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人脂肪干细胞膜片的构建及其生物学特性初探 预览 被引量:1
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作者 杨芳 陈书强 +7 位作者 芦洁 董杰 孙惠君 王晶晶 张建华 马媛 王晓红 《解放军医学院学报》 CAS 2018年第2期144-149,共6页
目的 利用分离纯化后的人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)构建ADSCs膜片,并探讨人ADSCs膜片的生物学特性。方法 收集年轻女性腹部手术皮下脂肪组织,用酶消化法成功分离纯化人ADSCs,进行流式细胞学鉴定,使用含有活性因... 目的 利用分离纯化后的人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)构建ADSCs膜片,并探讨人ADSCs膜片的生物学特性。方法 收集年轻女性腹部手术皮下脂肪组织,用酶消化法成功分离纯化人ADSCs,进行流式细胞学鉴定,使用含有活性因子的完全培养基诱导构建人ADSCs膜片后,扫描电镜观察细胞膜片组织形态,并采用q RT-PCR和ELISA检测人脂肪干细胞膜片相关促生长细胞因子及干性基因的表达水平。结果 成功分离人ADSCs,流式细胞学鉴定发现其间充质干细胞表面标记分子CD29、CD44、CD90、CD105均为阳性,造血干细胞表面标记CD45分子为阴性,符合ADSCs表面分子表达特点;人ADSCs进行成脂和成骨诱导后,油红O与茜素红染色阳性,提示人ADSCs具有多向分化潜能;扫描电镜观察膜片中的细胞呈网格样叠加生长,细胞之间连接紧密;qRT-PCR检测结果显示人ADSCs膜片中TGF-β1、FGF2、HGF、VEGF、Col 1A1等促生长细胞因子和OCT4、NANOG等干性基因显著高表达。ELISA检测结果显示人ADSCs膜片上清液高表达促生长细胞因子TGF-β1、FGF、HGF、VEGF。结论 我们成功利用人ADSCs诱导成人细胞膜片,该膜片可分泌更高含量的促生长细胞因子并表达更高水平的干性基因,为人ADSCs膜片应用于组织损伤修复提供了重要理论依据。 展开更多
关键词 人脂肪干细胞 细胞膜片 组织再生
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不明原因早期复发性流产患者蜕膜自然杀伤细胞对滋养层细胞系侵袭功能的影响 被引量:8
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作者 李博 +4 位作者 肖西峰 陈书强 王珺 陈丽华 王晓红 《中华生殖与避孕杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期378-383,共6页
目的研究早孕期复发性流产(RSA)患者与正常早孕妇女的蜕膜自然杀伤细胞(dNK)对滋养层细胞系HTR-8/SVneo侵袭能力的影响。方法收集正常早孕人工流产妇女(正常早孕组, n=10)和不明原因RSA患者(RSA组, n=8)的早孕蜕膜组织,用密度... 目的研究早孕期复发性流产(RSA)患者与正常早孕妇女的蜕膜自然杀伤细胞(dNK)对滋养层细胞系HTR-8/SVneo侵袭能力的影响。方法收集正常早孕人工流产妇女(正常早孕组, n=10)和不明原因RSA患者(RSA组, n=8)的早孕蜕膜组织,用密度梯度离心法分离出蜕膜淋巴细胞,免疫磁珠法进一步分选出CD56+CD16-NK细胞,即蜕膜NK细胞,将蜕膜NK细胞与HTR-8/SVneo共培养24 h后,通过MTT法和Transwell侵袭实验检测蜕膜NK细胞对滋养层细胞系HTR8/SVneo黏附及侵袭能力的影响,用Real-time PCR检测共培养后HTR-8/SVneo细胞的MMP-2和MMP-9 mRNA水平的表达情况。结果与正常早孕妇女相比,不明原因早孕期RSA患者的蜕膜NK细胞对滋养层细胞系HTR8/SVneo侵袭能力有减弱作用,并使HTR-8/SVneo表达促侵袭分子MMP-2和MMP-9表达降低。结论妊娠早期局部母-胎界面dNK细胞的功能异常可能是导致不明原因RSA的一个原因。 展开更多
关键词 蜕膜自然杀伤细胞(dNK) 复发性流产(RSA) 滋养层细胞 侵袭
反复自发性流产患者外周血CD14~+细胞表面CD49b和淋巴细胞活化基因3表达水平降低 被引量:1
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作者 曾汉玉 刘媛 +2 位作者 王晓红 陈丽华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期369-372,377共5页
目的观测黏附分子CD49b和负性调节分子淋巴细胞活化基因3(LAG-3)在反复自发性流产(RSA)患者CD14+细胞上的表达。方法收集7例正常对照者和12例RSA患者外周血5 m L,分离外周血单个核细胞(PBMC)和血浆,流式细胞术检测PBMC中CD14+... 目的观测黏附分子CD49b和负性调节分子淋巴细胞活化基因3(LAG-3)在反复自发性流产(RSA)患者CD14+细胞上的表达。方法收集7例正常对照者和12例RSA患者外周血5 m L,分离外周血单个核细胞(PBMC)和血浆,流式细胞术检测PBMC中CD14+细胞表面CD49b和LAG-3的表达;ELISA检测血浆中细胞因子白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)的水平。结果 RSA患者外周血中,单核细胞的比例与正常对照组相比无显著性差异;CD14+CD49b+、CD14+LAG-3+、CD14+CD49b+LAG-3+细胞的百分比均低于正常对照组。血浆中,TGF-β的水平低于正常对照组;IL-10的水平无显著差异。结论 RSA患者外周血CD14+细胞表面CD49b和LAG-3的表达和血浆中TGF-β的水平均显著降低。 展开更多
关键词 反复自发性流产 单核细胞 CD49b 淋巴细胞活化基因3(LAG-3) 转化生长因子Β IL-10
miR-133a对滋养层细胞系HTR8-SVneo的粘附及侵袭功能的影响 预览
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作者 刘媛 李博 +6 位作者 陈书强 王东 孙惠君 董杰 周晶 王晓红 《生殖医学杂志》 CAS 2015年第6期477-480,共4页
目的研究体外上调及下调miR-133a对滋养层细胞系HTR8-SVneo的粘附及侵袭功能的影响。方法将培养的HTR8-SVneo细胞根据脂质体转染因素分为对照组(转染空质粒)、上调组(转染mimics)、下调组(转染inhibitor),通过荧光定量PCR法检测各... 目的研究体外上调及下调miR-133a对滋养层细胞系HTR8-SVneo的粘附及侵袭功能的影响。方法将培养的HTR8-SVneo细胞根据脂质体转染因素分为对照组(转染空质粒)、上调组(转染mimics)、下调组(转染inhibitor),通过荧光定量PCR法检测各组miR-133a的表达水平,采用MTT法检测细胞粘附能力的变化,同时运用Transwell实验观察细胞侵袭能力的变化。结果与对照组比较,miR-133a上调组细胞黏附能力显著下降,miR-133a下调组细胞黏附力显著升高(P均〈0.05);与对照组比较,miR-133a上调组细胞侵袭力显著降低,miR-133a下调组细胞侵袭力显著升高(P均〈0.01)。结论 miR-133a在调控滋养层细胞粘附能力和侵袭能力方面起着重要作用。 展开更多
关键词 miR-133a 滋养层细胞 侵袭 黏附
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蜕膜NK细胞与不明原因复发性流产关系的研究进展
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作者 陈丽华 王晓红 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期571-574,共4页
蜕膜自然杀伤(dNK)细胞是妊娠时聚集在母胎界面的蜕膜组织中的NK细胞, 是妊娠早期蜕膜组织主要的淋巴细胞。该群NK细胞具有促进滋养层细胞侵袭、 促血管生成以及促进免疫耐受等功能; 而它们的功能异常直接影响妊娠的发展, 是导致... 蜕膜自然杀伤(dNK)细胞是妊娠时聚集在母胎界面的蜕膜组织中的NK细胞, 是妊娠早期蜕膜组织主要的淋巴细胞。该群NK细胞具有促进滋养层细胞侵袭、 促血管生成以及促进免疫耐受等功能; 而它们的功能异常直接影响妊娠的发展, 是导致复发性流产发生的原因之一。对蜕膜NK细胞功能和其上游或下游调控分子的研究将为复发性流产治疗提供新的思路。本文总结了蜕膜NK细胞的特征、 功能、 对妊娠的影响以及与复发性流产的关系。 展开更多
关键词 蜕膜 自然杀伤(NK)细胞 复发性流产 滋养层细胞 侵袭 综述
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