期刊文献+
共找到488篇文章
< 1 2 25 >
每页显示 20 50 100
压缩采样技术及其应用 被引量:64
1
作者 金坚 谷源涛 梅顺良 《电子与信息学报》 EI CSCD 北大核心 2010年第2期 470-475,共6页
如何降低宽带模拟信号数字化过程中的采样率,以及如何有效的对大量数据进行压缩存储一直是学者们关心的问题。该文综述了最近出现的一种新型信号处理方法一压缩采样(CompressiveSampling,cs),也称压缩传感(CompressiveSensing)... 如何降低宽带模拟信号数字化过程中的采样率,以及如何有效的对大量数据进行压缩存储一直是学者们关心的问题。该文综述了最近出现的一种新型信号处理方法一压缩采样(CompressiveSampling,cs),也称压缩传感(CompressiveSensing)。该方法通过对稀疏信号进行观测而非采样,只需少量观测点就能精确的重构原始信号。结果表明新方法的观测频率可以远远低于奈奎斯特采样频率。该文除介绍其基本原理和主要实现方法外,同时列举了多种应用,并指出若干待研究的问题。 展开更多
关键词 压缩采样 稀疏性 观测矩阵 信号恢复
在线阅读 免费下载
黄芪活性成分的提取及其对淋巴细胞增殖的影响 预览 被引量:20
2
作者 聂小华 史宝军 +3 位作者 敖宗华 尹光耀 金坚 陶文沂 《无锡轻工大学学报:食品与生物技术》 CSCD 北大核心 2003年第4期 49-51,共3页
研究了黄芪多糖(APS)、皂甙(AP)的提取工艺及其对淋巴细胞增殖的影响.通过单因素实验初步确定了APS,AP的提取工艺;淋巴细胞增殖实验表明,在12.5~100 μg/mL范围内,APS,AP均能促进ConA诱导的T淋巴细胞增殖,其中APS的增强作用显著.
关键词 黄芪多糖 活性成分 皂甙 提取工艺 淋巴细胞增殖 中药 免疫活性
在线阅读 下载PDF
延胡索乙素逆转多药耐药性人乳腺癌细胞MCF-7 预览 被引量:14
3
作者 张晓丽 曹国宪 +1 位作者 俞惠新 金坚 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期 19-21,共3页
目的:探讨延胡索乙素(Tetrahydropalmatine,Tet)逆转人乳腺癌细胞MCF-7多药耐药的作用机制.方法:采用SRB法测定药物对细胞的毒性作用;通过免疫细胞化学技术分析药物对细胞 Pgp、Lrp、Mrp、Gst、TopoⅡ等多药耐药相关蛋白表达的影响.结果... 目的:探讨延胡索乙素(Tetrahydropalmatine,Tet)逆转人乳腺癌细胞MCF-7多药耐药的作用机制.方法:采用SRB法测定药物对细胞的毒性作用;通过免疫细胞化学技术分析药物对细胞 Pgp、Lrp、Mrp、Gst、TopoⅡ等多药耐药相关蛋白表达的影响.结果:Tet在浓度小于2.5μg/ml时对MCF-7无毒性作用,2.5μg/ml 的Tet可明显逆转MCF-7/ADM耐药细胞的耐药性.MCF-7/S细胞不表达Pgp,而高表达TopoⅡ;MCF-7/ADM细胞Pgp高表达,但TopoⅡ低表达.Lrp、Mrp、Gst在MCF-7/S及MCF-7/ADM中的表达无明显差异.加入Tet后MCF-7/ADM细胞Pgp蛋白的表达明显下降,Topo的表达显著升高,其它几种蛋白的表达无明显变化.结论:Tet具有逆转MCF-7细胞MDR的作用,主要通过下调肿瘤细胞内Pgp的表达、上调TopoⅡ的表达而达到逆转耐药的效果. 展开更多
关键词 延胡索乙素 多药耐药 PGP TopoⅡ
在线阅读 下载PDF
稀土离子与乳铁蛋白结合的光谱研究 预览 被引量:18
4
作者 朱兵 杜秀莲 +3 位作者 李荣昌 王夔 金坚 王博诚 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第1期 26-30,共5页
用紫外示差光谱、荧光光谱及圆二色谱等方法研究了Tb3+和Eu3+在pH 7.4的条件下与乳铁蛋白及脱铁乳铁蛋白的结合作用.结果表明,Tb3+及Eu3+可特异性地结合在脱铁乳铁蛋白的两个Fe3+结合部位,但不能从已经结合铁的乳铁蛋白中把铁置换出来... 用紫外示差光谱、荧光光谱及圆二色谱等方法研究了Tb3+和Eu3+在pH 7.4的条件下与乳铁蛋白及脱铁乳铁蛋白的结合作用.结果表明,Tb3+及Eu3+可特异性地结合在脱铁乳铁蛋白的两个Fe3+结合部位,但不能从已经结合铁的乳铁蛋白中把铁置换出来.测得Tb3+与这两个部位结合的条件平衡常数为lgK1=8.48±0.24和lgK2=6.72±0.18(25℃,0.10 mol/L NaCl,0.10 mol/L Hepes,pH=7.4).Tb3+在这两个位点结合时,蛋白质的构象发生变化.在Tb3+与蛋白质的浓度比低时,构象趋于紧缩,色氨酸残基进入疏水的环境;当Tb3+结合得较多时,构象转而开放,色氨酸残基转向亲水性环境.但无论哪种情况,Tb3+与脱铁乳铁蛋白的结合都不影响蛋白的二级结构. 展开更多
关键词 乳铁蛋白 脱铁乳铁蛋白 稀土离子 结合作用 生物效应 构象
在线阅读 下载PDF
赭曲霉毒素A的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 预览 被引量:20
5
作者 黄飚 陶文沂 +3 位作者 张莲芬 时瑾 杨海麟 金坚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期 662-666,共5页
采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用... 采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用杂交瘤细胞制备抗OTA单克隆抗体.用OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立OTA-TRFIA.该方法的灵敏度为0.03μg/L,测量范围为0.03~1 000μg/L,批内和批间变异分别为3.7%和5.3%,平均回收率为94.2%,与赭曲霉毒素B的平均交叉反应为3.7%,与黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应,说明抗体的特异性很好.8条不同时间进行的间接竞争OTA-TRFIA的效应点均值ED80、ED50、ED20分别为(0.33±0.02)μg/L、(1.44±0.08)μg/L和(5.22±0.12)μg/L,说明方法的稳定性好,样品经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测OTA,两者的相关系数为0.925,结果相符.研究表明,OTA-TRFIA是目前报道的OTA检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景. 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A(OTA) 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 真菌毒素 单克隆抗体
在线阅读 下载PDF
黄曲霉毒素B1的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 预览 被引量:22
6
作者 黄飚 陶文沂 +3 位作者 张莲芬 时瑾 赵晓联 金坚 《核技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 295-300,共6页
采用时间分辨荧光技术建立了高灵敏的黄曲霉毒素B1(AFB1)间接竞争免疫分析法(AFB-TRFIA)。以AFB1-BSA为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗AFB1抗体;AFB1与辣根过氧化酶的联结物(AFB1-HRP)包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1共同竞争... 采用时间分辨荧光技术建立了高灵敏的黄曲霉毒素B1(AFB1)间接竞争免疫分析法(AFB-TRFIA)。以AFB1-BSA为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗AFB1抗体;AFB1与辣根过氧化酶的联结物(AFB1-HRP)包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1共同竞争有限的抗AFB1抗体;用稀土离子Eu^3+标记的羊抗兔抗体进行示踪。该方法的灵敏度为0.01μ/L,测量范围为0.01-100μg/L,批内和批间变异分别为4.1%和6.8%,平均回收率为97.2%,与黄曲霉毒素B2的平均交叉反应为10%左右;黄曲霉毒素G2、赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B及HRP基本不干扰本方法对AFB1的检测。8条不同时间进行的AFB1-TRFIA的效应点值ED80、ED50、ED20分别为(0.07±0.01)μg/L、(0.63±0.02)μg/L和(12.5±0.47)μg/L。比较AFB1-TRFIA和AFB1-ELISA检测AFB1,两者的相关系数为0.917。研究表明,AFB1-TRFIA是目前报导的AFB1检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1(AFB1) 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 真菌毒素 抗体
在线阅读 下载PDF
中药虎杖中抗癌活性物质研究 预览 被引量:22
7
作者 冯磊 张莲芬 +2 位作者 严婷 金坚 陶文沂 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期 689-691,共3页
目的:为虎杖药用价值的开发利用提供科学据依。方法:在生物活性测定指导下,从虎杖中分离得到一种较高抗癌活性的物质,并且用液质联用、红外光谱、紫外全扫描等方法鉴定其结构。MTF法测定它对L-02、HepG2、SHZ-888、MCF-7、MCF-7/AD... 目的:为虎杖药用价值的开发利用提供科学据依。方法:在生物活性测定指导下,从虎杖中分离得到一种较高抗癌活性的物质,并且用液质联用、红外光谱、紫外全扫描等方法鉴定其结构。MTF法测定它对L-02、HepG2、SHZ-888、MCF-7、MCF-7/ADM等细胞的抑制作用并用HE染色法观察其作用MCF-7/ADM细胞48h、72h后的肿瘤细胞形态学变化。结果:分离得到的物质为顺、反式-白藜芦醇,它能特异性抑制多种肿瘤细胞的生长,而对正常肝细胞毒性很小。同时,首次发现其对耐阿霉素的MCF-7乳腺癌细胞有直接的细胞毒性。结论:白藜芦醇是虎杖中一种活性强、低毒的抗癌物质。 展开更多
关键词 虎杖 白藜芦醇 MCF-7/ADM细胞 MTT法
在线阅读 下载PDF
人β干扰素-血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达 预览 被引量:20
8
作者 雷楗勇 张莲芬 +1 位作者 杨健良 金坚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期 13-18,共6页
利用重叠PCR技术在体外拼接IFNβ和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA。重组质粒pPIC9K-IFNβ-HSA经SalI线性化,电击转化毕赤酵... 利用重叠PCR技术在体外拼接IFNβ和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA。重组质粒pPIC9K-IFNβ-HSA经SalI线性化,电击转化毕赤酵母KM71,经CA18筛选得到高拷贝转化子。PCR鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达的融合蛋白IFNβ-HSA,表明该蛋白分子量约为90kDa,且具有HSA的抗原性;用细胞病变抑制法测定发酵液上清中融合蛋白的干扰素活性约为640IU/ml。 展开更多
关键词 Β干扰素 巴斯德毕赤酵母 融合蛋白
在线阅读 下载PDF
手法推拿联合针灸治疗老年颈性眩晕的效果及对椎-基底动脉血流动力学的影响 预览 被引量:29
9
作者 金坚 赵玲丹 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期共3页
目的:观察手法推拿联合针灸治疗老年颈性眩晕( CV)的临床疗效及对椎-基底动脉血流动力学的影响。方法78例老年 CV患者随机分为两组,观察组40例,给予手法推拿联合针灸治疗,对照组38例,给予手法推拿治疗,疗程2 w。观察两组治疗后... 目的:观察手法推拿联合针灸治疗老年颈性眩晕( CV)的临床疗效及对椎-基底动脉血流动力学的影响。方法78例老年 CV患者随机分为两组,观察组40例,给予手法推拿联合针灸治疗,对照组38例,给予手法推拿治疗,疗程2 w。观察两组治疗后临床疗效及治疗前后症状积分和基底动脉、双侧椎动脉收缩期峰流速(Vs)变化。结果观察组总有效率(95%)优于对照组(79.95%)(Z=-2.510,P<0.05)。两组治疗后症状积分均明显低于治疗前(t=18.784、9.947,P<0.05),且观察组低于对照组(t=7.959,P<0.05)。两组治疗后基底动脉及双侧椎动脉 Vs均较治疗前明显提高,且观察组高于对照组(t=7.959,P<0.05)。结论手法推拿联合针灸治疗老年CV可明显改善椎-基底动脉供血,改善症状,提高疗效。 展开更多
关键词 颈性眩晕 手法推拿 针灸 颈椎病 经颅多普勒超声
在线阅读 下载PDF
乳铁蛋白(LF)的提纯及其放射免疫分析在肺癌诊断中的应用 预览 被引量:19
10
作者 王崇道 金坚 《同位素》 CAS 1999年第1期 5-9,共5页
报道了乳铁蛋白(LF)的提纯方法,放射免疫分析法的建立及其在肺癌诊断中的应用。用改良的萃取法获得相对分子量为75000D的LF,其聚丙烯酰胺胶电泳及免疫双扩散结果均呈单一色带,1mL人乳可提取0.542mgLF。放射... 报道了乳铁蛋白(LF)的提纯方法,放射免疫分析法的建立及其在肺癌诊断中的应用。用改良的萃取法获得相对分子量为75000D的LF,其聚丙烯酰胺胶电泳及免疫双扩散结果均呈单一色带,1mL人乳可提取0.542mgLF。放射免疫分析批间及批内变异分别为4.77%和13.59%,回收率97.99%。对36例肺癌、21例肺部感染和4例正常人的支气管冲洗液中乳铁蛋白(BLF)进行测定,结果表明肺癌组明显高于肺部 展开更多
关键词 肺癌 乳铁蛋白 LF 提纯 放射免疫分析 RIA
在线阅读 下载PDF
人乳腺癌细胞MCF-7紫杉醇耐药株的建立及其生物学特性研究 预览 被引量:17
11
作者 张小平 陶永辉 +3 位作者 陈其亮 张莲芬 张熔熔 金坚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期 804-809,共6页
目的建立紫杉醇(Tax01)的人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Taxol,并初步研究其生物学特性。方法采用低浓度加量持续诱导法建立MCF-7/Taxol;细胞模型的多药耐药性以SRB法检测;流式细胞术分析细胞周期分布;免疫组化法检测细胞表型变化;... 目的建立紫杉醇(Tax01)的人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Taxol,并初步研究其生物学特性。方法采用低浓度加量持续诱导法建立MCF-7/Taxol;细胞模型的多药耐药性以SRB法检测;流式细胞术分析细胞周期分布;免疫组化法检测细胞表型变化;高效液相鉴定细胞中药物蓄积;光镜和电子扫描显微镜观察细胞形态。结果SRB法检测,MCF-7/Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)是亲代MCF-7细胞的525倍,撤药3mon后细胞的耐药指数保持在150倍以上,并对羟喜树碱、表柔比星、多柔比星、米托蒽醌、硫酸长春新碱、博来霉素和丝裂霉素等多种化疗药物产生交叉耐药性。MCF-7/Taxol细胞分化程度低于同步传代的MCF-7细胞,倍增时间明显高于亲本细胞,S期细胞明显增加,G1期细胞减少;随撤药时间的延长,细胞的增殖速度加快。MCF-7/Taxol细胞P-gP、LRP和GSTπ的表达水平较亲本细胞有明显增加,ER、PR阳性表达丢失;光镜下MCF-7/Taxol细胞明显变大并且形态不规则;电镜下其表面纤绒毛成小球状隆起和絮状突起;在稳定生长的耐药细胞和撤药培养的细胞中都有Taxol蓄积。结论该MCF-7/Taxol模型具有多药耐药细胞的基本生物学特性,可用于肿瘤多药耐药机制药的研究,推测耐药细胞株中含有天然MCF-7肿瘤干细胞。 展开更多
关键词 MCF-7细胞 人乳腺癌细胞 生物学特性 紫杉醇 乳腺癌耐药细胞株 免疫组化法检测 耐药株 TAXOL
在线阅读 下载PDF
苦参灵芝发酵液在2.2.15细胞中抗HBV作用 预览 被引量:13
12
作者 李雁群 张莲芬 +2 位作者 张志斌 金坚 章克昌 《无锡轻工大学学报:食品与生物技术》 CSCD 北大核心 2004年第2期 98-100,共3页
比较苦参的灵芝发酵液和苦参与灵芝发酵液的混合液体外抗乙肝病毒(HBV)的效果.用HBV DNA转染的2.2.15细胞作为模型,放射免疫法测定2种药物作用后细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg 量,计算其对HBsAg和HBeAg分泌的抑制率,用MTT法检测细胞毒性... 比较苦参的灵芝发酵液和苦参与灵芝发酵液的混合液体外抗乙肝病毒(HBV)的效果.用HBV DNA转染的2.2.15细胞作为模型,放射免疫法测定2种药物作用后细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg 量,计算其对HBsAg和HBeAg分泌的抑制率,用MTT法检测细胞毒性.结果表明:剂量在12.5~200 μg/mL的范围内,均能不同程度地减少细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg 量,发酵液细胞的毒作用不明显,而混合液具有一定的细胞毒作用.结果显示发酵液具有一定的体外抗HBV作用. 展开更多
关键词 苦参 灵芝 发酵液 抗乙肝病毒 中药 药物 药效
在线阅读 下载PDF
松口蘑菌丝体糖蛋白对荷S180肉瘤小鼠的抗肿瘤作用 预览 被引量:8
13
作者 万彩霞 许泓瑜 +3 位作者 薛峰 许正宏 金坚 陶文沂 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期 1439-1440,共2页
松口蘑[(Tricholoma matsutake(S.Ito.et Imai)Sing],是担子菌纲口蘑科真菌,又称松茸、松蕈或松蘑.现代医学研究表明[1],松口蘑子实体和菌丝体中提取的活性物质具有治疗糖尿病和癌症等作用.日本最近公开的专利文献(2001)[2]表明从松口... 松口蘑[(Tricholoma matsutake(S.Ito.et Imai)Sing],是担子菌纲口蘑科真菌,又称松茸、松蕈或松蘑.现代医学研究表明[1],松口蘑子实体和菌丝体中提取的活性物质具有治疗糖尿病和癌症等作用.日本最近公开的专利文献(2001)[2]表明从松口蘑子实体中分离出的一种糖蛋白可用于肿瘤的治疗,例如宫颈癌和子宫癌,以及大量由于p53抗癌基因或pBR不正常表达导致的癌症(如皮肤癌,肺癌,肝癌,肾癌和乳腺癌等).因此,近年来松口蘑被当作抗癌药物筛选对象之一.本文采用现代发酵技术培养产生大量松口蘑菌丝体,并以菌丝体中分离纯化出的糖蛋白作为活性成分,进行小鼠体内抗肿瘤实验研究. 展开更多
关键词 松口蘑 菌丝体 糖蛋白 抗肿瘤
在线阅读 下载PDF
CA19—9时间分辨荧光免疫分析方法的建立及应用 预览 被引量:11
14
作者 黄飚 肖华龙 +3 位作者 朱利国 谭成 蔡刚明 金坚 《标记免疫分析与临床》 CAS 2001年第1期 25-27,共3页
以CA19-9单抗192#包被板条,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3+及标记241#单抗,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液,采用平衡饱和法建立了CA19-9时间分辨荧光免疫分析。采用Log-Logit函数和四参数Logistic函数两... 以CA19-9单抗192#包被板条,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3+及标记241#单抗,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液,采用平衡饱和法建立了CA19-9时间分辨荧光免疫分析。采用Log-Logit函数和四参数Logistic函数两种程序处理数据。结果表明方法的批内和批间CV分别为3.26%和5.74%,平均回收率为99.61%,灵敏度为1.66U/mL,可测范围为18.69-967U/mL,ED20、ED50和ED80分别为40.55U/mL、114.2U/mL和396.9U/mL。本方法与CEA有6%交叉反应,与CA125、CA153和AFP均无交叉反应。Eu3+标记抗体于-30℃,保存六个月免疫反应性基本无损失,连续5个月应用同批试剂,分析结果稳定。78份血清样品的检测结果与化学发光法吻合。本文提示,采用CA19-9时间分辨荧光免疫分析,可以高效灵敏地检测出血清中的CA19-9含量,值得临床推广。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 CA19-9 胰腺癌 血清诊断
在线阅读 下载PDF
含金属聚合材料屏蔽γ射线效果的测定 预览 被引量:10
15
作者 徐希杰 吕坤祥 +5 位作者 邹新农 邹美芬 朱钧清 周杏琴 金坚 王博诚 《中国辐射卫生》 2001年第1期 23-24,共2页
应用同位素监测仪、γ辐射仪,测定含金属元素高分子聚合材料对γ射线的屏蔽效果.采用同位素131I、99m点源,针对聚合材料中不同的金属元素、含量差异和材料厚薄,并以铅玻璃作对照,根据射线屏蔽、吸收原理,参照有关国家专业标准和资料,建... 应用同位素监测仪、γ辐射仪,测定含金属元素高分子聚合材料对γ射线的屏蔽效果.采用同位素131I、99m点源,针对聚合材料中不同的金属元素、含量差异和材料厚薄,并以铅玻璃作对照,根据射线屏蔽、吸收原理,参照有关国家专业标准和资料,建立测定方法,测定了它们对γ射线的屏蔽效果.表明含金属高分子聚合材料有可能成为新一代屏蔽γ射线的防护材料. 展开更多
关键词 Γ射线 含金属高分子聚合材料 屏蔽率 测定
在线阅读 下载PDF
V 型砧锻造时变形规律的云纹法模拟研究 预览 被引量:5
16
作者 曹起骧 叶绍英 +1 位作者 金坚 郑涛 《大型铸锻件》 1987年第2期 1-13,共13页
本文用光电扫描云纹法对大型锻件的型砧拔长工艺进行了模拟研究。用新研制的气动装置测得了压合试件内部人工缺陷的“临界压下量曲线”和孔穴闭合规律;并用云纹法测得了 V 型砧拔长工艺锻坯内部应变分布规律。对孔穴闭合的内部原因作了... 本文用光电扫描云纹法对大型锻件的型砧拔长工艺进行了模拟研究。用新研制的气动装置测得了压合试件内部人工缺陷的“临界压下量曲线”和孔穴闭合规律;并用云纹法测得了 V 型砧拔长工艺锻坯内部应变分布规律。对孔穴闭合的内部原因作了分析,对最佳 V 型砧角度、砧宽比(W/D0)、工厂现行工艺进行了探讨。 展开更多
关键词 云纹法 变形规律 模拟 锻造 应变分布规律 大型锻件 光电扫描 人工缺陷
在线阅读 下载PDF
^125IUdR对人脑胶质瘤细胞SHG44的杀伤作用 预览 被引量:11
17
作者 李金泉 鲍耀东 +4 位作者 周岱 吴翼伟 江一民 王博诚 金坚 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期 881-884,共4页
为评价125IUdR对人脑胶质瘤细胞SHG44的杀伤作用,把125IUdR加入到SHG44细胞的培养基中,孵育后测量细胞摄取125IUdR的放射性活度;采用克隆形成法测定125IUdR对SHG44细胞生长抑制的效果.结果表明,培养基中125IUdR浓度增加时,SHG44细胞对12... 为评价125IUdR对人脑胶质瘤细胞SHG44的杀伤作用,把125IUdR加入到SHG44细胞的培养基中,孵育后测量细胞摄取125IUdR的放射性活度;采用克隆形成法测定125IUdR对SHG44细胞生长抑制的效果.结果表明,培养基中125IUdR浓度增加时,SHG44细胞对125IUdR的摄取量也相应增加(相关系数r=0.9917).SHG44细胞摄取125IUdR后生长受到明显抑制,细胞存活分数与培养基中125IUdR浓度呈直线负相关(r=-0.9736),其半数致死剂量LD50为(8.7±0.12)kBq/mL,125IUdR组的SHG44细胞存活分数明显低于Na125I组(P<0.001).结果提示,125IUdR能够掺入到SHG44细胞中,125IUdR对SHG44细胞有明显的杀伤作用,说明125IUdR可望成为治疗脑胶质瘤的潜在的一种放射性药物. 展开更多
关键词 脑胶质瘤 脱氧尿嘧啶核苷 SHG44细胞 放射性核素 治疗 碘125 放射疗法 放射性药物 杀伤作用 标记物
在线阅读 下载PDF
人乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/MDR^a的建立及其生物学特性的初步研究 预览 被引量:11
18
作者 严婷 张莲芬 +2 位作者 张熔熔 冯磊 金坚 《细胞生物学杂志》 CSCD 2006年第4期591-595,共5页
实验以MCF-7细胞株为亲本细胞,采用阿霉素(ADM)低浓度持续加量诱导法建立了多药耐药的人乳腺癌细胞系MCF-7/MDR^a,并对其耐药谱、动力学周期分布、表型变化、药物的蓄积量等生物学特性进行了初步分析评价。结果表明,MCF-7/MDR^a... 实验以MCF-7细胞株为亲本细胞,采用阿霉素(ADM)低浓度持续加量诱导法建立了多药耐药的人乳腺癌细胞系MCF-7/MDR^a,并对其耐药谱、动力学周期分布、表型变化、药物的蓄积量等生物学特性进行了初步分析评价。结果表明,MCF-7/MDR^a细胞较亲本细胞的ADM半数致死浓度(IC50)高500倍,撤药培养150天后耐药指数仍维持在200倍以上,并对多种化疗药物产生交叉耐药性;耐药细胞分化程度低于同步传代的MCF-7细胞,细胞倍增时间与亲本细胞接近,S期细胞显著增加,G1期细胞减少;随着撤药时间的延长,细胞的增殖速度加快;耐药细胞P-gP、LRP和GSTπ的表达水平较亲本细胞有显著增加,ER阳性表达丢失;在稳定生长的撤药培养6天的细胞中仍有ADM蓄积。建立的MCF-7/MDR^a模型具有多药耐药细胞的基本生物学特性,可用于肿瘤多药耐药机制的研究。 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞系MCF-7/MDR^a 阿霉素 多药耐药
在线阅读 下载PDF
改善稀有密码子和氨基酸残基限制提高重组人ADAM15去整合素结构域蛋白表达水平 预览 被引量:10
19
作者 吴静 雷楗勇 +2 位作者 张莲芬 花慧 金坚 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期 1067-1074,共8页
【目的】为提高重组人ADAM(A Disintegrin And Metalloproteinase)15去整合素结构域蛋白(rhADAM15)的表达水平。【方法】在详尽分析rhADAM15的cDNA和GST(谷胱甘肽-S-转移酶)-ADAM15结构的基础上,选择表达宿主菌并对表达质粒进行... 【目的】为提高重组人ADAM(A Disintegrin And Metalloproteinase)15去整合素结构域蛋白(rhADAM15)的表达水平。【方法】在详尽分析rhADAM15的cDNA和GST(谷胱甘肽-S-转移酶)-ADAM15结构的基础上,选择表达宿主菌并对表达质粒进行改造。【结果】(1)选择能为大肠杆菌稀有密码子提供额外tRNA的Escherichia coli.Rosetta(DE3)作为宿主菌,将质粒pGEX-ADAM15转化于其中在最佳诱导表达条件下获得298mg/L融合蛋白GST-ADAM15;(2)采用PCR体外定点突变技术将目标蛋白编码区稀有密码子GGA(Gly^425)替换为GGC,使融合蛋白表达水平提高9.4%;(3)通过消除凝血酶识别序列附近的Pro-Glu-Phe残基,提高凝血酶酶切效率,使rhADAM15产量提高了35.7%;(4)在GGA替换为GGC基础上切除“Pro-Glu-Phe”残基,使rhADAM15产量提高到68mg/L,比分别切除“Pro-Glu-Phe”残基、GGA替换为GGC和野生型提高了19.2%、51.1%和61.9%。【结论】这一结果表明,在充分认识目标蛋白特性的基础上定向选择表达宿主并改造表达质粒能实现外源蛋白高水平表达。 展开更多
关键词 ADAM15去整合素结构域 大肠杆菌Rosetta(DE3) 稀有密码子 PCR定点突变 抑制血管生成
在线阅读 下载PDF
伏马毒素B1时间分辨荧光免疫分析超微量检测方法的建立 被引量:15
20
作者 张珏 朱岚 +4 位作者 陈蕴 周彬 张艺 金坚 黄飚 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1112-1115,共4页
目的利用稀土离子作为示踪剂,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析方法检测伏马毒素B1(FB1)。方法以伏马毒素B1-牛血清白蛋白(FB1-BSA)包被于固相微孔板,FB1标准品或样品中的FB1竞争结合限量的抗FB1单抗,然后用稀土离子Eu^3+-羊抗... 目的利用稀土离子作为示踪剂,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析方法检测伏马毒素B1(FB1)。方法以伏马毒素B1-牛血清白蛋白(FB1-BSA)包被于固相微孔板,FB1标准品或样品中的FB1竞争结合限量的抗FB1单抗,然后用稀土离子Eu^3+-羊抗鼠IgG进行示踪检测,建立伏马毒素B1-时间分辨荧光免疫分析(FB1-TRFIA)并进行方法学的考核。结果FB1-TRFIA检测灵敏度为0.05ng/ml,检测范围为FB1 1.0—1000ng/ml,批内、批间变异率均小于10%。添加回收实验表明玉米样品中FB1批内平均回收率为104.3%,批间平均回收率为100.7%。FB1与FB2有轻微交叉反应,FB1不与赤霉毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、T2等真菌毒素发生交叉反应,方法特异性好。结论FB1-TRFIA灵敏度高,检测范围宽,重复性、稳定性好,是一种简便、快速、经济、稳定、可进行大批量样品伏马毒素筛查的检测方法。 展开更多
关键词 伏马毒素B1 时间分辨免疫分析 真菌毒素
上一页 1 2 25 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈