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MDA技术在转基因检测中的研究与应用
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作者 马晓娇 李亮 +1 位作者 宛煜嵩 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期2207-2214,共8页
PCR技术是转基因植物及其产品检测的主要方法,但是因为其对模板纯度和质量有较高要求,对于低质量模板难以获得稳定的检测结果。本研究利用MDA技术可将低至10 copies的微量DNA样品扩增至可用PCR方法稳定检出;进一步利用MDA技术对转基因... PCR技术是转基因植物及其产品检测的主要方法,但是因为其对模板纯度和质量有较高要求,对于低质量模板难以获得稳定的检测结果。本研究利用MDA技术可将低至10 copies的微量DNA样品扩增至可用PCR方法稳定检出;进一步利用MDA技术对转基因玉米有证标准物质Bt11粉末的单颗粒痕量样品释出DNA进行扩增,结合PCR扩增检测,玉米粉末颗粒中内源参照基因的检出率达到70%以上,转基因特异性序列检出与内源参照基因检出的比值,与标准物质标称值基本相符,为建立基于MDA技术转基因植物及其产品粉末颗粒等痕量样品检测方法奠定了基础,同时也为加工产品中复合性状转基因作物的检测提供了潜在的解决方案。 展开更多
关键词 MDA 非转基因玉米 Bt11 转基因玉米 检测
基于表面等离子体共振的核酸传感器研究进展
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作者 安娜 郑子繁 +5 位作者 董美 刘卫晓 宛煜嵩 李亮 韩阳 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期55-61,共7页
表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)生物传感器是一种基于物理光学原理的新型生化分析系统。近年来,因其具有无需标记、高灵敏度、高特异性、实时和快速等优势而广泛应用于各个领域,如临床诊断、转基因成分定性及定量检... 表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)生物传感器是一种基于物理光学原理的新型生化分析系统。近年来,因其具有无需标记、高灵敏度、高特异性、实时和快速等优势而广泛应用于各个领域,如临床诊断、转基因成分定性及定量检测、病毒鉴定、环境微生物检测、药物筛选及遗传分析等。它在不需要标记甚至无需纯化生物组分的天然条件下,将核酸探针作为识别因子修饰到传感器芯片表面上,并可实时监测一些特殊的分子互作信息。然而,基于SPR技术的核酸传感器鲜有系统性的报道,因此对有关表面等离子体共振现象的形成及其作为核酸敏感检测手段的原理、应用及发展趋势等问题作了简要的介绍,旨在为生物传感研究提供相应的参考依据。 展开更多
关键词 表面等离子体共振(SPR) 核酸检测 无需标记 分子相互作用
基于PCR技术的DNA分析测试关键要素 被引量:1
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作者 安娜 柳方方 +6 位作者 董美 胡晓颖 宛煜嵩 兰青阔 李亮 韩阳 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期624-629,共6页
大多数国家对转基因生物研究与产业化日趋积极,把发展生物技术作为支撑发展、引领未来的战略选择,力求抢占新一轮经济和科技革命的先机与制高点。随之而来的是公众对转基因产品安全性的关注。转基因生物成分分析作为安全性评价的重要内... 大多数国家对转基因生物研究与产业化日趋积极,把发展生物技术作为支撑发展、引领未来的战略选择,力求抢占新一轮经济和科技革命的先机与制高点。随之而来的是公众对转基因产品安全性的关注。转基因生物成分分析作为安全性评价的重要内容,发挥着举足轻重的作用,而基于PCR技术的转基因产品核酸成分分析是最经典、最广泛使用的方法。虽然此方法已普遍应用,但国内外鲜有较为全面的阐述此类分析测试要素的报道。为此,本综述对国内外相关方法的文献资料进行了梳理、比对和研究,结合已有的分析测试实验室的经验,提出了PCR测试体系的关键要素主要是标准和指南、方法的确认、标准物质及能力验证等四个方面,且在文中简明扼要的论述了各个部分的要点,供转基因核酸成分分析及相关领域工作者参考。 展开更多
关键词 转基因生物 分析测试 方法确认 标准物质 能力测试
转基因玉米Bt11品系特异性荧光RPA检测 被引量:2
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作者 李凯 +3 位作者 李亮 苗朝华 刘卫晓 宛煜嵩 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2017年第11期4741-4745,共5页
重组酶聚合酶介导的等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)作为一种新型等温扩增技术,具有反应时间短、灵敏度高、特异性强等特点,在转基因检测领域得到了广泛关注。本研究针对转基因玉米Bt11外源插入链接区域设计筛选... 重组酶聚合酶介导的等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)作为一种新型等温扩增技术,具有反应时间短、灵敏度高、特异性强等特点,在转基因检测领域得到了广泛关注。本研究针对转基因玉米Bt11外源插入链接区域设计筛选了特异性引物和探针,建立了快速准确的荧光RPA检测方法,在39℃条件下,20 min内完成扩增并且能够实时监测,可以准确有效地检测到50个拷贝的靶标片段。而且,对于背景复杂的植物基因组DNA能够得到准确的扩增曲线。本研究不仅可以满足常规实验室检测,通过RPA便携式仪器,还可以满足转基因植物现场检测,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 等温扩增 实时荧光RPA 转基因检测 Bt11
转基因水稻PA110-15基于RPA等温扩增及DNA试纸条联检的品系特异性检测方法
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作者 贾玄 李凯 +5 位作者 董美 李亮 苗朝华 刘卫晓 宛煜嵩 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2017年第12期5210-5215,共6页
水稻作为最重要的粮食作物之一,其转基因安全性一直受到各国政府和人民的广泛关注。为了保障和引导公众对转基因水稻的正确而全面的认识,转基因生物安全检测工作必不可少。在目前的转基因检测工作中,核酸扩增技术是最为常用的检测方法。... 水稻作为最重要的粮食作物之一,其转基因安全性一直受到各国政府和人民的广泛关注。为了保障和引导公众对转基因水稻的正确而全面的认识,转基因生物安全检测工作必不可少。在目前的转基因检测工作中,核酸扩增技术是最为常用的检测方法。PCR技术是最成熟、应用最广泛的一种核酸扩增技术。然而,PCR技术对温控条件的极度依赖性制约它在田间的现场快速检测。本研究以转基因水稻PA110-15为对象,建立了重组酶聚合酶等温扩增及DNA试纸条联检的品系特异性检测方法,减少了对专用仪器的依赖,为快速现场转基因检测提供了新的解决方案。 展开更多
关键词 等温扩增 RPA DNA试纸条 转基因检测 转基因水稻PA110-15
转基因马铃薯检测用质粒标准分子研制 被引量:1
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作者 安娜 董美 +4 位作者 李凯 宛煜嵩 韩阳 李亮 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期124-130,共7页
依据全球转基因作物商业化的强势发展态势,转基因马铃薯的普遍商业化已呈大势所趋。马铃薯是世界第四大食用作物,仅次于水稻、小麦和玉米。目前,全球获批商业化种植的转基因马铃薯45种,主要涉及抗虫、抗病毒及品质改良等性状。转基因技... 依据全球转基因作物商业化的强势发展态势,转基因马铃薯的普遍商业化已呈大势所趋。马铃薯是世界第四大食用作物,仅次于水稻、小麦和玉米。目前,全球获批商业化种植的转基因马铃薯45种,主要涉及抗虫、抗病毒及品质改良等性状。转基因技术在给人们带来巨大经济效益的同时,也引起了人们的担忧,主要包括食品安全及环境安全问题等,由此转基因生物产品成分的检测及监管的重要性凸显。在转基因检测领域,标准质粒以容易获得、纯度高、成本低与稳定性好等优点逐渐被广泛应用。在调研了所有商业化的转基因马铃薯的重要信息的基础上,针对这些转基因马铃薯的主要外源基因类型,构建含有抗马铃薯甲虫cry3A基因、胭脂碱合成酶启动子P-nos基因、抗马铃薯Y病毒pvycp基因及内标准基因尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶PATA基因的多靶标质粒pB JGMM003。该质粒可用于大部分已批准转化体及部分在研转基因马铃薯的鉴定、检测与监管工作,解决了转基因马铃薯的阳性标准品匮乏等问题,保障了转基因马铃薯相关工作的顺利进行。 展开更多
关键词 转基因马铃薯 标准质粒 检测 安全监管
转基因成分低水平混杂问题的现状 预览 被引量:1
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作者 柳方方 董美 +3 位作者 李凯 宛煜嵩 李亮 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期1-5,共5页
近20年来,转基因作物的种植面积持续增加,转基因产品的流通量和流通速度呈迅速上升趋势。在不同国家与地区间,非转基因产品内出现低含量转基因成分的问题,即转基因成分低水平混杂日趋严重。以此问题为立脚点,比较全面的阐述了7个不同国... 近20年来,转基因作物的种植面积持续增加,转基因产品的流通量和流通速度呈迅速上升趋势。在不同国家与地区间,非转基因产品内出现低含量转基因成分的问题,即转基因成分低水平混杂日趋严重。以此问题为立脚点,比较全面的阐述了7个不同国家与地区(组织)的转基因成分低水平混杂的定义,分析了共同特点;总结了各国的现行政策与允许值的规定;概述了低水平混杂问题对进出口贸易方面产生的影响,旨为我国制定低水平混杂的相关政策及检测标准提供基础资料。 展开更多
关键词 转基因作物 低水平混杂 无意混杂 阈值
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转基因马铃薯的研究现状 预览 被引量:2
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作者 安娜 董美 +2 位作者 宛煜嵩 李亮 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期38-43,共6页
马铃薯是仅次于水稻、玉米、小麦的世界第四大食用作物。马铃薯主粮化已经成为时下热议的话题之一,其核心优势是产量高、耐瘠薄、消耗水资源少、易于加工等。在耕地和水资源相对紧缺的中国,这些优点无疑具有非常大的吸引力。目前,全球... 马铃薯是仅次于水稻、玉米、小麦的世界第四大食用作物。马铃薯主粮化已经成为时下热议的话题之一,其核心优势是产量高、耐瘠薄、消耗水资源少、易于加工等。在耕地和水资源相对紧缺的中国,这些优点无疑具有非常大的吸引力。目前,全球共批准商业化种植的转基因马铃薯40余种,主要性状为:抗病、抗虫和品质改良等,其中部分产品即将在我国申请转基因生物安全证书。详细阐述了转基因马铃薯主要性状的特点、国内外研究进展、审批情况与安全评价的政策,以期为我国政府部门的安全监管及检测标准制定提供参考。 展开更多
关键词 转基因马铃薯 安全监管 商业化
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欧盟转基因生物安全检测技术现状及启示 预览
9
作者 吴刚 +3 位作者 谢家建 沈平 李文龙 宋贵文 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1-7,共7页
为了了解欧盟转基因生物安全检测技术发展现状,提高我国转基因安全监管水平。本研究根据对欧盟8家转基因检测相关机构现状的调查和分析结果,阐述了转基因检测过程中的关键技术要点及欧盟的实施情况,具体包括抽样与制样方法,转基因检测... 为了了解欧盟转基因生物安全检测技术发展现状,提高我国转基因安全监管水平。本研究根据对欧盟8家转基因检测相关机构现状的调查和分析结果,阐述了转基因检测过程中的关键技术要点及欧盟的实施情况,具体包括抽样与制样方法,转基因检测方法的循环验证与参数要求,样品的检测策略与实验室环境要求,以及检测结果的表述与不确定度评估。并结合我国转基因生物安全检测发展现状,提出了开展检测方法的实验室联合验证和加强转基因定量PCR检测技术的研发和应用的建议。 展开更多
关键词 欧盟 转基因生物 检测技术
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利用复合PCR方法同时检测三种转基因水稻 被引量:5
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作者 梁利霞 宛煜嵩 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期16-21,共6页
我国在转基因水稻研究方面处于国际领先地位,但由于研究材料扩散到商品化生产水稻中而引起的贸易纠纷时有发生。加强转基因水稻检测与监管,从源头控制转基因水稻基因扩散对于保障生物安全、促进米制品贸易有重要意义。本研究针对我国当... 我国在转基因水稻研究方面处于国际领先地位,但由于研究材料扩散到商品化生产水稻中而引起的贸易纠纷时有发生。加强转基因水稻检测与监管,从源头控制转基因水稻基因扩散对于保障生物安全、促进米制品贸易有重要意义。本研究针对我国当前转基因水稻监管重点,结合已有相关检测方法标准,针对三种不同转基因水稻:抗虫水稻TT51-1、抗病水稻M12、抗除草剂水稻LLRICE62,以水稻内源基因RBE4为参照基因,建立转基因水稻四重复合PCR检测方法,可在同一反应体系中同时检测鉴定三种转基因水稻品系,检测限可达250个拷贝。利用此方法可快速地定性检测和鉴定转基因水稻TT51、M12、LL RICE62。 展开更多
关键词 转基因水稻 检测方法标准 复合PCR
荧光RPA技术检测转基因水稻科丰6号 被引量:10
11
作者 徐潮 李亮 +1 位作者 宛煜嵩 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期875-880,共6页
目前转基因作物检测通常使用PCR检测方法,PCR检测耗时较长且需要精密控制温度循环的仪器,不适于现场检测。本研究应用重组酶聚合酶等温扩增技术(recombinase ploymerase amplification,RPA),根据转基因抗虫水稻科丰6号插入连接区整合... 目前转基因作物检测通常使用PCR检测方法,PCR检测耗时较长且需要精密控制温度循环的仪器,不适于现场检测。本研究应用重组酶聚合酶等温扩增技术(recombinase ploymerase amplification,RPA),根据转基因抗虫水稻科丰6号插入连接区整合序列设计筛选了一套可用于RPA检测的引物及探针组合,建立了转基因抗虫水稻科丰6号及其衍生品种转化体特异性荧光RPA检测方法。研究结果表明本方法可稳定特异检出样品中500个拷贝的靶标分子,利用实时荧光检测简化了检测程序,使检测可在10~20 min内完成,与常规PCR检测需要数小时相比极大地缩短了检测时间。使用锂电池驱动的便携式扩增检测仪,对于野外转基因现场检测具有极大的应用价值。 展开更多
关键词 RPA 等温扩增 科丰6号 转基因检测
基于色谱法的超螺旋质粒DNA纯化与分析进展 预览 被引量:1
12
作者 李亮 柳方方 +1 位作者 宛煜嵩 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1089-1094,共6页
质粒DNA含有独立复制的遗传结构,是基因工程的常用工具,广泛应用于分子生物学基础研究、农业转基因检测、医疗诊断与基因治疗等领域。质粒DNA的构型一般分为超螺旋、开口环状及线性3种。初步纯化的质粒DNA溶液中常混有3种构型,并且... 质粒DNA含有独立复制的遗传结构,是基因工程的常用工具,广泛应用于分子生物学基础研究、农业转基因检测、医疗诊断与基因治疗等领域。质粒DNA的构型一般分为超螺旋、开口环状及线性3种。初步纯化的质粒DNA溶液中常混有3种构型,并且掺杂一定量的蛋白质、RNA、内毒素以及宿主基因组DNA,这些杂质会影响后续的应用,因此质粒DNA需要进一步精细纯化。该文对质粒DNA的新应用领域、基于色谱的精细纯化技术及产物质量分析体系进行了综述,并展望了高纯度质粒DNA精细纯化及产物分析的发展方向。 展开更多
关键词 超螺旋质粒DNA 精细纯化 色谱技术 数字PCR 综述
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脱氧核糖核酸定量的潜在基准方法研究进展 预览 被引量:3
13
作者 李亮 张秀杰 +2 位作者 宛煜嵩 楚燕春 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期158-163,共6页
脱氧核糖核酸定量分析是食品安全检验、医疗诊断、转基因检测与病原微生物鉴定等相关领域的基础。常见的定量方法种类繁多,如紫外分光光度法、荧光染料法和实时荧光定量PCR法等等,各有所长,但测量结果缺乏可靠性、可比性和一致性。... 脱氧核糖核酸定量分析是食品安全检验、医疗诊断、转基因检测与病原微生物鉴定等相关领域的基础。常见的定量方法种类繁多,如紫外分光光度法、荧光染料法和实时荧光定量PCR法等等,各有所长,但测量结果缺乏可靠性、可比性和一致性。随着研究的深入与应用要求的提高,基准方法成为了核酸分析以及核酸测量能力评估的关键。本文综述了近年来三种成为潜在脱氧核糖核酸定量基准方法的研究发展,评述了各种方法的技术优势、不足与应用潜力,以期为其相关研究和利用提供参考。 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸定量 基准方法 IDMS ICP—OES MS dPCR
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转基因抗虫棉外源DNA插入整合结构分析和转化事件特异性检测方法的建立 预览 被引量:7
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作者 侯娜 贺辉群 +4 位作者 董美 徐荣旗 宛煜嵩 刘好宝 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 317-323,共7页
通过3'端2次高效热不对称交互PCR(hiTAIL-PCR)和5'端4次hiTAIL-PCR及1次长链PCR获得了转基因抗虫棉材料06N-119的外源DNA插入片段的全序列。外源DNA插入片段全长11578bp,由NptⅡ基因和Bt基因两个表达盒串联构成。插入位点处缺失75... 通过3'端2次高效热不对称交互PCR(hiTAIL-PCR)和5'端4次hiTAIL-PCR及1次长链PCR获得了转基因抗虫棉材料06N-119的外源DNA插入片段的全序列。外源DNA插入片段全长11578bp,由NptⅡ基因和Bt基因两个表达盒串联构成。插入位点处缺失75个碱基,未发生基因重组现象。根据3'端旁侧序列设计引物,特异性和灵敏度检测结果表明,建立的3'端定性PCR检测方法特异性强,灵敏度高,最低检测限为每100ng模板量的0.05%,相当于11个靶标序列拷贝。本研究结果对转基因抗虫棉外源基因检测和生物安全评价具有重要意义。 展开更多
关键词 抗虫棉 整合结构 PCR检测 转化事件特异性
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细菌碳代谢抑制作用的研究进展 预览 被引量:2
15
作者 林文娜 李亮 +5 位作者 王瑞 韩云蕾 代淑贤 平淑珍 燕永亮 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2011年第2期 46-52,共7页
当生长介质中存在多种碳源时,细菌通常选择利用某一种优先碳源,同时在碳代谢抑制蛋白参与下抑制其他碳源的代谢和利用。这种碳代谢抑制现象广泛存在于细菌中,是当前微生物代谢研究的热点和前沿之一。通过对碳源的选择性优先利用,细菌可... 当生长介质中存在多种碳源时,细菌通常选择利用某一种优先碳源,同时在碳代谢抑制蛋白参与下抑制其他碳源的代谢和利用。这种碳代谢抑制现象广泛存在于细菌中,是当前微生物代谢研究的热点和前沿之一。通过对碳源的选择性优先利用,细菌可以在生存环境中保持高度的竞争力和环境适应能力。碳代谢抑制蛋白通过复杂的调控网络发挥作用,主要通过转录水平上的激活/抑制或者与RNA结合蛋白的翻译控制等方式进行。在不同微生物中,碳代谢抑制蛋白的种类及其作用机制存在一定的差异。综述了目前研究较为深入的几种细菌中的碳代谢抑制蛋白及其作用机制,将有助于深化微生物的环境适应性,代谢多样性和碳代谢分子调控的认识。 展开更多
关键词 优先碳源 碳代谢抑制 调节机制
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全球转基因作物发展现状及趋势 预览 被引量:11
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作者 陈沽君 张维 +4 位作者 宛煜嵩 王友华 薛爱红 孙国庆 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期 369-374,共6页
随着转基因技术发展的日趋成熟和社会对转基因作物需求量的增加,转基因作物商业种植14年间有了迅猛的发展。本文从全球转基因作物大规模研究现状出发,分析了解转基因作物发展现状及趋势,对于指导当前的转基因作物研究和市场化具有重要... 随着转基因技术发展的日趋成熟和社会对转基因作物需求量的增加,转基因作物商业种植14年间有了迅猛的发展。本文从全球转基因作物大规模研究现状出发,分析了解转基因作物发展现状及趋势,对于指导当前的转基因作物研究和市场化具有重要意义。 展开更多
关键词 转基因技术 转基因作物 商品化 生物安全
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14个微卫星DNA标记在猪个体识别和溯源中的应用研究 预览 被引量:5
17
作者 阮泓越 宛煜嵩 +1 位作者 贺辉群 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期 1129-1133,共5页
本研究应用微卫星标记对3个国外引进猪品种(大白猪、长白猪和杜洛克猪)进行了个体识别的可行性研究。每个品种选取同窝的10个个体,利用SSR多态性分析个体之间的差异。结果表明利用7个微卫星标记即可区分来源于其中2窝的20个个体,再加... 本研究应用微卫星标记对3个国外引进猪品种(大白猪、长白猪和杜洛克猪)进行了个体识别的可行性研究。每个品种选取同窝的10个个体,利用SSR多态性分析个体之间的差异。结果表明利用7个微卫星标记即可区分来源于其中2窝的20个个体,再加上7个微卫星标记后可对另一窝10个后代进行个体识别。本研究进一步利用这些微卫星标记对屠宰场随机取样的5头猪进行从肉样到血液样品的溯源研究,结果表明同一头猪的肉样和血液样品的微卫星座位是一一对应的,说明应用微卫星标记进行从市场肉品到养殖猪血液的DNA溯源是可行的。 展开更多
关键词 微卫星DNA 个体识别 溯源
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蜂蜜中转基因成分的PCR检测 预览 被引量:3
18
作者 张秀杰 刁青云 +1 位作者 宛煜嵩 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期 584-587,共4页
我国是蜂蜜生产大国,棉花是主要蜜源植物之一。近些年来,我国种植的棉花大多为转基因抗虫棉,棉花蜜中是否含有转基因成分,引起国内外广大消费者的密切关注。本文以抗虫棉种植地采取的棉花蜜为原料,采用改良CTAB法,在DNA提取过程中,用PB... 我国是蜂蜜生产大国,棉花是主要蜜源植物之一。近些年来,我国种植的棉花大多为转基因抗虫棉,棉花蜜中是否含有转基因成分,引起国内外广大消费者的密切关注。本文以抗虫棉种植地采取的棉花蜜为原料,采用改良CTAB法,在DNA提取过程中,用PBS缓冲液除去其中大部分的可溶性多糖,并提高CTAB提取缓冲液中NaCl浓度以去除残余多糖,从蜂蜜中成功提取出片段完整、纯度较高的DNA,DNA得率为486ng/mL,OD260/OD280为2.01,能够满足后续PCR定性检测的需求。从以转基因棉花为蜜源的蜂蜜中检测出外源DNA片段,建立了蜂蜜中转基因成分的PCR检测技术。本研究对转基因食品标识制度的完善、转基因食品监管、减少贸易摩擦以及保证消费者权益等具有重要意义。 展开更多
关键词 蜂蜜 DNA提取 转基因 PCR
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中国转基因水稻的研究进展及产业化问题分析 预览 被引量:12
19
作者 孙国庆 +1 位作者 宛煜嵩 林敏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1-6,共6页
水稻在我国粮食生产和消费中占有重要地位,也是世界上最重要的粮食作物之一。水稻转基因研究已成为当前国内外植物分子生物学和作物育种研究的热点。目前我国转基因水稻研究处于国际领先水平,有望成为转基因抗虫棉之后又一个进入产业化... 水稻在我国粮食生产和消费中占有重要地位,也是世界上最重要的粮食作物之一。水稻转基因研究已成为当前国内外植物分子生物学和作物育种研究的热点。目前我国转基因水稻研究处于国际领先水平,有望成为转基因抗虫棉之后又一个进入产业化的转基因粮食作物,这可能将在确保我国粮食安全中发挥重要贡献。从国内外转基因水稻研发概况、我国Bt抗虫水稻生物安全评价两方面综述了我国转基因水稻产业化的前景,并在此基础上对产业化提出相关建议与对策。 展开更多
关键词 转基因 水稻 产业化
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三种土壤微生物总DNA提取方法的比较 预览 被引量:11
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作者 王丽娜 许修宏 +1 位作者 宛煜嵩 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期 331-334,共4页
本文对3种常用的土壤微生物总DNA提取方法Martin法、高盐改进法及试剂盒法进行了比较,并通过DNA得率、纯度及16S rDNA V3可变区的PCR扩增结合DGGE法(denatumg gradient gel electrophoresis),分别对3种方法进行评价。结果表明,3种... 本文对3种常用的土壤微生物总DNA提取方法Martin法、高盐改进法及试剂盒法进行了比较,并通过DNA得率、纯度及16S rDNA V3可变区的PCR扩增结合DGGE法(denatumg gradient gel electrophoresis),分别对3种方法进行评价。结果表明,3种方法提取的DNA均能满足土壤微生物多样性分析的要求。其中试剂盒方法操作简单,提取的DNA质量较高,但DNA得率较低且成本昂贵。Martin法和高盐改进法用时较长,DNA得率较高,纯度较低,但对后续PCR扩增和DGGE分析没有明显影响,且成本低廉。 展开更多
关键词 土壤微生物 DNA提取 DGGE
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