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三结构域蛋白21通过下调自噬相关蛋白4B抑制肝细胞癌细胞增殖的实验研究
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作者 李涛 陈岺曦 +3 位作者 孙梁博 连继勤 何凤田 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期815-822,共8页
目的探讨三结构域蛋白21(tripartite motif 21,TRIM21)抑制肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖的可能机制。方法采用TCGA数据库的样本数据分析TRIM21在HCC组织中的表达水平;Western blot检测HCC细胞系中TRIM21表达情况,在H... 目的探讨三结构域蛋白21(tripartite motif 21,TRIM21)抑制肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖的可能机制。方法采用TCGA数据库的样本数据分析TRIM21在HCC组织中的表达水平;Western blot检测HCC细胞系中TRIM21表达情况,在HepG2细胞中过表达TRIM21,并在SMMC7721细胞中敲低TRIM21;CCK-8和细胞克隆形成实验分别检测过表达和敲低TRIM21对HepG2和SMMC7721细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡的情况;Western blot检测TRIM21对自噬相关蛋白4B(autophagy related 4B,ATG4B)水平的影响;分别在HepG2细胞中下调ATG4B表达和在SMMC7721细胞中过表达ATG4B,CCK-8检测细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞周期变化。结果TRIM21在HCC组织中的表达水平较正常肝组织显著下调(n=49,P<0.05);在HepG2细胞中过表达TRIM21能显著降低细胞存活率(P<0.01)、抑制细胞增殖(P<0.01),在SMMC7721细胞中下调TRIM21的表达能显著增加细胞存活率(P<0.05)、促进细胞增殖(P<0.05)。过表达或敲低TRIM21对HCC细胞凋亡影响不明显;TRIM21在HCC细胞中可以抑制ATG4B的表达;而在HCC细胞中过表达或下调ATG4B也可以发挥促进或抑制细胞增殖的效果(P<0.05),ATG4B影响HCC细胞增殖的机制主要是改变细胞周期进程。结论TRIM21在HCC中可通过下调ATG4B而抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 三结构域蛋白21 细胞增殖 自噬相关蛋白4B 肝癌
生物化学与分子生物学实验教学改革初探
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作者 付晓红 许志臻 +2 位作者 赵力 黄刚 《中华医学教育探索杂志》 2019年第2期131-134,共4页
为进一步提高生物化学与分子生物学实验课的教学质量,增强学生应用理论知识的能力和综合素质;针对目前实验教学存在的不足,在生物化学与分子生物学实验教学中,丰富教学内容(如更新内容、区分设置实验、增补设计性/综合性实验)、改革教... 为进一步提高生物化学与分子生物学实验课的教学质量,增强学生应用理论知识的能力和综合素质;针对目前实验教学存在的不足,在生物化学与分子生物学实验教学中,丰富教学内容(如更新内容、区分设置实验、增补设计性/综合性实验)、改革教学方式(增加教学手段、教学方法及示教环节)和完善教学评价(兼顾实验报告考核和操作考核)等方面进行了初步探索。通过调查问卷分析,发现学生对实验课学习热情更高,实验技术更熟练,实验教学效果明显提升。现将近年在这些方面实施改革的方法及效果进行小结,以期为医学院校生物化学与分子生物学实验教学提供有益借鉴。 展开更多
关键词 生物化学与分子生物学 实验教学 教学改革
个案管理对乳腺癌患者化疗期间遵医行为及生活质量的影响 预览
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作者 魏淑霞 王柳 +4 位作者 刘丽娟 郝园园 郭素丽 郭英俊 《天津护理》 2018年第5期509-512,共4页
目的:探讨个案管理对提高乳腺癌患者化疗期间遵医行为及生活质量的效果。方法:按昕在病区将106例乳腺癌术后患者分为观察组和对照组各53例;对照组按照常规护理,观察组接受个案管理护理实践,对两组首次化疗时(护理前)、出院3个月... 目的:探讨个案管理对提高乳腺癌患者化疗期间遵医行为及生活质量的效果。方法:按昕在病区将106例乳腺癌术后患者分为观察组和对照组各53例;对照组按照常规护理,观察组接受个案管理护理实践,对两组首次化疗时(护理前)、出院3个月后(护理后)患者遵医行为的执行情况、癌性疲乏及生存质量进行统计学分析。结果:观察组按时复查比例高于对照组(P〈0.05)。观察组癌因性疲乏程度轻于对照组(P〈0.05)。观察组躯体功能、角色、认知、情绪、社会功能评分均高于对照组(P〈0.05)。结论:个案管理有助于提升乳腺癌患者化疗期间遵医干亍为的执行,有助于减少其癌性疲乏,提升其生活质量。 展开更多
关键词 乳腺癌 化学治疗 个案管理 医嘱依从性 生活质量
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丙戊酸钠通过激活miR-34c-5p/ATG4B信号通路抑制SH-SY5Y细胞自噬 预览
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作者 戴旭芳 +1 位作者 谢鹏 连继勤 《南方医科大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期1415-1420,共6页
目的探讨丙戊酸钠(VPA)对SH-SY5Y细胞中miR-34c-5p/ATG4B信号通路的激活作用及对自噬的影响。方法人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y用含10%胎牛血清的DMEM培养基常规培养,然后使用不同剂量VPA处理SH-SY5Y细胞24h,采用定量PCR分析VPA处理对ATG4... 目的探讨丙戊酸钠(VPA)对SH-SY5Y细胞中miR-34c-5p/ATG4B信号通路的激活作用及对自噬的影响。方法人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y用含10%胎牛血清的DMEM培养基常规培养,然后使用不同剂量VPA处理SH-SY5Y细胞24h,采用定量PCR分析VPA处理对ATG4B mRNA与miR-34c-5p表达的影响,免疫印迹法分析VPA处理对ATG4B蛋白表达的影响,将含ATG4B启动子片段的报告质粒转染SH-SY5Y细胞,然后通过荧光素酶报告基因系统分析VPA处理对ATG4B启动子活性的影响,用VPA单独或联合转录抑制剂放线菌素D分别处理SH-SY5Y细胞不同时间,定量PCR分析检测不同处理对ATG4BmRNA稳定性的影响,用VPA单独或联合miR-34c-5p抑制剂处理细胞24h,通过检测不同处理对ATG4B表达变化的影响,进而判断miR-34c-5p在VPA下调ATG4B表达中的作用,同时通过Western blot检测不同处理对LC3-II表达的影响,分析细胞自噬水平变化。结果VPA可剂量依赖性降低SH-SY5Y细胞中ATG4B的mRNA和蛋白水平(P<0.05)。VPA处理不影响SHSY5Y细胞中ATG4B的启动子活性(P>0.05),但显著下调其mRNA的稳定性(P<0.05)。同时,VPA处理明显增强SH-SY5Y细胞中miR-34c-5p的表达水平(P<0.05)。使用miR-34c-5p抑制剂与VPA联合处理SH-SY5Y细胞,可逆转VPA对ATG4B表达的下调作用。VPA处理还下调了SH-SY5Y细胞中LC3-II的表达水平(P<0.05)。结论VPA可能通过激活miR-34c-5p/ATG4B信号通路而抑制SH-SY5Y细胞自噬。 展开更多
关键词 丙戊酸钠 SH-SY5Y细胞 ATG4B miR-34c-5p 自噬
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二氯乙酸盐增强盐酸吡柔比星杀伤肝癌细胞的研究 被引量:2
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作者 倪振洪 +4 位作者 吴亚冉 梁书龙 秦利燕 何凤田 连继勤 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期570-574,共5页
目的探讨二氯乙酸盐(Dichloroacetate,DCA)增强盐酸吡柔比星(Pirarubicin,THP)杀伤肝癌细胞的效果及可能机制。方法用40μmol/L DCA与不同浓度(0、200、400、600、800μmol/L)盐酸吡柔比星(THP)联合处理肝癌Hep G2细胞24 h,采用... 目的探讨二氯乙酸盐(Dichloroacetate,DCA)增强盐酸吡柔比星(Pirarubicin,THP)杀伤肝癌细胞的效果及可能机制。方法用40μmol/L DCA与不同浓度(0、200、400、600、800μmol/L)盐酸吡柔比星(THP)联合处理肝癌Hep G2细胞24 h,采用CCK-8法检测对细胞增殖的影响。然后用40μmol/L二氯乙酸盐与600μmol/L盐酸吡柔比星联合处理肝癌Hep G2细胞24 h,用Western blot检测细胞中PARP的表达变化及JNK的磷酸化水平;用DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS的水平。结果 DCA可显著增强不同浓度THP对肝癌Hep G2细胞的杀伤效果,与PBS组相比具有统计学差异(P〈0.05);DCA联合THP处理24 h可显著升高细胞内的ROS水平,与PBS联合THP组相比具有统计学差异(P〈0.05);此外,DCA联合THP可使Hep G2细胞中凋亡相关分子PARP的剪切明显增加,并增强JNK的磷酸化水平。抗氧化剂NAC可显著降低DCA与THP联合处理对Hep G2细胞中JNK的激活作用。结论 DCA可显著增强THP杀伤肝癌细胞效应,其机制可能与ROS/JNK通路的激活有关。 展开更多
关键词 二氯乙酸盐 肝癌 盐酸吡柔比星 活性氧簇 C-JUN氨基末端激酶
MiR-7下调LXRβ表达而抑制HepG2细胞脂质生成的作用
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作者 付晓红 钟丹 +4 位作者 许志臻 周鹏 赵力 黄刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1085-1089,共5页
目的初步探讨miR-7对LXRβ的抑制作用及其在肝细胞脂质生成中的作用。方法生物信息学分析,预测LXRβmRNA的3'-UTR上miR-7的可能结合位点。在人肝细胞系Hep G2中转染miR-7,以Real-time PCR、Western blot检测LXRβmRNA水平和蛋白水平表... 目的初步探讨miR-7对LXRβ的抑制作用及其在肝细胞脂质生成中的作用。方法生物信息学分析,预测LXRβmRNA的3'-UTR上miR-7的可能结合位点。在人肝细胞系Hep G2中转染miR-7,以Real-time PCR、Western blot检测LXRβmRNA水平和蛋白水平表达的变化;构建LXRβ3'-UTR报告基因质粒p MIR/LXRβ,Report assay检测报告基因荧光素酶活性;Real-time PCR检测miR-7对LXRβ激动剂诱导的脂质生成相关靶基因FAS、ACC的表达变化。结果在人肝细胞中,miR-7能够显著抑制LXRβ的表达(P〈0.05),且miR-7能降低LXRβ重组质粒p MIR/LXRβ的荧光素酶活性(P〈0.05)。同时抑制其激动剂对脂质代谢相关靶基因的诱导作用。结论 miR-7可通过结合在LXRβ3'-UTR区域而抑制其表达,进而抑制FAS、ACC的表达而抑制脂质生成。 展开更多
关键词 肝X受体β miR-7 肝细胞 脂质生成
盐酸吡柔比星通过上调ATG4B增强HeLa细胞保护性自噬 被引量:2
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作者 吴亚冉 倪振洪 +3 位作者 郑英如 何凤田 连继勤 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期129-135,共7页
目的探讨盐酸吡柔比星增强宫颈癌He La细胞自噬水平的可能机制。方法采用CCK-8检测盐酸吡柔比星单独或联用自噬抑制剂氯喹对He La细胞增殖的影响;台盼蓝染色实验检测盐酸吡柔比星单独或联用自噬抑制剂氯喹对He La细胞死亡的影响;GFP-LC... 目的探讨盐酸吡柔比星增强宫颈癌He La细胞自噬水平的可能机制。方法采用CCK-8检测盐酸吡柔比星单独或联用自噬抑制剂氯喹对He La细胞增殖的影响;台盼蓝染色实验检测盐酸吡柔比星单独或联用自噬抑制剂氯喹对He La细胞死亡的影响;GFP-LC3质粒转染He La细胞后观察盐酸吡柔比星对自噬小体形成的影响;Western blot检测细胞中自噬标志分子Ⅱ型微管相关蛋白轻链3(microtuble-associated protein light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)、自噬相关分子自噬相关蛋白4B(autophapy related 4B,ATG4B)的表达情况。CCK-8实验及台盼蓝染色实验观察在有或者无自噬抑制剂氯喹作用下以及shRNA下调He La细胞中的ATG4B后盐酸吡柔比星对He La细胞的杀伤效应的影响。结果盐酸吡柔比星能剂量依赖地抑制He La细胞的增殖并促进其死亡(P〈0.05);盐酸吡柔比星处理能显著增加He La细胞中自噬小体的数量,并显著上调自噬标志分子LC3-II、自噬关键酶ATG4B的表达;自噬抑制剂氯喹可显著增强盐酸吡柔比星的杀细胞效应(P〈0.05),shRNA干扰ATG4B可抑制盐酸吡柔比星对He La细胞中自噬的增强作用(P〈0.05),并增强盐酸吡柔比星的杀细胞效应(P〈0.05)。结论盐酸吡柔比星通过上调ATG4B而增强的自噬对He La细胞起保护作用。 展开更多
关键词 盐酸吡柔比星 自噬 自噬相关蛋白4B 宫颈癌
白藜芦醇上调BATF2表达及抑制肝癌细胞增殖的研究 预览
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作者 付晓红 许志臻 +4 位作者 钟丹 吕细林 赵力 黄刚 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第23期3193-3195,3200共4页
目的 初步探讨白藜芦醇对BATF2表达的调控作用及对肝癌细胞(HepG2)增殖能力的影响。方法 用不同剂量的白藜芦醇(终浓度分别为20、40、80μmol/L)处理HepG2细胞,进行逆转录PCR(RT-PCR)、实时定量PCR(Real-time PCR)、Western blo... 目的 初步探讨白藜芦醇对BATF2表达的调控作用及对肝癌细胞(HepG2)增殖能力的影响。方法 用不同剂量的白藜芦醇(终浓度分别为20、40、80μmol/L)处理HepG2细胞,进行逆转录PCR(RT-PCR)、实时定量PCR(Real-time PCR)、Western blot检测碱性亮氨酸拉链转录因子2(BATF2)mRNA和蛋白水平表达的变化,并采用细胞增殖检测试剂(CCK-8)实验检测对细胞增殖能力的影响。结果 在HepG2细胞中,白藜芦醇能剂量依赖性地诱导BATF2在转录和翻译水平的表达,并抑制细胞的增殖(P〈0.05);基因检测发现白藜芦醇显著诱导BATF2启动区活性,-244--152区域存在白藜芦醇的可能结合位点。结论 白藜芦醇能增强HepG2细胞中BATF2的表达并抑制细胞的增殖,提示上调BATF2的表达可能是白藜芦醇抑制肝癌细胞增殖的机制之一。 展开更多
关键词 肝肿瘤 细胞增殖 肝癌细胞 白藜芦醇 碱性亮氨酸拉链转录因子2
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六西格玛管理理论在静脉化疗外渗风险控制中的应用 预览
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作者 魏淑霞 郭英俊 +7 位作者 薛晓英 许艳春 王柳 刘丽娟 郝圆圆 郭素丽 刘夏优 《实用临床医药杂志》 CAS 2015年第18期138-139,143共3页
化疗是癌症患者治疗的重要手段。外渗是输注物意外地从血管中渗漏到周围组织,如皮下脂肪、结缔组织或肌肉,为临床输注化疗药物严重并发症之一。一些抗癌的细胞毒性制剂已被证实药物副作用极其严重,它们能在数小时、数日、数月内造成严... 化疗是癌症患者治疗的重要手段。外渗是输注物意外地从血管中渗漏到周围组织,如皮下脂肪、结缔组织或肌肉,为临床输注化疗药物严重并发症之一。一些抗癌的细胞毒性制剂已被证实药物副作用极其严重,它们能在数小时、数日、数月内造成严重的组织损伤。因此,预防和适当的处理措施是避免后遗症的有效手段。如何加强对化疗药物各环节的危险因素控制,是肿瘤科护理质量管理和质量控制的重点。 展开更多
关键词 六西格玛管理 静脉化疗 外渗 风险控制
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生物化学期末考试试卷的分析与评价 预览 被引量:6
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作者 赵力 李渝萍 +2 位作者 彭家和 何凤田 《山西医科大学学报:基础医学教育版》 2011年第3期 231-233,共3页
分析评价临床医学2008级五年制本科2班学生的生物化学期末考试试卷,考试成绩呈负偏态分布,平均成绩为73.35分,难度为0.78,区分度为0.26,信度为0.88。试卷题型分布合理,试题总体难度适中,区分度尚可,信度高,较好地反映了学生的真实水平。
关键词 生物化学 试卷分析 难度 区分度
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创设情境联系生活丰富想象——第5册第6课《翠鸟》课堂实录片断与评析
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作者 《辽宁教育》 2001年第7期80-81,共2页
师:(放鸟叫的录音)同学们,你们听,这是谁在叫?你知道它们在说些什么吗?   生:(非常踊跃)这是小鸟在叫,它们在说:'同学们,你们好,欢迎我来到你们班作客吗?希望你们能喜欢我.'   生:同学们,我的叫声美吗?你来跟我比一比呀?……
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