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免疫荧光法检测氧诱导小鼠视网膜的病变 预览 被引量:1
1
作者 赵晓萍 陈燕 +3 位作者 姚怡心 李西华 沈淑坤 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第5期 810-813,共4页
目的:观察氧诱导小鼠视网膜的病变情况。方法:出生7d的129Sv/C57BL6J小鼠随机分为实验组和对照组,各28只。实验组置(75±2)%高氧环境、室温(23±2)℃,日光照明,5d后返回空气环境;对照组置(23±2)℃空气环境... 目的:观察氧诱导小鼠视网膜的病变情况。方法:出生7d的129Sv/C57BL6J小鼠随机分为实验组和对照组,各28只。实验组置(75±2)%高氧环境、室温(23±2)℃,日光照明,5d后返回空气环境;对照组置(23±2)℃空气环境中饲养:出生后第17d在视网膜平铺片及冰切片上通过免疫荧光法定量检测视网膜血管的增生情况,比较两组星型胶质细胞、小胶质细胞的差异,并通过TUNEL法检测细胞凋亡的情况。结果:出生后第17d实验组视网膜出现无血管区域,新生血管计数高于对照组(P〈0.01);星型胶质细胞增多、密集,与相邻的血管间的联系紧密,其小胶质细胞出现活化和增殖,突起少而短,并有胞体肿胀现象;实验组小鼠视网膜存在细胞凋亡。结论:(75±2)%高氧环境、室温(23±2)℃成功诱导小鼠视网膜的病变, 展开更多
关键词 免疫荧光 新生血管形成 星型胶质细胞 小胶质细胞 凋亡
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有丝分裂检验点基因BubR1的研究进展 预览 被引量:5
2
作者 时洪凯 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第7期 1110-1112,1115,共4页
BubR1是存在于哺乳动物中的有丝分裂检查点基因家族Mad3的同源基因,其编码蛋白BubR1是一个多结构域蛋白,在监测细胞有丝分裂前中期向后期转化的过程中扮演重要的角色。BubR1可以通过自身或作为MCC的成分抑制APC的活性,从APC隔离Cdc2... BubR1是存在于哺乳动物中的有丝分裂检查点基因家族Mad3的同源基因,其编码蛋白BubR1是一个多结构域蛋白,在监测细胞有丝分裂前中期向后期转化的过程中扮演重要的角色。BubR1可以通过自身或作为MCC的成分抑制APC的活性,从APC隔离Cdc20或者通过连接到微管驱动蛋白CENP—E,激活有丝分裂检查点信号级联放大。近年来关于BubR1的结构、功能及作用机理等研究工作颇为引人关注。这些研究表明:人BUBR1l基因定位于人类染色体15q14—21,其编码蛋白BubR1在整个有丝分裂中聚集在外层动粒板;BubR1缺陷导致对DNA损伤的妥协反应,它的完全切除导致大量细胞凋亡甚至胚胎致死;BubR1单基因剔除可增强剔除基因组不稳定性,并导致肿瘤发生;BubR1表达减少至10%的导致一系列早老相关的表型出现;BubR1+/-Apcmin/+复合突变提示BubR1和Ape相互作用调节中期一后期转化,这一反常现象可能在结直肠癌的基因组稳定性、发生和进展中发挥作用。本文将对BubR1蛋白就以上内容做一综述。 展开更多
关键词 有丝分裂检点 BUBR1 肿瘤 衰老
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一例Ⅰ型成骨不全家系的基因定位及突变检测 预览 被引量:11
3
作者 吴晓林 顾鸣敏 +5 位作者 崔斌 李西华 袁文涛 宋怀东 王铸钢 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期 699-702,共4页
目的对国内1例成骨不全(OI)家系进行基因突变及突变效应分析,为研究中国人群的成骨不全基因突变特点提供线索。方法对成骨不全Ⅰ型胶原基因COL1A1和COL1A2所在的17号染色体和7号染色体分别进行连锁分析,对致病基因做初步判断,然后用... 目的对国内1例成骨不全(OI)家系进行基因突变及突变效应分析,为研究中国人群的成骨不全基因突变特点提供线索。方法对成骨不全Ⅰ型胶原基因COL1A1和COL1A2所在的17号染色体和7号染色体分别进行连锁分析,对致病基因做初步判断,然后用聚合酶链反应扩增致病基因外显子,并测序检出基因突变。结果该家系为COL1A1基因突变,所有患者在该基因的第8个内含子剪切受体位点处为AG→GG(IVS8-2A〉G)突变。结论对比COL1A1基因突变数据库,该突变为一新发现突变。 展开更多
关键词 COL1A1基因 突变分析 成骨不全
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ATGL研究进展 预览 被引量:3
4
作者 倪萦音 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第7期 1102-1104,1118,共4页
脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)是脂肪组织中参与脂肪分解的脂肪酶。ATGL也被称为TTS2.2、desnutrin、iPLA2ξ或PNPLA2,在进化过程中较保守。ATGL拥有特异性的patatin结构域。空腹时ATGL表达上调,重新撮食后表达下降。基础水平、激素刺... 脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)是脂肪组织中参与脂肪分解的脂肪酶。ATGL也被称为TTS2.2、desnutrin、iPLA2ξ或PNPLA2,在进化过程中较保守。ATGL拥有特异性的patatin结构域。空腹时ATGL表达上调,重新撮食后表达下降。基础水平、激素刺激和过表达时均可分解甘油三酯,表达被抑制时甘油三酯分解减少。在ob/ob和db/db肥胖小鼠模型中表达量下降,表明其与肥胖、2型糖尿病、胰岛素抵抗和心血管系统疾病等严重疾病的发生可能均有关联。ATGL基因剔除小鼠研究证实其在能量代谢中发挥的重要作用;同时表明ATGL是负责细胞脂肪代谢的重要的甘油三酯脂肪酶。本文综述了ATGL的最新研究进展。 展开更多
关键词 ATGL 脂肪分解 脂肪酶 脂肪甘油三酯脂肪酶 甘油三酯
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小鼠结直肠自发肿瘤模型的建立 预览 被引量:5
5
作者 时洪凯 王毅 +1 位作者 陈燕 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第5期 714-717,共4页
目的:建立小鼠结直肠自发肿瘤模型.方法:用雄性Apc^Min/+基因突变小鼠与雌性BubR1^+/-基因敲除小鼠交配.得到的子代小鼠,按基因型分为Wild Type,BubR1^+/-,Apc^Min/+,和BubR1^+/-Apc^Min/+4组,每组7只,观察各组肠组织肿瘤数目... 目的:建立小鼠结直肠自发肿瘤模型.方法:用雄性Apc^Min/+基因突变小鼠与雌性BubR1^+/-基因敲除小鼠交配.得到的子代小鼠,按基因型分为Wild Type,BubR1^+/-,Apc^Min/+,和BubR1^+/-Apc^Min/+4组,每组7只,观察各组肠组织肿瘤数目、大小和位置,行HE染色后观察病理学改变,并用免疫组化染色法研究各组结直肠β-catenin的表达.结果:①BubR1^+/-Apc^Min/+组小鼠结直肠肿瘤的发病率显著增加,较Apc^Min/+组有显著差异(P=0.008).②BubR1或Apc单独缺失组小鼠结直肠中β-catenin蛋白除在细胞膜表达外,在细胞质也有弱阳性表达;而BubR1^+/-Apc^Min/+组小鼠结直肠β-catenin的表达水平明显增高,且多为细胞质表达和(或)膜浆共表达,部分合并细胞核表达.结论建立小鼠结直肠自发肿瘤模型对于筛选抗肿瘤药物和研究肿瘤发生机制具一定的应用价值. 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 基因 APC 基因 BubR1 动物模型
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医学遗传学网络教育现状分析与探讨 预览 被引量:1
6
作者 陈燕 赵晓萍 +1 位作者 郁松 《医学教育探索》 2007年第12期 1187-1188,1196,共3页
结合目前网络教育发展的优势与特点,分析了医学遗传学网络教育的现状,并探讨网络教育在医学遗传学教学中面临的问题及前景。
关键词 网络教育 医学遗传学 现状
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医学遗传学教学改革探析 预览 被引量:8
7
作者 赵晓萍 陈燕 +1 位作者 郁松 《医学教育探索》 2007年第11期 1008-1009,共2页
医学遗传学是生命科学的一门前沿学科,目前正发展成为一门高技术的科学。医学生不仅要学习当前医学遗传学的基本原理,而且还应该掌握医学遗传学领域新概念、新技术,以跟上科学发展的步伐。改进教学、考核方法是提高教学效果的有效措... 医学遗传学是生命科学的一门前沿学科,目前正发展成为一门高技术的科学。医学生不仅要学习当前医学遗传学的基本原理,而且还应该掌握医学遗传学领域新概念、新技术,以跟上科学发展的步伐。改进教学、考核方法是提高教学效果的有效措施。进一步探索和进行医学遗传学教学改革势在必行。 展开更多
关键词 医学遗传学 教学改革 考核
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帕金森病发病机制的研究进展 预览 被引量:5
8
作者 陈燕(综述) (审校) 《医学综述》 2007年第14期 1078-1080,共3页
帕金森病是一种常见的中枢神经系统退行性疾病,引起帕金森病的发病机制至今尚未明确。本文就对帕金森病发病机制研究中的病理机制、环境因素、遗传因素、氧化应激、线粒体功能障碍、蛋白质的错误折叠和聚集等方面的研究进展进行综述。
关键词 帕金森病 基因 病因学
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GABA-C受体/通道的最新研究进展 预览 被引量:6
9
作者 赵晓萍 《生命科学》 CSCD 2007年第4期 451-455,共5页
目前已有很多关于GABA-C受体/通道在视网膜中功能的研究报道,但近年来发现它在哺乳动物的视网膜外的组织,如丘脑、海马、垂体、脊髓、小脑和胃肠道等也有表达并参与了相关激素的调控.本文将主要叙述GABA-C受体/通道在分子结构、分布和... 目前已有很多关于GABA-C受体/通道在视网膜中功能的研究报道,但近年来发现它在哺乳动物的视网膜外的组织,如丘脑、海马、垂体、脊髓、小脑和胃肠道等也有表达并参与了相关激素的调控.本文将主要叙述GABA-C受体/通道在分子结构、分布和药理学特性方面较新的研究进展及参与相关激素包括褪黑激素、催乳素、生长激素和促甲状腺激素调控的研究. 展开更多
关键词 GABA-C受体/通道 GABA ρ亚单位 激素调控
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中枢多巴胺D1和D3受体在运动调控中的作用 预览 被引量:4
10
作者 陈燕 任志华 +2 位作者 刘契 徐明 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期 1033-1035,共3页
目的研究多巴胺D1和D3受体在运动调控中发挥的不同作用。方法60只小鼠随机分为多巴胺D3受体基因敲除组、多巴胺D1受体基因敲除组和野生型对照组,每组各20只;通过旷场实验和转棒实验,观察多巴胺D1和D3受体基因敲除小鼠运动能力的改变... 目的研究多巴胺D1和D3受体在运动调控中发挥的不同作用。方法60只小鼠随机分为多巴胺D3受体基因敲除组、多巴胺D1受体基因敲除组和野生型对照组,每组各20只;通过旷场实验和转棒实验,观察多巴胺D1和D3受体基因敲除小鼠运动能力的改变。结果在旷场实验和转棒实验中,多巴胺D1受体基因敲除组小鼠与野生型对照组比较,运动协调能力显著减弱(P〈0.01);多巴胺D3受体基因敲除组小鼠与野生型对照组比较,运动行为能力改变不明显。结论多巴胺D1受体在运动调控中起着比较重要的作用,D3受体在运动调控中的作用不很明显。 展开更多
关键词 多巴胺 多巴胺受体 运动行为
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多巴胺受体D1在小鼠运动调节方面的作用及与帕金森病的关系 预览 被引量:3
11
作者 陈燕 任志华 徐明 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第11期 975-978,共4页
目的:探讨多巴胺受体亚型D1在小鼠运动协调中的作用及与帕金森病的关系.方法:观察WT组(野生型)和D1(-/-)组小鼠的运动协调行为、体质量等表现差异;纹状体部苏木精伊红(HE)石蜡切片的形态学比较;酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化黑质... 目的:探讨多巴胺受体亚型D1在小鼠运动协调中的作用及与帕金森病的关系.方法:观察WT组(野生型)和D1(-/-)组小鼠的运动协调行为、体质量等表现差异;纹状体部苏木精伊红(HE)石蜡切片的形态学比较;酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化黑质致密部嘴侧1/3~2/3多巴胺能神经元数目比较,以及纹状体部WesternBlot蛋白水平检测TH含量变化.结果:TH免疫组化示两组小鼠黑质致密部嘴侧1/3~2/3区域的阳性多巴胺能神经元数目无明显差异.HE染色示两组小鼠纹状体部形态及其大小无明显差别,但日常行为学观察两组小鼠差异显著(P〈0.01),D1(-/-)组小鼠中脑石蜡切片显示神经元的退行性表现;而WT组未发现典型的神经元退行性改变.WesternBlot示WT组与D1(-/-)组小鼠的纹状体部TH表达水平差异显著(P〈0.05).结论:多巴胺受体D1在小鼠运动协调方面起重要作用,该受体的缺失对黑质多巴胺能神经元的影响程度虽没临床帕金森病(PD)严重,但仍可加速多巴胺能神经元发生退行性改变. 展开更多
关键词 受体 多巴胺 神经退行性改变 帕金森病
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NOVEL SPLICING MUTATION OF COL1A1 GENE CAUSING OSTEOGENESIS IMPERFECTA TYPE I IN CHINESE PEDIGREE 预览
12
作者 吴晓林 顾鸣敏 +5 位作者 崔兵 李西华 王铸钢 袁文涛 宋怀东 《上海第二医科大学学报:英文版》 2007年第1期 8-11,共4页
关键词 基因突变 骨生成 血统 中国
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α-突触核蛋白与帕金森病机制的研究进展
13
作者 (审校) 《国外医学:老年医学分册》 2006年第6期 251-256,共6页
α—synuclein是一种天然非折叠可溶性蛋白。目前发现它与许多神经功能障碍性及退行性中枢系统疾病密切相关,典型之一就是帕金森病(Parkinson disease,PD)。各种复杂因素,都可导致α—synuclein错误折叠并改变其正常的功能。在多... α—synuclein是一种天然非折叠可溶性蛋白。目前发现它与许多神经功能障碍性及退行性中枢系统疾病密切相关,典型之一就是帕金森病(Parkinson disease,PD)。各种复杂因素,都可导致α—synuclein错误折叠并改变其正常的功能。在多巴胺(dopamine,DA)能体系中,这一改变可最终使得多巴胺能神经细胞数目减少而导致PD。α—synuclein功能不金是PD中普遍存在的一个特征,该物质是如何产生神经细胞毒性作用的机制涉及多个方面。正是因为上述错综复杂的机制使得对α-synuclein与PD的研究进展缓慢。本文就α—synuclein基因、α-synuclein蛋白的聚集及其在PD发病机制中作用等方面的研究做一综述。 展开更多
关键词 α-synuclein聚集 氧化应激 多巴胺神经元
传代培养角膜细胞的染色体遗传变异率分析 预览 被引量:2
14
作者 马志敏 金月娥 +2 位作者 任志华 卢珞 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 76-77,共2页
目的 分析传代培养角膜细胞染色体数目的变异率。方法 选择人角膜上皮细胞(HCE)、牛角膜内皮细胞(BCE)和兔角膜上皮细胞(RCE)细胞,采用直接法制备传代细胞染色体标本,常规Giemsa染色,1000倍光学显微镜下计数分裂相染色体数目... 目的 分析传代培养角膜细胞染色体数目的变异率。方法 选择人角膜上皮细胞(HCE)、牛角膜内皮细胞(BCE)和兔角膜上皮细胞(RCE)细胞,采用直接法制备传代细胞染色体标本,常规Giemsa染色,1000倍光学显微镜下计数分裂相染色体数目,进行核型分析,统计染色体数目变异情况。结果 HCE染色体众数为56—65,为超二倍体;BCE染色体众数为27~34,为亚二倍体;RCE染色体众数为74~88,为超二倍体。与起源细胞相比,以上3种传代细胞染色体数目均发生了改变。结论 该项核型分析为HCE、BCE和RCE的功能研究提供了重要的参考信息。 展开更多
关键词 传代培养细胞 染色体变异 角膜细胞
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台湾原住民噶玛兰人肤纹学研究 被引量:4
15
作者 陈尧峰 张海国 +2 位作者 赖俊宏 王铸钢 《中国科学:C辑》 CSCD 北大核心 2006年第5期476-480,共5页
报道中国台湾噶玛兰人的肤纹参数,样本包括50名男性和50名女性.研究的项目有:指纹总嵴线数(TFRc)、指三角a和b间嵴线数(a—b RC)、手掌轴三角t到指三角a和d角度(atd)、轴三角t百分距离(tPD)、指纹、指间纹、手大小鱼际、猿... 报道中国台湾噶玛兰人的肤纹参数,样本包括50名男性和50名女性.研究的项目有:指纹总嵴线数(TFRc)、指三角a和b间嵴线数(a—b RC)、手掌轴三角t到指三角a和d角度(atd)、轴三角t百分距离(tPD)、指纹、指间纹、手大小鱼际、猿线、指三角等.还分析了同名指指纹对应的情况,见到非随机组合的现象.对台湾原住民(高山族)噶玛兰人的肤纹进行了详尽的调查,为人类学、遗传学和医学研究提供了较完整的资料. 展开更多
关键词 噶玛兰人 台湾原住民(高山族) 南岛语族 肤纹
PC-1转基因小鼠的建立及其与2型糖尿病发病的关系 被引量:2
16
作者 王毅 骆惠均 +6 位作者 王芳 张丽君 马志敏 孔辉 王龙 王铸钢 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期 554-556,共3页
目的探讨PC-1基因高表达与肥胖、胰岛素抵抗及2型糖尿病的关系.方法构建pcDNA3.1/PC-1转基因质粒,经显微注射的方法获得G0代转基因小鼠;用PCR、Southern印迹、RT-PCR和Western印迹方法检测PC-1转基因小鼠的基因组整合和组织表达;对转基... 目的探讨PC-1基因高表达与肥胖、胰岛素抵抗及2型糖尿病的关系.方法构建pcDNA3.1/PC-1转基因质粒,经显微注射的方法获得G0代转基因小鼠;用PCR、Southern印迹、RT-PCR和Western印迹方法检测PC-1转基因小鼠的基因组整合和组织表达;对转基因小鼠进行腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT)和胰岛素耐量试验(ITT).结果测序证明克隆的PC-1 cDNA序列与GenBank相应序列相比无误,转基因质粒中PC-1插入方向正确;鼠尾基因组DNA PCR和Southern印迹表明共获得8个PC-1转基因阳性的G0代小鼠,分别与野生型C57BL/6J小鼠交配后获得5个F1代PC-1转基因小鼠系;RT-PCR、Western印迹证实该基因在2个单系的骨骼肌和肝组织中有稳定表达;与野生型小鼠相比,转基因阳性小鼠的体重、空腹血糖、IPGTT和ITT结果无明显变化.结论成功构建稳定表达PC-1基因的转基因小鼠系,研究结果表明该基因在相关组织中的高表达不足以触发肥胖、胰岛素抵抗或2型糖尿病的发生. 展开更多
关键词 PC-1基因 小鼠 转基因 糖尿病 2型
一种新的垂体分泌蛋白Mimecan原核表达、抗体制备及其在垂体瘤组织中的表达 预览 被引量:1
17
作者 胡三梅 陈凤玲 +5 位作者 陈天钦 叶廷军 李荣英 史文静 宋怀东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期 13-18,共6页
Mimecan/osteoglycin是一种分泌型蛋白质,目前其功能尚不明确.从人垂体cDNA中克隆到OIF基因并构建成重组表达质粒pGEX-5X-2/mimecan,将此重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后用IPTG诱导,成功表达了一种分子量约为38 kD融合蛋白,约占菌... Mimecan/osteoglycin是一种分泌型蛋白质,目前其功能尚不明确.从人垂体cDNA中克隆到OIF基因并构建成重组表达质粒pGEX-5X-2/mimecan,将此重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后用IPTG诱导,成功表达了一种分子量约为38 kD融合蛋白,约占菌体总蛋白的30%~40%.此融合蛋白经纯化分离后免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体.用Western印迹法检测兔的抗血清.结果显示,该多克隆抗体有较好的针对mimecan蛋白的专一性并且效价较高,可用于对mimecan的功能研究.用此多克隆抗体检测到在某些种类的人垂体瘤组织中mimecan表达极高,提示可能存在新的垂体瘤类型. 展开更多
关键词 mimecan/osteoglycin GST融合蛋白 多克隆抗体 垂体瘤
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NUP98-HOXA9融合基因转基因小鼠的建立及乙烷亚硝基脲诱变的研究 被引量:2
18
作者 顺元 顾鸣敏 +6 位作者 王阳 谭轶 孙岳平 王龙 孔辉 王铸钢 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期 257-261,共5页
目的从整体动物水平阐明NUP98-HOXA9融合蛋白在白血病发病机制中的作用.方法采用分子克隆技术构建含有NUP98-HOXA9的转基因质粒,经显微注射建立含有该融合基因的转基因小鼠,并对其细胞表型进行分析;采用PCR、RT-PCR等技术进行转基因整... 目的从整体动物水平阐明NUP98-HOXA9融合蛋白在白血病发病机制中的作用.方法采用分子克隆技术构建含有NUP98-HOXA9的转基因质粒,经显微注射建立含有该融合基因的转基因小鼠,并对其细胞表型进行分析;采用PCR、RT-PCR等技术进行转基因整合和表达检测;对表型正常的转基因小鼠用乙烷亚硝基脲(ENU)诱变,观察转基因小鼠的表型变化.结果 5个单系的转基因小鼠在骨髓细胞中检出NUP98-HOXA9融合基因的稳定表达,但血常规、骨髓象及肝、脾等未见异常改变.ENU诱变后部分转基因阳性小鼠出现类似人类慢性髓系白血病的表现.结论 NUP98-HOXA9融合基因产物能在转基因小鼠中表达,但不足以诱发白血病;ENU诱变结果提示转基因小鼠对ENU造成的第二次打击可提高白血病的易感性. 展开更多
关键词 NUP98-HOXA9融合基因 转基因小鼠 乙烷亚硝基脲 亚硝基脲化合物 染色体畸变 白血病
NUP98-PMX1转基因小鼠发生髓系白血病样表型
19
作者 王阳 顾鸣敏 +8 位作者 谭轶 顺元 王龙 孔辉 孙岳平 陈赛娟 王铸钢 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期 262-265,共4页
目的在整体动物水平研究NUP98-PMX1融合蛋白的致白血病作用.方法采用分子克隆技术构建含有NUP98-PMX1的转基因质粒,显微注射法建立转NUP98-PMX1基因的小鼠,以PCR、RT-PCR方法检测融合基因的表达;用流式细胞仪检测骨髓细胞表型.结果转染N... 目的在整体动物水平研究NUP98-PMX1融合蛋白的致白血病作用.方法采用分子克隆技术构建含有NUP98-PMX1的转基因质粒,显微注射法建立转NUP98-PMX1基因的小鼠,以PCR、RT-PCR方法检测融合基因的表达;用流式细胞仪检测骨髓细胞表型.结果转染NUP98-PMX1融合基因的NIH3T3细胞生长加快,软琼脂上可形成集落,并使裸鼠致瘤.出现病态的8只NUP98-PMX1转基因小鼠中有4只发生粒细胞白血病样表型,其中3只表现为人类慢性髓系白血病样表型.结论 NUP98-PMX1融合基因具有致瘤性,其表达在髓系白血病的发生中起着极为重要的作用. 展开更多
关键词 NUP98-PMX1转基因小鼠 髓系白血病 CML 骨髓细胞
人新的生长激素异形体基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
20
作者 胡三梅 章国卫 +4 位作者 陈凤玲 李荣英 陈家伦 宋怀东 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期 148-150,共3页
目的构建含新的生长激素异形体(GHv)基因全长编码区的pGEM-T Easy质粒和GHv-谷胱甘肽转硫酶(GST)融合蛋白的表达质粒并在大肠杆菌表达出其融合蛋白.方法采用克隆和亚克隆技术构建GHv-GST融合基因的表达质粒,转化大肠杆菌BL21并用异丙基... 目的构建含新的生长激素异形体(GHv)基因全长编码区的pGEM-T Easy质粒和GHv-谷胱甘肽转硫酶(GST)融合蛋白的表达质粒并在大肠杆菌表达出其融合蛋白.方法采用克隆和亚克隆技术构建GHv-GST融合基因的表达质粒,转化大肠杆菌BL21并用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其表达GHv-GST融合蛋白,谷胱甘肽-Sepharose 4B纯化试剂盒纯化融合蛋白.结果含GHv-GST融合基因表达质粒的大肠杆菌表达出相对分子质量约43000的GHv-GST融合蛋白,SDS-PAGE结果显示纯化的融合蛋白为单一条带.结论成功构建成GHv-GST融合基因的表达质粒并且GHv-GST融合蛋白在大肠杆菌BL21中有高表达.上述工作为制备多抗,深入研究GHv基因的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 生长激素 异形体基因 克隆 大肠杆菌 表达
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