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AR-A014418对γδT细胞增殖、凋亡及杀伤功能的影响 预览
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作者 郑璐 孙蕾清 +6 位作者 陈复兴 周燏 吕小婷 李莹 周忠海 永强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期20-24,共5页
目的:观察糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)选择性抑制剂AR-A014418对体外扩增的γδT细胞的细胞活性包括增殖、凋亡和杀伤功能的影响。方法:采用人淋巴细胞分离液分离健康人外周血中单个核细胞,在γδT细胞完全培养基中培养获得γδT细胞。... 目的:观察糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)选择性抑制剂AR-A014418对体外扩增的γδT细胞的细胞活性包括增殖、凋亡和杀伤功能的影响。方法:采用人淋巴细胞分离液分离健康人外周血中单个核细胞,在γδT细胞完全培养基中培养获得γδT细胞。用不同浓度的AR-A014418诱导培养γδT细胞72 h后,用流式细胞术检测各诱导处理组γδT细胞的增殖、凋亡和杀伤能力;用Western blot检测γδT细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3表达情况。结果:AR-A014418浓度在0.3~10μmol/L时能促进γδT细胞的增殖并抑制其凋亡。同时促凋亡蛋白Cleaved caspase-3和Bax表达逐渐减弱,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达逐渐增强。尤其是在3μmol/L时,γδT细胞增殖活性最强,而且体外杀伤人肝癌HepG2细胞和人胃癌SGC-7901细胞活性也显著提高。结论:GSK-3β抑制剂AR-A014418在3μmol/L浓度时,可以抑制体外扩增γδT细胞的凋亡,并能增强其体外增殖和杀伤肿瘤活性,提示AR-A014418具有一定的免疫调节功能,为今后用于体外扩增γδT细胞提供实验依据。 展开更多
关键词 AR-A014418 ΓΔT细胞 增殖 凋亡 杀伤功能
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治学,让自己“特”起来 预览
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作者 陈复兴 《师道:人文》 2019年第1期20-22,共3页
记得某大学教授说:“社会有分工,术业有专攻。作为中小学一线教师,要干好自己的本业,教书育人。至于研究,顶多可以思考一下怎么上好自己的课,或者在一些教育刊物上发一些小文章,不要贪多求大,去搞什么课题。”言下之意,中小学教师是没... 记得某大学教授说:“社会有分工,术业有专攻。作为中小学一线教师,要干好自己的本业,教书育人。至于研究,顶多可以思考一下怎么上好自己的课,或者在一些教育刊物上发一些小文章,不要贪多求大,去搞什么课题。”言下之意,中小学教师是没什么条件从事学术研究的,只能做学术岸边扑腾的小鱼小虾。 展开更多
关键词 中小学教师 治学 学术研究 大学教授 一线教师 教书育人 教育刊物 文章
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—80℃短期冻存对NK细胞功能及杀伤活性的实验研究
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作者 吕小婷 周忠海 +3 位作者 陈复兴 周熵 李洪春 《徐州医科大学学报》 CAS 2018年第11期706-710,共5页
目的探讨一80℃短期冻存不同时间对NK细胞功能及杀伤活性的影响。方法采集和分离健康人外周血单个核细胞,在体外培养扩增NK细胞,扩增12d后将部分NK细胞于一80%冻存1、4、12、24周。用流式细胞仪分别检测冻存前后NK细胞的表型、凋亡百分... 目的探讨一80℃短期冻存不同时间对NK细胞功能及杀伤活性的影响。方法采集和分离健康人外周血单个核细胞,在体外培养扩增NK细胞,扩增12d后将部分NK细胞于一80%冻存1、4、12、24周。用流式细胞仪分别检测冻存前后NK细胞的表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B及CDl07a的表达;用LDH法检测并比较冻存前后的NK细胞对食管癌细胞株的杀伤活性。结果一80Y:冻存1、4、12周的NK细胞与未冻存的NK细胞比较表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B、CDl07a表达及对食管癌的杀伤活性,差异无统计学意义(P>0.05)。而冻存24周的NK细胞与未冻存的NK细胞比较表型、凋亡百分率、穿孔素、颗粒酶B、CDl07a表达及对食管癌的杀伤活性,差异均有统计学意义(P<O.05)。结论一80'E冻存NK细胞12周以内对细胞的功能及杀伤活性没有影响。 展开更多
关键词 NK细胞 冻存 杀伤活性
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师患寡 更患不均——县域内乡镇学校师资优质化策略管窥 预览
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作者 陈复兴 《师道:人文》 2018年第10期35-37,共3页
站在经济欠发达地区的教育系统角度,面对日渐频繁的师资流动,大有“一掌难当四面风”的窘态。某县某年刚提拔了一个县城中学的中层正职担任乡镇学校的正校长,一所地级市的重点中学却马上来了一个通知,让他前去任教,档案重建,弄得当... 站在经济欠发达地区的教育系统角度,面对日渐频繁的师资流动,大有“一掌难当四面风”的窘态。某县某年刚提拔了一个县城中学的中层正职担任乡镇学校的正校长,一所地级市的重点中学却马上来了一个通知,让他前去任教,档案重建,弄得当地教育局手忙脚乱,不得已重启校长遴选的程序。与经济发达地区的学校搞结对,结果对方校长一来,自己的师资家底也被摸得一清二楚,那些业务精英就很容易被挖走。 展开更多
关键词 乡镇学校 师资流动 优质化 经济欠发达地区 县域 经济发达地区 重点中学 教育系统
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让男孩“弱”一会儿 预览
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作者 陈复兴 《师道:人文》 2018年第8期10-11,共2页
这几年,教育界人士或者教育的有心人,大部会了解到一个词汇——男孩危机。它指的是男生在各方面部落后于女生的现象,并不仅仅限于学业,还有在心理素质、体魄体能和社会适应能力等方面。
关键词 男孩 社会适应能力 心理素质 教育界 词汇
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阿托伐他汀对人NK细胞杀伤结肠癌细胞的影响及其机制研究 预览 被引量:4
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作者 姬会春 刘军权 +3 位作者 周燏 李昳 陈复兴 费素娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期178-185,共8页
目的:探讨阿托伐他汀对人NK细胞杀伤结肠癌细胞的影响及其机制。方法:不同浓度的阿托伐他汀作用于3株结肠癌细胞(HCT-116、SW-480、Caco-2),CCK-8法测定阿托伐他汀对结肠癌细胞生长抑制率的影响。SCGM培养基体外扩增人NK细胞,自动... 目的:探讨阿托伐他汀对人NK细胞杀伤结肠癌细胞的影响及其机制。方法:不同浓度的阿托伐他汀作用于3株结肠癌细胞(HCT-116、SW-480、Caco-2),CCK-8法测定阿托伐他汀对结肠癌细胞生长抑制率的影响。SCGM培养基体外扩增人NK细胞,自动生化分析仪测定NK细胞对3株结肠癌细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测结肠癌细胞MICA/B的表达率。结果:(1)NK细胞的培养:培养前CD3-CD56+的NK细胞占外周血单个核细胞的比例为4.5%,培养10 d时NK细胞的比例增至93.1%。(2)阿托伐他汀对3株结肠癌细胞生长抑制率的影响:阿托伐他汀作用48 h后,在浓度5~40μmol/L的4个实验组中,HCT-116细胞的生长抑制率较对照组升高(P〈0.05)。作用96 h后,在1.25~40μmol/L的所有浓度组(6个)中,HCT-116细胞的生长抑制率均显著高于对照组(P〈0.05)。另外,HCT-116细胞的生长抑制率随着阿托伐他汀浓度的升高而逐渐上升,相关分析显示,阿托伐他汀的浓度与HCT-116细胞的生长抑制率呈正相关(r[48 h]=0.13,r[96 h]=0.22,P〈0.05)。(3)NK细胞经阿托伐他汀作用96 h后,除浓度为20μmol/L和40μmol/L时抑制率高于对照组,其他各组对NK细胞生长无明显影响。(4)阿托伐他汀对NK细胞杀伤结肠癌细胞活性的影响:NK细胞对HCT-116细胞的杀伤活性在阿托伐他汀浓度2.5~10μmol/L组均显著高于对照组,对SW-480的杀伤活性在5~20μmol/L组较对照组明显升高,对Caco-2的杀伤活性在2.5~20μmol/L组显著高于对照组(P〈0.05),其中同一浓度时对HCT-116细胞杀伤作用最强。(5)阿托伐他汀对结肠癌细胞MICA/B表达的影响:在阿托伐他汀浓度2.5μmol/L及5μmol/L组,HCT-116细胞MICA/B的表达率与对照组比较显著升高(P〈0.05),在10μmol/L及20μmol/L组,SW-480细胞MICA/B表达率显著高于对照组(P〈0.05),在2.5~40μmol/L组,Caco-2细胞MICA/B的表达率均较对照组显著升高(P〈0.0 展开更多
关键词 阿托伐他汀 结肠癌细胞 NK细胞 MICA/B
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水飞蓟宾增强人CIK细胞杀伤胃癌细胞株BCG-823的体外研究 被引量:1
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作者 吕小婷 刘军权 +5 位作者 陈复兴 徐晶 孙蕾清 郑璐 周忠海 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期7-13,共7页
为探讨水飞蓟宾对人CIK细胞杀伤胃癌细胞株BCG-823的影响及作用机制,分离健康志愿者外周血单个核细胞,体外诱导培养成人CIK细胞;收集培养扩增7d的CIK细胞,将其用不同浓度的水飞蓟宾诱导24h、48h、72h,CCK-8法检测其增殖情况;流式细胞术... 为探讨水飞蓟宾对人CIK细胞杀伤胃癌细胞株BCG-823的影响及作用机制,分离健康志愿者外周血单个核细胞,体外诱导培养成人CIK细胞;收集培养扩增7d的CIK细胞,将其用不同浓度的水飞蓟宾诱导24h、48h、72h,CCK-8法检测其增殖情况;流式细胞术检测CIK细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a和IFN-γ的表达变化及水飞蓟宾对其凋亡的影响;LDH法检测CIK细胞对胃癌细胞株BCG-823的杀伤活性。结果显示,与对照组相比,浓度为(1.6~50)μg/mL的水飞蓟宾作用CIK细胞72h后,增殖率较对照组显著增加(P〈0.05);穿孔素、颗粒酶B、CD107a和IFN-γ的表达以及活细胞率均不同程度增加(P〈0.05);且对胃癌细胞BGC-823的杀伤活性显著增强(P〈0.05)。以上实验结果提示一定浓度的水飞蓟宾对CIK细胞有促增殖作用,且能增强其对胃癌细胞株BCG-823的杀伤活性。 展开更多
关键词 CIK细胞 水飞蓟宾 杀伤活性 免疫治疗
紫草素诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的探讨 被引量:1
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作者 永强 郑璐 +5 位作者 刘军权 周燏 曹希亮 周忠海 陈复兴 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第16期159-162,共4页
目的:研究紫草素诱导人前列腺癌细胞(PC-3)凋亡及其作用机制。方法:以PC-3细胞为研究对象,以不同浓度的紫草素处理PC-3细胞,另设空白组,处理不同时间后,分别采用噻唑蓝(MTT)法检测紫草素对PC-3细胞增殖抑制情况;显微镜观察细胞形... 目的:研究紫草素诱导人前列腺癌细胞(PC-3)凋亡及其作用机制。方法:以PC-3细胞为研究对象,以不同浓度的紫草素处理PC-3细胞,另设空白组,处理不同时间后,分别采用噻唑蓝(MTT)法检测紫草素对PC-3细胞增殖抑制情况;显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和磷酸化-细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达。结果:不同浓度的紫草素对PC-3细胞的生长抑制呈时间和剂量依赖性;形态学观察结果显示紫草素作用PC-3细胞后可使细胞变圆,脱落,皱缩,细胞内出现空泡,周围出现凋亡小体;与空白组比较,不同浓度的紫草素明显升高Caspase-3和Bax蛋白的表达,明显降低Bcl-2蛋白的表达,不同浓度的紫草素作用细胞48 h后可诱导细胞产生ROS,ROS清除剂二硫苏糖醇(DTT)可以明显逆转紫草素诱导的PC-3细胞的生长抑制率,且0.2 mmol·L-1DTT可以抑制由紫草素诱导的Caspase-3和ERK1/2的活化。结论:紫草素通过ROS/ERK1/2信号通路诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 紫草素 人前列腺癌PC-3细胞 活性氧 细胞凋亡
TWS119对人NK细胞增殖和杀伤甲状腺癌BCPAP细胞的影响 预览 被引量:2
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作者 王海 郑璐 +3 位作者 汤新星 永强 周忠海 陈复兴 《标记免疫分析与临床》 CAS 2016年第5期562-566,共5页
目的探讨糖原合酶激酶-3β抑制剂TWS119对NK细胞增殖和杀伤功能的影响。方法从健康人外周血中分离单个核细胞(PBMCs),加入到NK完全培养基培养,分别于第1d和第7d时,加入TWS119(0~8.0μmol/L)诱导培养。培养10 d后,用CCK-8法测定NK细... 目的探讨糖原合酶激酶-3β抑制剂TWS119对NK细胞增殖和杀伤功能的影响。方法从健康人外周血中分离单个核细胞(PBMCs),加入到NK完全培养基培养,分别于第1d和第7d时,加入TWS119(0~8.0μmol/L)诱导培养。培养10 d后,用CCK-8法测定NK细胞增殖和杀伤甲状腺癌BCPAP细胞的能力;采用流式细胞术检测各组NK细胞纯度、颗粒酶和穿孔素的表达。结果培养10d后,第1天加入TWS119诱导组对NK细胞纯度和增殖呈现抑制作用;而第7天加入在一定浓度范围的TWS119诱导培养时能促进NK细胞的增殖和杀伤指标穿孔素的表达及对甲状腺癌BCPAP细胞的体外杀伤活性。结论 TWS119在一定浓度范围能促进γδT细胞增殖和增强对甲状腺癌BCPAP细胞的杀伤功能。 展开更多
关键词 NK细胞 TWS119 细胞增殖 BCPAP细胞 穿孔素
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阿托伐他汀对人NK细胞杀伤HCT-116细胞的影响及其机制研究 被引量:2
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作者 姬会春 周燏 +3 位作者 刘军权 陈复兴 李昳 费素娟 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2016年第3期304-307,共4页
目的探讨阿托伐他汀对人自然杀伤细胞(natural killer,NK)杀伤HCT-116细胞的影响及其机制。方法 CCK-8法测定不同浓度的阿托伐他汀对HCT-116细胞生长抑制率的影响。自动生化分析仪测NK细胞对HCT-116细胞的杀伤活性;流式细胞仪(FCM)... 目的探讨阿托伐他汀对人自然杀伤细胞(natural killer,NK)杀伤HCT-116细胞的影响及其机制。方法 CCK-8法测定不同浓度的阿托伐他汀对HCT-116细胞生长抑制率的影响。自动生化分析仪测NK细胞对HCT-116细胞的杀伤活性;流式细胞仪(FCM)检测HCT-116细胞MICA/B的表达率。结果不同浓度的阿托伐他汀作用于HCT-116细胞48 h后在浓度为5~40μmol/L及作用96 h后在浓度为1.25~40μmol/L时,对HCT-116细胞的生长抑制率与对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。阿托伐他汀浓度相同时,HCT-116细胞的生长抑制率在48 h组与96 h组相比,除5μmol/L浓度组外差异均有统计学意义(P〈0.05)。阿托伐他汀的浓度与HCT-116细胞的生长抑制率呈正相关(r[48 h]=0.13,r[96 h]=0.22,P〈0.05)。NK细胞对HCT-116细胞的杀伤活性在阿托伐他汀浓度为2.5~10μmol/L各组中均显著高于对照组(P〈0.05)。2.5μmol/L浓度组及5μmol/L浓度组,HCT-116细胞MICA/B的表达率与对照组比较显著升高(P〈0.05)。结论阿托伐他汀呈剂量依赖性抑制HCT-116细胞的生长,且延长作用时间可以增强阿托伐他汀对HCT-116细胞生长的抑制作用;还能够增强NK细胞对HCT-116杀伤活性;以及上调HCT-116细胞MICA/B的表达率,提高其免疫原性。 展开更多
关键词 阿托伐他汀 HCT-116细胞 自然杀伤细胞 MICA/B
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外来人员综合服务管理系统的研究与设计 预览
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作者 陈复兴 《科技创新与应用》 2016年第9期1-3,共3页
在中国,许多城市拥有大量的外来人员,他们是社会、经济和文化创新的重要源泉,如何服务好、管理好这些外来人员,是一二线城市的当务之急。传统的城市流动人员管理模式已经不能满足现代治理的需要,文章介绍了外来人员综合服务管理系统的... 在中国,许多城市拥有大量的外来人员,他们是社会、经济和文化创新的重要源泉,如何服务好、管理好这些外来人员,是一二线城市的当务之急。传统的城市流动人员管理模式已经不能满足现代治理的需要,文章介绍了外来人员综合服务管理系统的总体框架和主要功能。 展开更多
关键词 外来人员 服务管理 信息采集 房屋管理 工作提醒 数据质量 区划调整
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2-脱氧葡萄糖对体外培养人γδT细胞CCR5表达及杀伤功能影响 预览
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作者 郑璐 永强 +6 位作者 刘军权 吕小婷 张娟 孙蕾清 徐晶 周忠海 陈复兴 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期29-32,共4页
目的:观察糖基化抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对γδT细胞增殖、趋化因子受体CCR5和杀伤功能的影响。方法:从健康人外周血中分离单个核细胞,加入到γδT细胞完全培养基培养获得γδT细胞。用不同浓度的2-DG诱导培养... 目的:观察糖基化抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对γδT细胞增殖、趋化因子受体CCR5和杀伤功能的影响。方法:从健康人外周血中分离单个核细胞,加入到γδT细胞完全培养基培养获得γδT细胞。用不同浓度的2-DG诱导培养γδT细胞48 h后,用CCK-8法测定不同浓度2-DG组的γδT细胞增殖和杀伤能力;用流式细胞术检测γδT细胞CCR5的表达和杀伤功能指标的影响。结果:培养10 d后的γδT细胞纯度达到(88.18±3.41)%。2-DG浓度在0~1.0 mmol/L时对γδT细胞的增殖影响不明显,而当浓度大于1.0 mmol/L后能显著抑制γδT细胞的增殖。2-DG浓度在0~2.0 mmol/L范围内能促进CCR5的表达,且在0.5和1.0 mmol/L时能促进杀伤指标CD107a和穿孔素的表达及对结肠癌HCT116细胞的杀伤能力。结论:2-DG能促进γδT细胞表面趋化因子受体CCR5的表达,且在一定浓度范围内能提高γδT细胞的体外杀伤功能。 展开更多
关键词 2-DG ΓΔT细胞 CCR5 杀伤功能
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国企统一人力资源管理的信息化研究 预览
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作者 陈复兴 《信息与电脑》 2016年第4期94-97,99共5页
本文主要从大型国有企业的角度出发,介绍如何构建具备国企特色的、技术先进性的、统一规范的人力资源管理信息系统,描述系统的总体技术框架,并对主要的应用功能进行相关说明,重点介绍具备国企特色的干部管理、用工管理等。
关键词 国有企业 人力资源 干部 用工 员工绩效 员工关怀
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胃癌患者外周血Vδ2~+γδT细胞及其细胞因子的水平变化 被引量:1
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作者 仲芹芹 吕小婷 +2 位作者 刘军权 陈复兴 费素娟 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2016年第2期188-192,共5页
目的研究胃癌患者外周血Vδ2+γδT细胞及其细胞因子的变化情况,并探讨其临床意义。方法分离胃癌患者及正常人外周血单个核细胞(PBMC),采用多种荧光标记抗体标记细胞表面分子,流式细胞术分析Vδ2+γδT型细胞及其干扰素γ(IFN-γ... 目的研究胃癌患者外周血Vδ2+γδT细胞及其细胞因子的变化情况,并探讨其临床意义。方法分离胃癌患者及正常人外周血单个核细胞(PBMC),采用多种荧光标记抗体标记细胞表面分子,流式细胞术分析Vδ2+γδT型细胞及其干扰素γ(IFN-γ)、白介素17A(IL-17A)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况。结果胃癌患者外周血的Vδ2+γδT细胞比例与对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。Vδ2+γδT细胞中分泌IL-17A的细胞比例为(5.26±2.50)%,明显高于对照组(3.48±1.76)%(P〈0.05)。胃癌组外周血IFN-γ+Vδ2+γδT细胞与TNF-α+Vδ2+γδT细胞比例分别为(46.24±20.01)%、(43.78±19.85)%,与对照组(60.10±20.75)%、(54.67±19.02)%比较显著降低(P〈0.05)。结论胃癌患者外周血中分泌IFN-γ和TNF-α的Vδ2+γδT细胞比例显著减少,而分泌IL-17A的Vδ2+γδT细胞显著增加。提示上述三种细胞因子的分泌异常可能与胃癌的发生、发展有关。 展开更多
关键词 胃癌 Vδ2+γδT细胞 IFN-Γ 白介素-17A 肿瘤坏死因子Α
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TWS119通过抑制STAT3磷酸化促进γδT细胞CCR5的表达 预览
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作者 徐晶 孙蕾清 +5 位作者 永强 郑璐 吕小婷 陈复兴 刘军权 周忠海 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期825-827,837共4页
目的:研究糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)促进γδT细胞趋化因子受体CCR5表达的分子机制。方法:用TWS119诱导从健康人外周血中分离培养获得γδT细胞48 h后,用流式细胞仪检测γδT细胞CCR5的表达;Western blo... 目的:研究糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)促进γδT细胞趋化因子受体CCR5表达的分子机制。方法:用TWS119诱导从健康人外周血中分离培养获得γδT细胞48 h后,用流式细胞仪检测γδT细胞CCR5的表达;Western blot检测GAPDH和p-STAT3的表达。结果:培养10 d后的γδT细胞纯度达到85.79%±5.01%。TWS119浓度在0~8.0μmol/L范围内能显著促进趋化因子受体CCR5的表达,且剂量依赖性抑制STAT3的磷酸化。同时,用STAT3磷酸化抑制剂Stattic(0.5μmol/L)预处理γδT细胞也可以促进CCR5的表达,并能协同增强TWS119促进趋化因子受体CCR5的表达。结论:TWS119通过抑制STAT3磷酸化促进γδT细胞CCR5的表达。 展开更多
关键词 TWS119 CCR5 ΓΔT细胞 STAT3
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TWS119对人胃癌SGC-7901细胞和γδT细胞活性影响及机制研究 被引量:2
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作者 永强 郑璐 +5 位作者 刘军权 吕小婷 孙蕾清 徐晶 周忠海 陈复兴 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期373-378,共6页
目的研究糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)体外抗肿瘤活性和对人-/ST细胞活性的影响。方法用不同浓度的4,6-二取代吡咯并嘧啶分别作用于人胃癌SGC-7901细胞和18T细胞24、48和72h后,用CCK-8法测定4,6-二取代... 目的研究糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)体外抗肿瘤活性和对人-/ST细胞活性的影响。方法用不同浓度的4,6-二取代吡咯并嘧啶分别作用于人胃癌SGC-7901细胞和18T细胞24、48和72h后,用CCK-8法测定4,6-二取代吡咯并嘧啶对人胃癌SGC-7901细胞和γδT细胞增殖的影响及γδT细胞对SGC-7901细胞杀伤能力;流式细胞术分析4,6-二取代吡咯并嘧啶对SGC-7901细胞凋亡的影响,Westernblot检测4,6.二取代吡咯并嘧啶对Bcl-2、p-STAT3和p-ERK1/2表达的影响。结果0~8.0μmol·L-14,6-二取代吡咯并嘧啶能抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长并诱导其凋亡,抑制Bcl-2的表达,促进P—ERK1/2和p-STAT3的表达。而在γδT细胞中,4,6-二取代吡咯并嘧啶在0~4.0μmol·L-1时能促进其增殖和对SGC-7901细胞的体外杀伤活性,促进Bcl-2的表达,抑制P—ERK1/2和p-STAT3的表达。结论一定浓度的4,6-二取代吡咯并嘧啶能抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖并诱导其凋亡,同时能促进γδT细胞增殖和对SGC-7901细胞的杀伤活性,其机制可能与4,6-二取代吡咯并嘧啶激活Wnt信号传导通路及其对P—ERK1/2、Bcl-2和P-STAT3表达的影响有关。 展开更多
关键词 4 6-二取代吡咯并嘧啶 ΓΔT细胞 SGC-7901 细胞增殖 凋亡
帕米膦酸二钠与唑来膦酸对体外培养人γδT细胞的杀伤功能影响比较 被引量:1
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作者 吕小婷 +5 位作者 陈复兴 刘军权 郑璐 徐晶 孙蕾清 周忠海 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1039-1042,共4页
目的比较帕米膦酸二钠与唑来膦酸体外培养人γδT细胞的杀伤功能。方法用帕米膦酸二钠与唑来膦酸分别扩增人外周血γδT细胞。用CCK-8检测细胞增殖情况;第10天流式细胞术检测帕米膦酸二钠与唑来膦酸培养的γδT细胞的穿孔素、颗粒酶B、C... 目的比较帕米膦酸二钠与唑来膦酸体外培养人γδT细胞的杀伤功能。方法用帕米膦酸二钠与唑来膦酸分别扩增人外周血γδT细胞。用CCK-8检测细胞增殖情况;第10天流式细胞术检测帕米膦酸二钠与唑来膦酸培养的γδT细胞的穿孔素、颗粒酶B、CD107a和CD178的表达情况。CCK8法检测诱导后γδT细胞对肺癌细胞株A549、胃癌细胞株SGC-7901、胰腺癌细胞株SW-1990的杀伤活性。结果帕米膦酸二钠较唑来膦酸组(P〈0.05)能明显提高γδT细胞的表达。唑来膦酸组在γδT细胞颗粒酶、CD107a和CD178表达明显高于帕米膦酸二钠组,但是穿孔素的表达无显著性差别(P〉0.05)。结论唑来膦酸培养的γδT细胞一些功能表达明显表面高于帕米膦酸二钠组。但在效靶比低于20∶1时,二者培养的γδT细胞对A549、SGC-7901、Sw-1990的杀伤活性上无明显差异(P〉0.05)。当效靶比高于20∶1时,唑来膦酸组的杀伤活性高于帕米膦酸二钠组(P〈0.05)。 展开更多
关键词 帕米膦酸二钠 唑来膦酸 ΓΔT细胞 杀伤功能
细胞外信号调节激酶1/2通路抑制剂PD98059对体外培养γδT细胞增殖和杀伤功能的影响 预览
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作者 孙蕾清 徐晶 +5 位作者 永强 郑璐 吕小婷 刘军权 陈复兴 周忠海 《临床肝胆病杂志》 CAS 2016年第7期1388-1391,共4页
目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)1/2信号通路抑制剂PD98059对体外培养人γδT细胞增殖和杀伤功能的影响。方法从健康人外周血中分离单个核细胞,加入到含有唑来膦酸和白细胞介素2的RPMI 1640完全培养基中诱导培养获得γδT细胞。用ERK... 目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)1/2信号通路抑制剂PD98059对体外培养人γδT细胞增殖和杀伤功能的影响。方法从健康人外周血中分离单个核细胞,加入到含有唑来膦酸和白细胞介素2的RPMI 1640完全培养基中诱导培养获得γδT细胞。用ERK1/2特异性抑制剂PD98059阻断γδT细胞ERK1/2信号通路后,用细胞计数仪测定γδT细胞增殖和细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定杀伤能力;采用流式细胞术检测γδT细胞颗粒酶B和穿孔素的表达。计量资料组间比较采用t检验。结果培养10 d后的γδT细胞纯度达到(87.94±2.36)%。PD98059作用后的γδT细胞数低于对照组[(6.74±0.36)×10^5/ml vs(9.42±0.31)×10^5/ml],而PD98059作用后γδT细胞颗粒酶B阳性表达率[(48.89±1.31)%vs(41.58±1.58)%]、穿孔素阳性表达率[(65.92±3.29)%vs(33.49±2.83)%]、对肝癌Hep G2细胞的杀伤率[(69.28±4.96)%vs(48.34±3.01)%]均高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为-12.708、7.582、15.478、11.201,P值均〈0.001)。结论 ERK1/2特异性抑制剂PD98059阻断ERK1/2信号通路能抑制γδT细胞的增殖,但能增强γδT细胞的体外杀伤功能。 展开更多
关键词 细胞外信号调节MAP激酶类 蛋白激酶抑制剂 受体 抗原 T细胞 γ-δ 细胞增殖
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辣椒素对人γδT细胞杀伤人骨肉瘤HOS细胞的影响 被引量:1
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作者 冯晖 郭开今 +4 位作者 冯虎 吕小婷 周忠海 陈复兴 袁峰 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期314-318,共5页
探讨辣椒素对人γδT细胞体外增殖及杀伤骨肉瘤细胞的影响及作用机制。分离健康人PBMC,加入到含异戊烯焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate,IPP)和IL-2的DMEM-F12完全培养基中诱导培养γδT细胞。不同浓度的辣椒素作用于γδT细胞48h... 探讨辣椒素对人γδT细胞体外增殖及杀伤骨肉瘤细胞的影响及作用机制。分离健康人PBMC,加入到含异戊烯焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate,IPP)和IL-2的DMEM-F12完全培养基中诱导培养γδT细胞。不同浓度的辣椒素作用于γδT细胞48h后,CCK-8法检测各药物浓度组γδT细胞的增殖能力,采用流式细胞术检测各组γδT细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a及IFN-γ的表达,用LDH释放法检测各组γδT细胞对骨肉瘤HOS细胞的体外杀伤活性。结果显示,培养7d时各组帕T细胞纯度达到了(85.33±6.07)%。浓度为3.2~50μmol/L的辣椒素能显著促进帕T细胞的增殖,在浓度为25μmol/I。时其穿孔素、颗粒酶B、CD107a及IFN-γ的表达均显著高于对照组,且对人骨肉瘤HOS细胞的体外杀伤活性显著增强。以上结果提示辣椒素在体外能通过促进γδT细胞穿孔素、颗粒酶B和IFN-γ的表达上调显著增强其抗骨肉瘤细胞活性。 展开更多
关键词 辣椒素 ΓΔT细胞 增殖 细胞毒活性 骨肉瘤
结直肠癌患者外周血Vδ2 T细胞IL-17A的表达研究1 预览 被引量:2
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作者 韩春 陈复兴 +2 位作者 吕小婷 刘军权 费素娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期942-946,共5页
目的:比较结直肠癌患者与正常人外周血单个核细胞来源的Vδ2 T细胞CD27、IL-17A、IFN-γ和TNF-α的表达变化。方法:抽取试验对象外周血,分离单个核细胞,采用流式细胞术分析其中CD27+Vδ2 T细胞与CD27-Vδ2 T细胞的IL-17A、IFN-γ和T... 目的:比较结直肠癌患者与正常人外周血单个核细胞来源的Vδ2 T细胞CD27、IL-17A、IFN-γ和TNF-α的表达变化。方法:抽取试验对象外周血,分离单个核细胞,采用流式细胞术分析其中CD27+Vδ2 T细胞与CD27-Vδ2 T细胞的IL-17A、IFN-γ和TNF-α的分泌表达情况。结果:结直肠癌患者外周血Vδ2 T细胞的IL-17A表达明显高于正常人[(5.99±0.80)%比(3.48±0.57)%,P=0.01;]IFN-γ与TNF-α的分泌表达具有明显正相关性(P〈0.0001)。结直肠癌患者和正常人CD27+Vδ2 T细胞的IL-17A表达均较CD27-Vδ2 T细胞低,而CD27+Vδ2 T细胞的IFN-γ和TNF-α分泌表达则高于CD27-Vδ2 T细胞。结论:结直肠癌患者Vδ2 T细胞的IL-17A表达是升高的,而IFN-γ与TNF-α的分泌表达之间具有显著正相关性;共刺激受体CD27影响VδT细胞的功能表达。 展开更多
关键词 结直肠癌 γδ T细胞 CD27 IL-17A
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