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水杨酸调控内源H2S缓解黑大豆铝胁迫的作用机理研究 预览
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作者 滕建晒 +1 位作者 彭亮 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期121-130,共10页
该研究以铝(Al)敏感型黑大豆(SB)根为实验材料,通过一系列生理生化和组织化学实验手段,探讨了水杨酸(SA)通过调控内源H2S信号缓解铝胁迫的作用方式。结果表明:(1)AlCl3处理黑大豆SB根系Al积累增加,AlCl3与SA共处理能明显抑制Al在SB根系... 该研究以铝(Al)敏感型黑大豆(SB)根为实验材料,通过一系列生理生化和组织化学实验手段,探讨了水杨酸(SA)通过调控内源H2S信号缓解铝胁迫的作用方式。结果表明:(1)AlCl3处理黑大豆SB根系Al积累增加,AlCl3与SA共处理能明显抑制Al在SB根系的累积,加入H2S清除剂(HT)或H2S合成抑制剂(PAG)后SB根系Al累积量增加。(2)SA使Al胁迫下黑大豆(SB)根内源H2S水平增加1.5倍,并显著缓解Al胁迫导致的根生长抑制、活性氧(ROS)累积、氧化损伤和细胞死亡,共处理HT或PAG均能够显著降低内源H2S水平,并可逆转上述所有SA对Al胁迫的缓解效应。(3)SA降低了Al胁迫下黑大豆(SB)根尖抗氧化酶CAT、SOD和APX活性,抑制SB根系细胞ROS的产生,用HT或PAG抑制H2S信号可增强抗氧化酶活性。(4)在Al胁迫条件下,SA可进一步上调一系列耐Al基因的表达,包括外部解毒机制中的耐铝转录因子GmART1、柠檬酸合成酶基因GmCS、柠檬酸转运蛋白基因GmMATE,内部解毒机制中的苹果酸转运蛋白基因GmAlCT以及Al^3+相关转运蛋白基因GmAlS1和GmNIP1;2,通过HT或PAG降低内源H2S水平可逆转SA对上述基因表达的调控。(5)SA可提高Al胁迫下黑大豆(SB)根柠檬酸的分泌量,此效应亦可被HT或PAG抑制。研究发现,H2S可作为SA的下游信号参与调控黑大豆(SB)响应Al胁迫的过程,为揭示植物Al耐受信号调控网络途径提供部分新的理论基础。 展开更多
关键词 黑大豆(SB) 铝胁迫 水杨酸 硫化氢 活性氧 耐铝基因
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水杨酸调控敏感型黑大豆抗铝性研究
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作者 李芳 滕建晒 +3 位作者 彭亮 于丽娟 《昆明理工大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2018年第4期83-92,共10页
抗性作物品种中水杨酸(salicylic acid,SA)信号与铝(aluminum,Al)抗性相关,但对于SA调控敏感作物抗Al胁迫的能力还有待评估和研究.本实验选用云南本地Al敏感型黑大豆根系为材料,研究了SA对Al胁迫下根内生理生化的调控作用,结果显示... 抗性作物品种中水杨酸(salicylic acid,SA)信号与铝(aluminum,Al)抗性相关,但对于SA调控敏感作物抗Al胁迫的能力还有待评估和研究.本实验选用云南本地Al敏感型黑大豆根系为材料,研究了SA对Al胁迫下根内生理生化的调控作用,结果显示:(1)Al Cl3处理抑制根生长并呈现浓度效应,30μM Al Cl3处理可导致中等程度的抑制效应;(2)100μM SA处理可最大程度地缓解Al Cl3(30μM)对根长的抑制效应;(3)SA显著抑制Al胁迫下根尖内Al的累积、丙二醛含量、细胞死亡、活性氧累积(包括过氧化氢和超氧阴离子);(4)Al胁迫下根尖内一系列抗氧化酶基因(Cu-Zn SOD1、Cu-Zn SOD2、Cu-Zn SOD3、CAT3、CAT4、CAT5、PRX2B、PRX4)的表达维持不变或轻微上调,而加入SA后则大幅度上调了这些基因的表达水平;(5)聚类分析结果显示,SA能够逆转Al胁迫对伤害性生理指标的刺激效应;SA调控下Al损伤途径与Al抗性途径呈现负相关性.上述揭示出SA具备显著提升Al敏感型黑大豆抵抗Al胁迫的能力,这与其高效激活抗氧化系统密切相关.这为Al污染地区常规栽培品种的安全生产调控提供了一定的科学依据. 展开更多
关键词 水杨酸 铝胁迫 敏感型黑大豆 抗氧化物酶系统
水红木的化学成分及抗氧化活性研究
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作者 郑慧 张璐 +3 位作者 全丽秋 李建春 李从文 《昆明理工大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2018年第2期79-87,共9页
采用Sephadex-LH20、RP-18、MCI和反相高效液相等多种色谱分离方法,从水红木(Viburnum cylindricum)枝叶的纯甲醇提取物中共分离得到20个已知化合物.根据理化性质,应用NMR和MS等波谱技术并结合参考文献,这些化合物分别鉴定为:1,3,6-... 采用Sephadex-LH20、RP-18、MCI和反相高效液相等多种色谱分离方法,从水红木(Viburnum cylindricum)枝叶的纯甲醇提取物中共分离得到20个已知化合物.根据理化性质,应用NMR和MS等波谱技术并结合参考文献,这些化合物分别鉴定为:1,3,6-三羟基-8-甲基蒽醌(1),山柰酚(2),山柰酚-3-O-β-D-半乳糖苷(3),3,5,3',4'-四羟基-7-甲氧基黄酮(4),香橙素(5),间苯三酚甲醚(6),4-羟基苯甲酸(7),2-甲氧基间苯三酚(8),3,4-二羟基苯甲酸(9),对羟基桂皮酸(10),(E)-4-甲氧基肉桂醛(11),8-(β-D-吡喃葡萄糖基氧基)-9-羟基萘并[2,3-c]呋喃-1(3H)-酮(12),葡萄糖(13),橄榄脂素(14),落叶松树脂醇(15),七叶内酯(16),去氢二异丁香酚(17),(7S,8R)-4,5,9,9-四羟基-3-甲氧基-7,8-二氢苯并呋喃-1'-丙醇基新木脂素(18),丁香树脂醇(19),开环异落叶松树脂酚(20).其中化合物1,6-12和14首次从该植物中分离得到.采用DPPH法对化合物1-12和14-20进行了抗氧化活性评价,发现化合物1和6-11具有显著的抗氧化活性(EC50范围:1.6-22.5 mg/L). 展开更多
关键词 水红木 荚蒾属 化学成分 抗氧化
14-3-3蛋白参与植物应答非生物胁迫的研究进展 预览
4
作者 李芳 滕建晒 《植物科学学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期459-469,共11页
14-3-3蛋白是一种在真核生物细胞中普遍存在且高度保守的蛋白。该蛋白在大多数物种中由一个基因家族编码,并以同源或异源二聚体的形式存在。不同的14-3-3蛋白同工型具有不同的细胞特异性,可通过识别特异的磷酸化或非磷酸化序列与靶蛋白... 14-3-3蛋白是一种在真核生物细胞中普遍存在且高度保守的蛋白。该蛋白在大多数物种中由一个基因家族编码,并以同源或异源二聚体的形式存在。不同的14-3-3蛋白同工型具有不同的细胞特异性,可通过识别特异的磷酸化或非磷酸化序列与靶蛋白相互作用。14-3-3蛋白在植物生长和发育的各个方面都起重要作用。本文主要围绕植物14-3-3蛋白的种类、结构、磷酸化或非磷酸化识别序列及其响应干旱、冷冻、盐碱、营养和机械胁迫等的分子机制研究进展进行综述。 展开更多
关键词 14-3-3蛋白 结构 非生物胁迫
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苦参中的喹诺里西啶类生物碱成分研究
5
作者 赵得瑞 薛永 +3 位作者 刘丹 李蓉涛 李洪梅 《昆明理工大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2018年第4期93-97,共5页
利用硅胶、羟丙基葡聚糖凝胶和MCI等多种分离材料和手段,从苦参(Sophora flavescens Ait.)根的纯甲醇提取物中共分离鉴定了9个喹诺里西啶类生物碱成分,分别为:苦参碱(1),槐果碱(2),槐定碱(3),槐醇(4),17β-羟基槐定碱(5),... 利用硅胶、羟丙基葡聚糖凝胶和MCI等多种分离材料和手段,从苦参(Sophora flavescens Ait.)根的纯甲醇提取物中共分离鉴定了9个喹诺里西啶类生物碱成分,分别为:苦参碱(1),槐果碱(2),槐定碱(3),槐醇(4),17β-羟基槐定碱(5),(+)-9α-羟基苦参碱(6),氧化苦参碱(7),氧化槐果碱(8)和臭豆碱(9).其中,化合物1~8为苦参碱型,化合物9为金雀花碱型.同时,对化合物1~9进行了体外抗流感病毒活性筛选. 展开更多
关键词 苦参 槐属 结构鉴定 喹诺里西啶生物碱 抗流感病毒活性
金刚纂二萜类成分研究
6
作者 颜世利 李艳红 +1 位作者 李蓉涛 《中草药》 CSCD 北大核心 2017年第18期3699-3704,共6页
目的研究有毒药用植物金刚纂Euphorbia neriifolia茎皮的二萜类化学成分及其抗HIV-1活性。方法利用硅胶、ODS、MCI CHP-20P、Sephadex LH-20等柱色谱和高效液相色谱技术进行系统分离,通过理化性质和NMR、MS波谱数据鉴定化合物结构;采用H... 目的研究有毒药用植物金刚纂Euphorbia neriifolia茎皮的二萜类化学成分及其抗HIV-1活性。方法利用硅胶、ODS、MCI CHP-20P、Sephadex LH-20等柱色谱和高效液相色谱技术进行系统分离,通过理化性质和NMR、MS波谱数据鉴定化合物结构;采用HIV-1病毒株NL4-3感染的人淋巴MT-4细胞作为细胞检测模型对所得化合物进行抗HIV-1活性测试。结果从金刚纂茎皮的丙酮水提取物的醋酸乙酯萃取部分分离得到9个二萜类化合物,分别被鉴定为12α-乙酰氧基-3β,7α-二羟基-8α-甲氧基续随子烷(1)、3β,8α,12α-三乙酰氧基-7α-苯甲酰氧基续随子烷(2)、3β,8α,12α-三乙酰氧基-7α-巴豆酰氧基续随子烷(3)、对映-3-氧代阿替生烷-16α,17-缩丙酮(4)、13β-羟基-3,15-二氧代阿替生烷-16-烯(5)、对映-3β,(13S)-二羟基阿替生烷-16-烯-14-酮(6)、3β,13(S)-二羟基阿替生烷-16-烯-14-酮(7)、对映-(13S),18-二羟基阿替生烷-16-烯-3,14-二酮(8)、4,13β-二羟基-14-氧代-3,4-开环阿替生烷-16-烯-3-酸甲酯(9)。结论化合物1为新天然产物,化合物2~4、6~8为首次从该植物中分离得到,药理实验结果表明化合物4具有一定的抗HIV-1活性,EC50为8.7μg/m L(SI=1.92)。 展开更多
关键词 金刚纂 续随子烷型二萜 阿替生烷型二萜 12α-乙酰氧基-3β 7α-二羟基-8α-甲氧基续随子烷 抗HIV-1活性
外源绿原酸缓解黑大豆SB铝毒害的机理研究 预览
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作者 江晓洁 李芳 +1 位作者 王闻闻 《广西植物》 CSCD 北大核心 2017年第6期734-741,805共9页
该文研究了外源绿原酸(CGA)对Al胁迫下铝敏感型黑大豆SB根生理生化指标以及根中胁迫相关基因表达的变化,探讨外源CGA缓解SB根铝毒害的效果及分子机理。以不同浓度Al和CGA处理SB,筛选出CGA缓解Al毒害的最佳浓度,测定Al含量、抗氧化系... 该文研究了外源绿原酸(CGA)对Al胁迫下铝敏感型黑大豆SB根生理生化指标以及根中胁迫相关基因表达的变化,探讨外源CGA缓解SB根铝毒害的效果及分子机理。以不同浓度Al和CGA处理SB,筛选出CGA缓解Al毒害的最佳浓度,测定Al含量、抗氧化系统酶活性、14-3-3蛋白与H+-ATP酶的表达、H+泵活性。结果表明:低浓度CGA能缓解Al胁迫下黑大豆SB根伸长抑制,并促进侧根数目增加,而高浓度CGA的缓解效果下降;0.01 g·L-1 CGA使Al胁迫下SB根尖Al含量与MDA含量下降,促进根系柠檬酸的分泌。RTPCR和Western Bloting分析表明0.01 g·L-1 CGA促进Al胁迫下SB根中14-3-3b、14-3-3m、14-3-3k和GHA2基因(质膜H+-ATP酶)的表达,抑制MATE基因的表达。同时,0.01 g·L-1 CGA能促进Al胁迫下质膜H+-ATP酶蛋白磷酸化水平以及其与14-3-3蛋白结合,且能提高质膜H+-ATP酶和H+泵活性。因此推测外源CGA可能通过增加侧根数,增强14-3-3蛋白和质膜H+-ATP酶基因蛋白表达水平和互作,弥补Al胁迫下MATE表达的抑制,增加柠檬酸的分泌,增强SB对铝毒害的耐受性。 展开更多
关键词 黑大豆SB 绿原酸 柠檬酸 14-3-3蛋白 H+-ATPase Al胁迫
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安宁滇红和紫枝玫瑰精油的出油率和香气成分分析 预览 被引量:1
8
作者 朱艳玲 赵雷 +1 位作者 杨雁 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2017年第11期299-304,共6页
采用水蒸汽蒸馏法从安宁八街滇红玫瑰和紫枝玫瑰中提取得到玫瑰精油,滇红玫瑰精油产率为0.125‰;紫枝玫瑰精油产率为0.185‰。两种玫瑰精油的物理性状基本一致。利用气相色谱-质谱联用(GC—MS)从滇红和紫枝玫瑰精油中分别鉴定出9... 采用水蒸汽蒸馏法从安宁八街滇红玫瑰和紫枝玫瑰中提取得到玫瑰精油,滇红玫瑰精油产率为0.125‰;紫枝玫瑰精油产率为0.185‰。两种玫瑰精油的物理性状基本一致。利用气相色谱-质谱联用(GC—MS)从滇红和紫枝玫瑰精油中分别鉴定出93个和65个组分。滇红玫瑰中各组分含量从高到低顺序为:烷烃〉酚〉酯〉烯烃〉醇〉酮〉醛酸。紫枝玫瑰中各成分含量从高到低为:烷烃〉醇〉醛〉烯烃〉酯〉酮〉酸。滇红和紫枝玫瑰精油的主要成分均为烷烃类,分别占总精油成分的47.600%和80.083%。滇红中甲基丁香酚的含量较高(18.584%),其作为食品添加香料具有较好的应用价值和潜力。 展开更多
关键词 滇红 紫枝玫瑰 精油 气相色谱-质谱
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采用PCR-DGGE技术研究处理农田退水组合人工湿地微生物群落特征 被引量:5
9
作者 吴文卫 刘昂 +5 位作者 谷照虎 徐慧妮 赵磊 丽梅 李昆志 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期978-985,共8页
以种植美人蕉和旱伞竹的复合垂直流人工湿地(MIL)系统的基质(分子筛、陶粒和碎石)及表流人工湿地的基质土壤为材料,采用PCR-DGGE技术研究处理农田退水的湿地中微生物群落结构的差异及其优势菌群.结果显示,MIL系统上行池中种植美人... 以种植美人蕉和旱伞竹的复合垂直流人工湿地(MIL)系统的基质(分子筛、陶粒和碎石)及表流人工湿地的基质土壤为材料,采用PCR-DGGE技术研究处理农田退水的湿地中微生物群落结构的差异及其优势菌群.结果显示,MIL系统上行池中种植美人蕉、旱伞竹和不种植物对照3个处理的表层水样和上层碎石基质以及表流人工湿地3个处理的基质土样的可操作分类单元OTU(Operation Taxonomy Unit)数目都比较多(12-14),说明其微生物种类较多,微生物多样性较高,其优势种群主要为Uncultured Xylella sp.、Uncultred bacterium以及Uncultured Tolumones sp.和Acidovorax;MIL系统上行池下层的陶粒和分子筛基质的OTU数目以对照和种植旱伞竹的较高(6-11),而种植美人蕉处理最少(4-5),呈现微生物种类少、微生物多样性较低的特点,其优势种群主要有Uncultured Xylella sp.、Uncutured soil bacterium和Uncultured Sphingomon adacsas.这些结果表明垂直复合湿地系统选择种植美人蕉能提高其下层基质还原性,降低细菌多样性,有利于硝态氮的还原去除. 展开更多
关键词 人工湿地 微生物多样性 变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE) 农田退水 美人蕉
铁皮石斛改善卷烟评吸品质的物质基础研究 被引量:1
10
作者 李丹丹 +3 位作者 赵得瑞 向伦理 刘丹 李蓉涛 《昆明理工大学学报:自然科学版》 CAS 2016年第5期100-105,共6页
以石香薷、野苏子、铁皮石斛、绿萝花、代代花、云红花6种植物作为材料,用乙酸乙酯或苯乙醇超声提取.减压回收溶剂后得到植物浸膏,用水、无水乙醇或三醋酸甘油酯溶解浸膏,制成0.01%的供试样品,添加到烟草中.通过双盲评吸,发现铁皮石斛... 以石香薷、野苏子、铁皮石斛、绿萝花、代代花、云红花6种植物作为材料,用乙酸乙酯或苯乙醇超声提取.减压回收溶剂后得到植物浸膏,用水、无水乙醇或三醋酸甘油酯溶解浸膏,制成0.01%的供试样品,添加到烟草中.通过双盲评吸,发现铁皮石斛能显著改善卷烟的评吸效果.利用GC-MS分析,从石斛的挥发油中共鉴定了23个化合物,包括脂肪酸类7个,酯类8个和其它成分8个,脂肪酸和酯类兮别占发现占挥发油总量的49.36%和21.28%,研究发现,天然的酯和脂肪酸很可能是石斛改善卷烟评吸感观的主要物质群,这为植物提取物在改善卷烟评吸品质中的应用提供了基础支撑. 展开更多
关键词 铁皮石斛 挥发性成分 卷烟 加香 GC-MS
气体信号分子H_2S在植物中的研究进展 被引量:10
11
作者 李顺 景举伟 +2 位作者 严金平 徐慧妮 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期579-585,共7页
硫化氢(hydrogen sulfi de,H2S)是继一氧化氮(nitric oxide,NO)和一氧化碳(carbon monoxide,CO)之后的第三个气体信号分子。近年来,人们对动物中H2S的内源性生成、生物学效应及其分子机制等方面进行了广泛研究,但H2S在植物中的研... 硫化氢(hydrogen sulfi de,H2S)是继一氧化氮(nitric oxide,NO)和一氧化碳(carbon monoxide,CO)之后的第三个气体信号分子。近年来,人们对动物中H2S的内源性生成、生物学效应及其分子机制等方面进行了广泛研究,但H2S在植物中的研究相对较少。本文综述了植物体内H2S的性质及存在方式、产生途径、在植物生长发育及非生物胁迫下的作用、与其他信号分子的互作等的最新研究进展。 展开更多
关键词 硫化氢 气体信号分子 植物 信号分子互作
外源H_2S对NO_3~-胁迫下番茄幼苗生理生化特性的影响 预览 被引量:4
12
作者 景举伟 李顺 +4 位作者 赵艳 白学贵 李昆志 徐慧妮 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1173-1181,共9页
采用营养液水培方法,通过外源施加H2S供体NaHS(100μmol/L),研究了信号分子H2S对100mmol/L NO3^-胁迫下番茄幼苗生理生化特性的影响。结果表明:(1)NO3^-胁迫下,随着处理时间的延长,番茄幼苗的株高、根长、鲜重和干重显著降低,叶绿... 采用营养液水培方法,通过外源施加H2S供体NaHS(100μmol/L),研究了信号分子H2S对100mmol/L NO3^-胁迫下番茄幼苗生理生化特性的影响。结果表明:(1)NO3^-胁迫下,随着处理时间的延长,番茄幼苗的株高、根长、鲜重和干重显著降低,叶绿素(a、b)含量、净光合速率、气孔导度、蒸腾速率均显著降低,而胞间CO2浓度以及丙二醛(MDA)、H2O2含量增加,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性显著降低,抗坏血酸(AsA)和还原性谷胱甘肽(GSH)含量显著降低。(2)与NO3^-胁迫处理相比,外源NaHS处理1、3、5d后,番茄幼苗的株高、根长、鲜重和干重显著增加,叶绿素(a、b)含量、净光合速率、气孔导度、蒸腾速率均显著升高,而胞间CO2浓度显著降低;MDA和H2O2含量降低,SOD、POD、CAT和APX活性显著增强,AsA和GSH含量显著增加,而且幼苗的硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸合酶的活性显著增强;L-半胱氨酸脱巯基酶活性和内源H2S含量增加。研究认为,外源H2S可能通过提高抗氧化物酶的活性和增加抗氧化物质含量来缓解NO3^-对番茄幼苗造成的伤害,从而增强其对NO3^-胁迫耐性。 展开更多
关键词 土壤次生盐渍化 硫化氢 光合特性 氮代谢 抗氧化物酶
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菠菜SoHb基因的原核表达及功能分析 被引量:1
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作者 郭兆来 白学贵 +3 位作者 严金平 李昆志 徐慧妮 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期54-59,共6页
为了进一步揭示菠菜非共生血红蛋白(SoHb)的功能,通过RT-PCR的方法从菠菜根中克隆了SoHb基因编码区全长序列,并将其克隆到原核表达载体pET32a上,构建原核表达载体pET32a-SoHb,并转化大肠杆菌BL21 star(DE3)获得原核表达工程菌株。通... 为了进一步揭示菠菜非共生血红蛋白(SoHb)的功能,通过RT-PCR的方法从菠菜根中克隆了SoHb基因编码区全长序列,并将其克隆到原核表达载体pET32a上,构建原核表达载体pET32a-SoHb,并转化大肠杆菌BL21 star(DE3)获得原核表达工程菌株。通过IPTG法诱导该重组质粒在大肠杆菌中得到高效表达,融合蛋白分子质量约为38 kDa,且在上清液和包涵体中均有表达,可溶性部分经Ni2+ NTA亲和柱纯化,获得纯化的融合蛋白。与空载体相比,重组菌对硝化胁迫的抗性增加。以纯化的融合蛋白为抗原免疫昆明小鼠,制备多克隆抗体,并对其进行了Western blot检测。实验结果为进一步研究菠菜SoHb基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 非共生血红蛋白 大肠杆菌表达 硝化胁迫
外源IAA增强丹波黑大豆抗铝性的生理机制 预览 被引量:2
14
作者 王平 东杰 +4 位作者 李昆志 丽梅 年洪娟 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期112-117,共6页
以铝耐受型丹波黑大豆(RB)幼苗为供试材料,考察了不同浓度铝胁迫下添加外源IAA对RB根尖内源IAA、H2O2、MDA、铝含量、柠檬酸分泌量以及质膜H^+-ATPase活性的影响,探讨外源IAA增强RB抗铝能力的生理机制。结果显示:(1)经25、50和... 以铝耐受型丹波黑大豆(RB)幼苗为供试材料,考察了不同浓度铝胁迫下添加外源IAA对RB根尖内源IAA、H2O2、MDA、铝含量、柠檬酸分泌量以及质膜H^+-ATPase活性的影响,探讨外源IAA增强RB抗铝能力的生理机制。结果显示:(1)经25、50和200μmol·L~AlCl3胁迫处理24h后,RB根尖IAA含量、柠檬酸分泌量和质膜HtATPase活性均表现为先上升后下降的趋势,而HzOz、MDA和根尖铝含量却随着铝处理浓度的增加呈显著上升趋势。(2)与单独25、50和200μmol·L^-1AlCl3胁迫处理相比,添加50μmol·L^-1外源IAA后使得RB根尖铝、MDA和HzOz含量均显著降低,同时使RB根尖柠檬酸分泌量分别相应增加到单独处理的2.39、1.73和6.85倍,且其相应的质膜H^+-ATPase活性也增加了1.09、1.74和1.45倍。研究表明,外源IAA能通过增强丹波黑大豆根尖柠檬酸的分泌量和质膜H^+-ATPase活性来提高其对铝胁迫的抗性,明显缓解铝毒害作用。 展开更多
关键词 黑大豆 IAA 铝胁迫 柠檬酸 质膜H^+-ATPASE
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外源SA诱导黑大豆根系柠檬酸分泌缓解Al毒害 被引量:3
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作者 王闻闻 +2 位作者 丽梅 李昆志 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2014年第4期507-513,共7页
采用溶液培养的方法,以Al敏感型黑大豆(SB)为材料,研究外源添加水杨酸(SA)对Al胁迫下SB根生理生化指标和Al胁迫相关基因表达的影响,探讨外源SA缓解黑大豆Al毒害的分子机理。结果表明:低浓度(10,20!mol·L-1)SA缓解了Al毒引... 采用溶液培养的方法,以Al敏感型黑大豆(SB)为材料,研究外源添加水杨酸(SA)对Al胁迫下SB根生理生化指标和Al胁迫相关基因表达的影响,探讨外源SA缓解黑大豆Al毒害的分子机理。结果表明:低浓度(10,20!mol·L-1)SA缓解了Al毒引起的根伸长抑制,其中20!mol·L-1SA的缓解效果更明显;而高浓度SA和SA合成抑制剂多效唑(PAC)处理加重了Al毒引起的根伸长抑制;外源添加20!mol·L-1SA使Al胁迫下SB根尖MDA和H2O2含量下降,根系分泌物中柠檬酸的含量约是单独Al处理的2倍;基因表达分析表明外源添加20!mol·L-1SA促进Al胁迫下SB根中12个14-3-3亚型、质膜H+-ATP酶和柠檬酸通道蛋白(MATE)基因的表达;免疫共沉淀的结果表明外源添加20!mol·L-1SA提高了Al胁迫下质膜H+-ATP酶蛋白磷酸化水平及其与14-3-3蛋白结合能力;外源添加PAC的效果与外源添加SA的相反。外源SA可能通过诱导Al胁迫下MATE表达,提高14-3-3蛋白和质膜H+-ATP酶基因蛋白水平和互作,增加柠檬酸的分泌,增强黑大豆对Al毒害的耐受性。 展开更多
关键词 黑大豆 Al胁迫 水杨酸 柠檬酸 14-3-3 H+-ATP酶
丹波黑大豆GmbHLH30转录因子耐铝功能初步研究 被引量:2
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作者 宋倩 钱绍方 +2 位作者 丽梅 李昆志 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期332-337,共6页
铝毒是酸性土壤作物生长的主要限制因素。前期研究发现,铝胁迫下,耐铝型丹波黑大豆SSH(suppression subtractive hybridization,SSH)cDNA文库中bHLH30转录因子基因上调表达,推测该基因与丹波黑大豆耐铝性相关。克隆GmbHLH30基因,构建G... 铝毒是酸性土壤作物生长的主要限制因素。前期研究发现,铝胁迫下,耐铝型丹波黑大豆SSH(suppression subtractive hybridization,SSH)cDNA文库中bHLH30转录因子基因上调表达,推测该基因与丹波黑大豆耐铝性相关。克隆GmbHLH30基因,构建GmbHLH30植物表达载体pK2-35S-GmbHLH30,并在烟草中过量表达获得转GmbHLH30的转基因烟草植株。在铝胁迫下,转GmbHLH30的转基因烟草相对根伸长率比野生型烟草大,可溶性糖和脯氨酸含量高,H2O2水平低。表明GmbHLH30基因的过量表达可以增强植物的耐铝能力,暗示GmbHLH30转录因子参与调控植物的耐铝特性。 展开更多
关键词 黑大豆 bHLH30 铝胁迫 转基因烟草 铝耐受性
丹波黑大豆醛脱氢酶基因GmALDH3—1的克隆、原核表达和功能分析
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作者 张乐 +2 位作者 王琳 丽梅 李昆志 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期86-92,共7页
醛是一类具有高度反应活性的毒性物质,在生物体中主要由膜脂过氧化,氨基酸氧化和蛋白质的糖基化产生。醛脱氢酶(aldehydedehydrogenase,ALDH)是一类以多种醛类为底物的酶类,醛脱氢酶基因是一类编码将醛脱氢氧化为相应羧基酸的基... 醛是一类具有高度反应活性的毒性物质,在生物体中主要由膜脂过氧化,氨基酸氧化和蛋白质的糖基化产生。醛脱氢酶(aldehydedehydrogenase,ALDH)是一类以多种醛类为底物的酶类,醛脱氢酶基因是一类编码将醛脱氢氧化为相应羧基酸的基因,在植物,动物和微生物中均有发现。通过RT—PCR方法从丹波黑大豆根中扩增出基因GmALDH3-1。构建原核表达载体pGEX-4T-1-ALDH3—1,在E.coliBL21中表达,并研究不同浓度IPTG、时间和温度对ALDH3—1蛋白表达的影响,结果表明28℃下诱导6hALDH蛋白表达量最大,而IPTG浓度对ALDH3.1的表达量影响不大。在添加有不同浓度Al、cu和cd的液体LB培养基中培养转化茵和对照菌,检测转化茵和对照菌的生长曲线,生长曲线实验结果表明ALDH3—1转化工程菌对上述金属离子具有一定的耐受性。这些结果为进一步研究其结构和生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 大豆 ALDH 序列分析 原核表达 金属抗性
植物醛脱氢酶基因家族
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作者 张乐 李昆志 《生命的化学》 CAS CSCD 2013年第3期299-306,共8页
醛是一类具有高度反应活性的毒性物质,在生物体中主要由膜脂过氧化、氨基酸氧化和蛋白质糖基化产生。醛脱氢酶基因(aldehy dedehydrogenase,ALDH)编码一类将醛脱氢氧化为相应羧基酸的酶,在植物、动物和微生物中均有发现。由于ALDH... 醛是一类具有高度反应活性的毒性物质,在生物体中主要由膜脂过氧化、氨基酸氧化和蛋白质糖基化产生。醛脱氢酶基因(aldehy dedehydrogenase,ALDH)编码一类将醛脱氢氧化为相应羧基酸的酶,在植物、动物和微生物中均有发现。由于ALDH能够清除毒性醛类物质,其在人体和酵母细胞中已经被详细研究。ALDH基因可划分24个家族,植物中的ALDH基因家族包括ALDH2、ALDH3、ALDH5、ALDH6、ALDH7、ALDH10、ALDH11、ALDH12、ALDH18、ALDH19、ALDH21、ALDH22、ALDH23和ALDH24,有必要对植物中ALDH基因的研究状况做一综述。 展开更多
关键词 ALDH 基因家族 植物
大豆异黄酮生物合成关键酶及其代谢工程研究进展 被引量:9
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作者 张乐 +2 位作者 徐慧妮 丽梅 李昆志 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期133-138,共6页
异黄酮是一类具有C-6/C-3/C-6骨架的二次代谢产物,具有抗氧化和抗肿瘤活性。异黄酮与黄酮类物质具有相似的苯丙烷生物合成途径。天然的绝大部分异黄酮分布在豆科植物中,目前在大豆中已经发现了超过12个异黄酮(苷)。大豆异黄酮的... 异黄酮是一类具有C-6/C-3/C-6骨架的二次代谢产物,具有抗氧化和抗肿瘤活性。异黄酮与黄酮类物质具有相似的苯丙烷生物合成途径。天然的绝大部分异黄酮分布在豆科植物中,目前在大豆中已经发现了超过12个异黄酮(苷)。大豆异黄酮的生物合成主要涉及三个关键的酶查尔酮合酶(CHS)、查尔酮异构酶(CHI)和异黄酮舍酶(IFS)。总结了大豆异黄酮的提取分离方法和生物合成途径,着重综述了CHI、CHS、IFS生物学特征和功能及异黄酮的代谢工程研究。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 CHI CHS IFS 代谢工程
大豆小分子肽增强小鼠免疫力的实验研究 被引量:3
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作者 李硕 +2 位作者 李茂辉 丽梅 李昆志 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2012年第3期 466-469,473,共5页
为通过动物实验检测大豆小分子肽(分子量300~700 Da)对免疫系统的影响及其增强免疫力的作用,分别给受试组小鼠经口灌胃低、中、高剂量(分别为3、6、9 g.kg-1.d-1)的大豆小分子肽溶液30 d后,进行各项免疫指标的检测。结果显示:大... 为通过动物实验检测大豆小分子肽(分子量300~700 Da)对免疫系统的影响及其增强免疫力的作用,分别给受试组小鼠经口灌胃低、中、高剂量(分别为3、6、9 g.kg-1.d-1)的大豆小分子肽溶液30 d后,进行各项免疫指标的检测。结果显示:大豆小分子肽能促进小鼠脾淋巴细胞的转化和迟发型变态反应,提高抗体生成细胞数和血清溶血素水平,增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力;但对小鼠的NK细胞活性,单核—巨噬细胞的碳廓清能力,体重及免疫器官重量均无显著影响。这表明,大豆小分子肽具有增强机体免疫力的作用。 展开更多
关键词 大豆小分子肽 增强免疫力 小鼠
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