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顺铂诱导颗粒细胞损伤及二仙汤含药血清保护颗粒细胞的作用机制 预览
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作者 杨蕾 饶晨晨 +6 位作者 孙丽萍 王燕霞 赵丕文 高文雅 牛建昭 杨阳 《世界中医药》 CAS 2019年第7期1668-1671,共4页
目的:探讨顺铂对卵巢颗粒细胞的影响及二仙汤含药血清改善大鼠卵巢颗粒细胞损伤的作用机制。方法:选取大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂处理的方法,将顺铂处理后卵巢颗粒细胞随机分为:cDDP组、cDDP+雌二醇组、cDDP+二仙汤组,另设正常... 目的:探讨顺铂对卵巢颗粒细胞的影响及二仙汤含药血清改善大鼠卵巢颗粒细胞损伤的作用机制。方法:选取大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂处理的方法,将顺铂处理后卵巢颗粒细胞随机分为:cDDP组、cDDP+雌二醇组、cDDP+二仙汤组,另设正常组,加入相应药理血清连续培养48 h。采用Western Blotting法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax蛋白表达;RT-PCR法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax mRNA表达。结果:与正常对照组比较,cDDP组bax mRNA及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与cDDP组比较,CDDP+雌二醇组及cDDP+二仙汤组Bax mRNA及蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,cDDP组bcl-2 mRNA水平及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与cDDP组比较,CDDP+雌二醇组及cDDP+二仙汤组bcl-2 mRNA转录及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二仙汤能够抑制cDDP诱导的卵巢颗粒细胞损伤,其作用机制可能与调节bcl-2/bax平衡有关。 展开更多
关键词 二仙汤 顺铂 含药血清 卵巢颗粒细胞 卵巢功能低下 不孕 B细胞淋巴瘤2蛋白家族
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牛建昭教授治疗青春期子宫内膜异位症经验 预览
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作者 杨蕾 孙丽萍 +5 位作者 赵丕文 王燕霞 牛建昭 饶晨晨 杨阳 《世界中西医结合杂志》 2019年第5期621-625,共5页
牛建昭教授从事妇科临床、教学、科研近50年,擅长治疗各种妇科疑难杂症,其经验丰富且独到,尤其在治疗子宫内膜异位症方面亦颇有建树。子宫内膜异位症是由于各种病理因素导致有活性的内膜组织(包括腺体和间质),不仅生长在宫腔而且还附着... 牛建昭教授从事妇科临床、教学、科研近50年,擅长治疗各种妇科疑难杂症,其经验丰富且独到,尤其在治疗子宫内膜异位症方面亦颇有建树。子宫内膜异位症是由于各种病理因素导致有活性的内膜组织(包括腺体和间质),不仅生长在宫腔而且还附着在子宫内膜以外的其他部位,这些异常生长的内膜组织会引起女性经期痛经,严重者可引发不孕。中医学认为子宫内膜异位症的基本病机是“瘀阻胞宫冲任”,牛建昭教授在辨证论治、四诊合参的基础上,结合患者临床症状,认为青春期子宫内膜异位症的核心病机为“肾虚瘀结”,在治疗时注重“西医辨病,中医分型,中西结合,个性化治疗”的诊治思路,根据月经周期遣方用药,强调审因论治,注重情志调节。此外,对青春期女性确立了调经促卵、理气止痛、温补肾阳的治疗原则。根据患者个体差异随症加减,临床疗效显著。 展开更多
关键词 牛建昭教授 子宫内膜异位症 中西结合 情志调节
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二仙汤抗化疗性卵巢早衰氧化应激的效应观察 预览
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作者 饶晨晨 高文雅 +6 位作者 崔丽霞 石丹宁 牛建昭 赵丕文 孙丽萍 王燕霞 《湖南中医药大学学报》 CAS 2019年第5期578-583,共6页
目的观察二仙汤对卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)大鼠的抗氧化应激效应。方法雌性SD大鼠40只,监测一周动情周期,筛选有正常动情周期的大鼠入组,随机分为4组:正常组、模型组、阳性药组和二仙汤组。除正常组外,其余3组使用顺铂... 目的观察二仙汤对卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)大鼠的抗氧化应激效应。方法雌性SD大鼠40只,监测一周动情周期,筛选有正常动情周期的大鼠入组,随机分为4组:正常组、模型组、阳性药组和二仙汤组。除正常组外,其余3组使用顺铂注射液造POF模型,阳性药组和二仙汤组在造模同时进行药物干预,灌胃期间监测动情周期,15d后麻醉取材,应用放免法检测血清性激素卵泡刺激素(follicle timulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及雌激素(estrogen,E2)的水平以及氧化应激相关指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)、抗氧化指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的含量,显微镜下观察各组卵巢组织的病理改变。结果与正常组相比较,模型组大鼠动情周期及动情间期明显延长(P<0.01),血清FSH、LH、MDA含量显著升高(P<0.01),E2、SOD及CAT水平显著降低(P<0.01),卵巢组织中闭锁卵泡增多,窦卵泡数减少。与模型组相比,阳性药组与二仙汤组动情周期缩短(P<0.05或P<0.01),血清FSH、LH、MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01),E2、SOD及CAT的含量显著上升(P<0.05或P<0.01),闭锁卵泡数量减少,窦卵泡数增多。结论二仙汤能通过调节POF大鼠的的抗氧化能力来改善卵巢功能,减少氧化应激带来的损伤从而治疗POF。 展开更多
关键词 卵巢早衰 二仙汤 氧化应激 雌激素 黄体生成素
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卵巢早衰颗粒细胞凋亡调控机制的研究进展 预览
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作者 杨阳 +3 位作者 赵丕文 卢迪 杨蕾 饶晨晨 《医学研究杂志》 2018年第1期16-19,共4页
卵巢早衰是妇科疾病中常见病之一,近年来其发生率呈逐年增加的趋势,且低龄化趋向愈益明显。卵巢早衰发生的主要机制是卵泡细胞闭锁进程的加速,而其进程加速主要是由于颗粒细胞的凋亡,所以颗粒细胞在评判卵母细胞是否健康,胚胎生长... 卵巢早衰是妇科疾病中常见病之一,近年来其发生率呈逐年增加的趋势,且低龄化趋向愈益明显。卵巢早衰发生的主要机制是卵泡细胞闭锁进程的加速,而其进程加速主要是由于颗粒细胞的凋亡,所以颗粒细胞在评判卵母细胞是否健康,胚胎生长状态是否良好这两方面起到了举足轻重的作用。因此对于总结研究近年来颗粒细胞凋亡调控机制相关文献十分必要。本文总结归纳了相关文献,根据具体机制的不同,分为3个角度,调控颗粒细胞凋亡的相关基因,介入颗粒细胞凋亡过程的细胞因子和调节颗粒细胞的相关激素,从这几方面进行了综述。 展开更多
关键词 卵巢早衰 颗粒细胞 细胞凋亡 凋亡基因 类固醇激素 细胞因子
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二仙汤含药血清通过AKT途径介导顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制 预览 被引量:1
5
作者 杨蕾 王燕霞 +5 位作者 赵丕文 孙丽萍 饶晨晨 杨阳 张红红 《世界科学技术:中医药现代化》 CSCD 北大核心 2018年第5期690-696,共7页
目的:探讨二仙汤含药血清通过AKT途径介导顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的防护作用及分子机制。方法本实验采用大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂造模的方法。通过选取22-24 d的SD大鼠提取原代卵巢颗粒细胞,进行细胞培养并建立顺铂致卵... 目的:探讨二仙汤含药血清通过AKT途径介导顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的防护作用及分子机制。方法本实验采用大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂造模的方法。通过选取22-24 d的SD大鼠提取原代卵巢颗粒细胞,进行细胞培养并建立顺铂致卵巢颗粒细胞凋亡模型,将成模卵巢颗粒细胞随机分为:模型组、阳性对照组、二仙汤组,加入相应药理血清连续培养48 h后,用TUNEL法检测各组颗粒细胞凋亡情况;蛋白印迹法检测各组akt、p-akt蛋白的表达情况;RT-PCR检测各组akt基因表达情况。结果:通过TUNEL法对各实验组卵巢颗粒细胞凋亡形态学观察发现:与正常组相比,模型组凋亡情况十分明显。阳性对照组与模型组相比凋亡情况改善;二仙汤组与模型组相比较凋亡情况也得到了缓解。蛋白印迹分析显示:akt、p-akt蛋白表达量总体趋势走向、强度、结果相似。顺铂造模后的各实验组中的akt、p-akt蛋白表达量均减少,模型组akt、p-akt蛋白表达量最少;和模型组比较,各治疗组均akt、p-akt蛋白表达量表达增多,其中二仙汤组akt、p-akt蛋白表达量略低于补佳乐组akt、p-akt蛋白表达量。RT-PCR检测akt基因表达情况,与蛋白表达大体一致。结论二仙汤能明显减轻顺铂引起的卵巢颗粒细胞凋亡,其作用机制与激活AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 二仙汤 顺铂 卵巢颗粒细胞凋亡 AKT途径
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紫草素对宫颈癌SiHa细胞增殖周期的影响 预览 被引量:5
6
作者 杨阳 +5 位作者 牛建昭 赵丕文 王燕霞 卢迪 饶晨晨 穆玉雪 《环球中医药》 CAS 2018年第1期6-10,共5页
目的观察紫草素(Shikonin,SK)对人宫颈癌SiHa细胞增殖周期的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养人宫颈癌SiHa细胞,不同浓度SK作用于细胞后,流式细胞术检测细胞增殖指数和周期分布;细胞水平免疫组织化学法观察SiHa细胞G蛋白偶联雌激... 目的观察紫草素(Shikonin,SK)对人宫颈癌SiHa细胞增殖周期的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养人宫颈癌SiHa细胞,不同浓度SK作用于细胞后,流式细胞术检测细胞增殖指数和周期分布;细胞水平免疫组织化学法观察SiHa细胞G蛋白偶联雌激素受体(GPER)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果作用48小时后,与空白对照组相比,雌二醇组SiHa细胞增殖指数升高,1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8mol/L SK各组SiHa细胞增殖指数下降(P〈0.05),同时G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P〈0.01);与空白对照组相比,雌二醇组GPER、Cyclin D1蛋白表达增加,1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8mol/L SK各组GPER、Cyclin D1蛋白表达水平显著降低(P〈0.05),且呈浓度依赖性(P〈0.05)。结论紫草素能够抑制人宫颈癌鳞癌SiHa细胞增殖,其诱导G0/G1期阻滞的分子机制可能与GPER、Cyclin D1蛋白相关。 展开更多
关键词 紫草素 SIHA细胞 G蛋白偶联雌激素受体 细胞周期蛋白D1 细胞周期
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二仙汤对顺铂所致大鼠卵巢早衰模型中卵巢颗粒细胞增殖及周期的影响 预览 被引量:4
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作者 赵笛 赵丕文 +6 位作者 武虹波 蔡欣悦 孙丽萍 牛建昭 卢迪 齐明月 《环球中医药》 CAS 2017年第2期131-136,共6页
目的观察二仙汤对顺铂损伤大鼠卵巢颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。方法以不同剂量的二仙汤药理血清作用于体外培养的顺铂损伤卵巢颗粒细胞,并以正常药理血清为空白对照,戊酸雌二醇药理血清为阳性对照,同时对比加入PI3K/AKT通路的抑制剂... 目的观察二仙汤对顺铂损伤大鼠卵巢颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。方法以不同剂量的二仙汤药理血清作用于体外培养的顺铂损伤卵巢颗粒细胞,并以正常药理血清为空白对照,戊酸雌二醇药理血清为阳性对照,同时对比加入PI3K/AKT通路的抑制剂LY294002后各组的变化。MTT法检测各组药理血清作用于卵巢颗粒细胞24小时、48小时和72小时的增殖情况。流式细胞术检测各组中细胞周期各时相的变化。结果 (1)二仙汤对顺铂损伤后的卵巢颗粒细胞具有增殖促进作用(P〈0.05);且对于顺铂损伤后并给予LY294002抑制剂的颗粒细胞也具有增殖改善作用(P〈0.05)。(2)二仙汤各剂量组及戊酸雌二醇组均能使处于S期的顺铂损伤颗粒细胞比例显著增多,G_0/G_1期细胞相对比例减少(P〈0.01),且增殖指数升高(P〈0.01)。结论二仙汤对卵巢颗粒细胞增殖有显著促进作用,其作用机制可能是激活或增强AKT信号通路,抑制细胞凋亡,从而促进细胞增殖;另一方面,也可能是通过促进颗粒细胞从G_0期向S期转化,增加S期细胞比率来实现的。 展开更多
关键词 二仙汤 卵巢早衰 卵巢颗粒细胞 细胞增殖 细胞周期
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二仙汤及其拆方治疗卵巢早衰的实验研究进展 预览 被引量:8
8
作者 杨蕾 王继峰 +1 位作者 牛建昭 《环球中医药》 CAS 2017年第5期626-630,共5页
近年来,卵巢早衰发病率呈逐年上升趋势。现代医学主要是以激素替代疗法加以治疗,临床效果一般且副作用大。传统医学认为此病主要是年未老,冲任已衰,天癸已竭,肾中精气的衰少,从而诱发卵巢早衰。二仙汤主要有温补肾阳、改善体内雌激素水... 近年来,卵巢早衰发病率呈逐年上升趋势。现代医学主要是以激素替代疗法加以治疗,临床效果一般且副作用大。传统医学认为此病主要是年未老,冲任已衰,天癸已竭,肾中精气的衰少,从而诱发卵巢早衰。二仙汤主要有温补肾阳、改善体内雌激素水平的作用。在临床治疗卵巢早衰中发挥着重要的作用。本文通过促性腺激素、下丘脑生殖调节激素、下丘脑—垂体—卵巢轴以及卵巢颗粒细胞水平综述了近几年来关于二仙汤及其拆方在治疗卵巢早衰方面的实验研究进展。 展开更多
关键词 卵巢早衰 二仙汤 病因病机 实验研究进展
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二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达的影响 预览 被引量:3
9
作者 杨蕾 王继峰 +6 位作者 牛建昭 赵丕文 孙丽萍 武洪波 蔡欣悦 齐明月 《世界中医药》 CAS 2017年第4期865-869,共5页
目的:观察二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达的影响,从细胞凋亡的角度探讨二仙汤含药血清对卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制.方法:22~24 d的SD雌性大鼠30只,随机分为3组,分别为生理盐水组,补佳乐组,... 目的:观察二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达的影响,从细胞凋亡的角度探讨二仙汤含药血清对卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制.方法:22~24 d的SD雌性大鼠30只,随机分为3组,分别为生理盐水组,补佳乐组,二仙汤组.每组大鼠10只.给药4 d后处死大鼠,心脏取血,制备药物血清.22~24 d的SD大鼠卵巢颗粒细胞,经培养贴壁后,用顺铂损伤大鼠原代卵巢颗粒细胞.经各组药理血清作用后,应用放免法,进行雌激素和孕激素水平测定及分析.应用免疫组化法,测定各分组bcl-2、bax蛋白的表达情况,并进行图像分析.结果:放免结果显示,与正常组相比,模型组和补佳乐组E2表达明显改变,有统计学意义(P〈0.05).与模型组相比,补佳乐组、二仙汤组E2表达均有增加;与正常组相比,模型组P表达水平有所变化,有统计学意义(P〈0.05).与模型组相比,二仙汤组P表达略高于补佳乐组,但低于正常组.免疫组化结果显示,在卵巢颗粒细胞细胞质上可见bcl-2和bax蛋白表达的棕黄色颗粒.和正常组相比较,顺铂干预后各组bcl-2表达均减弱,而以模型组最明显,有统计学意义(P〈0.05);和模型组比较,各药物组均可见bcl-2阳性表达增加,但弱于正常组,有统计学意义(P〈0.05).bax与bcl-2表达强度结果相反,和正常组比较,顺铂干预后的各组bax均表达增强,模型组呈现极强表达现象,有统计学意义(P〈0.05);和模型组比较,各药物组均可见阳性表达减弱,但表达高于正常组,有统计学意义(P〈0.05).结论:二仙汤能降低经顺铂干预后大鼠bax蛋白在卵泡颗粒细胞表达,增强bcl-2蛋白的表达,二仙汤能够通过调节凋亡蛋白bcl-2、bax蛋白的表达,抑制卵巢颗粒细胞发生凋亡,从而保护卵巢功能. 展开更多
关键词 二仙汤 顺铂 颗粒细胞 细胞凋亡
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牛建昭教授治疗青春期多囊卵巢综合征
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作者 杨阳 饶晨晨 《吉林中医药》 2017年第10期987-990,共4页
牛建昭教授认为青春期多囊卵巢综合征的病因主要以肾虚为本,导致气血失调,同时以寒邪痰湿气滞血瘀为标,确立了补肾益精,气血同调,分型治标的治疗大法。强调在治疗过程中补肾之阴阳同时调后天之气血,进而达到阴阳并补,气血兼顾,标本同治... 牛建昭教授认为青春期多囊卵巢综合征的病因主要以肾虚为本,导致气血失调,同时以寒邪痰湿气滞血瘀为标,确立了补肾益精,气血同调,分型治标的治疗大法。强调在治疗过程中补肾之阴阳同时调后天之气血,进而达到阴阳并补,气血兼顾,标本同治的效果。除此之外,牛教授还根据青春期女性生理周期调经促排卵:月经期调经止痛,卵泡期滋补肾阴,排卵期调理气血促进排卵,黄体期温补肾阳,疏肝理气。在此基础上根据患者个体差异随症加减,临床疗效显著。 展开更多
关键词 青春期 多囊卵巢综合征 牛建昭
二仙汤对卵巢早衰大鼠卵巢储备功能的影响 被引量:12
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作者 冒湘琳 鲍伟倩 +3 位作者 赵丕文 牛建昭 赵福建 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期771-773,共3页
目的:通过研究二仙汤对卵巢血供和卵泡颗粒细胞分泌AMH、Inhibin的影响,探究其对卵巢储备功能的影响,从而探究二仙汤治疗卵巢早衰的机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和二仙汤组,腹腔注射顺铂建立化疗性损伤大... 目的:通过研究二仙汤对卵巢血供和卵泡颗粒细胞分泌AMH、Inhibin的影响,探究其对卵巢储备功能的影响,从而探究二仙汤治疗卵巢早衰的机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和二仙汤组,腹腔注射顺铂建立化疗性损伤大鼠卵巢早衰动物模型。造模后连续4周灌胃药物治疗。HE染色观察卵巢血管的变化;ELISA法测定血清中AMH、Inhibin含量。结果:与正常组比较,模型组卵巢血管减少,血清AMH、Inhibin下降(P<0.05);二仙汤和西药补佳乐治疗后与模型组比较卵巢血管增多,血清AMH、Inhibin升高(P<0.05)。结论:二仙汤治疗卵巢早衰的机制之一可能是改善卵巢血供,促进颗粒细胞AMH和Inhibin分泌,恢复卵泡正常募集和成熟,减少卵泡闭锁,从而改善卵巢储备功能。 展开更多
关键词 二仙汤 卵巢早衰 抗苗勒氏管激素 抑制素 卵巢储备
丹参酮ⅡA抗宫颈癌鳞癌细胞增殖效应及其雌激素受体亚型介导机制的研究 预览 被引量:4
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作者 臧金凤 赵丕文 +3 位作者 赵俊云 孙丽萍 牛建昭 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2016年第6期51-55,共5页
目的 观察丹参酮ⅡA 对宫颈癌鳞癌Siha 细胞增殖的影响,探讨其作用机制.方法 不同浓度丹参酮ⅡA 作用人宫颈癌鳞癌Siha 细胞,MTT 法和流式细胞术测定Siha 细胞增殖速率和增殖周期分布,Westernblot 测定Siha 细胞磷酸化细胞外信号调节激... 目的 观察丹参酮ⅡA 对宫颈癌鳞癌Siha 细胞增殖的影响,探讨其作用机制.方法 不同浓度丹参酮ⅡA 作用人宫颈癌鳞癌Siha 细胞,MTT 法和流式细胞术测定Siha 细胞增殖速率和增殖周期分布,Westernblot 测定Siha 细胞磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、细胞周期蛋白(Cyclin)D 表达.结果 1×10^-5、5×10^-6、1×10^-6、5×10^-7 mol/L 丹参酮ⅡA 显著抑制宫颈癌鳞癌Siha 细胞增殖,该抑制作用可被雌激素受体(ER)α 拮抗剂MPP 增强、可被ERβ 拮抗剂PHTPP 减弱;1×10^-5、5×10^-6、1×10^-6 mol/L 丹参酮ⅡA 干预后Siha 细胞增殖指数显著下降;1×10^-5、5×10^-6、1×10^-6、5×10^-7 mol/L 丹参酮ⅡA 干预后Siha 细胞p-ERK、Cyclin D 蛋白表达水平显著降低.结论 丹参酮ⅡA 抑制宫颈癌鳞癌Siha 细胞增殖是通过靶细胞ER 途径实现的,并通过降低p-ERK、Cyclin D 表达量发挥抗增殖作用. 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 宫颈癌鳞癌Siha细胞 雌激素受体 细胞增殖 细胞周期 磷酸化细胞外信号调节激酶 细胞周期蛋白D
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基因沉默技术研究丹参酮ⅡA抗雌激素受体阴性乳腺癌细胞增殖的GPER途径 被引量:2
13
作者 赵丕文 臧金凤 +3 位作者 陈梦 孙丽萍 牛建昭 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期4502-4506,共5页
目的:利用经典核雌激素受体(ER)阴性、膜G蛋白偶联雌激素受体(GPER)阳性乳腺癌SKBR3细胞探索丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)对肿瘤细胞增殖活性的影响及其GPER介导功能。方法:应用GPER Si RNA转染构建GPER基因沉默的SKBR3细胞,并用We... 目的:利用经典核雌激素受体(ER)阴性、膜G蛋白偶联雌激素受体(GPER)阳性乳腺癌SKBR3细胞探索丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)对肿瘤细胞增殖活性的影响及其GPER介导功能。方法:应用GPER Si RNA转染构建GPER基因沉默的SKBR3细胞,并用Western Blot方法检测基因沉默效果;利用MTT细胞增殖速率、PI细胞周期测定方法观察丹参酮ⅡA对SKBR3细胞增殖速率、细胞增殖指数的影响及GPER的介导作用。利用Western Blot方法检测丹参酮ⅡA对SKBR3细胞周期蛋白Cyclin D表达的影响及GPER的介导功能。结果:(1×10^-5~1×10^-8)mol/L丹参酮ⅡA能够显著降低SKBR3细胞增殖速率,(1×10^-5~1×10^-6)mol/L丹参酮ⅡA能够显著下调细胞增殖指数,且上述抑制作用可因GPER基因沉默而明显减弱。Western Blot测定结果表明,(1×10^-5~1×10^-6)mol/L丹参酮ⅡA可使SKBR3细胞Cyclin D蛋白表达显著降低,且该效应可被GPER基因沉默所拮抗。结论:丹参酮ⅡA具有抑制乳腺癌SKBR3细胞增殖的作用,该抑制作用是经GPER途径介导的。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 基因沉默 乳腺癌 SKBR3细胞 细胞增殖 G蛋白偶联雌激素受体 雌激素受体
PI3k/Akt通路参与二仙汤抑制顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的作用 预览 被引量:3
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作者 杨蕾 +7 位作者 王继峰 牛建昭 赵丕文 孙丽萍 王燕霞 武洪波 蔡欣悦 杨阳 《世界科学技术:中医药现代化》 2016年第8期1362-1367,共6页
目的:观察顺铂干预大鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况,从而探讨二仙汤含药血清经PI3k/Akt通路抑制卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制。方法:SD雌性大鼠30只,随机分为3组,分别为生理盐水组、补佳乐组、二仙汤组。心脏取血,制备药物血清。SD大鼠卵巢... 目的:观察顺铂干预大鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况,从而探讨二仙汤含药血清经PI3k/Akt通路抑制卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制。方法:SD雌性大鼠30只,随机分为3组,分别为生理盐水组、补佳乐组、二仙汤组。心脏取血,制备药物血清。SD大鼠卵巢颗粒细胞,经培养贴壁后,用顺铂损伤大鼠原代卵巢颗粒细胞。经各组药理血清作用后,应用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,并对各实验组大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡情况进行分析。应用免疫组化法,测定各分组PI3k、Akt、p-Akt蛋白的表达情况,并进行图像分析。结果:流式细胞凋亡结果显示,二仙汤可以降低顺铂损伤后的大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡率。免疫组化结果显示,PI3k、p-Akt、Akt在细胞质内均有表达,可见棕黄色阳性物质;而二仙汤可以上调顺铂干预后大鼠卵巢颗粒细胞的PI3k、p-Akt、Akt的表达。结论:二仙汤含药血清上调了PI3k、p-Akt、Akt的表达,从而抑制了卵巢颗粒细胞凋亡,该过程可能通过调节PI3k/Akt通路实现,进而有效地保护卵巢功能。 展开更多
关键词 二仙汤 卵巢颗粒细胞 PI3K/AKT通路 细胞凋亡
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β-谷甾醇对T47D细胞增殖和细胞周期的影响及作用机制探讨 预览 被引量:6
15
作者 牛建昭 +5 位作者 王继峰 郝庆秀 赵丕文 杨美娟 张丽娟 冒湘琳 《世界科学技术:中医药现代化》 2015年第2期362-366,共5页
目的:观察β-谷甾醇(BSS)对雌激素受体(ER)阳性人乳腺癌T47D细胞的作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察不同浓度BSS对T47D细胞增殖的影响;利用流式细胞术检测其对T47... 目的:观察β-谷甾醇(BSS)对雌激素受体(ER)阳性人乳腺癌T47D细胞的作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察不同浓度BSS对T47D细胞增殖的影响;利用流式细胞术检测其对T47D细胞周期的影响;利用Western-blot和Real-time PCR技术检测其对细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白及m RNA表达的影响。结果:高浓度BSS抑制T47D细胞增殖,使细胞分裂增殖指数降低,且ICI182 780不能完全拮抗其对T47D细胞的增殖抑制作用;低浓度BSS可促进T47D细胞增殖,提高细胞分裂增殖指数,且ICI182 780可完全拮抗其促增殖作用。Western-blot及Real-time PCR结果显示:低浓度BSS可诱导T47D细胞Cyclin D1蛋白和m RNA表达,并且ICI182 780能够抑制此诱导作用。结论:BSS通过ER介导调节Cyclin D1蛋白与m RNA水平的表达,从而影响ER阳性人乳腺癌T47D细胞增殖活性和细胞周期,发挥植物雌激素样作用。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 T47D 细胞周期蛋白D1 细胞增殖 细胞周期 植物雌激素
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丹参酮IIA抗乳腺癌T47D细胞增殖的GPER途径研究 预览 被引量:9
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作者 赵丕文 臧金凤 +2 位作者 陈梦 牛建昭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1458-1462,共5页
目的利用经典雌激素受体(estrogenic receptor,ER)和G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen recep-tor,GPER)阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA(TanshinoneIIA)对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能.方法以GPE... 目的利用经典雌激素受体(estrogenic receptor,ER)和G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen recep-tor,GPER)阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA(TanshinoneIIA)对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能.方法以GPER激动剂G1和GPER拮抗剂G15为工具药干预,并应用GPERSiRNA转染构建GPER基因沉默的T47D细胞,利用MTT细胞增殖实验观察丹参酮IIA对T47D细胞增殖速率的影响及GPER的介导作用.利用Westernblot方法检测丹参酮IIA对T47D细胞GPER表达情况的影响.结果1×10^-5 mol·L^-1 ~1×10^-7 mol·L^-1丹参酮IIA能够明显抑制T47D细胞增殖,且该抑制作用可被G1拮抗,可被G15增强.丹参酮IIA作用于GPER基因沉默的T47D细胞,该细胞表现出更为明显的生长抑制效应.West-ernblot测定结果表明,1×10^-5 mol·L^-1和1×10^-6 mol·L^-1丹参酮IIA可使T47D细胞GPER蛋白表达明显降低.结论丹参酮IIA具有抑制乳腺癌T47D细胞增殖的作用,该抑制作用可经GPER途径介导;且丹参酮IIA具有对靶细胞GPER表达的调节功能. 展开更多
关键词 丹参酮IIA 乳腺癌 T47D细胞 细胞增殖 G蛋白偶联雌激素受体 雌激素受体 基因沉默
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细胞凋亡途径探讨二仙汤治疗大鼠卵巢早衰实验研究 预览 被引量:17
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作者 张丽娟 +1 位作者 赵丕文 冒湘琳 《世界科学技术:中医药现代化》 2015年第4期812-818,共7页
目的:通过卵泡颗粒细胞的凋亡途径探讨二仙汤对化疗性损伤卵巢早衰的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和二仙汤组,腹腔注射顺铂建立化疗性损伤大鼠卵巢早衰动物模型。造模后连续4周各组灌胃给予相应药物治疗。观察... 目的:通过卵泡颗粒细胞的凋亡途径探讨二仙汤对化疗性损伤卵巢早衰的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和二仙汤组,腹腔注射顺铂建立化疗性损伤大鼠卵巢早衰动物模型。造模后连续4周各组灌胃给予相应药物治疗。观察大鼠一般情况;测定血清中E2、FSH、LH和Pro含量;观察卵巢组织形态;TUNEL法分析卵泡颗粒细胞的凋亡;免疫组化检测BAX、Bcl-2和VEGF蛋白的表达情况。结果:模型组体质量下降,动情周期紊乱,治疗后体质量增加,动情周期恢复。与正常组比较,模型组E2、LH下降,FSH水平升高,Pro含量各组比较无显著差异。TUNEL检测模型组较正常组阳性表达增多,二仙汤组较模型组阳性表达减少。模型组较正常组BAX表达明显升高,Bcl-2下降,二仙汤治疗后与模型组比较BAX表达量下降,Bcl-2表达升高;VEGF蛋白在模型组中表达明显低于正常组,二仙汤组较模型组表达增多,阳性组表达略有恢复。结论:顺铂可致卵泡颗粒细胞凋亡,造成卵巢功能过早衰退;二仙汤通过调节血清中各激素含量,改变凋亡细胞相关蛋白的表达量来降低顺铂对卵巢的损害,促进卵泡发育,改善并增强卵巢功能。 展开更多
关键词 卵巢早衰 二仙汤 卵泡颗粒细胞 凋亡
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β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体表达及其下游基因PS2的影响 被引量:2
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作者 牛建昭 +4 位作者 赵丕文 郝庆秀 杨美娟 孙艳玲 张丽娟 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期165-167,174共4页
目的:观察β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体(estrogen receptor,ER)及下游基因PS2的影响,探讨其植物雌激素样作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,应用实时荧光定量PCR技术检测ERα、ERβ及PS2mRNA表达变化,western-blot技... 目的:观察β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体(estrogen receptor,ER)及下游基因PS2的影响,探讨其植物雌激素样作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,应用实时荧光定量PCR技术检测ERα、ERβ及PS2mRNA表达变化,western-blot技术检测ERα、ERβ蛋白表达变化。结果:β-谷甾醇可诱导ERα、ERβ及PS2 mRNA表达,且上调ERβ更显著,对PS2 mRNA的诱导作用可以被ICI182 780抑制,能够上调ERα和ERβ蛋白表达,且可以被ICI182 780抑制。结论:β-谷甾醇可以通过ER途径调节下游靶基因的表达而发挥植物雌激素样作用。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 T47D PS2 雌激素受体 植物雌激素
顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的实验研究 预览 被引量:5
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作者 张丽娟 +1 位作者 赵丕文 冒湘琳 《世界中医药》 CAS 2015年第10期1563-1565,1569共4页
目的:探讨采用临床常用药物顺铂建立化疗性损伤卵巢早衰动物模型的方法。方法:通过观察阴道脱落细胞选取有正常动情周期的雌性SD大鼠60只随机分为正常组,低剂量组和高剂量组。按4 mg/kg和6 mg/kg分别给予低、高剂量组腹腔注射顺铂注射... 目的:探讨采用临床常用药物顺铂建立化疗性损伤卵巢早衰动物模型的方法。方法:通过观察阴道脱落细胞选取有正常动情周期的雌性SD大鼠60只随机分为正常组,低剂量组和高剂量组。按4 mg/kg和6 mg/kg分别给予低、高剂量组腹腔注射顺铂注射液,每周1次,连续2周。每天观察大鼠一般情况,体重,动情周期。取材后测定血清中E2、FSH、LH和Pro含量,光镜下观察卵巢病理组织形态变化。结果:体重下降,动情周期紊乱,动情间期延长。与正常比较,高、低剂量组E2水平不同程度降低,FSH、LH水平升高(P〈0.05)。孕酮含量各组比较无统计学意义(P〉0.05)。卵泡计数减少。结论:化疗药物顺铂可致大鼠卵巢功能明显衰退,卵泡发育障碍,生殖能力受损。为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型提供一种操作简单,成功率高,结果可靠的实验方法。 展开更多
关键词 顺铂 卵巢早衰 大鼠 动物模型
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G蛋白偶联雌激素受体在雌激素相关肿瘤发生中的作用 预览 被引量:4
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作者 赵丕文 David Yue-Wei Lee +2 位作者 陈梦 牛建昭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1037-1041,共5页
在经典的雌激素核受体a和β之外,雌激素或雌激素样物质也可以经过膜受体,即G蛋白偶联雌激素受体(GPER)发挥功能。G蛋白偶联雌激素受体是雌激素非基因通路信号转导过程的重要介导因子,在雌激素相关肿瘤细胞的发生和治疗中具有重要... 在经典的雌激素核受体a和β之外,雌激素或雌激素样物质也可以经过膜受体,即G蛋白偶联雌激素受体(GPER)发挥功能。G蛋白偶联雌激素受体是雌激素非基因通路信号转导过程的重要介导因子,在雌激素相关肿瘤细胞的发生和治疗中具有重要的意义。现针对G蛋白偶联雌激素受体在雌激素相关肿瘤细胞中介导的效应及有关机制的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 G蛋白偶联雌激素受体 G蛋白偶联受体30 雌激素受体 肿瘤 雌激素 植物雌激素 乳腺癌
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