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去甲基化处理对NK-92MI细胞系抑制性受体KIR表达的影响 预览 被引量:2
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作者 高晓宁 林季 +4 位作者 王莉莉 高丽 海杰 孙敬芬 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期656-660,共5页
为分析NK细胞系NK-92MI细胞中抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killercellimmnoglobulin-likere—ceptor,KIR)的基因启动子区的甲基化模式及去甲基化处理对基因表达的影响,探讨基因kir可能的表达调控机制,采用亚硫酸氢盐测序法检测... 为分析NK细胞系NK-92MI细胞中抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killercellimmnoglobulin-likere—ceptor,KIR)的基因启动子区的甲基化模式及去甲基化处理对基因表达的影响,探讨基因kir可能的表达调控机制,采用亚硫酸氢盐测序法检测NK-92MI细胞kir2DL1和kir2DL2/2DL3基因启动予区的甲基化水平,应用甲基化抑制剂5-氮胞苷处理NK-92MI细胞以诱导CpG岛去甲基化,RT—PCR方法检测其基因表达。结果显示:kir2DL1和kir2DL2/2DL3基因启动子区CpG二核苷酸甲基化频率依次在25%-88%、5%-80%之间;应用甲基化抑制剂5-氮胞苷可以诱导NK-92MI细胞重新表达kir2DL1基因,并使kir2DL1、kir2DL2和kir2DL3基因表达量增加。结论:启动子甲基化参与调控NK-92MI细胞基因kir表达。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 NK-92MI细胞系 去甲基化处理
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人动员外周血成体干/祖细胞定向诱导分化为血管内皮前体细胞的免疫表型分析 预览 被引量:1
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作者 海杰 王菲菲 +4 位作者 高晓宁 靖彧 刘景华 高春记 于力 《标记免疫分析与临床》 CAS 2009年第3期 148-151,共4页
观察动员后的人外周血成体干/祖细胞体外定向诱导分化为血管内皮前体细胞(EPC)的免疫表型特征及变化。采用健康成人经粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员后的外周血成体干/祖细胞,经贴壁培养法定向分化为EPC,之后通过流式细胞术检测EP... 观察动员后的人外周血成体干/祖细胞体外定向诱导分化为血管内皮前体细胞(EPC)的免疫表型特征及变化。采用健康成人经粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员后的外周血成体干/祖细胞,经贴壁培养法定向分化为EPC,之后通过流式细胞术检测EPC表型。结果显示,培养后的贴壁细胞具有内皮细胞特征,能够与I型荆豆凝集素(UEA-I)结合。流式细胞术检测UEA-I结合率为92.1%,内皮细胞标志物CD31、KDR、CD62E均有不同程度增加,而粒-巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)及CD34表达明显减低,表明诱导分化后细胞的免疫表型发生了相应的变化。 展开更多
关键词 成体干/祖细胞 血管内皮前体细胞 粒细胞集落刺激因子
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重组人白介素11联合粒细胞集落刺激因子动员的自体外周血造血干细胞移植 预览 被引量:7
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作者 朱海燕 达万明 +9 位作者 高春记 汪菲菲 韩晓蘋 李红华 黄文荣 张翼鷟 王书红 薄剑 靖彧 海杰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期 345-349,共5页
本研究旨在探索重组人白介素11(rhIL—11)联合重组人粒细胞集落刺激因子(rhG—CSF)动员外周血造血干细胞进行自体外周血干细胞移植的作用。16例预行自体外周血干细胞移植的非霍奇金淋巴瘤及急性髓系白血病患者随机分为实验组(rhIL... 本研究旨在探索重组人白介素11(rhIL—11)联合重组人粒细胞集落刺激因子(rhG—CSF)动员外周血造血干细胞进行自体外周血干细胞移植的作用。16例预行自体外周血干细胞移植的非霍奇金淋巴瘤及急性髓系白血病患者随机分为实验组(rhIL-11联合rhG—CSF动员)及对照组(rhG—CSF动员),两组均在动员性化疗后血象下降至最低值有回升迹象时应用rhIL—11及rhG—CSF;rhG—CSF5μg/(kg·d)动员中位时间5.5天,rhIL—1150μg/(kg·d)动员中位时间4天;动员后观察外周血白细胞和血小板计数,以及干细胞采集物单个核细胞、CD34^+细胞、CFU—GM集落数的变化;按常规进行自体外周血干细胞移植后,观察粒细胞及血小板植活时间及单采血小板输注量。结果显示:实验组及对照组动员后外周血白细胞和血小板计数,以及干细胞采集物单个核细胞、CD54^+细胞及CFU—GM集落数无显著性差异(P〉0.05)。自体外周血干细胞移植后,实验组中性粒细胞数≥0.5×10^9/L的中位时间为10.5天,对照组中为13天.实验组比对照组提前2.5天(P〈0.05)。实验组血小板数≥20×10^9/L的中位时间为11.5天,对照组为13天,实验组比对照组提前1.5天(p〈0.05)。实验组输注单采血小板中住数为3.5单位,对照组为5单位,实验组比对照组减少1.5单位(P〈0.05)。实验组使用动员剂的不良反应主要有低热、乏力、感冒样症状、食欲不振、头晕、肌肉酸痛等,对照组仅出现低热,患者对以上症状均可以耐受,停药后症状自行消失。结论:rhIL—11联合rhG—CSF动员外周血造血干细胞安全有效,在自体外周血干细胞移植后造血重建较快,单采血小板输注量少。 展开更多
关键词 白细胞介素-11 粒细胞集落刺激因子 造血干细胞动员 自体造血干细胞移植
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KIR2DS2基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 预览
4
作者 窦立萍 达万明 +8 位作者 王畅 康慧媛 卢学春 范辉 薄剑 海杰 高春记 韩晓萍 于力 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2008年第2期 128-130,共3页
目的:构建携带KIR2DS2基因短发夹状干扰RNA(short hairin RNA,shRNA)的RNAi慢病毒载体。方法:针对已经筛选确定的KIR2DS2基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经HpaI和XhoI酶切后的pSicoR.GFP载体[含U... 目的:构建携带KIR2DS2基因短发夹状干扰RNA(short hairin RNA,shRNA)的RNAi慢病毒载体。方法:针对已经筛选确定的KIR2DS2基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经HpaI和XhoI酶切后的pSicoR.GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LV—shKIR2DS2慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用LV—shKIR2DS2及Packaging system质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度。结果:PCR和测序证实,成功构建KIR2DS2shRNA的慢病毒载体LV.shKIR2DS2。293T细胞测定病毒滴度为6×10^8TU/ml。结论:成功构建携带KIR2DS2基因短发夹状干扰RNA的RNAi慢病毒载体。 展开更多
关键词 RNA小分子干扰 KIR2DS2 慢病毒属
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Kir2ds4基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 预览 被引量:5
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作者 窦立萍 达万明 +7 位作者 王畅 康慧媛 赵瑜 孙敬芬 海杰 王全顺 高春记 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期 663-666,共4页
本研究旨在构建kir2ds4基因RNAi慢病毒载体。针对已经筛选确定的kff2ds4基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经HpaI和XhoI酶切后的pSicoR-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LV-shkir2ds4慢... 本研究旨在构建kir2ds4基因RNAi慢病毒载体。针对已经筛选确定的kff2ds4基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经HpaI和XhoI酶切后的pSicoR-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LV-shkir2ds4慢病毒载体,应用PCR筛选阳性克隆并进行测序鉴定。用LV-shkir2ds4,包装系统质粒共转染包装细胞293T细胞,产生慢病毒颗粒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度。结果表明,PCR和测序结果证实成功地构建了kir2ds4shRNA的慢病毒载体LV-shkir2ds4。293T细胞测定病毒滴度为6×10^8TU/ml。结论:成功地构建了人kff2ds4基因RNAi慢病喜载体. 展开更多
关键词 RNA干扰kir2ds4基因 慢病毒载体
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急性髓系白血病中CD64表达的敏感性及特异性研究 预览 被引量:4
6
作者 海杰 高晓宁 +4 位作者 陈卫华 李猛 孙敬芬 韩晓蘋 于力 《标记免疫分析与临床》 CAS 2008年第4期 217-218,230,共3页
研究急性髓系白血病(AML)免疫分型中CD64的敏感性和特异性。用系列抗原对132例AML患者的骨髓细胞进行直接标记,并用流式细胞术进行分析。结果表明:在AML中,CD64对急性粒-单细胞白血病(M4)和急性单核细胞白血病(M5)中敏感性最高... 研究急性髓系白血病(AML)免疫分型中CD64的敏感性和特异性。用系列抗原对132例AML患者的骨髓细胞进行直接标记,并用流式细胞术进行分析。结果表明:在AML中,CD64对急性粒-单细胞白血病(M4)和急性单核细胞白血病(M5)中敏感性最高(分别为96.4%和100%),在其他AML(M0、M1、M2、M3、M6、M7)中表达均较低。CD64对M4和M5中的特异性为56.5%。因此,CD64有助于AML中M4、M5的鉴别诊断。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 CD64 流式细胞术
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低危骨髓增生异常综合征患者间充质干细胞的生物学特性的实验研究 预览 被引量:2
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作者 张翼鹜 赵丹丹 +3 位作者 韩晓蘋 海杰 达万明 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期 813-818,共6页
骨髓增生异常综合征的发病机制至今尚未明确,有研究表明MDS患者骨髓基质微环境功能的异常与其发病有关。间充质干细胞是造血微环境的重要成分,本研究拟探讨低危MDS患者间充质干细胞(MSC)的生物学特性及功能.采集低危MDS患者的骨髓... 骨髓增生异常综合征的发病机制至今尚未明确,有研究表明MDS患者骨髓基质微环境功能的异常与其发病有关。间充质干细胞是造血微环境的重要成分,本研究拟探讨低危MDS患者间充质干细胞(MSC)的生物学特性及功能.采集低危MDS患者的骨髓标本,分离、培养和扩增MSC,观察细胞形态,进行免疫表型、成骨分化能力鉴定,检测其增殖能力及对体外造血的支持功能;用实时定量RT—PCR法测定MSC中相关细胞因子及化学趋化因子的表达,并与健康供者的MSC进行比较。结果表明:培养低危MDS患者的MSC呈典型的成纤维细胞样,细胞表达SH2(CD105),SH3(CD73),Thy—1(CD90),CD34及CD45均为阴性,诱导后可向成骨细胞分化。其体外扩增能力与与健康供者相比无显著差异(P〉0.05),但体外支持造血功能较后者显著减低(P〈0.05)。实时定量PT—PCR显示SDF—1在低危MDS患者MSC中显著高表达(P〈0.01)。结论:间充质干细胞的功能异常与低危MDS患者骨髓微环境的造血调控失常相关,这为MDS发病机制的认识及治疗提供了新的思路,值得进一步探讨。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 低危骨髓增生异常综合征 间充质干细胞 造血微环境 SDF-1 生物学特性
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异基因外周血造血干细胞移植治疗急性非淋巴细胞白血病合并肾细胞癌切除术后1例 预览 被引量:2
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作者 朱海燕 达万明 +6 位作者 高春记 韩晓萍 王书红 靖彧 薄剑 海杰 李猛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期 203-206,共4页
本研究探索异基因造血干细胞移植治疗急性非淋巴细胞白血病合并肾细胞癌切除术后患者的有效性与安全性。对1例急性非淋巴细胞白血病合并肾细胞癌患者术后施行了清髓性HLA全相合的异基因外周血造血干细胞移植,预处理方案为全身照射、环... 本研究探索异基因造血干细胞移植治疗急性非淋巴细胞白血病合并肾细胞癌切除术后患者的有效性与安全性。对1例急性非淋巴细胞白血病合并肾细胞癌患者术后施行了清髓性HLA全相合的异基因外周血造血干细胞移植,预处理方案为全身照射、环磷酰胺及阿糖胞苷,移植物抗宿主病预防方案为环孢霉素A、霉酚酸酯及短程甲氨蝶呤。收集相关临床和随访资料进行分析。结果显示,该患者移植后第16天造血重建,第30天及第100天STR-PCR法检测为完全供者型嵌合,未发生急性或慢性GVHD,无严重并发症,随访44个月无病生存。结论:异基因造血干细胞移植治疗急性非淋巴细胞白血病合并肾细胞癌是可行而有效的。 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 急性非淋巴细胞白血病 肾细胞癌
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动员外周血造血干细胞移植物中同时高效去除T/B细胞的体外研究 预览 被引量:2
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作者 肖娟 李红华 +5 位作者 金香淑 海杰 富丽烨 高春记 韩晓蓣 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1126-1129,共4页
单倍体相合造血干细胞移植时,去除移植物中的T细胞和B细胞可减少移植物抗宿主病和EBV相关的淋巴细胞增殖性疾病的发生。本研究在国内首次应用CliniMACS系统,通过CD3/CD19磁珠抗体同时有效地去除动员外周血造血干细胞中的T细胞和B细... 单倍体相合造血干细胞移植时,去除移植物中的T细胞和B细胞可减少移植物抗宿主病和EBV相关的淋巴细胞增殖性疾病的发生。本研究在国内首次应用CliniMACS系统,通过CD3/CD19磁珠抗体同时有效地去除动员外周血造血干细胞中的T细胞和B细胞。用流式细胞术检测移植物中T细胞和B细胞的去除效率,以集落形成实验评价去除后的干细胞功能。结果表明:T细胞和B细胞去除之前单个核细胞总数为4.88×10^10,去除之后移植物中T细胞比例为0.02%,去除4.4Log;B细胞比例不到0.01%,至少去除3.3Log。移植物中除CD34^+细胞外。还包括NK细胞,单核细胞和粒细胞。CD34^+细胞纯度为0.98%,计数1.84×10^8,回收率为69.7%;NK细胞计数2.54×10^9,回收率为71.7%。集落形成实验显示CD3/CD19去除对造血干细胞功能无影响。结论:应用CliniMACS系统可有效地同时去除动员外周血干细胞中的T细胞和B细胞,且不影响造血干细胞的生物学功能,此项研究为去除T/B细胞的单倍体相合造血干细胞移植提供了技术平台。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 单倍体相合移植 T细胞去除 B细胞去除
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非霍奇金淋巴瘤52例免疫表型分析 预览
10
作者 李珍 唐菊英 +1 位作者 海杰 李红华 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2007年第4期,共2页
非霍奇金淋巴瘤(NHL)是淋巴结或淋巴结外淋巴组织的恶性肿瘤,根据免疫表型可以分为B细胞和T/NK细胞来源2大类。现将本院血液科2003年2月至2006年1月收治的NHL52例的免疫表型分析报道如下。1临床资料1.1一般资料52例中,男33例,女19例,年... 非霍奇金淋巴瘤(NHL)是淋巴结或淋巴结外淋巴组织的恶性肿瘤,根据免疫表型可以分为B细胞和T/NK细胞来源2大类。现将本院血液科2003年2月至2006年1月收治的NHL52例的免疫表型分析报道如下。1临床资料1.1一般资料52例中,男33例,女19例,年龄19~81岁,中位年龄51岁。其中B细胞淋巴瘤37例,T细胞及NK细胞淋巴瘤15例。患者均为初治,髂后上棘抽取骨髓3~4mL,肝素抗凝,快速混匀,进行免疫表型检测。穿刺或切除肿大的淋巴结做病理检测。1.2免疫表型检测抗体及试剂均购自美国BD公司。直接荧光标记法标记相关抗体,包括CD2,CD5,CD7,CD10,CD19,CD20,CD22,CD23,CD25,CD56,CD57,HLA-DR,cCD3,cCD79a。用流式细胞仪检测,CD45/SSC设门方法确定目标群,计算阳性细胞百分率,阳性T或B细胞百分率>20%为阳性(+)。1.3结果免疫表型分析结果见表1,2。表137例B细胞NHL免疫表型例类型nCD10CD19CD5CD20CD22CD23CD25HLA-DR cCD79a弥漫大B细胞淋巴瘤166100141100016B小细胞淋巴瘤805246... 展开更多
关键词 淋巴瘤 免疫表型 临床分析
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急性移植物抗宿主病病人Th细胞亚群变化及其临床意义 预览 被引量:1
11
作者 王书红 达万明 +3 位作者 海杰 靖彧 苏荣 阮秀霞 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期 805-808,共4页
本研究探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)时Th细胞亚群的数量变化及其临床意义。观察了23例allo-HSCT患者aGVHD的发病情况,aGVHD的诊断主要依据临床表现,对部分病例进行了皮肤活检,取得病理学依据。... 本研究探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)时Th细胞亚群的数量变化及其临床意义。观察了23例allo-HSCT患者aGVHD的发病情况,aGVHD的诊断主要依据临床表现,对部分病例进行了皮肤活检,取得病理学依据。移植前后定期采集23例患者的外周血,采用流式细胞仪检测其Th细胞亚群Th1、Th2细胞比例的变化。结果表明:23例患者8例发生了aGVHD,其中3例Ⅰ度,2例Ⅱ度,3例Ⅲ度aGVHD,15例未发生aGVHD。流式细胞术检测显示,发生aGVHD患者的Th1细胞量明显高于未发生aGVHD患者(p〈0.01),Ⅱ-Ⅲ度aGVHD患者Th1细胞的IFN-γ表达明显高于未发生aGVHD患者(p〈0.01),而Th2细胞的IL-4表达明显低于未发生aGVHD患者,动态观察发现在aGVHD发生前和发生后未治疗的患者Th1细胞明显增高,治疗后明显下降,而未发生aGVHD的患者移植前后Th1细胞量变化不大。结论:发生aGVHD患者Th1细胞明显增多,且这种增多与aGVHD有关。因此,移植后早期动态监测Th细胞亚群Th1量的变化有助于aGVHD的诊治。 展开更多
关键词 急性移植物抗宿主病 异基因造血干细胞移植 TH1细胞 TH2细胞
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异基因外周血干细胞移植供者动员后淋巴细胞及造血干细胞的变化 预览
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作者 海杰 唐菊英 +7 位作者 李猛 朱海燕 李晓红 孙敬芬 赵瑜 韩晓蘋 高春记 于力 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2007年第6期 424-425,共2页
目的:观察异基因外周血干细胞移植供者动员前后淋巴细胞亚群及造血干细胞的变化。方法:粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员外周血,直接免疫荧光法标记淋巴细胞和CD34细胞,用流式细胞仪检测其表达情况,甲基纤维素半固体培养基进行CFU-G... 目的:观察异基因外周血干细胞移植供者动员前后淋巴细胞亚群及造血干细胞的变化。方法:粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员外周血,直接免疫荧光法标记淋巴细胞和CD34细胞,用流式细胞仪检测其表达情况,甲基纤维素半固体培养基进行CFU-GM培养评价干细胞克隆生成能力。结果:rhG-CSF动员后淋巴细胞亚群与动员前相比无明显变化,CD34+细胞由动员前的0.12±0.08增加到0.83±0.26,CFU-GM有动员前的12±6增加到102±16。结论:正常供者外周血动员后CD34+细胞明显增加,淋巴细胞无明显变化。 展开更多
关键词 外周血干细胞移植 粒细胞集落刺激因子 淋巴细胞 造血干细胞动员
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应用粒细胞集落刺激因子动员的外周血体外扩增内皮祖细胞 预览 被引量:2
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作者 董蔚 盖鲁粤 +3 位作者 海杰 顾峥 宋欣 张苗 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2007年第5期 332-334,共3页
目的探讨从正常人经粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony simulating factor, G-CSF)动员的外周血中分离扩增内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)。方法经G-CSF动员后,富集的外周血单个核细胞(peripheral blood mo... 目的探讨从正常人经粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony simulating factor, G-CSF)动员的外周血中分离扩增内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)。方法经G-CSF动员后,富集的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMNC)贴壁培养法定向扩增EPCs,免疫组织化学染色和荧光标记鉴定其内皮细胞特性。流式细胞仪检测细胞表面标记物变化。结果获得的贴壁细胞数为(8.825±2.958)个/100个PBMNC,具有多种内皮细胞特征,血管性假血友病因子阳性,同时结合剂豆凝集素Ⅰ并内吞乙酰化低密度脂蛋白呈红绿荧光双染色。培养后血细胞标记物减少,内皮细胞标记物增加(P〈0.01)。结论从G-CSF动员的外周血中可获得较多数量EPCs,并具有多种内皮细胞特征。 展开更多
关键词 粒细胞集落刺激因子 内皮祖细胞 流式细胞术 免疫组织化学
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汉族健康人群KIR分布对异基因造血干细胞移植供者选择的影响 预览 被引量:1
14
作者 窦立萍 达万明 +8 位作者 王畅 康慧媛 高春记 李晓红 李猛 韩晓萍 赵瑜 海杰 于力 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第32期 4-6,共3页
目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)在中国人群中的分布规律及其对异基因造血干细胞移植供者选择的影响。方法采用序列特异性引物PCR(PCR-SSP)分型技术检测了79例汉族人群中KIR的基因型分布、74例异基因造血干细胞移植供受者对... 目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)在中国人群中的分布规律及其对异基因造血干细胞移植供者选择的影响。方法采用序列特异性引物PCR(PCR-SSP)分型技术检测了79例汉族人群中KIR的基因型分布、74例异基因造血干细胞移植供受者对KIR及HLA基因型。结果KIR2DL1的基因分布频率为100%,KIR2DL2为20%,KIR2DL3为100%,KIR3DLI为94.81%。95.9%的供者携带与异基因造血干细胞移植关系密切的三组KIR受体。结论汉族人群具有独特的KIR分布规律,KIR2DL1、KIR3DL1是在中国人群异基因造血干细胞移植中起主要作用的KIR受体。 展开更多
关键词 受体 杀伤细胞 免疫球蛋白样 造血干细胞移植 组织相容性抗原
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STR-PCR分析嵌合体在同种异基因造血干细胞移植中的应用 预览 被引量:9
15
作者 孙敬芬 韩晓苹 +5 位作者 赵丹丹 汪菲菲 海杰 高春记 达万明 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期 337-341,共5页
利用荧光标记的多重PCR扩增短串联重复序列(STR-PCR)结合毛细管电泳检测供者细胞嵌合率(DC),以探讨该方法的连续检测对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后转归的预警作用,采集27例清髓性外周血干细胞移植患者移植前、移植后不同... 利用荧光标记的多重PCR扩增短串联重复序列(STR-PCR)结合毛细管电泳检测供者细胞嵌合率(DC),以探讨该方法的连续检测对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后转归的预警作用,采集27例清髓性外周血干细胞移植患者移植前、移植后不同时段的外周血或骨髓,DNA样本用Profiler Plus和Cofiler Plus商品化试剂盒扩增后,用ABI310遗传分析仪进行毛细管电泳,确定基因位点及峰面积,根据基因型的差异选择嵌合率计算公式。结果表明:两种试剂盒测得的DC嵌合率一致;在27对中能区别出供受差别的STR位点,Profiler Plus为6.3(4-9)个,Cofiler Plus为4.9(2-6)个。26例患者均在移植后28天出现供者细胞,1例患者未出现供者细胞。14例患者DC100%,均获得持久植入,至今仍无白血病生存;另有9例患者出现不稳定混合嵌合(MC)状态(DC为0%-90.2%),其中5例为血液学复发。27例病人中有6例死亡。上述5例复发患者均在出现临床症状前发生DC量下降;供者细胞完全嵌合组移植物抗宿主病(GVHD)的发生率高于MC组。结论:动态检测DC可用于移植动力学研究,对移植物早期植入或被排斥、疾病复发以及GVHD的发生均有预警作用,对早期实施临床干预治疗有重要的指导意义。 展开更多
关键词 同种异基因造血干细胞移植 STR—PCR 毛细管电泳 嵌合体
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非血缘关系异基因造血干细胞移植临床分析
16
作者 李红华 于力 +10 位作者 高春记 达万明 靖玉 薄剑 王书红 黄文荣 朱海燕 张翼卓 韩晓萍 海杰 张伯龙 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第S1期118-119,共2页
目的对解放军总医院血液科27例行非血缘关系异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的血液病患者进行移植疗效分析并探索改善移植效果的措施。方法 2001年7月至2006年10月我院完成的非血缘关系异基因造血干细胞移植27例,其中男18例,女9例,... 目的对解放军总医院血液科27例行非血缘关系异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的血液病患者进行移植疗效分析并探索改善移植效果的措施。方法 2001年7月至2006年10月我院完成的非血缘关系异基因造血干细胞移植27例,其中男18例,女9例,中位年龄32(13~50)岁。包括急性白血病(AL)16例,慢性粒细胞白血病 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 血缘关系 慢性粒细胞白血病 血液病患者 急性白血病 疗效分析 外周血干细胞移植 移植物抗宿主病 移植效果 分子生物学
异基因外周血造血干细胞移植后迟发性非感染性肺部合并症的临床研究 预览 被引量:2
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作者 张翼鷟 高春记 +10 位作者 张伯龙 达万明 韩晓蘋 李红华 靖彧 黄文荣 薄剑 王书红 朱海燕 海杰 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期 632-635,共4页
本研究探讨异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)后迟发性非感染性肺部合并症(late-onset nonin-fectious pulmonary complications,LNIPC)的发生、危险因素、预后及治疗方法。对70例allo-PBSCT患者的临床资料进行了回顾性分析... 本研究探讨异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)后迟发性非感染性肺部合并症(late-onset nonin-fectious pulmonary complications,LNIPC)的发生、危险因素、预后及治疗方法。对70例allo-PBSCT患者的临床资料进行了回顾性分析。结果发现:在存活超过3个月的63例患者中,9例发生了LNIPC,发生率为14.3%,其中5例并发感染,由LNIPC导致死亡者4例。移植时疾病处于晚期及慢性广泛性GVHD与LNIPC的发生显著相关;性别、年龄、预处理方案的选择、HLA相合程度及GVHD的预防等均与该并发症的发生无明显相关。结论:移植后定期监测胸部CT、肺功能等甚为必要,对LNIPC早期诊断者采用强的松复合或不复合环孢菌素A治疗,其中多数患者能获缓解。 展开更多
关键词 异基因外周血造血干细胞移植 迟发性非感染性肺部并发症 移植物抗宿主病
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低浓度二甲基亚砜冻存外周血造血干细胞的效果 预览 被引量:4
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作者 海杰 唐菊英 +5 位作者 孙敬芬 赵丹丹 黄文荣 刘源 高春记 达万明 《临床血液学杂志》 2006年第6期 350-351,共2页
目的:观察外周血造血干细胞(PBSC)用低浓度二甲基亚砜(DMSO)和羟乙基淀粉(HES)在-80℃条件下冷冻保存的效果。方法:49例次患者的PBSC在冻存后3、6个月及1年进行复苏,分别取样进行有核细胞(NC)计数、锥虫蓝拒染率测定、CD34... 目的:观察外周血造血干细胞(PBSC)用低浓度二甲基亚砜(DMSO)和羟乙基淀粉(HES)在-80℃条件下冷冻保存的效果。方法:49例次患者的PBSC在冻存后3、6个月及1年进行复苏,分别取样进行有核细胞(NC)计数、锥虫蓝拒染率测定、CD34’细胞阳性率分析和粒-巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)检测。结果:PBSC在-80℃冰箱中冻存3个月和6个月的NC、CD34^+细胞、CFU-GM回收率的差异均无统计学意义(均P〉0.05),NC活细胞比率差异也无统计学意义(P〉O.05)。PBSC冻存1年NC、CD34^+细胞、CFU—GM集落回收率及活细胞比率均有显著性下降(均P〈0.01)。结论:应用低浓度DMSO在-80℃冻存PBSC3个月和6个月的细胞能得到较好保存,1年后的冻存效果显著下降。 展开更多
关键词 外周血造血干细胞 二甲基亚砜 羟乙基淀粉
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非体外循环冠状动脉旁路移植术后造血干细胞动员的临床研究 预览
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作者 王立新 高长青 +3 位作者 王奇 海杰 李宁 王姗 《中国胸心血管外科临床杂志》 2006年第6期 382-385,共4页
目的研究非体外循环冠状动脉旁路移植术(OPCAB)后造血干细胞动员的规律及影响因素。方法对55例择期行OPCAB、近期无急性心肌梗死患者,分别于术前30min、术后6、12、24、48、72和120h采外周静脉血4ml,CD34和CD45双抗标记、流式细胞... 目的研究非体外循环冠状动脉旁路移植术(OPCAB)后造血干细胞动员的规律及影响因素。方法对55例择期行OPCAB、近期无急性心肌梗死患者,分别于术前30min、术后6、12、24、48、72和120h采外周静脉血4ml,CD34和CD45双抗标记、流式细胞仪检测造血干细胞计数,同时检测心肌酶谱及肌钙蛋白T的变化。结果冠心病患者术前造血干细胞计数占外周血有核细胞数计数的0.13%±0.12%,OPCAB后明显升高,24h达到峰值(O.34%±0.20Vo),术后120h回到术前基线水平;吸烟、高血脂、糖尿病对造血干细胞动员无明显影响,但合并高血压病患者外周血造血干细胞动员明显低于无高血压病患者;术后24h造血干细胞动员与肌酸激酶及肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶、肌钙蛋白T呈正相关(r=0.692,P=0.000;r=0.558,P=0.000;r=0.447,P=0.000;r=0.401,P=0.004).结论OPCAB术后造血干细胞快速、短暂动员,心肌损伤程度、冠心病危险因素参与了造血干细胞动员的调节。 展开更多
关键词 造血干细胞 动员 冠状动脉旁路移植术
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双色双融合荧光原位杂交检测成人急性淋巴细胞白血病BCR—ABL基因重排 被引量:6
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作者 郭搏 达万明 +4 位作者 韩晓萍 赵丹丹 海杰 王可 唐菊英 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期 902-905,共4页
目的探讨双色双融合荧光原位杂交探针(dual—color-dual-fusion fluorescence in situ hybridization,DC-DF-FISH)在成人急性淋巴细胞白血病BCR-ABL基因重组中的应用价值。方法选择本院诊断的26例急性淋巴细胞白血病,采用流式细胞... 目的探讨双色双融合荧光原位杂交探针(dual—color-dual-fusion fluorescence in situ hybridization,DC-DF-FISH)在成人急性淋巴细胞白血病BCR-ABL基因重组中的应用价值。方法选择本院诊断的26例急性淋巴细胞白血病,采用流式细胞技术检测免疫表型、并应用常规R显带技术、双色双融合间期荧光原位杂交技术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测患者的染色体核型及BCR-ABL融合基因,并对其结果进行比较。结果26例患者中,所有检出Ph染色体及BCR-ABL基因的病例均为B细胞或T/B双表型淋巴细胞白血病,其中常规显带技术检测出Ph染色体为3例(阳性率为11.5%),经DC—DF-FISH及RT-PCR(reverse transcriptase polymerase chain reaction)检测此3例BCR-ABL基因阳性,证实此3例患者为Ph阳性的急性淋巴细胞白血病(Ph^+ALL),而对常规显带未检出Ph染色体的23例患者,DC-DF-FISH及RT-PCR检测出其中6例BCR-ABL基因阳性,说明此6例患者存在隐匿的t(9;22)。DC-DF-FISH及RT-PCR阳性检出率为34.6%(9/26)。结论双色双融合荧光原位杂交技术具有高度的准确性、可靠性,是检测ALL患者BCR-ABL基因重排的可靠方法,适用于ALL的诊断、疗效判定及微小残留病灶的检测。 展开更多
关键词 白血病 淋巴细胞 急性 原位杂交 荧光 基因 BCR-ABL 费城染色体
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