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结肠镜反转技术与再次直视退镜观察对右半结肠腺瘤检出率的影响
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作者 王洪丽 张海辉 +2 位作者 杨玉秀 李修岭 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第1期72-74,共3页
目的探讨内镜反转技术和再次直视退镜观察在右半结肠腺瘤检查中的价值。方法行结肠镜检查患者1 080例,随机分为内镜反转组552例和直视退镜组528例,常规结肠镜检查后,内镜反转组采用反转退镜技术,直视退镜组采用再次直视退镜法对右半结... 目的探讨内镜反转技术和再次直视退镜观察在右半结肠腺瘤检查中的价值。方法行结肠镜检查患者1 080例,随机分为内镜反转组552例和直视退镜组528例,常规结肠镜检查后,内镜反转组采用反转退镜技术,直视退镜组采用再次直视退镜法对右半结肠进行观察,记录内镜反转组反转成功率,比较2组二次退镜操作难易度、右半结肠息肉及腺瘤常规检出率、反转或再次退镜检出率、总检出率及对不同直径腺瘤的检出率。结果内镜反转组反转成功率为94.02%,未发生出血、穿孔等并发症;2组二次退镜操作难易度比较差异无统计学意义(P>0.05);内镜反转组右半结肠息肉、腺瘤常规检出率(11.37%、3.28%)、反转或再次退镜检出率(4.82%、3.08%)、总检出率(16.18%、6.36%)与直视退镜组(10.23%、2.84%;4.17%、2.65%;14.39%、5.49%)比较差异均无统计学意义(P>0.05);内镜反转组、直视退镜组右半结肠息肉、腺瘤总检出率均高于常规检出率(P<0.05);2组常规与内镜反转/退镜对不同直径腺瘤的检出率比较差异均无统计学意义(P>0.05),内镜反转组内镜反转与直视退镜组再次退镜对不同直径腺瘤的检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论结肠镜反转技术及再次退镜观察均可提高右半结肠腺瘤检出率,且不受腺瘤直径的影响。 展开更多
关键词 结肠腺瘤 结肠镜 内镜反转 直视退镜 息肉 右半结肠
唑来膦酸联合阿法骨化醇和钙剂治疗骨质疏松的临床疗效分析 预览
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作者 雷雷 郑瑞芝 +2 位作者 陈艳 王燕燕 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期233-235,276共4页
目的分析唑来膦酸联合阿法骨化醇和钙剂治疗骨质疏松的临床疗效。方法收集2015年4月至2018年4月我院收治的102例骨质疏松患者,采用随机数字表法分为对照组(51例,单纯钙剂治疗)和试验组(51例,唑来膦酸+阿法骨化醇+钙剂治疗),从骨密度、VA... 目的分析唑来膦酸联合阿法骨化醇和钙剂治疗骨质疏松的临床疗效。方法收集2015年4月至2018年4月我院收治的102例骨质疏松患者,采用随机数字表法分为对照组(51例,单纯钙剂治疗)和试验组(51例,唑来膦酸+阿法骨化醇+钙剂治疗),从骨密度、VAS评分、生活质量等方面评价疗效。结果治疗后试验组骨密度显著较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);试验组VAS评分显著低于对照组的,差异有统计学意义(P<0.05);试验组生活质量评分显著较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论唑来膦酸联合阿法骨化醇和钙剂可有效提高骨质疏松患者骨密度,缓解疼痛症状,改善生活质量。 展开更多
关键词 唑来膦酸 阿法骨化醇 钙剂 骨质疏松 骨密度
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350例溃疡性结肠炎患者临床特征分析 预览
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作者 刘博伟 肖伟 +8 位作者 贾航 兰玲 袁媛 张玲娟 梁宝松 张昊 李健 李修岭 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第1期92-95,共4页
目的回顾性调查350例住院溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者,分析其临床特征。方法回顾性分析UC患者性别、年龄、肠镜表现、临床表现、病变分布、严重程度分级及治疗效果等临床资料。结果350例UC患者中,男191例(54.6%),女159例(4... 目的回顾性调查350例住院溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者,分析其临床特征。方法回顾性分析UC患者性别、年龄、肠镜表现、临床表现、病变分布、严重程度分级及治疗效果等临床资料。结果350例UC患者中,男191例(54.6%),女159例(45.4%),男女性别比为1.2∶1,年龄(47.0±15.7)岁。按每年收治UC患者数统计,总体呈递增的趋势,2017年UC住院数是2013年的3.3倍。主要临床表现:腹痛237例(67.7%),腹泻309例(88.3%),黏液脓血便298例(85.1%),里急后重280例(80.0%)。病情严重程度分级:轻度120例(36.9%),中度96例(29.5%),重度109例(33.5%);病变分布范围:直肠型46例(14.2%),左半结肠型164例(50.5%),全结肠型115例(35.4%)。老年组(≥61岁)与青年组(21~40岁)病变严重程度构成比较,差异有统计学意义(χ2=10.8,P=0.005),且青年组重度UC发生率更高。不同性别病变严重程度构成比较,差异有统计学意义(χ2=7.6,P=0.02),女性重度UC发生率更高。给予5-氨基水杨酸(5-aminosalicylic acid,5-ASA)、激素及免疫抑制剂等药物治疗后好转318例(90.9%),无效32例(9.1%),其中初始治疗无效者20例(5.7%),给予生物治疗后好转,外科手术8例(2.3%),死亡3例(0.9%)。结论UC发病率有逐年升高的趋势,临床主要表现为腹痛、腹泻、脓血便及里急后重等症状;与老年组(≥61岁)相比,青年组(21~40岁)重度UC发生率更高,女性较男性患者重度UC发生率更高;病变范围以左半结肠受累较为常见,大多数对内科药物治疗反应良好。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 临床特征
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脐带间充质干细胞移植治疗终末期肝硬化的效果探析
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作者 赵小丽 《现代医学与健康研究》 2018年第12期127-128,共2页
目的本文旨在对脐带间充质干细胞移植治疗终末期肝硬化的效果进行探析。方法选取我院2016年4月至2018年2月共收治的肝硬化患者98例,将其随机分为观察组和对照组各49例。对照组采用常规内科方法给予患者免疫调节、抗炎保肝、抗纤维化药... 目的本文旨在对脐带间充质干细胞移植治疗终末期肝硬化的效果进行探析。方法选取我院2016年4月至2018年2月共收治的肝硬化患者98例,将其随机分为观察组和对照组各49例。对照组采用常规内科方法给予患者免疫调节、抗炎保肝、抗纤维化药物对症治疗;观察组在对照组基础上采用脐带间充质干细胞移植方法进行治疗。治疗8周后观察两组患者临床疗效及肝功能指标。结果治疗后观察组食欲、精神、体力都明显好转,92%(45/49)、96%(47/49)和82%(40/49)、腹水消失42例(86%),下肢水肿消失41例(84%),均明显高于对照组(P<0.05);与治疗前比较两组患者总胆红素水平(TBIL)降低明显,观察组血清白蛋白(ALB)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原水平(Fbg)均明显降低,与对照组相比,观察组ALB、TBIL、PT以及Fbg均得到明显改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脐带间充质干细胞移植术治疗终末期肝硬化临床疗效显著,能减少肝脏炎症及肝硬化程度,明显改善患者肝功能。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞移植 终末期肝硬化 肝功能
表达可溶性程序性死亡受体1溶瘤腺病毒对B16/F10细胞增殖凋亡的影响及其机制
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作者 张玉薇 刘广芝 +3 位作者 袁蒙蒙 杨广英 秦涛 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期1441-1444,共4页
目的构建表达可溶性程序性死亡受体1(sPD1)溶瘤腺病毒并研究其对B16/F10细胞增殖凋亡影响及机制。方法构建表达sPD1溶瘤腺病毒并感染B16/F10细胞株,荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术对比分析病毒复制功能,噻唑蓝(MTT)法检测重组... 目的构建表达可溶性程序性死亡受体1(sPD1)溶瘤腺病毒并研究其对B16/F10细胞增殖凋亡影响及机制。方法构建表达sPD1溶瘤腺病毒并感染B16/F10细胞株,荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术对比分析病毒复制功能,噻唑蓝(MTT)法检测重组病毒抑制B16/F10生长;注射病毒于B16/F10皮下瘤小鼠模型中,观察肿瘤体积变化,EliSpot技术检测肿瘤浸润淋巴细胞数量。结果病毒处理B16/F10细胞6、24、36、48、60、72 h后,Ad5处理组病毒拷贝数增加倍数分别是0.99±0.10、1.12±0.05、1.57±0.15、3.59±1.03、6.26±0.74、9.69±1.46;Ad5-sPD1处理组病毒拷贝增加倍数分别是1.00±0.104、0.99±0.08、1.05±0.03、3.56±1.04、6.04±0.38、11.05±1.12,两组比较差异无统计学意义(P=0.754);分别使用不同病毒量,感染复数(MOI)为0、5、10、15、20的病毒处理B16/F10细胞72 h后,Ad5处理组细胞活力为(100.00±6.39)%、(101.60±5.21)%、(98.66±7.31)%、(93.50±4.54)%、(73.16±2.45)%;Ad5-sPD1处理组细胞活力为(100.00±6.38)%、(97.10±6.37)%、(96.96±7.44)%、(95.67±7.46)%、(74.49±4.14)%,两组比较差异无统计学意义(P=0.779);Mock(无病毒感染)、Ad5和Ad5-sPD1病毒治疗B16/F10皮下瘤小鼠模型,实验终止时,肿瘤体积分别是(3 638±1.823)、(2 603±336)、(1 097±532) cm^3,差异有统计学意义(Mock和Ad5:P=0.044,Mock和Ad5-sPD1:P=0.000,Ad5和Ad5-sPD1:P=0.000)。Mock、Ad5和Ad5-sPD1病毒分别注射小鼠模型,5 d后,γ-干扰素(IFN-γ)斑点数分别是19.4±7.75、149.8±25.18、314±32.34,各组间差异有统计学意义(Mock和Ad5:P=0.000,Mock和Ad5-sPD1:P=0.000,Ad5和Ad5-sPD-1:P=0.000)。结论表达sPD1溶瘤腺病毒通过阻断免疫抑制通路,增加肿瘤特异性淋巴细胞浸润,提高溶瘤腺病毒的抗肿瘤作用,抑制肿瘤生长。 展开更多
关键词 溶瘤腺病毒 肿瘤 免疫反应 程序性死亡受体1
稳定表达EGFRvⅢ胶质瘤细胞株的建立 预览
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作者 雷舒婷 赵静静 +2 位作者 郑岩 李修岭 《中国实用医刊》 2018年第7期1-3,共3页
目的构建稳定表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的胶质瘤U87细胞株。方法首先EGFRvⅢcDNA(2832bp)克隆入pCDH-CMV-MCS-EF1-puro的XbaⅠ和NotⅠ位点,引物中添加His6标签,测序鉴定;用磷酸钙沉淀法将含目的基因的质粒pCDH-CM... 目的构建稳定表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的胶质瘤U87细胞株。方法首先EGFRvⅢcDNA(2832bp)克隆入pCDH-CMV-MCS-EF1-puro的XbaⅠ和NotⅠ位点,引物中添加His6标签,测序鉴定;用磷酸钙沉淀法将含目的基因的质粒pCDH-CMV-EGFRvⅢ-EF1-puro与慢病毒包装质粒pCMV-dR8.9和包膜蛋白质粒pVSV-G三质粒共转染293T细胞。过滤、浓缩包装好病毒后,利用稀释计数法测定病毒滴度。制备好的慢病毒感染U87细胞,经嘌呤霉素筛选、有限稀释克隆培养建立稳定表达细胞株。Western blot采用人EGFRvⅢ单抗、His6单抗检测筛选的细胞株,流式细胞术检测EGFRvⅢ在U87细胞表面的表达。结果重组质粒pCDH-EGFRvⅢ经XbaⅠ和NotⅠ双酶切、1%琼脂糖凝胶电泳,产物与预期目的基因EGFRvⅢ cDNA(2 832 bp)大小一致;Western blot鉴定6株U87-vⅢ均表达EGFRvⅢ蛋白(145 kd)和His6(145 kd);流式细胞术检测2株U87-vⅢ细胞株(U87-vⅢ-2、U87-vⅢ-4)表面均表达EGFRvⅢ蛋白(分别为93.1%、96.9%)。结论稳定表达EGFRvⅢ的U87细胞株被成功建立,为胶质瘤的靶向治疗研究提供了基础。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体 脑胶质瘤 U87
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普芦卡必利在慢性便秘患者结肠镜检查肠道准备中的应用 预览 被引量:3
7
作者 杨桃桃 杨玉秀 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2018年第1期100-104,共5页
肠道清洁程度是影响结肠镜检查质量的决定性因素。慢性便秘患者的肠道准备效果欠佳,导致肠镜检查成功率和准确性降低、镜下治疗的安全性下降。普芦卡必利(Prucalopride,PRU)是新一代高选择性、高亲和力5-羟色胺4(5-hydroxytryptamine... 肠道清洁程度是影响结肠镜检查质量的决定性因素。慢性便秘患者的肠道准备效果欠佳,导致肠镜检查成功率和准确性降低、镜下治疗的安全性下降。普芦卡必利(Prucalopride,PRU)是新一代高选择性、高亲和力5-羟色胺4(5-hydroxytryptamine 4,5-HT4)受体激动剂,可引起肠道高幅推进性收缩,加快结肠传输。许多研究已证实,PRU是治疗慢性便秘的有效药物。近年来,PRU在肠镜前肠道清理方面的应用备受关注。本文就PRU在慢性便秘患者结肠镜检查前肠道准备中的应用现状作一概述。 展开更多
关键词 普芦卡必利 聚乙二醇 结肠镜检查 肠道准备 便秘
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成胶质细胞瘤CAR-T免疫治疗的研究进展
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作者 石璐璐 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期321-328,共8页
成胶质细胞瘤是发病率高、侵袭性强、预后差的中枢神经系恶性肿瘤。自2005年FDA批准的替莫唑胺后,再无明显改善疗效的新策略。随着多形性成胶质细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)分子生物学、肿瘤免疫学与免疫治疗技术的发展,以及... 成胶质细胞瘤是发病率高、侵袭性强、预后差的中枢神经系恶性肿瘤。自2005年FDA批准的替莫唑胺后,再无明显改善疗效的新策略。随着多形性成胶质细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)分子生物学、肿瘤免疫学与免疫治疗技术的发展,以及分子靶点的发现、中枢免疫"豁免"理论的突破和基因转导与细胞技术的进步,GBM治疗迎来了免疫治疗的新跨越。以嵌合抗原受体修饰T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cell,CAR-T)为代表的细胞免疫治疗,在靶向EGFRvⅢ、IL-13Rα2、HER2、促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(erythropoietin-producing hepatocellular carcinoma A2,Eph A2)的GBM体外实验、动物模型及临床试验中都展示了良好的应用前景。然而,GBM的分子异质性、免疫抑制微环境、血脑屏障等为CAR-T进入一线治疗提出了挑战。研究者们正在探索肿瘤恶性表型所必需的新靶点、防止免疫逃逸的最优靶抗原组合,致力于提高CAR-T血脑屏障穿越和肿瘤组织侵润的能力,寻找最佳注射途径和治疗方案,同时逐步完善中枢神经肿瘤免疫治疗评估体系。相信CAR-T免疫治疗的突破终将为GBM患者向往美好生活圆梦。 展开更多
关键词 成胶质细胞瘤 免疫治疗 嵌合抗原受体
EGFRvⅢ/CAR-T对EGFRvⅢ^+U87胶质瘤细胞和裸鼠移植瘤的特异性杀伤作用 被引量:1
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作者 郑岩 谢甲贝 +3 位作者 曹名波 张炳勇 李修岭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期334-339,共6页
目的:制备靶向EGFRvⅢ的第三代CAR-T(EGFRvⅢ/3CAR-T),检测其在体外和体内对EGFRvⅢ+U87胶质瘤细胞的特异性杀伤效应。方法:用磷酸钙沉淀法将三质粒共转染HEK293T细胞包装EGFRvⅢ/3CAR慢病毒(LV-EGFRvⅢ/3CAR),感染健康人CD3+T... 目的:制备靶向EGFRvⅢ的第三代CAR-T(EGFRvⅢ/3CAR-T),检测其在体外和体内对EGFRvⅢ+U87胶质瘤细胞的特异性杀伤效应。方法:用磷酸钙沉淀法将三质粒共转染HEK293T细胞包装EGFRvⅢ/3CAR慢病毒(LV-EGFRvⅢ/3CAR),感染健康人CD3+T细胞,Western blotting和流式细胞术检测T细胞中EGFRvⅢ/3CAR的表达水平,51Cr释放法检测EGFRvⅢ/3CART对EGFRvⅢ+U87细胞的体外杀伤效应,ELISA法检测EGFRvⅢ/3CAR+T的IFN-γ分泌水平。构建裸鼠异种胶质瘤移植模型,检测EGFRvⅢ/3CAR-T对移植瘤的体内杀伤活性。结果:EGFRvⅢ/3CAR慢病毒包装成功,滴度值为5×10^6TU/ml。Western blotting在相对分子质量58 000处检测到EGFRvⅢ/3CAR表达,未转导组无相同分子量蛋白表达。流式细胞术检测结果显示EGFRvⅢ/3CAR转导效率平均为52.3%,^51Cr释放法检测EGFRvⅢ/3CAR-T特异性杀伤作用与E∶T值(E∶T为4∶1、为8∶1、16∶1、32∶1)呈正比关系。ELISA法检测到细胞因子IFN-γ分泌量为(1 836±148.2)pg/ml,与NT T和GFP+T细胞相比差异有统计学意义(P〈0.01)。EGFRvⅢ/3CAR+T细胞的特异性杀伤活性及IFN-γ分泌均依赖于EGFRvⅢ在U87细胞中的表达水平。体内肿瘤生长检测结果显示,注射后3周EGFRvⅢ/3CAR+T组肿瘤体积较GFP+T细胞和PBS组差异有统计学意义(P〈0.01)。结论:EGFRvⅢ/3CAR-T在体外和体内均能发挥靶向杀伤EGFRvⅢ+脑胶质瘤细胞的作用,为后续临床试验提供依据。 展开更多
关键词 EGFRvⅢ 嵌合抗原受体 胶质瘤 U87细胞 免疫治疗
盐酸千金藤碱抑制肝癌肾脏、睾丸转移及其分子机制
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作者 张立达 房新辉 +2 位作者 杨玉秀 白阳秋 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第13期1192-1197,共6页
目的 通过裸鼠肝原位移植荧光人肝癌细胞,观察肝癌细胞肾脏、睾丸转移情况,并探讨盐酸千金藤碱抑制肝癌细胞转移及其分子机制。方法 采用慢病毒转染构建稳定表达荧光素酶基因的人肝癌细胞SMCC-7721-Luc。BALB/c裸鼠皮下接种SMCC-7721-Lu... 目的 通过裸鼠肝原位移植荧光人肝癌细胞,观察肝癌细胞肾脏、睾丸转移情况,并探讨盐酸千金藤碱抑制肝癌细胞转移及其分子机制。方法 采用慢病毒转染构建稳定表达荧光素酶基因的人肝癌细胞SMCC-7721-Luc。BALB/c裸鼠皮下接种SMCC-7721-Luc细胞,待肿瘤长至100 mm3左右,取皮下瘤植入裸鼠肝脏包膜,建立裸鼠原位肝癌模型。裸鼠腹腔注射盐酸千金藤碱,用小动物活体成像系统观察肝原位肿瘤肾脏、睾丸转移情况。给药21 d后,解剖取肿瘤组织,Western blot检测相关蛋白表达,同时取肝脏、肾脏、睾丸等组织,用10%中性甲醛固定,进行病理分析。结果 构建的SMCC-7721-Luc细胞能稳定表达Luc基因,裸鼠肝原位接种该细胞后产生较强、稳定的荧光。活体成像系统显示盐酸千金藤碱能抑制裸鼠原位肝癌向肾脏、睾丸转移,与其降低MMP-7和N-cadherin蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达有关。结论 盐酸千金藤碱通过调控MMP-7、N-cadherin和E-cadherin蛋白抑制原位肝癌向肾脏、睾丸转移。 展开更多
关键词 盐酸千金藤碱 人肝癌细胞 基质金属蛋白酶 钙粘素
肠道菌群紊乱在老龄小鼠POCD发生中的作用:与小肠Treg细胞和Th1/Th2细胞的关系
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作者 伍晓莹 王广治 +1 位作者 刘胜群 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期1318-1321,共4页
目的评价肠道菌群紊乱在老龄小鼠术后认知功能障碍(POCD)发生中的作用及其与小肠Treg细胞和Th1/Th2细胞的关系。方法SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠36只,体重45~50g,18月龄,采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、POCD组和POCD-VSL#3... 目的评价肠道菌群紊乱在老龄小鼠术后认知功能障碍(POCD)发生中的作用及其与小肠Treg细胞和Th1/Th2细胞的关系。方法SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠36只,体重45~50g,18月龄,采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、POCD组和POCD-VSL#3组(PV组)。POCD组和PV组采用腹腔探查术制备小鼠POCD模型;PV组于术后立即开始灌胃VSL#3(300μl/次,1次/d),间隔24h,连续7d。术后7d时采用Morris水迷宫实验测定认知功能。Morris水迷宫实验结束后采集眼眶静脉血,随后处死小鼠取小肠和海马组织,采用流式细胞仪法检测小肠黏膜固有层和血浆CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg、TCD4^+IFN-γ^+Th1及CD4^+IL-4^+Th2细胞百分比;采用RT-PCR法检测小肠黏膜固有层、血浆和海马IL-4mRNA与IFN-γmRNA表达,并计算比值。结果与C组比较,POCD组小肠黏膜固有层和血浆CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg和CD4^+IL-4^+Th2细胞百分比减少,CD4^+IFN-γ^+Th1细胞百分比增加,小肠黏膜固有层、血浆和海马IL-4mRNA表达下调,IFN-γmRNA表达上调,IL-4mRNA/IFN-γmRNA比值减小,逃避潜伏期和游泳距离延长,目标象限停留时间缩短(P<0.05);与POCD组比较,PV组小肠黏膜固有层和血浆CD4+CD25+Foxp3^+Treg和CD4^+IL-4^+Th2细胞百分比增多,CD4^+IFN-γ^+Th1细胞百分比减少,小肠黏膜固有层、血浆和海马IL-4mRNA表达上调,IFN-γmRNA表达下调,IL-4mRNA/IFN-γmRNA比值增加,逃避潜伏期和游泳距离缩短,目标象限停留时间延长(P<0.05)。结论肠道菌群紊乱促进了老龄小鼠POCD的发生,与小肠Treg细胞百分比减少和Th1/Th2细胞比例失调有关。 展开更多
关键词 肠杆菌科 T淋巴细胞 调节性 T淋巴细胞 辅助诱导 认知障碍 老年人
汉族结直肠癌患者胞苷脱氨酶基因单核苷酸多态性与卡培他滨治疗不良反应的关系
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作者 王鑫 谢甲贝 +4 位作者 曹名波 张延瑞 王春荣 李修岭 《中华实用诊断与治疗杂志》 2018年第5期489-493,共5页
目的检测汉族人群结直肠癌患者胞苷脱氨酶(cytidine deaminase,CDA)基因rs3215400、rs532545位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),评估其与卡培他滨治疗不良反应的关系。方法汉族结直肠癌患者62例,均接受卡培... 目的检测汉族人群结直肠癌患者胞苷脱氨酶(cytidine deaminase,CDA)基因rs3215400、rs532545位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),评估其与卡培他滨治疗不良反应的关系。方法汉族结直肠癌患者62例,均接受卡培他滨单药或联合奥沙利铂方案化疗至少2个周期,依据美国国家癌症研究所常见不良反应事件评价标准评估卡培他滨治疗不良反应,包括手足综合征(hand foot syndrome,HFS)、腹泻、中性粒细胞减少症。化疗2个周期时,采集患者静脉血提取基因组DNA,采用高通量测序技术检测CDA基因rs532545、rs3215400位点SNP并计算突变率,比较rs532545、rs3215400位点不同基因型不良反应差异,在显性模型、隐性模型中分析CDA基因rs532545、rs3215400位点不同基因型发生不良反应的风险。结果 62例结直肠癌患者,CDA基因rs532545位点基因型野生型(G/G)50例,杂合突变型(A/G)12例,突变率为19.4%;CDA基因rs3215400位点基因型野生型(-/-)18例,杂合突变型(-/C)30例,纯合突变型(C/C)14例,突变率为71.0%;化疗2个周期时,CDA基因rs532545位点野生型(G/G)0∽1级HFS发生率(36.0%)高于杂合突变型(A/G)(0)(P〈0.05),2∽4级HFS发生率(64.0%)低于杂合突变型(A/G)(100.0%)(P〈0.05),腹泻、中性粒细胞减少症发生率与杂合突变型(A/G)比较差异均无统计学意义(P〉0.05);化疗2个周期时,CDA基因rs3215400位点野生型(-/-)0∽1级HFS发生率(5.6%)低于杂合突变型(-/C)(53.3%),2∽4级HFS发生率(94.4%)高于杂合突变型(-/C)(46.7%)(P〈0.05);野生型(-/-)0∽1级及2∽4级HFS发生率与纯合突变型(C/C)(7.1%、92.9%)比较差异无统计学意义(P〉0.05);野生型(-/-)、杂合突变型(-/C)及纯合突变型(C/C)腹泻、中性粒细胞减少症发生率比较差异均无统计学意义(P〉0.05);在显性模型中,CDA基因rs53 展开更多
关键词 结直肠癌 胞苷脱氨酶 卡培他滨 基因多态性 汉族
EGFRvⅢ与成胶质细胞瘤的免疫治疗
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作者 武俊超 鲁迪 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期441-446,共6页
表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor variantⅢ,EGFRvⅢ)是EGFR最常见的突变体,在30%成胶质细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)中表达。EGFRvⅢ源于外显子2~7的缺失导致了受体的组成性激活,与肿瘤的... 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor variantⅢ,EGFRvⅢ)是EGFR最常见的突变体,在30%成胶质细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)中表达。EGFRvⅢ源于外显子2~7的缺失导致了受体的组成性激活,与肿瘤的发生、发展和不良预后密切相关。EGFRvⅢ独特的甘氨酸位点为靶向治疗提供了理想的分子靶点,针对EGFRvⅢ的免疫治疗策略在杀灭GBM细胞、抑制进展和侵袭等方面有着巨大的潜在价值,多肽/DC疫苗、治疗性抗体、小分子抑制剂、过继细胞免疫治疗等在实验室和临床都取得了令人鼓舞的结果,本文对EGFRvⅢ的特点及GBM免疫治疗的研究进展予以评述。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体 成胶质细胞瘤 免疫治疗
γc家族细胞因子对体外培养T细胞表型的影响
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作者 赵静静 雷舒婷 +2 位作者 郑岩 李修岭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期475-479,共5页
目的:探讨γc家族细胞因子对体外培养T细胞表型的影响,为过继免疫治疗体外细胞制备提供实验依据。方法:采用健康人外周静脉血单个核细胞(PBMC),应用尼龙毛柱法、CD3磁珠阳性分选法、CD3磁珠阴性分选法和自然沉降法等4种方法分选T细... 目的:探讨γc家族细胞因子对体外培养T细胞表型的影响,为过继免疫治疗体外细胞制备提供实验依据。方法:采用健康人外周静脉血单个核细胞(PBMC),应用尼龙毛柱法、CD3磁珠阳性分选法、CD3磁珠阴性分选法和自然沉降法等4种方法分选T细胞,比较各种方法获取的T细胞纯度、回收率和细胞增殖。用CD3/CD28免疫磁珠激活CD3+T细胞,γc家族细胞因子分为IL-2组和IL-7、IL-15、IL-21混合组,比较两组T细胞扩增倍数和表型的差异。结果:CD3磁珠阴性分选的T细胞纯度显著高于尼龙毛柱分选、CD3磁珠阳性分选、自然沉降分选[(94.06±1.07)%vs(86.74±1.06)%、(89.61±1.40)%、(88.48±1.86)%,P〈0.05],自然沉降分选的T细胞回收率显著高于其余3种分选法[(60.29±1.53)%vs(45.03±2.79)%、(20.15±3.41)%、(42.98±2.82)%,P〈0.05),综合比较效果以自然沉降法为最优选择。IL-2组T细胞扩增倍数显著高于混合组[(262.6±143.2)vs(73.0±25.8)倍,P〈0.05]。混合组的早期记忆T细胞占总T细胞的比例、Tscm和T_scm-like、Tcm所占比例均显著高于IL-2组[(55.6±1.82)%vs(39.6±1.52)%,(16.6±1.82)%vs(9.8±1.30)%,(39.0±1.58)%vs(29.2±1.79)%;均P〈0.05]。结论:自然沉降法从PBMC中分选T细胞具有低成本、高纯度、高回收率的优势。IL-7、IL-15和IL-21混合培养有利于早期记忆T细胞的生成,为肿瘤过继免疫治疗的体外细胞制备提供了实验依据。 展开更多
关键词 γc细胞因子家族 IL-2 IL-7 IL-15 IL-21 早期记忆T细胞
PiggyBac转座子介导的嵌合抗原受体修饰T细胞研究
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作者 郜宁 付玉龙 +4 位作者 郑岩 张炳勇 李修岭 陈金秀 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期2215-2218,共4页
目的建立一种非病毒的T细胞基因转导方法,为CAR-T细胞免疫治疗提供基因修饰策略。方法将CD19CAR表达框(1470bp)克隆入PiggyBac转座子载体PB513B-1的XbaⅠ和EcoRⅠ位点,构建靶向CD19的PiggyBac转座子载体(pb19CAR);将转座子和转座酶双质... 目的建立一种非病毒的T细胞基因转导方法,为CAR-T细胞免疫治疗提供基因修饰策略。方法将CD19CAR表达框(1470bp)克隆入PiggyBac转座子载体PB513B-1的XbaⅠ和EcoRⅠ位点,构建靶向CD19的PiggyBac转座子载体(pb19CAR);将转座子和转座酶双质粒,经电穿孔仪(1×20ms830V/840V/850V)和核转仪(U014/T023)转导原代T细胞,优化转导程序,比较两种转导装置的效率及细胞存活率;用靶抗原CD19蛋白(5μg/ml)和CD3/CD28mAb(5μg/ml)两种包被平板激活、白细胞介素(IL)-2(500U/ml)和混合细胞因子IL-7(10ng/ml)/IL-15(10ng/ml)/IL-21(20ng/ml)两种扩增方法,比较激活、扩增、CD19CAR表达和细胞表型。结果转座子载体(pb19CAR)经XbaⅠ和EcoRⅠ双酶切和基因测序确认构建成功。经流式细胞术及细胞活力计数仪检测,电穿孔仪转导效率及细胞活率均高于核转仪[(51.0±2.3)%比(36.5±1.8)%(P=0.000),(75.0±3.8)%比(60.0±3.0)%(P=0.000)];电穿孔后培养扩增12d流式细胞术检测CD19CAR表达显示靶抗原CD19蛋白组明显高于CD3/CD28mAb组[(70.0±3.5)%比(54.0±2.7)%(P=0.000)]、细胞表型分析显示混合细胞因子组比IL-2组有更高比例的Tscm/Tscm-like(25.00±1.25)%比(12.20±0.60)%(P=0.000)、Tcm细胞(10.20±0.51)%比(3.00±0.15)%(P=0.000)。结论pb19CAR/转座酶双质粒电穿孔具有较高的转导效率和细胞活率;靶抗原CD19蛋白刺激可优势扩增CAR-T细胞;混合细胞因子支持具有中央记忆和干细胞记忆表型的CAR-T细胞生长。 展开更多
关键词 PIGGYBAC转座子 嵌合抗原受体 电穿孔
靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的嵌合抗原受体修饰T细胞对肝癌细胞SMMC-7721的特异杀伤作用
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作者 付玉龙 郜宁 +4 位作者 郑岩 岳冉 张炳勇 李修岭 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期2242-2245,共4页
目的观察靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体修饰T细胞(EGFRvⅢ/2CAR-T)对肝癌细胞SMMC-7721的特异杀伤作用。方法二代EGFRvⅢCAR表达框(EGFRvⅢ/2CAR,1374bp)克隆入PiggyBac转座子载体PB513B-1的XbaⅠ和BamHⅠ位点... 目的观察靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体修饰T细胞(EGFRvⅢ/2CAR-T)对肝癌细胞SMMC-7721的特异杀伤作用。方法二代EGFRvⅢCAR表达框(EGFRvⅢ/2CAR,1374bp)克隆入PiggyBac转座子载体PB513B-1的XbaⅠ和BamHⅠ位点,转座子载体(PB-EGFRvⅢ/2CAR)和转座酶双质粒电穿孔(1×20ms,840V)转导人外周血T细胞,流式细胞术检测EGFRvⅢ/2CAR表达。Westernblot法检测SMMC-7721中EGFRvⅢ表达。EGFRvⅢ/2CAR-T细胞和SMMC-7721细胞共培养,乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测特异杀伤作用、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测干扰素(IFN)-γ分泌水平。结果重组载体PB-EGFRvⅢ/2CAR经XbaⅠ和BamHⅠ酶切、电泳分析及DNA测序证明基因片段连接无误、核酸序列正确。流式细胞术检测结果转座子/转座酶双质粒电穿孔外周血T细胞EGFRvⅢ/2CAR表达率为55.5%。Westernblot显示SMMC-7721在相对分子质量145000处EGFRvⅢ表达。EGFRvⅢ/2CAR-T和SMMC-7721共培养24h,LDH释放试验证明肿瘤特异性杀伤,与效靶比呈正比(E∶T为1∶1、5∶1、10∶1、15∶1、20∶1);ELISA检测到IFN-γ分泌量为(1060.1±89.0)pg/ml,明显高于对照组(P=0.000)。结论靶向EGFRvⅢ的二代CAR-T细胞能够特异杀伤EGFRvⅢ+的肝癌细胞SMMC-7721。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体 嵌合抗原受体 免疫治疗 PIGGYBAC转座子
基因修饰T细胞过继免疫治疗肿瘤的研究进展 被引量:3
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作者 王智扬 《中华实用诊断与治疗杂志》 2017年第7期712-715,共4页
过继免疫治疗(adoptive immunotherapy,AIT)是一种新的肿瘤治疗方法,可直接杀伤或激发机体免疫反应杀伤肿瘤细胞,发挥治疗作用。基因修饰T细胞是AIT的重要组成,近年来对T细胞分离、基因修饰等方面的研究使AIT取得了一系列进展。作为未来... 过继免疫治疗(adoptive immunotherapy,AIT)是一种新的肿瘤治疗方法,可直接杀伤或激发机体免疫反应杀伤肿瘤细胞,发挥治疗作用。基因修饰T细胞是AIT的重要组成,近年来对T细胞分离、基因修饰等方面的研究使AIT取得了一系列进展。作为未来AIT治疗体系的一部分,免疫标志物检测逐渐受到重视。本文就基因修饰T细胞AIT治疗肿瘤的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 肿瘤过继免疫治疗 T细胞 基因修饰
经内镜栓塞术联合套扎术治疗肝硬化食管胃底静脉曲张出血的疗效分析 被引量:2
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作者 陆小丹 赵迤旋 +3 位作者 任燕北 张炳勇 曹名波 《医药论坛杂志》 2017年第6期9-11,15共4页
目的研究内镜下食管静脉曲张套扎术(EVL)联合组织胶栓塞术用于肝硬化食管胃底静脉曲张出血(EVB)患者中的疗效及安全性。方法对河南省人民医院2014年1月—2016年6月采用套扎术联合组织胶栓塞术的87例肝硬化食管胃底静脉曲张出血患者... 目的研究内镜下食管静脉曲张套扎术(EVL)联合组织胶栓塞术用于肝硬化食管胃底静脉曲张出血(EVB)患者中的疗效及安全性。方法对河南省人民医院2014年1月—2016年6月采用套扎术联合组织胶栓塞术的87例肝硬化食管胃底静脉曲张出血患者的临床资料进行回顾分析,观察疗效及统计并发症。结果早期再出血率3.4%,迟发性再出血率12.8%。术后3月食管静脉曲张显效为37.8%,有效为31.7%;胃底静脉曲张显效为23.2%,有效为29.3%。术后6月食管静脉曲张显效为43.3%,有效为32.1%;胃底静脉曲张显效为26.9%,有效为34.6%。术后并发症有恶心、呕吐55例(63.2%),胸痛43例(49.4%),上腹不适10例(11.5%),发热7例(8%),穿孔1例(1.1%)。结论 EVL联合组织胶栓塞术用于肝硬化食管胃底静脉曲张出血治疗安全有效,但存在一定的并发症。 展开更多
关键词 食管胃底静脉曲张出血 套扎术 栓塞术 临床疗效
慢病毒载体在肿瘤基因治疗中的研究进展 被引量:2
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作者 孙上钧 丁辉 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期352-354,共3页
肿瘤基因治疗依赖于高效、安全、稳定的基因转导方法,慢病毒以其转染率高、靶向性强、表达稳定等优点脱颖而出,为肿瘤治疗带来了新的曙光。近年来,慢病毒载体逐渐成熟的设计、逐步完善的生产工艺、不断提高的安全性使其拥有广阔的应... 肿瘤基因治疗依赖于高效、安全、稳定的基因转导方法,慢病毒以其转染率高、靶向性强、表达稳定等优点脱颖而出,为肿瘤治疗带来了新的曙光。近年来,慢病毒载体逐渐成熟的设计、逐步完善的生产工艺、不断提高的安全性使其拥有广阔的应用前景;慢病毒在肿瘤疫苗制备、嵌合抗原受体修饰T细胞、介导自杀基因、RNA干扰及抑制肿瘤血管生成等方面的研究进展,不仅促进了肿瘤基因治疗的发展,更助力于肿瘤治疗进入精准医学新时代。 展开更多
关键词 慢病毒载体 基因治疗 肿瘤
幽门螺杆菌感染与溃疡性结肠炎相关性分析 被引量:1
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作者 周璐祎 闫爽 +6 位作者 娄保军 郭琼雅 张海辉 张延瑞 王春荣 丁松泽 《中国临床研究》 CAS 2017年第4期447-450,共4页
目的探讨幽门螺杆菌(H.pylori)与溃疡性结肠炎(UC)的关系。方法采用病例对照研究,严格按照病例对照的纳入和排除标准选取2014年9月至2016年9月于河南省人民医院消化内科就诊的58例初发型UC患者为病例组,选择同期就诊的80例有消... 目的探讨幽门螺杆菌(H.pylori)与溃疡性结肠炎(UC)的关系。方法采用病例对照研究,严格按照病例对照的纳入和排除标准选取2014年9月至2016年9月于河南省人民医院消化内科就诊的58例初发型UC患者为病例组,选择同期就诊的80例有消化道症状且肠镜检查无器质性病变或正常结肠表现的患者为对照组,均行13C尿素呼气试验确定有无H.pylori感染。对两组患者的年龄、性别、BMI、受教育年限、吸烟史及H.pylori感染情况进行比较,运用多因素Logistic回归分析UC的影响因素,并比较UC不同病变范围及程度间的H.pylori感染率有无差异。结果病例组与对照组比较,年龄、吸烟史及H.pylori感染情况差异有统计学意义(P〈0.05,P〈0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、吸烟史与uc无相关性(P均〉0.05);H.pylori感染与UC呈负相关(OR=0.350,95%CI=0.166-0.735,P=0.006)。此外,轻、中、重度UC患者的H.pylori感染率分别为37.50%、31.58%、26.67%,随UC病变程度加重,H.pylori感染率略有下降,但差异无统计学意义(P〉0.05);直肠型、左半结肠型及全结肠型uc患者的H.pylori感染率分别为37.50%、31.82%、30.00%,随病变范围的增大,H.pylori感染率略有下降,但差异无统计学意义(P〉0.05)。结论H.pylori感染率与UC的发生呈负相关性,H.pylori感染可能是UC发生的保护性因素,其具体机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 溃疡性结肠炎 初发型 13C尿素呼气试验 相关性
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