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急性尿路感染大鼠模型的建立及在中药药效评价中的应用
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作者 毛鑫 姚荣妹 +3 位作者 徐玉辉 高英杰 崔晓兰 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期177-180,共4页
目的:建立急性尿路感染大鼠模型,并探讨其在药效评价中的应用。方法:SD大鼠采用经尿道膀胱灌注尿路致病性大肠埃希菌CFT073的方法建立尿路感染模型:大鼠感染后以尿液中白细胞及潜血为指标优化感染条件;使用优化后的条件造模并给予三金... 目的:建立急性尿路感染大鼠模型,并探讨其在药效评价中的应用。方法:SD大鼠采用经尿道膀胱灌注尿路致病性大肠埃希菌CFT073的方法建立尿路感染模型:大鼠感染后以尿液中白细胞及潜血为指标优化感染条件;使用优化后的条件造模并给予三金片治疗,检测模型组白细胞及潜血分级,尿液及肾脏中的细菌数,并称取膀胱组织重量,检测膀胱组织病理变化并观察三金片对模型组的治疗作用。结果:以大鼠尿液中白细胞及潜血的阳性率为指标优化感染条件为CFT073细菌1×10^7 CFU/只的浓度感染3天;以优化后的条件造模,模型组尿液中白细胞及潜血水平明显升高,尿液及肾脏中有大量细菌,膀胱指数增加,炎性损伤明显;三金片250 mg/kg给药三天后可明显降低尿路感染大鼠尿液中的白细胞水平,降低尿液及肾脏细菌,减轻膀胱组织损伤。结论:本实验成功建立与临床症状相似的尿路感染大鼠模型,可用于评价药物对急性尿路感染的治疗作用。 展开更多
关键词 尿路感染 尿路致病大肠杆菌 白细胞 潜血 三金片
干扰素α-2b对豚鼠生殖器疱疹病毒感染的死亡保护及治疗作用 预览
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作者 高英杰 +1 位作者 曲天歌 崔晓兰 《药物资讯》 2018年第5期116-121,共6页
目的:评价干扰素α-2b对豚鼠生殖器疱疹病毒感染的死亡抑制及治疗作用。方法:采用豚鼠生殖器疱疹病毒感染模型观察干扰素α-2b的死亡保护作用及治疗作用。结果:干扰素α-2b对豚鼠生殖器疱疹病毒感染具有明显的死亡保护作用,同时具有显... 目的:评价干扰素α-2b对豚鼠生殖器疱疹病毒感染的死亡抑制及治疗作用。方法:采用豚鼠生殖器疱疹病毒感染模型观察干扰素α-2b的死亡保护作用及治疗作用。结果:干扰素α-2b对豚鼠生殖器疱疹病毒感染具有明显的死亡保护作用,同时具有显著的治疗作用,且治疗作用随给药次数增加而增强。结论:干扰素α-2b对豚鼠生殖器疱疹病毒感染具有死亡保护及治疗作用。 展开更多
关键词 干扰素α-2b 生殖器 疱疹病毒 死亡保护 治疗效果
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疏风解毒胶囊治疗EB病毒感染致裸鼠肿瘤模型的药效学探讨 被引量:2
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作者 孙静 赵荣华 +2 位作者 高英杰 崔晓兰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期144-148,共5页
目的:通过观察疏风解毒胶囊对EB病毒转染的人鼻咽癌细胞株CNE-2Z移植感染Balb/C裸小鼠致肿瘤模型的影响,评价疏风解毒胶囊体内抗EB病毒作用。方法:在Balb/C裸鼠右腋皮下接种鼻咽癌CNE-2Z细胞悬液,接种1周后,将移植瘤模型成功的裸鼠随... 目的:通过观察疏风解毒胶囊对EB病毒转染的人鼻咽癌细胞株CNE-2Z移植感染Balb/C裸小鼠致肿瘤模型的影响,评价疏风解毒胶囊体内抗EB病毒作用。方法:在Balb/C裸鼠右腋皮下接种鼻咽癌CNE-2Z细胞悬液,接种1周后,将移植瘤模型成功的裸鼠随机分为6组,分别为模型组、阿昔洛韦组、连花清瘟胶囊组、疏风解毒胶囊高、中、低剂量组(2.2,1.1,0.55 g·kg^-1·d^-1),每组7只,分组当天开始给药,每日1次,连续给药3周。给药当天测定裸鼠的体重,肿瘤体积,隔日测定1次,3周后称体重处死裸小鼠,取出肿瘤组织、脾脏和胸腺称质量,计算每组肿瘤体积、相对肿瘤体积、相对肿瘤增殖率、脾脏指数、胸腺指数。结果:与模型组比较,疏风解毒胶囊高、中、低剂量组均可在一定程度上降低Balb/C裸小鼠脾脏指数,升高其胸腺指数;疏风解毒胶囊高剂量组可显著降低给药8-20 d后裸鼠肿瘤体积(P〈0.05,P〈0.01);中剂量组可显著降低给药8-14,18 d后肿瘤体积(P〈0.05,P〈0.01),低剂量组可显著降低给药8,12 d后肿瘤体积(P〈0.05)。在相对肿瘤增值率方面疏风解毒胶囊表现出一定的抑制肿瘤增长的趋势。结论:疏风解毒胶囊对EB病毒转染的CNE-2Z细胞移植裸小鼠肿瘤模型具有抑制作用。 展开更多
关键词 疏风解毒胶囊 EB病毒 脾脏指数 胸腺指数 肿瘤体积 相对肿瘤增殖率
重组人表皮生长因子的构建与表达 预览 被引量:2
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作者 李姗姗 朱晓美 +1 位作者 朱大岭 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期 297-300,共4页
目的 应用原核表达系统研究提高重组表皮生长因子(rhEGF)产量的方法。方法用RT—PCR方法克隆hEGF基因并插入表达载体pGEX-4T-1,获得重组的表达质粒pGEX-4T-1-hEGF转化大肠杆菌BL21并筛选得到工程菌株,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱... 目的 应用原核表达系统研究提高重组表皮生长因子(rhEGF)产量的方法。方法用RT—PCR方法克隆hEGF基因并插入表达载体pGEX-4T-1,获得重组的表达质粒pGEX-4T-1-hEGF转化大肠杆菌BL21并筛选得到工程菌株,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导目的蛋白表达,亲和层析纯化rhEGF,MTT法测定活性。结果成功扩增获得hEGF基因,部分表达产物为可溶性的、部分形成包涵体。菌体裂解上清液经亲和层析纯化后纯度达98%,复性后的rhEGF具有促细胞生长活性。结论成功构建并原核表达了重组人表皮生长因子基因,其表达产物具有很好的促细胞增殖活性。 展开更多
关键词 人表皮生长因子 原核表达 生物活性
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犬冠状动脉平滑肌细胞培养及鉴定
5
作者 刘建勋 +3 位作者 侯金才 李磊 史跃 马彦雷 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期115-117,共3页
目的:建立犬冠状动脉平滑肌细胞培养及鉴定的方法。方法:用胶原酶消化法体外培养犬冠状动脉平滑肌细胞。结果:分离犬冠状动脉后,用胶原酶消化法培养原代冠状动脉平滑肌细胞,8天后细胞细胞呈"峰-谷"状态,平滑肌细胞α-肌动蛋白免疫... 目的:建立犬冠状动脉平滑肌细胞培养及鉴定的方法。方法:用胶原酶消化法体外培养犬冠状动脉平滑肌细胞。结果:分离犬冠状动脉后,用胶原酶消化法培养原代冠状动脉平滑肌细胞,8天后细胞细胞呈"峰-谷"状态,平滑肌细胞α-肌动蛋白免疫组织化学鉴定为平滑肌细胞,纯度为100%。结论:此方法操作简单、快速,得到细胞数量大、纯度高,是一种稳定的冠状动脉平滑肌细胞培养法。 展开更多
关键词 冠状动脉 平滑肌细胞 细胞培养 细胞鉴定
清开灵注射液对大鼠CYP1A2和2D6的影响 预览 被引量:17
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作者 刘艳 王晶 +2 位作者 于卫江 朱大岭 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第19期 2044-2047,共4页
目的:通过清开灵注射液的大鼠体内、外实验,观察清开灵注射液对大鼠CYP1A2亚型,CYP2D6亚型的影响。方法:通过HPLC法测定全血中咖啡因的代谢率,观测清开灵注射液对大鼠CYP1A2活性的影响;通过HPLC法测定大鼠肝微粒体重组系统非那西... 目的:通过清开灵注射液的大鼠体内、外实验,观察清开灵注射液对大鼠CYP1A2亚型,CYP2D6亚型的影响。方法:通过HPLC法测定全血中咖啡因的代谢率,观测清开灵注射液对大鼠CYP1A2活性的影响;通过HPLC法测定大鼠肝微粒体重组系统非那西丁的代谢比率,确定清开灵注射液对大鼠肝微粒体CYP1A2亚型的作用;测定大鼠肝微粒体重组系统右美沙芬的代谢比率,确定清开灵注射液对大鼠肝微粒体CYP2D6亚型的作用。结果:实验组中给予大鼠不同浓度的清开灵注射液(0.15,0.3,0.6mL·kg^-1),其咖啡因代谢率为(15.9±3.8)%,(14.5±1.8)%,(12.3±1.2)%,对照组为(16.8±5.9)%,各剂量组及对照组间均无显著性差异;肝微粒体体外重组系统中,实验组各浓度清开灵注射液对CYP2D6没有影响;高剂量组清开灵注射液对CYP1A2有抑制作用。结论:清开灵注射液对CYP1A2和CYP2D6的活性没有影响。 展开更多
关键词 清开灵注射液 大鼠 CYP1A2 CYP2D6 肝微粒体
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细胞色素P450 CYP4A的组织和细胞表达特异性 预览
7
作者 陆刚 唐晓波 +3 位作者 余辉艳 郑蕾 朱大岭 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期 505-511,共7页
目的确定细胞色素P450CYP4A在组织和细胞水平表达是否具有特异性。方法采用Western印迹法分析细胞色素P450CYP4A蛋白在培养的牛肺动脉内皮细胞、平滑肌细胞及牛肾动脉内皮细胞的表达;采用原位杂交法检测细胞色素P450CYP4AmRNA在大鼠肺... 目的确定细胞色素P450CYP4A在组织和细胞水平表达是否具有特异性。方法采用Western印迹法分析细胞色素P450CYP4A蛋白在培养的牛肺动脉内皮细胞、平滑肌细胞及牛肾动脉内皮细胞的表达;采用原位杂交法检测细胞色素P450CYP4AmRNA在大鼠肺支气管内皮和血管内皮细胞的表达;以^14C标记的花生四烯酸(AA)作为反应底物,用荧光高效液相色谱法(HPLC)通过检测牛肺动脉内皮细胞催化外源性AA生成20-羟基廿碳四烯酸(20-HETE)的反应,确定肺动脉内皮细胞是否存在细胞色素P450CYP4A;将肺动脉内皮细胞破碎并用乙酸乙酯萃取,用荧光物质标记萃取物,用荧光HPIJC检测内源性20-HETE,从代谢产物水平确定细胞色素P450CYP4A的功能蛋白质表达。结果①Western印迹法分析结果表明,细胞色素P450CYP4A蛋白在牛肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞中均有表达,在肺动脉内皮细胞中的表达明显高于平滑肌细胞(积分吸光度值分别为10182±279,5249±167);在牛肾动脉内皮细胞中也有表达,但明显低于肺动脉内皮细胞的表达(积分吸光度值分别为12173±171,17863±207)。②原位杂交结果显示,细胞色素P450CYP4AmRNA可在大鼠肺支气管内皮细胞和大鼠肺血管内皮均有表达。③用HPLC在牛肺动脉内皮细胞中检测到20-HETE,表明细胞色素P450CYP4A在肺动脉内皮细胞存在。结论细胞色素P450CYP4A有其特定的组织和细胞分布,在牛和大鼠肺脏动脉内皮细胞有高表达。 展开更多
关键词 细胞色素P450 CYP4A 细胞 培养的 蛋白表达 基因表达 组织分布
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白花蛇舌草水提取物对大鼠细胞色素P450 1A2亚型的影响 预览 被引量:4
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作者 刘艳 +3 位作者 唐晓波 刘秉义 武正华 朱大岭 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第1期 4-7,共4页
目的 观察白花蛇舌草水提取物对大鼠细胞色素P450 1A2亚型(CYP 1A2)的影响。方法 实验组(高、中、低剂量组)大鼠分别给予白花蛇舌草水提取物5.84g/kg、8.26g/kg、11.68g/kg,对照组给予生理盐水,用蛋白印迹方法测定大鼠CYP 1A2... 目的 观察白花蛇舌草水提取物对大鼠细胞色素P450 1A2亚型(CYP 1A2)的影响。方法 实验组(高、中、低剂量组)大鼠分别给予白花蛇舌草水提取物5.84g/kg、8.26g/kg、11.68g/kg,对照组给予生理盐水,用蛋白印迹方法测定大鼠CYP 1A2的蛋白表达。通过高效液相色谱(HPLC)法测定全血中咖啡因的代谢率,研究白花蛇舌草水提取物对大鼠肝脏CYP 1A2的影响;用HPLE法测定非那西丁的代谢率,确定白花蛇舌草水提取物对大鼠肝微粒体CYP 1A2活性的影响。结果 蛋白印迹分析结果表明,白花蛇舌草水提取物对CYP 1A2蛋白表达没有影响。给予高、中、低剂量白花蛇草水提物的大鼠咖啡因代谢率分别为(33.62±5.08)%、(32.19±4.87)%、(31.05±4.93)%;对照组大鼠咖啡因代谢率为(30.73±5.40)%,实验组间及与对照组比较均无显著性差异(P〉0.05)。肝微粒体体外温孵实验中,实验各剂量组和对照组非那西丁代谢率分别为(3.76±0.83)%、(3.61±0.79)%、(3.84±0.86)%、(3.81±0.82)%,实验组间及与对照组比较均无显著性差异(P〉0.05)。结论 体内、体外实验结果均表明,白花蛇舌草水提取物对大鼠肝脏CYP 1A2没有抑制作用。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 细胞色素P450 肝微粒体 高效液相色谱
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菟丝子水煎液对大鼠肝微粒体细胞色素P450亚型酶活性的影响 预览 被引量:9
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作者 余辉艳 +2 位作者 于卫江 武正华 朱大岭 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第2期 105-108,共4页
目的 观察菟丝子对大鼠肝细胞色素P450酶系统中CYP1A2,2D6以及3A43种亚型活性的影响。方法 对照组和实验组大鼠分别经口给予生理盐水和菟丝子水煎液2周,差速离心分离肝微粒体,HPLC法分别测定大鼠肝微粒体中CYP1A2,2D6以及3A4探针药... 目的 观察菟丝子对大鼠肝细胞色素P450酶系统中CYP1A2,2D6以及3A43种亚型活性的影响。方法 对照组和实验组大鼠分别经口给予生理盐水和菟丝子水煎液2周,差速离心分离肝微粒体,HPLC法分别测定大鼠肝微粒体中CYP1A2,2D6以及3A4探针药物的代谢率;通过Western blot测定大鼠肝微粒体中CYP1A2,2D6以及3A4蛋白的相对含量。结果 ①实验组探针药物非那西丁代谢率高于对照组(P〈0.05),Western blot分析显示实验组CYP1A2蛋白表达略高于对照组;②实验组探针药物右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P〈0.05),CYP2D6蛋白表达亦明显高于对照组;③两组间探针药物咪哒唑仑代谢率及CYP3A4蛋白表达无明显差异。结论 中药菟丝子水煎液可诱导大鼠肝微粒体中的CYP2D6和CYP1A2,而对CYP3A4无影响。 展开更多
关键词 中药菟丝子 细胞色素P450 肝微粒体 蛋白表达
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高效液相色谱法测定15-羟化二十烷四烯酸 预览
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作者 毕海荣 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期 348,共1页
近年来的研究表明,在脑、肾、肺、血管等组织中,花生四烯酸(AA)可以被细胞色素P450(CYP450)或15脂氧化酶代谢为15-羟化二十烷四烯酸(15-HETE)、20-羟化二十烷四烯酸(20—HETE)、环氧二十碳四烯酸(EETs)等多种生物活性物质... 近年来的研究表明,在脑、肾、肺、血管等组织中,花生四烯酸(AA)可以被细胞色素P450(CYP450)或15脂氧化酶代谢为15-羟化二十烷四烯酸(15-HETE)、20-羟化二十烷四烯酸(20—HETE)、环氧二十碳四烯酸(EETs)等多种生物活性物质。最近研究证明,15-HETE与许多疾病如骨组织、血管疾病的发生发展有关。鉴于15-HETE在体内的水平低。采用一般的测定方法很难测定,为此。作者采用高效液相色谱(HPLC)荧光检测,在对其生物活性物质进行测定的同时,并对衍生过程进行优化,结果报道如下。 展开更多
关键词 15-羟化二十烷四烯酸 色谱法 高压液相 质谱
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