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陆地棉GhBFT1基因的克隆、表达及亚细胞定位分析 预览
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作者 李研 刘慧 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期183-189,共7页
植物的磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族(PEBP)分为3个亚家族,其中BFT属于TFL1亚家族成员,在维持植物分生组织的无限生长方面起着重要作用。棉花是重要的经济作物,但BFT1家族成员目前没有相关的研究报道。本研究克隆GhBFT1基因,开展基因表达、... 植物的磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族(PEBP)分为3个亚家族,其中BFT属于TFL1亚家族成员,在维持植物分生组织的无限生长方面起着重要作用。棉花是重要的经济作物,但BFT1家族成员目前没有相关的研究报道。本研究克隆GhBFT1基因,开展基因表达、亚细胞定位分析,初步探索GhBFT1基因在棉花中可能的功能。通过RT-PCR的方法从新陆早33中克隆了一个GhBFT1同源基因,ORF长度为525bp,推测编码174个氨基酸,包含TFL1亚家族蛋白保守氨基酸位点His88/Asp144,同源建模分析表明GhBFT1蛋白三维结构与TFL1家族蛋白的结构非常相似,进化树分析表明GhBFT1基因与番木瓜、榴莲、哥伦比亚锦葵、可可等亲缘关系更为接近。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析表明GhBFT1基因在棉花根、雄蕊、开花当天和开花后1天的胚珠中表达量较高。构建融合表达载体35S∶GhBFT1-GFP,转化至农杆菌GV3101,然后转化本氏烟草叶片中,用激光共聚焦显微镜观察烟草叶表皮细胞,发现细胞质和细胞核中均有强烈的绿色荧光信号,表明GhBFT1是细胞质和细胞核定位的蛋白。本研究对棉花家族基因做了一定的功能探索,为将来深入研究棉花BFT1基因在棉花生长发育和开花转变中的功能奠定基础。 展开更多
关键词 陆地棉 磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族 基因表达 蛋白亚细胞定位
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短命植物小拟南芥光周期调控基因CONSTANS的克隆与表达特征分析 预览
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作者 刘芳 肖衡 +4 位作者 金玉环 孙琦 康凯程 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期190-199,共10页
目的光周期是影响植物生长发育的重要因素之一,CONSTANS(CO)是植物光周期开花途径中关键的基因。方法本研究基于短命植物小拟南芥(Arabidopsis pumila)转录组数据库,获得1条与拟南芥CO基因AtCOL1基因序列高度相似的unigene,通过RT-PCR... 目的光周期是影响植物生长发育的重要因素之一,CONSTANS(CO)是植物光周期开花途径中关键的基因。方法本研究基于短命植物小拟南芥(Arabidopsis pumila)转录组数据库,获得1条与拟南芥CO基因AtCOL1基因序列高度相似的unigene,通过RT-PCR方法从小拟南芥中克隆了该CO同源基因,命名为ApCOL1;进行了基因的生物信息学分析及节律表达、组织表达和响应非生物胁迫的表达特征分析。结果研究结果表明ApCOL1具有两个B-box和一个CCT结构域,氨基酸序列上与AtCOL1相似性高达86.8%。系统进化分析表明ApCOL1与AtCOL1和琴叶拟南芥(Arabidopsis lyrata)的AlCOL1亲缘关系较近,且属于第I亚组成员。qRT-PCR实验表明在长日照和短日照条件下ApCOL1具有相似的昼夜节律表达特征;ApCOL1在小拟南芥各组织中均有表达,但在果荚中表达量最高。250mmol/LNaCl胁迫和20%PEG-6000模拟干旱胁迫12h明显抑制ApCOL1基因的表达,并且随着胁迫时间的延长ApCOL1表达水平没有显著差异。在高温(40℃)胁迫下,ApCOL1基因的表达在24h内先下降后上升并达到最高,48h又下降到对照水平。低温(4℃)胁迫24h之前,ApCOL1基因的表达没有明显变化,但处理48h表达水平显著下降。结论本研究表明ApCOL1基因能够响应盐、干旱、高温和低温等非生物胁迫,暗示该基因在小拟南芥抵抗逆境胁迫中起着重要作用。 展开更多
关键词 小拟南芥 CONSTANS基因 生物节律 非生物胁迫
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小拟南芥转运蛋白基因及NHX2基因的克隆与表达 预览
3
作者 孙琦 +3 位作者 刘芳 金玉环 肖建旺 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期200-209,共10页
转运蛋白(transport protein)是膜蛋白的一大类,介导生物膜内外的化学物质及信号的交换。植物体内存在多个与Na +转运相关的蛋白,其中液泡膜Na +/H +逆向转运蛋白(Vacuolar Na^+/H^+ antiporter,NHX)在离子稳态和提高植物耐盐性方面发... 转运蛋白(transport protein)是膜蛋白的一大类,介导生物膜内外的化学物质及信号的交换。植物体内存在多个与Na +转运相关的蛋白,其中液泡膜Na +/H +逆向转运蛋白(Vacuolar Na^+/H^+ antiporter,NHX)在离子稳态和提高植物耐盐性方面发挥着重要作用。为了深入了解转运蛋白基因在短命植物小拟南芥( Arabidopsis pumila)耐盐方面的作用,本研究首先基于小拟南芥响应高盐胁迫叶片转录组数据筛选出1157个转运蛋白基因,按功能分为Na^+转运蛋白,K^+转运蛋白,Ca^2+转运蛋白,ABC转运蛋白以及糖转运蛋白等,其中功能注释为Na +转运蛋白的基因有24个。K均值(K-means)聚类分析结果显示,1157个转运蛋白基因分布于20个K subcluster,其中在K6、K9、K15子聚类中的基因数量分布较多,分别为172、193、190个。在分布于K6子聚类的Na^+转运蛋白基因中,有一个编码NHX2蛋白的基因经盐胁迫处理后明显上调表达。采用RT-PCR克隆了ApNHX 2基因, ApNHX2开放阅读框1626 bp,编码541个氨基酸。ApNHX2蛋白是一个典型的跨膜转运蛋白,具有12个跨膜结构区。系统进化分析表明ApNHX2与拟南芥AtNHX2亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,ApNHX 2基因在小拟南芥各组织中均有表达,但在花中表达量最高。为进一步研究该基因的功能,构建了过量表达载体35S∶ApNHX2并转化农杆菌GV3101。本研究为进一步阐述转运蛋白基因在小拟南芥响应盐胁迫中的功能机制奠定了基础。 展开更多
关键词 小拟南芥 NA^+/H^+逆向转运蛋白 基因克隆 组织表达
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小拟南芥激素相关基因及GH3.6的克隆与表达 预览
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作者 孙琦 +3 位作者 刘芳 金玉环 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期323-331,共9页
植物激素是植物体内产生的一些微量的、能调节自身生理过程的有机化合物,生长素是一种重要的植物激素,在植物生长发育的过程中起着重要作用。为了探索激素相关基因在短命植物小拟南芥(Arabidopsis pumila)逆境适应过程中的作用,本研究... 植物激素是植物体内产生的一些微量的、能调节自身生理过程的有机化合物,生长素是一种重要的植物激素,在植物生长发育的过程中起着重要作用。为了探索激素相关基因在短命植物小拟南芥(Arabidopsis pumila)逆境适应过程中的作用,本研究基于小拟南芥响应高盐胁迫叶片转录组数据库,首先筛选出2156个激素相关基因,包括生长素、脱落酸、乙烯、水杨酸、茉莉酸、油菜素内酯、细胞分裂素及赤霉素相关的基因,其中生长素和脱落酸相关基因所占比例最多并且多为上调表达。进一步通过分层聚类(H-Cluster),K均值聚类(K-means Cluster)和密度聚类(SOM Cluster)分析持续上调的基因,发现一个编码吲哚乙酸酰胺合成酶的基因GRETCHEN HAGEN 3.6(GH3.6)在高盐胁迫过程中明显上调表达。采用RT-PCR克隆小拟南芥Ap GH3.6基因,其开放阅读框长为1839 bp,编码612个氨基酸。系统进化分析表明,Ap GH3.6与山"菜(Eutrema salsugineum)GH3.6进化关系最近,属于同一进化分支。转录组数据分析表明在250 m M Na Cl下,Ap GH3.6持续上调表达;实时荧光定量PCR分析表明Ap GH3.6在小拟南芥各个组织中均有表达,但在花中表达量最高;高盐胁迫表达分析表明,随着胁迫时间增加,Ap GH3.6表达量不断升高。为了进一步研究该基因的功能,构建了植物过量表达载体35S∶Ap GH3.6并转化农杆菌GV3101。本研究为深入分析激素相关基因在小拟南芥响应盐胁迫中的功能机制奠定了基础。 展开更多
关键词 小拟南芥 GRETCHEN HAGEN3(GH3) 生长素 基因表达
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高中生物学教育对生物多样性保护的重要性
5
作者 王洁 《中学生物教学》 2019年第18期35-36,共2页
分析了高中生物学教学中渗透生物多样性保护教育的重要性,并对渗透策略进行了探讨:(1)提高教师职业素养;(2)在课堂教学中渗入;(3)开展丰富的课外活动,加强高中生生物学理论知识与情感道德的相互渗透,进而培养学生的学科核心素养。
关键词 高中生物学 教育 生物多样性
呼吸机相关性肺炎常见病原菌分布及耐药性分析 预览
6
作者 倩倩 +1 位作者 马兰 周秀芝 《滨州医学院学报》 2019年第1期17-19,23共4页
目的了解呼吸机相关性肺炎病原菌分布和耐药性,为临床早期、合理、有效地使用抗生素提供可靠的依据,避免多重耐药的发生。方法分析临床确诊为呼吸机相关性肺炎患者51例痰标本分离的病原菌112株。采用法国梅立埃鉴定和药敏测定系统进行... 目的了解呼吸机相关性肺炎病原菌分布和耐药性,为临床早期、合理、有效地使用抗生素提供可靠的依据,避免多重耐药的发生。方法分析临床确诊为呼吸机相关性肺炎患者51例痰标本分离的病原菌112株。采用法国梅立埃鉴定和药敏测定系统进行病原菌鉴定和药物敏感性检测。结果112株病原菌中以革兰氏阴性杆菌为主,占75.89%,主要为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯、嗜麦芽寡养单胞菌和大肠埃希菌。革兰氏阳性菌占16%,以金黄色葡萄球菌为主。真菌占11%,以白色念珠菌为主。鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌耐药严重,鲍曼不动杆菌对头孢类、青霉素类、喹诺酮类、碳青霉烯类耐药率大于50%,铜绿假单胞菌对氨苄西林/舒巴坦耐药率为100%。结论呼吸机相关性肺炎病原菌多重耐药或泛耐药比例较高,临床应根据耐药性监测数据合理使用抗生素。 展开更多
关键词 呼吸机相关性肺炎 病原菌 敏感性 多重耐药菌
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新疆小拟南芥烯醛双键还原酶基因对转基因烟草耐盐性的影响 预览
7
作者 周童 杨立飞 +2 位作者 夏新宇 肖衡 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2018年第3期345-350,共6页
为了研究前期从新疆小拟南芥中克隆的编码烯醛双键还原酶(alkenal reductase)Ap AER基因的功能,本研究构建了带有花椰菜花叶病毒(Ca MV)的35S启动子的植物过表达载体35S:Ap AER,并转化至农杆菌GV3101中,采用叶盘法转化烟草获得了转... 为了研究前期从新疆小拟南芥中克隆的编码烯醛双键还原酶(alkenal reductase)Ap AER基因的功能,本研究构建了带有花椰菜花叶病毒(Ca MV)的35S启动子的植物过表达载体35S:Ap AER,并转化至农杆菌GV3101中,采用叶盘法转化烟草获得了转35S:Ap AER基因的烟草。用250 mmol/L的Na Cl溶液分别胁迫转基因和野生型烟草2和4 d,并测定了脯氨酸(Proline)和丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)及过量化物酶(POD)酶活力等生理指标。结果表明:高盐胁迫下14 d,转基因烟草的长势明显优于野生型烟草,转基因烟草普遍植株较高、叶片大、叶色深;转基因烟草的Proline含量、CAT及POD酶活力均高于对照,而反映质膜受损情况的MDA含量显著低于对照。表明过表达Ap AER基因,能提高转基因植株清除醛自由基的能力、提高脯氨酸等渗透调节物质的含量及相关还原酶活性,从而显著提高转基因烟草的耐盐性。 展开更多
关键词 Ap AER 转基因 烟草 耐盐性
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混合式学习对高中生物核心概念教学的影响 预览
8
作者 许继强 张华 《新课程》 2018年第21期26-27,共2页
如何在一节高中生物课程中,让学生尽可能理解并运用核心概念解决实际问题是教育领域研究的热门话题。随着信息化技术在教育领域的不断发展,混合式学习脱颖而出,这种学习方式的特点是"教师为主导,学生为主体"。通过量化研究的方法,以... 如何在一节高中生物课程中,让学生尽可能理解并运用核心概念解决实际问题是教育领域研究的热门话题。随着信息化技术在教育领域的不断发展,混合式学习脱颖而出,这种学习方式的特点是"教师为主导,学生为主体"。通过量化研究的方法,以新疆石河子第一中学高一理科学生2017年7月期末生物试卷分数为例进行调查研究,结果发现,混合式学习环境下,混合式生物课程的开展对高中生学习生物学核心概念起到积极的促进作用。 展开更多
关键词 核心概念 混合式学习 量化研究
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诺奖视角下提高学生生物科学素养策略研究——以“2007年诺贝尔生理学奖”为例
9
作者 许继强 《中学生物教学》 2018年第4X期27-29,共3页
随着素质教育的推广,中学生物学课堂更加注重增强学生的动手能力,培养学生主动思考、乐于学习的探究意识,提高学生的生物科学素养。在中学生物学课堂中介绍科学研究的成果以及相关人物的传奇经历,对培养学生生物科学素养能够起到一定的... 随着素质教育的推广,中学生物学课堂更加注重增强学生的动手能力,培养学生主动思考、乐于学习的探究意识,提高学生的生物科学素养。在中学生物学课堂中介绍科学研究的成果以及相关人物的传奇经历,对培养学生生物科学素养能够起到一定的作用。以人教版教材为例,将中学生物课程与诺贝尔生理学或医学奖联系起来,对二者的连接点做出分析并提出相关教学策略,以期对培养学生生物科学素养有所启示。 展开更多
关键词 诺贝尔生理学或医学奖 教学策略 生物科学素养
棉花硫氧还蛋白基因GhWCRKC2-5参与开花调控的功能研究 预览
10
作者 李云飞 桑娜 +3 位作者 刘慧 于秀立 张亭亭 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2018年第6期774-782,共9页
目的FLOWERING LOCUST(FT)位于开花调控网络的中心,编码成花激素,不仅调控植物开花转变,还参与调控植物多方面的生长发育。硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)在植物的逆境胁迫中发挥着重要的生物学功能。方法我们前期克隆了一个棉花FT同源基... 目的FLOWERING LOCUST(FT)位于开花调控网络的中心,编码成花激素,不仅调控植物开花转变,还参与调控植物多方面的生长发育。硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)在植物的逆境胁迫中发挥着重要的生物学功能。方法我们前期克隆了一个棉花FT同源基因GhFT1,利用酵母双杂技术筛选到一个与GhFT1蛋白互作的硫氧还蛋白GhWCRKC2-5。本研究采用RT-PCR技术从陆地棉中扩增了GhWCRKC2-5基因的开放阅读框cDNA。该基因编码一个203个氨基酸的短肽,含有WCRKC保守氨基酸基序,为非典型的Trx。全基因组分析表明棉花中含有46个非典型的Trxs,系统进化分析显示GhWCRKC2-5与Theobroma cacao的TcWCRKC亲缘关系最近。qRT-PCR分析表明GhWCRKC2-5基因在棉花根和花中表达较高,在茎、叶和顶端分生组织中表达较低;在纤维不同发育时期,GhWCRKC2-5基因表达呈现出降低-升高-降低的趋势,在棉花开花后25d时的纤维表达最高。结果在拟南芥中过量表达GhWCRKC2-5基因,转基因拟南芥明显比野生型早花,并且转基因拟南芥的FT及开花通路中关键基因SUPPESSOR OF OVER EXPRESSION OF CONSTANS1(SOC1)明显上调表达。利用病毒介导的基因沉默技术干扰GhWCRKC2-5基因的表达,GhWCRKC2-5沉默的植株比对照植株开花时间晚。结论GhWCRKC2-5基因在棉花的开花转变中起着重要作用,本研究为深入分析棉花开花调控机理奠定基础。 展开更多
关键词 陆地棉 Trx GhWCRKC2-5基因 早花
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短命植物新疆小拟南芥高盐胁迫处理下内参基因的筛选 预览 被引量:2
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作者 金玉环 刘芳 +2 位作者 孙琦 《玉林师范学院学报》 2018年第2期2-9,共8页
新疆小拟南芥(Arabidopsis pumila)是早春短命植物,广泛分布于新疆极端环境,是研究生物和环境适应机制较好的模式材料.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是一种常用的可以快速获取基因表达的分析方法,而选择合适的内参基因是实时荧光定量PC... 新疆小拟南芥(Arabidopsis pumila)是早春短命植物,广泛分布于新疆极端环境,是研究生物和环境适应机制较好的模式材料.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是一种常用的可以快速获取基因表达的分析方法,而选择合适的内参基因是实时荧光定量PCR的前提.本研究从小拟南芥全长转录组数据库中选取了14个候选内参基因,利用qRT-PCR分析内参基因在250 mmol/L NaCl胁迫处理0、3、6、12、24和48 h共6个不同时间点样品中的基因表达,利用geNorm、Norm Finder和Bestkeeper三种软件进行数据分析.结果显示:在250 mmol/L NaCl胁迫处理下,较为稳定表达的内参基因是GAPDH和ACT1.本研究筛选出高盐胁迫处理下的稳定表达的GAPDH和ACT1基因作为内参基因,对后续验证基因的表达和揭示小拟南芥耐逆机制具有重要意义. 展开更多
关键词 小拟南芥 实时荧光定量PCR NACL胁迫 内参基因
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陆地棉编码成花素同源基因GhFT1-A和GhFT1-D启动子的克隆及活性分析 预览
12
作者 蔡大润 李超 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2017年第3期305-311,共7页
在陆地棉全基因组中序列比对GhFT1基因在At和Dt基因组上的差异,设计特异性引物克隆其上游约1.8 kb的非编码序列作为目的启动子,通过测序结果区分At、Dt类型。本研究克隆出1701 kb GhFT1-A启动子和1771 kb GhFT1-D启动子(简称1.8 kb)... 在陆地棉全基因组中序列比对GhFT1基因在At和Dt基因组上的差异,设计特异性引物克隆其上游约1.8 kb的非编码序列作为目的启动子,通过测序结果区分At、Dt类型。本研究克隆出1701 kb GhFT1-A启动子和1771 kb GhFT1-D启动子(简称1.8 kb)。序列比对分析发现了At和Dt基因组上不同GhFT1启动子间存在许多核苷酸序列差异。GhFT1-A和GhFT1-D启动子上存在大量的、作用广泛的顺式作用元件,并发现了一个顺式作用元件富集的重复片段区域。启动子活性检测证明了GhFT1基因上游1.8 kb的At和Dt启动子均具有活性,但At亚基因组启动子的活性弱于Dt型。陆地棉编码成花素同源基因GhFT1的启动子对于调控GhFT1-A和GhFT1-D的表达具有重要作用,并且它们之间的活性存在差异,暗示At和Dt基因组对开花调控作用不同。 展开更多
关键词 陆地棉 FLOWERING LOCUS T 1 成花素 启动子 顺式作用元件
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基于网络教学平台的细胞生物学教学改革研究 预览 被引量:1
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作者 倪伟 胡圣伟 +2 位作者 崔百明 沈军队 《信息记录材料》 2017年第5期126-127,共2页
为了进一步推动细胞生物学教学改革,提高学生在细胞生物学学习中的自主性和选择性,介绍了基于网络的开放式细胞生物学教学共享资源库的构建,并重点分析资源库核心部分的功能和应用。
关键词 细胞生物学 网络教学系统 教学改革
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小拟南芥实时荧光定量PCR(qRT-PCR)内参基因的筛选 被引量:4
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作者 郑丽洁 林军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期774-783,共10页
小拟南芥(Arabidopsis pumila),又名无苞芥(Olimarabidopsis pumila),为拟南芥的近缘物种。选择合适的内参基因对于提高实时荧光定量PCR(quantitative real—time PCR,qRT—PCR)分析基因表达的准确性至关重要。本研究在分析小... 小拟南芥(Arabidopsis pumila),又名无苞芥(Olimarabidopsis pumila),为拟南芥的近缘物种。选择合适的内参基因对于提高实时荧光定量PCR(quantitative real—time PCR,qRT—PCR)分析基因表达的准确性至关重要。本研究在分析小拟南芥叶片转录组数据的基础上,筛选了12个表达稳定的候选内参基因,包括肌动蛋白1(actin-1,ACT-1)、α-微管蛋白1(α-tubulin,TUA1)、β-微管蛋白6(β-tubulin,TUB6)、翻译起始因子(translation initiation factor2,IF2)、延伸因子1-α(elongation factor 1-alpha,EF1-α)、聚泛素14(polyubiquitin14,UBQ14)、UBQ9、泛素连接酶35(ubiquitin-conjugating enzyme35,UBC35)、转录起始因子1(transcription initiation factor,HAF1)、FK506结合蛋白62(FK506 binding protein 62,FKBP62)、miR319a和醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)。我们分别利用NormFinder、Genorm和Bestkeeper软件分析了这12个基因在dH2O、NaCl处理下及小拟南芥不同组织中的表达稳定性。研究表明,在dH2O处理条件下表达稳定的基因为TUB6和FKBP62,在NaCl处理条件下为EF1-α和IF2,在组织器官中为HAF1,这些基因适合作为相应试验条件下小拟南芥的内参基因。本研究为小拟南芥基因表达分析提供了可靠的内参基因,具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 小拟南芥 无苞芥 盐胁迫 实时荧光定量PCR 内参基因
新疆小拟南芥NAC转录因子ApNAC055的克隆及表达分析 预览 被引量:3
15
作者 林军 张亮 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2017年第6期747-753,共7页
本研究从新疆特色植物小拟南芥(Arabidopsis pumila)盐胁迫转录组数据结果中,得到1条与拟南芥NAC转录因子ANAC055(Gene Bank登录号为AEE75683.1)序列高度相似的Unigene。根据ORF序列设计引物,利用RT-PCR技术从小拟南芥叶片c DNA中... 本研究从新疆特色植物小拟南芥(Arabidopsis pumila)盐胁迫转录组数据结果中,得到1条与拟南芥NAC转录因子ANAC055(Gene Bank登录号为AEE75683.1)序列高度相似的Unigene。根据ORF序列设计引物,利用RT-PCR技术从小拟南芥叶片c DNA中克隆了该基因的coding sequence(CDS),命名为Ap NAC055。生物信息分析结果表明,Ap NAC055蛋白是1个无跨膜区域的亲水性蛋白,N端具有一段No apical meristem(NAM)保守结构域;该蛋白二级结构包含73个α-螺旋和33个β-转角。系统进化分析结果表明,Ap NAC055与芜菁NAC055进化关系较近,属于同一进化分支。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析结果显示,Ap NAC055在小拟南芥各组织中均有表达,在叶片和果荚中表达量均较高,尤其在果荚中;盐胁迫处理可明显诱导Ap NAC055的表达。本研究表明,Ap NAC055可能在小拟南芥耐盐中起重要作用。 展开更多
关键词 小拟南芥 无苞芥 NAC转录因子 耐盐 基因表达
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细胞工程实验教学改革探索 预览 被引量:1
16
作者 倪伟 胡圣伟 +2 位作者 崔百明 沈军队 《教育教学论坛》 2017年第48期97-98,共2页
细胞工程是生物工程的一个重要方面,也是发展迅猛的前沿学科之一。为了增强学生的实践创新能力及动手能力,配合细胞工程理论课教学改革的不断深化,细胞工程实验教学改革已是大势所趋。本教研组经过多年的探索,从教学内容、教学条件和考... 细胞工程是生物工程的一个重要方面,也是发展迅猛的前沿学科之一。为了增强学生的实践创新能力及动手能力,配合细胞工程理论课教学改革的不断深化,细胞工程实验教学改革已是大势所趋。本教研组经过多年的探索,从教学内容、教学条件和考核制度等方面,对细胞工程实验教学进行了改革,旨在提高学生的综合实验能力,培养他们独立思考、科研创新的能力。 展开更多
关键词 细胞工程 实验 教学改革
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TRV病毒介导的基因沉默体系在新疆陆地棉和亚洲棉中的建立 预览 被引量:1
17
作者 刘慧 于秀立 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2016年第5期485-492,共8页
为研究烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术应用的广谱性,以陆地棉(Gossypium hirsutum) CLA1为标记基因,通过构建基因沉默载体,在新陆早33和亚洲棉(Gossypium arbor... 为研究烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术应用的广谱性,以陆地棉(Gossypium hirsutum) CLA1为标记基因,通过构建基因沉默载体,在新陆早33和亚洲棉(Gossypium arboreum)建立了TRV-VIGS体系.半定量PCR分析表明,与对照相比,TRV侵染的新陆早33和亚洲棉中CLA1基因的表达均被有效抑制,真叶表现出明显的白化症状.同时在45份新陆中系列棉花材料中重复该体系,并且通过控制培养温度来检验温度对VIGS的影响,结果表明,当昼/夜温度分别为23℃/21℃和32℃/28℃时,不同品种的新陆中系列棉花均可以维持不同程度的白化表型.证明,TRV介导的VIGS可以用于室内研究新陆中系列棉花和亚洲棉基因功能. 展开更多
关键词 GOSSYPIUM arboreum GOSSYPIUM hirsutum 基因沉默 烟草脆裂病毒 TRV-VIGS CLA1
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小拟南芥ApZFP基因异源超表达促进拟南芥开花并提高耐逆性 被引量:2
18
作者 刘慧 郭丹丽 +1 位作者 蔡大润 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期296-305,共10页
锌指蛋白(ZFP)是一类重要的转录因子,广泛参与植物的生长发育和非生物胁迫应答。新疆小拟南芥(Arabidopsis pumila)又名无苞芥,是十字花科短命植物,具有高光效、繁殖力强和适应干旱等生物学特征,而且比模式植物拟南芥(A.thaliana... 锌指蛋白(ZFP)是一类重要的转录因子,广泛参与植物的生长发育和非生物胁迫应答。新疆小拟南芥(Arabidopsis pumila)又名无苞芥,是十字花科短命植物,具有高光效、繁殖力强和适应干旱等生物学特征,而且比模式植物拟南芥(A.thaliana)更耐高盐胁迫。将前期克隆的小拟南芥锌指蛋白基因Ap ZFP通过花滴法转化到哥伦比亚生态型拟南芥(Col-0)中,获得了独立表达的转基因株系。表型观察发现,过量表达Ap ZFP基因可促使拟南芥在长短日照下均提前开花。实时荧光定量PCR结果显示,转基因拟南芥株系中,光周期途径中的CO基因和年龄途径中的SPL基因表达上调;春化、环境温度和自主途径中的FLC基因表达下调;编码成花素的基因FT及下游开花相关基因AP1和LFY的表达量均升高。进一步通过盐、干旱和ABA胁迫处理Ap ZFP转基因株系的种子和幼苗,发现在胁迫处理下,与对照相比,转基因拟南芥种子萌发率较高,幼苗主根较长。因此推测,Ap ZFP在植物发育过程中具有多种功能,可能既参与植物的开花转变过程,又同其它植物的锌指蛋白基因一样,参与植物的耐逆过程。 展开更多
关键词 小拟南芥 无苞芥 锌指蛋白 早花 抗逆
亚洲棉bZIP蛋白家族的鉴定及GaFD基因的组织表达分析 预览
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作者 张彦楠 蔡大润 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期832-843,共12页
碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)是真核生物中数量最多并且最具多样性的转录因子之一,参与植物生长发育及响应生物和非生物胁迫。本研究利用亚洲棉(Gossypium arboreum)全基因组数据库,通过生物信息学分析分布在13条染... 碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)是真核生物中数量最多并且最具多样性的转录因子之一,参与植物生长发育及响应生物和非生物胁迫。本研究利用亚洲棉(Gossypium arboreum)全基因组数据库,通过生物信息学分析分布在13条染色体上的159个bZIP家族基因的全序列。系统进化、基因结构和保守基序分析表明这些基因分成13个亚家族。其中,A亚家族有3个GaFD基因GaFD1、GaFD2和GaFD3,通过实时荧光定量PCR分析3个GaFD基因在不同组织中的表达,结果表明GaFD1和GaFD2在SAM中的表达量最高,GaFD3在茎中表达量最高。研究表明棉花基因组中具有数量众多的bZIP家族成员,不同基因结构及FD基因不同的表达特征表明bZIP基因在棉花生长发育中可能具有不同的功能,这些结果为进一步解析棉花bZIP家族基因的功能和作用机理积累了有价值的资料。 展开更多
关键词 碱性亮氨酸拉链 亚洲棉 FD 进化分析 基因表达
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小拟南芥双键还原酶基因OpDBR的克隆及表达分析 预览 被引量:7
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作者 郑丽洁 林军 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2016年第2期251-258,共8页
从小拟南芥,又名无苞芥(Olimarabidopsis pumila,异种名Arabidopsis pumila)幼苗叶片cDNA文库中获得1条与拟南芥烯醛双键还原酶基因At DBR1(Gen Bank登录号为NP_197202.2)高度相似的EST序列,该序列包含1个1041 bp的最大开放阅读框(... 从小拟南芥,又名无苞芥(Olimarabidopsis pumila,异种名Arabidopsis pumila)幼苗叶片cDNA文库中获得1条与拟南芥烯醛双键还原酶基因At DBR1(Gen Bank登录号为NP_197202.2)高度相似的EST序列,该序列包含1个1041 bp的最大开放阅读框(ORF),推测编码346个氨基酸(Gen Bank登录号为KU845686)。利用RT-PCR技术从小拟南芥叶片的cDNA中克隆了该基因,命名为OpDBR。比对分析结果表明,该基因属于中链还原/脱氢酶(medium chain reductase/dehydrogenases,MDR)超级家族,具有double bond reductase-like保守蛋白结构域;该蛋白的二级结构包含106个α-螺旋和48个β-转角。系统进化树分析结果表明,OpDBR编码产物与预测的亚麻芥烯醛双键还原酶(Gen Bank登录号为XP_010492631.1)遗传关系最为接近,属于同一进化分支。实时荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)结果显示,OpDBR在小拟南芥的不同组织中都有表达,茎中表达量最高,根中最低。其在200 mmol/L NaCl、4℃、100μmol/L ABA、20%PEG-6000处理下的表达结果分析显示,该基因可能在小拟南芥应对逆境胁迫时起着重要作用。 展开更多
关键词 小拟南芥 无苞芥 DBR 抗逆 基因表达
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