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车间多机床状态实时监测系统研究 预览
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作者 鲁壮 李波 《机床与液压》 北大核心 2019年第19期77-81,共5页
随着零件加工精度和效率要求的提升,机床实时状态信息对于加工参数的动态调整有着重要作用。以车间多台华中8型数控机床为监测对象,开展了多机床状态信息监测系统的研究。采用STM32下位机系统作为智能终端,移植TCP/IP协议,实现了机床关... 随着零件加工精度和效率要求的提升,机床实时状态信息对于加工参数的动态调整有着重要作用。以车间多台华中8型数控机床为监测对象,开展了多机床状态信息监测系统的研究。采用STM32下位机系统作为智能终端,移植TCP/IP协议,实现了机床关键点温度、运动位置、主轴转速及进给速度等信息的采集,并基于CAN总线搭建了多智能终端的信息传输网络,采用C#语言开发了上位机监控系统。实验测试结果表明:该系统工作稳定,可靠性好,具有良好的扩展性,其可有效提高车间机床监控效率,降低运营成本。 展开更多
关键词 数控机床 信息监测 数据采集 STM32
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学习分析视角下的个性化预测研究 被引量:2
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作者 张琪 王红梅 +1 位作者 庄鲁 赖松 《中国远程教育》 CSSCI 北大核心 2019年第4期38-45,92,93共10页
以学习分析为核心的“数据驱动教学”已成为智能教育时代的重要教学范式。在学习结果预测方面,大多数研究将学习者视为整体进行评估,缺少个性化的分类形式与预测模型,也鲜有较为全面的数据挖掘算法的比较研究。本研究基于中学“互联网+... 以学习分析为核心的“数据驱动教学”已成为智能教育时代的重要教学范式。在学习结果预测方面,大多数研究将学习者视为整体进行评估,缺少个性化的分类形式与预测模型,也鲜有较为全面的数据挖掘算法的比较研究。本研究基于中学“互联网+”混合学习场景,基于“大五人格”分类,分析学习行为指标与不同人格特质群体学习结果之间的相关性,利用多元线性回归构建相应的预测模型。通过对28类回归算法与24类分类算法的结果比较,判别具有最佳精度和鲁棒性的预测算法。研究发现,不同人格特质群体的预测变量存在差异,课后测验平均分数出现在所有群体的预测方程中并占有最高的权重;过程性评估成绩、在线学习时长是较为稳健的预测因子;无论在数值预测还是分类预警中,Random Forest算法都具有最佳效能。 展开更多
关键词 学习分析 学习预测 数据挖掘 人格特质 个性化建模 智能学习系统 预测效能 数据驱动教学
车间多机床热误差补偿技术研究 预览
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作者 李波 鲁壮 +1 位作者 张文 姜涛 《组合机床与自动化加工技术》 北大核心 2019年第5期94-97,共4页
针对车间多机床热误差补偿问题,提出了一种温度分布式采集、集中式建模计算的方法。下位机终端以STM32F1为核心,实现机床敏感点温度采集、补偿值数控系统交换等;上位机服务系统采用.NET平台AForge框架开发,并基于机床特性构建相应的粒... 针对车间多机床热误差补偿问题,提出了一种温度分布式采集、集中式建模计算的方法。下位机终端以STM32F1为核心,实现机床敏感点温度采集、补偿值数控系统交换等;上位机服务系统采用.NET平台AForge框架开发,并基于机床特性构建相应的粒子群优化BP神经网络热误差模型,实现了异构机床的集中热误差补偿计算。通过无线路由器及WDS无线桥接功能模块,扩展无线网络空间范围,热误差补偿终端与上位机服务基于Modbus TCP协议通信。通过功能测试及性能验证,上下位机系统工作稳定,具有良好灵活性及扩展性,有效简化了车间多机床的热误差补偿过程。 展开更多
关键词 热误差补偿 无线网络 多机床 神经网络
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一起由燃放烟花引起的高层住宅火灾事故的调查与认定
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作者 张小芹 路庄 王中翔 《消防技术与产品信息》 2018年第3期48-50,共3页
介绍了一起由燃放烟花引起的高层住宅火灾事故的调查与认定过程,通过缜密细致的现场勘验、物证检测和广泛深入的调查取证,确定了起火原因,可供类似火灾的调查与认定参考。
关键词 火灾调查 烟花 事故原因
环境温湿度对肉鸡营养物质代谢的影响及调控机制 预览
5
作者 陆壮 何晓芳 +3 位作者 张林 李蛟龙 高峰 周光宏 《动物营养学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期3021-3026,共6页
温热环境是影响家禽生产的-个重要因素.肉鸡对温度的影响十分敏感,而湿度又常 与温度共同作用影响肉鸡的体温调节.本文综述了环境温湿度对肉鸡生长性能、神经内分泌机 能以及糖、脂类、蛋白质和矿物质代谢的影响及调控机制,以期为肉鸡... 温热环境是影响家禽生产的-个重要因素.肉鸡对温度的影响十分敏感,而湿度又常 与温度共同作用影响肉鸡的体温调节.本文综述了环境温湿度对肉鸡生长性能、神经内分泌机 能以及糖、脂类、蛋白质和矿物质代谢的影响及调控机制,以期为肉鸡温热环境控制提供理论 依据. 展开更多
关键词 温度 湿度 肉鸡 营养物质代谢 影响 调控机制
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温热环境因子影响肉鸡采食的调控机制 预览
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作者 何晓芳 陆壮 +3 位作者 张林 李蛟龙 高峰 周光宏 《动物营养学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期3027-3034,共8页
采食量是影响肉鸡健康生长的重要因素,摄入的营养物质除一部分用于维持肉鸡基本 生命代谢需求外,大部分用于保障肉鸡良好的生长性能.下丘脑作为中枢神经系统调节采食量 的重要部位,它可以整合外周环境和各种信号分子,使得机体做出适当... 采食量是影响肉鸡健康生长的重要因素,摄入的营养物质除一部分用于维持肉鸡基本 生命代谢需求外,大部分用于保障肉鸡良好的生长性能.下丘脑作为中枢神经系统调节采食量 的重要部位,它可以整合外周环境和各种信号分子,使得机体做出适当的反应,最终调节肉鸡的 采食量.温热环境因子是实际生产中影响家禽采食行为和生长性能的重要环境因素,本文就温 热环境因子对肉鸡采食行为的影响、下丘脑的摄食信号整合机制以及关键热信号分子的调控机 制作一综述,以期为肉鸡温热环境控制提供理论依据. 展开更多
关键词 肉鸡 下丘脑 采食行为 温热环境因子 调控机制
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5-氨基乙酰丙酸的生理功能及在动物生产中的应用 预览
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作者 陆壮 《饲料工业》 北大核心 2017年第1期22-24,共3页
5-氨基乙酰丙酸是一种广泛存在于生物体中的非蛋白氨基酸,在调节血红素合成过程中起重要作用。文章综述了5-氨基乙酰丙酸的生理功能,以及对动物生产性能、铁元素吸收利用以及动物免疫状态的调节作用,为畜牧业进一步开放利用5-氨基乙... 5-氨基乙酰丙酸是一种广泛存在于生物体中的非蛋白氨基酸,在调节血红素合成过程中起重要作用。文章综述了5-氨基乙酰丙酸的生理功能,以及对动物生产性能、铁元素吸收利用以及动物免疫状态的调节作用,为畜牧业进一步开放利用5-氨基乙酰丙酸提供参考依据。 展开更多
关键词 5-氨基乙酰丙酸 生理功能 动物生产
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辽育白牛胴体产肉量预测模型研究 预览
8
作者 张丽君 陆壮 +3 位作者 李静 金双勇 王春润 蒋磊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第6期1654-1658,共5页
为了快速且准确的预测辽育白牛胴体产肉量,进而建立完善的胴体分级体系,本试验对60头辽育白牛进行屠宰胴体分割试验,分别测量了胴体重(X1),第5肋侧厚度(X2),第5~6肋眼肌宽高乘积(X3),第5~6肋眼肌面积(X4),第12肋侧厚度(X5),... 为了快速且准确的预测辽育白牛胴体产肉量,进而建立完善的胴体分级体系,本试验对60头辽育白牛进行屠宰胴体分割试验,分别测量了胴体重(X1),第5肋侧厚度(X2),第5~6肋眼肌宽高乘积(X3),第5~6肋眼肌面积(X4),第12肋侧厚度(X5),第12~13肋眼肌宽高乘积(X6),第12~13肋眼肌面积(X7),肾脏油、心脏油和膈肌油之和(X8),后腿围(X9)和大腿肌肉厚(X10)等与产肉量、产肉率相关的10项指标,利用SPSS 19.0软件对数据进行相关分析和线性回归分析。结果显示,X1、X8与产肉量和产肉率相关性最强,依此推导出2个可信度高、实践中方便应用的产肉量预测方程:1产肉量(眼肌宽高乘积)=0.809X1+0.158X6+0.857X8-13.967(R2=0.986);2产肉量(眼肌面积)=0.779X1+0.318X7+0.933X8-17.779(R2=0.990)。 展开更多
关键词 辽育白牛 产肉量 产肉率 预测模型 胴体分级
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红景天黄酮与血清白蛋白之间相互作用的研究 预览
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作者 陆钊 韩鹏虎 +2 位作者 冷朝阳 芦壮 韩丽琴 《吉林医药学院学报》 2015年第6期431-433,共3页
目的探讨红景天总黄酮对牛血清白蛋白(BSA)荧光作用的影响,以及在金属Cu2+存在和不同pH条件下,黄酮对牛血清白蛋白的荧光猝灭机制。方法测定黄酮、Cu2+离子、不同pH对BSA荧光光谱的影响,并根据所得光谱的变化,判断其对BSA的作用类... 目的探讨红景天总黄酮对牛血清白蛋白(BSA)荧光作用的影响,以及在金属Cu2+存在和不同pH条件下,黄酮对牛血清白蛋白的荧光猝灭机制。方法测定黄酮、Cu2+离子、不同pH对BSA荧光光谱的影响,并根据所得光谱的变化,判断其对BSA的作用类型。结果随着黄酮溶液用量的增大和Cu2+的加入,BSA的发射波长不变而荧光强度逐渐降低,而随着pH的增加,黄酮与BSA混合液的发射波长不变,而荧光强度逐渐增加。结论总黄酮、Cu2+对BSA有荧光猝灭作用,并以静态猝灭作用为主。 展开更多
关键词 红景天总黄酮 血清白蛋白 金属离子 荧光分光光度法 猝灭机制
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西门塔尔×辽育白牛杂种阉牛低营养水平、长周期饲养模式生产中高等级牛肉研究初报 预览
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作者 金双勇 张丽君 +3 位作者 张丽辉 李静 陆壮 安鹏威 《现代畜牧兽医》 2015年第11期30-34,共5页
为探索以辽宁省养殖户现有条件为基础,以黄贮玉米秸秆为主的低营养水平,长周期的饲养模式生产中高等级牛肉的可行性及配套技术,开展了西门塔尔公牛与辽育白牛母牛杂交后代牛的育肥和屠宰试验。结果表明,采用低营养水平饲养西门塔尔... 为探索以辽宁省养殖户现有条件为基础,以黄贮玉米秸秆为主的低营养水平,长周期的饲养模式生产中高等级牛肉的可行性及配套技术,开展了西门塔尔公牛与辽育白牛母牛杂交后代牛的育肥和屠宰试验。结果表明,采用低营养水平饲养西门塔尔公牛与辽育白牛母牛杂交后代公犊牛(阉割),可能造成生长性能下降,育肥期延长,产肉性能下降等负面结果。但对肉品质无明显影响,采用低营养水平、长周期的饲养模式,同样可生产中高等级牛肉。 展开更多
关键词 西门塔尔×辽育白牛杂种阉牛 低营养水平 中高等级牛肉
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Fe2 TiAl热膨胀和弹性性质的第一性原理研究 预览
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作者 路庄 王少峰 《重庆理工大学学报:自然科学版》 CAS 2014年第7期55-60,共6页
基于晶格动力学理论,得出了Fe2 TiAl的声子谱;考虑到晶格的离散效应,并且将晶体中原子的振动用3n个无相互作用的声子来描述;基于密度泛函理论计算Fe2TiAl的基态能量和力常数矩阵,同时采用声子谱的方法来计算Fe2 TiAl的准谐自由能... 基于晶格动力学理论,得出了Fe2 TiAl的声子谱;考虑到晶格的离散效应,并且将晶体中原子的振动用3n个无相互作用的声子来描述;基于密度泛函理论计算Fe2TiAl的基态能量和力常数矩阵,同时采用声子谱的方法来计算Fe2 TiAl的准谐自由能,通过对自由能求极小值获得热平衡体积,并在此基础上获得热膨胀系数、等温体模量和热容;基于弹性理论,研究了Fe2 TiAl的弹性性质,并计算了Fe2 TiAl的等熵弹性常数和Caushy压强随温度的变化关系,同时讨论了Fe2 TiAl的塑性。 展开更多
关键词 FE2 TIAL 声子谱 热膨胀 弹性
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上海市5家医院2011年高血压住院患者降压药物利用分析 被引量:1
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作者 庞露微 王干迷 +2 位作者 汤文璐 陆壮 陈玉洁 《中国临床药学杂志》 CAS 2014年第6期361-365,共5页
目的分析上海市5家医院高血压住院患者降压药物的临床使用情况,并评价其合理性。方法回顾性分析上海市5家医院2011年高血压住院患者电子处方数据,通过药物利用指数(DUI)、日均药费(DDC)排序法、用药金额与用药频度(DDDs)的序号... 目的分析上海市5家医院高血压住院患者降压药物的临床使用情况,并评价其合理性。方法回顾性分析上海市5家医院2011年高血压住院患者电子处方数据,通过药物利用指数(DUI)、日均药费(DDC)排序法、用药金额与用药频度(DDDs)的序号比,了解降压药物的临床利用情况。结果共计13408张降压药物电子处方,使用量最大的降压药物为钙通道阻滞剂(CCB),占总处方量的32.3%;DDDs位居前3位的药品为苯磺酸氨氯地平片、酒石酸美托洛尔片和螺内酯片。大部分降压药物的DUI值和多数降压药物的用药金额与用药频度的序号比值均在1左右。联合用药占总处方数的27.8%。最常见的联合用药形式为钙通道阻滞剂+血管紧张素Ⅱ受体阻断剂+利尿剂和上述三联用药情况下加入肾上腺素B受体阻断药的四联用药形式。结论住院患者临床应用降压药以钙通道阻滞剂苯磺酸氨氯地平片占主导地位。各类降压药物的临床使用剂量基本符合推荐剂量。利尿剂类药物价格低廉患者易于接受,而血管扩张药及CCB类药物价格偏高。联合用药有利于血压控制达标,降低长期治疗费用。 展开更多
关键词 降压药 药物利用 合理用药
天冬氨酸作为非特异性吸附抑制剂在二氧化钛选择性富集磷酸肽中的应用 预览 被引量:6
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作者 迟明 毕炜 +5 位作者 卢庄 宋丽娜 贾伟 张养军 钱小红 蔡耘 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期 152-157,共6页
二氧化钛富集法作为目前使用最为广泛的金属氧化物富集磷酸肽的方法,在富集过程中常常对富含天冬氨酸和谷氨酸的酸性非磷酸化肽段存在一定的非特异性吸附作用。这些肽段与磷酸化肽段一同被富集,降低了磷酸肽富集的选择性。传统方法中使... 二氧化钛富集法作为目前使用最为广泛的金属氧化物富集磷酸肽的方法,在富集过程中常常对富含天冬氨酸和谷氨酸的酸性非磷酸化肽段存在一定的非特异性吸附作用。这些肽段与磷酸化肽段一同被富集,降低了磷酸肽富集的选择性。传统方法中使用的非特异性吸附抑制剂常会对质谱的电喷雾离子源造成污染,因而限制了其在液相色谱-质谱联用(LC-MS)系统中的应用。本研究将天冬氨酸作为一种新型的非特异性吸附抑制剂加入到二氧化钛富集体系中,并分别对3种和9种标准蛋白质酶切肽段混合物进行富集实验,同时与添加另一种非特异性吸附抑制剂——谷氨酸以及不添加任何非特异性吸附抑制剂的富集体系进行了富集效果的比较。结果表明,天冬氨酸可以有效地提高二氧化钛对磷酸肽富集的选择性。将添加天冬氨酸的二氧化钛富集体系应用于鼠肝全蛋白质磷酸肽的富集中,同样取得了很好的效果,表明天冬氨酸在复杂的生物样本的磷酸肽富集中也同样具有良好的应用前景。此外,由于天冬氨酸在反相色谱中极易被洗脱去除,从而避免了传统抑制剂对LC-MS系统离子源的污染问题。 展开更多
关键词 二氧化钛 富集 非特异性吸附抑制剂 天冬氨酸 磷酸肽 鼠肝
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改进的^18O同位素标记法标记蛋白质多肽 预览 被引量:2
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作者 赵焱 卢庄 +2 位作者 贾伟 应万涛 钱小红 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第1期 91-94,共4页
针对^18O同位素标记反应两个重要影响因素——肽段分散度和胰酶灭活方法,进行了标记条件的改进和灭活方法的优化。在H21^8O中加入RapigestTM SF助溶剂并微波辅助加热,使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的标记效率得到明显改进(^18O/^16O峰面积... 针对^18O同位素标记反应两个重要影响因素——肽段分散度和胰酶灭活方法,进行了标记条件的改进和灭活方法的优化。在H21^8O中加入RapigestTM SF助溶剂并微波辅助加热,使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的标记效率得到明显改进(^18O/^16O峰面积比值〉99%)。标记后,对胰酶进行还原烷基化化学修饰彻底灭活,使标记后的肽段稳定性显著提高,放置6d不发生回交反应。对标准蛋白质甲状腺球蛋白酶切肽段混合物标记后的质谱实验结果表明:优化的标记方法能快速稳定地标记蛋白质酶切多肽。 展开更多
关键词 18O同位素标记 多肽 蛋白质组
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麦胚凝集素亲和色谱富集糖肽过程中的肽键裂解 预览 被引量:2
15
作者 卢庄 王京兰 +5 位作者 贾伟 杨兵 蔡耘 邓玉林 张玉奎 钱小红 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期 19-23,共5页
蛋白质的糖基化是最重要的翻译后修饰之一,与蛋白质结构和功能的关系密切。凝集素亲和色谱是蛋白质糖基化研究中很常用的工具,不同的凝集素可以对不同的单糖或寡糖有特异的富集作用。麦胚凝集素(WGA)由于其特异作用的糖型广泛存在... 蛋白质的糖基化是最重要的翻译后修饰之一,与蛋白质结构和功能的关系密切。凝集素亲和色谱是蛋白质糖基化研究中很常用的工具,不同的凝集素可以对不同的单糖或寡糖有特异的富集作用。麦胚凝集素(WGA)由于其特异作用的糖型广泛存在而成为使用最多的凝集素之一。在本研究中,发现将WGA用于糖肽亲和富集会导致部分肽段的降解,从而导致后续的肽段序列分析的失败。本文用4种标准蛋白质对这种现象进行了验证,结果表明肽段的降解可以发生在多个位点,其中较多地发生在酪氨酸、苯丙氨酸及亮氨酸的羧基端。这一结果提示:在糖蛋白质组研究中,如果应用WGA富集糖肽并采用质谱进行鉴定,则采用半酶切或非特异性酶切的检索策略更为合适。 展开更多
关键词 麦胚凝集素亲和色谱 糖肽 肽键 断裂 蛋白质组学
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基于膜超滤的糖肽富集新方法 预览
16
作者 卢庄 贾伟 +4 位作者 宋丽娜 蔡耘 邓玉林 张玉奎 钱小红 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期 644-648,共5页
建立了一种用于糖肽富集的新型超滤方法,采用截留相对分子质量为3000μ的超滤膜,截取相对分子质量大于3000μ的组分,同时完成糖肽的富集、样本的脱盐及浓缩,简化了操作过程并减少了样本损失。用4种标准蛋白酶切肽段混合物测试方法... 建立了一种用于糖肽富集的新型超滤方法,采用截留相对分子质量为3000μ的超滤膜,截取相对分子质量大于3000μ的组分,同时完成糖肽的富集、样本的脱盐及浓缩,简化了操作过程并减少了样本损失。用4种标准蛋白酶切肽段混合物测试方法的有效性,结果表明,采用超滤方法富集后的样品可以多鉴定1个糖肽,且所有鉴定的糖肽丰度远高于未富集的样品。将该方法用于人血浆样本,血浆全酶切肽段的1个SCX组分用超滤法富集后,其鉴定的糖肽数量超过未富集组分的6倍,且糖肽富集的选择性大于85%。该方法为糖蛋白质组学的研究及糖相关生物标志物的开发提供了有力的技术支持。 展开更多
关键词 N-连接糖肽 超滤 富集
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规模化蛋白质生物质谱鉴定中肽段氨基端环化修饰现象 预览 被引量:1
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作者 卢庄 赵丽艳 +4 位作者 张养军 蔡耘 邓玉林 张玉奎 钱小红 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第7期 950-954,共5页
对蛋白质样品制备中引入的氨基酸残基的一种现象——蛋白质酶切肽段氨基端的环化修饰现象的初步研究结果显示,很多以谷氨酰胺(Q)或氨乙酰化修饰的半胱氨酸(CAM_C)残基起始的肽段会发生氨基端的环化修饰,且修饰反应不完全,在同一... 对蛋白质样品制备中引入的氨基酸残基的一种现象——蛋白质酶切肽段氨基端的环化修饰现象的初步研究结果显示,很多以谷氨酰胺(Q)或氨乙酰化修饰的半胱氨酸(CAM_C)残基起始的肽段会发生氨基端的环化修饰,且修饰反应不完全,在同一样本中修饰与非修饰两种状态常同时存在,并且环化修饰后的肽段的反相色谱保留时间发生延迟。在数据库检索时添加环化修饰,可以提高蛋白质的鉴定成功率。本研究结果为大规模的蛋白质质谱数据解析提供了有价值的参考。 展开更多
关键词 肽段氨基端 环化 规模化 蛋白质鉴定
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基于强阳离子交换色谱分离的磷酸化肽段富集策略 预览 被引量:5
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作者 隋少卉 王京兰 +4 位作者 卢庄 蔡耘 张养军 蔚文峰 钱小红 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期 195-199,共5页
为了在短时间内获得相对含量高的磷酸化肽段,以标准磷酸化蛋白质为模型对强阳离子交换色谱(SCX)分离磷酸化肽段体系的缓冲溶液和梯度设置进行了研究,并用酵母酶切肽段混合物考察了该路线在较复杂的样品中的应用。实验结果表明优化后... 为了在短时间内获得相对含量高的磷酸化肽段,以标准磷酸化蛋白质为模型对强阳离子交换色谱(SCX)分离磷酸化肽段体系的缓冲溶液和梯度设置进行了研究,并用酵母酶切肽段混合物考察了该路线在较复杂的样品中的应用。实验结果表明优化后的体系能够在30min内分离出磷酸肽段,而且非磷酸化肽段的干扰很少,这样便相对提高了磷酸化肽段在质谱仪中的响应强度,重要的是该体系可以对复杂样品进行很好的分离。这说明SCX用于规模化磷酸化肽段富集的策略是可行的。本研究为磷酸化蛋白质组学规模化分析提供了实用技术。 展开更多
关键词 磷酸化 位点 强阳离子交换色谱 富集 蛋白质组学
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等电聚焦分离与^18O稳定同位素标记联用的磷酸化蛋白质组学定量方法研究 预览 被引量:5
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作者 隋少卉 王京兰 +5 位作者 贾伟 卢庄 刘金风 宋丽娜 蔡耘 钱小红 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第8期 1017-1023,共7页
磷酸化蛋白质组学定量分析,要对磷酸化修饰富集技术和定量技术进行研究。基于此,本研究采用^18O稳定同位素标记技术对胰蛋白酶酶解肽段混合物进行标记,并对其标记时间和标记后胰蛋白酶的变性条件进行优化。结果表明:在pH=4~5的KH2PO4... 磷酸化蛋白质组学定量分析,要对磷酸化修饰富集技术和定量技术进行研究。基于此,本研究采用^18O稳定同位素标记技术对胰蛋白酶酶解肽段混合物进行标记,并对其标记时间和标记后胰蛋白酶的变性条件进行优化。结果表明:在pH=4~5的KH2PO4缓冲体系中,37℃,标记反应持续19~24h,除了C-端肽之外,几乎所有的肽段都可达到100%标记;采用TCEP可以有效地抑制16O-^18O回标现象。建立了与18O标记技术兼容性良好的IPG-IEF技术对磷酸化肽段进行选择性富集,富集后共从HepG2细胞中鉴定到491个磷酸化位点、362个磷酸化肽段和356个磷酸化蛋白,表明IPG-IEF在大规模磷酸化肽段分离富集中是有效的;最后与高准确度高灵敏度高分辨率的LTQ-FTICR质谱仪联用,建立了基于^18O-IPG-IEF-LTQ-FTICR的磷酸化蛋白质组定量技术。实验结果表明,该技术可以实现磷酸化肽段的有效定性和定量。本研究为磷酸化蛋白质组学定量研究提供了实用技术。 展开更多
关键词 18O标记技术 等电聚焦 傅里叶交换离子回旋质谱(LTQ-FTICR-MS) 磷酸化蛋白质组定性与定量
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^18 O稳定同位素标记定量蛋白质组研究技术的建立与优化 预览 被引量:9
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作者 钱林艺 应万涛 +4 位作者 刘新 卢庄 蔡耘 何建勇 钱小红 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期 161-165,共5页
建立了^18O稳定同位素标记方法,用于复杂体系蛋白质相对定量分析.对影响蛋白质标记稳定性的实验条件进行了比较和优化.结果表明,采用酶切后标记的方法,酶切肽段在胰酶催化下,在pH 5.0的K2HPO4/KH2PO4缓冲体系中,37℃^18O标记反应16 h,... 建立了^18O稳定同位素标记方法,用于复杂体系蛋白质相对定量分析.对影响蛋白质标记稳定性的实验条件进行了比较和优化.结果表明,采用酶切后标记的方法,酶切肽段在胰酶催化下,在pH 5.0的K2HPO4/KH2PO4缓冲体系中,37℃^18O标记反应16 h,绝大部分肽段即可达到100%的标记效率.对多个16O/^18O 成对肽段峰强度的动态范围及定量准确度进行了考察.结果表明,^18O标记方法是一种简便、稳定、可靠的相对定量方法,10倍动态范围内,标记率相对标准偏差在18.4%以内,^16O/^18O峰强度呈很好的线性关系.本实验考察了标记后的肽段在不同溶液体系中的稳定性,为复杂样品的预处理和预分离的溶液条件提供了依据. 展开更多
关键词 稳定同位素标记 ^18O 定量蛋白质组学 质谱 液相色谱
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