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我国林业碳汇融资发展对策研究 预览
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作者 刘铭 孙铭君 彭红军 《中国林业经济》 2019年第4期1-4,8共5页
发展林业碳汇,是缓解减排压力、改善生态环境的有效途径。通过简述我国林业碳汇融资的内涵、发展现状,分析现存发展问题,提出从建立全国性林业碳汇交易市场、鼓励林业碳汇领域的金融创新、明晰林业碳汇产权和完善林业碳汇项目风险防范... 发展林业碳汇,是缓解减排压力、改善生态环境的有效途径。通过简述我国林业碳汇融资的内涵、发展现状,分析现存发展问题,提出从建立全国性林业碳汇交易市场、鼓励林业碳汇领域的金融创新、明晰林业碳汇产权和完善林业碳汇项目风险防范机制等四方面改善林业碳汇融资现状。 展开更多
关键词 林业碳汇 融资 发展现状
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基于运动历史图像与卷积神经网络的行为识别 预览
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作者 石英 孙明军 +2 位作者 李之达 罗佳齐 杨明东 《湘潭大学学报:自然科学版》 CAS 2019年第2期109-117,共9页
针对人体行为识别难于兼顾速度与精度的问题,提出了一种结合运动历史图像(MHI)与卷积神经网络的行为识别算法.该算法首先从原始视频序列中计算MHI,不仅减少了待处理的信息量,还提取了行为识别中的关键时空信息;接着以MHI作为输入,搭建... 针对人体行为识别难于兼顾速度与精度的问题,提出了一种结合运动历史图像(MHI)与卷积神经网络的行为识别算法.该算法首先从原始视频序列中计算MHI,不仅减少了待处理的信息量,还提取了行为识别中的关键时空信息;接着以MHI作为输入,搭建了深度卷积神经网络,可以更好地表达时空信息;最后利用随机梯度下降法与dropout策略训练网络,实现行为类别分类.对比不同卷积神经网络训练与测试实验,该算法在Weizmann行为识别数据集上取得了95%的平均识别率,相较于未改进的网络结构提升了1.2%;对于持续时间为1.6s的行为动作,该算法的识别时间为1.56s.实验结果表明,所提算法在维持较高识别准确率的同时,实现了人体行为的在线实时识别与分类. 展开更多
关键词 深度学习 运动历史图像 卷积神经网络 行为识别 Weizmann行为识别数据集
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蛙泳结合推拿疗法治疗颈型颈椎病的研究
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作者 孙明君 王炳洋 《智慧健康》 2019年第13期123-124,128共3页
本文以蛙泳中划臂呼吸动作参与肌群与颈型颈椎病发病肌群高度重合为切入点,通过对80例颈型颈椎病患者随机分为试验组和对照组进行分组治疗观察,经过12周的治疗对比,通过对治疗前后的NPQ颈痛量表、简式McGill疼痛量表评分进行统计学分析... 本文以蛙泳中划臂呼吸动作参与肌群与颈型颈椎病发病肌群高度重合为切入点,通过对80例颈型颈椎病患者随机分为试验组和对照组进行分组治疗观察,经过12周的治疗对比,通过对治疗前后的NPQ颈痛量表、简式McGill疼痛量表评分进行统计学分析,从总体评分来看,试验组效果明显高于对照组,其组内前后侧差异显而易见,具有统计学意义(P<0.05)。可以看出蛙泳结合推拿疗法治疗颈型颈椎病临床效果明显。因此既可以运用蛙泳来作为治疗颈型颈椎病有效补充,也可以将蛙泳运动作为一种预防颈型颈椎病的手段进行推广。 展开更多
关键词 蛙泳 推拿疗法 颈型颈椎病
框架柱的钢筋施工质量通病控制措施研究 预览
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作者 孙明俊 唐汪柱 《建材世界》 2018年第3期70-72,78共4页
建筑结构中框架柱是非常重要的承重结构,它能起到支撑梁板等上部荷载及自身荷载的作用,因此必须保证其钢筋分项工程的施工质量。该文在分析安徽省新型城镇化建设项目宿舍楼框架柱钢筋分项工程施工过程中存在的质量通病基础上,提出了柱... 建筑结构中框架柱是非常重要的承重结构,它能起到支撑梁板等上部荷载及自身荷载的作用,因此必须保证其钢筋分项工程的施工质量。该文在分析安徽省新型城镇化建设项目宿舍楼框架柱钢筋分项工程施工过程中存在的质量通病基础上,提出了柱子箍筋制作与安装、柱筋定位和柱中纵向钢筋搭接长度等方面施工质量对柱钢筋分项工程施工质量的影响。 展开更多
关键词 框架柱 箍筋 搭接 钢筋定位
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安全壳冷却对氢气风险管理的影响研究 预览
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作者 刘汉臣 孙明军 佟立丽 《核科学与工程》 CSCD 北大核心 2018年第6期995-1001,共7页
严重事故管理(SAM)过程中,氢气控制相关的缓解措施可能与其他缓解措施相互影响,带来负面效果。本文研究了安全壳冷却应用于安全壳降压策略与氢气控制策略进行事故缓解时对氢气风险的影响。利用MATLAB开发了安全壳氢气可燃性判断辅助计算... 严重事故管理(SAM)过程中,氢气控制相关的缓解措施可能与其他缓解措施相互影响,带来负面效果。本文研究了安全壳冷却应用于安全壳降压策略与氢气控制策略进行事故缓解时对氢气风险的影响。利用MATLAB开发了安全壳氢气可燃性判断辅助计算(CA)用于氢气可燃性判断。在此基础上,利用一体化分析程序建立了核电厂主系统与安全壳耦合分析模型,研究了安全壳惰化与恢复安全壳冷却对氢气风险的影响。分析表明,以50%流量开启安全壳冷却,能够维持安全壳压力且内部环境处于惰化状态,结合CA,能够通过控制安全壳压力实现缓解安全壳的氢气风险,可为技术支持中心制定相关缓解策略提供参考,提高严重事故管理导则的可执行性。 展开更多
关键词 安全壳 氢气风险 非能动安全壳冷却 严重事故管理
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布鲁氏菌MLVA-15分型方法的建立 预览
6
作者 王勋 米吉提·莫合他尔汗 +7 位作者 孙明军 狄栋栋 许芳 贾舒安 颜成旭 李金平 范伟兴 曾巧英 《中国兽药杂志》 2018年第8期12-18,共7页
为提高对我国布鲁氏菌流行菌株的鉴别分型能力,利用布鲁氏菌可变数目串联重复序列(VNTR)的多态性,建立了新的布鲁氏菌分型方法——MLVA-15。与传统的布鲁氏菌MLVA-16和BruMLSA21分型方法相比,新的MLVA-15分型方法对我国羊种布鲁氏菌... 为提高对我国布鲁氏菌流行菌株的鉴别分型能力,利用布鲁氏菌可变数目串联重复序列(VNTR)的多态性,建立了新的布鲁氏菌分型方法——MLVA-15。与传统的布鲁氏菌MLVA-16和BruMLSA21分型方法相比,新的MLVA-15分型方法对我国羊种布鲁氏菌流行菌株的区分能力有着显著的提高,能够满足布病流行病学调查中对病原追溯的需求。尝试利用不同VNTR位点组合来提高对布鲁氏菌的鉴别能力,为单一种型布鲁氏菌流行区域的布病病原学调查提供了新思路。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 VNTR MLVA BruMLSA
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马鼻肺炎病毒进化分析及DNA条形码的确定
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作者 郑小龙 王群 +4 位作者 孙明君 孙涛 朱来华 梁成珠 岳志芹 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期238-242,共5页
从GenBank数据库下载马鼻肺炎病毒基因组全序列和同属的其他病毒基因组序列,对其进行多重比对,绘制系统进化树,并根据序列比对筛选保守序列作为马鼻肺炎病毒的DNA条形码,筛选出2条基因序列作为马鼻肺炎病毒的DNA条形码,可用于马鼻... 从GenBank数据库下载马鼻肺炎病毒基因组全序列和同属的其他病毒基因组序列,对其进行多重比对,绘制系统进化树,并根据序列比对筛选保守序列作为马鼻肺炎病毒的DNA条形码,筛选出2条基因序列作为马鼻肺炎病毒的DNA条形码,可用于马鼻肺炎病毒的鉴别诊断。 展开更多
关键词 马鼻肺炎病毒 系统进化 DNA条形码
反应堆燃料棒^131I泄漏危害与防护 预览
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作者 孙明军 祝贺 +2 位作者 赵延鹏 安世峰 曲冰 《核电子学与探测技术》 北大核心 2017年第4期445-449,共5页
反应堆如发生燃料破损,^131I等裂变气体会通过破损包壳释放到厂房中增加人员内照射风险。以CPR1000机组为例分析表明:即使1根燃料棒破损也会对工作人员带来内照射风险,破损达运行限值0.25%时,即使投运净化系统,也需对人员采取防护措施... 反应堆如发生燃料破损,^131I等裂变气体会通过破损包壳释放到厂房中增加人员内照射风险。以CPR1000机组为例分析表明:即使1根燃料棒破损也会对工作人员带来内照射风险,破损达运行限值0.25%时,即使投运净化系统,也需对人员采取防护措施。本文结合实际核电厂运行经验探讨了放射性碘危害的控制和防护措施。 展开更多
关键词 燃料破损 碘危害 评估 防护
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比利时输入中国牛精液携带的施马伦贝格病毒潜在入侵风险评估 预览 被引量:1
9
作者 张志诚 李继东 +4 位作者 孙明军 马珊珊 戈胜强 吴晓东 王志亮 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期1110-1117,共8页
为明确现阶段比利时输入中国牛精液携带施马伦贝格病毒的潜在入侵风险,基于世界动物卫生组织(Of-fice International Des Epizooties,OIE)风险评估的框架,结合贝叶斯统计推断的方法,开展现阶段比利时拟输入中国牛精液产品携带施... 为明确现阶段比利时输入中国牛精液携带施马伦贝格病毒的潜在入侵风险,基于世界动物卫生组织(Of-fice International Des Epizooties,OIE)风险评估的框架,结合贝叶斯统计推断的方法,开展现阶段比利时拟输入中国牛精液产品携带施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)通过口岸贸易的输入量化风险评估。释放评估显示,比利时畜群存在SBV的释放风险。基于对比利时的SBV的监测监控体系、易感畜群监视、实验室诊断方法选择,结合检测方法和试剂有效性的参数化模拟,显示比利时牛精液供体动物SBV阳性预测值超过66.8866%的概率不大于0.0019。参照比利时2011年度出口到中国的精液批次标准,模拟现阶段比利时种用牛精液出口到中国市场每1批次中可能检出的假阴性概率在82.16%的置信区间内分布在0.001到0.006之间,即1000批次精液的假阴性检出批次在82%的置信区间为1到6个批次,大于6个批次的假阴性概率小于13.63%,大于1个批次的概率大于95.80%。评估结论认为,从比利时输入有关的牛精液等产品将会对我国养殖畜群及其生态安全等产生较大的不确定性风险。 展开更多
关键词 精液 施马伦贝格病毒 贝叶斯推断 量化风险 假阴性 口岸 比利时
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西方马脑炎病毒TaqMan MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立 预览
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作者 郑小龙 王群 +3 位作者 邓明俊 张晓文 孙明君 朱来华 《动物医学进展》 北大核心 2016年第1期6-10,共5页
通过RT-PCR从西方马脑炎病毒(WEEV)中扩增得到1 317bp特异的保守序列,将其克隆到pMD-20T载体中,进行体外转录,制备标准品cRNA。以10倍比稀释的cRNA为模板,进行TaqMan MGB荧光定量RT-PCR扩增并制作标准曲线,建立了WEEV荧光定量RT-PCR... 通过RT-PCR从西方马脑炎病毒(WEEV)中扩增得到1 317bp特异的保守序列,将其克隆到pMD-20T载体中,进行体外转录,制备标准品cRNA。以10倍比稀释的cRNA为模板,进行TaqMan MGB荧光定量RT-PCR扩增并制作标准曲线,建立了WEEV荧光定量RT-PCR检测方法。对建立的方法进行了特异性和敏感性试验。结果表明,建立的荧光定量RT-PCR方法最低可检测10拷贝的cRNA;且与马鼻肺炎病毒(EHV-1)、马动脉炎病毒(EAV)、马流感病毒(EIV,H3N8)、西尼罗病毒(WNV)、东方马脑炎病毒(EEEV)和日本脑炎病毒(JEV)不发生交叉反应。与常规RT-PCR相比,该方法更加快速,特异性和敏感性更高,灵敏度为常规RT-PCR方法的100倍。 展开更多
关键词 西方马脑炎病毒 TAQMAN MGB 荧光定量RT-PCR
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板坯自动喷涂技术在热连轧带钢厂的应用 预览
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作者 夏小明 孙明军 +2 位作者 罗桂梅 何光键 周心富 《表面技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期138-143,共6页
目的 降低炉内氧化烧损,提高产品的成材率。方法 板坯在上料辊道上及进加热炉前,当检测的板坯温度低于300℃时,利用辊刷及空气吹扫装置清理上下表面后,喷涂一层防高温氧化隔离剂,然后装炉加热,经热连轧成卷。为了减少隔离剂的浪费,提高... 目的 降低炉内氧化烧损,提高产品的成材率。方法 板坯在上料辊道上及进加热炉前,当检测的板坯温度低于300℃时,利用辊刷及空气吹扫装置清理上下表面后,喷涂一层防高温氧化隔离剂,然后装炉加热,经热连轧成卷。为了减少隔离剂的浪费,提高喷涂效果与设备运行效率,将毛状细钢丝改为钢丝绳,截止阀到喷嘴的距离(需要清洗段)由原约4 m缩短为0.2 m,材质由软塑料管改为内径5 mm的铜管。因上料辊道长度短,超过300℃的热坯必须停留在喷涂罩内,且时间不固定,因此系统设置停留时间≤10 min则继续喷涂,否则,清洗管路,停止喷涂。为了解决停留后需继续喷涂,导致喷涂层厚度不均,最终造成中间坯同块钢出现温度陡降的问题,需要延迟溢流阀门关闭0.5 s,喷涂系统压力维持在0.3 MPa之内。结果 成材率可以提高0.3%以上,吨钢涂料消耗控制在0.33 kg以内。结论 通过优化喷涂设备结构、材质以及喷涂溢流阀门动作时序,控制系统压力,能实现自动喷涂,获得涂层均匀、节省涂料、提高成材率的效果。 展开更多
关键词 板坯 自动喷涂系统 涂料 涂层厚度 温降 氧化烧损
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东方马脑脊髓炎病毒PCR-DHPLC检测方法的建立与初步应用 预览
12
作者 郑小龙 王群 +4 位作者 孙涛 孙明君 张晓文 朱来华 梁成珠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期638-641,共4页
为建立检测东方马脑脊髓炎病毒(EEEV)的方法,本研究利用PCR结合变性高效液相色谱技术(DHPLC),针对EEEV NS1基因,设计特异性引物,通过优化反应条件,对核酸扩增产物采用DHPLC进行检测分析,核酸扩增产物形成DHPLC特征峰图,建立了EEEV的... 为建立检测东方马脑脊髓炎病毒(EEEV)的方法,本研究利用PCR结合变性高效液相色谱技术(DHPLC),针对EEEV NS1基因,设计特异性引物,通过优化反应条件,对核酸扩增产物采用DHPLC进行检测分析,核酸扩增产物形成DHPLC特征峰图,建立了EEEV的PCR-DHPLC快速检测方法。结果显示该方法与其他6种常见马病病毒均无交叉反应,未检测到其他马病病毒的阳性吸收峰,具有较强的特异性;对梯度稀释的标准阳性模板的检测限可达到10拷贝/μL;利用本研究建立的方法与荧光定量RT-PCR对30份临床样品进行检测,两者符合率达100%。本研究建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可以用于EEE的病原学诊断及流行病学调查。 展开更多
关键词 东方马脑脊髓炎 变性高效液相色谱 RT-PCR 荧光定量PCR
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北冬虫夏草多糖对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的影响 被引量:4
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作者 呼晨 孙铭君 姚金水 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期518-521,共4页
为探讨北冬虫夏草多糖对四氯化碳(CCl4)所致小鼠肝损伤的保护作用。通过不同剂量北冬虫夏草多糖对CCl4致小鼠急性肝损伤的结构和功能的研究,测定了试验小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性... 为探讨北冬虫夏草多糖对四氯化碳(CCl4)所致小鼠肝损伤的保护作用。通过不同剂量北冬虫夏草多糖对CCl4致小鼠急性肝损伤的结构和功能的研究,测定了试验小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性和总胆红素(T-BiL)水平,以及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性及丙二醛(MDA)含量,并对肝脏进行了病理形态学的显微观察。结果显示:各剂量北冬虫夏草多糖能不同程度降低CCl4所致小鼠血清中AST、ALT、ALP活性和T-BiL水平,升高肝脏组织中SOD、GSH的水平,降低肝脏组织中MDA的含量;减轻和改善化学性肝损伤肝组织的病理变化程度和促进其结构和功能的修复。北冬虫夏草多糖对CCl4所致小鼠肝损伤有较好的保护作用。 展开更多
关键词 北冬虫夏草多糖 四氯化碳 小鼠 肝损伤
选矿厂常用管道性质和管道支吊架间距的计算 预览
14
作者 何洋 孙明俊 夏自发 《有色设备》 2016年第2期29-31,共3页
针对选矿厂常用管道,按输送介质不同进行分类。总结选矿厂常用管道材质,材质特性以及可应用作业点。指出管道支吊架间距与管道强度条件和刚度条件相关,给出计算方法,并进行实例计算。
关键词 选矿厂 管道性质 管道支吊架间距
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山东某铁矿碎磨流程研究 预览
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作者 孙明俊 周苏阳 《有色设备》 2016年第6期4-6,13共4页
针对山东某427.1万t/a铁矿的矿石性质,通过对建设投资和生产成本进行数据分析,对可能使用的常规三段一闭路、SABC、HPGR三种碎磨流程进行综合技术比较。根据方案比较结果和国内外类似选矿厂的生产实践经验,该铁矿的碎磨流程方案推... 针对山东某427.1万t/a铁矿的矿石性质,通过对建设投资和生产成本进行数据分析,对可能使用的常规三段一闭路、SABC、HPGR三种碎磨流程进行综合技术比较。根据方案比较结果和国内外类似选矿厂的生产实践经验,该铁矿的碎磨流程方案推荐使用HPGR碎磨流程。 展开更多
关键词 铁矿 碎磨流程 高压辊磨机
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进出口动物中新霉素 ELISA 检测方法的建立 预览
16
作者 孙明君 邱芳 +1 位作者 张金玲 郑小龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第12期3163-3169,共7页
应用碳二亚胺法合成人工抗原得到卵清蛋白偶联新霉素,通过方阵试验确定最佳抗原包被浓度与抗体稀释倍数,以新霉素质量浓度对数为横坐标、抗体抑制率为纵坐标绘制标准曲线,建立了进出口食用动物中新霉素ELISA 快速检测技术,并对建立的方... 应用碳二亚胺法合成人工抗原得到卵清蛋白偶联新霉素,通过方阵试验确定最佳抗原包被浓度与抗体稀释倍数,以新霉素质量浓度对数为横坐标、抗体抑制率为纵坐标绘制标准曲线,建立了进出口食用动物中新霉素ELISA 快速检测技术,并对建立的方法进行了回收率和特异性试验。结果表明,建立的检测方法包被人工合成抗原的最适稀释度为1∶200,抗体的最佳稀释度为1∶2000,半数抑制浓度(IC50)为6.99 ng/mL;该方法的最低检测限达40 ng/mL,与庆大霉素、卡那霉素、链霉素、托普霉素、阿米卡星、双氢链霉素的交叉反应率均小于0.1%,平均加标回收率83.77%。标准曲线在1.5-40 ng/mL 范围内是线性的,相关系数为0.987,标准曲线方程为y=-37.66x+94.592;与常规液相检测方法相比操作简单、快速。本研究建立了一种快速、高效、特异的新霉素ELISA 检测方法。 展开更多
关键词 进出口食用动物 新霉素 酶联免疫吸附试验 检测方法
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罕见胸腺原始神经外胚层肿瘤的临床特点
17
作者 杜亚奇 刘东屏 +1 位作者 孙明军 赵梅芬 《热带医学杂志》 CAS 2016年第10期1275-1277,1289共4页
目的 探讨原始神经外胚层肿瘤(PNET)的临床特点和诊疗方法。方法 回顾性分析中国医科大学附属第一医院收治的1例胸腺原始神经外胚层肿瘤的临床资料,分析其临床、病理及治疗的特点。结果 经超声引导下穿刺取病理,行免疫组化,获得组织... 目的 探讨原始神经外胚层肿瘤(PNET)的临床特点和诊疗方法。方法 回顾性分析中国医科大学附属第一医院收治的1例胸腺原始神经外胚层肿瘤的临床资料,分析其临床、病理及治疗的特点。结果 经超声引导下穿刺取病理,行免疫组化,获得组织学证据,诊断为胸腺原始神经外胚层肿瘤(IV期)。结论 PNET属于高度恶性肿瘤,易发生远处转移,且预后差,因发病罕见,临床及病理医师对其认识不足,易造成误诊或漏诊。 展开更多
关键词 原始神经外胚层肿瘤 急性胰腺炎
热轧IF钢汽车原板质量问题分析及关键技术研究 预览 被引量:4
18
作者 褚俊威 孙明军 邱增帅 《轧钢》 2015年第2期18-21,共4页
针对热轧IF钢汽车原板生产中存在的温度偏差、边部黑线、宽度拉窄、卷取压痕等质量问题进行了分析,并结合生产实际,提高了板坯出炉温度,优化了E1立辊辊型、除鳞工艺、U形卷取模型控制参数和控制方法、精轧机组速度制度,并对活套单... 针对热轧IF钢汽车原板生产中存在的温度偏差、边部黑线、宽度拉窄、卷取压痕等质量问题进行了分析,并结合生产实际,提高了板坯出炉温度,优化了E1立辊辊型、除鳞工艺、U形卷取模型控制参数和控制方法、精轧机组速度制度,并对活套单位张力进行了调整,提升了IF钢汽车原板的产品质量,实现了稳定生产。 展开更多
关键词 IF钢汽车原板 热轧工艺 质量问题 改进措施
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结直肠透明细胞癌的临床病理观察及分子生物学特点 被引量:3
19
作者 陈岚 肖飞 +2 位作者 孙铭钧 刘东戈 何淑蓉 《诊断病理学杂志》 CSCD 2015年第4期212-216,232共6页
目的 探讨结直肠透明细胞上皮性肿瘤的临床病理形态及分子生物学特征,探讨其发病机制与大肠腺瘤及传统腺癌的相关性.方法 比较1例乙状结肠息肉切除标本中透明细胞病变和传统腺瘤成分的组织学、免疫组化、电镜及分子生物学特点,并结合文... 目的 探讨结直肠透明细胞上皮性肿瘤的临床病理形态及分子生物学特征,探讨其发病机制与大肠腺瘤及传统腺癌的相关性.方法 比较1例乙状结肠息肉切除标本中透明细胞病变和传统腺瘤成分的组织学、免疫组化、电镜及分子生物学特点,并结合文献复习.结果 本例乙状结肠透明细胞病变与周围腺瘤病变截然分界,并浸润至黏膜下层,符合原发性结直肠透明细胞癌.其分子生物学特点与腺瘤成分不同,而与传统结直肠癌(CRC)一致,具有APC、TP53基因突变,并保持传统CRC免疫组化CK7阴性、CK20和CDX2阳性的特征,空亮的胞质不含黏液,可能为退变的脂滴.结论 结直肠原发性透明细胞癌罕见,它可能是传统CRC的一种形态学变异.鉴别诊断要除外肾脏及女性盆腔生殖系统透明细胞癌,及具有透明细胞形态改变的神经内分泌肿瘤. 展开更多
关键词 透明细胞癌 结直肠癌 分子学 APC TP53
东方马脑脊髓炎病毒TaqMan MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立 预览 被引量:1
20
作者 郑小龙 王群 +2 位作者 张晓文 孙明君 朱来华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第11期2850-2855,共6页
本试验通过RT-PCR从东方马脑脊髓炎病毒(EEEV)中扩增得到128bp的特异性保守序列,将其克隆到pMD20-T载体中,并进行体外转录,制备标准品cRNA。以10倍系列稀释的cRNA为模板,进行TaqMan MGB荧光定量RT-PCR扩增并制作标准曲线,建立了EEEV T... 本试验通过RT-PCR从东方马脑脊髓炎病毒(EEEV)中扩增得到128bp的特异性保守序列,将其克隆到pMD20-T载体中,并进行体外转录,制备标准品cRNA。以10倍系列稀释的cRNA为模板,进行TaqMan MGB荧光定量RT-PCR扩增并制作标准曲线,建立了EEEV TaqMan MGB荧光定量RT-PCR的检测方法。进一步对建立的方法进行了特异性和敏感性试验。结果表明,建立的TaqMan MGB荧光定量RT-PCR最低可检测10拷贝/μL的cRNA;且与阴性对照及马鼻肺炎病毒(EHV-1)、马动脉炎病毒(EAV)、马流感病毒(EIV,H3N8)、西尼罗病毒(WNV)、西方马脑脊髓炎病毒(WEEV)和日本马脑炎病毒(JEV)均不发生交叉反应。所制作的标准曲线在1.0×10^1~1.0×10^6拷贝/μL浓度范围内有极好的线性关系,相关系数为0.998,标准曲线方程式为y=40-3.35logx;与常规RT-PCR相比,该方法更加快速,特异性和敏感性更高,灵敏度为常规RT-PCR方法的100倍。试验结果表明,建立了一种快速、高效、特异、敏感的EEEV TaqMan MGB荧光定量RT-PCR检测方法。 展开更多
关键词 东方马脑脊髓炎病毒 TAQMAN MGB 荧光定量RT-PCR
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