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基因诊断技术的临床应用进展 预览 被引量:7
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作者 高媛 郑文岭 马文丽 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第1期15-18,共4页
近年来,基因诊断技术取得前所未有的进步,随着该技术在临床检测中的推广、应用,基因诊断技术为我们早期发现肿瘤以及其他遗传性疾病带来曙光。本文对基因诊断中常用的分子生物学技术及其在临床中的应用进展做一总结。
关键词 基因诊断 临床应用
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甘薯储藏蛋白(sporamin)A基因在大肠杆菌中的表达研究 被引量:3
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作者 封树梅 张义正 《四川大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期 446-450,共5页
利用基因重组技术,将PCR扩增获得的甘薯储藏蛋白A基因的成熟肽编码区序列,插入到高效表达载体pTrcHisB中,构建成重组表达质粒pTHSPO-A,用限制酶切和PCR分析均表明重组质粒与预期结果相符,用IPTG诱导重... 利用基因重组技术,将PCR扩增获得的甘薯储藏蛋白A基因的成熟肽编码区序列,插入到高效表达载体pTrcHisB中,构建成重组表达质粒pTHSPO-A,用限制酶切和PCR分析均表明重组质粒与预期结果相符,用IPTG诱导重组质粒转化的大肠杆菌TOP10。菌体总蛋白经12%SDS-PAGE分析,可观察到一个大小为10kD的蛋白质带,其分子量比预期值小。 展开更多
关键词 甘薯 基因表达 大肠杆菌 SDS-PAGE 储藏蛋白基因
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肥胖者经减重手术能避糖尿病
3
作者 王贞虎 《当代老年》 2013年第3期41-41,共1页
瑞典研究人员表示,接受减重手术的肥胖者能大幅延缓、甚至可能避免罹患2型糖尿病。先前研究已显示,减重手术能逆转已出现2型糖尿病症状患者病情;这项最新发现则提供减重手术能避免糖尿病的证据。
关键词 2型糖尿病 肥胖者 手术 减重 研究人员
拟南芥、水稻和毛果杨中CesA基因的进化和表达分析 预览 被引量:4
4
作者 朱煜 谭梦月 +3 位作者 邹爱兰 张文举 戚金亮 杨永华 《南京林业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期11-16,共6页
纤维素是植物细胞壁的主要成分,纤维素合成酶是纤维素合成过程中重要的酶类。利用拟南芥(草本植物)、水稻(禾本科作物)、毛果杨(木本植物)3种已知全基因组序列的模式植物,对纤维素合成酶基因(CesA)家族的成员进行系统分析,了解C... 纤维素是植物细胞壁的主要成分,纤维素合成酶是纤维素合成过程中重要的酶类。利用拟南芥(草本植物)、水稻(禾本科作物)、毛果杨(木本植物)3种已知全基因组序列的模式植物,对纤维素合成酶基因(CesA)家族的成员进行系统分析,了解CesA基因超基因家族的进化关系。研究结果表明,CesA基因在物种分化之前就已经存在,并且在各个物种内部出现了基因扩张,不同物种扩张程度不同,整个基因家族呈负选择压力。为进一步探讨该家族基因的表达调控模式,以水稻为例对该基因家族的启动子元件进行了分析,发现OsCesA基因可能受到多种胁迫和激素信号的调控;而RT-PCR结果表明ABA可以显著下调该类基因的表达。 展开更多
关键词 拟南芥 水稻 毛果杨 纤维素合成酶基因 进化树 基因表达
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Scriptaid affects histone acetylation and the expression of development-related genes at different stages of porcine somatic cell nuclear transfer embryo during early development
5
作者 ZHOU Yan HUANG YongYe +7 位作者 XIE WanHua SONG Qi JI Yuan ZHANG YanPing OUYANG HongSheng LAI LiangXue PANG DaXin TANG XiaoChun 《中国科学通报:英文版》 SCIE CAS 2013年第18期2044-2052,共9页
Although the somatic cell nuclear transfer(SCNT) technique has been used extensively for cloning and generating transgenic pigs,the cloning efficiency is still very low.It has been proposed that the low efficiency of ... Although the somatic cell nuclear transfer(SCNT) technique has been used extensively for cloning and generating transgenic pigs,the cloning efficiency is still very low.It has been proposed that the low efficiency of this technique is the result of incomplete epigenetic reprogramming and abnormal gene expression during early embryonic development.In this study,we investigate the effect of Scriptaid,a low-toxicity histone deacetylase inhibitor,on the developmental competence of porcine SCNT embryos.We found that treating SCNT embryos with 500 nmol/L Scriptaid for 15 h after activation significantly enhanced the blastocyst formation rate(27.7%) compared with the untreated group(control)(12.2%,P<0.05).Using an immunofluorescence technique to measure the average fluorescence intensity,we also found that treating SCNT embryos with Scriptaid increased the level of histone acetylation on histone H3 at lysine 14(acH3K14).Furthermore,treating embryos with Scriptaid increased the expression level of three genes that play important roles during embryonic development(Oct4,Klf4 at the blastocyst stage and Nanog at the 4-cell stage).Moreover,the expression level of the apoptosis-related gene Caspase-3 was significantly lower in the Scriptaid-treated SCNT embryos compared with the control SCNT embryos at the 4-cell and blastocyst stages.In conclusion,these results indicate that Scriptaid treatment improves the development and nuclear reprogramming of porcine SCNT embryos. 展开更多
关键词 体细胞核移植胚胎 组蛋白乙酰化 转基因猪 早期发育过程 免疫荧光技术 Caspase-3 细胞凋亡相关基因 克隆胚胎
关于氨基酸结构与RNA中碱基密码间关系的探讨 预览 被引量:1
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作者 胡皆汉 郑学仿 《分子科学学报:中英文版》 CAS CSCD 2000年第3期 171-176,共6页
探讨了氨基酸结构与RNA中碱基三字密码间的关系,找到了与决定氨基酸相应碱基三字码的主要因素,指出决定氨基酸三字码的第1,2个码的碱基的亲水性要与氨基酸的亲水性相匹配,强亲水性的碱基与强亲水性的氨基酸相应;第2个码的碱... 探讨了氨基酸结构与RNA中碱基三字密码间的关系,找到了与决定氨基酸相应碱基三字码的主要因素,指出决定氨基酸三字码的第1,2个码的碱基的亲水性要与氨基酸的亲水性相匹配,强亲水性的碱基与强亲水性的氨基酸相应;第2个码的碱基的亲水性是决定其亲水性的主要因素,而第1个码的碱基亲水必屯有相当的影响,每种氨基酸的碱基三字码个数的多少,以及三字码中第3个码为何种碱基,都与氨基酸的化学结构密切相关,特别是与R(R 展开更多
关键词 遗传密码 RNA 氨基酸 结构 碱基
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细胞信号转导,基因表达,DNA复制保真制度与哺乳细胞非 … 被引量:2
7
作者 余应年 孙雪敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期 1028-1029,共2页
关键词 细胞信号转导 基因表达 DNA复制 基因突变 肿瘤
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基因突变如何自发产生 预览
8
作者 鞠永峰 《生物学教学》 2014年第5期66-67,共2页
本文简要介绍基因突变自发产生的三个重要来源:DNA复制的错误、DNA的自发性损伤、转座子的DNA元件的插入。
关键词 基因突变 复制错误 自发损伤 转座子
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骨形态发生蛋白诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的研究进展 被引量:2
9
作者 武成聪 陈佳滨 +2 位作者 蔡伟良 宁寅宽 李强 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第21期4192-4195,共4页
目前从骨髓中成功分离、鉴定BMSCs的方法较为成熟。新发现一些物质能诱导BMSCs向成骨细胞分化因子,其中对BMP研究较多。其机制可能是通过结合Ⅰ、Ⅱ型BMP受体后激活Smad信号通路诱导成骨。其诱导方法主要包括直接应用天然BMP或者将BMP... 目前从骨髓中成功分离、鉴定BMSCs的方法较为成熟。新发现一些物质能诱导BMSCs向成骨细胞分化因子,其中对BMP研究较多。其机制可能是通过结合Ⅰ、Ⅱ型BMP受体后激活Smad信号通路诱导成骨。其诱导方法主要包括直接应用天然BMP或者将BMP及其协同基因转入BMSCs,通过靶细胞的持续表达BMP促进新骨形成。本文将近10年BMP诱导BMSCs向成骨分化的研究现状及发展趋势做一综述。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白 骨化 骨生成 综述
一种简便快速的体外点突变方法 预览 被引量:1
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作者 扈荣良 李敏 +4 位作者 张守峰 邱薇 赵君 王凤阳 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期 270,273,共2页
体外点突变是研究蛋白质结构-功能关系、基因表达、载体修饰等的重要技术之一。已报道的一些体外突变方法[1~4],一般需以单链DNA为模板,并要求对突变基因进行亚克隆和对单链DNA拯救,技术上较复杂,多数需1周以上时间。Stratagen... 体外点突变是研究蛋白质结构-功能关系、基因表达、载体修饰等的重要技术之一。已报道的一些体外突变方法[1~4],一般需以单链DNA为模板,并要求对突变基因进行亚克隆和对单链DNA拯救,技术上较复杂,多数需1周以上时间。Stratagen公司研制的Quickchange试剂盒,可以双链DNA质粒为模板,只需4步操作,在1~2 d内即可完成点突变过程[5],但该试剂盒价格昂贵,使用次数有限。我们根据Pfu和DpnⅠ等酶的特性,自行设计了突变反应及方法,对6 kb、8 kb和14.6 kb的目的质粒分别进行了点突变,成功地在质粒上创造了相应的酶切位点。 展开更多
关键词 质粒 碱基突变 体外点突变 酶切位点
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三种不同原位PCR方法的比较研究 预览 被引量:5
11
作者 顾广玉 吴丽莉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期 236,共1页
关键词 直接法 间接法 标记引物法 原位PCR方法 比较研究
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鸡IGFBP2基因3′UTR区1196C〉A单核苷酸多态性的功能性鉴定及分析 被引量:3
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作者 于莹莹 乔书培 +5 位作者 孙婴宁 宋鹤 张潇飞 闫晓红 李辉 王宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1163-1172,共10页
鸡IGFBP2基因3′非编码区(3′UTR)1196C〉A单核苷酸多态性(SNP)与鸡的腹脂重和腹脂率显著相关.生物信息学分析显示,该SNP恰好位于gga-mi R-456-3p的一个潜在靶基因结合位点处,提示IGFBP2基因可能是gga-mi R-456-3p的一个靶基因,且该... 鸡IGFBP2基因3′非编码区(3′UTR)1196C〉A单核苷酸多态性(SNP)与鸡的腹脂重和腹脂率显著相关.生物信息学分析显示,该SNP恰好位于gga-mi R-456-3p的一个潜在靶基因结合位点处,提示IGFBP2基因可能是gga-mi R-456-3p的一个靶基因,且该SNP位点可能影响gga-mi R-456-3p对IGFBP2基因表达的调控作用.为鉴定SNP 1196C〉A是否为功能性SNP,本研究分别构建了包含该SNP位点C或A等位基因的双荧光素酶报告基因载体,比较分析这两个等位基因在鸡胚成纤维细胞系(DF1)和鸡前脂肪细胞中对报告基因活性和表达的影响;利用mi RNA mimics和inhibitor分析gga-mi R-456-3p对不同等位基因报告基因活性以及内源性IGFBP2表达的影响.结果发现,在DF1细胞和鸡前脂肪细胞中,A等位基因的报告基因活性和表达均显著高于C等位基因(P〈0.05);gga-mi R-456-3p仅影响C等位基因的报告基因活性和表达,而对A等位基因的报告基因活性没有明显影响;gga-mi R-456-3p调控细胞内源性IGFBP2基因的m RNA和蛋白质表达.本研究证实IGFBP2基因是gga-mi R-456-3p的靶基因,其3′UTR区SNP 1196C〉A是一个功能性SNP,它影响gga-mi R-456-3p对鸡IGFBP2基因的表达调控作用.本研究结果对于鸡的分子辅助选择育种及IGFBP2基因在脂肪沉积中调控机制的阐明具有重要意义. 展开更多
关键词 IGFBP2基因 单核苷酸多态性 3′非编码区 gga-mi R-456-3p
长链非编码RNA(lncRNA)在氧化型低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤中表达谱的变化 被引量:1
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作者 张铭 纪玉强 +2 位作者 谢梅 王楠 赵朝 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第30期5816-5820,5857共6页
目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)在氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的损伤人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)与正常HUVEC中表达谱的差异... 目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)在氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的损伤人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)与正常HUVEC中表达谱的差异。方法:采用lnc RNA芯片检测ox-LDL诱导的损伤HUVEC与正常HUVEC中lncRNA及mRNA的表达差异,筛选出HUVEC损伤相关的lncRNA。结果:相对于正常HUVEC,在ox-LDL诱导的损伤HUVEC中表达上调和下调超过2倍的lncRNAs和m RNAs分别有139种和113种,上调和下调超过4倍的lncRNAs和mRNAs分别有35种和28种。结论:与正常HUVEC比较,ox-LDL诱导的损伤HUVEC中lncRNA的表达谱显著变化,lncRNA可能在血管内皮细胞损伤过程中发挥一定作用。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 人脐静脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 芯片
Rice Genomics and Genetics(RGG)
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《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期991-991,共1页
关键词 水稻基因组 分子遗传学 基因组学 出版物 同行评审 水稻遗传 国际性 应用
水通道蛋白AQP5对小鼠骨髓间充质干细胞分化能力的影响
15
作者 羿菲 张莹 +4 位作者 李小曼 白宁 刘汀 孙威 曹流 《解剖科学进展》 2016年第3期310-314,共5页
目的探寻水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)对小鼠骨髓间充质干细胞分化能力的影响。方法采用RT-PCR和Western Blot方法检测AQP5在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达。定向诱导BMSCs后分别进行油红O染色(成脂),茜素红S和碱性磷酸... 目的探寻水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)对小鼠骨髓间充质干细胞分化能力的影响。方法采用RT-PCR和Western Blot方法检测AQP5在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达。定向诱导BMSCs后分别进行油红O染色(成脂),茜素红S和碱性磷酸酶染色(成骨),Collagen II和番红素O染色(成软骨)。检测钙离子、碱性磷酸酶和胞外糖胺多糖含量,Real-time PCR检测成脂、成骨和成软骨分化后的特异标记分子的相对+/+m RNA表达。结果 RT-PCR和Western Blot结果发现野生型(AQP5)BMSCs中有AQP5阳性条带。油红O、茜素红S、碱-/-性磷酸酶,Collagen II和番红素O染色阳性染色率在AQP5敲除型(AQP5)BMSCs明显高于野生型。Real-time PCR结果证-/-实AQP5 BMSCs在成脂、成骨和成软骨分化特异标记分子的相对m RNA表达水平显著提高。结论小鼠BMSCs中有AQP5表达,AQP5敲除显著提高BMSCs的成脂、成骨和成软骨分化能力。 展开更多
关键词 AQP5 骨髓起源间充质干细胞 分化潜能 小鼠
实时定量PCR技术在动物疫病研究中的应用 预览
16
作者 国君 姜景才 +1 位作者 赵微微 康波 《畜牧兽医科技信息》 2009年第5期 12-13,共2页
实时定量PCR(real-time quantitative PCR)是在PCR技术基础上发展起来的一种高度灵敏的核酸定量技术。实时定量PCR继承了PCR技术灵敏、快速、特异的优点,同时又克服了PCR技术中存在的假阳性率高、易污染、EB染料对实验人员的危险以... 实时定量PCR(real-time quantitative PCR)是在PCR技术基础上发展起来的一种高度灵敏的核酸定量技术。实时定量PCR继承了PCR技术灵敏、快速、特异的优点,同时又克服了PCR技术中存在的假阳性率高、易污染、EB染料对实验人员的危险以及不能进行准确定量等缺点。实时定量PCR实现了PCR从定性或半定量到准确定量的飞跃,目前,已经成为分子生物学和医学研究等领域的重要工具。本文就实时定量PCR技术及其在动物研究领域中的应用作一综述。 展开更多
关键词 实时定量PCR 基因表达 综述
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微RNA在胚胎干细胞自我更新和分化中的作用 被引量:1
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作者 叶守东 宋后燕 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期508-510,共3页
胚胎干细胞来自胚泡内细胞团,具有自我更新和多向分化潜能,有很重要的医学价值。微RNA(microRNA,miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的调控基因转录后水平的非编码小分子RNA,参与生物个体的发育进程。本文就近来微RNA在调节胚胎干细... 胚胎干细胞来自胚泡内细胞团,具有自我更新和多向分化潜能,有很重要的医学价值。微RNA(microRNA,miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的调控基因转录后水平的非编码小分子RNA,参与生物个体的发育进程。本文就近来微RNA在调节胚胎干细胞自我更新和分化方面的作用作一综述。 展开更多
关键词 MICRORNA 自我更新 分化
黑胸大蠊浓核病毒NS2蛋白的表达、抗体制备及亚细胞定位 被引量:3
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作者 杨波 余沛然 +5 位作者 蔡大威 董晓敏 刘志刚 胡征 张珈敏 胡远扬 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1443-1448,共6页
ns2是黑胸大蠊浓核病毒的一个非结构基因,所编码的蛋白质大小为30kD,是一个功能未知的基因。为了对该基因进行深入的功能研究,从感染了黑胸大蠊浓核病毒的蟑螂的后肠组织中通过RT-PCR得到ns2基因编码序列,将其构建于原核表达载体pET-28a... ns2是黑胸大蠊浓核病毒的一个非结构基因,所编码的蛋白质大小为30kD,是一个功能未知的基因。为了对该基因进行深入的功能研究,从感染了黑胸大蠊浓核病毒的蟑螂的后肠组织中通过RT-PCR得到ns2基因编码序列,将其构建于原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得融合表达产物。此融合蛋白经分离纯化后,免疫新西兰大白兔,制备其多克隆抗体。采用Western印迹技术,用该抗体检测ns2基因的真核表达产物,证明该抗体有较好的针对NS2蛋白的专一性,可用于对NS2结构和功能的研究。同时,将此编码序列克隆至果蝇细胞表达载体pAC,得到重组质粒后转染果蝇S2细胞表达重组蛋白,通过共聚焦显微镜用该抗体检测该蛋白在S2细胞中的亚细胞定位,发现NS2蛋白主要定位于细胞质,核内仅有少量分布。 展开更多
关键词 黑胸大蠊浓核病毒 NS2蛋白 表达 亚细胞定位
聚离子亚基化合物介导的基因转移方法可用于外源基因?… 预览
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作者 史国利 游环宇 《南开大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期 106-108,共3页
利用聚离子亚基化合物介导的基因转移方法,研究了外源β-半乳糖苷酶报告基因的瞬时表达。结果表明,聚离子亚基化合物介导的基因转移方法可用于外源基因的瞬时表达研究。而且在相同的条件下,用该方法在NIH3T3细胞和PA317... 利用聚离子亚基化合物介导的基因转移方法,研究了外源β-半乳糖苷酶报告基因的瞬时表达。结果表明,聚离子亚基化合物介导的基因转移方法可用于外源基因的瞬时表达研究。而且在相同的条件下,用该方法在NIH3T3细胞和PA317细胞中对报告基因转移的效率 展开更多
关键词 基因转移 瞬时表达 Polybrene 外源基因
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Prevention of diet-induced obesity by safflower oil: insights at the levels of PPARα, Orexin, and Ghrelin gene expression of adipocytes in mice
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作者 Zhong Zhang Qiang Li Fengchen Liu Yuqian Sun Jinchao Zhang 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2010年第3期202-208,共7页
这研究的目的是在老鼠由一本高红花油食谱和 adipocytic 基因表示调查导致食谱的肥胖的预防。四十只 3-week-old C57BL/6 老鼠随机被划分成三个组:控制组(反对, 5% 猪油 +5% 红花油) ,高猪油组(LAR, 45% 猪油 +5% 红花油) ,并且高... 这研究的目的是在老鼠由一本高红花油食谱和 adipocytic 基因表示调查导致食谱的肥胖的预防。四十只 3-week-old C57BL/6 老鼠随机被划分成三个组:控制组(反对, 5% 猪油 +5% 红花油) ,高猪油组(LAR, 45% 猪油 +5% 红花油) ,并且高红花油组(SAF, 45% 红花油 +5% 猪油) 。在 10 个星期以后, LAR 组的 10 只老鼠高被换到红花油饮食(LARSAF ) 。十个星期以后,葡萄糖忍耐测试被葡萄糖的 intraperitoneal 注射执行。类脂化合物和胰岛素的传播层次被测量,白脂肪质的纸巾为基因薄片和反向的 transcriptasepolymerase 链反应分析被拿。LAR 组比 CON 组显示出更高的身体重量,脂肪过多索引,胰岛素,和类脂化合物(P < 0.05 ) 。在 LARSAF 组的身体重量在饮食的颠倒以后减少了。血浆生物化学的侧面在 LARSAF 和 SAF 组减少了(P < 0.05 ) 与那些相比 LAR 组。LARSAF 组的血葡萄糖水平与 LAR 组的相比在 intraperitoneal 葡萄糖忍耐测试期间被减少。LARSAF 组有 Orexin 和 Ghrelin 基因表示的底层,而 PPAR 基因表示的水平显著地与 LAR 组的相比被提高。那么, SAF 食谱能改变 adipocytic 在导致食谱的肥胖的有效改善的脂肪过多相关的基因表示和结果。 展开更多
关键词 基因表达水平 肥胖基因 PPAR 红花油 Ghrelin 食欲素 饮食 小鼠
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