期刊文献+
共找到64,876篇文章
< 1 2 250 >
每页显示 20 50 100
AGAMOUS like 6亚家族基因研究进展 预览 被引量:3
1
作者 王珍华 胡立霞 +2 位作者 钟丹 韩雪 庞基良 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1480-1487,共8页
开花是植物由营养生长向生殖生长转变的重要过程,许多开花相关基因参与这一过程,AGAMOUS like 6(AGL6)亚家族是其中的重要一类,AGL6亚家族基因编码MIKC-type MADS box转录因子,含有MADS-box保守结构域,通过多条途径参与花时的调节及... 开花是植物由营养生长向生殖生长转变的重要过程,许多开花相关基因参与这一过程,AGAMOUS like 6(AGL6)亚家族是其中的重要一类,AGL6亚家族基因编码MIKC-type MADS box转录因子,含有MADS-box保守结构域,通过多条途径参与花时的调节及花器官发育。该文对AGL6及其同源基因的结构、功能、进化以及与其它相关基因之间的调控关系进行综述,并对该基因研究中存在的一些问题及今后的研究方向进行了讨论。 展开更多
关键词 AGL6 AGL6同源基因 花发育
在线阅读 下载PDF
利用非转座子载体介导的转基因家蚕表达人胰岛素样生长因子Ⅰ
2
作者 胡莹莹 薛仁宇 +1 位作者 曹广力 贡成良 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期658-664,共7页
为了实现利用非转座子载体介导的转基因家蚕整体表达人胰岛素样生长因子Ⅰ(hIGF-Ⅰ),将hIGF-Ⅰ基因克隆进非转座子类型的昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His,构建转基因载体pIZT/V5-His-hIGF-Ⅰ。利用精子介导法将该转基因载体导入家蚕卵,... 为了实现利用非转座子载体介导的转基因家蚕整体表达人胰岛素样生长因子Ⅰ(hIGF-Ⅰ),将hIGF-Ⅰ基因克隆进非转座子类型的昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His,构建转基因载体pIZT/V5-His-hIGF-Ⅰ。利用精子介导法将该转基因载体导入家蚕卵,通过绿色荧光筛选并结合PCR和Dot blotting检测鉴定,表明已成功获得hIGF-Ⅰ转基因家蚕。对培育至G2代的转基因家蚕5龄幼虫蛋白质样品进行Western blotting分析,结果显示hIGF-Ⅰ在转基因家蚕中获得表达,重组hIGF-Ⅰ的分子质量约12.5 kD;ELISA检测hIGF-Ⅰ在G2代转基因家蚕5龄幼虫全蚕以及后部丝腺、脂肪体冻干粉中的质量比分别为65、411、469 ng/g。试验结果再次证实通过非转座子载体pIZT/V5-His介导可以将外源基因导入家蚕基因组,并实现外源基因在转基因家蚕中整体表达。 展开更多
关键词 转基因家蚕 非转座子载体pIZT/V5-His 人胰岛素样生长因子Ⅰ 精子介导法
人类核糖体S6激酶RPS6KA5的cDNA克隆及组织表达谱分析 预览
3
作者 姜春玲 余龙 《实验生物学报》 CSCD 2000年第2期 119-127,共9页
人类核糖体S6激酶包括两个蛋白家族P90~(RSK)和P70~(S6K),它们分别介导着两条细胞信号传导通路。当这些激酶活性被它们的抗体或纳巴霉素抑制时,细胞的增殖随之停止。但当纳巴霉素的结构类似物—免疫抑制剂FK-506作用于细胞时,虽可抑制... 人类核糖体S6激酶包括两个蛋白家族P90~(RSK)和P70~(S6K),它们分别介导着两条细胞信号传导通路。当这些激酶活性被它们的抗体或纳巴霉素抑制时,细胞的增殖随之停止。但当纳巴霉素的结构类似物—免疫抑制剂FK-506作用于细胞时,虽可抑制成纤维细胞PBL1的增殖,但却不能抑制P90~(RSK)、P70~(S6K)和MAPK的活性。这提示体内还存在着已知P90~(RSK)和P70~(S6K)蛋白的替代者或还存在着不涉及已知P90~(RSK)和P70~(S6K)的信号通路。为此,本文采用“同源筛选”策略,试图证实上述推测。我们以小鼠P90~(RSK)基因的保守性序列为探针,在NCBI EST数据库中进行同源筛选,得到三个人体同源EST片段。以EST片段的整合序列为探针,在人脑组织cDNA文库中进行杂交筛选,最终获得3833bp的全长cDNA序列,其中第165-2570bp为一完整的开放阅读框,编码了802个氨基酸。这个推导蛋白质与人P90~(RSK)家族成员具有较高的氨基酸同源性,并被命名为RPS6KA5,它在国际GenBank的登录号为:AF090421,Northern杂交显示该基因在人各组织中广泛表达,RH定位将该基因定于14号染色体长臂31—32.1的范围内,另一新的P70~(S6K)基因(GenBank注册登记号为AF037447)也已被克隆,从而证实了人体内存在着已知P90~(RSK)及P70~(S6K)家族基因替代者的最初设想。 展开更多
关键词 核糖体S6激酶 CDNA克隆 基因表达 同源筛选
在线阅读 下载PDF
甲状旁腺激素对大鼠绝经后骨质疏松牙周炎模型外周血中成纤维细胞生长因子23与碱性磷酸酶表达的影响
4
作者 孙晓东 张卫群 +3 位作者 林志勇 方冬 石晓婷 白广亮 《临床口腔医学杂志》 2012年第10期589-592,共4页
目的:通过动物实验,检测大鼠外周血中成纤维细胞生长因子23(FGF23)与碱性磷酸酶(ALP)水平的变化,探讨甲状旁腺激素(PTH)对其表达的影响及其在治疗牙周炎过程中的机理。方法:选用68只3月龄雌性Wistar大鼠随机分为健康对照组(... 目的:通过动物实验,检测大鼠外周血中成纤维细胞生长因子23(FGF23)与碱性磷酸酶(ALP)水平的变化,探讨甲状旁腺激素(PTH)对其表达的影响及其在治疗牙周炎过程中的机理。方法:选用68只3月龄雌性Wistar大鼠随机分为健康对照组(A组),伪手术对照组(B组),去势牙周炎组(C组),去势牙周炎并甲状旁腺激素注射组(D组)。C组和D组去势牙周炎模型建立成功后,D组间歇性低量腹腔内注射甲状旁腺激素,A、B和c组腹腔内注射等体积的生理盐水。两个月后,麻醉下方块截取包括实验区磨牙的双侧上颌骨,HE染色后进行观察。收集实验各阶段外周血,检测FGF23、ALP水平。结果:注射PTH后,D组外周血FGF23、AIJP水平高于A、B、C组(P〈0.05),D组牙槽骨中骨小梁较c组粗大、致密,排列有规则,与A、B组相似。结论:甲状旁腺激素可升高外周血FGF23、ALP的水平,有利于成骨,对绝经期后牙周炎有治疗作用。 展开更多
关键词 甲状旁腺激素 牙周炎 成纤维细胞生长因子 23碱性磷酸酶
超声辐照与丁酸钠对腺相关病毒转染大鼠视网膜色素上皮细胞的影响 预览
5
作者 李红丽 杜联芳 +1 位作者 李凤华 王慧萍 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1288-1291,共4页
目的探讨超声辐照与丁酸钠在携带增强型绿色荧光蛋白的2型重组腺相关病毒(rAAV2-EGFP)感染大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞中的应用价值。方法大鼠RPE细胞接种于24孔板中,分别以rAAV2-EGFP(对照组)、rAAV2-EGFP+超声辐照(超声辐照... 目的探讨超声辐照与丁酸钠在携带增强型绿色荧光蛋白的2型重组腺相关病毒(rAAV2-EGFP)感染大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞中的应用价值。方法大鼠RPE细胞接种于24孔板中,分别以rAAV2-EGFP(对照组)、rAAV2-EGFP+超声辐照(超声辐照组,辐照时间60 s,声强0.5、1 W/cm2)、rAAV2-EGFP+不同终浓度丁酸钠(丁酸钠组)转染大鼠RPE细胞。转染后48 h,倒置荧光显微镜观察转染细胞EGFP表达情况,流式细胞仪检测细胞转染效率(EGFP阳性细胞百分率);转染后24 h,MTS法检测细胞增殖。结果流式细胞仪检测结果显示:超声辐照组和丁酸钠组EGFP阳性细胞百分率显著高于对照组(P〈0.05),丁酸钠组转染效率提高的百分率显著高于超声辐照组(P〈0.05)。细胞增殖检测结果显示,超声辐照组转染细胞的吸光度值显著高于丁酸钠组(P〈0.05)。结论丁酸钠和超声辐照均能提高rAAV2-EGFP对大鼠RPE细胞的转染效率,其中丁酸钠的效果显著,而超声辐照对细胞增殖的抑制程度较轻。 展开更多
关键词 超声辐射 丁酸钠 腺相关病毒 视网膜色素上皮细胞
在线阅读 下载PDF
农杆菌介导的曼地亚红豆杉细胞遗传转化体系的建立 预览 被引量:1
6
作者 许想平 于小青 +2 位作者 董艳山 付春华 余龙江 《山地农业生物学报》 2012年第5期406-411,共6页
建立了根癌农杆菌介导的红豆杉细胞遗传转化体系,为红豆杉细胞的遗传改良打下基础。最优转化条件是:菌液光密度A600=0.6,侵染时间25min,共培养最适温度21℃,共培养时间48h;最适头孢霉素(Cephamycin,Cef)抑菌浓度为300mg/L;... 建立了根癌农杆菌介导的红豆杉细胞遗传转化体系,为红豆杉细胞的遗传改良打下基础。最优转化条件是:菌液光密度A600=0.6,侵染时间25min,共培养最适温度21℃,共培养时间48h;最适头孢霉素(Cephamycin,Cef)抑菌浓度为300mg/L;最优的除菌及筛选方式为:用含100mg/L头孢霉素的无菌水冲洗共培养后的细胞10s,然后将细胞转至舍300mg/L头孢霉素的抑菌培养基上,两周后转至含150mg/L卡那霉素(Kanamycin,Kan)或8mg/L潮霉素(Hygromycin,Hyg)的筛选培养基上筛选。采用小愈伤团法筛选转基因纯系,GUS染色显示,筛选后转化细胞株的阳性细胞占80%以上。 展开更多
关键词 红豆杉细胞 遗传转化 体系优化
在线阅读 下载PDF
盐角草和盐芥3个超氧化物歧化酶基因的克隆和功能分析 预览 被引量:1
7
作者 吴凡 余梅 +3 位作者 鲁茂龙 李娟 王荣富 王先磊 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1957-1964,共8页
为了探究盐生植物的耐盐机制,比较不同盐生植物超氧化物歧化酶(SOD)基因耐盐性的大小,采用RACE技术克隆了盐角草锰和铜/锌两种SOD的cDNA全长。序列分析表明,盐角草MnSOD基因(SeMSD,GenBank登录号为JQ061158)含有699 bp的开放阅... 为了探究盐生植物的耐盐机制,比较不同盐生植物超氧化物歧化酶(SOD)基因耐盐性的大小,采用RACE技术克隆了盐角草锰和铜/锌两种SOD的cDNA全长。序列分析表明,盐角草MnSOD基因(SeMSD,GenBank登录号为JQ061158)含有699 bp的开放阅读框,编码一个长233个氨基酸的多肽,其预测相对分子量为25.7 kD。Cu/ZnSOD基因(SeCSD,GenBank登录号为JQ061160)开放阅读框长为684 bp,并编码228个氨基酸的多肽,相对分子量为23.3 kD。根据已获得的这两个cDNA序列和GenBank公布的盐芥MnSOD基因序列(ThMSD,EF140719),构建了3个原核表达载体pET30a-SeMSD、pET30a-SeCSD和pET30a-ThMSD,并将它们转化大肠杆菌BL21,成功表达出了目的蛋白。通过优化IPTG的诱导浓度,在6.5%和7.5%盐度下对这3个SOD基因的耐盐能力验证结果显示,相比对照菌BL21(pET30a),转化了pET30a-SeMSD和pET30a-ThMSD载体的重组菌具有更高的耐盐性,而转化pET30a-SeCSD载体的重组菌没有表现出耐盐性的提高。 展开更多
关键词 盐角草 MNSOD Cu/ZnSOD 克隆 耐盐性
在线阅读 下载PDF
“千人基因组计划”发布高精度遗传变异图谱
8
《中国家禽》 北大核心 2012年第21期34-34,共1页
由中、美、英等国共同发起的大型国际合作项目“千人基因组计划”的最新研究成果10月31日在《自然》杂志上在线发表。该协作组公布了高分辨率的人类基因组遗传变异整合图谱,将为基因组学在人类疾病与健康领域中的应用,以及个体化医疗... 由中、美、英等国共同发起的大型国际合作项目“千人基因组计划”的最新研究成果10月31日在《自然》杂志上在线发表。该协作组公布了高分辨率的人类基因组遗传变异整合图谱,将为基因组学在人类疾病与健康领域中的应用,以及个体化医疗时代的到来奠定坚实基础。 展开更多
关键词 基因组计划 遗传变异 图谱 高精度 《自然》杂志 国际合作项目 人类基因组 个体化医疗
多杀性巴氏杆菌PurF蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 预览 被引量:1
9
作者 张爱芹 郭东春 +5 位作者 刘家森 原冬伟 姜骞 林欢 崔玉东 曲连东 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第1期6-10,共5页
为了获得多杀性巴氏杆菌PurF蛋白及其多克隆抗体,通过PCR扩增了多杀性巴氏杆菌C51—17株purF基因,将其克隆到表达载体pPROEX—HTa中,构建重组表达质粒pHT—PurF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。SDS-PAG... 为了获得多杀性巴氏杆菌PurF蛋白及其多克隆抗体,通过PCR扩增了多杀性巴氏杆菌C51—17株purF基因,将其克隆到表达载体pPROEX—HTa中,构建重组表达质粒pHT—PurF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,获得重组蛋白分子质量约56.5ku,主要以包涵体形式存在;Western blot检测表明,表达的蛋白可与多杀性巴氏杆菌制备的高免血清发生特异性反应。将制备的重组蛋白免疫Balb/e小鼠制备多克隆抗体,ELISA检测血清抗体效价,结果显示制备的多克隆抗体滴度达到1:128000,Western blot表明可与多杀性巴氏杆菌PurF蛋白发生反应。本研究制备了多杀性巴氏杆菌的PurF蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究PurF蛋白在多杀性巴氏杆菌致病中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 purF基因 原核表达 多克隆抗体
在线阅读 下载PDF
农杆菌介导蝴蝶兰的遗传转化研究 预览 被引量:6
10
作者 崔波 蒋素华 +3 位作者 牛苏燕 袁秀云 马杰 叶永忠 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期642-645,650共5页
采用根癌农杆菌介导法,将ACC合成酶反义基因导入蝴蝶兰原球茎中,比较不同PPT筛选压力、Mer浓度和侵染时间等对蝴蝶兰转化的影响,优化蝴蝶兰的遗传转化体系.结果表明,在OD600值为0.2~0.3的农杆菌茵液中侵染120min后,放入含有20m... 采用根癌农杆菌介导法,将ACC合成酶反义基因导入蝴蝶兰原球茎中,比较不同PPT筛选压力、Mer浓度和侵染时间等对蝴蝶兰转化的影响,优化蝴蝶兰的遗传转化体系.结果表明,在OD600值为0.2~0.3的农杆菌茵液中侵染120min后,放入含有20mg·L-1Mer和2.0mg·L-1PPT的筛选培养基中的原球茎,遗传转化效率最高. 展开更多
关键词 蝴蝶兰 ACC合成酶基因 遗传转化
在线阅读 下载PDF
沙冬青AmLEA5基因的生物信息学分析及非生物胁迫下的表达模式 被引量:3
11
作者 赵晓鑫 刘美芹 +5 位作者 师静 智冠华 刘胜利 张俊琦 陈玉珍 卢存福 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期492-500,共9页
对用固相扣除杂交方法从低温驯化沙冬青克隆得到的AmLEA5基因进行表达模式分析和生物信息学分析,表明该基因编码一种第5族胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA),全长693 bp,含有1个297 bp的开放阅读框,编码98个氨基酸,预测Am-LEA5的分子量为10.6... 对用固相扣除杂交方法从低温驯化沙冬青克隆得到的AmLEA5基因进行表达模式分析和生物信息学分析,表明该基因编码一种第5族胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA),全长693 bp,含有1个297 bp的开放阅读框,编码98个氨基酸,预测Am-LEA5的分子量为10.6 kDa,是一种亲水性蛋白,有多个磷酸化位点。密码子偏好性分析表明该基因略偏好于用A或T结尾的密码子。系统发生分析表明,AmLEA5蛋白与蒺藜苜蓿LEA(ACJ84182.1)亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示AmLEA5的表达量在低温、干旱、盐和热胁迫条件下均有上调,尤其在低温胁迫后期富集量最高。亚细胞定位表明,用YFP标记的AmLEA5位于细胞质和细胞核内。一系列试验结果表明AmLEA5基因在沙冬青抵御非生物胁迫,尤其是在抵御低温胁迫机制中发挥重要作用。 展开更多
关键词 沙冬青 AmLEA5 生物信息学分析 表达模式 亚细胞定位
《生物化学期刊》:研究发现核转录因子对结肠癌的重要作用
12
《现代生物医学进展》 CAS 2013年第8期I0004-I0004,共1页
来自中科院上海生科院营养科学研究所,复旦大学医学院等处的研究人员发现了一种称为核转录因子(PAx2)的作用分子在结肠癌的发生发展过程中扮演了重要角色,指出这种转录因子能促进结肠癌细胞增殖和肿瘤生长,这对于解析结肠癌病理机... 来自中科院上海生科院营养科学研究所,复旦大学医学院等处的研究人员发现了一种称为核转录因子(PAx2)的作用分子在结肠癌的发生发展过程中扮演了重要角色,指出这种转录因子能促进结肠癌细胞增殖和肿瘤生长,这对于解析结肠癌病理机制,以及这种转录因子的新功能具有重要意义,相关成果公布在Journal of Biological Chemistry杂志上。 展开更多
关键词 核转录因子 结肠癌 化学期刊 生物 发生发展过程 科学研究所 研究人员 复旦大学
日本脑炎病毒(JEV)内蒙古分离株M73—1E基因的5′端?… 预览
13
作者 张彤 秦毅强 《内蒙古大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 2000年第5期 513-516,共4页
根据国外报道的JEV(Japanese encephalitis virus)基因组全序列,针对JEV E基因5′端设计合成一对特异引物,以日本脑炎病毒内蒙古分离株M73-1RNA为模板,经RT-PCR扩增,获得36... 根据国外报道的JEV(Japanese encephalitis virus)基因组全序列,针对JEV E基因5′端设计合成一对特异引物,以日本脑炎病毒内蒙古分离株M73-1RNA为模板,经RT-PCR扩增,获得366bp的JEV E基因cDNA片段。将此片段重组于质粒pUC19中,并转化大肠杆菌DH5α,经PCR扩增,酶切及序列分析,结果表明JEV M73-1 5′端126个核苷酸序列与JEV日 展开更多
关键词 日本脑炎病毒 E基因 克隆 序列分析 M73-1分离株
在线阅读 下载PDF
RNA聚合酶Ⅲ启动子的结构与功能 预览 被引量:5
14
作者 糜军 汤宇澄 《生命的化学》 CAS CSCD 2000年第2期 80-81,共2页
关键词 RNA聚合酶Ⅲ 启动子 结构 功能
在线阅读 下载PDF
植物抗脱水力胁迫的分子机制 预览 被引量:8
15
作者 熊清 王伯初 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第3期 247-250,共4页
主要介绍植物在脱水胁迫下,逆激基因产物的和胁迫的转导过程,逆激基因产物的功能可分为两类:一类起“保护”作用,另一类起“调节”作用。在脱水胁迫起始信号和基因表达之间至少存在四条信号转导通路,两条依赖脱落酸(ABA),两... 主要介绍植物在脱水胁迫下,逆激基因产物的和胁迫的转导过程,逆激基因产物的功能可分为两类:一类起“保护”作用,另一类起“调节”作用。在脱水胁迫起始信号和基因表达之间至少存在四条信号转导通路,两条依赖脱落酸(ABA),两条不依赖ABA,依赖ABA的途径中有1条必须有蛋白质合成,不依赖ABA的途径中有1条与低温胁迫应答有共同的信号转导通路。 展开更多
关键词 信号转导 基因表达 脱水胁迫 逆激基因 抗逆机制
在线阅读 下载PDF
分子伴侣过量表达对蛋白质分泌及可溶性的影响 预览 被引量:9
16
作者 杨运桂 龚毅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第3期 382-387,共6页
通过过量表达大肠杆菌分子伴侣SecB和GroEL,研究了它们对靶蛋白的分泌及可溶性的影响,在过量表达SecB的宿主菌中,周质空间分泌蛋白总量较对照组提高了约71%,GL-7-ACA酰化酶在周质空间酶的活力较对照组提高... 通过过量表达大肠杆菌分子伴侣SecB和GroEL,研究了它们对靶蛋白的分泌及可溶性的影响,在过量表达SecB的宿主菌中,周质空间分泌蛋白总量较对照组提高了约71%,GL-7-ACA酰化酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约1.5倍,碱性磷酸酯酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约54%;在过量表达GroEL的宿主菌中,周质分泌蛋白总量较对照组提高了约52%,青霉素G酰化酶在周质空间酶的活力较对照组提高 展开更多
关键词 分子伴侣 分泌 可溶性表达 蛋白质 过量表达
在线阅读 下载PDF
猪α干扰素基因在pET32a表达载体中的表达和鉴定 预览
17
作者 舒黛廉 王珏 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第7期32-35,共4页
利用PCR技术从猪瘟免疫猪血中提取基因组,并从中扩增出约500bp的基因片段;将此基因片段克隆于大肠杆菌pMD18-T载体,经PCR、测序鉴定后,将其片段克隆于pET32a(+)载体进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE检测,结果表明,猪α干扰素在pET32... 利用PCR技术从猪瘟免疫猪血中提取基因组,并从中扩增出约500bp的基因片段;将此基因片段克隆于大肠杆菌pMD18-T载体,经PCR、测序鉴定后,将其片段克隆于pET32a(+)载体进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE检测,结果表明,猪α干扰素在pET32a原核表达载体中成功地获得了分泌表达,且表达蛋白在PK-15细胞上表现出较强的抗病毒活性,这为进一步研究猪α干扰素的功能和开发奠定了基础。 展开更多
关键词 猪IFN-α基因克隆 原核表达 诱导表达 抗病毒活性
在线阅读 下载PDF
MicroRNA-10a促进人胎盘间充质干细胞向内胚层细胞的分化 被引量:4
18
作者 陈冬梅 马海滨 +3 位作者 刘淑丹 王立斌 李玉奎 魏军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1015-1019,共5页
目的研究mieroRNA.10a(miR-10a)参与的转录后调控,提高人胎盘间充质干细胞(PMSC)向内胚层细胞分化的能力。方法利用慢病毒过表达miR-10a前体和反义寡核苷酸抑制miR-10a表达,分析miR-10a与其调控的靶基因Hoxal的表达关系;并采用... 目的研究mieroRNA.10a(miR-10a)参与的转录后调控,提高人胎盘间充质干细胞(PMSC)向内胚层细胞分化的能力。方法利用慢病毒过表达miR-10a前体和反义寡核苷酸抑制miR-10a表达,分析miR-10a与其调控的靶基因Hoxal的表达关系;并采用实时定量PCR(qRT-PCR)和免疫荧光细胞化学染色检测miR-10a过表达后,PMSC向内胚层细胞分化能力的变化。结果PMSC中过表达和抑制表达miR-10a,能反向调控其靶基因Hoxal的表达;miR-10a过表达后,内胚层细胞特异性基因FoxA2、Sox.17、Pdx-1和Cdx2的表达量显著上升,FOXA2、SOX-17和PDX-1阳性细胞数量明显增多。结论miR-10a在化学诱导向内胚层细胞分化的PMSC中呈现高表达;miR-10a可能通过抑制其靶基因Hoxal的表达,调控下游内胚层基因表达上调,从而促进胎盘间充质干细胞向内胚层细胞分化。 展开更多
关键词 miR-10a 内胚层 胎盘间充质干细胞 细胞分化
嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及酶学性质 预览 被引量:1
19
作者 郑春阳 刘珺 +1 位作者 魏国祥 王磊 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1333-1337,共5页
首先根据Thermopolyspora flexuosa的内切-1,4-β-木聚糖酶基因设计了引物,PCR扩增成功后进行酶切消化,连接载体质粒pHT43,经大肠杆菌DH5α扩增后,挑选阳性克隆,经菌体PCR及测序验证后.将基因序列测序正确的质粒大量抽提,经过... 首先根据Thermopolyspora flexuosa的内切-1,4-β-木聚糖酶基因设计了引物,PCR扩增成功后进行酶切消化,连接载体质粒pHT43,经大肠杆菌DH5α扩增后,挑选阳性克隆,经菌体PCR及测序验证后.将基因序列测序正确的质粒大量抽提,经过转化导入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilius WB800N宿主,培养并经过1mmol/LIPTG诱导表达后,发酵胞外上清经SDS—PAGE电泳证明重组蛋白质成功获得表达。其相对分子质量为27kD,最适反应温度为80℃,最适反应pH为6.0。由此得知。分泌表达的嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶的枯草芽孢杆菌工程菌株构建成功.这为未来该酶的产业化生产奠定了基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌表达系统 分泌表达 耐高温嗜热内切-1 4-β-木聚糖酶
在线阅读 下载PDF
转草莓GalUR基因提高拟南芥和生菜维生素C含量 预览
20
作者 陶启长 郭新波 +1 位作者 孙小芬 唐克轩 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期14-19,共6页
在模式植物拟南芥和经济作物生菜中过量表达维生素C(AsA)合成的旁路途径——古洛糖途径的关键酶D半乳糖醛酸还原酶基因(GalUR),探讨该基因对植物AsA含量的贡献和作用.结果表明:同非转基因对照相比,转草莓GalUR基因的拟南芥中AsA含... 在模式植物拟南芥和经济作物生菜中过量表达维生素C(AsA)合成的旁路途径——古洛糖途径的关键酶D半乳糖醛酸还原酶基因(GalUR),探讨该基因对植物AsA含量的贡献和作用.结果表明:同非转基因对照相比,转草莓GalUR基因的拟南芥中AsA含量最高提高到2.59倍,转草莓GalUR基因的生菜中AsA含量最高提高到2.11倍. 展开更多
关键词 拟南芥 生菜 维生素C 代谢工程
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 250 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈