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海人藻酸受体GluK2亚基复制缺陷型腺病毒的构建
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作者 杜彩萍 徐镇 +2 位作者 胡书群 李婷 侯筱宇 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期12-16,共5页
目的:构建海人藻酸(kmnme,KA)受体GluK2亚基复制缺陷型腺病毒重组体。方法:以GluK2-pcDNA3.1真核表达载体为模板,经PCR扩增GluK2目的基因,然后将其亚克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV,后将重组的穿梭质粒与腺病毒骨架载体pAd... 目的:构建海人藻酸(kmnme,KA)受体GluK2亚基复制缺陷型腺病毒重组体。方法:以GluK2-pcDNA3.1真核表达载体为模板,经PCR扩增GluK2目的基因,然后将其亚克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV,后将重组的穿梭质粒与腺病毒骨架载体pAdEasy-1共同电转入BJ5183电穿孔感受态细胞筛选阳性同源重组子。阳性重组体经限制性内切酶PacI消化,经脂质体转染入HEK293细胞进行包装与扩增。接着腺病毒经大量提取纯化后进行滴度测定。结果:GluK2腺病毒具有较强的感染能力(6.75×10^9ifu/ml)并可表达目的蛋白。结论:GluK2复制缺陷型腺病毒成功构建。GluK2腺病毒可高效感染原代神经元及神经细胞系,为进一步研究其对神经元的调控作用奠定基础。 展开更多
关键词 GluK2 海人藻酸受体 腺病毒 复制缺陷型 感染能力
类转录激活样因子效应物核酸酶技术的原理及应用
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作者 张巧娟 张艳琼 柳长柏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期76-80,共5页
类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)是近年兴起的一种基因定点编辑技术,由特异性DNA结合结构域TALE和DNA切割结构域Fok I核酸内切酶组成。由于TALEN能对基因组中特异性基因进行识... 类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)是近年兴起的一种基因定点编辑技术,由特异性DNA结合结构域TALE和DNA切割结构域Fok I核酸内切酶组成。由于TALEN能对基因组中特异性基因进行识别和定点剪切,导致基因DNA双链断裂,进一步诱导DNA损伤后修复,可对基因组中的特定位点进行高效遗传操作,如基因的敲入、敲除和修复等。TALEN技术以其设计简单、特异性高、毒性低及靶点选择灵活等特点成为目前应用最为广泛的基因定点编辑技术。本文将就TALEN的原理、研究进展以及临床应用展望作一综述。 展开更多
关键词 类转录激活因子效应物核酸酶(TALENs) 基因定点编辑 基因治疗
pIRES2-GDNF-NT-3真核表达载体的构建与鉴定
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作者 栗炳南 李卫东 +1 位作者 林俊堂 丰慧根 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第31期6056-6061,共6页
目的:采用一种简便和高效的方法构建双基因共表达载体pIRES2-GDNF-NT-3。方法:人胶质细胞源性神经营养因子和神经营养素3是采用PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取,将人胶质细胞源性神经营养因子的cDNA片段插入到pIRES2... 目的:采用一种简便和高效的方法构建双基因共表达载体pIRES2-GDNF-NT-3。方法:人胶质细胞源性神经营养因子和神经营养素3是采用PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取,将人胶质细胞源性神经营养因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建成为pIRES2-GDNF-EGFP.神经营养素3cDNA片段通过替换EGFP的方式插入到pIRES2-GDNF-EGFP中构建成为pIRES2-GDNF-NT-3双基因共表达栽体。结果:人胶质细胞源性神经营养因子和神经营养素3被克隆,通过测序和酶切鉴定的得知与基因库报道序列一致。结论:人神经生长因子和神经营养素3双基因真核表达载体成功构建,它提供了一个新的表达系统,为进一步研究双基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 神经营养素3 真核双表达载体 内部核糖体进入位点
高纯度可溶性嵌合蛋白VEGI^+的表达纯化 预览
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作者 丁莉莉 魏锐利 +1 位作者 蔡季平 李由 《第二军医大学学报》 CAS 北大核心 2007年第12期 1324-1328,共5页
目的:制备纯化的新型血管生长抑制剂可溶性嵌合蛋白VEGI^+,为进一步研究其活性奠定基础。方法:应用PCR方法制备血管内皮细胞生长抑制因子(VEGI)与寡肽CTTHWGFTLC相嵌合的融合基因VEGI^+,将PCR产物克隆至pGEM—T载体中,经酶切... 目的:制备纯化的新型血管生长抑制剂可溶性嵌合蛋白VEGI^+,为进一步研究其活性奠定基础。方法:应用PCR方法制备血管内皮细胞生长抑制因子(VEGI)与寡肽CTTHWGFTLC相嵌合的融合基因VEGI^+,将PCR产物克隆至pGEM—T载体中,经酶切及测序鉴定后,与原核表达载体pET30a(+)重组,构建重组表达载体pET30a—VEGI^+,转化大肠杆菌BL21并诱导表达,纯化并鉴定表达产物。结果:成功扩增融合基因VEGI^+,构建的重组质粒pET30a—VEGI^+酶切鉴定结果与预期一致,诱导后表达产物以包涵体为主。SDS-PAGE电泳及Western印迹结果表明,复性纯化后的嵌合蛋白VEGI^+相对分子质量约为23000,纯度约为90%。结论:成功构建了重组表达载体,并在大肠杆菌诱导表达,亲和层析纯化后获得纯度较高的可溶性嵌合蛋白VEGI^+。 展开更多
关键词 血管内皮生长抑制因子 寡肽类 基因融合
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枯草芽孢杆菌草酸脱羧酶转化拟南芥研究初报 预览 被引量:2
5
作者 陈晓婷 陈芳芳 +4 位作者 郑麟 林志伟 王爱荣 鲁国东 王宗华 《中国农学通报》 2008年第2期 53-58,共6页
多种真菌在致病过程中会分泌草酸,这些草酸产生菌寄主范围广,可以导致上百种植物病害,造成世界范围农作物的严重减产。草酸可以通过氧化与脱羧两种途径降解。该研究克隆了枯草芽孢杆菌的草酸脱羧酶基因Yvrk,并构建其植物表达载体,... 多种真菌在致病过程中会分泌草酸,这些草酸产生菌寄主范围广,可以导致上百种植物病害,造成世界范围农作物的严重减产。草酸可以通过氧化与脱羧两种途径降解。该研究克隆了枯草芽孢杆菌的草酸脱羧酶基因Yvrk,并构建其植物表达载体,通过农杆菌浸花转化拟南芥,收获种子,用除草剂Basta筛选获得15株转基因植株,对其中的11个株系分别离体接种菌核病菌,24h后量病斑,发现有6株转基因植株的病斑显著小于野生型。PCR验证发现大部分转基因植株确有Yvrk的存在,实验结果说明草酸脱羧酶基因确能一定程度上缓解真菌病害。 展开更多
关键词 拟南芥 枯草芽孢杆菌 草酸脱羧酶 菌核病菌
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马尾松毛虫质型多角体病毒非结构蛋白p44在Bac-to-Bac系统中的表达和亚细胞定位
6
作者 彭晗 王洪秀 +3 位作者 王金昌 关丽梅 靳亮 万翠香 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期122-128,共7页
为探寻马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV 1)p44蛋白的功能,构建了DpCPV 1基因组S8片段的原核表达体系,表达纯化蛋白后免疫家兔制备了多克隆抗体。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建了3种重组的杆状病毒质粒(Bacmid-p44、Bacmid-p44... 为探寻马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV 1)p44蛋白的功能,构建了DpCPV 1基因组S8片段的原核表达体系,表达纯化蛋白后免疫家兔制备了多克隆抗体。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建了3种重组的杆状病毒质粒(Bacmid-p44、Bacmid-p44-e GFP和Bacmid-e GFP)。转染昆虫细胞Sf9进行表达,通过Western blot检测和蛋白的亚细胞定位观察。Western blot检测结果显示,Bacmid-S8在昆虫细胞Sf9中表达实际蛋白的大小为35 kD,比在原核系统中表达的蛋白(44 k D)略小;利用激光共聚焦显微镜观察p44-e GFP的融合蛋白的亚细胞定位发现,融合p44的绿色荧光蛋白(eGFP)主要聚集在细胞质中,而未融合的eGFP则分布于整个细胞,说明DpCPV 1的p44蛋白定位于细胞质中。 展开更多
关键词 马尾松毛虫质型多角体病毒 多克隆抗体 真核表达 细胞定位
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一种新型的低辅毒污染的重组AAV生产系统 被引量:3
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作者 陈立 陈浩明 +3 位作者 李戈 姚纪花 卢大儒 薛京伦 《科学通报》 CAS 北大核心 2003年第1期52-54,共3页
将Cre-loxP系统引入重组AAV的生产过程之中, 用缺陷型腺病毒AdLC作为生产重组AAV的辅助病毒. 在大量生产带有目的基因(EGFP, hFⅨ )的重组腺相关病毒载体的同时, 最大程度地限制了辅助病毒的产生, 从而减轻了下游纯化工作的压力. 活体... 将Cre-loxP系统引入重组AAV的生产过程之中, 用缺陷型腺病毒AdLC作为生产重组AAV的辅助病毒. 在大量生产带有目的基因(EGFP, hFⅨ )的重组腺相关病毒载体的同时, 最大程度地限制了辅助病毒的产生, 从而减轻了下游纯化工作的压力. 活体动物实验的结果证实了这种方法的优越性. 实验结果为重组AAV载体系统在基因治疗领域中的应用提供了一条新的途径. 展开更多
关键词 重组腺相关病毒 AAV Cre-loxP系统 缺陷型腺病毒 辅助病毒 生产系统 基因治疗
人肽抗生素hPABβ重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达 预览 被引量:5
8
作者 胡金川 饶贤才 +3 位作者 黎庶 金晓琳 汪正清 胡福泉 《解放军医学杂志》 CAS 北大核心 2004年第2期 113-115,共3页
目的构建人肽抗生素hPAB-β重组质粒,并在大肠杆菌中进行表达,为大量制备hPAB-β奠定基础.方法通过PCR将hPAB-β融合蛋白的CNBr裂解位点改为羟胺裂解,将修改的目标片段克隆到pFAST-HTa质粒中,挑取阳性重组子,酶切出目标片段再亚克隆到pQ... 目的构建人肽抗生素hPAB-β重组质粒,并在大肠杆菌中进行表达,为大量制备hPAB-β奠定基础.方法通过PCR将hPAB-β融合蛋白的CNBr裂解位点改为羟胺裂解,将修改的目标片段克隆到pFAST-HTa质粒中,挑取阳性重组子,酶切出目标片段再亚克隆到pQE32-CP中,含阳性重组子的工程菌用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,进一步以亲和层析纯化融合蛋白,用羟胺裂解分析.结果构建的pFAST-hPAB-β重组质粒经酶切可得到约230bp的片段,与预期大小相符,测序结果表明其序列正确;构建的pQE32-CP-hPAB-β重组表达质粒酶切亦可切出230bp的片段,测序结果表明序列和阅读框均正确;重组表达质粒在大肠杆菌中能表达出Mr约27×103大小的蛋白,表达量约占细菌总蛋白的43%,该融合蛋白以包涵体形式存在,通过亲和层析可获得该蛋白,纯度为80.4%,该融合蛋白经羟胺裂解1h即可得到与合成肽大小相符的小肽.结论本研究成功构建了含hPAB-β重组质粒的工程菌,为进一步研究和大量制备hPAB-β创造了前提. 展开更多
关键词 抗生素类 HPAB-β 融合表达 大肠杆菌 质粒 裂解位点
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猪传染性胃肠炎病毒重组核蛋白免疫原性的研究 预览 被引量:1
9
作者 侯喜林 余丽芸 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第10期 7-10,共4页
猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核蛋白(NP)基因是高度保守序列.其编码的NP是病毒粒子的主要组成成分。N基因在PCR分离后,亚克隆到PQE30载体上的组氨酸亲合标志的N端,产生与组氨酸融合的重组融合N蛋白,经Ni-NTA金属亲合层析纯化后免... 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核蛋白(NP)基因是高度保守序列.其编码的NP是病毒粒子的主要组成成分。N基因在PCR分离后,亚克隆到PQE30载体上的组氨酸亲合标志的N端,产生与组氨酸融合的重组融合N蛋白,经Ni-NTA金属亲合层析纯化后免疫家兔,产生了多克隆抗体,此抗体与相应的抗原反应所产生的特异性条带和此抗原与抗NP单克隆抗体反应所产生的特异性条带一致。证明重组融合N蛋白具有良好的免疫原性和反应原性。 展开更多
关键词 TGEV 重组融合核蛋白 免疫原性
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人类白细胞抗原HLA-A/C座位间基因重组的发现 被引量:2
10
作者 王中梅 刘娜 +3 位作者 龚治尹 王丽君 李伟 单小燕 《现代检验医学杂志》 CAS 2014年第5期107-108,111共3页
目的:发现并证实两例人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)复合体 HLA-A/C座位间的基因重组。方法采集拟进行 HLA-I,II类 A,B和DRB1位点进行低分辨分型的两个家系共计12人的外周血标本,采用聚合酶链反应-序列特异寡核苷... 目的:发现并证实两例人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)复合体 HLA-A/C座位间的基因重组。方法采集拟进行 HLA-I,II类 A,B和DRB1位点进行低分辨分型的两个家系共计12人的外周血标本,采用聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸探针技术(PCR-SSO)和聚合酶链反应-序列特异性引物技术(PCR-SSP)进行 HLA低分辨分型,然后用基于测序的分型方法(SBT)进行高分辨基因分型,再根据结果进行遗传家系分析研究,确定 HLA基因重组相关位点。结果通过 HLA低、高分辨基因分型的结果进行家系分析,其中一个家系 A*30∶01/32∶01-C*06∶02间发生了重组,另一个家系是 A*11∶01/26∶01-C*07∶06间发生了重组,两个家系均是在染色单体减数分裂时 HLA-A和-C基因座位间发生了重组,均是父亲的2条染色单体间发生了交换,重组后产生的新的单倍型又完整的遗传给了下一代。结论发现并证实两例中国汉族人群 HLA-A/C基因座位间的基因重组家系,为更深入研究 HLA重组机制奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 基因重组 H LA-A/C位点
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下调Cullin1基因对脑胶质瘤细胞U251周期及相关蛋白的影响
11
作者 孙胜广 周波涛 范月超 《徐州医学院学报》 CAS 2015年第2期94-96,共3页
目的:探讨Cullin1(Cul1)基因对脑胶质瘤细胞U251细胞周期的影响。方法运用Control siRNA、Cul1 siRNA分别转染脑胶质瘤细胞U251,Western blot检测Cul1蛋白表达,流式细胞仪检测脑胶质瘤细胞U251细胞周期的变化,Western Blot 检测C... 目的:探讨Cullin1(Cul1)基因对脑胶质瘤细胞U251细胞周期的影响。方法运用Control siRNA、Cul1 siRNA分别转染脑胶质瘤细胞U251,Western blot检测Cul1蛋白表达,流式细胞仪检测脑胶质瘤细胞U251细胞周期的变化,Western Blot 检测Cul1基因干涉后对脑胶质瘤细胞U251细胞周期蛋白及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的影响。结果与Control siRNA组相比,Cul1 siRNA组脑胶质瘤细胞U251 Cul1蛋白表达量降低99.1%;Cul1基因干涉后脑胶质瘤细胞U251细胞G1期的细胞比例上升比较明显;Cul1基因干涉后脑胶质瘤细胞U251中的Cyclin D1及Cyclin E的蛋白表达量明显减少,而p21和p27的蛋白表达量明显增加。结论 Cul1 siR-NA靶向干扰了Cul1的表达,通过下调Cyclin D1、Cyclin E蛋白的表达,同时上调p21和p27蛋白的表达,使脑胶质瘤细胞U251停滞在G 1期。 展开更多
关键词 Cul1基因 胶质瘤 细胞周期
RNA干扰及其在植物中的应用进展 预览
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作者 朱学文 李凤梅 《长江大学学报自然科学版:农学卷》 CAS 2007年第3期 96-99,共4页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是双链RNA诱导的基因沉默现象,RNA干扰现象是在线虫中首次发现的,它广泛存在于生物体中(包括单细胞生物、后生动物和哺乳动物)。综述了植物RNA干扰及其在植物基因功能分析、遗传改良农作物和抗病... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是双链RNA诱导的基因沉默现象,RNA干扰现象是在线虫中首次发现的,它广泛存在于生物体中(包括单细胞生物、后生动物和哺乳动物)。综述了植物RNA干扰及其在植物基因功能分析、遗传改良农作物和抗病毒等方面的广泛应用。 展开更多
关键词 RNA干扰 DSRNA 应用
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人Rac1基因shRNA表达质粒的构建及鉴定 被引量:1
13
作者 王虹 张菊青 +2 位作者 陈玉丙 张红梅 崔满华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期414-417,共4页
目的构建人Rac1基因shRNA表达质粒,为提高卵巢癌放化疗的敏感性奠定基础。方法根据GenBank中登录的人Rac1基因序列,应用shRNA设计软件设计并合成用于构建shRNA表达质粒的oligo DNA,构建shRNA重组质粒。将阳性Rac1基因shRNA重组质粒经脂... 目的构建人Rac1基因shRNA表达质粒,为提高卵巢癌放化疗的敏感性奠定基础。方法根据GenBank中登录的人Rac1基因序列,应用shRNA设计软件设计并合成用于构建shRNA表达质粒的oligo DNA,构建shRNA重组质粒。将阳性Rac1基因shRNA重组质粒经脂质体介导转染卵巢癌Skov3细胞,48 h后经RT-PCR筛选有效的shRNA重组质粒。结果经限制性内切酶BamHⅠ和PstⅠ酶切鉴定出阳性Rac1基因shRNA重组质粒,序列比对分析结果与理论序列完全一致。RT-PCR检测显示,转染pGPU6/GFP/Rac1-524的Skov3细胞Rac1基因mRNA的转录水平下降。结论已成功构建人Rac1基因shRNA表达质粒,并筛选出有效的干扰质粒pGPU6/GFP/Rac1-524。 展开更多
关键词 RAC1 GTP结合蛋白质 RNA干扰 卵巢肿瘤
一类基因组断点median问题的模型与算法
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作者 王继强 《科学技术与工程》 北大核心 2012年第14期 3315-3318,共4页
研究了来自生物信息学领域的基因组断点median问题。在无向环形基因组的经典情形的基础上,针对有向环形基因组的情形给出了模型和算法。基于LINGO软件的算例表明算法是可行和有效的。
关键词 断点 MEDIAN 算法 相邻度 标准增广 旅行商问题
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人胰岛素基因重组杆状病毒在家蝇中表达的研究 预览 被引量:1
15
作者 李华 刘维全 +3 位作者 刘海鹏 王本旭 王吉贵 江禹 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2004年第2期 113-114,117,共3页
目的:利用杆状病毒表达系统进行人胰岛素基因在家蝇中表达的研究.方法:用携带有人胰岛素基因的重组杆状病毒感染家蝇幼虫,用放射免疫技术、Tricine-SDS-PAGE和Western-blot技术对蝇蛆胰岛素表达水平进行检测.结果:重组的杆状病毒感染家... 目的:利用杆状病毒表达系统进行人胰岛素基因在家蝇中表达的研究.方法:用携带有人胰岛素基因的重组杆状病毒感染家蝇幼虫,用放射免疫技术、Tricine-SDS-PAGE和Western-blot技术对蝇蛆胰岛素表达水平进行检测.结果:重组的杆状病毒感染家蝇幼虫后,蝇蛆中有人胰岛素的表达,表达量为37.401μIU/ml,占蝇蛆总蛋白的0.583%.结论:利用杆状病毒表达系统可以在家蝇蝇蛆中表达人胰岛素. 展开更多
关键词 杆状病毒表达系统 人胰岛素基因 家蝇
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Potential transcriptional regulatory regions exist upstream of the human ezrin gene promoter in esophageal carcinoma cells
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作者 Shuying Gao Yanpeng Dai +3 位作者 Meijun Yin Jing Ye Gang Li Jie Yu 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2011年第6期455-464,共10页
我们以前证明这个区域 ? 人的 ezrin 基因(VIL2 ) 的 87/+134 在人的食道的癌 EC109 房间,和一个进一步在上游的区域展出了倡导者活动 ?1324/? 890 断然调整的抄写。在这研究,识别 transcriptional VIL2 倡导者在上游的规章的区域,... 我们以前证明这个区域 ? 人的 ezrin 基因(VIL2 ) 的 87/+134 在人的食道的癌 EC109 房间,和一个进一步在上游的区域展出了倡导者活动 ?1324/? 890 断然调整的抄写。在这研究,识别 transcriptional VIL2 倡导者在上游的规章的区域,我们克隆 VIL2 ?1541/? 包含 ? 1324/ 的 706 片断 ? 890,并且调查了它的 transcriptional 经由酶试金在的规章的性质短暂地 transfected 房间。在 EC109 房间,它被发现那 VIL2 ?1541/? 706 项拥有的倡导者和 enhancer 活动。我们也局部性的 transcriptional 由熔化 VIL2 的 5 删除或 3 删除片断的规章的区域 ?1541/? 706 到一个酶记者。我们发现有三积极并且一否定 transcriptional 在 VIL2 以内的规章的区域 ?1541/? 706 在 EC109 房间。当这些区域独立被定位时没有倡导者的酶基因在上游,或定位指导酶基因的 VIL2 倡导者或 SV40 倡导者在上游,仅仅 VIL2 ?1297/? 1186 展出了可观的倡导者和 enhancer 活动,它是比那些低的 ?1541/? 706。另外, Sp1 的短暂表示增加了 ezrin 表示和 VIL2 的 transcriptional 激活 ?1297/? 1186。尽管在删除实验展出显著地积极或否定的 transcriptional 规定,另外的三个区域显示出一条更弱或不在的规定。这些数据建议 VIL2 倡导者在上游的超过一个区域参予了 VIL2 抄写,和 VIL2 ?1297/? 1186,可能作为关键 transcriptional 规章的区域,在有另外的潜在的规章的区域的同伴的调整 VIL2 抄写。 展开更多
关键词 转录调控区 食管癌细胞 基因启动子 上游地区 人类 荧光素酶基因 SV40启动子 瞬时表达
转基因疾病动物模型的研究进展 预览 被引量:7
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作者 刘英 张瑞君 +1 位作者 伍志伟 施苓 《动物医学进展》 2006年第12期 44-49,共6页
人类疾病动物模型(animal models of human diseases)是为阐明人类疾病的发生机制或建立治疗方法而制作的、具有人类疾病模拟表现的实验动物。疾病动物模型对医学发展做出了很大贡献。但是,许多疾病难以用人工诱发的方法制造动物模... 人类疾病动物模型(animal models of human diseases)是为阐明人类疾病的发生机制或建立治疗方法而制作的、具有人类疾病模拟表现的实验动物。疾病动物模型对医学发展做出了很大贡献。但是,许多疾病难以用人工诱发的方法制造动物模型,或许多疾病在实验动物身上不发生或仅仅是高等哺乳类动物才发生,因此难以通过自发或人工定向培育的方法获得动物模型。转基因技术的出现,为人类精确地研究基因与疾病的相关关系提供了可能,而且可以在个体发生的每个阶段中使用任何个体进行遗传功能的分析。因此,转基因疾病动物模型的开发成为转基因动物的热点。文章就转基因疾病动物模型的建立制作及应用前景做一综述。 展开更多
关键词 人类疾病动物模型 转基因动物
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美国基因重组微生物野外试验的现状与展望 预览
18
作者 长谷部亮 龙习才 《生物工程进展》 1991年第1期 23-28,共6页
<正> 1.前言 目前,世界各国都在以各种各样的目的,开展基因重组微生物(Genetically Engineered Microorganisms,GEMs)的野外利用研究活动。特别是美国,从1987年开始就在全国各地开展了小规模的野外试验。
关键词 基因重组 GEMS 野外试验
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候选菌落直接进行PCR筛选重组子 预览
19
作者 唐微 朱明磊 +2 位作者 王珺 王燕 孙晓东 《郧阳医学院学报》 2007年第3期 179-180,共2页
转基因研究的重要一环是重组体的筛选与鉴定,最常用的重组体筛选是利用其抗性筛选(Amp^+,Kan^+,Tet^+)或蓝白斑筛选。但是,许多重组体的初选既不能用抗性筛选也不能用白斑筛选,只能用PCR、电泳、酶切等方法进行,而这种筛选... 转基因研究的重要一环是重组体的筛选与鉴定,最常用的重组体筛选是利用其抗性筛选(Amp^+,Kan^+,Tet^+)或蓝白斑筛选。但是,许多重组体的初选既不能用抗性筛选也不能用白斑筛选,只能用PCR、电泳、酶切等方法进行,而这种筛选则需提取质粒后才能进行。通常做法是将连接的产物涂在LB平板上,然后挑取菌落进行培养,再提取其质粒进行PCR、电泳、酶切、测序等鉴定。 展开更多
关键词 BAR基因 重组子筛选
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Beneficial effects of autologous bone marrow mononuclear cell transplantation against ischemic bile duct in rats
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作者 LI Li-xin CHEN DA-zhi HE Qiang 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期280-283,共4页
背景骨头髓房间移植被显示了导致 angiogenesis 并且因此改进评估的 ischemic disease.This 学习骨头髓 mononuclear 的效果在有我们建立了的 ischemic 胆汁 duct.Methods 的老鼠的 neovascularization 上的房间( BM-MNCs )培植为由夹... 背景骨头髓房间移植被显示了导致 angiogenesis 并且因此改进评估的 ischemic disease.This 学习骨头髓 mononuclear 的效果在有我们建立了的 ischemic 胆汁 duct.Methods 的老鼠的 neovascularization 上的房间( BM-MNCs )培植为由夹钳 manipulation.There 的胆汁的狭窄是的 ischemic 的一个动物模型在每个组的 10 只老鼠: BM-MNCs 培植组,控制组和正常 group.Rat 腿节 BM-MNCs 用密度坡度 centrifugation 被孤立 展开更多
关键词 骨髓单个核细胞 缺血性疾病 细胞移植 胆管 大鼠 有益作用 免疫组织化学 微血管密度
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