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实验大鼠泰泽菌检测方法的比较研究 认领 被引量:3
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作者 高正琴 邢进 +2 位作者 王春玲 贺争鸣 邢瑞昌 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2004年第3期 142-146,共5页
目的比较实验大鼠泰泽菌检测方法─nested-PCR、IFA、免疫抑制诱发试验-触片染色镜检和组织病理学诊断.方法根据泰泽菌16S rDNA合成引物,对16个菌株作nested-PCR扩增并进行特异性、敏感性试验、验证.将此PCR应用于20只免疫抑制Wistar大... 目的比较实验大鼠泰泽菌检测方法─nested-PCR、IFA、免疫抑制诱发试验-触片染色镜检和组织病理学诊断.方法根据泰泽菌16S rDNA合成引物,对16个菌株作nested-PCR扩增并进行特异性、敏感性试验、验证.将此PCR应用于20只免疫抑制Wistar大鼠和5只非免疫抑制SD大鼠泰泽菌检测,并作IFA、常规细菌学检测和组织病理学诊断.结果 nested-PCR中仅有泰泽菌出现196 bp特异性扩增条带;而15株非泰泽菌均未出现此扩增条带.该PCR能检出10 pg泰泽菌DNA.将此PCR应用于大鼠泰泽菌检测,结果未检出阳性样品.nested-PCR与常规细菌学检测、组织病理学诊断结果相一致.采用IFA方法,以购得的大鼠泰泽菌抗原片对上述25份大鼠血清进行检测,结果有6份血清产生非特异性反应.结论采用IFA对动物群进行筛查出现阳性结果,须采用免疫抑制诱发试验、PCR和组织病理学诊断技术组合进一步验证.本研究建立的nested-PCR方法,特异、敏感、快速,结合组织病理学诊断技术对实验动物泰泽菌感染可做出精确诊断. 展开更多
关键词 大鼠 泰泽菌 芽孢杆菌 聚合酶链反应 荧光抗体技术 检测方法
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用于工业杀菌剂评估的高通量筛选方法的建立 认领 被引量:1
2
作者 杨平 衣雪竹 《广州化工》 CAS 2015年第6期135-136,147共3页
为建立一种工业杀菌剂高通量筛选方法,采用96孔板培养法,以大肠杆菌作为待测菌,利用显色剂显色反应对杀菌剂的抑菌能力进行评价。结果显示,采用1~4 d培养菌液,稀释至10%或菌液吸光度值A=0.038,显色剂TTC(2,3,5-氯化三苯基... 为建立一种工业杀菌剂高通量筛选方法,采用96孔板培养法,以大肠杆菌作为待测菌,利用显色剂显色反应对杀菌剂的抑菌能力进行评价。结果显示,采用1~4 d培养菌液,稀释至10%或菌液吸光度值A=0.038,显色剂TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)加入量20 mg/kg,显色18~24 h可得到与试管法一致的结果。该方法操作简捷,微量省力,结果易观察,成本低,可用于工业杀菌剂的大量筛选和应用评估。 展开更多
关键词 杀菌剂评估 高通量筛选 显色剂
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一种实时方法研究阪崎肠杆菌的生长情况 认领
3
作者 袁飞 徐宝梁 +3 位作者 陈颖 赵贵明 赵勇胜 张菲菲 《中国卫生检验杂志》 2008年第4期 649-650,共2页
目的:建立一种实时方法研究阪崎肠杆菌生长情况。方法:采用96孔板培养阪崎肠杆菌,然后由扫描仪实时监测阪崎肠杆菌的生长。结果:采用传统的平板方法和微孔板光谱分析仪测定阪崎肠杆菌数量之间具有非常好的相关性(r^2=0.92)。采... 目的:建立一种实时方法研究阪崎肠杆菌生长情况。方法:采用96孔板培养阪崎肠杆菌,然后由扫描仪实时监测阪崎肠杆菌的生长。结果:采用传统的平板方法和微孔板光谱分析仪测定阪崎肠杆菌数量之间具有非常好的相关性(r^2=0.92)。采用这种新的快速方法测定阪崎肠杆菌的生长,从而缩短测定时间(由至少24h缩短为小于10h),比传统方法更方便、快速,并可实现实时监测阪崎肠杆菌的生长情况。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 生长 快速 实时方法
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酱油中黄曲霉毒素B1的风险评估 认领 被引量:9
4
作者 孙秀兰 晏丽 +2 位作者 徐丹 孙婷婷 朱瑜 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2010年第8期748-750,753共4页
黄曲霉毒素B1(AFB1)是已知毒性最强的天然物质,在我国的酱油产品中普遍存在,对人体的危害及其严重,其安全性受到消费者的密切关注。为了解我国酱油中黄曲霉毒素B1的安全现状,建立我国酱油中黄曲霉毒素B1的应急对策,本文采用酶联免疫法... 黄曲霉毒素B1(AFB1)是已知毒性最强的天然物质,在我国的酱油产品中普遍存在,对人体的危害及其严重,其安全性受到消费者的密切关注。为了解我国酱油中黄曲霉毒素B1的安全现状,建立我国酱油中黄曲霉毒素B1的应急对策,本文采用酶联免疫法(ELISA)对我国203个酱油样品中的AFB1含量进行了检测,并就现有的污染状况,从危害识别、危害描述、暴露评估和风险特征描述等方面对酱油中的AFB1进行了风险评估。 展开更多
关键词 酱油 AFB1 风险评估
微生物检测内部质量监控评价方法 认领 被引量:1
5
作者 王青柏 曾绮文 +1 位作者 谭雨婷 李良秋 《轻工科技》 2019年第7期114-115,136共3页
本文主要介绍微生物检测内部质量监控几种常用的评价方法,为微生物检测实验室制定合理、有效的内部质量监控计划及其结果评价方法提供参考。
关键词 微生物 质量监控 评价方法
生物发光法微生物快速检测试剂的性质及其影响因素研究 认领 被引量:12
6
作者 张菊梅 吴清平 +1 位作者 李程思 吴慧清 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期 36-41,共6页
研究了ATP生物发光微生物快速检测试剂的反应动力学、反应最适温度、pH以及各种影响因素。在ATP生物发光反应中,测试系统中D-荧光素用量为40~50μg/mL时对反应已经足够;发光脉冲计数CPM值随反应时间的延长不断降低,开始的1min内,... 研究了ATP生物发光微生物快速检测试剂的反应动力学、反应最适温度、pH以及各种影响因素。在ATP生物发光反应中,测试系统中D-荧光素用量为40~50μg/mL时对反应已经足够;发光脉冲计数CPM值随反应时间的延长不断降低,开始的1min内,其CPM值下降最快,然后下降速度不断减缓;反应的最适温度为24℃~25℃;而体系的最佳pH为7.2-7.4。配制好的发光试剂溶液置于4℃保存45h,可以保持86%的活力。在25℃时保温1h,活力下降较少,随时间的增加,活力逐渐下降,到6.5h时,仅剩53.5%的活力,而在33℃时,随着保温时间的延长,酶活力下降较快,保温1.5h,活力剩下59.1%,因此保存温度对发光试剂活力的影响非常大。各种化学物质如酸、碱、盐及表面活性剂都会抑制ATP发光反应,当NaCl浓度达到1.5g/L时,即可以抑制52.5%的发光,TritonX-100及酸、碱对系统均有一定的影响,CTAB、SDS及TCA则严重抑制发光反应。 展开更多
关键词 生物发光 微生物 快速检测试剂 性质 影响因素
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MTT法检测金黄色萄萄球菌活菌数的研究 认领 被引量:3
7
作者 袁琳 宁丹 +1 位作者 唐曦阳 李晶 《中南民族大学学报:自然科学版》 CAS 2014年第2期54-56,84共4页
以金黄色葡萄球菌为对象,探讨了MTT法应用于细菌细胞数定量分析时,MTT作用时间、毒性、剂量和DMSO用量等因素对活菌计数的影响.结果表明:当细菌数在105~107个/mL时,吸光度值与细菌数目呈良好的正向线性关系,MTT法可准确检测金黄色葡... 以金黄色葡萄球菌为对象,探讨了MTT法应用于细菌细胞数定量分析时,MTT作用时间、毒性、剂量和DMSO用量等因素对活菌计数的影响.结果表明:当细菌数在105~107个/mL时,吸光度值与细菌数目呈良好的正向线性关系,MTT法可准确检测金黄色葡萄球菌的活菌数量.最佳反应条件为:0.25 mg/mL MTT溶液作用2 h,DMSO为2~2.5倍的菌液体积. 展开更多
关键词 MTT法 金黄色葡萄球菌 活菌计数
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食品中五种致病性弧菌MPCR—DHPLc检测方法的建立 认领 被引量:4
8
作者 邵碧英 王传得 +4 位作者 郑晶 黄晓蓉 曹际娟 陈彬 吴谦 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期 500-504,共5页
采用试剂盒法提取5种敛病性弧菌(霍乱弧菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和拟态弧菌)的基因组DNA。分别合成5对特异性引物,对PCR反应体系进行优化后,建立了5种致病性弧菌间的MPCR—DHPLC检测方法。二重PCR—DHPLC检测灵敏度可... 采用试剂盒法提取5种敛病性弧菌(霍乱弧菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和拟态弧菌)的基因组DNA。分别合成5对特异性引物,对PCR反应体系进行优化后,建立了5种致病性弧菌间的MPCR—DHPLC检测方法。二重PCR—DHPLC检测灵敏度可达到100CFU/ml。建立的MPCR—DHPLC方法在食品中弧菌的检测上具有很好的应用价值。 展开更多
关键词 弧菌 基因组DNA 多重PCR 变性高效液相色谱
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温和气单胞菌PCR快速诊断方法的建立 认领 被引量:4
9
作者 黄冠军 刘天强 +2 位作者 刘衍鹏 饶朝龙 肖丹 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2012年第1期 89-92,共4页
根据NCBI公布的温和气单胞菌(Aeromonas sobria)丝氨酸蛋白酶的基因序列,设计并选取一对能够快速而准确地检测温和气单胞菌的PCR引物,建立PCR快速检测体系,并对患病的鱼组织进行检测。研究结果表明,使用设计的引物能够扩增出与预... 根据NCBI公布的温和气单胞菌(Aeromonas sobria)丝氨酸蛋白酶的基因序列,设计并选取一对能够快速而准确地检测温和气单胞菌的PCR引物,建立PCR快速检测体系,并对患病的鱼组织进行检测。研究结果表明,使用设计的引物能够扩增出与预计大小相符合的131bp的特异性片段,具有较好的检测特异性,对靶标DNA的检测灵敏度为1.0pg/20uL,对温和气单胞菌的检测灵敏度为50cfu/20uL。样品的检测结果与实际发病情况一致,表明本研究成功建立了温和气单胞菌常规PCR检测体系,该体系可以用于温和气单胞菌的诊断和样品的检测。 展开更多
关键词 温和气单胞菌(Aeromonas sobria) 胞外丝氨酸蛋白酶 聚合酶链式反应 检测
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食源性微生物PCR检测技术研究进展及标准化讨论 认领 被引量:6
10
作者 张然 董海强 张廷文 《山东轻工业学院学报:自然科学版》 CAS 2010年第4期 8-12,共5页
随着食品安全问题关注程度的不断升温,食源性微生物的检测技术也趋向迅捷、准确、大通量的方向发展。建立在传统微生物学之上的检验方法日益显现出工作繁冗、耗时长、精确性差等缺点。聚合酶链式反应(PCR)技术自上世纪80年代以来被应... 随着食品安全问题关注程度的不断升温,食源性微生物的检测技术也趋向迅捷、准确、大通量的方向发展。建立在传统微生物学之上的检验方法日益显现出工作繁冗、耗时长、精确性差等缺点。聚合酶链式反应(PCR)技术自上世纪80年代以来被应用于食源性微生物检测领域。PCR技术经历了不断改良,巢式PCR、逆转录PCR直至实时定量PCR的应用,都使食源性微生物的PCR检测技术日趋完善。随着近年来多重、多种PCR的综合应用,PCR检测技术已经在食源性微生物检测中得到广泛的应用。与此相比,食源性微生物PCR检测技术的标准化工作却相对滞后。食源性微生物PCR检测技术的标准化可通过对各种PCR方法的统计、评估、筛选等策略来实施。结合我国实际情况,在建立标准的食源性微生物PCR检测方法,推广标准化PCR检测技术的应用等方面还要很多工作要做。 展开更多
关键词 食源性微生物 快速检测技术 PCR 标准化
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微生物学检验中灭菌方法的研究 认领 被引量:3
11
作者 罗彤彤 单齐梅 +1 位作者 卢亚平 潘英民 《矿冶》 CAS 2002年第1期 80-82,共3页
北京矿冶研究总院天然植物胶发展中心生产的植物胶,属于食品添加剂中的食品增稠剂,每批产品必须符合质量标准中微生物学指标的要求,需要进行严格的微生物学检测.本文从温度、辐射、过滤、化学药剂等方面研究了微生物学检验中灭菌的方法... 北京矿冶研究总院天然植物胶发展中心生产的植物胶,属于食品添加剂中的食品增稠剂,每批产品必须符合质量标准中微生物学指标的要求,需要进行严格的微生物学检测.本文从温度、辐射、过滤、化学药剂等方面研究了微生物学检验中灭菌的方法,使检验达到无菌操作的要求. 展开更多
关键词 微生物学 检验 灭菌
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复方酮康唑软膏微生物限度检查法的验证 认领 被引量:1
12
作者 赵小英 《海峡药学》 2008年第5期 54-56,共3页
目的选择正确的方法降低复方酮康唑软膏的抑菌作用,以保证检验结果的正确性与可信性。方法细菌、霉菌及酵母菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌均采用培养基稀释法。结果经试验结果得出,细菌、霉菌及酵母菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单... 目的选择正确的方法降低复方酮康唑软膏的抑菌作用,以保证检验结果的正确性与可信性。方法细菌、霉菌及酵母菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌均采用培养基稀释法。结果经试验结果得出,细菌、霉菌及酵母菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌可采用培养基稀释法检查。结论用培养基稀释法检查复方酮康唑软膏中的细菌、霉菌及酵母菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌,结果可靠。 展开更多
关键词 复方酮康唑软膏 徽生物限度检查法 培养基稀释法
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PMA/EMA-LAMP法应用于VBNC状态活菌检测的研究进展 认领
13
作者 冯雪 王冠蕾 侯俊材 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2020年第5期37-41,共5页
结合环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),PMA/EMA-LAMP在高灵敏度、特异性和快速性方面明显优于传统的基于PCR的检测方法。特别是PMA/EMA-LAMP在VBNC状态下对大肠埃希菌、副溶血性弧菌和葡萄球菌的检测... 结合环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),PMA/EMA-LAMP在高灵敏度、特异性和快速性方面明显优于传统的基于PCR的检测方法。特别是PMA/EMA-LAMP在VBNC状态下对大肠埃希菌、副溶血性弧菌和葡萄球菌的检测已被证明是一种有效的方法。本文综述了此方法的应用及作用机理。 展开更多
关键词 乳制品 非可培养态 食源性致病菌 环介导等温扩增
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Nested-PCR检测种传番茄细菌性溃疡病菌 认领 被引量:4
14
作者 闵现华 刘箐 +6 位作者 韩跃武 文朝慧 王军平 刘姝彤 刘雅莉 宋蕤 施颖波 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第7期 28-31,共4页
利用番茄溃疡病菌特异性引物对纯菌液、模拟带菌种子及自然感染种子提取液分别进行Direct-PCR和Nested-PCR检测。结果在纯菌液中,Direct-PCR的检测灵敏度为105cfu/mL,Nested-PCR为102cfu/mL;在模拟带菌种子提取液中,Direct-PCR的检测灵... 利用番茄溃疡病菌特异性引物对纯菌液、模拟带菌种子及自然感染种子提取液分别进行Direct-PCR和Nested-PCR检测。结果在纯菌液中,Direct-PCR的检测灵敏度为105cfu/mL,Nested-PCR为102cfu/mL;在模拟带菌种子提取液中,Direct-PCR的检测灵敏度为107cfu/mL,Nested-PCR为104cfu/mL;在自然感染种子提取液中,稀释104倍后Nested-PCR仍然可以检出。建立的番茄种子Nested-PCR检测技术,无需经过核酸提取步骤,可以在8 h内完成整个检测过程,方便快捷,成本低廉,可作为番茄种子带菌的常规检测方法。 展开更多
关键词 番茄溃疡病 番茄种子 Direct-PCR NESTED-PCR
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高效液相色谱法测定大蒜中吡虫啉残留 认领 被引量:6
15
作者 王勇 周宏琛 +2 位作者 闫秋成 朱涛 田晓林 《济宁师范专科学校学报》 2006年第3期 16-17,共2页
建立了大蒜中吡虫啉残留分析的高效液相-二极管阵列检测方法.样品经甲醇提取浓缩后,用5%氯化钠水溶液及石油醚萃取,再用二氯甲烷反萃取水相,吹干,定容,采用反向C18色谱柱,流动相为甲醇/水(体积比32: 68),波长为272m.结果表明:在0.1... 建立了大蒜中吡虫啉残留分析的高效液相-二极管阵列检测方法.样品经甲醇提取浓缩后,用5%氯化钠水溶液及石油醚萃取,再用二氯甲烷反萃取水相,吹干,定容,采用反向C18色谱柱,流动相为甲醇/水(体积比32: 68),波长为272m.结果表明:在0.1~10.0μg/mL范围内回归方程为:Y=126.208X-1.348,相关系数为0.99998,呈良好的线性关系,方法检出限为0.05mg/kg,平均回收率为79.6%~88.2%,相对标准偏差为2.1%~3.2%. 展开更多
关键词 高效液相色谱法 吡虫啉 大蒜
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化妆品微生物检验操作要注意的几个问题 认领 被引量:10
16
作者 覃洁 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期 104-106,共3页
提出了化妆品微生物检验的操作中要注意的几个问题,分析检验时出现的假阴性现象、抑菌现象和次生菌现象的原因,提出了避免措施,以提高检验结果的准确性。
关键词 化妆品 微生物 检验
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MTT和TTC在嗜酸乳杆菌菌落计数中的应用 认领 被引量:2
17
作者 吕嘉枥 韩迪 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2007年第4期 23-25,共3页
对MTT和TTC于嗜酸乳杆菌菌落计数的可行性进行了探讨。结果表明,当MTT或TTC69最终质量浓度为0.1~0.2g/L时菌落正常生长.而且显色效果明显。说明MTT和TTC可应用于嗜酸乳杆菌的计数。但MTT溶液在MRS培养基中超过45℃时就容易变色,... 对MTT和TTC于嗜酸乳杆菌菌落计数的可行性进行了探讨。结果表明,当MTT或TTC69最终质量浓度为0.1~0.2g/L时菌落正常生长.而且显色效果明显。说明MTT和TTC可应用于嗜酸乳杆菌的计数。但MTT溶液在MRS培养基中超过45℃时就容易变色,这给实验操作带来一定的要求。用TTC进行培养时间的试验。结果,嗜酸乳杆菌在TTC-MRS中培养36h后,就能有效地进行菌落计数。这与用普通的MRS琼脂计数相比,时间大大缩短。 展开更多
关键词 MTT TTC 嗜酸乳杆菌 菌落计数
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包装饮用水生产线中铜绿假单胞菌的检测与防控 认领 被引量:5
18
作者 许晓云 陈倩 +2 位作者 刘琦 郭真真 李作美 《饮料工业》 2018年第3期14-18,共5页
选取包装饮用水生产线上部分质量监控点的水作为研究对象,采用滤膜法分别在3月中旬、6月中旬、9月中旬、12月中旬进行铜绿假单胞菌的检测,以得到其检出率。目的是对包装饮用水生产线中的铜绿假单胞菌进行针对性的防控。结果显示,3月中... 选取包装饮用水生产线上部分质量监控点的水作为研究对象,采用滤膜法分别在3月中旬、6月中旬、9月中旬、12月中旬进行铜绿假单胞菌的检测,以得到其检出率。目的是对包装饮用水生产线中的铜绿假单胞菌进行针对性的防控。结果显示,3月中旬生产线上不同质量监控点水的检出率分别为5%、50%、5%、0、0;6月中旬分别为35%、100%、40%、0、0;9月中旬分别为10%、65%、20%、0、0;12月中旬分别为0、45%、0、0、0。综上所述,夏秋季的铜绿假单胞菌的检出率高于春冬季,铜绿假单胞菌的污染主要来自于加工过程中的粗滤环节。 展开更多
关键词 生产线 铜绿假单胞菌 矿泉水 检出率 防控
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酸乳中乳酸菌计数培养基的优选与改良 认领 被引量:6
19
作者 黄小丹 柳建良 杜林 《仲恺农业技术学院学报》 2006年第1期 21-24,共4页
比较了5种乳酸菌计数培养基对乳酸菌的检测效果,其中TJA培养基乳酸菌检测率比LCM培养基、MRS培养基、改良CHALMRS部养基和LAB培养基分别高11.7%、44.8%、43.1%、和121.3%;在优选出的TJA培养基上分别添加不同质量分数的分散剂吐温-80进... 比较了5种乳酸菌计数培养基对乳酸菌的检测效果,其中TJA培养基乳酸菌检测率比LCM培养基、MRS培养基、改良CHALMRS部养基和LAB培养基分别高11.7%、44.8%、43.1%、和121.3%;在优选出的TJA培养基上分别添加不同质量分数的分散剂吐温-80进行改良,结果表明,改良TJA培养基以含0.1%吐温-80的检测效果最佳,对部分市售酸乳的检测与分析表明,酸乳成品中的乳酸菌数普遍大于1×10^8 cfu/ML,个别品牌酸乳中的活性菌达到1×10^9cfu/ML. 展开更多
关键词 酸乳 乳酸菌 培养基 吐温-80
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肉毒毒素及其检测方法研究进展 认领 被引量:1
20
作者 高艳丽 王景林 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第12期2334-2337,共4页
肉毒毒素是自然界中毒性极强的一类神经麻痹毒素,可引起人类和动物肉毒中毒。因其制备简单、毒性强,已被列为最具威胁的生物恐怖剂之一,同时也是重要的毒素战剂。其感染剂量极低,每个人都易感。肉毒中毒后,病情严重者一般2-3 d内即可能... 肉毒毒素是自然界中毒性极强的一类神经麻痹毒素,可引起人类和动物肉毒中毒。因其制备简单、毒性强,已被列为最具威胁的生物恐怖剂之一,同时也是重要的毒素战剂。其感染剂量极低,每个人都易感。肉毒中毒后,病情严重者一般2-3 d内即可能死亡。如采取正确及时的治疗,可使肉毒中毒死亡率降低,而快速检测方法的建立无疑是成功治疗的前提。本文就肉毒毒素及其检测方法做一综述。 展开更多
关键词 肉毒毒素 肉毒中毒 检测方法
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