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内参基因GAPDH和β-actin在BMP9诱导的骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达情况 预览 被引量:2
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作者 杨伦韵 张晓艳 +2 位作者 廉静 罗进勇 唐敏 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期546-549,共4页
目的:观察常用内参基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)和β肌动蛋白(β-actin)在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)诱导的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,M... 目的:观察常用内参基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)和β肌动蛋白(β-actin)在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)诱导的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化过程中表达情况,以确定相关研究的内参基因。方法:检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)确定BMP9诱导的MSCs(包括C3H10、C2C12和MEF)向成骨分化;以real-time PCR分别检测0、1、3、5、7 d GAPDH和β-actin的m RNA表达水平;以Western blot检测GAPDH和β-actin蛋白。结果:(1)β-actin在BMP9诱导的MSCs成骨分化过程中m RNA表达水平逐渐升高,0 d与5 dβ-actin的m RNA表达量存在统计学差异(C3H10、C2C12和MEF的P值均为0.000,GAPDH的m RNA表达水平未见明显改变(P〉0.05);β-actin蛋白表达量随成骨分化逐渐增加,而GAPDH蛋白表达未见明显变化。结论:在BMP9诱导的MSCs成骨分化过程中,GAPDH比β-actin更适合做内参。 展开更多
关键词 内参基因 骨髓间充质干细胞 成骨分化 骨形态发生蛋白9
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骨髓细胞多向分化潜能的初步研究 预览 被引量:2
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作者 朱海英 苏娟 +5 位作者 李文林 姚玉成 刘红 王新民 余宏宇 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS 北大核心 2002年第11期 1172-1174,共3页
目的:探讨骨髓细胞在受致死剂量照射的受体鼠体内的多向分化潜能.方法:将C57-TgN(Mx-cre)雄性小鼠的骨髓细胞经尾静脉植入受致死剂量照射的雌性受体鼠,重建受体鼠骨髓,然后分别用PCR和免疫组化分析检测受体鼠的多个器官组织中sry及Mx-cr... 目的:探讨骨髓细胞在受致死剂量照射的受体鼠体内的多向分化潜能.方法:将C57-TgN(Mx-cre)雄性小鼠的骨髓细胞经尾静脉植入受致死剂量照射的雌性受体鼠,重建受体鼠骨髓,然后分别用PCR和免疫组化分析检测受体鼠的多个器官组织中sry及Mx-cre基因的分布及表达情况.结果:PCR和免疫组化分析结果均显示,供体细胞的两个标志sry及Mx-cre在受体鼠的肝脏、肾脏、皮肤、脾脏等多个器官中都有表达.结论:骨髓细胞不仅可以重建受致死剂量照射受体鼠的造血系统,而且具有分化为肝脏、肾脏、皮肤、脾脏等组织细胞类型的多向潜能性. 展开更多
关键词 骨髓细胞 造血干细胞 细胞分化
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Oct3/4在体外诱导大鼠骨髓间质干细胞神经分化中的作用 被引量:2
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作者 王舒阳 韩瑞 +5 位作者 张广宇 王翠琴 彭越 鲁晶晶 彭涛 贾延劼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 385-392,共8页
目的:探讨Oct3/4在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元中的作用。方法:构建大鼠Oct3/4慢病毒载体(Oct3/4-LV)并感染大鼠MSCs;实验分为感染组(感染Oct3/4-LV)、阴性对照组(感染FU-PGC-NC-LV)和未感染组3组;采用β... 目的:探讨Oct3/4在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元中的作用。方法:构建大鼠Oct3/4慢病毒载体(Oct3/4-LV)并感染大鼠MSCs;实验分为感染组(感染Oct3/4-LV)、阴性对照组(感染FU-PGC-NC-LV)和未感染组3组;采用β-巯基乙醇诱导各组大鼠MSCs分化为神经元。倒置荧光显微镜下观察MSCs感染后形态学变化;MTT法检测细胞存活率;免疫细胞化学法检测神经元烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Oct3/4的表达变化;Western blotting法检测MAP-2和Oct3/4蛋白的表达变化;RT-PCR法检测MAP-2和Oct3/4 mRNA的表达变化。结果:(1)阳性克隆PCR证明大鼠Oct3/4慢病毒载体构建成功,孔稀释法测定病毒滴度为2×10~(11)TU/L。(2)倒置显微镜下观察大鼠Oct3/4慢病毒载体感染成功,感染复数(MOI)值为10,感染48 h时感染率最高,荧光表达最强;感染率可达83.4%±2.2%。感染组中,MSCs形态发生变化;MTT提示感染组细胞存活率显著降低(P〈0.05)。(3)β-巯基乙醇可以诱导大鼠MSCs向神经元分化,其中以感染组诱导效果最佳,具有比较典型的神经元形态,NSE和MAP-2的表达率与其它各组相比显著增高(P〈0.05)。(4)感染组与其它各组同时点的Oct3/4表达相比均显著增高(P〈0.01)。并且随着诱导时间的延长,各组Oct3/4表达持续减少,诱导后5 h与诱导前相比存在显著差异(P〈0.05)。结论:Oct3/4在大鼠MSCs分化为神经元的过程中可能起到了重要的调控作用。 展开更多
关键词 Oct3/4 骨髓间充质干细胞 神经元 慢病毒
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Integrin β_1在维生素C诱导小鼠诱导性多能干细胞向心肌样细胞分化中的作用 被引量:2
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作者 魏婷 曾迪 +3 位作者 欧东波 丁璐 李雪 郑强荪 《心脏杂志》 CAS 2013年第2期151-157,167共8页
目的:探讨整联蛋白β1(Integrinp,)在维生素C(Vc)诱导小鼠诱导性多能干细胞(inducedpluripotentstemcells,iPSCs)向心肌样细胞(cardiomyocytes,CMs)分化中的作用。方法:在立式显微镜下,分别摘取胚胎(12.5d、14.5d及16... 目的:探讨整联蛋白β1(Integrinp,)在维生素C(Vc)诱导小鼠诱导性多能干细胞(inducedpluripotentstemcells,iPSCs)向心肌样细胞(cardiomyocytes,CMs)分化中的作用。方法:在立式显微镜下,分别摘取胚胎(12.5d、14.5d及16.5d)BALB/c胎鼠、新生(出生1d,P1)和成年BALB/c小鼠的心脏,提取总RNA,半定量及实时定量PCR分析心脏发育不同时期IntegrinB,的表达。利用悬滴培养形成拟胚体(embryoidbody,EB)的方法体外诱导iPSCs向心肌样细胞分化,诱导过程中分别添加Vc和integrinβ1抑制剂(HMIβ1-1)处理,共分为3组:对照组、Vc处理组和Vc+HMIβ1-1处理组。诱导分化的第3、5、7天,半定量及实时定量PCR检测Oct4、integrinβ1和心肌特异性因子(α—MHC、MLC2a)。用免疫荧光染色法检测心肌特异性结构蛋白心肌肌钙蛋白I(cTnI)的表达。结果:Inte—grinB,在心脏胚胎发育时期(E12.5、E14.5、E16.5、P1)的表达递增(P〈0.01),成年期表达有所回落(P〈0.01)。半定量及实时定量PCR的结果提示,Vc组α—MHC、MLC2a的表达显著高于对照组(P〈0.01),加integrinB,抑制剂HMβ1-1后表达量降低(P〈0.01)。跳动EBs计数的结果提示,诱导分化第10、14、18、22、26天,Vc组跳动EBs的百分率显著高于对照组(P〈0.01);而Vc+HMIβ1-1组跳动EBs的百分率相对于Vc组显著降低(P〈0.01)。免疫荧光染色显示,Vc组有较强的cTnI表达,添加integrinis。抑制后,Vc+HMβ1-1组cTnI的表达明显减弱。结论:Vc可促进iPSCs向心肌细胞分化,其机制可能是通过integrin13,介导。 展开更多
关键词 诱导性多能干细胞 细胞分化 整联蛋白β1维生素C 小鼠
Notch信号通路在骨形态发生蛋白9诱导的多潜能干细胞成骨分化中的作用 被引量:7
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作者 刘强 翁亚光 +2 位作者 徐道晶 罗敏 唐敏 《第三军医大学学报》 CAS 北大核心 2010年第23期2492-2496,共5页
目的初步探讨Notch信号通路对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导多潜能干细胞成骨分化的作用和机制。方法腺病毒表达载体(AdBM P9/AdGFP、AdHey1/AdRFP)和BMP9/GFP条件培养基处理C2C12细胞,细胞化学染色和活... 目的初步探讨Notch信号通路对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导多潜能干细胞成骨分化的作用和机制。方法腺病毒表达载体(AdBM P9/AdGFP、AdHey1/AdRFP)和BMP9/GFP条件培养基处理C2C12细胞,细胞化学染色和活性定量检测早期成骨标志物碱性磷酸酶(ALP),定量RT-PCR检测Notch信号通路靶基因Hey1,以了解Hey1在AdBMP9介导的成骨分化作用中的表达和作用;采用细胞密度实验和Notch信号通路抑制剂(DAPT)检测Notch信号通路对成骨的影响;在AdBMP9/AdGFP处理下,检测细胞上Notch信号通路配体、受体表达变化。结果 AdBMP9作用下,1、3、5、7dALP活性持续增加(P〈0.05);Hey1一过性升高,其与AdBMP9呈剂量依赖性;Hey1可协助BMP9成骨(P〈0.05),不能单独起效。80%和40%细胞密度组ALP量和Hey1表达均高于20%组(P〈0.05);DAPT组中ALP活性明显降低(P〈0.05);在AdBMP9作用下,Notch信号通路配受体有不同程度的上调,其中受体Notch4和配体Jag-1上调最为明显(分别为11.3倍和5.1倍)。结论 Notch信号通路参与BMP9介导的多潜能干细胞成骨分化,其可能的机制是BMP9通过诱导Notch通路配体、受体表达上调使Hey1升高,后者协同成骨。 展开更多
关键词 NOTCH信号通路 骨形态发生蛋白9 多潜能干细胞 发状分裂相关增强子-1 DAPT
体外诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞的定向分化及其鉴定 被引量:7
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作者 郑朝晖 朱平 +3 位作者 王彦宏 樊春梅 丁进 尚鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS 北大核心 2005年第1期 79-82,共4页
目的: 体外诱导骨髓间充质干细胞(MSC)向软骨细胞定向分化, 并对分化后的细胞进行鉴定.方法: 由健康成人骨髓中分离出MSC, 取第3代细胞进行实验.鉴定后, 将微小细胞团在TGF-β1、地塞米松(Dex)及维生素C(Vit C)等诱导下分化.14 d后, 细... 目的: 体外诱导骨髓间充质干细胞(MSC)向软骨细胞定向分化, 并对分化后的细胞进行鉴定.方法: 由健康成人骨髓中分离出MSC, 取第3代细胞进行实验.鉴定后, 将微小细胞团在TGF-β1、地塞米松(Dex)及维生素C(Vit C)等诱导下分化.14 d后, 细胞团经石蜡包埋、切片及HE染色后, 进行甲苯胺蓝染色及II型胶原(Col II) 的免疫组化染色.采用Western blot和RT-PCR, 分别检测诱导前后MSC中Col II及前Col II mRNA的表达.结果: HE染色显示, 诱导后细胞呈软骨细胞样形态; 甲苯胺蓝及Col II染色的细胞外基质呈阳性.Western blot和RT-PCR的结果显示, 诱导分化后的MSC可表达Col II和前Col II的mRNA.结论: MSC在TGF-β1、 Dex及Vit C等诱导后, 可分化为软骨细胞. 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 细胞培养 软骨细胞 分化
蛋白激酶与蛋白磷酸酶在细胞增殖分化中的机制研究 预览 被引量:11
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作者 刘善荣 刘厚奇 +3 位作者 戚中田 赵兰娟 王凤玫 冯根生 《第二军医大学学报》 CAS 北大核心 2004年第5期 550-552,共3页
细胞生长发育和癌变过程中有众多复杂的信号转导途径以及信号分子参与,其中最基本的生化反应过程是系列蛋白质(信号分子)的磷酸化.
关键词 蛋白激酶 蛋白磷酸酶 细胞增殖 细胞分化
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犬骨髓间叶干细胞的多向分化潜力 预览
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作者 任晓庆 王方正 +4 位作者 浦介麟 张澍 张明伟 贾玉和 吴国玫 《中国分子心脏病学杂志》 2004年第5期 259-264,共6页
目的观察犬骨髓间叶干细胞的体外多向分化潜力,为损伤组织的干细胞移植修复提供理论基础.方法利用梯度-贴壁筛选法分离、培养与扩增骨髓间叶干细胞.利用化学诱导剂5-氮胞苷(20μmol/L),血管内皮细胞生长因子(VEGF 10ng/ml),成骨细胞诱导... 目的观察犬骨髓间叶干细胞的体外多向分化潜力,为损伤组织的干细胞移植修复提供理论基础.方法利用梯度-贴壁筛选法分离、培养与扩增骨髓间叶干细胞.利用化学诱导剂5-氮胞苷(20μmol/L),血管内皮细胞生长因子(VEGF 10ng/ml),成骨细胞诱导剂(地塞米松10nMol/L,抗坏血酸0.05mMol,β甘油磷酸钠10mMol/L)以及成脂肪细胞诱导剂(1-甲基3-异丁基黄嘌呤0.5mmol/L,地塞米松1μmol/L,胰岛素10mg/L,消炎痛100mmol/L),分别定向诱导骨髓间叶干细胞分化为心肌细胞、血管内皮细胞、成骨细胞与脂肪细胞.再应用细胞形态观察、免疫细胞化学染色及电镜对分化细胞进行鉴定.结果利用梯度-贴壁筛选法可以分离培养与扩增骨髓间叶干细胞.5-氮胞苷可诱导干细胞呈现肌管、肌丝、心房颗粒,且肌细胞特异性蛋白α-actinin,Myosin,α-Actin,Troponin Ⅰ免疫染色阳性;VEGF可诱导骨髓间叶干细胞出现管网状、血管样及鹅卵石样结构,vWF免疫染色阳性;成骨细胞诱导剂可诱导分化细胞碱性磷酸酶阳性;成脂肪细胞诱导剂使分化细胞内出现脂肪滴,油红O染色示脂滴为橙红色.结论成年犬骨髓间叶干细胞在体外具备多向分化潜力.在化学或生物诱导剂的作用下,犬骨髓间叶干细胞能够定向分化为心肌细胞、血管内皮细胞、成骨细胞、脂肪细胞等多种间叶组织类型细胞. 展开更多
关键词 间叶干细胞 骨髓 细胞培养 心肌细胞 内皮细胞 成骨细胞 脂肪细胞 分化
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体外培养条件下rhBMP—2和TGF—β对兔MSC分化和增殖的影响 预览 被引量:2
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作者 胡强 艾玉峰 +2 位作者 熊猛 张琳西 汤苏阳 《中国美容医学》 CAS 2001年第3期 185-188,共4页
目的:观察rhBMP-2,TGF-β等因子诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化及增殖的情况.方法:通过体外培养兔骨髓基质干细胞(Bone Marrow Stromal Cells,MSC)稳定传代后,采取分别单独加入rhBMP-2,TGF-β等诱导因子方法观察MSC的成长分化,采用MTT... 目的:观察rhBMP-2,TGF-β等因子诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化及增殖的情况.方法:通过体外培养兔骨髓基质干细胞(Bone Marrow Stromal Cells,MSC)稳定传代后,采取分别单独加入rhBMP-2,TGF-β等诱导因子方法观察MSC的成长分化,采用MTT方法以及碱性磷酸酶染色的方法观察上诉因子对细胞生长分化和增殖的影响.结果:当rhBMP-2的浓度在400~800ng/ml时对兔MSC的增殖和分化有明显的促进作用,其主要作用为促进分化,TGF-β对兔MSC的增值和分化也有明显的促进作用,其主要作用为促进MSC的增值.结论:rhBMP-2和TGF-β可以作为兔骨髓基质细胞较理想的诱导因子,促进MSC在体外的增殖和分化,为体外培养组织工程化骨提供较好的种子细胞. 展开更多
关键词 组织工程 骨髓基质干细胞 RHBMP-2 TGF-β MSC 组织工程骨
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武山鸡黑素细胞的形态发生 预览
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作者 张垒 程庭楷 《江西医学院学报》 CAS 1999年第4期 85-86,F003,共3页
武山鸡(泰和乌骨鸡)是我国特有的药用鸡种,其形态与其他鸡种迥然不同;其最突出的特征是一白(羽毛主要为绒羽,是纯白色)、五爪(足有5趾)、八黑(冠、眼、皮、喙、足、骨、肌、内脏均呈黑色)。八黑的原因是其体内各部均含有大量黑素细胞... 武山鸡(泰和乌骨鸡)是我国特有的药用鸡种,其形态与其他鸡种迥然不同;其最突出的特征是一白(羽毛主要为绒羽,是纯白色)、五爪(足有5趾)、八黑(冠、眼、皮、喙、足、骨、肌、内脏均呈黑色)。八黑的原因是其体内各部均含有大量黑素细胞。因此武山鸡是用来观察黑素细胞发生、... 展开更多
关键词 武山鸡 黑素细胞 形态学 细胞学
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miR-125b调节C3H10T1/2间充质干细胞中Cbfβ的表达 被引量:1
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作者 周维 谢肇 许建中 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期 1048-1051,共4页
目的研究miR-125b对鼠间充质干细胞株C3H10T1/2中核心结合因子-β(core-binding factor beta,Cbfβ)表达的调节作用。方法将microRNA阴性对照、miR-125b mimic和anti-miR-125b用脂质体转染小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2,Western blot及... 目的研究miR-125b对鼠间充质干细胞株C3H10T1/2中核心结合因子-β(core-binding factor beta,Cbfβ)表达的调节作用。方法将microRNA阴性对照、miR-125b mimic和anti-miR-125b用脂质体转染小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2,Western blot及RT-PCR测定细胞中Cbfβ蛋白及mRNA表达;以PicTar数据库预测的Cbfβ3'-非翻译区上miR-125b靶位点附近约30个碱基为基础合成3组插入序列(阳性对照、野生型序列、突变序列),连接到经HindⅢ、SpeⅠ双酶切后的PmiR-report载体质粒上,然后与miRNA阴性对照和miR-125b mimic共同转染293T细胞,双荧光素酶报告基因检测荧光素酶活性。结果过表达miR-125b抑制Cbfβ蛋白及mRNA表达(P〈0.05),转染anti-miR-125b可促进Cbfβ蛋白及mRNA表达(P〈0.05);miR-125b抑制Cbfβ3'-非翻译区荧光素活性。结论外源性miR-125b可作用于Cbfβ3'非翻译区从而负性调节C3H10T1/2细胞中Cbfβ的表达。 展开更多
关键词 MiR-125b 间质干细胞 细胞 培养的 核心结合因子β
骨髓间充质干细胞对肥大心肌细胞脂肪酸代谢影响的体外研究 预览
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作者 卓文玉 陈沅 +2 位作者 田杰 朱静 向平 《重庆医科大学学报》 CAS 2008年第2期 129-132,165,共5页
目的:探讨骨髓间充质干细胞对肥大心肌细胞脂肪酸代谢的影响及其机制。方法:体外培养的Wistar新生大鼠心肌细胞随机分为3组:正常对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用组、骨髓间充质干细胞干预组,采用免疫荧光显微镜测定心肌细胞核因子... 目的:探讨骨髓间充质干细胞对肥大心肌细胞脂肪酸代谢的影响及其机制。方法:体外培养的Wistar新生大鼠心肌细胞随机分为3组:正常对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用组、骨髓间充质干细胞干预组,采用免疫荧光显微镜测定心肌细胞核因子NF-κB和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)PPARγ、PPARα的活性,紫外分光光度法检测心肌细胞内游离脂肪酸(FFA)含量。结果:AngⅡ刺激乳鼠心肌细胞NF-κB活性增强,抑制PPARα和PPARγ活性减弱,增加心肌细胞内FFA蓄积(P〈0.01);MSCs干预组心肌细胞NF-κB活性及心肌细胞内FFA含量较AngⅡ作用组显著降低(P〈0.01和P〈0.01)而PPARα和PPARγ活性增强(P〈0.05和P〈0.01)。结论:骨髓间充质干细胞可改善肥大心肌细胞的脂肪酸代谢,这可能是骨髓间充质干细胞移植改善心功能作用机制之一,NF-κB及PPARs可能是其作用的信号通路之一。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 心肌细胞 NF-κB 游离脂肪酸
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维生素C对CD4+效应记忆性T细胞体外扩增的影响 被引量:1
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作者 张译文 罗海华 +2 位作者 张旭 张辉 刘超 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1471-1475,共5页
目的:探讨小分子药物维生素c(VC)对CD4+效应记忆性T细胞(TEM)体外扩增的影响从而改善过继免疫治疗的效果。方法:体外分离正常人的外周血CD4+T淋巴细胞,将细胞分为2组(实验组和对照组)进行细胞培养。实验组加入VC后,通过细... 目的:探讨小分子药物维生素c(VC)对CD4+效应记忆性T细胞(TEM)体外扩增的影响从而改善过继免疫治疗的效果。方法:体外分离正常人的外周血CD4+T淋巴细胞,将细胞分为2组(实验组和对照组)进行细胞培养。实验组加入VC后,通过细胞计数仪和流式细胞仪对2组细胞中TEM的扩增情况进行检测。结果:(1)在CD4+T细胞体外扩增实验中,VC对CD4+T细胞的总数无显著影响。(2)VC使TEM在CD4+T细胞中的比例显著升高,100mg/L为扩增的最佳浓度。(3)在CD4+T细胞扩增的第10天检测其中TEM的细胞数量,对照组TEM的数量为(1.22±0.15)×10^6,实验组TEM的数量为(3.56±0.35)×10^6,两者的差异有统计学意义(P〈0.01)。结论:VC可有效地促进CD4+TEM的体外扩增,为过继免疫治疗提供简单、安全及有效的体外扩增方法。 展开更多
关键词 维生素C 效应记忆性T细胞 过继免疫治疗
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人脐血基质细胞自发分泌多种造血生长因子的实验研究 预览 被引量:8
14
作者 刘耀 陈幸华 +1 位作者 张曦 彭贤贵 《第三军医大学学报》 CAS 北大核心 2005年第7期 643-645,共3页
目的探讨体外培养的人脐血基质细胞分泌血小板生成素(thrombopoietin,TPO)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、干细胞生长因子(stem cell factor,SCF)的能力.方法留取不同培养时相... 目的探讨体外培养的人脐血基质细胞分泌血小板生成素(thrombopoietin,TPO)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、干细胞生长因子(stem cell factor,SCF)的能力.方法留取不同培养时相点的培养液上清,ELISA法检测上清中TPO、GM-CSF、SCF的浓度,并与骨髓基质细胞的培养上清液对照比较其特点.结果人脐血基质细胞和骨髓基质细胞均可分泌TPO、GM-CSF和SCF等造血生长因子,二者造血生长因子的分泌随着培养时间的延长而逐渐下降,其中人脐血基质细胞分泌TPO和SCF的高峰期出现在第7天,而GM-CSF的分泌则无高峰期的出现;通过与骨髓基质细胞分泌三种造血生长因子量进行对比发现,人脐血基质细胞SCF和GM-CSF的分泌量低于骨髓基质细胞,而TPO的分泌高于同期培养的骨髓基质细胞.结论人脐血基质细胞与骨髓基质细胞一样具有分泌造血生长因子,支持调控造血的作用. 展开更多
关键词 人脐血基质细胞 造血生长因子 骨髓基质细胞
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骨髓基质细胞条件培养液调节神经干细胞分化有效成分的蛋白质微阵列分析 被引量:7
15
作者 顾平 马芹颖 +5 位作者 王彦永 温雅 王铭维 崔冬生 刘力 耿媛 《解剖学报》 CAS 北大核心 2008年第6期 845-849,共5页
目的检测骨髓基质细胞条件培养液(N—CM)中诱导神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的细胞因子,探讨骨髓基质细胞(BMSCs)调节NSCs分化的机制。方法将收集到的N—CM混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,用这两部分培养液... 目的检测骨髓基质细胞条件培养液(N—CM)中诱导神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的细胞因子,探讨骨髓基质细胞(BMSCs)调节NSCs分化的机制。方法将收集到的N—CM混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,用这两部分培养液分别培养NSCs,确定其中能促进NSCs分化为高比例神经元的部分并进行大鼠蛋白质微阵列检测。结果N—CM分子量大于5kD的部分可以促进NSCs分化为高比例神经元,并通过蛋白质微阵列检测,与单纯骨髓基质培养液相比,有7种细胞因子的表达量上调了1.5倍,分别是CINC-3、CNTF、IFN-γ、IL-1α、MCP-1、TIMP-1和VEGF。结论BMSCs分泌的可溶性分子对NSCs分化为神经元有促进作用,其中某些分子量大于5KD的细胞因子可能在这一调节作用中发挥效应。 展开更多
关键词 神经干细胞 骨髓基质细胞 条件培养液 蛋白质微阵列 细胞因子 超滤浓缩 免疫组织化学
昆明白小鼠间同种生精干细胞移植 预览 被引量:3
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作者 张茨 王玲珑 +1 位作者 宋超 金化民 《中华男科学杂志》 CAS 2003年第6期 417-420,共4页
目的:研究同种生精干细胞移植的可行性.方法:在不采用免疫抑制剂的条件下,进行基因型相似的封闭群昆明白小鼠间的同种生精干细胞移植,观察其生精恢复情况.每次穿刺右侧睾丸网,左侧睾丸作自身对照.结果:成功移植的小鼠睾丸生精功能基本... 目的:研究同种生精干细胞移植的可行性.方法:在不采用免疫抑制剂的条件下,进行基因型相似的封闭群昆明白小鼠间的同种生精干细胞移植,观察其生精恢复情况.每次穿刺右侧睾丸网,左侧睾丸作自身对照.结果:成功移植的小鼠睾丸生精功能基本恢复正常.结论:在基因型类似的昆明白小鼠进行同种生精干细胞移植是可行的. 展开更多
关键词 生精干细胞 同种移植 昆明白小鼠
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胚胎中脑神经干细胞移植治疗大鼠帕金森病模型 预览 被引量:5
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作者 张海龙 李智高 +4 位作者 李玉 王波 段奎甲 王明国 邓兴力 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第1期49-51,共3页
目的研究胚胎中脑神经干细胞(mNSCs)移植对帕金森病(PD)模型大鼠的治疗作用。方法分离培养大鼠胚胎mNSCs并进行EGFP基因修饰。前脑内侧束和纹状体立体定向注射6-羟多巴胺建立PD大鼠模型。将EGFP基因修饰mNSCs定向移植到PD大鼠纹状... 目的研究胚胎中脑神经干细胞(mNSCs)移植对帕金森病(PD)模型大鼠的治疗作用。方法分离培养大鼠胚胎mNSCs并进行EGFP基因修饰。前脑内侧束和纹状体立体定向注射6-羟多巴胺建立PD大鼠模型。将EGFP基因修饰mNSCs定向移植到PD大鼠纹状体区。免疫荧光组织化学鉴定移植细胞的存活、迁移和分化。行为学实验观察治疗效果。结果EGFP基因修饰胚胎mNSCs移植能分化为多巴胺神经元和小胶质细胞。移植后行为学实验发现可改善运动功能。结论移植EGFP基因修饰胚胎mNSCs可改善PD大鼠的运动障碍。 展开更多
关键词 增强型绿色荧光蛋白 中脑神经干细胞 帕金森病 移植
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Oct4调节胚胎干细胞全能性扩增的研究进展 预览 被引量:1
18
作者 刘善荣 刘厚奇 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS 北大核心 2003年第9期 963-965,共3页
Oct4是一种POU转录因子,属于Ⅴ类POU蛋白,在小鼠全能胚胎干细胞和生殖系干细胞表达.在早期鼠胚中,只有在ICM变成滋养层阶段,Oct4为维持其全能表型而发挥作用.Oct4表达可能是由位置效应引起的,还与特异调节Oct4活性的元件,如近端、远端... Oct4是一种POU转录因子,属于Ⅴ类POU蛋白,在小鼠全能胚胎干细胞和生殖系干细胞表达.在早期鼠胚中,只有在ICM变成滋养层阶段,Oct4为维持其全能表型而发挥作用.Oct4表达可能是由位置效应引起的,还与特异调节Oct4活性的元件,如近端、远端增强子元件有关.Oct4对转录的调节分为抑制转录和转录激活两种.Oct4的激活有3种模式:远端依赖性共激活,构象依赖性共激活,Oct4聚合体依赖性共激活. 展开更多
关键词 OCT4 胚胎干细胞 全能性扩增 研究进展
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体外诱导成人骨髓间充质干细胞转化为神经元细胞的实验研究 预览 被引量:1
19
作者 常颖 卜丽莎 齐欣 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2005年第3期 261-263,共3页
目的探讨成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)在体外特定的诱导条件下,转化为神经元细胞的规律、效率及长期存活的条件.方法采用β-巯基乙醇为诱导剂,在体外诱导6 h后,改用诱导维持液使诱导后的细胞在诱导维持液中存活6 d.用细胞化学及免疫组... 目的探讨成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)在体外特定的诱导条件下,转化为神经元细胞的规律、效率及长期存活的条件.方法采用β-巯基乙醇为诱导剂,在体外诱导6 h后,改用诱导维持液使诱导后的细胞在诱导维持液中存活6 d.用细胞化学及免疫组织化学、Western blot方法检测神经元细胞、星形胶质细胞标记蛋白的表达.结果诱导6 h,诱导后的细胞尼氏染色胞浆中可见深蓝色的尼氏体形成;细胞表达NSE、NF-M,而不表达GFAP;NSE、NF-M阳性细胞数超过80%以上.Western blot结果显示:诱导6 h,诱导后的细胞表达Nestin,而无MAP-2的表达,随着时间的延长,Nestin的表达逐渐减少,而出现了MAP-2的表达.结论β-巯基乙醇在体外可定向诱导hMSCs经神经干细胞转化为神经元细胞,而且诱导后的神经元细胞逐渐趋于成熟. 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 神经元细胞分化 细胞移植
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表皮干细胞体外诱导转分化为角膜上皮细胞的实验研究 预览 被引量:3
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作者 杨珂 余瑾 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS 北大核心 2006年第7期 671-673,共3页
目的探讨表皮干细胞向角膜上皮细胞转分化的可塑性.方法用Ⅳ型胶原筛选的方法培养并鉴定表皮干细胞,经体外与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,免疫组化检测角膜上皮细胞特异标志物K12表达.结果获得的表皮干细胞表现出很强的增殖潜能,光镜... 目的探讨表皮干细胞向角膜上皮细胞转分化的可塑性.方法用Ⅳ型胶原筛选的方法培养并鉴定表皮干细胞,经体外与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,免疫组化检测角膜上皮细胞特异标志物K12表达.结果获得的表皮干细胞表现出很强的增殖潜能,光镜下为原始细胞形态特征,能强表达K19和β1-integrin,共培养2周后可见细胞分化,细胞表达角膜上皮特征性K12.结论在本实验的体外诱导条件下,表皮干细胞能转分化为角膜上皮细胞. 展开更多
关键词 表皮干细胞 角膜上皮 转分化
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