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大鼠骨髓基质干细胞分离、纯化与诱导分化的研究进展 预览 被引量:2
1
作者 张维颉 顾润国 《医学综述》 2012年第22期3743-3746,共4页
骨髓基质干细胞(BMSCs)是一类具有自我增殖和分化潜能的多能干细胞,在骨髓中含量极少。目前对其生物学特性研究比较成熟,在培养过程中展示出贴壁性、异质性、自我更新能力、可塑性、易受细胞因子影响及低免疫原性等生物学特征。BMSCs... 骨髓基质干细胞(BMSCs)是一类具有自我增殖和分化潜能的多能干细胞,在骨髓中含量极少。目前对其生物学特性研究比较成熟,在培养过程中展示出贴壁性、异质性、自我更新能力、可塑性、易受细胞因子影响及低免疫原性等生物学特征。BMSCs独特的生物学特性及目前的研究现状都预示着其具有广泛的应用前景。现就大鼠BMSCs的生物学特性、分离与纯化、诱导分化的方法等方面予以综述。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 诱导分化 鉴定
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CUL4A作用机制研究进展
2
作者 周辉 谭灿 +2 位作者 陈虹 张李洋 肖玲 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第19期3781-3784,3800共5页
Cullin4A(CUL4A)是泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)中泛素E3连接酶家族的重要成员之一。UPS是细胞内蛋白降解的重要途径,越来越多的证据表明CUL4A可以通过CUL4A-DDB1-E3途径调节细胞中的一些功能蛋白质,产生相... Cullin4A(CUL4A)是泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)中泛素E3连接酶家族的重要成员之一。UPS是细胞内蛋白降解的重要途径,越来越多的证据表明CUL4A可以通过CUL4A-DDB1-E3途径调节细胞中的一些功能蛋白质,产生相应的作用。本文就CUL4A在基因组的稳定、细胞周期的调控、恶性肿瘤的发生发展、胚胎发育、造血干细胞及脑缺血性损伤等方面的作用进行综述。 展开更多
关键词 泛素E3连接酶 CUL4A 缺血性脑损伤
甲状腺激素受体相关蛋白15的研究进展 预览
3
作者 王海波 孟照辉 《医学综述》 2013年第14期2497-2501,共5页
甲状腺激素受体相关蛋白15(TRIP15)是一个核受体家族的选择性转录共抑制子,参与构成COP9信号复合体,调节机体蛋白质的降解。TRIP15与涉及转录调节、细胞周期调控、DNA损伤修复的多种生物大分子相互作用,参与细胞增殖、分化、凋亡等重... 甲状腺激素受体相关蛋白15(TRIP15)是一个核受体家族的选择性转录共抑制子,参与构成COP9信号复合体,调节机体蛋白质的降解。TRIP15与涉及转录调节、细胞周期调控、DNA损伤修复的多种生物大分子相互作用,参与细胞增殖、分化、凋亡等重要生理过程,其表达调控的信号通路与肿瘤、脂质代谢紊乱及内分泌疾病的发生与发展密切相关。TRIP15具有复杂的蛋白质相互作用网络及多样的生物学功能,可能会成为疾病治疗的新靶点。 展开更多
关键词 甲状腺激素受体相关蛋白15 转录共抑制子 核受体 COP9信号复合体 肿瘤
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膜联蛋白A7低表达对人肝癌HepG2细胞增殖的影响 被引量:10
4
作者 王小杰 李欣 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期656-660,共5页
目的 探讨膜联蛋白A7低表达对人肝癌HepG2细胞的增殖产生的影响。方法 采用Western blotting法鉴定siRNA可有效抑制膜联蛋白A7表达,然后用脂质体转染法将siRNA转染入HepG2细胞,将细胞分为siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,在转染... 目的 探讨膜联蛋白A7低表达对人肝癌HepG2细胞的增殖产生的影响。方法 采用Western blotting法鉴定siRNA可有效抑制膜联蛋白A7表达,然后用脂质体转染法将siRNA转染入HepG2细胞,将细胞分为siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,在转染后24h、48h、72h进行细胞计数以绘制细胞增殖曲线,转染后48h进行MTT实验以检测细胞增殖活力;免疫组织化学法检测cyclinD1和Ki67的表达,Western blotting法检测cyclinD1的表达情况。结果 转染了靶向膜联蛋白A7的siRNA后48h的HepG2细胞,细胞计数和MTT实验可见siRNA干扰组细胞增殖活力较阴性对照组和空白对照组显著降低(P〈0.05);cyclinD1和Ki67蛋白表达均为siRNA干扰组细胞表达显著低于两对照组(P〈0.05)。 结论 膜联蛋白A7低表达可能对HepG2细胞的增殖具有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 膜联蛋白A7 HEPG2细胞 CYCLIND1 KI67 免疫组织化学 免疫印迹法
糖化血红蛋白和BNP检测在糖尿病合并慢性心衰患者中的临床意义分析 预览 被引量:8
5
作者 董虹 刘天春 周莉 《长江大学学报自然科学版:医学(下旬)》 CAS 2014年第8期95-97,共3页
目的:探讨糖尿病合并慢性心衰病人的糖化血红蛋白(GHbAlc)和BNP(BNP)检测的临床意义。方法:医院收治的138例病人,实验组为糖尿病合并慢性患者63例,对照组为糖尿病未并发心衰的患者75例。通过注射甘精胰岛素和口服瑞格列奈,对... 目的:探讨糖尿病合并慢性心衰病人的糖化血红蛋白(GHbAlc)和BNP(BNP)检测的临床意义。方法:医院收治的138例病人,实验组为糖尿病合并慢性患者63例,对照组为糖尿病未并发心衰的患者75例。通过注射甘精胰岛素和口服瑞格列奈,对患者进行14d的治疗,在第O、7、14天时分别检测其空腹血糖(FBG)、OHbAlc、BNP,并对GHbAlC、BNP的相关性进行分析。结果:通过14d治疗,两组患者的FBG和GHbAlC水平显著降低(P〈0.05),实验组BNP水平显著降低(P〈0.05),但对照组并未有显著影响。在第0、7、14天时,实验组GHbAlc、BNP相关性分别为(r=0.34,P〈0.05;r=0.11,P〈0.05;r=0.5,P〈0.05),.相关性由强变弱,逐渐降低。而对照组在第0、7、14天时,GHbAlc、BNP相关性分比为(r=0.34,P〈O.05;r=0.28,P〈0.05;r=0.36,P〈0.05),均呈现弱相关。结论:糖尿病合并慢性心衰的患者中,随着GHbAlc水平的增加,BNP水平会相应增加。通过控制GHbAlc的水平,可相应降低BNP水平,从而降低慢性心衰患者住院的几率。 展开更多
关键词 糖化血红蛋白 BNP 糖尿病 慢性心衰 临床意义 相关性
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人骨保护素在 CHO 细胞内初步稳定表达 预览
6
作者 孟凡星 李瑞香 臧晓怡 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期611-613,665共4页
目的:构建人OPG的稳定表达载体,并在DHFR-型CHO细胞内稳定表达。方法用RT-PCR的方法获得人全长OPG的编码基因,并将其克隆入载体pcDNA3.1-DHFR/CT-GFP,鉴定无误后,转染DHFR-型CHO细胞,经MTX筛选获得阳性表达OPG的细胞株。结果成功... 目的:构建人OPG的稳定表达载体,并在DHFR-型CHO细胞内稳定表达。方法用RT-PCR的方法获得人全长OPG的编码基因,并将其克隆入载体pcDNA3.1-DHFR/CT-GFP,鉴定无误后,转染DHFR-型CHO细胞,经MTX筛选获得阳性表达OPG的细胞株。结果成功构建人OPG的稳定表达载体,并获得阳性表达OPG的细胞株。结论全长人OPG基因可以在CHO细胞内成功稳定表达,这为OPG的功能研究及临床应用奠定物质基础。 展开更多
关键词 骨保护素 二氢叶酸还原酶 中国仓鼠卵巢细胞
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IBP与p53蛋白在胃腺癌中的表达及临床意义
7
作者 亢夏 宋汉香 郭乔楠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期219-226,共8页
目的探讨干扰素调节因子4结合蛋白(IRF-4 binding protein,IBP)在胃腺癌细胞及临床病理组织中的表达、与p53蛋白表达的相关性及临床意义。方法通过免疫荧光、Real-time PCR和Western blot检测胃腺癌细胞株MKN-45、SGC-7901中IBP的表达情... 目的探讨干扰素调节因子4结合蛋白(IRF-4 binding protein,IBP)在胃腺癌细胞及临床病理组织中的表达、与p53蛋白表达的相关性及临床意义。方法通过免疫荧光、Real-time PCR和Western blot检测胃腺癌细胞株MKN-45、SGC-7901中IBP的表达情况;收集2015-2016年在本科确诊的胃腺癌HE切片对应存档蜡块150例,采用免疫组化EnVision法检测并标记IBP在150例胃腺癌标本中的表达,并检测突变型p53蛋白的表达,分析IBP在胃腺癌组织中的表达及其与胃腺癌各临床病理资料因子相应的关系,采用Spearman等级相关分析IBP与p53蛋白表达的相关性。结果免疫荧光检测显示IBP主要表达在胃腺癌细胞株MKN-45的胞质和胞膜中,主要以胞膜表达为主。Western blot及Real-time PCR均证实胃腺癌细胞株MKN-45、SGC-7901中均有IBP的表达,且在MKN-45细胞中的表达高于SGC-7901细胞(P <0. 05)。在胃腺癌组织中,IBP的阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织(P <0. 01);p53蛋白的阳性表达率也显著高于正常胃黏膜组织(P <0. 01);IBP阳性表达与病理分级呈正相关(P <0. 05),与患者年龄、性别、胃壁浸润深度、TNM分期、Lauren分型及肿瘤部位无相关性(P> 0. 05);p53蛋白的阳性表达与患者的年龄、性别、病理分级、Lauren分型具有相关性(P <0. 05),与患者胃壁浸润深度、TNM分期及肿瘤部位无相关性(P> 0. 05);在胃腺癌中IBP与p53蛋白表达没有显著的相关关系(r=0. 013,P> 0. 05)。结论 IBP在胃腺癌细胞株及临床病理组织中高表达,主要表达于胞膜、胞质;p53蛋白在胃腺癌临床病理组织中高表达,主要表达于胞核;IBP在胃腺癌组织中高表达与患者病理分级正相关,在胃腺癌组织中IBP与p53蛋白没有明显的相关关系。 展开更多
关键词 胃腺癌 干扰素调节因子4结合蛋白 P53蛋白
分流培养模式下中医药院校生物化学教学改革的探索 预览 被引量:1
8
作者 程莉娟 宋岚 +1 位作者 周芳亮 陶怀 《基础医学教育》 2014年第11期906-908,共3页
生物化学是医学院校的一门重要基础课程,为使生物化学教学更适合分流培养模式的要求,进行了一系列生物化学教学的改革和探索,主要集中在教学计划的制定,提出针对分流培养模式下改进教学方法的基本措施,采取多样化考核方式等方面,... 生物化学是医学院校的一门重要基础课程,为使生物化学教学更适合分流培养模式的要求,进行了一系列生物化学教学的改革和探索,主要集中在教学计划的制定,提出针对分流培养模式下改进教学方法的基本措施,采取多样化考核方式等方面,以培养中医药类专业高素质人才。 展开更多
关键词 生物化学 分流培养模式 教学改革
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牙本质基质蛋白1在模拟失重骨丧失中的作用 被引量:1
9
作者 张蓉 韩向龙 +3 位作者 张春宝 史真 陈庚 郭慧慧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期2385-2388,共4页
目的检测模拟失重状态时牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)和成骨抑制蛋白(sclerostin,SOST)在小鼠胫骨的表达,以及正常和DMP1基因缺失下SOST的表达,初步探讨DMP1在模拟失重下骨质丧失形成过程中的可能作用及机制。方... 目的检测模拟失重状态时牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)和成骨抑制蛋白(sclerostin,SOST)在小鼠胫骨的表达,以及正常和DMP1基因缺失下SOST的表达,初步探讨DMP1在模拟失重下骨质丧失形成过程中的可能作用及机制。方法 1 1个月龄B6野生型小鼠随机分为悬尾组、对照组(n=5)。悬尾组悬吊1个月后与对照组胫骨石蜡切片进行HE及DMP1和SOST免疫组化染色,实时定量PCR检测Dmp1基因水平的表达。22个月龄B6Dmp1基因敲除鼠制备胫骨石蜡切片,进行SOST免疫组化染色。结果 HE染色显示悬尾组松质骨小梁较对照组稀疏,皮质骨变薄。免疫组化实验显示悬尾鼠DMP1和SOST在骨细胞细胞质和基质中的表达较对照组增高。高倍镜下DMP1和SOST阳性细胞数悬尾组显著高于对照组(P〈0.05,P〈0.01)。Dmp1实时定量PCR结果与免疫组化结果一致,悬尾组表达量为对照组的(2.8±0.4)倍,显著高于对照组(P〈0.01)。SOST在Dmp1基因敲除鼠骨细胞中的表达也较正常增强。结论 DMP1在模拟失重小鼠胫骨中表达增强,提示无力学刺激这一特殊的机械信号可传递至骨细胞,导致其分泌DMP1的改变。SOST在骨形成中具有抑制作用,它在Dmp1基因敲除鼠及悬尾鼠胫骨中表达的增强提示SOST表达上调,导致骨形成减少可能是Dmp1基因敲除鼠和悬尾鼠骨质丧失的一个共同的重要因素。 展开更多
关键词 牙本质基质蛋白1 成骨抑制蛋白 尾部悬吊 实时定量PCR
2型糖尿病大鼠超声心动图的变化 预览
10
作者 彭铭 林乐迎 +1 位作者 符信清 詹春华 《国际医药卫生导报》 2015年第13期1799-1801,1808共4页
目的探讨2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠超声心动图的变化及胰岛素对其的影响。方法高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素腹腔注射(STZ,30mg/kg)制备T2DM大鼠模型,随机临床对照试验(randomized controlled trialsRC... 目的探讨2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠超声心动图的变化及胰岛素对其的影响。方法高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素腹腔注射(STZ,30mg/kg)制备T2DM大鼠模型,随机临床对照试验(randomized controlled trialsRCT)分为正常对照组、糖尿病(Diabetes mellitus,DM)组和胰岛素治疗组(每只3U/d股内侧皮下注射),对照组和DM组注射等剂量的生理盐水(股内侧皮下注射),每天1次,持续喂养2个月。结果与对照组组比较,糖尿病模型组大鼠LVEDV、LVESV和SV均明显降低;其他有所增加(P〈0.05),胰岛素能显著降低LVFS、EF,对其他超声心动图指标无明显影响。结论胰岛素能降低2型糖尿病大鼠的血糖,改善心功能,可不同程度下调SAN间质胶原的沉积。 展开更多
关键词 糖尿病 大鼠 超声心动图
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大鼠骨髓间充质干细胞的分离鉴定及免疫调节性能初探 预览 被引量:1
11
作者 张志强 刘义 +1 位作者 李克秋 李光 《天津医药》 CAS 2015年第6期611-615,共5页
目的:分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),鉴定其向脂肪细胞和软骨细胞的分化潜能,并探讨其免疫调节性能。方法无菌条件下摘取Sprague-Dawley(SD)大鼠股骨和胫骨,全骨髓贴壁法培养BMSCs,胰酶消化传代培养。待培养至第3代时... 目的:分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),鉴定其向脂肪细胞和软骨细胞的分化潜能,并探讨其免疫调节性能。方法无菌条件下摘取Sprague-Dawley(SD)大鼠股骨和胫骨,全骨髓贴壁法培养BMSCs,胰酶消化传代培养。待培养至第3代时进行流式鉴定,检测分离的BMSCs分化为脂肪细胞的潜能。与Wistar大鼠脾脏来源T细胞进行共培养,分为直接接触组和Transwell共培养组,探讨其对T细胞亚群的影响,并研究其相关机制。结果BMSCs呈梭形生长,生长至第3代的细胞经检测发现几乎不表达CD34和CD45,高表达CD29、CD44和CD90,且经诱导后细胞可分化为脂肪细胞和软骨细胞。与脾脏来源T细胞共培养可有效降低CD8+的效应T细胞(Teffs)的比例,并且增加CD4+CD25+双阳性的调节性T细胞(Tregs)数量,具有一定的免疫调节性能。与T细胞共培养后BMSCs的IL-10和TGF-β1基因表达显著增强,其中与T细胞直接接触组效果更为明显。结论 BMSCs可能通过直接接触以及分泌细胞因子来发挥免疫调节功能。 展开更多
关键词 骨髓 间质干细胞 细胞分化 神经免疫调节 大鼠 Sprague-Dawley 大鼠 Wistar
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细胞因子参与胃癌发生和发展研究进展 预览 被引量:1
12
作者 李康 旦增 《医学综述》 2015年第20期3697-3700,共4页
细胞因子是一类能在细胞间传递信息、发挥免疫调节的蛋白质或小分子多肽;其表达异常诱发多种疾病,包括胃癌。细胞因子参与调控细胞的癌变、侵袭与转移、血管生成,并通过调控肿瘤相关抗原的抗原递呈、淋巴细胞的活化参与胃癌的免疫逃... 细胞因子是一类能在细胞间传递信息、发挥免疫调节的蛋白质或小分子多肽;其表达异常诱发多种疾病,包括胃癌。细胞因子参与调控细胞的癌变、侵袭与转移、血管生成,并通过调控肿瘤相关抗原的抗原递呈、淋巴细胞的活化参与胃癌的免疫逃逸,且在胃癌细胞抵抗放化疗治疗中发挥重要作用。因此,调节机体细胞因子的水平,促使机体形成对胃癌的抗肿瘤也就成为胃癌治疗的新方向。 展开更多
关键词 胃癌 细胞因子 免疫逃逸
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13
《中国医药导报》 2002年第10期12-13,共2页
0235980 人腮腺中高水平的β半乳糖苷酶和神经节苷酶GM1/Nowroozi N//ArchOtolary ngol Head Neck Srug.-2001,127(11).-1381~1384 医科图
关键词 医科 神经节 牛磺酸 腮腺 半乳糖苷酶 高水平 表达 超氧化物歧化酶 逆转作用 过氧化物歧化酶
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神经营养素-4及其受体的研究进展 预览
14
作者 王京 黄秉仁 田竞生 《医学研究杂志》 1999年第7期22-25,共4页
神经营养素-4(NT-4)作为神经营养素家族的新成员,与其他家族成员-神经生长因子(NGF),脑源性神经生长因子(BDNF),神经营养素-3(NT-3),神经营养素-5(NT-5),神经营养素-6(NT-6)一起对神经元的生存及发育起重要作用。近来的研... 神经营养素-4(NT-4)作为神经营养素家族的新成员,与其他家族成员-神经生长因子(NGF),脑源性神经生长因子(BDNF),神经营养素-3(NT-3),神经营养素-5(NT-5),神经营养素-6(NT-6)一起对神经元的生存及发育起重要作用。近来的研究结果显示,它在基因结构,氨基酸序列,生理功能等方面与其他家族成员相比有进化的保守性,又有自己进化的特殊性。它在哺乳动物体内有广泛表达,通过低亲和力NGF受体(P75<sup>LNCFR</sup>),高亲和力trkA受体,高亲和力trkB受体发挥作用。NT-4在神经退行性疾病中的临床应用价值也在研究中。 展开更多
关键词 神经营养素-4 神经营养素家族 受体 神经退行性疾病
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HIV-2 Gag蛋白的表达研究
15
作者 王秀清 金宁一 +7 位作者 田梅 郭志儒 王宏伟 方厚华 顾万均 马奉龙 司兴奎 殷震 《生物技术通讯》 CAS 1997年第Z1期113-114,共2页
HIV-2是引起艾滋病的主要病原之一,与HIV-1相比,其致病性弱,感染的潜伏期长,有的甚至不发展成艾滋病。但HIV-2的易感宿主较HIV-1广,除人和猩猩之外,HIV-2还能感染猴等灵长类动物,这将为艾滋病疫苗和实验动物模型的研究提供有利条件。... HIV-2是引起艾滋病的主要病原之一,与HIV-1相比,其致病性弱,感染的潜伏期长,有的甚至不发展成艾滋病。但HIV-2的易感宿主较HIV-1广,除人和猩猩之外,HIV-2还能感染猴等灵长类动物,这将为艾滋病疫苗和实验动物模型的研究提供有利条件。 我们应用原核高效表达载体pBV220在大肠杆菌中分别表达了HIV-2gag全部和部分蛋白(去掉与pol重叠序列)。在此基础上我们又将gag全部和部分序列置于痘苗病毒P7.5和 展开更多
关键词 GAG蛋白 HIV-2 重组痘苗病毒 启动子 艾滋病疫苗 实验动物模型 高效表达载体 表达量 HIV-1 大肠杆菌中表达
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核因子κB与Th细胞分化 预览 被引量:1
16
作者 李云秋(综述) 冯永(审校) 《医学临床研究》 CAS 2006年第2期 277-279,共3页
核因子κB是一种广泛存在于体内多种细胞的转录因子,由一个复杂的体系组成,目前已发现它调节着100多种靶基因的表达.能与调控免疫应答、炎症反应、细胞分化和生长、细胞粘附和细胞凋亡所必需的许多细胞因子,粘附因子等基因启动子或增强... 核因子κB是一种广泛存在于体内多种细胞的转录因子,由一个复杂的体系组成,目前已发现它调节着100多种靶基因的表达.能与调控免疫应答、炎症反应、细胞分化和生长、细胞粘附和细胞凋亡所必需的许多细胞因子,粘附因子等基因启动子或增强子部位的κB位点发生特异性结合,启动和调节这些基因的转录,在机体的免疫应答、炎症反应和细胞的生长生育等方面发挥重要作用.本文复习相关文献,对NF-κB及其对Th细胞分化的调节作一综述 展开更多
关键词 NK-κB T淋巴细胞 辅助误导 综述文献
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胰岛素样生长因子的分泌及功能对人体的影响 被引量:6
17
作者 王绮 张晓娜 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2006年第12期 900-903,共4页
分娩是宫内外生活的转折点,新生儿期是由宫内激素调节转向生后激素调节的过渡期。在这个阶段,胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin—like growthf actor。IGF-Ⅰ)等内分泌激素的分泌异常可持续到儿童期及成年期,导致胎儿期的宫内发育迟缓... 分娩是宫内外生活的转折点,新生儿期是由宫内激素调节转向生后激素调节的过渡期。在这个阶段,胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin—like growthf actor。IGF-Ⅰ)等内分泌激素的分泌异常可持续到儿童期及成年期,导致胎儿期的宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)、儿童期的儿童单纯性肥胖症、成年期的胰岛素抵抗综合征(IRS)等。笔者就近年来的发展研究做一综述。 展开更多
关键词 生长调节素类 胰岛素抗体 胎儿生长迟缓
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提高基因工程中重组蛋白质表达效率及可溶性产物的一种新方法 预览 被引量:5
18
作者 杨瑞 王淑秀 +1 位作者 陈正跃 秦川 《中国临床康复》 北大核心 2006年第29期 92-93,共2页
目的:建立一种使基因工程中重组蛋白质高效表达并提高可溶性比率的新方法。方法:2002-09/2005-03在新乡医学院分子生物研究室用不含葡萄糖的M9ZB培养基分别培养转化过的含Tac启动子或T7启动子的工程菌。采用终浓度为0.02mmol/L的I... 目的:建立一种使基因工程中重组蛋白质高效表达并提高可溶性比率的新方法。方法:2002-09/2005-03在新乡医学院分子生物研究室用不含葡萄糖的M9ZB培养基分别培养转化过的含Tac启动子或T7启动子的工程菌。采用终浓度为0.02mmol/L的IPTG及5mmol/L的乳糖进行诱导。采用SDS-PAGE及岛津薄层扫描分析仪进行表达效率检测、蛋白可溶性的扫描分析。 结果:用常规方法(1mmol/L IPTG,LB培养基)诱导,重组基因的表达效率不高,表达量占菌体总蛋白25%,且可溶性产物比例较低,占表达蛋白的20%,采用0.02mmol/L的IPIG及5mmol/L乳糖诱导后重组蛋白表达效率占菌体总蛋白的65%,可溶性产物比例亦大幅升高占表达蛋白90%-93%,此方法没有选择性,对17启动子表达系统和Tac启动子表达系统均有效。 结论:采用0.02mmol/L的IPTG及5mmol几乳糖诱导后,不仅使含Tac启动子或T7启动子的表达系统中重组蛋白表达增加而且产物可溶性升高。 展开更多
关键词 基因 基因表达 重组蛋白质类
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尖吻蝮蛇毒小分子多肽的分离及抗血小板聚集作用 预览 被引量:14
19
作者 雷丹青 周先丽 李映新 《中国药理学通报》 CAS 北大核心 2006年第9期 1126-1129,共4页
目的从尖吻蝮蛇毒中分离纯化一种抗血小板聚集小分子多肽,研究其理化性质以及对ADP、胶原、凝血酶诱导的血小板聚集反应的影响。方法经Sephadex G-75凝胶过滤,超滤,DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析法分离纯化蛇毒组分,采用高效液... 目的从尖吻蝮蛇毒中分离纯化一种抗血小板聚集小分子多肽,研究其理化性质以及对ADP、胶原、凝血酶诱导的血小板聚集反应的影响。方法经Sephadex G-75凝胶过滤,超滤,DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析法分离纯化蛇毒组分,采用高效液相鉴定纯度,用SDS-凝胶电泳(SDS-PAGE)测定其分子量,用比浊法测定其抗血小板聚集活性。结果从尖吻蝮蛇毒中分离相对分子质量约为7862u等电点为4.29的组分,该组分能抑制由ADP、胶原、凝血酶诱导的血小板聚集并成剂量依赖性。结论此法成功地从尖吻蝮蛇毒中纯化出抗血小板聚集组分。该组分与去整合素比较相似,可能属于去整合素家族。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇毒 分离提纯 血小板聚集抑制剂
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细菌CPU0402发酵生产辅酶Q10的初步研究 预览
20
作者 应忠良 吕炜锋 +1 位作者 高向东 姚文兵 《中国新药杂志》 CAS 北大核心 2006年第20期 1753-1756,共4页
目的:优化发酵条件提高细菌CPU0402发酵生产辅酶Q10的产量。方法:在实验室5.5L发酵罐中考察影响辅酶Q10发酵的主要因素,采用分阶段控氧模式并通过补料流加的方式延长发酵过程中的产物合成期从而获得辅酶Q10的高产率。结果:在优化... 目的:优化发酵条件提高细菌CPU0402发酵生产辅酶Q10的产量。方法:在实验室5.5L发酵罐中考察影响辅酶Q10发酵的主要因素,采用分阶段控氧模式并通过补料流加的方式延长发酵过程中的产物合成期从而获得辅酶Q10的高产率。结果:在优化条件后的补料分批发酵中辅酶Q10的产量达到了14.5mg·L6-1,生产率达到0.392mg·L^-1·h^-1,分别比分批发酵的最佳值提高了65.5%和7.4%。结论:应用分阶段控氧模式和补料流加的方法可显著提高细菌CPU0402发酵生产辅酶Q10的产量。 展开更多
关键词 辅酶Q10 通气量 类胡萝卜素 分批发酵 补料分批发酵
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