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流式细胞术免疫分型对多发性骨髓瘤的诊断价值 预览
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作者 王星 张瑜 马列婷 《中国卫生标准管理》 2019年第18期131-134,共4页
目的探讨流式细胞术免疫分型对多发性骨髓瘤(MM)患者的诊断价值。方法选取我院自2016年1月—2018年12月收治的56例MM患者,均给予流式细胞术、毛细管免疫分型电泳、骨髓穿刺、毛细管血清蛋白电泳等实验室检查,比较各种检查结果阳性率及... 目的探讨流式细胞术免疫分型对多发性骨髓瘤(MM)患者的诊断价值。方法选取我院自2016年1月—2018年12月收治的56例MM患者,均给予流式细胞术、毛细管免疫分型电泳、骨髓穿刺、毛细管血清蛋白电泳等实验室检查,比较各种检查结果阳性率及在MM分型中的优劣势。结果流式细胞学检查MM的检出率(96.43%)明显高于毛细管血清蛋白电泳、毛细管免疫分型电泳检出率,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞学检查MM患者中有54例MM的免疫球蛋白呈阳性表达,毛细管免疫分型电泳检查出48例MM的免疫球蛋白呈阳性表达,流式细胞术及毛细管免疫分型电泳对MM的免疫球蛋白kappa型轻链及Labda型轻链分型结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论MM患者诊断中流式细胞术免疫分型是较为敏感的诊断方法,可对良恶性浆细胞进行有效鉴别,可辅助诊断MM。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 流式细胞术 免疫分型 诊断价值 阳性率 骨髓穿刺液 MM的流式细胞术检测
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射频消融治疗对肝癌患者细胞免疫功能的影响
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作者 宋士军 白力允 +4 位作者 申家辉 赵红丹 郭康 李俊鹏 王侠 《临床心身疾病杂志》 CAS 2019年第3期29-31,共3页
目的探讨射频消融治疗对肝癌患者细胞免疫功能的影响。方法对60例肝癌患者应用射频消融术治疗,于治疗前24h、治疗1周及4周末采用流式细胞仪检测患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4^+CD25^+调节性T细胞的比例变化,治疗4周末依据临床症状缓解... 目的探讨射频消融治疗对肝癌患者细胞免疫功能的影响。方法对60例肝癌患者应用射频消融术治疗,于治疗前24h、治疗1周及4周末采用流式细胞仪检测患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4^+CD25^+调节性T细胞的比例变化,治疗4周末依据临床症状缓解情况评定临床疗效。结果治疗4周末,本组患者治疗总有效率为50%。射频消融治疗1周、4周末患者外周血中CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+水平均较治疗前升高,CD4^+CD25^+调节性T细胞较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);CD8^+水平略升高,差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗1周末比较,治疗4周末CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+比例略有升高,CD4^+CD25^+调节性T细胞比例略升高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论原发性肝癌患者存在细胞免疫抑制,射频消融治疗能明显提高患者的细胞免疫功能。 展开更多
关键词 肝癌 射频消融术 T淋巴细胞亚群 CD4^+CD25^+调节性T细胞 流式细胞仪 免疫功能
Pax6基因在小鼠骨髓间充质干细胞中的过表达 预览
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作者 方可心 丁玲 +3 位作者 辛颖 马静怡 李倩 高杰 《局解手术学杂志》 2019年第10期767-771,共5页
目的体外研究Pax6基因在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达情况。方法利用全骨髓贴壁法体外分离培养小鼠BMSCs,将包装成功的Pax6慢病毒表达颗粒感染BMSCs,经G418梯度及荧光蛋白双筛选后,使用细胞免疫荧光染色、蛋白印迹技术及反转录P... 目的体外研究Pax6基因在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达情况。方法利用全骨髓贴壁法体外分离培养小鼠BMSCs,将包装成功的Pax6慢病毒表达颗粒感染BMSCs,经G418梯度及荧光蛋白双筛选后,使用细胞免疫荧光染色、蛋白印迹技术及反转录PCR(RT-PCR)技术检测Pax6的表达情况,流式细胞术检测Pax6/BMSCs阳性细胞的比例。结果 Pax6成功在BMSCs内过表达,流式结果显示Pax6阳性率超过90%。结论建立Pax6稳定表达的细胞株Pax6/BMSCs可为下一步其在眼表组织工程方面的研究奠定基础。 展开更多
关键词 PAX6 骨髓间充质干细胞 G418筛选 流式细胞术
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动物源性生物材料体外淋巴细胞增殖试验方法的建立
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作者 陈亮 穆钰峰 +3 位作者 邵安良 魏丽娜 屈树新 徐丽明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1337-1346,共10页
目的:建立可用于评价动物源性生物材料细胞免疫的体外淋巴细胞增殖试验方法。方法:采用C57小鼠脾脏淋巴细胞,通过淋巴细胞数量、阳性对照剂(刀豆蛋白A,Con A)浓度和培养时间等条件筛选,用CCK8试剂检测细胞增殖率,初步优化体外淋巴细胞... 目的:建立可用于评价动物源性生物材料细胞免疫的体外淋巴细胞增殖试验方法。方法:采用C57小鼠脾脏淋巴细胞,通过淋巴细胞数量、阳性对照剂(刀豆蛋白A,Con A)浓度和培养时间等条件筛选,用CCK8试剂检测细胞增殖率,初步优化体外淋巴细胞增殖试验方法。采用牛心包组织(原材料)的浸提液和匀浆液,作为抗原特异性的阳性对照组考察样品前处理方式对试验体系的影响,并用流式细胞仪分析增殖后的淋巴细胞亚型百分比,考察样品制备方式对淋巴细胞亚型增殖影响的差异。结果:本试验中小鼠脾淋巴细胞体外增殖试验条件确定为每孔接种6×105个淋巴细胞,阳性对照孔Con A浓度为2.5μg·mL-1,培养时间为3 d。牛心包浸提液和匀浆液的淋巴细胞增殖率均约为细胞对照组的2倍,两者的淋巴细胞亚型百分比变化不同于Con A组,未出现T细胞、CD4 T细胞、CD8 T细胞百分比的增加。浸提液组与匀浆液组的活化NK细胞和NKT细胞百分比与对照组相比均明显升高,但浸提液组的升高幅度数倍高于匀浆液组,且仅浸提液组NK细胞百分比与对照相比出现了明显倍增。结论:本研究建立了以动物组织(原材料)为抗原特异性阳性对照的体外淋巴细胞增殖试验方法。动物组织(原材料)浸提和匀浆样品均可以产生淋巴细胞增殖阳性结果,其促进淋巴细胞增殖的机理(亚型分类)不同于Con A等有丝分裂原,提示使用作为动物组织(原材料)阳性对照更能反映试验体系的敏感性。 展开更多
关键词 动物组织(原材料) 动物源性生物材料 淋巴细胞增殖试验 抗原特异性 流式细胞术
流式细胞仪测定荔枝倍性和基因组大小的细胞核提取液筛选与应用 预览
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作者 赖彪 吴传龙 +5 位作者 秦永华 刘成明 冯奇瑞 叶自行 胡桂兵 王惠聪 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期939-946,共8页
【目的】流式细胞术是目前测定植物倍性和基因组大小差异的最快、最有效的方法。建立适合荔枝的流式细胞术的方法,对荔枝倍性育种以及基因组大小的确定是必不可少的。【方法】笔者以荔枝的幼嫩叶片为材料,筛选适合荔枝的细胞核提取液配... 【目的】流式细胞术是目前测定植物倍性和基因组大小差异的最快、最有效的方法。建立适合荔枝的流式细胞术的方法,对荔枝倍性育种以及基因组大小的确定是必不可少的。【方法】笔者以荔枝的幼嫩叶片为材料,筛选适合荔枝的细胞核提取液配方,建立利用流式细胞仪测定荔枝倍性和基因组大小的方法。用改进的标准两步法,比较了6 种常用细胞核提取液提取细胞核的效果。【结果】利用WPB(Woody Plant Buffer)提取的大部分荔枝品种(品系)叶片细胞核稳定、分辨率高、细胞碎片少且细胞G0/G1峰的变异系数(CV)较低,平均CV值为5.12%,说明该配方适用于酚类物质丰富的荔枝细胞核的提取。同时以已知染色体数量的‘无核荔’(2n=30)为外标,检测了18 个品种(品系)的倍性,发现参测样品的G0/G1峰与‘无核荔’G0/G1峰的荧光均值的比值为0.78~1.24,说明所测荔枝品种(品系)均为二倍体。以已知基因组大小的‘Stupické polní rané’番茄为内标测定了14 个品种(品系)的基因组大小,结果表明荔枝基因大小约为550~620 Mb,平均602 Mb,不同荔枝品种(品系)间基因组大小存在一定差异。【结论】WPB细胞核提取液提取的荔枝幼嫩的叶片的细胞核质量好,可用于流式细胞术荔枝倍性和基因组大小的测定,测定的结果显示参测荔枝品种(品系)均为二倍体,无单倍或多倍的情况,不同荔枝品种基因组大小有一定的差异。 展开更多
关键词 荔枝 流式细胞术 细胞核提取液 倍性 基因组大小
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荷瘤小鼠脾脏功能紊乱型CD8^+ T细胞数量的分析研究 预览
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作者 陈家瑞 黄庆玲 +2 位作者 胡丽群 罗洁 梁伟 《蛇志》 2019年第3期327-330,共4页
目的分析荷瘤小鼠与正常小鼠脾脏功能紊乱型CD8+T细胞(Tim-3+/PD-1+CD8^+T细胞)的数量比例,预测肿瘤患者功能紊乱型CD8^+T细胞的情况,为改善肿瘤的免疫治疗提供参考。方法设置荷瘤小鼠组与正常小鼠组,每组各3只,分别从两组小鼠脾脏中提... 目的分析荷瘤小鼠与正常小鼠脾脏功能紊乱型CD8+T细胞(Tim-3+/PD-1+CD8^+T细胞)的数量比例,预测肿瘤患者功能紊乱型CD8^+T细胞的情况,为改善肿瘤的免疫治疗提供参考。方法设置荷瘤小鼠组与正常小鼠组,每组各3只,分别从两组小鼠脾脏中提取分离获得CD8+T细胞,用FITC标记的PD-1抗体、PE标记的Tim-3抗体与CD8+T细胞共孵育,孵育后经流式细胞术检测获得数据,并分析结果。结果正常小鼠组脾脏CD8+T细胞占脾脏T淋巴细胞总数百分比为7.7%,荷瘤小鼠组脾脏CD8^+T细胞占脾脏T淋巴细胞总数百分比为1.2%,两组的CD8+T细胞数量有明显差异性(χ^2=0.299,P=0.02);正常小鼠组脾脏功能紊乱型CD8^+T细胞占CD8+T细胞总数的百分比为1.17%,荷瘤小鼠组脾脏功能紊乱型CD8^+T细胞占CD8+T细胞总数的百分比为1.17%,两组数据差异无统计学意义(χ^2=0.00,P=1.00)。结论荷瘤小鼠与正常小鼠脾脏组织中功能紊乱型CD8+T细胞的数目无明显差异。 展开更多
关键词 CD8^+T细胞 细胞分选 PD-1 TIM-3 流式细胞术
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基于流式细胞术的保加利亚乳杆菌活性检测方法的应用研究
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作者 郑亦舟 王杰 +2 位作者 刘洋 俞漪 赵渝 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第3期589-592,共4页
目的采用流式细胞术对现今售卖模式下的含保加利亚乳杆菌饮料中活性菌进行实时监测。方法利用SYTO~?24与碘化丙锭(propidium iodide,PI)双染色法对发酵乳饮料中的保加利亚乳杆菌的活性检测,并对模拟现有售卖模式下发酵乳制品在其验货或... 目的采用流式细胞术对现今售卖模式下的含保加利亚乳杆菌饮料中活性菌进行实时监测。方法利用SYTO~?24与碘化丙锭(propidium iodide,PI)双染色法对发酵乳饮料中的保加利亚乳杆菌的活性检测,并对模拟现有售卖模式下发酵乳制品在其验货或销售等常温保存阶段保加利亚乳杆菌活性的变化进行检测。结果同一样品,流式细胞术检测活性保加利亚乳杆菌结果与平板计数法结果在同一数量级内。在商超验货等常温放置时间在5h内,活性保加利亚乳杆菌的数量级不会有显著性变化(P<0.5)。结论该方法能够对保加利亚乳杆菌活性有效检测,且能够缩短单样品的检测时间,适用于商品的快速检测和放行。 展开更多
关键词 流式细胞术 荧光染色 活性 保加利亚乳杆菌
AlCoCrCuFeTix高熵合金细胞毒性评价及对L929细胞凋亡与Ⅰ型胶原合成的影响 预览
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作者 肖睿 孙宇 +4 位作者 喻望清 焦二龙 汪伟佳 张兆钰 张雪 《口腔医学》 CAS 2019年第6期500-504,共5页
目的评价AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金细胞毒性。方法对AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金进行MTT毒性实验评价其细胞毒性;流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染法评价其对L929细胞凋亡的影响;免疫荧光染色检测各组L... 目的评价AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金细胞毒性。方法对AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金进行MTT毒性实验评价其细胞毒性;流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染法评价其对L929细胞凋亡的影响;免疫荧光染色检测各组L929细胞Ⅰ型胶原的合成水平来评价该系列材料对细胞增殖的影响。结果随着Ti元素的递增,AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金细胞毒性增大,凋亡率呈上升趋势,而L929细胞的Ⅰ型胶原蛋白表达水平下降。实验表明AlCoCrCuFe具有良好的细胞相容性,细胞毒性各时间点评级均为1级,且凋亡率及Ⅰ型胶原蛋白表达水平与空白对照组无明显差异。结论AlCoCrCuFeTix系列高熵合金中的AlCoCrCuFe具有良好的细胞相容性,可初步满足医疗器械使用的基本要求。 展开更多
关键词 高熵合金 细胞毒性 L929细胞 流式细胞术 免疫荧光
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应用流式细胞术进行血小板计数的探讨 预览
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作者 黎庆梅 梁彩云 +3 位作者 江雪霞 高凯 麦惠霞 吴昊 《实用医技杂志》 2019年第4期416-417,共2页
目的探讨流式细胞术(FCM)计数血小板的应用价值。方法用流式细胞术与电阻抗法计数血小板并与(参考方法)手工法进行比较。结果 3种方法计数血小板均有相关性(P<0.01),血小板计数在(1~300)×10~9/L相关系数>0.97,血小板计数在(1... 目的探讨流式细胞术(FCM)计数血小板的应用价值。方法用流式细胞术与电阻抗法计数血小板并与(参考方法)手工法进行比较。结果 3种方法计数血小板均有相关性(P<0.01),血小板计数在(1~300)×10~9/L相关系数>0.97,血小板计数在(1~100)×10~9/L较低范围时,相关系数(r)>0.95。与参考方法比较,血小板计数>100×10~9/L时2种方法的相关系数分别为0.98、0.97,血小板<100×10~9/L时,相关系数为0.95、0.86。结论 FCM计数血小板优于电阻抗法,特别对血小板减少症的患者。 展开更多
关键词 血小板计数 流式细胞术 低血小板症
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特发性血小板减少性紫癜患者调节性T细胞表达水平检测的临床意义 预览
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作者 路红霞 王英 《现代仪器与医疗》 CAS 2019年第1期45-48,共4页
目的:分析特发性血小板减少性紫癜(Idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者调节性T细胞表达的变化,探讨其临床意义。方法:将我院2013年8月至2017年2月收治的117例ITP患者分别纳入初治组(n=54)、复发组(n=63);根据治疗结果再分为... 目的:分析特发性血小板减少性紫癜(Idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者调节性T细胞表达的变化,探讨其临床意义。方法:将我院2013年8月至2017年2月收治的117例ITP患者分别纳入初治组(n=54)、复发组(n=63);根据治疗结果再分为难治组、非难治组;选取同期30名健康体检者,纳入对照组。使用流式细胞术检测各组受试者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞、CD4^+T细胞表达水平,并比较初治组治疗后不同临床疗效患者而外周血CD4^+CD25^+表达变化,分析调节性T细胞表达与ITP发生发展及预后结局的关联。结果:117例ITP患者中,初治54例,复发63例;将初治组、复发组治疗无效患者共计44例纳入难治组,将其余73例患者纳入非难治组。治疗前初治组、复发组CD4^+CD25^+、CD4^+百分比及CD4^+CD25^+/CD4^+比值均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。非难治组CD4^+CD25^+、CD4^+百分比及CD4^+CD25^+/CD4^+比值低于对照组,难治组CD4^+CD25^+、CD4^+百分比及CD4^+CD25^+/CD4^+比值低于非难治组,差异有统计学意义(P<0.05)。初治组显效、有效、进步者,其治疗后外周血CD4^+CD25^+百分比均较治疗前升高,治疗后外周血CD4^+CD25^+百分比由无效、进步、有效、显效依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ITP患者外周血CD4^+CD25^+、CD4^+百分比及CD4^+CD25^+/CD4^+比值的明显下降说明机体处于细胞免疫调控异常状态,调节性T细胞平衡紊乱的纠正有助于患者预后质量的改善。 展开更多
关键词 特发性血小板减少性紫癜 调节性T细胞 流式细胞术
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基于CD133及上皮-间质转化相关因子的列线图模型对上皮性卵巢癌预后的预测价值 预览
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作者 张娟娟 张春莲 +1 位作者 张志军 王超云 《安徽医药》 CAS 2019年第8期1600-1603,共4页
目的构建预测上皮性卵巢癌(EOC)预后的列线图模型,验证其应用价值。方法对2009年1月至2012年1月十堰市太和医院152例经手术病理确诊的初治EOC病人进行术后持续随访。检测其病理标本中CD133、Snail、E-cadherin蛋白表达情况,统计病人一... 目的构建预测上皮性卵巢癌(EOC)预后的列线图模型,验证其应用价值。方法对2009年1月至2012年1月十堰市太和医院152例经手术病理确诊的初治EOC病人进行术后持续随访。检测其病理标本中CD133、Snail、E-cadherin蛋白表达情况,统计病人一般资料及临床病理资料,通过Cox风险比例模型确定病人累积生存率的影响因素,应用R语言建立基于上述因素的列线图模型,并验证其应用价值。结果 152份病理标本中,CD133阳性表达87例,占57.24%,E-cadherin阳性表达50例,占32.89%,Snail阳性表达89例,占58.55%。CD133、Snail阳性者及E-cadherin阴性者,累积生存时间明显短于对应对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CD133阳性、伴腹部脏器或淋巴结转移是病人预后的危险因素,E-cadherin阳性是病人预后的保护因素(P<0.05)。经R语言建立列线图模型及校准曲线,校准图形接近于斜率为1的直线,列线图模型的内部一致性参数C-index=0.699。结论 CD133及E-cadherin表达情况是EOC病人预后的影响因素,构建列线图能够有效预测病人生存率。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 E-钙黏蛋白 流式细胞术 印迹法 蛋白质 列线图 预后 存活率
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FHL2基因异位表达对肺癌细胞的影响 预览
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作者 刘志强 朱双丽 +9 位作者 花瑞 江志刚 林礼 梁积峰 陈宇 温瑶 王跃群 刘作良 吴秀山 范雄伟 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期41-46,共6页
依据细胞的全能性,心肌细胞中的高表达基因可能对细胞增殖具有一定的抑制作用。FHL2作为心脏高表达的基因,为证实其对癌细胞增殖具有一定的抑制作用,通过COSMIC网站对FHL2基因进行生物信息学、统计学分析,发现其与肺癌的发生有一定的相... 依据细胞的全能性,心肌细胞中的高表达基因可能对细胞增殖具有一定的抑制作用。FHL2作为心脏高表达的基因,为证实其对癌细胞增殖具有一定的抑制作用,通过COSMIC网站对FHL2基因进行生物信息学、统计学分析,发现其与肺癌的发生有一定的相关性;采用流式细胞术检测过表达FHL2基因的A549细胞的表型,并进一步通过蛋白免疫印迹检测相关的周期蛋白调控因子,结果表明,在A549细胞中过表达FHL2基因会使细胞周期阻滞,伴随着G1/S检验点的相关蛋白因子的表达变化。因此,心脏高表达基因FHL2可能是通过调节细胞周期蛋白阻碍A549细胞的增殖,从而达到对肺癌的发生发展的阻碍作用。 展开更多
关键词 FHL2基因 生物信息学 细胞周期 流式细胞术 蛋白免疫印迹
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骨髓增生异常综合征流式细胞术免疫表型分析 预览
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作者 张伟 蒋丽君 +5 位作者 包慎 马燕萍 梁沛凤 智峰 冶秀鹏 王春华 《宁夏医学杂志》 CAS 2019年第6期527-529,共3页
目的研究流式细胞术(FC)对于骨髓增生异常综合征(MDS)诊断和预后的价值。方法收集明确诊断的31例MDS病例,应用FC对骨髓进行免疫表型检测,对发现异常的23例进行统计分析。结果 MDS流式细胞术检测免疫表型异常阳性率74.2%,成熟粒细胞群CD1... 目的研究流式细胞术(FC)对于骨髓增生异常综合征(MDS)诊断和预后的价值。方法收集明确诊断的31例MDS病例,应用FC对骨髓进行免疫表型检测,对发现异常的23例进行统计分析。结果 MDS流式细胞术检测免疫表型异常阳性率74.2%,成熟粒细胞群CD15/CD10、CD13/CD16或CD11b表达异常占26.8%,最为常见;在23例MDS中有15例存在此种异常(65.2%)。成熟粒细胞群跨系列表达CD56为14.2%。成熟粒细胞群CD15/CD11b、CD13/CD16免疫表型紊乱在低危组与高危组为66.67∶63.64,比值相近。低危组成熟粒细胞群跨系列表达CD5为8.33%,高危组9.09%。高危组存在更多的CD34~+细胞跨系列表达,CD7最常见,占免疫表型异常的54.54%,且均出现在高危组,其余可见CD5、CD19。单核细胞跨系列表达CD56亦仅出现在高危组。结论 FC检查不但有助于提高MDS的诊断而且对预后评估也有重要的临床价值。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 免疫表型 流式细胞术
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间质上皮转化因子(c-Met)嵌合抗体重链CDR3随机突变哺乳动物细胞表面展示文库的构建
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作者 郭佳 蒋韵 +5 位作者 滕飞 尹衍新 于丽华 付敏 蒋明 房健民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期557-562,共6页
目的采用哺乳动物细胞表面展示技术构建间质上皮转化因子(c-Met)嵌合抗体3E1D7的重链补体决定区3(CDR3)随机突变抗体库。方法用定向进化的方法在嵌合抗体3E1D7重链CDR3内部造成基因随机突变,将其通过双酶切克隆到哺乳动物细胞展示载体pS... 目的采用哺乳动物细胞表面展示技术构建间质上皮转化因子(c-Met)嵌合抗体3E1D7的重链补体决定区3(CDR3)随机突变抗体库。方法用定向进化的方法在嵌合抗体3E1D7重链CDR3内部造成基因随机突变,将其通过双酶切克隆到哺乳动物细胞展示载体pSZI-CD中构建随机突变抗体库。抗体库基因转染CHO细胞,流式细胞术检测抗体基因是否在细胞表面表达。结果3E1D7重链CDR3随机突变抗体库构建成功,库容量达到5.52×10^6。随机挑选20个阳性克隆进行测序鉴定,20个克隆均在不同位置发生碱基突变且没有重复突变,编码20种不同的氨基酸序列,抗体库具有较好的多样性和随机性。流式细胞术分析抗体基因库上膜情况,均检测到全长抗体在CHO细胞表面的表达。结论通过哺乳动物细胞表面展示技术,成功构建了库容量达到5.52×10^6的c-Met嵌合抗体重链CDR3随机突变抗体库。 展开更多
关键词 间质上皮转化因子(c-Met) 哺乳动物细胞表面展示 流式细胞术
CD56在多发性骨髓瘤诊断及分型中的临床应用 预览
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作者 梁艳 伦伟丹 刘礼平 《当代医学》 2019年第17期83-85,共3页
目的探讨CD56在多发性骨髓瘤诊断及分型中的临床应用意义。方法研究于2017年1月至2018年7月开展,收集赣南医学院第一附属医院初次进行诊治的多发性骨髓瘤患者52例,正常人17例。采用美国BDFACSCalibur型流式细胞仪采集数据,检测浆细胞的... 目的探讨CD56在多发性骨髓瘤诊断及分型中的临床应用意义。方法研究于2017年1月至2018年7月开展,收集赣南医学院第一附属医院初次进行诊治的多发性骨髓瘤患者52例,正常人17例。采用美国BDFACSCalibur型流式细胞仪采集数据,检测浆细胞的免疫表型。取69例对象骨髓标本,标记CD45、CD38、CD138、CD56、CD19、CD117、CD34、CD20、CD22、CD33、CD9、DR、cKappa、cLambda及骨髓比例进行检测,分析其免疫表型特点。结果多发性骨髓瘤患者中CD56表达率76.9%;多发性骨髓瘤患者中M蛋白表达率为76.9%。结论CD56在多发性骨髓瘤诊断中,是区分良、恶性浆细胞的重要标志;CD56表达患者中以IgG型最为常见。 展开更多
关键词 临床应用 多发性骨髓瘤 免疫表型 流式细胞术
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纳米细菌对人关节软骨细胞生物学形态的影响
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作者 彭伟秋 张祥洪 +3 位作者 韦钊岚 丘立标 张湘生 刘傥 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第1期11-13,共3页
目的观察纳米细菌损伤人膝关节软骨细胞的方式和特点。方法正常人膝关节软骨细胞分为高浓度组、中浓度组、低浓度组和对照组,分别加入吸光度值为0.280、0.035、0.002、0的纳米细菌液进行攻击,加入纳米细菌液24、48h时光镜下观察4组膝关... 目的观察纳米细菌损伤人膝关节软骨细胞的方式和特点。方法正常人膝关节软骨细胞分为高浓度组、中浓度组、低浓度组和对照组,分别加入吸光度值为0.280、0.035、0.002、0的纳米细菌液进行攻击,加入纳米细菌液24、48h时光镜下观察4组膝关节软骨细胞形态学变化及存活率,免疫荧光染色法观察中浓度组加入纳米细菌液0、1、2、4、8h时纳米细菌与软骨细胞的位置关系,流式细胞仪检测加入纳米细菌液24h时4组软骨细胞凋亡率。结果高浓度组加入纳米细菌液24h、中浓度组加入纳米细菌液48h,光镜下大部分软骨细胞坏死甚至未见完整细胞形态;加入纳米细菌液24、48h时,高浓度组软骨细胞存活率吸光度值(0.413±0.046、0.345±0.125)低于中浓度组(0.496±0.039、0.708±0.043)、低浓度组(0.539±0.047、1.018±0.048)和对照组(0.577±0.045、1.133±0.127)(P<0.05),中浓度组低于低浓度组和对照组(P<0.05),低浓度组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);纳米细菌可在较短时间内侵入至软骨细胞中,且随时间延长软骨细胞内纳米细菌荧光颗粒数目增多;加入纳米细菌液24h,高、中、低浓度组和对照组软骨细胞凋亡率[(1.541±0.046)%、(1.546±0.039)%、(1.539±0.047)%、(1.527±0.045)%]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论纳米细菌可损伤人关节软骨细胞,短时间内(24h)被攻击的软骨细胞未发现明显凋亡,高浓度纳米细菌可造成人关节软骨细胞更严重损伤。 展开更多
关键词 纳米细菌 人关节软骨细胞 凋亡 流式细胞仪
不同来源间充质干细胞表面标记的比较
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作者 杜志朋 殷国田 +2 位作者 李苗苗 郭志坤 李琼 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期589-594,共6页
目的探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)、人脂肪间充质干细胞(ADSCs)和人经血源子宫内膜间充质干细胞(MenSCs)之间表面标记的差异及随培养代次增加表面标记的变化。方法分别将HUCMSCs、 ADSCs和MenSCs培养至第3、6、9、12代,用流式细胞... 目的探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)、人脂肪间充质干细胞(ADSCs)和人经血源子宫内膜间充质干细胞(MenSCs)之间表面标记的差异及随培养代次增加表面标记的变化。方法分别将HUCMSCs、 ADSCs和MenSCs培养至第3、6、9、12代,用流式细胞术、免疫荧光法检测CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD45的表达并进行比较。结果培养MenSCs和HUCMSCs呈纺锤状,ADSCs形态多样以梭型、多角形为主。流式细胞术检测显示,人HUCMSCs、ADSCs和MenSCs的第3代CD29、CD44、CD73和CD105阳性表达率均在95%以上,CD45阴性表达;第3代MenSCs CD90的表达率为(72.43±0.76)%,均低于其在HUCMSCs(99.67±0.12)%和ADSCs(99.70±0.15)%表达(P<0.001)。HUCMSCs、ADSCs和MenSCs随培养代次的增加表面标记CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD45表达率差异无显著性(P>0.05)。免疫荧光结果与流式细胞术结果一致。结论 HUCMSCs、ADSCs和MenSCs随培养时间的增加稳定高表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105,不表达CD45,MenSCs的CD90表达率低于其在HUCMSCs和ADSCs的表达。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 人脂肪间充质干细胞 人经血源子宫内膜间充质干细胞 免疫荧光法 流式细胞术
应用流式细胞术鉴定死活结核分枝杆菌的实验研究 预览
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作者 王伟亮 谢贝 +5 位作者 孟繁荣 王楠 杨瑜 刘志辉 谭守勇 张言斌 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期372-378,共7页
【目的】探讨碘化丙锭(PI)和6-羧基荧光素二乙酸酯(6-cFDA)鉴别死、活结核分枝杆菌的性能,为应用流式细胞术定量检测与分析结核分枝杆菌药物敏感性和异质性耐药方法的创建提供基础性实验依据。【方法】应用PI和6-cFDA分别对10株1麦氏浊... 【目的】探讨碘化丙锭(PI)和6-羧基荧光素二乙酸酯(6-cFDA)鉴别死、活结核分枝杆菌的性能,为应用流式细胞术定量检测与分析结核分枝杆菌药物敏感性和异质性耐药方法的创建提供基础性实验依据。【方法】应用PI和6-cFDA分别对10株1麦氏浊度结核分枝杆菌纯培养活菌悬液和其相应的1麦氏浊度85℃加热30 min的死菌悬液进行染色,应用流式细胞术检测其平均荧光强度(MFI),依据受试者工作特征曲线(ROC)确定区分死菌与活菌的MFI界值,然后对另外10株活菌悬液和10株死菌悬液进行相同实验,利用前述MFI界值进行细菌死活判定。【结果】①在确定MFI界值实验中:10份死菌悬液样本PI染色的MFI值呈非正态分布,其中位值为2 459,10份活菌悬液样本PI染色的MFI值呈正态分布,其均值为426±180,PI染色鉴定死菌的MFI界值为1 329;10份死、活菌悬液样本6-cFDA染色的MFI值均呈正态分布,其均值分别为49±4和7 144±4 512,6-cFDA染色鉴定活菌的MFI界值为1 021。②应用PI染色鉴定死菌的MFI界值和6-cFDA染色鉴定活菌的MFI界值检测另外10株活菌悬液和10株死菌悬液,其准确度分别为95%和100%,灵敏度分别为1.00和1.00,特异度分别为0.90和1.00,Yonde指数分别为0.90和1.00,阳性预测值分别为0.91和1.00,阴性预测值分别为1.00和1.00。【结论】PI染色能够良好鉴定结核分枝杆菌死菌、6-cFDA染色能够良好鉴定结核分枝杆菌活菌,基于PI、6-cFDA染色鉴定结核分枝杆菌活性将具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 流式细胞术 结核分枝杆菌 碘化丙锭 6-羧基二乙酰荧光素
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活动性类风湿关节炎调节性T细胞程序性细胞死亡蛋白-1/程序性死亡配体1表达及与临床指标的相关性 预览
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作者 武加标 任敏 +2 位作者 成菊兰 许联红 戚传平 《中华临床免疫和变态反应杂志》 2019年第2期113-117,共5页
目的探讨程序性细胞死亡蛋白-1/程序性死亡配体1(PD-1/PD-L1)在活动性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血调节性T细胞表面表达变化及临床意义。方法用流式细胞术分别检测62例活动期RA患者外周血CD4^+CD25^+T细胞和CD4^+CD... 目的探讨程序性细胞死亡蛋白-1/程序性死亡配体1(PD-1/PD-L1)在活动性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血调节性T细胞表面表达变化及临床意义。方法用流式细胞术分别检测62例活动期RA患者外周血CD4^+CD25^+T细胞和CD4^+CD25^-T细胞群PD-1和PD-L1的阳性率,并设立39例健康体检者作为健康对照组,分析PD-1/PD-L1与实验室各指标和病情活动性的相关性。结果 PD-1在24例高度活动组和38例中低度活动组RA患者CD4^+CD25^+T细胞的表达水平分别为[(2.27±0.56)%和(1.83±1.08)%],高于健康对照组(1.42±0.49)%,差异有统计学意义(P<0.01)。PD-L1在高度活动组和中低度活动组RA患者CD4^+CD25^+T细胞的表达水平分别为[(2.06±0.62)%和(1.83±0.63)%],亦高于健康对照组(0.80±0.43)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.001)。PD-1在CD4^+CD25^+T细胞表达水平与DAS28呈正相关(r=0.477,P<0.01),PD-L1在CD4^+CD25^-T细胞表达水平与DAS28无相关性(r=0.078,P=0.549)。结论 PD-1/PD-L1在活动性RA患者调节性T细胞表达存在差异,其与DAS28相关性提示PD-1/PD-L1信号通路可经调节性T细胞调控参与RA的发生。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 程序性细胞死亡蛋白-1 程序性死亡配体1 调节性T细胞 流式细胞术
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人类全血中调节性B细胞检测技术的建立及应用
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作者 洪敏 梁进 +4 位作者 李少逰 陈晓 钟兆铭 邓俊 俞岚 《昆明理工大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期79-85,共7页
建立了一种全血、多参数的流式检测技术用以分析人类外周血调节性B细胞(regulator B cells,Breg)相关分子标志物,即CD19^+TGF-β^+、CD19^+IL-10^+、CD19^+CD25^+,比较不同刺激条件CpG+PIB及LPS+PIB对检测结果的影响,并探讨Breg细胞与... 建立了一种全血、多参数的流式检测技术用以分析人类外周血调节性B细胞(regulator B cells,Breg)相关分子标志物,即CD19^+TGF-β^+、CD19^+IL-10^+、CD19^+CD25^+,比较不同刺激条件CpG+PIB及LPS+PIB对检测结果的影响,并探讨Breg细胞与实体肿瘤的相关性.实验结果显示,人全血经5~6 h刺激因子刺激后能够有效地检测到Breg细胞,且两种检测条件均能够获得较好的检测效果,其中CpG+PIB刺激条件有更高的检测效率.应用该检测方法分别检测健康人20例及肿瘤患者60例,结果提示肿瘤患者CD19^+IL-10^+细胞比例(1.05±0.78)%与健康人(0.45±0.23)%相比显著升高(P=0.001);而肿瘤患者CD19^+TGF-β^+细胞比例(0.96±0.87)%与健康人(0.91±0.40)%相比没有显著差异(P=0.764),肿瘤患者CD19^+CD25^+细胞比例(18.16±10.57)%与健康人(18.83±6.22)%相比没有显著差异(P=0.729),但Ⅳ期肿瘤CD19^+TGF-β^+细胞比例(1.23±1.16)%以及CD19^+CD25^+细胞比例(23.41±11.70)%均高于健康组.该方法的建立为探讨Breg细胞与疾病免疫状态的相关性提供了一种可行的研究方法. 展开更多
关键词 调节性B细胞 流式细胞术 全血检测 肿瘤
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