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MicroRNA-146a表达与乳腺癌临床分子亚型的相关性研究 预览
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作者 付明刚 郭丽英 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第3期43-46,共4页
目的检测microRNA-146a(miR-146a)在不同临床分子亚型的乳腺癌组织中的表达,分析miR-146a与分子亚型之间的相关性。方法选取新疆医科大学第一附属医院乳腺浸润性导管癌患者手术标本185例,应用原位杂交技术检测乳腺癌石蜡组织中miR-146a... 目的检测microRNA-146a(miR-146a)在不同临床分子亚型的乳腺癌组织中的表达,分析miR-146a与分子亚型之间的相关性。方法选取新疆医科大学第一附属医院乳腺浸润性导管癌患者手术标本185例,应用原位杂交技术检测乳腺癌石蜡组织中miR-146a的表达情况,应用χ^2检验和秩和检验分析miR-146a表达水平在不同临床分子亚型的乳腺癌之间的关系。结果4组不同临床分子亚型的浸润性乳腺癌组织中,miR-146a在LuminaA型中的阳性表达率最高,而miR-146a在basal-like型的阴性表达率最高,临床分子亚型中miR-146a表达差异有统计学意义(P<0.05),进一步分组检验,Lumina A型较basal-like型阳性表达率与Basallike型比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-146a在浸润性乳腺癌组织中的表达与其临床分子亚型相关,浸润性乳腺癌组织中miR-146a阳性表达程度高提示预后较佳,其有望成为乳腺癌新的预后分子判断标志。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 MICRORNAS 原位杂交 分子亚型
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)PmHEX基因的功能研究
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作者 范闪闪 郑哲 +2 位作者 郝瑞娟 王庆恒 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期19-24,共6页
几丁质是软体动物贝壳有机框架的重要成分,其代谢在贝壳矿化中发挥重要作用。β-N-乙酰-己糖胺酶(HEX, EC3.2.1.52)是几丁质代谢的关键水解酶。为了探究马氏珠母贝β-N-乙酰-己糖胺酶(Pm HEX)(登录号:MF555152)在贝壳形成中的作用,本研... 几丁质是软体动物贝壳有机框架的重要成分,其代谢在贝壳矿化中发挥重要作用。β-N-乙酰-己糖胺酶(HEX, EC3.2.1.52)是几丁质代谢的关键水解酶。为了探究马氏珠母贝β-N-乙酰-己糖胺酶(Pm HEX)(登录号:MF555152)在贝壳形成中的作用,本研究利用原位杂交(ISH)技术检测Pm HEX基因在外套膜的定位,结果显示Pm HEX的mRNA主要分布于外侧褶的外上皮细胞、中褶的内侧上皮细胞和内褶上皮细胞。利用RNAi技术抑制Pm HEX表达后,Pm HEX在边缘区和套膜区的表达量均显著下调;SEM观察发现实验组的棱柱层和珍珠层的微观结构都出现不同程度的紊乱。综上所述,Pm HEX可能通过影响几丁质代谢,参与马氏珠母贝贝壳棱柱层和珍珠层的矿化过程。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 β-N-乙酰-己糖胺酶 贝壳矿化 RNAI 原位杂交
CXCR7在人脑胶质瘤中的表达及意义
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作者 张贺军 朱军 《华北理工大学学报:医学版》 2019年第1期49-52,共4页
①目的探讨CXCR7蛋白及CXCR7mRNA的表达水平与人脑胶质瘤病理分级之间的关系。②方法采用SP免疫组织化学及原位杂交方法检测60例胶质瘤肿瘤组织以及30例非肿瘤脑组织中CXCR7蛋白、CXCR7mRNA及的表达。③结果CXCR7蛋白及CXCR7mRNA在非肿... ①目的探讨CXCR7蛋白及CXCR7mRNA的表达水平与人脑胶质瘤病理分级之间的关系。②方法采用SP免疫组织化学及原位杂交方法检测60例胶质瘤肿瘤组织以及30例非肿瘤脑组织中CXCR7蛋白、CXCR7mRNA及的表达。③结果CXCR7蛋白及CXCR7mRNA在非肿瘤组未见表达。CXCR7蛋白在60例的胶质瘤组织中的阳性表达为43例,其中在胶质瘤Ⅰ~Ⅱ级、Ⅲ、Ⅳ级组中阳性表达率为50%、74.1%、94.7%,其中Ⅰ~Ⅱ级与Ⅳ级组,Ⅲ、Ⅳ级组比较(P<0.05)。CXCR7mRNA在60例病理切片中有40例阳性表达,Ⅰ~Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤阳性表达率为40%、66.6%、94.7%,其中Ⅰ~Ⅱ级与Ⅳ级组比较(P<0.05)。④结论CXCR7蛋白、CXCR7mRNA的阳性表达随着胶质瘤的病理分级升高而递增,与其发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 CXCR7 胶质瘤 免疫组化 原位杂交
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复合型环保试剂超声组织快速处理技术对肿瘤活检标本蛋白及分子检测的影响
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作者 郑波 王鹏姣 +3 位作者 薛丽燕 刘秀云 郭蕾 应建明 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期116-119,共4页
目的探讨使用固定、脱水、透明三合一复合型环保试剂超声组织快速处理技术对肿瘤活检标本进行前处理,对后续靶标检测的影响。方法收集2017年2—4月在中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院进行手术的乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胃癌、肝... 目的探讨使用固定、脱水、透明三合一复合型环保试剂超声组织快速处理技术对肿瘤活检标本进行前处理,对后续靶标检测的影响。方法收集2017年2—4月在中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院进行手术的乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胃癌、肝脏肿物、膀胱肿物、子宫肿物等术后组织标本共56例,模拟术前活检标本进行取材,每例标本取材3块,直径为1~3 mm,分别归入对照组(传统活检组织处理方法)、实验1组(3.7%中性缓冲甲醛固定、复合型环保试剂超声组织快速处理技术建议方法)和实验2组(复合型环保试剂直接固定、较高组织处理温度和较长组织处理时间)。两位病理学家盲法复核实验1组、实验2组的共计43例全自动免疫组织化学检测HER2、Napsin A、甲状腺转录因子(TTF)1、MLH1的细胞核、胞质、胞膜染色结果,4例HER2荧光原位杂交(FISH)结果,20例DNA提取质量及4例肺腺癌EGFR基因突变检测结果,与对照组进行比较。结果实验1组免疫组织化学染色、HER2 FISH、DNA提取质量、EGFR基因突变检测与对照组结果完全一致。实验2组免疫组织化学染色、HER2 FISH及DNA提取质量与对照组及实验1组结果无明显差异,但可能会引起免疫组织化学染色背景增加。实验2组较高处理温度和较长处理时间未对EGFR基因突变检测结果造成影响。结论复合型环保试剂超声组织快速处理技术可以应用到肿瘤活检标本快速检测中,复合型环保试剂可以起到补充固定作用,较高处理温度和较长处理时间对免疫组织化学、FISH及基因突变检测准确性无明显影响。 展开更多
关键词 组织固定 活组织检查 针吸 免疫组织化学 原位杂交 荧光 DNA突变 分析
蚤状溞caspase-3基因在不同环境条件下的表达分析 预览
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作者 吴乐乐 叶功照 +1 位作者 童巧琼 王丹丽 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期29-34,共6页
以蚤状溞(Daphniapulex)为研究对象,采用Real-TimePCR技术分析了蚤状溞caspase-3mRNA表达水平随着不同培养温度、种群密度和食物种类变化;用Caspase-3的特异性底物Ac-DEVD-AMC测定了Caspase-3酶活在不同培养温度、种群密度和食物种类条... 以蚤状溞(Daphniapulex)为研究对象,采用Real-TimePCR技术分析了蚤状溞caspase-3mRNA表达水平随着不同培养温度、种群密度和食物种类变化;用Caspase-3的特异性底物Ac-DEVD-AMC测定了Caspase-3酶活在不同培养温度、种群密度和食物种类条件下的变化,并通过整体原位杂交检测了caspase-3基因在蚤状溞不同生殖状态下的定位表达。研究结果:蚤状溞caspase-3mRNA表达量随着温度和种群密度的增加而增加;以Banta培养液培养的蚤状溞caspase-3mRNA表达量与小球藻培养的表达量无显著差异(P>0.05);且caspase-3mRNA的表达量与Caspase-3酶活的变化规律相一致;整体原位杂交结果显示,caspase-3基因在蚤状溞活体细胞几乎都有表达,在两性溞中表达量较高,孤雌成溞中表达量较低。caspase-3基因的表达与环境有关,而蚤状溞的衰老和caspase-3mRNA的表达及Caspase-3的酶活有关,但环境因子如何影响caspase-3基因的表达进而调控枝角类生殖转换还需今后进一步的研究。 展开更多
关键词 蚤状溞 CASPASE-3基因 MRNA表达 酶活 原位杂交
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马氏珠母贝贝壳基质蛋白基因Pm-PNU7的克隆和功能研究
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作者 黄荣莲 范闪闪 杜晓东 《广东海洋大学学报》 CAS 2019年第1期22-29,共8页
【目的】研究马氏珠母贝(Pinctada martensii)贝壳基质蛋白(Shell Matrix Proteins,SMPs)基因(Pm-PNU7)表达与功能。【方法】利用马氏珠母贝基因组和蛋白质组信息分析和RACE技术克隆获得壳基质蛋白新基因Pm-PNU7全长序列,通过原位杂交... 【目的】研究马氏珠母贝(Pinctada martensii)贝壳基质蛋白(Shell Matrix Proteins,SMPs)基因(Pm-PNU7)表达与功能。【方法】利用马氏珠母贝基因组和蛋白质组信息分析和RACE技术克隆获得壳基质蛋白新基因Pm-PNU7全长序列,通过原位杂交对其进行定位,RNA干扰检测其对贝壳形成的影响。【结果】Pm-PNU7的cDNA全长为797 bp,编码145个氨基酸,具有特殊的“KGG”重复序列和富含天冬氨酸(Asp)序列“DDDDDDHDD”。qRT-PCR分析表明,Pm-PNU7基因在外套膜边缘区和套膜区显著高表达(P<0.05);ISH检测显示,Pm-PNU7主要定位于边缘区外褶外侧和内侧上皮细胞、中褶内侧上皮细胞以及套膜区外侧上皮细胞。RNA干扰后,Pm-PNU7在外套膜边缘区和套膜区的表达量均显著下调,贝壳棱柱层和珍珠层微观结构均出现不同程度的紊乱。【结论】Pm-PNU7参与了贝壳棱柱层和珍珠层的形成。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 贝壳基质蛋白 原位杂交 RNA干扰
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胰腺癌石蜡包埋组织中微RNA原位杂交检测技术的优化
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作者 倪晨明 倪灿荣 +3 位作者 金钢 焦莉娟 李连峰 郑建明 《第二军医大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期1375-1380,共6页
目的对采用原位杂交检测10%中性甲醛溶液固定的石蜡包埋(FFPE)胰腺癌组织切片中微RNA(miR)的方法进行技术优化,以提高miR的阳性检出率。方法 将20例胰腺癌组织标本构建成组织芯片,使用锁核酸(LNA)标记的探针和显色原位杂交技术检测miR-2... 目的对采用原位杂交检测10%中性甲醛溶液固定的石蜡包埋(FFPE)胰腺癌组织切片中微RNA(miR)的方法进行技术优化,以提高miR的阳性检出率。方法 将20例胰腺癌组织标本构建成组织芯片,使用锁核酸(LNA)标记的探针和显色原位杂交技术检测miR-21和miR-34a的表达。杂交温度分别设为48℃、53℃、56℃,杂交后采用3种不同的洗涤条件(温度、时间和3种不同洗涤缓冲液)进行杂交条件优化。将126例胰腺癌组织标本制成组织芯片,采用优化的显色原位杂交技术检测miR-21和miR-34a的表达。结果 miR-21探针最佳杂交条件为杂交温度53℃下杂交6 h,使用洗涤缓冲液Ⅲ在65℃下洗涤6 min,再用PBS洗涤1 min;miR-34a探针最佳杂交条件为杂交温度53℃下杂交6 h,使用洗涤缓冲液Ⅲ分别在4℃和65℃下洗涤6 min,再用PBS洗涤1 min。在126例胰腺癌组织中,84例(66.7%)miR-21表达阳性,77例(61.1%)miR-34a表达阳性。结论 在FFPE胰腺癌组织切片中,miR-21和miR-34a的最佳杂交温度均为53℃,选择合适的杂交后洗涤温度和洗涤缓冲液有利于提高miR的阳性检出率。 展开更多
关键词 原位杂交 微RNA 组织微阵列 胰腺肿瘤 杂交温度
致病性副溶血性弧菌菌落杂交检测体系的优化 预览
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作者 徐马俊坤 冯博 +3 位作者 张昭寰 孙晓红 潘迎捷 赵勇 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期23-28,共6页
对常见食源性致病菌副溶血性弧菌的杂交条件进行了优化。基于副溶血性弧菌的tdh,trh,toxR基因选用了3种探针序列,从菌落杂交样品的预处理方法、杂交时间和显色检测等方面对基于副溶血性弧菌毒力基因的原位杂交实验进行了条件优化。结果... 对常见食源性致病菌副溶血性弧菌的杂交条件进行了优化。基于副溶血性弧菌的tdh,trh,toxR基因选用了3种探针序列,从菌落杂交样品的预处理方法、杂交时间和显色检测等方面对基于副溶血性弧菌毒力基因的原位杂交实验进行了条件优化。结果表明,采用80℃热固定2 h,37℃预杂交10 min后杂交8 h以及封闭1 h的改良方法可获得高特异性、低背景且着色清晰的实验结果。优化的菌落杂交技术检测副溶血性弧菌与传统检测方法相比,具有高效、准确、可区分致病性菌株的优点,为水产品中副溶血性弧菌致病菌株和非致病菌株的同步检测和筛选提供参考。 展开更多
关键词 致病株 副溶血性弧菌 原位杂交 菌落杂交
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高渗透压胁迫下水稻干尖线虫Ab-tre基因表达 预览
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作者 陈俏丽 王峰 +2 位作者 李丹蕾 零雅茗 张瑞芝 《中国农学通报》 2018年第24期141-146,共6页
水稻干尖线虫可通过海藻糖酶水解海藻糖提供能量以适应高渗透压胁迫,本研究旨在探究水稻干尖线虫海藻糖酶基因(Ab-tre)在高渗透压胁迫下的表达。在转录组测序结果基础上,克隆到水稻干尖线虫海藻糖酶基因,以30%甘油溶液为高渗透压胁迫... 水稻干尖线虫可通过海藻糖酶水解海藻糖提供能量以适应高渗透压胁迫,本研究旨在探究水稻干尖线虫海藻糖酶基因(Ab-tre)在高渗透压胁迫下的表达。在转录组测序结果基础上,克隆到水稻干尖线虫海藻糖酶基因,以30%甘油溶液为高渗透压胁迫剂,通过荧光定量Q-PCR及原位杂交探究该基因在高渗透压胁迫下的表达。荧光定量Q-PCR表明,高渗透压胁迫3-7 min,及高渗透压胁迫140 min后在蒸馏水中恢复90 min时,Ab-tre表达量均有显著上调。原位杂交表明,Ab-tre主要在水稻干尖线虫体中部有杂交信号。本研究表明Ab-tre与水稻干尖线虫抗高渗透压胁迫过程相关,对Ab-tre功能进行研究,可为防治该线虫奠定理论基础。 展开更多
关键词 水稻干尖线虫 海藻糖酶 高渗透压胁迫 原位杂交 荧光定量Q-PCR
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miR-4286与AEG-1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 预览
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作者 赵华 陈莹蓉 +3 位作者 宋鹏涛 余才华 吴巍 马志红 《浙江医学》 CAS 2018年第22期2427-2430,2512共5页
目的 探讨miR-4286、星形胶质细胞上调基因- 1(AEG-1) 在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与NSCLC临床病理特征的关系。 方法 分别采用原位杂交方法和免疫组织化学染色检测组织芯片中140例NSCLC癌组织及癌旁正常组织中miR-4286、A... 目的 探讨miR-4286、星形胶质细胞上调基因- 1(AEG-1) 在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与NSCLC临床病理特征的关系。 方法 分别采用原位杂交方法和免疫组织化学染色检测组织芯片中140例NSCLC癌组织及癌旁正常组织中miR-4286、AEG-1的表达,并分析两者表达水平与NSCLC临床病理特征的关系。 结果 NSCLC癌组织中miR-4286高表达率为62.14%,高于癌旁正常组织的4.29%,差异有统计学意义(P<0.01);NSCLC 癌组织中AEG-1高表达率为55.71%,高于癌旁正常组织的7.86%,差异有统计学意义(P<0.01)。miR-4286高表达与患者肿瘤直径大小、肿瘤TNM分期和淋巴结转移均有关(均P<0.05),AEG-1高表达与患者肿瘤TNM分期和淋巴结转移均有关(均P<0.05)。Spearman等级相关分析显示NSCLC癌组织中miR-4286 的表达与AEG-1 的表达呈正相关(r=0.223,P=0.008)。 结论 NSCLC 癌组织中miR-4286与AEG-1均高表达,miR-4286与AEG-1表达水平与TMN分期和淋巴结转移均有关,提示miR-4286和AEG-1可能参与NSCLC 的发生、发展与转移。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miR-4286 原位杂交 免疫组织化学 星形胶质细胞上调基因- 1
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16/18型HPV和IMP3在宫颈脱落细胞中的表达和意义 预览
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作者 吴倩 易韦 +3 位作者 谢青梅 龙昭玲 寿娟 彭学勤 《华中科技大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第3期321-324,共4页
目的观察16/18型人乳头瘤病毒(HPV)和IMP3蛋白在宫颈液基薄层脱落细胞(LCT)中的表达,探讨其在宫颈癌筛查中的价值和意义。方法用原位杂交法检测163例宫颈细胞块中16/18型HPV DNA的表达情况,采用免疫组化法检测IMP3表达情况,并探讨... 目的观察16/18型人乳头瘤病毒(HPV)和IMP3蛋白在宫颈液基薄层脱落细胞(LCT)中的表达,探讨其在宫颈癌筛查中的价值和意义。方法用原位杂交法检测163例宫颈细胞块中16/18型HPV DNA的表达情况,采用免疫组化法检测IMP3表达情况,并探讨其与宫颈病变程度的相关性。结果在不同细胞学类型病变中16/18型HPV阳性率不同,分别为NILM 10.00%、ASCUS 29.27%、LSIL 52.63%、HSIL 91.43%、SCC 100.00%;IMP3阳性率分别为NILM 2.50%、ASCUS 21.73%、LSIL 44.74%、HSIL 80.00%、SCC 88.89%。NILM、LSIL与HSIL组两两比较,二者的表达在组间均有显著差异(均P〈0.05);且16/18型HPV及IMP3的表达均与宫颈病变程度呈正相关,随病变的级别增高而增高,在SCC中阳性率最高。结论 LCT行细胞块制作、联合检测16/18型HPV和IMP3的表达,可提高宫颈癌筛查的准确性,有效分流不同级别的患者,为指导临床治疗及评估预后奠定基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 IMP3 细胞块 宫颈病变 原位杂交 免疫组化
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HER2免疫组织化学1+浸润性乳腺癌的基因扩增状态和mRNA表达分析
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作者 武莎斐 刘媛媛 +5 位作者 刘笑玎 姜英 罗玉凤 崔全才 梁智勇 曾瑄 《中华病理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期522-526,共5页
目的探讨HER2免疫组织化学(IHC)1+乳腺癌患者的基因扩增状态和原位HER2 mRNA表达情况,为精准检测HER2及相关临床策略的修订提供初步参考数据。 方法抽取北京协和医院2011至2013年间手术获取的非特殊型浸润性乳腺癌HER2 IHC 1+存... 目的探讨HER2免疫组织化学(IHC)1+乳腺癌患者的基因扩增状态和原位HER2 mRNA表达情况,为精准检测HER2及相关临床策略的修订提供初步参考数据。 方法抽取北京协和医院2011至2013年间手术获取的非特殊型浸润性乳腺癌HER2 IHC 1+存档蜡块标本65例,制作组织芯片,分别采用荧光原位杂交(FISH)和RNAscope方法检测其HER2基因状态和原位mRNA表达水平。如原发灶HER2的FISH结果不确定或阴性但mRNA高表达,再以FISH复检其淋巴结转移灶的HER2基因状态。结果在65例标本中,FISH阳性4例(6.2%),其中2例为HER2/CEP17〉2且平均HER2基因拷贝数〉4,另2例为HER2/CEP17〈2但平均HER2基因拷贝数〉6;在此4例FISH阳性标本中,2例为mRNA高表达(RNAscope 3分),另2例为中度表达(RNAscope 2分)。另外,在全部标本中,3例HER2/CEP17〉2但平均HER2基因拷贝数〈4,其中2例mRNA高表达(RNAscope 3分和4分),另1例mRNA中度表达(RNAscope 2分)。未见HER2基因状态及mRNA表达与临床病理特征(肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、脉管癌栓)之间存在明显相关性(P均〉0.05)。结论在本组HER2 IHC 1+乳腺癌中检出了部分FISH阳性的标本,其mRNA也有一定程度的表达,可判断为抗HER2治疗的潜在获益者。鉴于精准分子分型对于乳腺癌临床处理及相关诊疗策略制定具有重要意义,后续有必要进行大样本量的验证。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因 ERBB-2 免疫组织化学 原位杂交 RNA 信使
bcl-2/IgH基因易位及免疫球蛋白基因重排在滤泡性淋巴瘤中的应用
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作者 许洁 颜黎栩 +5 位作者 张科平 崔倩 陈洁 朱小兰 骆新兰 刘艳辉 《中华病理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期423-426,共4页
目的探讨bcl-2/IgH基因易位及免疫球蛋白(Ig)H/L基因重排检测在滤泡性淋巴瘤(FL)不同分级中的应用。方法应用荧光原位杂交(FISH)法检测了广东省人民医院病理科2014年9月至2016年12月收集的32例FL bcl-2/IgH基因易位状态,同时... 目的探讨bcl-2/IgH基因易位及免疫球蛋白(Ig)H/L基因重排检测在滤泡性淋巴瘤(FL)不同分级中的应用。方法应用荧光原位杂交(FISH)法检测了广东省人民医院病理科2014年9月至2016年12月收集的32例FL bcl-2/IgH基因易位状态,同时应用聚合酶链反应(PCR)-GeneScan法检测了32例FL免疫球蛋白重链/轻链(IgH/L)基因重排,统计分析bcl-2/IgH基因易位状态与肿瘤分级、克隆性IgH/L基因重排的关系。结果32例FL石蜡标本,bcl-2/IgH基因易位17例,其中,FL1、FL2易位的发生比例分别为12/13、3/5,而FL3易位的发生比例仅为2/14;24例IgH/L基因重排阳性,其中,FL1基因重排的检出比例为7/13,FL2、FL3重排的检出比例分别为4/5、13/14。Spearman等级相关检验和χ^2检验结果显示,bcl-2/IgH基因易位与FL的分级存在显著负相关关系(rp=-0.661),bcl-2/IgH基因易位率随着肿瘤分级的增加而降低,FL1、2和FL3中表达差异有统计学意义(P〈0.05);而IgH/L基因重排在FL3中的检测率高于FL1、2,有效地弥补了单纯FISH检测bcl-2/IgH基因易位的缺陷。结论联合FISH和PCR-GeneScan检测提高了FL分子诊断的阳性率,比单纯FISH检测染色体异常或单纯重排检测更灵敏,为FL疑难病例的诊断和鉴别诊断提供了更加准确和客观的科学依据。 展开更多
关键词 淋巴瘤 滤泡型 原位杂交 荧光 基因重排
g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达
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作者 夏海雄 李莉 +3 位作者 周艳华 任平平 何志旭 舒莉萍 《浙江大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第1期57-63,共7页
目的:观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法:利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pC... 目的:观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法:利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pCS~(2+)重组质粒,并将其显微注射入斑马鱼胚胎内,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;蛋白质印迹法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白的表达量;改良G6pd定量比值法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd酶活性。结果:g6pd基因在进化过程中相对保守,斑马鱼与人类的G6pd蛋白质相似度为88%,斑马鱼与小鼠的G6pd蛋白质相似度为87%。原位杂交试验结果显示,g6pd基因主要表达于斑马鱼的造血组织,显微注射g6pd-EGFP-p CS2+重组质粒后观察的结果与原位杂交试验结果一致。24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白相对表达量分别为1.44±0.03、1.47±0.05、1.54±0.02,差异无统计学意义(P〉0.05);G6pd酶活性分别为1.74±0.17、1.75±0.12、1.71±0.22,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:成功观察到斑马鱼体内g6pd基因表达部位及其变化规律,并测定了不同发育时相斑马鱼胚胎中G6pd蛋白表达和酶活性,为建立斑马鱼G6PD缺乏症模型奠定了基础。 展开更多
关键词 葡糖磷酸脱氢酶缺乏 葡糖磷酸脱氢酶 原位杂交 DNA 重组 质粒 基因表达 斑马鱼 胚胎发育
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miR-497-5p在子宫内膜病变组织中的表达及临床意义 预览
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作者 孔繁菲 马剑 +3 位作者 丛蓉 杨慧 冷洪锐 马晓欣 《中国医科大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期593-596,600共5页
目的检测mi R-497-5p在不同子宫内膜病变组织中的表达,探讨与子宫内膜癌临床病理参数的关系及其临床意义。方法采用原位杂交法检测110例子宫内膜癌、20例非典型增生及30例正常子宫内膜组织中miR-497-5p的表达。结果子宫内膜癌及非典型... 目的检测mi R-497-5p在不同子宫内膜病变组织中的表达,探讨与子宫内膜癌临床病理参数的关系及其临床意义。方法采用原位杂交法检测110例子宫内膜癌、20例非典型增生及30例正常子宫内膜组织中miR-497-5p的表达。结果子宫内膜癌及非典型增生子宫内膜组织中,mi R-497-5p的阳性表达率均低于正常内膜组织,其表达强度与临床分期(P〈0.001)、分化级别(P〈0.001)、肿瘤浸润深度(P=0.039)和淋巴结转移(P=0.022)有关。利用癌症和肿瘤基因图谱数据库中数据进行生存分析,提示mi R-497-5p高表达组子宫内膜癌患者预后更佳(P〈0.05)。结论 mi R-497-5p在子宫内膜癌组织中的表达水平明显降低,可作为判断子宫内膜癌患者预后的指标之一。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 miR-497-5p 原位杂交
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26例Kikuchi病的临床病理分析及EB病毒检测
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作者 陈琳 李文生 +4 位作者 雷建园 张巍 马钰 李真真 孙亚丽 《诊断病理学杂志》 2018年第10期685-688,共4页
目的 分析Kikuchi病(KD)的临床病理特点,并进一步探讨EB病毒在KD中可能的作用及机制。方法 回顾性分析2012-11—2017-08间在陕西省人民医院就诊的26例KD患者的临床病理资料,并应用原位杂交技术检测其EB病毒表达状况。结果 Kikuchi病... 目的 分析Kikuchi病(KD)的临床病理特点,并进一步探讨EB病毒在KD中可能的作用及机制。方法 回顾性分析2012-11—2017-08间在陕西省人民医院就诊的26例KD患者的临床病理资料,并应用原位杂交技术检测其EB病毒表达状况。结果 Kikuchi病主要病理学特征为淋巴结内有不规则的片状坏死,核碎常见,可见大量组织细胞增生。坏死区增生的组织细胞CD68、CD163、MPO常(+),坏死区周围浆样树突细胞CD123(+),这是KD的免疫组化特点。应用原位杂交方法检测EB病毒,阳性率为11.5%。结论 KD无特异性的临床表现,其确诊主要依靠病理活检。但其病理特征复杂,有较高的误诊率,免疫组化检查可协助诊断。本组26例中,通过原位杂交检测,仅发现3例EBV(+)。且复习文献多为个案报道,结论尚不一致,因此,并不能得出EBV是KD发病的直接原因。 展开更多
关键词 KIKUCHI病 临床病理 免疫组化 原位杂交 EB病毒
黏液型血管瘤样纤维组织细胞瘤的临床病理学观察
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作者 贡其星 张智弘 范钦和 《中华病理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期700-705,共6页
目的探讨黏液型血管瘤样纤维组织细胞瘤(AFH)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法收集2008-2017年就诊于南京医科大学第一附属医院的3例黏液型AFH患者资料,采用EnVision法检测免疫组织化学表型,采用荧光原位杂交(FISH)法检测E... 目的探讨黏液型血管瘤样纤维组织细胞瘤(AFH)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法收集2008-2017年就诊于南京医科大学第一附属医院的3例黏液型AFH患者资料,采用EnVision法检测免疫组织化学表型,采用荧光原位杂交(FISH)法检测EWSRl基因断裂重排情况。结果3例中男性2例,女性1例,年龄分别为13、31和42岁。临床表现主要为偶然发现或缓慢生长的无痛性肿块。肿瘤位于浅表软组织(皮下、黏膜下)2例,深部软组织(腹膜后)1例。大体上肿瘤最大径分别为1、7和2cm,切面灰白质实。组织学上,肿瘤均境界清楚,有纤维性包膜及淋巴细胞鞘。肿瘤呈模糊的多结节状分布,问质广泛黏液变性(≥60%)。黏液丰富区域瘤细胞相对稀疏,呈梭形或星芒状,条索状或丝网状排列,或杂乱无章的分布于间质中;瘤细胞相对丰富区域可见经典AFH的组织/树突样细胞合体样生长,排列呈小片状、短束状、交错状或局部旋涡状。瘤细胞轻.中度异型性,核分裂象可见(≤2/10HPF)。未见肿瘤性坏死。仅1例见裂隙状出血性腔隙。另有1例部分间质出现丰富的硬化性胶原。3例均表达CD68、CDl63,2例表达结蛋白、上皮细胞膜抗原和CD99,1例表达Calponin和平滑肌肌动蛋白。S-100蛋白、CD34、CD31、CD35、CD21、广谱细胞角蛋白均阴性。FISH检测示EWSRl均阳性。2例获随访结果,分别随访6个月和89个月,未见复发或转移。结论黏液型AFH的临床表现、免疫表型、分子遗传学改变及生物学行为与经典型AFH相同.但组织形态学特殊,需要与肌上皮瘤、神经源性肿瘤等富含间质黏液的肿瘤鉴别。 展开更多
关键词 组织细胞瘤 良性纤维性 黏液 软组织肿瘤 原位杂交 荧光
胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病临床病理特征
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作者 申龙树 肖君 +3 位作者 王耀辉 王洁 高丽丽 章宜芬 《诊断病理学杂志》 2018年第6期434-438,443共6页
目的探讨胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病临床病理特征。方法收集胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病患者病变组织标本,利用HE染色、免疫组化、基因重排及原位杂交等方法,结合临床资料并复习文献,分析疾病的临床病理特点。结果内镜... 目的探讨胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病临床病理特征。方法收集胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病患者病变组织标本,利用HE染色、免疫组化、基因重排及原位杂交等方法,结合临床资料并复习文献,分析疾病的临床病理特点。结果内镜下见胃窦和胃体多发性孤立或融合息肉样丘状隆起,表面光滑。送检胃窦及胃体ESD标本光镜下见黏膜固有层弥漫致密的淋巴细胞浸润,局部浸润到黏膜下层,淋巴细胞形态小到中等大,形态单一,细胞核轻度异型;免疫组化示CD2、CD3、CD5、CD7、CD8、TIA(+),CD4、Gr B、CD56(-),Ki-67约5%(+);原位杂交EBER(-);基因重排检出T淋巴细胞受体TCR基因发生克隆性基因重排。肠镜检查肠道黏膜未见特殊。结合复习相关文献,诊断为胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病,对症治疗并随访9个月,患者身体状况良好。结论胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病具有惰性临床过程,正确诊断并选择适当的治疗措施具有重要临床意义。 展开更多
关键词 胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病 免疫组化 基因重排 原位杂交 外周T细胞淋巴瘤
耳蜗毛细胞miR-30b对Dynamin基因靶向调控的研究
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作者 李洋 唐小林 +2 位作者 余菲 李华君 袁伟 《四川大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第3期347-351,共5页
目的观察正常成年小鼠耳蜗毛细胞中miR-30b的表达,研究其对靶基因(Dynamin1,DNM1)的调控是否会影响内毛细胞中突触囊泡内吞关键蛋白Dynamin的表达。方法取正常成年C57小鼠耳蜗基底膜行原位杂交,观察耳蜗毛细胞中miR-30b的表达分布;构... 目的观察正常成年小鼠耳蜗毛细胞中miR-30b的表达,研究其对靶基因(Dynamin1,DNM1)的调控是否会影响内毛细胞中突触囊泡内吞关键蛋白Dynamin的表达。方法取正常成年C57小鼠耳蜗基底膜行原位杂交,观察耳蜗毛细胞中miR-30b的表达分布;构建荧光素酶报告基因载体,转染293T细胞,通过荧光素酶活性变化明确DNM1是否为miR-30b的靶基因;通过耳蜗圆窗显微注射过表达miR-30b的腺相关病毒(adenoassociated virus,AAV),14d后通过real time-PCR检测miR-30b和DNM1的mRNA表达,免疫印迹实验(Western blot)检测Dynamin蛋白表达。结果 miR-30b在小鼠耳蜗内、外毛细胞胞质和胞核均有表达;miR-30b可抑制DNM1载体的荧光表达(P〈0.05),而突变型DNM1载体的荧光表达无抑制作用;转染AAV-miR-30b后miR-30b的相对表达量增高,DNM1和Dynamin蛋白表达降低。结论 miR-30b在小鼠耳蜗内、外毛细胞均有表达;miR-30可以靶向下调DNM1基因从而抑制Dynamin蛋白表达。 展开更多
关键词 毛细胞 miR-30b DNM1 DYNAMIN 原位杂交 双荧光素酶报告基因 腺相关病毒
Clec14a基因调控斑马鱼胚胎血管发育 预览
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作者 杨晋娴 王新 +2 位作者 刘东 张海骏 邵义祥 《交通医学》 2018年第6期535-539,共5页
目的:探索Clec14a在斑马鱼胚胎期的表达及其在血管发育过程中的功能,探讨该基因调控血管发育机制。方法:通过胚胎整体原位杂交技术,观察Clec14a基因在斑马鱼胚胎期的表达情况;在转基因斑马鱼系Tg(kdrl:mCherry)和Tg(fli1a:nGFP)中,显微... 目的:探索Clec14a在斑马鱼胚胎期的表达及其在血管发育过程中的功能,探讨该基因调控血管发育机制。方法:通过胚胎整体原位杂交技术,观察Clec14a基因在斑马鱼胚胎期的表达情况;在转基因斑马鱼系Tg(kdrl:mCherry)和Tg(fli1a:nGFP)中,显微注射吗啉修饰的反义寡核苷酸(morpholinoantisense oligos)下调Clec14a基因表达,同时在转基因斑马鱼系Tg(kdrl:mCherry)中注射Clec14a-mRNA调控Clec14a基因表达,利用激光共聚焦显微镜观察分析斑马鱼节间血管(intersegment vessel,ISV)表型,统计分析内皮细胞迁移速度和数目的变化,并应用qRT-PCR技术检测下调后该基因mRNA表达情况。结果:在受精后24h、48h和72h,Clec14a基因在斑马鱼脑、心脏、血管系统中有表达;Clec14a基因表达下调导致ISV发育缺陷,内皮细胞数目减少,抑制其迁移速度。结论:下调Clec14a基因表达能够通过抑制内皮细胞增殖和内皮细胞迁移调控斑马鱼胚胎血管发育。 展开更多
关键词 Clec14a 血管发育 原位杂交 斑马鱼
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