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mTOR和4E-BP1在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达及其与预后的关系
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作者 张强 刘钢 杭伟 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期123-127,共5页
目的:研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白-1(4E-BP1)在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)中的表达,及其与患者临床病理因素和预后的关系。方法:采用免疫组织化学染色方法检测36例ENKTCL和20例鼻咽淋巴组... 目的:研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白-1(4E-BP1)在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)中的表达,及其与患者临床病理因素和预后的关系。方法:采用免疫组织化学染色方法检测36例ENKTCL和20例鼻咽淋巴组织增生患者组织中mTOR和4E-BP1蛋白的表达情况,运用χ~2检验分析其与ENKTCL的临床分期、B症状、一般状况评分及国际预后指数(IPI)之间的关系。结果:ENKTCL组织中mTOR、4E-BP1表达率分别为63.9%和58.3%;鼻咽淋巴组织增生中的mTOR、4E-BP1表达率分别为15.0%和10.0%,2组比较差异均有统计学意义(χ~2=12.355,P=0.0001;χ~2=12.410,P=0.0001),且mTOR、4E-BP1在ENKTCL组织中表达呈正相关(r=0.655,P=0.001)。mTOR与ENKTCL的临床分期有关,且在Ⅲ~Ⅳ期组中的阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期组,差异有统计学意义(χ~2=17.902,P=0.0001);4E-BP1与ENKTCL的IPI有关,且IPI>2分组的阳性表达率高于IPI≤2分组,差异有统计学意义(χ~2=4.051,P=0.044)。结论:mTOR与下游底物4E-BP1共同作用导致ENKTCL的生长、分化和转移,两者可成为判断ENKTCL预后的有效指标。 展开更多
关键词 结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤 MTOR 4EBP1 预后
miR-125b在嗜酸性粒细胞性鼻窦炎中的表达模式及生物学作用
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作者 孟晓敏 李华瑞 刘峰 《河北医科大学学报》 CAS 2019年第1期105-108,共4页
目的探讨miR-125b在嗜酸性粒细胞性鼻窦炎中的表达模式及生物学作用。方法qPCR检测miR-125b在不同类型的鼻窦炎中的表达模式;原位杂交试验检测miR-125b在不同类型鼻窦炎组织中的表达情况;Westernblotting检测miR-125b和4E-BP1之间的调... 目的探讨miR-125b在嗜酸性粒细胞性鼻窦炎中的表达模式及生物学作用。方法qPCR检测miR-125b在不同类型的鼻窦炎中的表达模式;原位杂交试验检测miR-125b在不同类型鼻窦炎组织中的表达情况;Westernblotting检测miR-125b和4E-BP1之间的调控关系;免疫组织化学检测miR-125b在不同类型鼻窦炎组织中Ⅰ型IFN-β的表达。结果与对照组相比:qPCR检测嗜酸性粒细胞伴有鼻息肉的慢性鼻-鼻窦炎(eosinophil-chronic rhinosinusitis with nasal polyps,Eos-CRSwNP)组miR-125b表达水平最高,非嗜酸性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(non eosinophil-chronic rhinosinusitis with nasal polyps,Non-Eos-CRSwNP)组和慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(eosinophil-chronic rhinosinusitis without nasal polyps,Eos-CRSsNP)组miR-125b表达水平相对较高;Western blotting检测Eos-CRSwNP组miR-125b表达水平最高,Non-Eos-CRSwNP组和Eos-CRSsNP组miR-125b表达水平相对较高;增加miR-125b表达后,4E-BP1蛋白表达水平相应下调;免疫组织化学检测Eos-CRSwNP组Ⅰ型IFN-β表达水平最高,Non-Eos-CRSwNP组和Eos-CRSsNP组Ⅰ型IFN-β表达水平相对较高。结论miR-125b在嗜酸性粒细胞性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达水平较高,可以通过调控4E-BP1和IFN-β的表达影响其进展。 展开更多
关键词 鼻窦炎 miR-125b 4E-BP1 干扰素Β
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磷酸化4E-BP1在结直肠癌中的表达及与临床病理特征、预后的关系 预览
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作者 陈亦明 王继生 +4 位作者 徐鲁白 周斌 范恒伟 高静 谢君青 《浙江医学》 CAS 2017年第23期2084-2088,共5页
目的 探讨磷酸化的真核翻译起始因子结合蛋白(p-4E-BP1)在结直肠癌组织中的表达及与临床病理特征、预后的关系。方法 采用免疫组化染色检测164例患者结直肠癌组织中p-4E-BP1表达,采用qRT-PCR、Western bolt法检测结直肠癌组织及其癌... 目的 探讨磷酸化的真核翻译起始因子结合蛋白(p-4E-BP1)在结直肠癌组织中的表达及与临床病理特征、预后的关系。方法 采用免疫组化染色检测164例患者结直肠癌组织中p-4E-BP1表达,采用qRT-PCR、Western bolt法检测结直肠癌组织及其癌旁正常组织中4E-BP1、p-4E-BP1的m RNA、蛋白表达,应用Kaplan-Meier法和Cox比例风险回归模型对结直肠癌患者进行生存分析。结果 164例结直肠癌患者中p-4E-BP1均有表达,其中低表达69例(42.1%),高表达95例(57.9%)。p-4E-BP1表达与结直肠癌患者的肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均有关,其中细胞分化较差、浸润较深、淋巴结转移、TNM分期较晚的结直肠癌患者p-4E-BP1表达均较高(均P〈0.05);而p-4E-BP1蛋白表达较癌旁正常组织明显增高(P〈0.05)。p-4E-BP1高表达组无进展生存期、总生存期均明显短于低表达组(均P〈0.05)。p-4E-BP1蛋白表达是影响患者术后总生存期、无进展生存期的独立风险因素(RR=5.414、4.754,均P〈0.05)。结论 p-4E-BP1高表达与肿瘤进展以及不良预后相关,p-4E-BP1可作为临床判断结直肠癌患者预后的一个新指标。 展开更多
关键词 结肠直肠癌 4E-BP1 磷酸化 临床病理特征 预后
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L-亮氨酸改善高原记忆损伤作用? 被引量:1
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作者 周保柱 栾飞 +2 位作者 李茂星 张泉龙 贾正平 《医药导报》 CAS 2016年第3期237-241,共5页
目的:探讨L-亮氨酸对高原记忆损伤的改善作用及其机制。方法通过八臂迷宫筛选雄性昆明种小鼠50只,随机分为常氧对照组( NC组),模型对照组( Model组),L-亮氨酸小、中、大剂量组。 L-亮氨酸小、中、大剂量组分别按0.473,0.945,1... 目的:探讨L-亮氨酸对高原记忆损伤的改善作用及其机制。方法通过八臂迷宫筛选雄性昆明种小鼠50只,随机分为常氧对照组( NC组),模型对照组( Model组),L-亮氨酸小、中、大剂量组。 L-亮氨酸小、中、大剂量组分别按0.473,0.945,1.89 g·kg-1剂量灌胃给予L-亮氨酸,NC组和Model组给予等体积纯化水。均给药1周。给药第4天,将Model组和L-亮氨酸小、中、大剂量组置于大型低压氧舱模拟高原低压低氧环境(海拔7500 m,3 d)。采用八臂迷宫测试其空间学习记忆能力;干/湿比重法测定各组脑组织含水量变化;苏木精-伊红( HE)染色观察海马CA1区细胞形态变化;SYBR Green实时定量PCR检测海马组织mTOR、P70S6K和4E-BP1 mRNA表达。结果与NC组比较,Model组参考记忆错误(RME)、错误总数(TE)及测试时间(TT)均显著增加(P〈0.05),脑含水量显著升高(P〈0.01),海马CA1区神经元损伤加重,mTOR和P70S6K mRNA表达显著降低( P〈0.05)。与Model组比较,L-亮氨酸小、中剂量组工作记忆错误( WME)、RME、TE、TT、脑含水量和4E-BP1 mRNA表达均降低,P70S6K mRNA表达增加;L-亮氨酸大剂量组WME和TE均显著降低(P〈0.05),脑含水量显著降低(P〈0.01),P70S6K mRNA表达显著增加(P〈0.05)。 L-亮氨酸小、中、大剂量组海马CA1区神经元损伤明显减轻。结论 L-亮氨酸对高原记忆损伤有改善作用,其机制可能通过激活mTOR及其下游底物(4E-BP1和P70S6K)发挥作用。 展开更多
关键词 L-亮氨酸 雷帕霉素靶蛋白 4E-BP1 P70S6K 高原记忆损伤
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新城疫病毒在感染早期通过Akt/mTOR/4E-BP1和p38/Erk/Mnk1通路激活宿主真核翻译起始因子eIF4E的研究 预览 被引量:1
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作者 詹媛 仇旭升 +4 位作者 曲昱蓉 孙英杰 谭磊 宋翠萍 丁铲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-5,共5页
为阐明新城疫病毒(NDV)在感染宿主细胞后对宿主真核翻译起始因子以及相关调控通路的调节作用,本实验采用westernblot检测NDV感染HeLa细胞早期真核翻译起始因子elF4F的磷酸化水平以及Akt/mTOR/4E.BP1和p38/Erk/Mnk1调控通路的活... 为阐明新城疫病毒(NDV)在感染宿主细胞后对宿主真核翻译起始因子以及相关调控通路的调节作用,本实验采用westernblot检测NDV感染HeLa细胞早期真核翻译起始因子elF4F的磷酸化水平以及Akt/mTOR/4E.BP1和p38/Erk/Mnk1调控通路的活化情况,同时用紫外线(Uv)灭活的NDV进行对照试验。结果显示,NDV感染HeLa早期能够迅速诱导真核起始因子elF4E的磷酸化,而UV灭活NDV作用的细胞则无此现象。通过对相关调控通路的检测发现,NDV在感染早期对elF4E的磷酸化是通过激活p38/Erk/Mnk1通路实现的。此外,NDV感染还可以激活Akt/mTOR/4E-BP1通路,诱导elF4E阻遏蛋白4E-BP1发生磷酸化并解离出elF4E,从而促进elF4F复合体的形成,确保真核翻译的进行。该结果对深入解析NDV与宿主之间的相互作用以及翻译相关信号通路参与调控病毒复制的机制具有重要意义。 展开更多
关键词 新城疫病毒 EIF4E 4E-BP1 Mnk1 真核翻译起始因子
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大运动量和减量训练对心肌mTOR和下游信号蛋白4E-BP1的影响 被引量:1
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作者 张军 曾凡星 +3 位作者 高原 赵猛 罗曦娟 李井刚 《中国运动医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期235-241,共7页
目的:探讨大运动量和减量训练对心肌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)和下游信号通路的影响。方法:72只雄性SD大鼠经过1周适应性训练后,随机分为8组:3周安静对照组、3周大运动量训练组、3天对照组、3天减量训练组、6天对照组、6天减... 目的:探讨大运动量和减量训练对心肌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)和下游信号通路的影响。方法:72只雄性SD大鼠经过1周适应性训练后,随机分为8组:3周安静对照组、3周大运动量训练组、3天对照组、3天减量训练组、6天对照组、6天减量训练组、2周对照组和2周减量训练组。3周大运动量训练采用上坡跑,在跑台上以中等强度(20 m/min,坡度10%)和大强度(26 m/min,坡度10%)交替进行,运动时间逐渐延长,由60 min增加到120 min。大运动量训练期间,每周训练6天,周1休息,共训练3周。3周大运动量训练后进行减量训练,运动强度保持不变,仍然是中等强度和大强度交替进行,但运动时间逐渐减少,由60min减少到20 min。减量的速度为阶梯式的。减量训练分为3天、6天和2周的减量训练。安静对照组在安静饲养相应天数后,各运动训练组在末次运动后12小时,麻醉取血后取左心室肌。制备心肌组织匀浆后,用Western blotting方法测定m TOR、真核生物翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)的蛋白表达和磷酸化。结果:3周大运动量训练后进行3天减量训练,心肌m TOR(Ser2448)磷酸化显著增加。3周大运动量训练后,心肌m TOR(Ser2448)磷酸化/m TOR显著降低(P〈0.05)。而3天减量训练后,心肌m TOR(Ser2448)磷酸化/m TOR显著升高(P〈0.05)。3周大运动量训练和减量训练后,心肌4E-BP1和4E-BP1(Thr37/46)磷酸化无显著变化(P〉0.05)。结论:减量训练能引起心肌m TOR激活,对心脏有利。 展开更多
关键词 MTOR 4E-BP1 减量训练 心肌
mTOR信号通路在卵巢型子宫内膜异位症中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 汪玉莲 陈小华 +1 位作者 温勤坚 王丽群 《海南医学院学报》 CAS 2014年第7期884-887,共4页
目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白在卵巢型子宫内膜异位组织中的表达及其临床意义。方法:利用RT—PCR、蛋白质免疫印迹法、免疫组织化学法检测2011年1月~2013年6月就诊我院的卵... 目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白在卵巢型子宫内膜异位组织中的表达及其临床意义。方法:利用RT—PCR、蛋白质免疫印迹法、免疫组织化学法检测2011年1月~2013年6月就诊我院的卵巢型子宫内膜异位症患者40例和正常增生期子宫内膜40例组织中mTOR及下游分子p70S6激酶(p70S6K)和4E—BP1的表达。结果:mTOR及下游分子p70S6K和4E—BP1在卵巢型子宫内膜异位组织中mRNA及蛋白的表达均低于正常子宫内膜组织。mTOR蛋白在卵巢型子宫内膜异位组织中为阳性表达,高于正常子宫内膜组织,且与痛经、月经异常、不孕无明显相关性,而与囊肿大小、异位内膜浸润深度及盆腔浸润情况关系显著。结论:mTOR信号通路与卵巢型子宫内膜异位症的发生、发展关系密切,mTOR蛋白失活可能是卵巢子宫内膜异位的显著标志,检测mTOR蛋白表达对卵巢子宫内膜异位的诊断具有一定意义。 展开更多
关键词 雷帕霉素靶蛋白(mTOR) P70S6K 4EBP1 卵巢型子宫内膜异位症
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雷帕霉素靶蛋白及其下游因子在大鼠脊髓背角和背根神经节的表达与分布 预览
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作者 吕婧 佘守章 +1 位作者 许立新 应彦璐 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期1993-1996,共4页
目的观察雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其下游因子真核细胞起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)、p70核糖体S6蛋白激酶(p70S6K)及其磷酸化形式在脊髓背角和背根神经节(DRG)的表达和分布。方法以逆转录-聚合酶链反应、Western blot确定mTOR、4... 目的观察雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其下游因子真核细胞起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)、p70核糖体S6蛋白激酶(p70S6K)及其磷酸化形式在脊髓背角和背根神经节(DRG)的表达和分布。方法以逆转录-聚合酶链反应、Western blot确定mTOR、4E-BP1和p70S6K及其磷酸化形式在DRG和背角的表达。免疫组化染色确定mTOR、4E-BP1和p70S6K及其磷酸化形式在DRG和背角的定位,并定量分析。结果 mTOR、4EBP1和p70S6K分布在整个脊髓背角和DRG,特别是在脊髓背角的外层,而磷酸化形式在脊髓背角和DRG表达都非常低,没有检测到。在脊髓背角,mTOR、p70S6K和4E-BP1表达于神经元细胞,在星形胶质细胞和小胶质细胞没有表达。在DRG,mTOR和p70S6K表达于神经元细胞,(26.1±3.2)%呈mTOR表达阳性,(19.1±1.9)%呈p70S6K表达阳性;4E-BP1则表达于卫星胶质细胞。结论 mTOR、p70S6K和4E-BP1在脊髓背角和DRG表达丰富,而它们的磷酸化活化形式表达非常低。 展开更多
关键词 MTOR信号通路 P70S6K 4E-BP1 背根神经节 脊髓背角 表达 定位
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雷帕霉素对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响 预览 被引量:2
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作者 李永峰 朱世泽 +3 位作者 郑志芳 王朝阳 吴文艺 蔡玉梅 《中国美容医学》 CAS 2014年第3期207-212,共6页
目的:雷帕霉素(Rapamycin,Rapa)对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用,深入探讨其作用机制.方法:用雷帕霉素的不同药物浓度干预体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞,CCK-8方法检测对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响;免疫组化、RT-PCR和west... 目的:雷帕霉素(Rapamycin,Rapa)对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用,深入探讨其作用机制.方法:用雷帕霉素的不同药物浓度干预体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞,CCK-8方法检测对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响;免疫组化、RT-PCR和western blot检测干预前后瘢痕疙瘩成纤维细胞中磷酸化的P70s6k、4E-BP1表达情况.结果:CCK-8检测体外培养瘢痕疙瘩成纤维的吸光度,随浓度和时间的增大而减小,各组之间差别具有统计学意义(P<0.05);免疫组化(药物浓度取10nmol/L),RT-PCR和western blot 对不同药物浓度(0.1nmol/L、1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L)干预前后,基因表达和蛋白表达均下降,各组之间差别具有统计学意义(P<0.05).结论:雷帕霉素对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖有明显的抑制作用,也抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中磷酸化的P70s6k、4E-BP1表达. 展开更多
关键词 雷帕霉素 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 MTOR P70S6K 4E-BP1
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4E-BP1、4E-BP1-4A重组慢病毒载体的构建及对胃癌细胞HGC27生长的影响 被引量:1
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作者 罗国兰 王洪涛 +8 位作者 伍飞马 李海量 张晓清 薛萌 王健 李山虎 赵亚丽 刘萱 周建光 《生物技术通讯》 CAS 2013年第2期193-196,共4页
目的:构建4E—BPl及其T37A、T46A、$65A、T70A突变体4E—BPl-4A基因表达的重组慢病毒载体,研究其对胃癌HGC27细胞生长的影响。方法:PCR扩增4E—BPl基因及其突变体aE—BPl-4A基因并克隆到pCDH载体,构建成pCDH-4E—BPl、pCDit一4E—BP... 目的:构建4E—BPl及其T37A、T46A、$65A、T70A突变体4E—BPl-4A基因表达的重组慢病毒载体,研究其对胃癌HGC27细胞生长的影响。方法:PCR扩增4E—BPl基因及其突变体aE—BPl-4A基因并克隆到pCDH载体,构建成pCDH-4E—BPl、pCDit一4E—BPl—4A,将其-9包装载体共转染293T细胞,包装成Lenti-4E—BPl及Lenti-4E—BPl—4A重组慢病毒载体,将此慢病毒感染胃癌HGC27细胞,Western印迹鉴定病毒载体介导的4E—BPl、4E~BPl—4A蛋白的表达,MTT、克隆形成和软琼脂方法研究过量表达4E—BPl、4E—BPl—4A对胃癌HGC27细胞生长的影响。结果:包装成Lenti-4E—BPl及Lenti-4E—BPl—4A重组慢病毒载体,并将此慢病毒载体感染胃癌HGC27细胞;MTT、克隆形成、软琼脂实验表明过量表达4E—BP!可抑制胃癌HGC27细胞的生长,过量表达4E—BP!一4A时抑制效果更明显。结论:构建了4E—BPl、4E—BPI-4A的重组慢病毒表达载体,在胃癌HGC27细胞中过量表达4E—BPl可抑制细胞生长,过量表达4E—BPl-4A的抑制效果更明显。 展开更多
关键词 4E-BP1 4E-BP1-4A 慢病毒载体 胃癌 细胞生长
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黄荆子乙酸乙酯提取物对人绒毛膜癌JEG-3细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制 预览 被引量:1
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作者 邓君 张怡 谭智慧 《中南大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期476-482,共7页
目的:观察黄荆子乙酸乙酯提取物(purified vitexin compound2,VB2)对人类绒毛膜癌JEG-3细胞体外增殖及凋亡活性,及对凋亡相关基因mTOR/4E-BPlmRNA表达的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTF)法检测不同浓度的VB2对JEG-3细胞的... 目的:观察黄荆子乙酸乙酯提取物(purified vitexin compound2,VB2)对人类绒毛膜癌JEG-3细胞体外增殖及凋亡活性,及对凋亡相关基因mTOR/4E-BPlmRNA表达的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTF)法检测不同浓度的VB2对JEG-3细胞的体外增殖活性;Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化;流式细胞分析方法定量检测不同浓度药物作用后细胞凋亡率;RT-PCR法检测mTOR/4E-BPlmRNA水平表达的变化。 展开更多
关键词 绒毛膜癌 JEG-3 黄荆子乙酸乙酯提取物 MTOR 4E-BP1
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mTOR/4E—BP1参与诺考达唑诱导的Dami细胞多倍体化调控
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作者 于卉影 马东初 +2 位作者 蔺迪 孙英慧 陶顺艳 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第33期6426-6430,共5页
目的:多倍性是物种形成的重要机制,决定一些重要器官细胞产生的数量和功能,而且与某些病理过程(如恶性肿瘤)的发生有密切关系。我们通过建立相对同步化的多倍体细胞模型,已经证实mTOR/S6K1参与多倍体细胞周期的调控。本课题主要... 目的:多倍性是物种形成的重要机制,决定一些重要器官细胞产生的数量和功能,而且与某些病理过程(如恶性肿瘤)的发生有密切关系。我们通过建立相对同步化的多倍体细胞模型,已经证实mTOR/S6K1参与多倍体细胞周期的调控。本课题主要研究roTOR下游的另一个重要信号分子4E-BP1是否也参与细胞的倍体化调控。方法:诺考达唑诱导Dami细胞建立相对同步化的多倍体细胞模型,Western-blot分析多倍体细胞模型中mTOR/4E—BP1通路信号分子表达和磷酸化修饰位点的变化,流式细胞仪双荧光分析4E—BP1不同结构域磷酸化位点修饰与细胞周期各时相的关系。结果:诺考达唑诱导的Dami细胞可作为相对同步化的多倍体细胞周期模型,在二倍体和多倍体细胞周期中,mTOR表达增加及第2448位丝氨酸位点磷酸化发生在G1期进入S期,4E—BP1的第37,46位苏氨酸和第65位丝氨酸位点磷酸化发生在G2/M期。结论:mTOR/4E-BP1通路参与多倍体细胞周期的调控。 展开更多
关键词 多倍体 MTOR 4EBP1
mTOR、eIF4E、4E-BP1在宫颈癌组织中的表达及临床意义 预览 被引量:7
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作者 夏百荣 孟凡玲 卢北燕 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2011年第4期301-305,共5页
目的 探讨mTOR、eIF4E、4E-BP1在宫颈癌发生发展中的作用和相关性,为预后判断提供理论依据.方法 采用免疫组织化学SP法检测mTOR、eIF4E、4E-BP1在53例宫颈癌组织、15例宫颈上皮内瘤变组织和13例正常宫颈组织中的表达.结果 (1)mTOR、eI... 目的 探讨mTOR、eIF4E、4E-BP1在宫颈癌发生发展中的作用和相关性,为预后判断提供理论依据.方法 采用免疫组织化学SP法检测mTOR、eIF4E、4E-BP1在53例宫颈癌组织、15例宫颈上皮内瘤变组织和13例正常宫颈组织中的表达.结果 (1)mTOR、eIF4E和4E-BP1在宫颈癌组中的阳性表达显著高于正常组和CIN组(P<0.01),而后两组比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)eIF4E表达与宫颈癌临床分期、淋巴结转移、病理分化程度和术后复发有关(P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05);(3)mTOR表达与宫颈癌术后复发显著相关(P<0.01);(4)4E-BP1表达与宫颈癌临床分期显著相关(P<0.01);(5)mTOR与eIF4E;mTOR与4E-BP1在宫颈癌中的阳性表达均呈显著正相关(P<0.01);(6)生存单因素分析mTOR、eIF4E、4E-BP1均与宫颈癌的预后有关(P<0.01,P<0.05,P<0.05).结论 mTOR、eIF4E、4E-BP1的高表达在宫颈癌发生发展中起重要作用,与预后不良有关. 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 宫颈上皮内瘤变 MTOR EIF4E 4EBP1 免疫组织化学
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磷酸化4E—BPl与恶性肿瘤研究进展
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作者 常成 谷金宇 《国际免疫学杂志》 CAS 北大核心 2011年第5期257-259,263共4页
4E—BPl是真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)的特异性抑制物,近年研究显示,磷酸化形式的4E—BPl(P-4E.BPl)在多种恶性肿瘤如乳腺癌、宫颈癌、甲状腺、前列腺癌、大肠癌等中存在过表达,并且其表达与肿瘤的大小、侵袭、转移能力、预... 4E—BPl是真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)的特异性抑制物,近年研究显示,磷酸化形式的4E—BPl(P-4E.BPl)在多种恶性肿瘤如乳腺癌、宫颈癌、甲状腺、前列腺癌、大肠癌等中存在过表达,并且其表达与肿瘤的大小、侵袭、转移能力、预后等临床病理特征密切相关。因此,阐明P-4E—BPl的表达与肿瘤的生物学行为将有助于全面了解恶性肿瘤的发生、发展、侵袭及转移机制,同时对指导临床诊断和治疗,判断预后有重大意义。更重要的是,P-4E—BPl有可能成为治疗肿瘤的新靶点,为临床治疗肿瘤提供新思路。 展开更多
关键词 翻译起始因子4e结合蛋白1 磷酸化 恶性肿瘤
雷帕霉素抑制食管鳞癌细胞裸鼠移植瘤生长及mTOR/4E—BP1信号通路的活性 预览 被引量:2
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作者 侯桂琴 刘书漫 +3 位作者 王莉莉 贾欣 王丽 薛乐勋 《基础医学与临床》 北大核心 2010年第2期155-158,共4页
目的体内观察雷帕霉素对食管鳞癌细胞生长及mTOR/4E-BP1信号通路的影响。方法给BALB/c裸鼠皮下注射食管鳞癌细胞株(EC9706),建立移植瘤模型,用雷帕霉素及顺铂对肿瘤进行治疗;用RT—PCR及Western blot等观察细胞形态及信号通路中... 目的体内观察雷帕霉素对食管鳞癌细胞生长及mTOR/4E-BP1信号通路的影响。方法给BALB/c裸鼠皮下注射食管鳞癌细胞株(EC9706),建立移植瘤模型,用雷帕霉素及顺铂对肿瘤进行治疗;用RT—PCR及Western blot等观察细胞形态及信号通路中各因子的变化。结果与对照组相比,雷帕霉素对肿瘤生长具有显著抑制作用(P〈0.05),联合顺铂处理组的抑瘤作用更明显;雷帕霉素在体内降低了mTOR和p-4E-BP1的表达,并使4E-BP1的表达水平升高。结论雷帕霉素在体内能明显抑制食管鳞癌细胞EC9706裸鼠移植瘤的生长并抑制roTOR/4E-BP1信号通路的活性。 展开更多
关键词 食管鳞癌 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 4E-BP1 雷帕霉素
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4E-BP1、p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中作用的实验研究 被引量:5
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作者 刘莹 朱祖安 崔涛 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2009年第4期504-507,共4页
目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用。方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、West... 目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用。方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、Western、blot检测肿瘤细胞生长、细胞周期分布及p70S6k、4E-BP1蛋白表达及磷酸化情况。结果:细胞计数结果显示RAD001作用于胃癌细胞株MKN-28,N-87 24h即开始出现对细胞生长的抑制作用,随着作用时间延长至48、72h,抑制作用逐渐增强。流式细胞术结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87细胞株细胞周期发生改变,停滞在G0~G1期细胞比例增加,在实验中显示细胞系N87对于RAD001作用相对敏感。Western-blot结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87的4E-BP1和p70S6K表达下降,同时去磷酸化。结论:RAD001是通过抑制mTOR的活性,进而阻断4E-BP1及p70S6K的磷酸化和蛋白质翻译进而调节着细胞周期以发挥抑制胃癌细胞生长的作用。 展开更多
关键词 mTOR MKN-28 N-87 P70S6K p-p70S6k 4E—-BP1 p-4EBP1
杂色曲霉素诱导胃黏膜上皮细胞细胞周期G2期阻滞 预览 被引量:1
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作者 邢欣 邢凌霄 +5 位作者 李月红 王娟 姚志刚 王俊灵 刘亚玲 张祥宏 《细胞生物学杂志》 2009年第1期89-95,共7页
探讨杂色曲霉素(sterigmatocystin,ST)对体外培养的永生化胃黏膜上皮细胞GES-1细胞周期的影响及细胞周期蛋白D1、真核起始因子eIF4E和其结合蛋白4E—BP1在ST诱导细胞周期变化中的可能作用。采用细胞培养、噻唑蓝(MTT)比色法、流式... 探讨杂色曲霉素(sterigmatocystin,ST)对体外培养的永生化胃黏膜上皮细胞GES-1细胞周期的影响及细胞周期蛋白D1、真核起始因子eIF4E和其结合蛋白4E—BP1在ST诱导细胞周期变化中的可能作用。采用细胞培养、噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞定量检测(FCM)、吉姆萨(Giemsa)染色、蛋白质免疫印迹(Western印迹)以及反转录聚合酶联反应(RT—PCR)等方法,研究不同浓度(100、500、1000、2000LLg/L)ST处理24h后,GES-1细胞的增殖、细胞周期分布及elF4E、4E.BP1及细胞周期蛋白D1表达的变化情况。MTT法检测结果显示,ST可明显抑制GES-1细胞的增殖,ST100、500、1000、2000μg/L处理组的增殖抑制率分别为12.76%、16.35%、21.65%和32.06%。FCM检测结果显示,给予500、1000和2000μg/LST处理24h可剂量依赖性提高G1/M期细胞比例。吉姆萨染色结果表明,在0-2000μg/L的剂量范围内随sT剂量增高,细胞分裂指数逐渐降低,提示ST可诱导胃黏膜上皮细胞周期发生G2期阻滞。Western印迹分析结果显示,在0-2000μg/L浓度范围内,sT可剂量依赖性地上调eIF4E和4E—BP1在蛋白质水平上的表达(eiF4E:r=0.844,P〈0.01:4E.BP1:r=0.930,P〈0.01),而降低eIF4E和4E—BP1的磷酸化水平(peIF4E:r=-0.663,P〈0.01:p4E-BPi:r=-0.656,P〈0.01);同时使细胞周期蛋白D1的表达下降(r=-0.559,P〈0.05)。RT-PCR检测在mRNA水平进-步证实了sT对eIF4E和4E.BP1表达的影响。研究结果表明,ST可抑制体外培养永生化胃黏膜上皮细胞增殖,诱导细胞发生G2期阻滞,4E—BP1表达升高,而eIF4E和4E-BP1的磷酸化水平降低及细胞周期蛋白D1表达下降可能是ST抑制胃黏膜上皮细胞增殖,诱导周期分布变化的重要机制。 展开更多
关键词 杂色曲霉素 EIF4E 4EBP1 细胞周期蛋白D1
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Resveratrol对糖尿病大鼠肾皮质4E-BP1和S6磷酸化表达的影响 被引量:2
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作者 丁大法 游娜 +3 位作者 徐家蓉 蒋秀琴 缪珩 鲁一兵 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2009年第10期1347-1351,共5页
目的:探讨Resveratrol对糖尿病(DM)大鼠早期肾脏肥大的影响及其可能的机制。方法:雄性sD大鼠13只,应用链脲佐菌素诱导建立DM大鼠模型,6只正常sD大鼠作为对照(NC)。DM大鼠于第11周随机分为DM组7只和Resveratrol(DR)组6只,DR... 目的:探讨Resveratrol对糖尿病(DM)大鼠早期肾脏肥大的影响及其可能的机制。方法:雄性sD大鼠13只,应用链脲佐菌素诱导建立DM大鼠模型,6只正常sD大鼠作为对照(NC)。DM大鼠于第11周随机分为DM组7只和Resveratrol(DR)组6只,DR组给予Resveratrol 10mg/(kg·d)灌胃,共4周。第14周收集3组大鼠24h尿测尿微量白蛋白。处死大鼠,心脏取血测血肌酐。取肾组织,制石蜡切片做HE染色,免疫组化观察肾皮质4E—BP1磷酸化蛋白表达量的变化。Western blot检测肾皮质s6磷酸化蛋白表达的改变。结果:与NC组相比,DR和DM组大鼠血糖、24h尿微量白蛋白和血肌酐明显升高,而体重明显降低(P均〈0.01),而用Resveratrol干预后DR组大鼠血糖、24h尿微量白蛋白及血肌好比DM组明显好转(P〈0.05)。肾脏HE染色结果显示,DM组大鼠肾小球系膜基质中度增生,系膜细胞增生,系膜区明显扩大,肾小球体积增大。DR组肾小球系膜细胞和基质增生及。肾小球系膜区扩张较DM组明显减轻。肾皮质免疫组化结果显示,4E—BP1磷酸化蛋白在DM组表达呈强阳性,在DR组表达呈弱阳性。DM和DR组大鼠血管组织中S6磷酸化蛋白的表达明显高于NC组(P〈0.01),而DR组明显低于DM组(P〈0.01)。结论:DM大鼠早期存在肾脏肥大和mTOR信号通路下游的4E.BPl和s6磷酸化蛋白表达增高。Resveratrol可能通过抑制4E-BP1和S6的磷酸化来减轻DM大鼠早期肾脏肥大,延缓糖尿病肾病的发展。 展开更多
关键词 RESVERATROL 糖尿病肾病 大鼠 4EBP1 S6 磷酸化 肥大
内蒙古白绒山羊4E-BP1基因cDNA克隆及组织表达特异性分析
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作者 傅海霞 杨娇馥 +2 位作者 梁燕 陈宇浩 王志钢 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 90-94,共5页
旨在克隆内蒙古白绒山羊4E-BP1(真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1)基因并进行生物信息学及表达模式分析。根据已报道物种4E-BP1基因cDNA序列,用primer premier5软件设计引物,通过RT-PCR从绒山羊胎儿成纤维细胞总RNA中扩增出4E-BP1基... 旨在克隆内蒙古白绒山羊4E-BP1(真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1)基因并进行生物信息学及表达模式分析。根据已报道物种4E-BP1基因cDNA序列,用primer premier5软件设计引物,通过RT-PCR从绒山羊胎儿成纤维细胞总RNA中扩增出4E-BP1基因编码区cDNA序列,对目的片段进行测序及表达模式分析。克隆到的内蒙古白绒山羊4E-BP1基因cDNA全长357 bp,包含了完整的的ORF,编码118个氨基酸残基。核酸序列与牛、马、人、大鼠及小鼠的同源性分别为98%、90%、90%、88%和87%。4E-BP1基因在绒山羊脑、心脏、睾丸及胰腺组织中均有表达。 展开更多
关键词 内蒙古白绒山羊 4E-BP1 组织特异性表达
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