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金丝桃素对口蹄疫病毒的体外抗病毒实验 预览 被引量:12
1
作者 王曙阳 梁剑平 +3 位作者 杨林西 崔颖 尚若峰 罗永江 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第6期 6-9,共4页
本文报道了金丝桃素体外抗口蹄疫病毒(FMDV)的研究结果。采用双抗体捕获抗原法、病毒滴度测定、MTT法、组织细胞培养等方法均检测到抗病毒作用。结果显示:金丝桃素在BHK-21细胞感染FMDV前、后及同时加入,都有明显抑制细胞病变的作... 本文报道了金丝桃素体外抗口蹄疫病毒(FMDV)的研究结果。采用双抗体捕获抗原法、病毒滴度测定、MTT法、组织细胞培养等方法均检测到抗病毒作用。结果显示:金丝桃素在BHK-21细胞感染FMDV前、后及同时加入,都有明显抑制细胞病变的作用。金丝桃素使FMDV的TCID50从8.5下降到6.25。双抗体捕获抗原法检测到金丝桃素有效抑制FMDVBHK-21细胞的吸附、融合,抑制率可达59.72%。研究结果提示:金丝桃素在体外有抗口蹄疫病毒作用,抑制口蹄疫病毒与宿主细胞的吸附、融合是抗病毒的重要途径之一。 展开更多
关键词 金丝桃素 抗口蹄疫病毒 bhk-21细胞 细胞病变
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江苏省自然人群乙型脑炎抗体血清学监测 被引量:11
2
作者 陆培善 邓秀英 +2 位作者 胡莹 高君 马福宝 《实用预防医学》 CAS 2010年第3期490-492,共3页
目的了解江苏省正常人群流行性乙型脑炎(乙脑)免疫状况。方法采用蚀斑减少中和试验对2006-2009年收集的0~20岁血清标本3258份进行乙脑抗体检测。结果乙脑抗体总的阳性率为70.35%,GMT为1:13.56。结论江苏省3岁以上人群乙脑抗体有保... 目的了解江苏省正常人群流行性乙型脑炎(乙脑)免疫状况。方法采用蚀斑减少中和试验对2006-2009年收集的0~20岁血清标本3258份进行乙脑抗体检测。结果乙脑抗体总的阳性率为70.35%,GMT为1:13.56。结论江苏省3岁以上人群乙脑抗体有保护作用,其阳性率及效价随年龄增加而增加,0和1岁组抗体水平较低,应该加强该年龄段人群的保护。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 蚀斑减少中和实验 血清学监测 bhk-21细胞
金丝桃素体外抗口蹄疫病毒与宿主细胞吸附作用研究 预览 被引量:6
3
作者 王曙阳 梁剑平 +4 位作者 陈积红 崔颖 尚若锋 王学红 华兰英 《中兽医医药杂志》 2009年第1期 5-8,共4页
对光活化金丝桃素体外抑制口蹄疫病毒与宿主细胞吸附作用进行实验。体外培养的BHK-21细胞加入金丝桃素,日光灯下光活化1h后感染FMDV。通过细胞病变观察、MTT法、双抗体捕获抗原法、扫描电子显微镜进行抑制FMDV与宿主细胞吸附、融合研... 对光活化金丝桃素体外抑制口蹄疫病毒与宿主细胞吸附作用进行实验。体外培养的BHK-21细胞加入金丝桃素,日光灯下光活化1h后感染FMDV。通过细胞病变观察、MTT法、双抗体捕获抗原法、扫描电子显微镜进行抑制FMDV与宿主细胞吸附、融合研究。结果表明金丝桃素有明显抑制细胞病变的作用。双抗体捕获抗原法检测金丝桃素有效抑制FMDV和BHK-21细胞的吸附、融合,抑制率可达59.72%。扫描电镜观察,金丝桃素组与病毒对照组相比,BHK-21细胞FMDV颗粒明显减少。提示金丝桃素在体外有显著抑制口蹄疫病毒与宿主细胞的吸附、融合作用。 展开更多
关键词 金丝桃素 bhk-21细胞 细胞病变 口蹄疫病毒 吸附
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猪乙脑病毒CSF.XZ-2D株的分离鉴定及其体外培养特性研究 预览 被引量:5
4
作者 滕蔓 罗俊 +5 位作者 樊剑鸣 王兴涛 王方雨 柴书军 杨继飞 张改平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期 274-278,共5页
为了解河南省规模化猪场日本乙型脑炎病毒(JEV)流行株的特征,本研究对临床流产胎儿脑脊液进行病毒盲传分离,经RT-PCR等分子生物学方法及乳鼠感染试验,分离鉴定了1株基因Ⅲ型JEV株,命名为CSF.XZ-2D。采用BHK-21细胞对该分离株的体外培... 为了解河南省规模化猪场日本乙型脑炎病毒(JEV)流行株的特征,本研究对临床流产胎儿脑脊液进行病毒盲传分离,经RT-PCR等分子生物学方法及乳鼠感染试验,分离鉴定了1株基因Ⅲ型JEV株,命名为CSF.XZ-2D。采用BHK-21细胞对该分离株的体外培养特性进行研究,结果表明,在25 cm2细胞瓶中,用1.25×106个细胞/瓶的初始量制备细胞单层,以较低剂量的病毒液吸附细胞并洗涤弃去游离病毒粒子,可在感染后60 h达到最大增殖量,病毒效价为105.0TCID50/0.1 mL以上。本研究为其他JEV分离株的体外培养提供了参考。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 分离鉴定 脑脊液 bhk-21细胞 体外培养
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伪狂犬病病毒吉林分离株感染BHK-21细胞的超微结构变化 被引量:5
5
作者 初小辉 常灵竹 +3 位作者 骆艳秋 贺文琦 陈克研 高丰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1663-1667,共5页
以猪伪狂犬病病毒(PRV)吉林分离株PRV-JL感染体外培养的BHK-21细胞为模型,通过透射电镜对PRV的形态发生学和宿主细胞超微结构的动态变化规律进行研究。结果显示,PRV能导致BHK-21细胞圆缩,并发生细胞融合,形成合胞体;电镜观察到的病毒... 以猪伪狂犬病病毒(PRV)吉林分离株PRV-JL感染体外培养的BHK-21细胞为模型,通过透射电镜对PRV的形态发生学和宿主细胞超微结构的动态变化规律进行研究。结果显示,PRV能导致BHK-21细胞圆缩,并发生细胞融合,形成合胞体;电镜观察到的病毒粒子呈球形或椭圆形,成熟的病毒粒子直径大小为140~210 nm,未成熟病毒粒子直径为90~150 nm,多呈中空状,部分呈致密核芯。病毒吸附于细胞后以膜融合的方式进入细胞,在胞核内复制,装配好的病毒粒子以出芽的方式离开细胞核,获得最初的囊膜,进入胞浆;在胞浆内的病毒粒子又利用高尔基体的膜结构合成第2层囊膜,形成完整的病毒粒子;最后包裹有完整病毒粒子的高尔基囊泡与细胞膜发生融合,将病毒粒子释放到细胞外。感染细胞超微结构变化主要表现为:细胞胞浆空泡增多,内质网扩张,线粒体增生、嵴肿胀、脱落,最后空泡化,整个细胞裂解、破碎。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 bhk-21细胞 超微结构
人源性双亲性穿膜肽PKV14的合成及其对BHK-21细胞的影响
6
作者 陈莹 宋金春 刘岩松 《现代药物与临床》 CAS 2018年第10期2482-2486,共5页
目的合成人源性双亲性穿膜肽RRTLRRRRAAQRCG(PKV14),并研究其细胞穿膜效果和对细胞活性的影响。方法采用固相合成法合成PKV14,采用高效液相色谱和质谱对PKV14进行验证,使用荧光显微镜和酶标仪观察PKV14在BHK-21细胞系中的穿膜效果,采... 目的合成人源性双亲性穿膜肽RRTLRRRRAAQRCG(PKV14),并研究其细胞穿膜效果和对细胞活性的影响。方法采用固相合成法合成PKV14,采用高效液相色谱和质谱对PKV14进行验证,使用荧光显微镜和酶标仪观察PKV14在BHK-21细胞系中的穿膜效果,采用MTT实验法检测PKV14的细胞毒性。结果合成了PKV14肽段,并且PKV14对于BHK-21细胞系的穿膜效率极高,细胞毒性实验表明PKV14对BHK-21细胞活性无影响。结论 PKV14是具有高穿膜活性,安全低毒的新型人源性细胞穿膜肽,有作为药物载体的潜力。 展开更多
关键词 人源性双亲性穿膜肽 PKV14 穿膜活性 bhk-21细胞
动物细胞大规模培养中细胞凋亡检测方法的研究 预览 被引量:4
7
作者 武发菊 刘学荣 +6 位作者 尚勇良 安芳兰 董文教 宋玉霞 董金杰 陈苗苗 牟克斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第12期 235-239,共5页
为了探讨动物细胞大规模培养中细胞凋亡的检测方法,以不同浓度氯化铵诱导BHK-21细胞凋亡,每隔12 h收集细胞,采用台盼兰形态学排染法、吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法、FITC-Annexin V/PI双染色荧光显微镜观察法、原位缺口末端标记法(T... 为了探讨动物细胞大规模培养中细胞凋亡的检测方法,以不同浓度氯化铵诱导BHK-21细胞凋亡,每隔12 h收集细胞,采用台盼兰形态学排染法、吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法、FITC-Annexin V/PI双染色荧光显微镜观察法、原位缺口末端标记法(TUNEL)、DNA凝胶电泳、流式细胞术(FCM)法进行细胞凋亡的检测。通过比较发现,不同方法检测结果都存在着显著性差异,但吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法是一种简单、易行、准确、全面定性细胞凋亡的较为可靠的方法,而FITC-Annexin V/PI双染色流式细胞仪能特异地、准确地检出早期凋亡的细胞,是较为理想的凋亡定量检测方法。这2种方法的联合运用更适应于动物细胞大规模培养过程中细胞凋亡的检测。 展开更多
关键词 bhk-21细胞 大规模培养 细胞凋亡 检测方法
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鸭坦布苏病毒感染对BHK-21细胞分泌胞外体的影响 预览
8
作者 周晓雅 周祺 +5 位作者 殷冬冬 唐井玉 邢雪 董靖 刘红梅 王桂军 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期161-166,共6页
目的:探讨鸭坦布苏病毒感染BHK-21细胞对胞外体的影响,进一步研究鸭坦布苏病毒的致病机制。方法:利用鸭坦布苏病毒AH-F10株感染BHK-21细胞,并设置未感染病毒的对照组。用PEG法提取感染病毒的BHK-21细胞和对照组细胞上清中的胞外体,通... 目的:探讨鸭坦布苏病毒感染BHK-21细胞对胞外体的影响,进一步研究鸭坦布苏病毒的致病机制。方法:利用鸭坦布苏病毒AH-F10株感染BHK-21细胞,并设置未感染病毒的对照组。用PEG法提取感染病毒的BHK-21细胞和对照组细胞上清中的胞外体,通过电镜观察、Western blot检测对胞外体进行鉴定,并对提取的两组胞外体进行质谱鉴定分析。结果:电镜观察到纯度高的内部色浅、边缘浓染的杯状囊泡,直径30-160 nm。感染组胞外体的平均粒径大小大于对照组胞外体的平均粒径大小。Western blot试验中,均检测出CD9、CD63分子。应用液相质谱法从胞外体中鉴定出106种蛋白,其中感染坦布苏病毒组共检测出84种蛋白,对照组49种蛋白,有27种共同蛋白分子。结论:鸭坦布苏病毒感染BHK-21细胞会影响细胞胞外体的分泌,影响胞外体粒径大小及其蛋白组成成分。本试验为进一步研究坦布苏病毒的感染和致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 bhk-21细胞 胞外体 质谱分析
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TPL2促进口蹄疫病毒在BHK-21细胞复制
9
作者 魏南南 徐守兴 +4 位作者 史喜娟 卢炳州 张克山 郑海学 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1204-1211,共8页
为研究肿瘤进行性位点2(TPL2)在仓鼠肾细胞(BHK-21)中对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响,使用FMDV感染BHK-21细胞,通过qRT-PCR技术检测FMDV感染对内源性TPL2转录水平的影响;根据GenBank公布的TPL2基因序列(NM007746.2)设计构建TPL2... 为研究肿瘤进行性位点2(TPL2)在仓鼠肾细胞(BHK-21)中对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响,使用FMDV感染BHK-21细胞,通过qRT-PCR技术检测FMDV感染对内源性TPL2转录水平的影响;根据GenBank公布的TPL2基因序列(NM007746.2)设计构建TPL2的真核表达质粒以及设计并合成宿主TPL2的RNAi序列,利用脂质体方法转染BHK-21细胞,通过qRT-PCR和Western blotting技术分析TPL2在BHK-21细胞过表达和干扰对FMDV复制的影响。结果表明,FMDV感染BHK-21细胞后,TPL2转录水平显著上调;过表达TPL2能够促进FMDV在BHK-21细胞中复制,而下调表达内源性TPL2后FMDV的复制受到抑制,表明TPL2促进FMDV在BHK-21细胞中进行复制,本结果进一步拓展了我们对FMDV与天然免疫机制之间关系的认识,同时为TPL2的相关研究积累了科学资料。 展开更多
关键词 TPL2 口蹄疫病毒 FMDV bhk-21细胞 天然免疫 复制
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氨对悬浮培养幼仓鼠肾细胞(BHK-21)生长代谢的影响 预览 被引量:3
10
作者 武发菊 尚勇良 +7 位作者 安芳兰 董文教 宋玉霞 董金杰 陈苗苗 牟克斌 黄银君 刘学荣 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2011年第2期28-32,共5页
【目的】研究在幼仓鼠肾细胞(BHK-21)悬浮培养过程中,不同浓度氨对其生长代谢的影响。【方法】用添加0,1.8,2.5,5.5,8.0和15.0 mmol/L氨的培养基培养BHK-21细胞,每隔12 h取样1次,用细胞计数仪进行细胞计数,测定细胞活力,采用AO/EB双... 【目的】研究在幼仓鼠肾细胞(BHK-21)悬浮培养过程中,不同浓度氨对其生长代谢的影响。【方法】用添加0,1.8,2.5,5.5,8.0和15.0 mmol/L氨的培养基培养BHK-21细胞,每隔12 h取样1次,用细胞计数仪进行细胞计数,测定细胞活力,采用AO/EB双染色法和Annexin V-FITC/PI流式细胞仪2种方法检测细胞的凋亡情况,同时测定细胞培养过程中葡萄糖、氨和乳酸浓度的变化。【结果】在BHK-21细胞连续培养过程中,当氨的添加浓度低于1.8 mmol/L时,其对细胞的生长几乎不产生抑制作用,细胞活性、细胞总数与对照组差异不显著,未出现细胞聚集成团现象;当氨添加浓度达到15.0 mmol/L时,BHK-21细胞直接进入死亡期;当氨的添加浓度为2.5~8.0 mmol/L时,氨对细胞生长的抑制作用由弱变强,这种抑制作用在细胞培养至24 h开始出现。另外,随着氨添加浓度的增加,葡萄糖的消耗量减少,细胞代谢产生的乳酸和氨降低。【结论】氨对悬浮培养的BHK-21细胞的生长和代谢有显著影响。 展开更多
关键词 细胞培养 bhk-21细胞 氨抑制 细胞凋亡
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Asia 1型FMDV感染BHK-21细胞差异蛋白质点2-DE分析 被引量:3
11
作者 刘永杰 张克山 +5 位作者 尚佑军 郭建宏 郑海学 田宏 卢国栋 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期145-149,共5页
为研究Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)感染BHK-21细胞后蛋白质组的变化及差异,将FMDV接种于培养的单层BHK-21细胞,同时设未接毒的BHK-21细胞作对照组。待细胞病变后分别提取2组细胞总蛋白借助2-DE技术及PDQuest8.0软件进行细胞蛋白质组二... 为研究Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)感染BHK-21细胞后蛋白质组的变化及差异,将FMDV接种于培养的单层BHK-21细胞,同时设未接毒的BHK-21细胞作对照组。待细胞病变后分别提取2组细胞总蛋白借助2-DE技术及PDQuest8.0软件进行细胞蛋白质组二维电泳图谱差异性分析。结果显示感染组有1 457个可见蛋白质点,而对照组可见的蛋白质点为1 427个。感染组蛋白点的表达量与对照组相比,二者具有统计学差异(P〈0.05)的蛋白质点472个,其中表达上调251个点,表达下调221个点,新合成蛋白点30个。结果表明FMDV感染BHK-21细胞后引起了细胞蛋白质组表达模式的改变,这种变化是病毒与细胞相互作用的结果。本研究首次利用蛋白质组学技术研究Asia 1型FMDV感染BHK-21细胞后蛋白质组学差异,有助于深入研究Asia 1型FMDV和BHK-21细胞相互作用的分子机制。 展开更多
关键词 Asia1型FMDV bhk-21细胞 感染 差异蛋白质组
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siRNA抑制口蹄疫病毒在BHK-21细胞中复制的研究 预览 被引量:3
12
作者 王伟利 陈立军 +2 位作者 赵明秋 琚春梅 陈金顶 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期 116-118,共3页
选取口蹄疫病毒(FMDV)的VP1、IRES、2B、3D和L基因保守序列,设计、合成siRNA,并成功构建表达siRNA的穿梭载体,通过脂质体2000在BHK-21细胞上转染6个重组siRNA表达质粒,观察其对FMDV S72毒株复制的抑制效果.结果发现:病毒对照和空载... 选取口蹄疫病毒(FMDV)的VP1、IRES、2B、3D和L基因保守序列,设计、合成siRNA,并成功构建表达siRNA的穿梭载体,通过脂质体2000在BHK-21细胞上转染6个重组siRNA表达质粒,观察其对FMDV S72毒株复制的抑制效果.结果发现:病毒对照和空载体对照细胞死亡脱落,脂质体2000对照和细胞对照细胞状态良好;6个siR-NA转染孔细胞状态明显优于病毒对照孔,表明6个重组质粒转染后均可以显著抑制FMDV S72毒株的复制,其中靶向IRES1基因的siRNA对FMDV的复制抑制最为明显. 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 RNA干扰 SIRNA bhk-21细胞
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山羊痘病毒诱导BHK-21细胞凋亡的检测 预览 被引量:2
13
作者 程振涛 岳筠 +5 位作者 周碧君 王开功 文明 李永明 许乐仁 朱时杰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期 49-54,共6页
为验证山羊痘病毒诱导BHK-21细胞出现凋亡现象的存在,分别采用HE染色、凋亡试剂盒检测、流式细胞仪检测和DNA Ladder检测,对山羊痘病毒感染的BHK-21细胞培养物进行细胞凋亡检测。不同方法检测结果均显示,山羊痘病毒感染BHK-21细胞组相... 为验证山羊痘病毒诱导BHK-21细胞出现凋亡现象的存在,分别采用HE染色、凋亡试剂盒检测、流式细胞仪检测和DNA Ladder检测,对山羊痘病毒感染的BHK-21细胞培养物进行细胞凋亡检测。不同方法检测结果均显示,山羊痘病毒感染BHK-21细胞组相同时间细胞凋亡数明显高于对照组。表明山羊痘病毒可诱导BHK-21细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 bhk-21细胞 细胞凋亡 检测
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口蹄疫病毒感染BHK—21细胞的代谢热谱研究 预览
14
作者 吴继彬 刘欲文 +5 位作者 张恒 顾潮江 郑从义 屈三甫 汪存信 常惠芸 《中国病毒学》 CSCD 2003年第3期 283-287,共5页
本文应用高灵敏度的LKB2277生物活性检测仪测定FMDV感染BHK-21细胞的代谢热谱,并与传统方法测定的一步生长曲线进行比较,二者具有显著的相似性.结果表明,微量热法通过对细胞及其受病毒感染的细胞体系代谢热的测定,能有效地监测病毒在宿... 本文应用高灵敏度的LKB2277生物活性检测仪测定FMDV感染BHK-21细胞的代谢热谱,并与传统方法测定的一步生长曲线进行比较,二者具有显著的相似性.结果表明,微量热法通过对细胞及其受病毒感染的细胞体系代谢热的测定,能有效地监测病毒在宿主细胞内增殖的过程.该方法还提供了一种动态连续分析病毒感染增殖的新手段. 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 感染 bhk-21细胞 代谢热谱 一步生长曲线
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猪带绦虫AgB与猪CD58或IFN-γ共表达质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达 被引量:1
15
作者 侯俊玲 景志忠 +6 位作者 郑亚东 胡志敏 骆学农 蒙学莲 窦永喜 刘军龙 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期 694-699,共6页
猪囊尾蚴病是一种重要的人畜共患病,研制有效、安全、廉价的疫苗是当前主要的研究方向之一。本试验通过PCR方法,从含猪囊尾蚴B抗原(AgB)、猪CD58和猪IFN-γ的重组克隆质粒中扩增出AgB、CD58和IFN-γ基因,然后将其克隆到真核表达载体pB... 猪囊尾蚴病是一种重要的人畜共患病,研制有效、安全、廉价的疫苗是当前主要的研究方向之一。本试验通过PCR方法,从含猪囊尾蚴B抗原(AgB)、猪CD58和猪IFN-γ的重组克隆质粒中扩增出AgB、CD58和IFN-γ基因,然后将其克隆到真核表达载体pBudCE4.1中。重组表达质粒鉴定后,在脂质体作用下转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光(IFA)或直接免疫荧光试验分别检测AgB、CD58和IFN-γ在BHK-21中的表达。结果显示,AgB、CD58和IFN-γ在BHK-21细胞中都成功表达,这为研制抗猪囊尾蚴DNA疫苗奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 AGB CD58 IFN-Γ 转染 bhk-21细胞
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猪α干扰素在BHK-21细胞中的表达与生物活性分析 被引量:2
16
作者 肖红冉 王大伟 +4 位作者 贺志锐 王鹏雁 倪伟 胡圣伟 陈创夫 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2013年第2期182-186,共5页
为了构建猪α-干扰素(PoIFN-α)的真核表达系统,鉴定其生物学活性,分离猪的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增猪α-干扰素基因序列,克隆至pcDNA3.1(+)载体,并转染BHK-21细胞。通过G418筛选获得稳定转染的细胞株,采用rea... 为了构建猪α-干扰素(PoIFN-α)的真核表达系统,鉴定其生物学活性,分离猪的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增猪α-干扰素基因序列,克隆至pcDNA3.1(+)载体,并转染BHK-21细胞。通过G418筛选获得稳定转染的细胞株,采用real-time PCR及ELISA测定PoIFN-α基因在BHK-21细胞内的表达,利用淋巴细胞增值试验(MTT)检测表达蛋白的生物学活性。结果表明:稳定整合PoIFN-α基因的BHK-21细胞系其PoIFN-αmRNA的转录效率比阴性对照组提高1.52倍,蛋白表达量显著提高1.35倍。MTT试验表明真核表达PoIFN-α淋巴细胞增值活性与阴性对照组相比差异显著(P〈0.01),表明BHK-21细胞表达的PoIFN-α具有良好的生物学活性,为开发新型抗病毒制剂奠定基础。 展开更多
关键词 猪Α干扰素 bhk-21细胞 生物活性分析
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不同新生牛血清对体外培养BHK-21细胞的影响 被引量:2
17
作者 孙招金 陈柄企 +3 位作者 王玲 叶贺佳 童菊芸 罗开健 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第7期862-864,共3页
目的比较不同新生牛血清对体外培养的BHK-21细胞的影响。方法以不同厂家和同一厂家不同批次的共6种新生牛血清培养BHK-21细胞,观察细胞传代后在不同血清培养条件下的形态、增长倍数和细胞维持时间。结果6号血清培养的细胞生长状态最好... 目的比较不同新生牛血清对体外培养的BHK-21细胞的影响。方法以不同厂家和同一厂家不同批次的共6种新生牛血清培养BHK-21细胞,观察细胞传代后在不同血清培养条件下的形态、增长倍数和细胞维持时间。结果6号血清培养的细胞生长状态最好,增长倍数最高,维持细胞存活时间最长;3号血清培养效果次之;2号、4号和5号血清培养的细胞至第4天仍未长满单层;1号血清培养的细胞基本未生长。结论不同厂家和同一厂家不同批次的新生牛血清对BHK-21细胞体外培养的效果存在差异。 展开更多
关键词 血清 bhk-21细胞 细胞形态
准噶尔雅罗鱼β-肌动蛋白基因启动子的克隆及其活性功能初步检测 预览 被引量:1
18
作者 胡文革 郝凤霞 +2 位作者 陈创夫 王远志 任艳 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期 1029-1036,共8页
以开发利用新疆濒危鱼类准噶尔雅罗鱼(Leuciscus merzbacheri)基因资源为研究目的,利用PCR技术克隆准噶尔雅罗鱼的β-actin基因,得到的β-actin基因片段SZ21包含启动调控区,大小为2398bp。SZ21的启动调控区包括β-actin基因上游调控... 以开发利用新疆濒危鱼类准噶尔雅罗鱼(Leuciscus merzbacheri)基因资源为研究目的,利用PCR技术克隆准噶尔雅罗鱼的β-actin基因,得到的β-actin基因片段SZ21包含启动调控区,大小为2398bp。SZ21的启动调控区包括β-actin基因上游调控序列、第1、第2、第3和第4外显子部分序列。上游调控序列中含有对转录起重要作用的CAAT框、TATA框和CArG框等元件。对启动子序列在线分析表明,获得的启动子含有E-box、RU49、ZBPF、CEBP、CREB等多个重要转录因子结合位点。用AatⅡ破坏真核表达载体pEGFP-N1-AFPⅢ中的CMV启动子,将准噶尔雅罗鱼的SZ21启动调控区克隆到载体pEGFP-N1-AFPⅢ(CMV坏)上,构建成重组表达载体β2pEGFP-N1-AFPⅢ。脂质体转染BHK-21细胞。结果表明,克隆的准噶尔雅罗鱼β-actin基因启动子SZ21具有启动EGFP报告基因在哺乳动物细胞中表达的活性。通过BHK-21绿色荧光细胞的传代证实,克隆的启动子具有持续启动蛋白基因表达的活性,在细胞传代中可以遗传。PCR检测传代的BHK-21绿色荧光细胞基因组DNA,均能检测到SZ21目的片段。文章成功分离了具有活性功能的准噶尔雅罗鱼β-actin基因启动子。 展开更多
关键词 准噶尔雅罗鱼 β-肌动蛋白启动子 脂质体转染 bhk-21细胞 活性功能
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辛德毕斯病毒在BHK—21细胞中繁殖过程的研究 预览 被引量:2
19
作者 梁凤霞 谢建新 +2 位作者 张琼 丁明孝 翟中和 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期 161-165,共5页
辛德毕斯病毒(Sindbis virus)在 BHK-21细胞中繁殖的一步生长曲线表明,病毒感染后2小时便可产生大量的子代病毒;感染后6小时,病毒滴度达到最高峰,为10~9TCID_(50)/ml。电镜技术显示了病毒粒子的形态结构与形态发生过程。本文还对 SbV ... 辛德毕斯病毒(Sindbis virus)在 BHK-21细胞中繁殖的一步生长曲线表明,病毒感染后2小时便可产生大量的子代病毒;感染后6小时,病毒滴度达到最高峰,为10~9TCID_(50)/ml。电镜技术显示了病毒粒子的形态结构与形态发生过程。本文还对 SbV 的代谢合成动态及对宿主细胞的影响进行了研究和讨论。 展开更多
关键词 辛德毕斯病毒 bhk-21细胞 繁殖
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不同浓度葡萄糖和谷氨酰胺对BHK-21细胞凋亡的影响 预览 被引量:1
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作者 武发菊 尚勇良 +6 位作者 安芳兰 董文教 宋玉霞 鲍士兵 陈苗苗 牟克斌 刘学荣 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第3期 51-55,共5页
研究葡萄糖和谷氨酰胺两种重要营养物质对BHK-21细胞凋亡的影响,在BHK-21细胞体外培养过程中,加入不同浓度的葡萄糖和谷氨酰胺,每隔24 h取样细胞计数,活性分析和细胞凋亡率的测定。结果发现,当葡萄糖浓度降至0 mmol/L-4 mmol/L,谷氨酰... 研究葡萄糖和谷氨酰胺两种重要营养物质对BHK-21细胞凋亡的影响,在BHK-21细胞体外培养过程中,加入不同浓度的葡萄糖和谷氨酰胺,每隔24 h取样细胞计数,活性分析和细胞凋亡率的测定。结果发现,当葡萄糖浓度降至0 mmol/L-4 mmol/L,谷氨酰胺浓度降至0 mmol/L-1 mmol/L时,细胞生长速率降低,细胞培养至48 h就开始大量凋亡,细胞活性也随之下降。可见,葡萄糖和谷氨酰胺的浓度对BHK-21细胞的活性和细胞凋亡有着显著性的影响。 展开更多
关键词 bhk-21细胞 葡萄糖 谷氨酰胺 细胞凋亡
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