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不同饲养方式下奶牛感染BPIV-3、Brucella的血清学流行病学调查 预览
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作者 马淑一 马大山 +1 位作者 白雪 何珊 《包头医学院学报》 CAS 2019年第3期78-79,83共3页
目的:了解不同的饲养方式下奶牛感染牛副流感3型病毒(Bovine parainfluenza virus type3,BPIV-3)及布鲁氏菌(Brucella)的状况,为提高奶牛的繁殖率提供科学依据。方法:采用完全随机抽样的方法,抽取内蒙西部地区散养牛共151头、其中伴有... 目的:了解不同的饲养方式下奶牛感染牛副流感3型病毒(Bovine parainfluenza virus type3,BPIV-3)及布鲁氏菌(Brucella)的状况,为提高奶牛的繁殖率提供科学依据。方法:采用完全随机抽样的方法,抽取内蒙西部地区散养牛共151头、其中伴有流产、子宫炎的成母牛和肺炎等症状的犊牛40头。养牛场集中饲养牛共176头,其中伴有流产、子宫炎的成母牛和肺炎等症状的犊牛49头。共计327头作为研究对象。采用ELISA方法检测血清,测定其感染性抗体。结果:集中饲养牛组BPIV-3抗体和Brucella抗体检出率分别为9.09%和25.57%,散养组BPIV-3抗体和Brucella抗体检出率为分别为3.31%和11.92%,两组BPIV-3抗体和Brucella抗体检出率比较均有统计学意义(χ^2=4.52,P<0.05;χ^2=9.73,P<0.05);伴有流产、子宫炎的成母牛和肺炎等症状的犊牛集中饲养牛组BPIV-3抗体和Brucella抗体检出率为分别为30.61%和85.71%,散养牛组BPIV-3抗体和Brucella抗体检出率为分别为为12.05%和37.50%,两组BPIV-3抗体和Brucella抗体检出率均有统计学意义(χ^2=4.15,P<0.05;χ^2=22.23,P<0.05);两组BPIV-3、Brucella的混合感染率有统计学意义(χ^2=6.328,P<0.05)。结论:饲养方式会影响奶牛的繁殖率,且集中饲养方式的感染率明显大于散养。 展开更多
关键词 饲养方式 牛副流感3型病毒 布鲁氏菌 血清学调查
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蚀斑法分离纯化BHV-1和BPIV-3混合病毒 预览
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作者 马玉梅 张海霞 +6 位作者 包晓婧 令瑛 李向茸 李琼毅 魏嘉 李倬 冯若飞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期37-38,42共3页
利用蚀斑试验方法对牛疱疹病毒1型(BHV-1)和牛副流感病毒3型(BPIV-3)的混合病毒进行分离纯化及鉴定,为BHV-1、BPIV-3感染的诊断提供科学依据。将不同稀释度的BHV-1和BPIV-3混合病毒接种至牛肾原代细胞,加营养琼脂培养,产生蚀斑后扩... 利用蚀斑试验方法对牛疱疹病毒1型(BHV-1)和牛副流感病毒3型(BPIV-3)的混合病毒进行分离纯化及鉴定,为BHV-1、BPIV-3感染的诊断提供科学依据。将不同稀释度的BHV-1和BPIV-3混合病毒接种至牛肾原代细胞,加营养琼脂培养,产生蚀斑后扩增并RT-PCR鉴定。将纯化后毒液分别进行二次蚀斑纯化及鉴定。结果 BHV-1和BPIV-3混合病毒第6-7 d可产生明显蚀斑。鉴定阳性的BHV-1和BPIV-3进行二次蚀斑,鉴定结果均为阳性,且分离的两种病毒TCID_(50)测定结果为10-(-8.5)/0.1 m L、10-(-6.5)/0.1 m L。首次通过蚀斑试验,成功分离并得到了两株毒力较高且纯化的BHV-1和BPIV-3病毒株。 展开更多
关键词 牛疱疹病毒1型 牛副流感病毒3 蚀斑试验 病毒分离 病毒纯化
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奶牛场主要病毒性繁殖障碍疫病感染情况调查 预览 被引量:3
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作者 罗玉江 李静 +3 位作者 苏贵成 屈勇刚 曹树珠 李岩 《中国动物检疫》 CAS 2015年第6期15-17,共3页
[目的]调查4个奶牛场主要病毒性繁殖障碍疫病的感染情况,为进一步进行病原学研究,揭示其致病作用,以及为制定防治措施奠定基础。[方法]选取4个规模化奶牛场,采集死胎、流产胎儿的肺、肝、脾、肾、淋巴结等组织,伴有肺炎症状犊牛的... [目的]调查4个奶牛场主要病毒性繁殖障碍疫病的感染情况,为进一步进行病原学研究,揭示其致病作用,以及为制定防治措施奠定基础。[方法]选取4个规模化奶牛场,采集死胎、流产胎儿的肺、肝、脾、肾、淋巴结等组织,伴有肺炎症状犊牛的鼻拭子和耳组织,腹泻犊牛粪便,初乳以及冻精样品,共计248份。采用实时荧光RT-PCR/PCR检测方法,对牛病毒性腹泻/黏膜病病毒(BVDV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)进行检测。[结果]发现BVDV、BPIV-3、IBRV的总阳性率分别为11.29%(28/248)、10.00%(18/180)、9.26%(15/162)。[结论]这4个奶牛场存在BVDV、BPIV-3、IBRV的感染,调查结果为规模化奶牛场繁殖障碍类主要病毒性疫病的防控提供了流行病学数据。 展开更多
关键词 BVDV BPI-3 IBRV 实时荧光RT-PCR/PCR
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BRSV和BPIV-3双重PCR检测方法的建立及初步应用 预览 被引量:5
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作者 王嵩 林红丽 +5 位作者 王宇鹏 刘振格 王杰 杨明发 余丽芸 侯喜林 《黑龙江八一农垦大学学报》 2014年第5期35-38,共4页
为建立一种快速诊断牛呼吸道合胞体病毒(BRSV),牛副流感病毒3型(BPIV-3)病毒病的方法,根据Genbank中登录的BRSV核衣壳蛋白N基因序列和BPIV-3的核衣壳蛋白N基因序列,利用分子生物学软件Primer5.0设计2对特异引物,经过条件优化,建立了... 为建立一种快速诊断牛呼吸道合胞体病毒(BRSV),牛副流感病毒3型(BPIV-3)病毒病的方法,根据Genbank中登录的BRSV核衣壳蛋白N基因序列和BPIV-3的核衣壳蛋白N基因序列,利用分子生物学软件Primer5.0设计2对特异引物,经过条件优化,建立了BRSV和BPIV-3的双重PCR检测方法。采用该方法检测BRSV和BPIV-3参考毒株,特异性良好。对参考毒株进行梯度稀释检测,结果该方法检测BRSV的敏感性可达10 TCID50·100μL^-1,BPIV-3可达10 TCID50·100μL^-1。应用建立的双重PCR方法能够从临床样品中检测出BRSV和BPIV-3。表明建立的双重PCR方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于BRSV和BPIV-3的临床检测。 展开更多
关键词 牛呼吸道合胞体病毒 牛副流感病毒3 双重反转录聚合酶链反应
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沙冬青总黄酮体外抗BPIV-3的试验研究 预览 被引量:2
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作者 张嘉男 陶波 +2 位作者 黄志浩 方梅 贾宁 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期6-10,共5页
【目的】研究沙冬青总黄酮体外抗牛副流感病毒Ⅲ型(BPIV-3)的作用,并对其抗病毒作用机制进行探讨.【方法】以细胞存活率和抑制率为指标,采用MTT比色法检测沙冬青总黄酮抗BPIV-3活性.分别以感染病毒同时给药、给药后接种病毒、先感染... 【目的】研究沙冬青总黄酮体外抗牛副流感病毒Ⅲ型(BPIV-3)的作用,并对其抗病毒作用机制进行探讨.【方法】以细胞存活率和抑制率为指标,采用MTT比色法检测沙冬青总黄酮抗BPIV-3活性.分别以感染病毒同时给药、给药后接种病毒、先感染病毒后给药3种方式观察沙冬青总黄酮对BPIV-3病毒的抑制效果.【结果】沙冬青总黄酮的安全浓度为0.187mg/mL,病毒半数细胞感染量(TCID50)为10-7.733/0.1mL.在安全浓度范围内,沙冬青总黄酮具有良好的抗BPIV-3作用,且这种作用呈一定的量效关系.当浓度为0.187mg/mL时,BPIV-3抑制率达89.43%,细胞存活率高达96.66%;当浓度为0.187mg/mL时,阻断抑制率达68.36%,而细胞存活率达到86.98%;当浓度为0.187mg/mL时,对BPIV-3复制抑制效果最明显,达到50.55%,而细胞存活率达到78.81%.同时,在安全浓度范围内,沙冬青总黄酮直接杀灭BPIV-3病毒的效力较阻断作用和抑制作用更强.【结论】沙冬青总黄酮具有良好体外抗牛副流感病毒Ⅲ型(BPIV-3)的作用. 展开更多
关键词 沙冬青总黄酮 抗病毒作用 BPIV-3 体外试验
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牛副流感病毒3型血凝素-神经氨酸酶蛋白在杆状病毒中的表达 被引量:1
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作者 卢元赫 张玲玲 +7 位作者 张峣 任博雯 祝子涵 冉旭华 倪宏波 刘阳阳 李维香 闻晓波 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期360-364,共5页
目的在杆状病毒中表达牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type-3,BPIV-3)血凝素-神经氨酸酶蛋白(hemagglutinin-neuraminidase,HN)。方法提取BPIV-3 BN-1株RNA,设计特异性引物扩增HN全长ORF,将其克隆至杆状病毒供体载体p ... 目的在杆状病毒中表达牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type-3,BPIV-3)血凝素-神经氨酸酶蛋白(hemagglutinin-neuraminidase,HN)。方法提取BPIV-3 BN-1株RNA,设计特异性引物扩增HN全长ORF,将其克隆至杆状病毒供体载体p Fast Bac HTA中,获得重组供体质粒p Fast Bac-HN。将p Fast Bac-HN转化至感受态细胞E.coli DH10Bac,制备穿梭质粒Bacmid-HN。将纯化的Bacmid-HN经脂质体转染至Sf21昆虫细胞,拯救重组杆状病毒,并进行Western blot鉴定。结果经PCR及测序鉴定证明,HN基因重组供体质粒p Fast Bac-HN及穿梭质粒Bacmid-HN构建正确。利用Sf21昆虫细胞成功拯救重组杆状病毒,连续传代扩增3代的病毒滴度为2×10^8 CPE/ml。重组HN蛋白的相对分子质量约70 000,可与BPIV-3阳性血清发生特异性反应。结论在杆状病毒表达系统中成功表达了BPIV-3重组HN蛋白,为BPIV-3的诊断及疫苗效力评价奠定了基础。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3 血凝素-神经氨酸酶蛋白 杆状病毒 真核细胞 基因表达
牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒和牛副流感病毒3型三重RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:7
7
作者 索阳 陈继勇 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第6期10-13,共4页
根椐GenBank中牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)和牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV-3)3种病毒基因序列,设计合成引物... 根椐GenBank中牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)和牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV-3)3种病毒基因序列,设计合成引物,建立3种病毒的三重RT-PCR方法。用这3对引物对同一样品中的BVDV、BRSV和BPIV-3核酸模板进行三重RT-PCR扩增,结果显示:可同时扩增BVDV的466 bp,BRSV的735 bp和BPIV-3的258 bp的特异性片段,而对其他4种病原的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该三重RT-PCR技术能检出10 pg的BVDV、1 pg的BPIV-3和10 pg的BRSV模板。用37份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示:两者的总符合率为100%。结果表明:建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。 展开更多
关键词 三重聚合酶链式反应 牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 牛呼吸道合胞体病毒(BRSV) 牛副流感病毒3型(BPIV-3)
牛副流感病毒3型RT—PCR检测方法的建立 预览 被引量:11
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作者 刘晓乐 张敏敏 +3 位作者 陈颖钰 胡长敏 陈焕春 郭爱珍 《中国奶牛》 2011年第22期 1-4,共4页
参照GenBank中公布的牛副流感病毒3型(Bovineparainfluenzavirus3,BPIV-3)全基因序列,针对BPIV-3特异性NP蛋白保守基因设计一对引物,建立了BPIV-3的RT—PCR诊断方法。其最佳扩增退火温度为58.1℃,引物浓度为1.0μmol/L。采用... 参照GenBank中公布的牛副流感病毒3型(Bovineparainfluenzavirus3,BPIV-3)全基因序列,针对BPIV-3特异性NP蛋白保守基因设计一对引物,建立了BPIV-3的RT—PCR诊断方法。其最佳扩增退火温度为58.1℃,引物浓度为1.0μmol/L。采用该方法扩增BPIV-3参考病毒.能扩增出425bp预期大小的特异性片段,而扩增牛病毒性腹泻/黏膜病病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛合胞体病毒、猪瘟病毒以及牛支原体、大肠埃希氏菌、牛巴氏杆菌和沙门氏菌等常见病毒和细菌均呈阴性结果。对参考病毒进行梯度稀释检测,结果证明该法检测BPIV-3的灵敏度可达10^-3FCID50/0.1mL。 展开更多
关键词 PCR 检测方法 牛副流感病毒3
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牛呼吸道疾病混合感染的病例诊断 预览 被引量:2
9
作者 仝晓丹 闻晓波 《中国奶牛》 2018年第2期37-39,共3页
牛呼吸道疾病综合征是危害全球养牛业发展的一类重要疾病,具有很高的发病率和死亡率。2017年3月黑龙江某牛场牛只突然出现精神沉郁、厌食、咳嗽、呼吸困难等症状,采集病牛鼻拭子,提取DNA或RNA,通过RT-PCR、PCR技术进行牛副流感3型病毒... 牛呼吸道疾病综合征是危害全球养牛业发展的一类重要疾病,具有很高的发病率和死亡率。2017年3月黑龙江某牛场牛只突然出现精神沉郁、厌食、咳嗽、呼吸困难等症状,采集病牛鼻拭子,提取DNA或RNA,通过RT-PCR、PCR技术进行牛副流感3型病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛腺病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛支原体的病原学检测。通过实验室检测确诊该牛场患病牛只为牛副流感3型病毒和牛支原体混合感染,因此建议牛场应及时对病牛进行对症治疗并做好未发病牛的防护工作。 展开更多
关键词 牛呼吸道疾病综合征 牛副流感3型病毒 牛支原体 PCR 混合感染
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C基因型牛副流感3型病毒的分离鉴定 预览 被引量:5
10
作者 冉旭华 张峣 +6 位作者 曹思 卢元赫 张玲玲 刘阳阳 倪宏波 朱战波 闻晓波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期1368-1373,共6页
为了对宁夏地区患有呼吸系统疾病的舍饲牛进行病原鉴定,试验主要利用RT-PCR方法对样品进行牛副流感3型病毒(BPIV3)M基因序列扩增,将扩增产物连接在pMD18-T载体后转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中进行亚克隆.通过氨苄青霉素平板筛选,... 为了对宁夏地区患有呼吸系统疾病的舍饲牛进行病原鉴定,试验主要利用RT-PCR方法对样品进行牛副流感3型病毒(BPIV3)M基因序列扩增,将扩增产物连接在pMD18-T载体后转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中进行亚克隆.通过氨苄青霉素平板筛选,将鉴定为阳性的克隆菌进行核苷酸序列测定并利用分子生物学软件与GenBank上参考序列进行同源性比对.测序结果表明,从样品中分离到了1株BPIV3,并命名为NX49,其M基因全长为1 056 bp;进化分析表明,NX49隶属于BPIV3 C基因型,其M基因与中国山东C型分离株SD0835具有较高同源性,核苷酸同源性为99.4%;理化分析表明,该毒株对温度、酸及有机物均敏感,高温孵育下Mg2+对该病毒无保护力;血凝试验表明,NX49对豚鼠红细胞凝集效价仅为1:4,且仅在4℃孵育时出现凝集反应.本研究成功分离得到一株BPIV3 C型毒株,这将有助于中国BPIV3分子进化规律及病毒流行特点的进一步研究. 展开更多
关键词 牛副流感3型病毒 C基因型 分离 鉴定 同源性比对
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内蒙古地区部分奶牛场牛副流感血清学调查 预览 被引量:3
11
作者 张欣欣 王业华 +3 位作者 乌力吉那仁 满都拉图 龙堂 关平原 《畜牧与饲料科学》 2016年第2期17-18,共2页
为了解内蒙古地区奶牛场牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus 3,BPIV3)的感染状况,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对6个奶牛场进行血清学调查。结果表明,该地区奶牛场中普遍存在BPIV3的感染情况,6个奶牛场均为阳性,阳性率最高达... 为了解内蒙古地区奶牛场牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus 3,BPIV3)的感染状况,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对6个奶牛场进行血清学调查。结果表明,该地区奶牛场中普遍存在BPIV3的感染情况,6个奶牛场均为阳性,阳性率最高达100%(15/15),阳性率最低为90.90%(20/22),平均阳性率为95.20%(119/125)。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3 酶联免疫吸附试验 血清流行病学调查
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新疆部分规模化奶牛场5种疫病的血清学调查 预览 被引量:15
12
作者 李静 李岩 +3 位作者 范伟兴 袁立岗 齐亚银 蒲敬伟 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第11期24-27,共4页
为了解新疆地区部分规模化奶牛场牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感3型病毒和牛支原体的感染状况,本试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA )检测试验区奶牛场中未接种上述疫病疫苗的奶牛血清,对自... 为了解新疆地区部分规模化奶牛场牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感3型病毒和牛支原体的感染状况,本试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA )检测试验区奶牛场中未接种上述疫病疫苗的奶牛血清,对自然感染状况进行评估。结果表明,牛传染性鼻气管炎病毒抗体平均阳性率为82.5%(66/80),牛病毒性腹泻病毒抗体平均阳性率为88.8%(71/80),牛呼吸道合胞体病毒抗体平均阳性率为82.5%(66/80),牛副流感3型病毒抗体平均阳性率为91.3%(73/80),牛支原体抗体平均阳性率86.3%(69/80);试验区牛场均存在2种~5种病原的混合感染现象,其中5种病原混合感染率为71.3%。结果显示在新疆地区部分规模化奶牛场中普遍存在上述5种病原的感染,且混合感染现象明显,奶牛生产中必须加强这些疫病的防控工作。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 牛病毒性腹泻病毒 牛呼吸道合胞体病毒 牛副流感3型病毒 牛支原体
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牛副流感病毒3型的分离鉴定 被引量:20
13
作者 刘鹏 侯喜林 +1 位作者 周玉龙 朴范泽 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1384-1389,共6页
从黑龙江省某牛场患有呼吸道疾病的病牛鼻液中分离到1株病毒,该病毒能在MDBK细胞上增殖并产生特征性细胞病变,对分离毒株进行理化特性、RT-PCR鉴定及序列测定与分析,结果发现该病毒为RNA病毒,具有血凝性,对乙醚、氯仿极其敏感,不耐热,... 从黑龙江省某牛场患有呼吸道疾病的病牛鼻液中分离到1株病毒,该病毒能在MDBK细胞上增殖并产生特征性细胞病变,对分离毒株进行理化特性、RT-PCR鉴定及序列测定与分析,结果发现该病毒为RNA病毒,具有血凝性,对乙醚、氯仿极其敏感,不耐热,对酸的抵抗力差;分离株与GenBank中已发表的病毒株N基因片段的同源性为82.6%~99.1%,结果表明分离的病毒为牛副流感病毒3型毒株,命名为BPIV3DQ1株。根据GenBank上发表的牛副流感病毒3型核衣壳蛋白N基因序列,设计合成了一对特异性引物,能扩增704bp的目的片段,可以检测出10个TCID50/100μL病毒核酸。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3 分离 鉴定 RT-PCR
表达RSV附着蛋白和融合蛋白的bPIV3可保护仓鼠抵抗hPIV3和RSV的攻击 预览
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作者 刘莉娜 陈受霓 《国外医学:预防.诊断.治疗用生物制品分册》 2004年第5期 232-233,共2页
作者用减毒牛3型副流感病毒(bPIV3)作为病毒载本主链,在bPIV3RNA基因组的HN和L基因之间插入呼吸道合胞病毒(RSV)的附着(G)和融合(F)基因,形成的病毒PIV3/RSV(I)含有2900nt的插入片段,它由两个有转译活性的转录单位组成。尽管基因物... 作者用减毒牛3型副流感病毒(bPIV3)作为病毒载本主链,在bPIV3RNA基因组的HN和L基因之间插入呼吸道合胞病毒(RSV)的附着(G)和融合(F)基因,形成的病毒PIV3/RSV(I)含有2900nt的插入片段,它由两个有转译活性的转录单位组成。尽管基因物质增加,但此病毒在Vero细胞中的增殖仍然可达到高滴度,可表达RSV和bPIV3的表面糖蛋白。 展开更多
关键词 RSV附着蛋白 融合蛋白 bPIV3 仓鼠 hPIV3 RSV
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抑制p38 MAPK信号通路对Bpiv3复制的影响
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作者 李丽阳 李鹏飞 +3 位作者 张靖晗 余丽芸 刘艳双 侯喜林 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期121-128,共8页
由牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,Bpiv3)感染引起的牛副流感病已成为各国牛场最重要的传染病之一,每年都会给世界养牛业造成巨大的经济损失,但关于该病致病的分子机制研究较少。本研究通过观察Bpiv3感染对MDBK细... 由牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,Bpiv3)感染引起的牛副流感病已成为各国牛场最重要的传染病之一,每年都会给世界养牛业造成巨大的经济损失,但关于该病致病的分子机制研究较少。本研究通过观察Bpiv3感染对MDBK细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MKK3)及其下游分子p38丝裂酶原活化的蛋白激酶(p38MAPK)的表达的影响,探讨相关的信号转导机制,对p38 MAPK通路在Bpiv3感染过程中的作用进行了初步研究。Bpiv3感染细胞后,采用Western Blot检测MKK3,p38 MAPK在蛋白水平的表达变化,并采用ELISA法检测细胞上清中IL-6,IL-8,IL-13和TNF-α的水平变化,采用SPSS 12软件进行统计学分析。结果表明,Bpiv3在感染后能够诱导MKK3的激活以及p38的磷酸化,激活了p38 MAPK信号通路。而且p38 MAPK信号通路参与了Bpiv3的复制过程。ELISA检测Bpiv3感染后以及使用抑制剂SB202190处理后的细胞上清中IL-6、IL-8、IL-13和TNF-α的水平发现,p38 MAPK信号通路参与了Bpiv3诱导的炎症反应。研究证实Bpiv3感染能够激活p38 MAPK通路,显著上调MKK3的表达并诱导p38发生磷酸化,进一步激活下游分子发挥生物学活性,促进Bpiv3的复制及诱导促炎细胞因子的产生。p38 MAPK信号通路的激活可能是Bpiv3感染诱发炎症反应的机制之一。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3型(Bpiv3) P38 MAPK信号通路 炎症反应
一株牛副流感病毒3型的分离鉴定及系统进化树分析
16
作者 崔一龙 杨达汉 +3 位作者 石芸 尹有勤 薛江东 马德慧 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期25-28,共4页
目的分离鉴定一株疑似为牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)的毒株,并分析系统进化树。方法从内蒙古某牛场患有呼吸道疾病的病牛鼻液中分离一株疑似为BPIV3的毒株,将分离毒株在MDBK细胞上进行增殖,并通过血凝试... 目的分离鉴定一株疑似为牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)的毒株,并分析系统进化树。方法从内蒙古某牛场患有呼吸道疾病的病牛鼻液中分离一株疑似为BPIV3的毒株,将分离毒株在MDBK细胞上进行增殖,并通过血凝试验及RT-PCR鉴定,同时对其N基因序列进行测定及分析,建立亲缘关系进化树。结果该分离病毒可在MDBK细胞上增殖,且可产生特异性细胞病变,第6代细胞的毒力为10^7.1 TCID50/100μL,与GenBank中已发表的BPIV3毒株N基因片段的同源性为99.9%,与序列号为D84095.1的BPIV3等亲缘性最近。结论本研究获得的分离株为BPIV3,与日本分离株(D84095.1)同源性较高。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3 病毒分离 血凝试验 RT-PCR 系统进化树
牛副流感病毒3型RT-PCR方法的建立及初步应用 预览
17
作者 王吉 付瑞 +7 位作者 李晓波 王淑菁 王莎莎 李威 秦骁 巩薇 岳秉飞 贺争鸣 《实验动物与比较医学》 CAS 2018年第2期98-104,共7页
目的建立用于牛源性样本中牛副流感病毒3型(BPIV3)RT-PCR检测方法。方法选择已发表的BPIV3神经氨酸酶㈣基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物,建立BPIV3RT-PCR方法。并对方法的特异性、敏感性、重复性、稳定性等进行方法学评价... 目的建立用于牛源性样本中牛副流感病毒3型(BPIV3)RT-PCR检测方法。方法选择已发表的BPIV3神经氨酸酶㈣基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物,建立BPIV3RT-PCR方法。并对方法的特异性、敏感性、重复性、稳定性等进行方法学评价。同时用建立的RT-PCR方法检测137份牛源性样本。结果建立的BPIV3RT-PCR方法与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛鼻气管炎病毒(BHV-1)、仙台病毒(SV)均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为61gTCID50/mL;BPIV3cDNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带;应用建立的方法检测137份牛源样本,核酸阳性率为14.6%。结论建立的BPIV3荧光定量PCR检测方法具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源性样表中BPIV3核酸的检测。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3型(BPIV3) PCR 牛源性样本
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牛副流感病毒3型3种基因型多重RT-PCR检测方法的建立 预览
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作者 杨帆 石顺利 +4 位作者 徐娜 雷宇 常塔娜 李平安 关平原 《中国畜牧兽医》 北大核心 2018年第1期32-38,共7页
为建立检测牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)3种基因型的多重RT-PCR方法,根据GenBank上发表的BPIV3 3种基因型病毒株的HN基因序列设计特异性引物,优化反应体系建立多重RT-PCR方法。结果显示,方法可同时扩增... 为建立检测牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)3种基因型的多重RT-PCR方法,根据GenBank上发表的BPIV3 3种基因型病毒株的HN基因序列设计特异性引物,优化反应体系建立多重RT-PCR方法。结果显示,方法可同时扩增出BPIV3A型150bp、B型253bp和C型342bp的特异性片段,与牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、牛支原体、牛布鲁氏菌、羊布鲁氏菌、牛源多杀性巴氏杆菌A型和B型均无交叉反应,A、B、C基因型BPIV3最低阳性质粒检测量分别为0.89×104、0.92×104和1.53×104拷贝/μL。本试验建立的多重RT-PCR检测方法操作方便、特异性强,应用于临床样本的检测,可快速检测BPIV3 3种基因型。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3型(BPIV3) 基因型 多重RT-PCR 检测
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牛副流感病毒3型实时荧光定量PCR检测方法的建立及在牛源样本检测中的应用
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作者 王吉 付瑞 +7 位作者 李晓波 王淑菁 王莎莎 李威 秦骁 巩薇 岳秉飞 贺争鸣 《中国病毒病杂志》 CAS 2018年第5期393-399,共7页
目的建立用于牛源性样本牛副流感病毒3型(BPIV3)实时荧光定量PCR (Q-PCR)快速检测方法。方法选择已发表的BPIV3 HN基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物和探针,建立BPIV3Q-PCR方法。并对方法的线性、特异性、敏感性、重复性、... 目的建立用于牛源性样本牛副流感病毒3型(BPIV3)实时荧光定量PCR (Q-PCR)快速检测方法。方法选择已发表的BPIV3 HN基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物和探针,建立BPIV3Q-PCR方法。并对方法的线性、特异性、敏感性、重复性、稳定性等进行方法学评价。同时用建立的Q-PCR方法检测105批次牛源性样本。结果建立的BPIV3Q-PCR方法线性范围为1×10^1拷贝/μl-1×108拷贝/μl;与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛鼻气管炎病毒(BHV-1)、仙台病毒(SV)均无交叉反应;检测敏感度可以达到1.0×10^1拷贝/μl;3个不同浓度梯度标准品3次不同实验平均变异系数均小于5%。应用建立的方法检测105批次牛源性样本,BPIV3核酸阳性率为12.4%。结论建立的BPIV3QPCR检测方法线性关系良好,具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源性样本BPIV3的快速定量检测。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3型(BPIV3) 实时荧光定量PCR检测方法 牛源性样本
牛副流感3型病毒Nano-PCR、LAMP方法的建立及初步应用 预览
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作者 李健友 李家伟 +2 位作者 王超 郭利 何洪彬 《中国畜牧兽医》 北大核心 2017年第10期2837-2844,共8页
试验旨在建立牛副流感3型病毒(bovine parainfluenza type-3 virus,BPIV3)纳米PCR(Nano-PCR)与环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)新型快速分子检测技术,对其进行特异性和敏感性对比试验,并对10份... 试验旨在建立牛副流感3型病毒(bovine parainfluenza type-3 virus,BPIV3)纳米PCR(Nano-PCR)与环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)新型快速分子检测技术,对其进行特异性和敏感性对比试验,并对10份临床样品进行了检测。特异性与敏感性试验结果显示,建立的Nano-PCR和LAMP方法只对BPIV3特异,而对牛呼吸道合胞体病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒无交叉反应;建立的Nano-PCR和LAMP方法具有相同的敏感性,均是普通PCR的10倍,最低核酸检出量均为4.16×102拷贝/μL。临床检测结果显示,建立的两种方法阳性符合率为100%,且阳性检出率均高于普通PCR。因此,本试验建立的Nano-PCR和LAMP方法为BPIV3的临床诊断提供了更快速、敏感、可靠的工具。 展开更多
关键词 牛副流感3型病毒(BPIV3) Nano-PCR LAMP
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