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β﹣连环素核易位在甲状腺肿瘤干细胞向钠碘转运体功能性表达细胞分化中的抑制作用
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作者 兰玲 邓微 +6 位作者 崔岱 陈海翎 霍丽丽 左庆瑶 李伟 张国英 罗勇 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期1904-1910,共7页
目的确认肿瘤干细胞(CSC)发生β-连环素(0-catenin)核易位能否分化出钠碘转运体(NIS)膜表达缺失、对治疗抵抗的甲状腺癌细胞。方法从人甲状腺滤泡癌细胞KrC 133中分选侧群干细胞(SP),并进行细胞“干性”鉴定;对FTC133来源的SP细胞进行β... 目的确认肿瘤干细胞(CSC)发生β-连环素(0-catenin)核易位能否分化出钠碘转运体(NIS)膜表达缺失、对治疗抵抗的甲状腺癌细胞。方法从人甲状腺滤泡癌细胞KrC 133中分选侧群干细胞(SP),并进行细胞“干性”鉴定;对FTC133来源的SP细胞进行β-catenin转染,再将其促分化培养,并收集分化细胞。应用Western印迹、Transwell、MTT方法,验证分化细胞的上皮细胞间质转化(EMT)属性及体外增殖侵袭能力的变化;应用免疫荧光染色和细胞摄碘试验,观察分化细胞的N1S功能性表达及摄碘能力的变化;应用分化细胞建立严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠皮下瘤模型,观察瘤体对"T体内治疗的反应,并应用免疫组化技术初步检测治疗相关功能蛋白的表达变化。结果FTC133中侧群干细胞约0.03%。应用3-catenin转染FTC133源SP细胞后.其分化细胞中出现了典型EMT转化,其中上皮属性蛋白(E钙黏素和细胞角蛋白18)表达缺失,间质属性蛋白(波形蛋白、纤连蛋白、尿激酶型纤溶酶原激活因子)反常表达;与未转染组和空质粒转染组相比,转染组SP细胞分化细胞体外增殖能力分别增强了约85.4%和81.0%(均P<0.01),侵袭能力则上升了78.8%和84.4%(均戸<0.01)0免疫荧光染色显示,β-catenin转染SP细胞后,其分化细胞出现明显的B-catenin核易位,同时伴随NIS蛋白由膜表达向浆表达的显著转变;体外摄碘率则分别下降约52.8%和45.2%(均P<0.01)。动物实验进一步显示,β-catenin转染SP细胞后,其分化细胞体现了很强的肿瘤生长促进能力和对抗治疗的能力(均P<0.05)。结论干细胞发生β-catenin核易位可能分化为对治疗抵抗的甲状腺癌细胞。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 肿瘤干细胞 Β连环素 上皮细胞-间充质细胞转换 钠碘转运体
萝卜硫素对视网膜母细胞瘤细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响
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作者 缪珊珊 黄香春 《国际中医中药杂志》 2019年第2期169-172,共4页
目的 研究萝卜硫素对视网膜母细胞瘤细胞(Y79)增殖、凋亡及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法Y79细胞经10、20、40 mg/L萝卜硫素干预24、48 h后,采用CCK8试剂盒检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪检测萝卜硫素对Y79细胞凋亡的影响,Wes... 目的 研究萝卜硫素对视网膜母细胞瘤细胞(Y79)增殖、凋亡及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法Y79细胞经10、20、40 mg/L萝卜硫素干预24、48 h后,采用CCK8试剂盒检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪检测萝卜硫素对Y79细胞凋亡的影响,Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。结果不同浓度萝卜硫素作用Y79细胞24、48 h后,可呈浓度、时间依赖性的抑制细胞增殖。与对照组比较,10、20、40 mg/L萝卜硫素组细胞凋亡率[(12.47±2.24)%、(24.63±3.44)%、(57.49±5.41)%比(3.47±0.74)%]增高(P<0.05);40 mg/L萝卜硫素组细胞Bax[(0.57±0.03)比(0.12±0.01)]表达升高,抗凋亡蛋白Bcl-2[(0.16±0.01)比(0.81±0.03)]、Wnt[(0.19±0.01)比(0.74±0.02)]、β-catenin[(0.22±0.02)比(0.82±0.03)]蛋白表达降低(P<0.05)。结论萝卜硫素可抑制Y79细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 细胞增殖 细胞凋亡 WNT信号通路 Β连环蛋白 萝卜硫素
Yes相关蛋白1在儿童肝母细胞瘤中的表达及作用研究
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作者 雷蕾 徐曼 +3 位作者 刘慧 谭憬一 曹鲜 许文凤 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2019年第5期426-431,共6页
目的探讨Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)在儿童肝母细胞瘤的表达及其与患儿预后的关系,以及YAP1对肝母细胞瘤增殖和凋亡的影响。方法采用免疫组化染色检测YAP1和β-连环蛋白(β-catenin)在38例儿童肝母细胞瘤和瘤旁组织... 目的探讨Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)在儿童肝母细胞瘤的表达及其与患儿预后的关系,以及YAP1对肝母细胞瘤增殖和凋亡的影响。方法采用免疫组化染色检测YAP1和β-连环蛋白(β-catenin)在38例儿童肝母细胞瘤和瘤旁组织中的表达。将YAP1 siRNA转染人肝母细胞瘤细胞株HepG2后,分别采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)和蛋白印迹法(western blot)检测YAP1在mRNA和蛋白水平的变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果YAP1在肝母细胞瘤的细胞核表达率为50.00%(19/38),瘤旁肝组织无表达0.00%(0/21)(χ^2=15.49,P<0.01),且其表达水平与患儿的预后呈负相关。β-catenin在肝母细胞瘤的细胞核阳性表达率为52.63%(20/38),瘤旁肝组织不表达(0/21)(χ^2=16.72,P<0.01)。YAP1与β-catenin的表达呈正相关。转染siRNA后,HepG2细胞YAP1的mRNA及蛋白表达显著低于对照组,细胞增殖能力下降,凋亡率增高。结论YAP1在儿童肝母细胞瘤中高表达,并且与患儿的预后呈负相关。YAP1可能与β-catenin共同促进肝母细胞瘤的生长。YAP1可能成为儿童肝母细胞瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 肝母细胞瘤 Β连环素 预后 细胞增殖 细胞凋亡 Yes相关蛋白1
Wnt/β-catenin信号通路在卵巢癌干细胞增殖、迁移和侵袭中的作用 预览 被引量:3
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作者 姚彬 张庆华 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第25期4001-4006,共6页
背景:在肿瘤细胞中,β-catenin降解障碍导致胞浆内游离的β-catenin聚集并与TCF/LEF结合进入细胞核内,启动下游基因转录,诱发Wnt/β-catenin信号通路异常改变。因此,研究β-catenin与卵巢癌干细胞的关系,可为特异性抑制卵巢癌干细胞提... 背景:在肿瘤细胞中,β-catenin降解障碍导致胞浆内游离的β-catenin聚集并与TCF/LEF结合进入细胞核内,启动下游基因转录,诱发Wnt/β-catenin信号通路异常改变。因此,研究β-catenin与卵巢癌干细胞的关系,可为特异性抑制卵巢癌干细胞提供新的思路。目的:观察β-catenin基因沉默后卵巢癌干细胞增殖、迁移与侵袭能力的变化。方法:采用免疫磁珠法从人卵巢癌细胞A2780中分离CD133阳性卵巢癌干细胞。选取70%-80%融合的CD133阳性细胞,分别转染慢病毒pLKO.1-shRNA-β-catenin(实验组)与pLKO.1-shRNA-ctrl(对照组)质粒,转染后72 h,采用Western blot检测两组细胞β-catenin、上皮表型分子E-cadherin和间质表型分子Vimentin的表达,MTT法检测两组细胞增殖活性,Transwell小室实验检测两组细胞迁移与侵袭能力。结果与结论:①转染后72 h,实验组细胞β-catenin蛋白明显低于对照组(P<0.05);②实验组培养2,3 d的细胞增殖能力低于对照组(P<0.05);③转染后72 h,实验组细胞迁移能力、侵袭能力明显低于对照组(P<0.05);④转染后72 h,实验组上皮表型分子E-cadherin蛋白表达高于对照组(P<0.05),间质表型分子Vimentin蛋白表达低于对照组(P<0.05);⑤结果表明,Wnt/β-catenin信号通路参与了卵巢癌干细胞的迁移与侵袭,沉默β-catenin基因表达可抑制卵巢癌干细胞的增殖、迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 卵巢癌干细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 干细胞 卵巢肿瘤 肿瘤干细胞 Β连环素 基因沉默 组织工程
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脂肪纤维瘤病八例临床病理学观察 被引量:1
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作者 刘绮颖 孙蒙 +1 位作者 喻林 王坚 《中华病理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第3期186-191,共6页
目的 探讨脂肪纤维瘤病的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断。方法回顾性分析复旦大学附属肿瘤医院病理科2008年1月至2017年6月8例脂肪纤维瘤病会诊病例的临床病理学资料和免疫表型,采用Sanger测序法检测β-catenin基因突变,运用荧光... 目的 探讨脂肪纤维瘤病的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断。方法回顾性分析复旦大学附属肿瘤医院病理科2008年1月至2017年6月8例脂肪纤维瘤病会诊病例的临床病理学资料和免疫表型,采用Sanger测序法检测β-catenin基因突变,运用荧光原位杂交法检测NTRK1和ETV6基因重排,分析随访结果并复习文献。 结果男性4例,女性4例,年龄3个月至9岁(中位年龄1.5岁)。肿瘤分别发生于手(4例)、足(2例)和躯干(2例),表现为局部缓慢性生长的无痛性肿块,境界不清。2例为先天性,其中1例出生时即发现患病,1例于出生后不久发现。大体上,肿瘤外形不规则,由灰黄色脂肪组织和混杂的灰白色纤维组织组成,平均直径2.6 cm(范围1~5 cm)。镜下观察:肿瘤含有大量的脂肪组织,略呈分叶状,脂肪组织间隔内可见条束状或梁状增生的纤维母细胞和肌纤维母细胞,类似韧带样瘤型纤维瘤病,2例浸润邻近的骨骼肌。增生的纤维母细胞和肌纤维母细胞无明显的异型性,核分裂象罕见(〈1/10 HPF)。纤维母细胞和肌纤维母细胞程度不等表达平滑肌肌动蛋白、肌特异性肌动蛋白、CD34和CD99,不表达β-catenin、结蛋白和S-100蛋白等标志物,Ki-67阳性指数〈2%。分子检测显示无β-catenin基因突变(0/3),无NTRK1基因重排(0/3)和ETV6基因重排(0/2)。随访6例,2例局部复发,1例带瘤生存。结论 脂肪纤维瘤病好发于新生儿和婴幼儿四肢末端,以大量脂肪组织和穿插其间类似韧带样瘤型纤维瘤病的纤维母细胞和肌纤维母细胞条束为特征,但与韧带样瘤型纤维瘤病不同,不涉及β-catenin基因突变。熟悉其临床病理学特征有助于与具有相似形态的间叶性肿瘤相鉴别。 展开更多
关键词 纤维瘤 Β连环素 原位杂交 荧光 免疫组织化学
富血小板血浆对硝普钠诱导的软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响 预览 被引量:1
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作者 赵泉 吴剑 《中医正骨》 2018年第4期4-7,12共5页
目的:观察富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)对硝普钠诱导的软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法:取5月龄新西兰大白兔耳静脉血制成富血小板血浆.取兔双膝关节软骨,分离、培养软骨细胞.取培养的第2代软骨细胞,分为空白... 目的:观察富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)对硝普钠诱导的软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法:取5月龄新西兰大白兔耳静脉血制成富血小板血浆.取兔双膝关节软骨,分离、培养软骨细胞.取培养的第2代软骨细胞,分为空白对照组、硝普钠对照组、PRP组和Wnt蛋白生成抑制剂2(theinhibitorofWntproduction-2,IWP-2)组,空白对照组与硝普钠对照组加入生理盐水、PRP组加入PRP、IWP-2组加入IWP-2干预1h后,除空白对照组外,其余3组再加入硝普钠干预24h.采用实时荧光定量PCR法检测各组软骨细胞Wntl、β-catenin和糖原合成酶激酶-3p(glycogensynthasekinase-3p,GSK-3p)mRNA的表达情况,采用Western-blot法检测各组软骨细胞Wntl、β-catenin和GSK-3p蛋白表达情况.结果:经甲苯胺蓝染色及II型股原免疫组化染色,鉴定所培养细胞为软骨细胞.干预后,4组软骨细胞Wntl、β-catenin和GSK-3pmRNA相对表达量组间总体比较,差异均有统计学意义(0.429±0.015,0.968±0.058,0.693±0.019,0.228±0.012,F=4.673,P=0.013;0.434土0.021,0.948±0.067,0.702±0.024,0.191±0.011,F=3.918,P=0.008;0.816±0.039,0.225±0.017,0.459±0.018,0.929土0.118,F=3.015,P=0.005).PRP组软骨细胞Wntl、β-cateninmRNA相对表达量均较空白对照组和IWP-2组高(P=a036,P=0.000;P=0.026,P=0.000),但均较硝普钠对照组低(P=0.017;P=0.013).PRP组软骨细胞GSK-3pmRNA相对表达量较空白对照组和IWP-2组低(P=0.001,P=0.000),但较硝普钠对照组高(P=0.016).干预后,4组软骨细胞Wntl、β-catenin和GSK-3p蛋白相对表达量组间总体比较,差异均有统计学意义(0.565±0.017,0.941±0.134,0.725±0.031,0.251±0.013,F=5.062,P=0.017;0.526±0.024,0.872±0.016,0.653±0.016,0.262±0.018,F=3.592,P=0.006;0.753±0.014,0.262土0.015,0.579±0.024,0.823±0.025,F=2.384,P=0.002).PRP组软骨细胞Wntl和β-catenin蛋白相对表达量较空白对照组和IWP-2组高(P=0.031,P=a000;P=0.041,P=0.002),但低于硝普钠对� 展开更多
关键词 富血小板血浆 骨关节炎 软骨细胞 硝普钠 Wnt信号通路 Β连环素 糖原合成酶激酶3
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Wnt/β—catenin信号通路在骨关节炎和大骨节病发病中的作用及研究进展
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作者 王婉莹 彩云 孙丽艳 《中华地方病学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期933-936,共4页
骨关节炎是以关节软骨的破坏、骨赘形成及关节间隙变窄为特征的慢性退变性关节疾病.严重影响患者的生活质量,然而其发病机制目前仍不十分清楚。大骨节病是一种发生在5~15岁儿童的地方性、多发性、变形性骨关节病,病因和发病机制未明... 骨关节炎是以关节软骨的破坏、骨赘形成及关节间隙变窄为特征的慢性退变性关节疾病.严重影响患者的生活质量,然而其发病机制目前仍不十分清楚。大骨节病是一种发生在5~15岁儿童的地方性、多发性、变形性骨关节病,病因和发病机制未明。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路参与胚胎软骨的发育及维持成人骨骼的稳定,是调控软骨细胞生长、发育和分化的一个关键通路。作者就Wnt43.catenin信号通路在骨关节炎和大骨节病发病中的作用和研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 骨关节炎 大骨节病 WNT信号通路 Β-连环蛋白
实验性脉络膜新生血管中Rapl、鸟苷三磷酸-Rap1、血管内皮生长因子及β-连环蛋白的表达研究
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作者 王鑫 尚庆丽 +3 位作者 马景学 郝玉华 姚惠娟 李佳佳 《中华眼底病杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期475-480,共6页
目的观察实验性脉络膜新生血管(CNV)中Rap1、鸟苷三磷酸-Rap1(GTP-Rap1)、血管内皮生长因子(VEGF)及β-连环蛋白(β-catenin)的表达。方法42只棕色挪威大鼠随机分为空白对照组、模型组,分别为7、35只;均双眼入组。模型组大鼠... 目的观察实验性脉络膜新生血管(CNV)中Rap1、鸟苷三磷酸-Rap1(GTP-Rap1)、血管内皮生长因子(VEGF)及β-连环蛋白(β-catenin)的表达。方法42只棕色挪威大鼠随机分为空白对照组、模型组,分别为7、35只;均双眼入组。模型组大鼠氪离子激光光凝建立CNV模型。光凝后3、7、14、21、28 d行荧光素眼底血管造影(FFA)、脉络膜血管铺片检查,观察光凝后不同时间大鼠荧光素渗漏程度以及CNV面积的变化。蛋白免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测CNV中Rap1、GTP-Rap1、VEGF、β-catenin蛋白和mRNA表达。结果FFA检查结果显示,光凝后14 d,光凝斑出现大片圆盘状荧光素渗漏。激光共聚焦显微镜观察发现,与光凝后7 d时CNV面积比较,光凝后14、21、28 d时CNV面积增加,差异均有统计学意义(t=3.725、5.532、3.605,P<0.05)。Western blot检测结果显示,与空白对照组比较,光凝后不同时间点,CNV中Rap1蛋白相对表达量差异均无统计学意义(P=0.156);GTP-Rap1蛋白相对表达量显著降低,VEGF、β-catenin蛋白相对表达量明显增高,差异均有统计学意义(P=0.000)。RT-PCR检测结果显示,与空白对照组比较,光凝后不同时间点,CNV中Rap1 mRNA相对表达量差异无统计学意义(P=0.645);β-catenin mRNA相对表达量差异均有统计学意义(P=0.000)。7、14、21、28 d,GTP-Rap1、VEGF mRNA相对表达量差异均有统计学意义(P=0.000)。结论实验性CNV中GTP-Rap1表达较正常大鼠明显减少。 展开更多
关键词 脉络膜新生血管化/治疗 rap1 GTP结合蛋白质类 血管内皮生长因子类 D连环素
磷酸化组蛋白H3和β-连环素在非小细胞肺癌组织中的表达及意义
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作者 李忠堂 张立平 《中国基层医药》 CAS 2018年第12期1589-1592,I0003共5页
目的探讨磷酸化组蛋白H3(PHH3)和β-连环素(β-catenin)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法收集日照市中心医院2013年6月至2017年6月手术切除的NSCLC组织78例,采用免疫组织化学MaxVision法检测NSCLC组织和30例... 目的探讨磷酸化组蛋白H3(PHH3)和β-连环素(β-catenin)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法收集日照市中心医院2013年6月至2017年6月手术切除的NSCLC组织78例,采用免疫组织化学MaxVision法检测NSCLC组织和30例周围正常肺组织中PHH3、β-catenin蛋白的表达,分析其表达与NSCLC临床病理特征的关系及两者表达的相关性。结果PHH3在NSCLC和正常肺组织中的阳性率分别为73.1%(57/78)和6.7%(2/30),差异有统计学意义(χ2=38.553,P〈0.05),PHH3过表达与肿瘤的分化程度(χ2=5.248,P〈0.05)、淋巴结转移(χ2=7.747,P〈0.05)密切相关,与患者年龄(χ2=0.209,P〉0.05)、性别(χ2=0.033,P〉0.05)、病理类型(χ2=0.190,P〉0.05)无关。β-catenin在NSCLC和正常肺组织中的异常表达率分别为69.2%(54/78)和10.0%(3/30),差异有统计学意义(χ2=30.499,P〈0.05),β-catenin异常表达与肿瘤的分化程度(χ2=4.934,P〈0.05)、淋巴结转移(χ2=8.098,P〈0.05)密切相关,与患者年龄(χ2=0.006,P〉0.05)、性别(χ2=0.595,P〉0.05)、病理类型(χ2=0.071,P〉0.05)无关。PHH3和β-catenin在NSCLC组织中表达呈正相关(r=0.597,P〈0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示PHH3和β-catenin的表达与预后呈负相关。结论PHH3和β-catenin在NSCLC组织中的过度表达可能与NSCLC的发生发展、侵袭转移有关,两者有望成为判定NSCLC及预测其侵袭转移能力的指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺 组蛋白类 Β连环素 免疫组织化学
Wnt/β-catenin信号通路在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 预览 被引量:1
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作者 严丽 李清怀 +1 位作者 冀宏 郝芳 《河北医科大学学报》 CAS 2017年第6期663-667,F0003共6页
目的探讨Wnt/β-catenin通路中Wnt通路抑制因子(Wnt inhibitory factor-1,WIF-1)、β连环蛋白(β-catenin)和细胞周期蛋白(cyclin D1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)中的表达及意义。方法选取PTC患者60例,留... 目的探讨Wnt/β-catenin通路中Wnt通路抑制因子(Wnt inhibitory factor-1,WIF-1)、β连环蛋白(β-catenin)和细胞周期蛋白(cyclin D1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)中的表达及意义。方法选取PTC患者60例,留取癌灶组织和癌旁组织标本。检测WIF-1、β-catenin和cyclin D1mRNA和蛋白表达,并分析WIF-1mRNA与β-catenin和cyclin D1mRNA的相关性。结果 PTC组织WIF-1mRNA表达水平和蛋白表达阳性率均显著低于癌旁组织,β-catenin、cyclin D1 mRNA表达水平和蛋白表达阳性率均显著高于癌旁组织(P〈0.05)。PTC淋巴结转移组WIF-1mRNA表达水平和蛋白表达阳性率低于无淋巴结转移组,β-catenin、cyclin D1mRNA表达水平和蛋白表达阳性率高于无淋巴结转移组(P〈0.05)。不同性别、年龄、肿瘤直径、病灶数目和是否包膜侵犯PTC中WIF-1、β-catenin、cyclin D1mRNA表达水平和蛋白表达阳性率差异无统计学意义(P〉0.05)。WIF-1mRNA与β-catenin和cyclin D1 mRNA表达呈负相关。结论WIF-1基因在PTC中表达下调促进了β-catenin蛋白在细胞质中累积,导致靶基因cyclin D1过度激活。WIF-1下调和(或)β-catenin、cyclin D1上调在PTC的发生和转移中发挥促进作用。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 WNT信号通路 Β连环素
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独活寄生汤治疗肝肾不足型膝骨关节炎的临床疗效观察 预览 被引量:3
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作者 万美珍 邓紫玉 代龙金 《中国社区医师》 2017年第14期92-93,共2页
目的:探讨独活寄生汤治疗肝肾不足型膝骨关节炎的疗效。方法:收治膝骨关节炎(肝肾不足型)患者64例,随机分为对照组和试验组各32例,对照组给予硫酸氨基葡萄糖钾胶囊治疗,试验组在对照组基础上联合独活寄生汤治疗。结果:试验组治疗... 目的:探讨独活寄生汤治疗肝肾不足型膝骨关节炎的疗效。方法:收治膝骨关节炎(肝肾不足型)患者64例,随机分为对照组和试验组各32例,对照组给予硫酸氨基葡萄糖钾胶囊治疗,试验组在对照组基础上联合独活寄生汤治疗。结果:试验组治疗总有效率高于对照组(P<0.05),治疗后试验组β-catenin、ESR、CRP水平下降优于对照组(P<0.05);治疗前,中晚期患者血清中β-catenin水平高于早期患者(P<0.05)。结论:独活寄生汤对肝肾不足型膝骨关节炎患者血清中β-catenin的表达存在一定的相关性,且临床疗效显著。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 Β-连环蛋白 独活寄生汤 肝肾不足
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Wnt/β-catenin信号通路对子宫内膜间质细胞的调节机制 预览 被引量:4
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作者 陈镘如 廖治 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第7期1013-1018,共6页
背景:越来越多的基因和信号通路参与了干细胞的周期性调节,其中Wnt/β-catenin信号通路是干细胞的重要通路之一。目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路对小鼠子宫内膜间质细胞相关功能的影响。方法:Balb/c小鼠注射Wnt/β-catenin通路阻... 背景:越来越多的基因和信号通路参与了干细胞的周期性调节,其中Wnt/β-catenin信号通路是干细胞的重要通路之一。目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路对小鼠子宫内膜间质细胞相关功能的影响。方法:Balb/c小鼠注射Wnt/β-catenin通路阻断剂或激活剂后获得子宫内膜,一部分用于内膜间质细胞侵袭能力和蛋白免疫印迹检测,一部分用于制备子宫内膜异位症模型,并进行免疫组化检测。结果与结论:激活组β-catenin、GSK3β蛋白表达显著高于抑制组(P〈0.05)。在穿膜细胞数方面,激活组显著高于抑制组和对照组(P〈0.05)。抑制组异位内膜E-钙黏素蛋白呈阳性表达,激活组异位内膜血管内皮生长因子蛋白呈强阳性表达。结果提示Wnt/β-catenin信号通路可能通过加强内膜异位种植、侵袭、转移等导致子宫内膜异位症的发生。 展开更多
关键词 子宫内膜 子宫内膜异位症 Β连环素 组织构建 组织工程 WNT/Β-CATENIN信号通路
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黄精多糖调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 预览 被引量:11
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作者 农梦妮 曾高峰 +4 位作者 宗少晖 杜力 李柯柯 彭小明 严芳娜 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第15期2133-2139,共7页
背景:骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能。黄精多糖可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化。目的:探讨黄精多糖对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:培养小... 背景:骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能。黄精多糖可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化。目的:探讨黄精多糖对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:培养小鼠骨髓间充质干细胞,在传统成骨诱导培养基诱导下给予5,10,25,50 mg/L黄精多糖进行干预,不加黄精多糖作为对照组,显微镜下观察细胞形态变化。PNPP法检测碱性磷酸酶活性;观察细胞发生矿化并进行茜素红染色,记录矿化结节数和面积分数;q RT-PCR检测成骨相关基因碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素m RNA表达;采用q RT-PCR和Western Blot分别检测β-catenin基因和蛋白表达水平;采用双荧光素酶报告基因检测系统检测下游β-catenin/TCF的转录活性。结果与结论:①与对照组相比,不同质量浓度的黄精多糖以剂量依赖性的方式提高碱性磷酸酶活性(P〈0.05),显著增强细胞的矿化能力,明显提高碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素基因的表达(P〈0.05);②诱导后β-catenin m RNA在第3天表达最高,黄精多糖在促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的过程中还能显著上调β-catenin的表达(P〈0.05),促使含有TCF结合位点的荧光素酶报告基因(TOPFlash)的高表达(P〈0.05);③说明黄精多糖通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 黄精属 间质干细胞 细胞分化 Β连环素 TCF转录因子类 组织工程 组织构建 骨细胞 黄精多糖 骨髓间充质干细胞 成骨分化 Wnt/β-catenin 骨质疏松 国家自然科学基金
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β-连环素通路对转化生长因子β1致肺纤维化的调控作 被引量:1
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作者 田新瑞 田新利 +4 位作者 王慧芳 常琴 霍如婕 殷得莉 郑国平 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期1929-1933,共5页
目的探讨β-连环素通路对转化生长因子β1(TGF-β1)致肺纤维化的调控作用。方法体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN细胞)分为四组:A1.对照组;B1.加5 μg/L TGF-β1的TGF-β1组;C1.转染真核表达载体pcDNA3.0(pcDNA)后... 目的探讨β-连环素通路对转化生长因子β1(TGF-β1)致肺纤维化的调控作用。方法体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN细胞)分为四组:A1.对照组;B1.加5 μg/L TGF-β1的TGF-β1组;C1.转染真核表达载体pcDNA3.0(pcDNA)后加5 μg/L TGF-β1的pcDNA+TGF-β1组;D1.转染β-连环素敲除载体[F-(β-TrCP)-Ecad]后加5 μg/L TGF-β1的F-(β-TrCP)-Ecad+TGF-β1组。24 h后,显微镜下观察各组细胞形态,Western印迹法检测各组细胞上皮钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白(Fn)表达;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞培养上清液中促纤维化转录产物Snail mRNA的表达。体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞(CRL-2192细胞)分为五组:A2.对照组;B2.加20 μg/L干扰素γ的干扰素γ组;C2.加10 μg/L TGF-β1和20 μg/L干扰素γ的TGF-β1+干扰素γ组;D2.转染F-(β-TrCP)-Ecad后加入C2组相同试剂的F-(β-TrCP)-Ecad+TGF-β1+干扰素γ组;E2.转染野生型β-连环素表达载体(WTβ-连环素)后加入C2组相同试剂的WTβ-连环素+TGF-β1+干扰素γ组。24 h后,Western印迹法检测A2、B2、C2组中β-连环素蛋白的表达;RT-PCR检测各组细胞培养上清液诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达。结果B1、C1组RLE-6TN细胞形态变为梭形,D1组细胞形态基本呈铺路石样;B1、C1组RLE-6TN细胞纤维细胞特征蛋白α-SMA、Fn蛋白及下游促纤维化转录产物Snail mRNA表达均显著高于A1组,而上皮细胞特征蛋白上皮钙黏素蛋白表达显著低于A1组;D1组细胞α-SMA、Fn蛋白、Snail mRNA表达均显著低于C1组(0.352±0.076比0.937±0.303、0.319±0.072比0.903±0.211、3.675±0.642比9.708±2.031),而上皮钙黏素蛋白表达显著高于C1组(1.482±0.227比0.604±0.121)(均P〈0.05)。CRL-2192细胞中,β-连� 展开更多
关键词 肺纤维化 Β连环素 转化生长因子Β1 上皮细胞-间质转化 巨噬细胞
WNT信号通路抑制因子-1和β连环蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义 预览 被引量:4
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作者 李波 宋永胜 +1 位作者 张超 司青乐 《疑难病杂志》 CAS 2016年第7期710-712,F0003共4页
目的探讨WNT信号通路抑制因子-1(WIF-1)和β连环蛋白(β-catenin)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其与肾癌临床分期、病理分级的相关性。方法选取2010年2月—2015年6月中国医科大学附属盛京医院第二泌尿外科行根治性手术切除的cc... 目的探讨WNT信号通路抑制因子-1(WIF-1)和β连环蛋白(β-catenin)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其与肾癌临床分期、病理分级的相关性。方法选取2010年2月—2015年6月中国医科大学附属盛京医院第二泌尿外科行根治性手术切除的ccRCC患者102例为研究对象,应用免疫组织化学SP法检测102例肾细胞癌组织及相对应的癌旁正常肾脏组织中WIF-1、β-catenin表达情况。结果 WIF-1在ccRCC组织及正常组织中的表达差异有统计学意义(59.7±19.6 vs.112.2±18.6,t=3.104,P〈0.05);β-catenin在ccRCC组织及正常组织中的表达差异亦有统计学意义(157.1±17.2 vs.102.1±18.7,t=4.015,P〈0.05)。WIF-1的表达与肾透明细胞癌的临床分期(r=-0.542,P〈0.05)、病理分级(r=-0.476,P〈0.05)呈负相关;β-catenin的表达与肾透明细胞癌的临床分期(r=0.511,P〈0.05)、病理分级(r=0.562,P〈0.05)呈正相关.;WIF-1与β-catenin在肾癌中的表达呈负相关(r=-0.425,P〈0.01)。结论 WIF-1表达降低和β-catenin表达升高与肾癌的病理分级和临床分期有关,对ccRCC预后评价有一定参考意义,也可为其治疗提供一种可能的靶向治疗途径。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 WNT通路抑制因子-1 Β连环蛋白
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CD10在癌相关成纤维细胞中的表达及其对结直肠癌形成和演进的影响 被引量:2
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作者 朱音 郑江江 +3 位作者 杨芳 聂倩倩 朱紫菱 邓红 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期859-865,共7页
目的探讨癌相关成纤维细胞(CAF)CD10的表达及其在结直肠癌形成和演进中的作用。方法收集浙江宁波市鄞州第二医院有详细随访资料的结直肠癌手术切除标本226例,应用免疫组织化学法检测肿瘤组织中心区、癌旁腺瘤组织及切缘正常黏膜组织... 目的探讨癌相关成纤维细胞(CAF)CD10的表达及其在结直肠癌形成和演进中的作用。方法收集浙江宁波市鄞州第二医院有详细随访资料的结直肠癌手术切除标本226例,应用免疫组织化学法检测肿瘤组织中心区、癌旁腺瘤组织及切缘正常黏膜组织间质成纤维细胞CD10表达和肿瘤细胞Ki-67、p53、cyclin D1及β-catenin的表达,观察CD10在间质CAF中表达情况,分析其与肿瘤细胞表达Ki-67、p53、cyclin D1及β-catenin和临床病理参数的相关性。结果正常肠黏膜间质成纤维细胞不表达CD10,结直肠癌组织中心区和癌旁腺瘤区CAF CD10的表达率分别为80.1%(181/226)和58.4%(132/226),CD10阳性的细胞同时表达平滑肌肌动蛋白(SMA),不表达结蛋白。Ki-67在结直肠癌组织中心区和癌旁腺瘤区的肿瘤细胞表达率分别为84.1%(190/226)和63.7%(144/226),正常肠黏膜上皮表达率为7.1%(16/226)。p53在结直肠癌组织中心区和癌旁腺瘤区肿瘤细胞表达率分别为50.4%(114/226)和53.1%(120/226),在正常肠黏膜上皮的表达率为8.8%(20/226)。cyclin D1在结直肠癌组织中心区和癌旁腺瘤区肿瘤细胞表达率分别83.6%(189/226)和48.7%(110/226),在正常肠黏膜上皮不表达。β-catenin在正常肠黏膜上皮全部定位于细胞膜,癌旁腺瘤区肿瘤细胞膜表达率为53.1%(120/226),细胞质表达率为95.6%(216/226),细胞核表达率为10.6%(24/226);肿瘤中心区癌细胞膜表达率为17.7%(40/226),细胞质表达率为100.0%(226/226),细胞核表达率为49.1%(111/226)。随着CAF CD10在癌旁腺瘤区和癌组织中心区的表达逐渐增高,周围肿瘤细胞Ki-67、p53、cyclin D1和β-catenin核表达也逐渐增高(P〈0.05)。CAF CD10在不同性别、不同年龄段和不同分化程度的癌组织中的表达率有差异(P〈0.05);而与浸润深度、有无淋巴结转移及脉管癌栓 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 成纤维细胞 脑啡肽酶 Β连环素 WNT蛋白质类
Wnt10b诱导再生毛囊的表达特性研究
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作者 星懿展 郭海英 +1 位作者 马小艮 李玉红 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期261-264,共4页
目的研究Wntlob诱导再生毛囊的表达特性及诱导作用机制。方法HEK-293细胞内扩增并用氯化铯梯度离心纯化Wntlob过表达腺病毒及对照腺病毒,皮内注射至C57BL/6J小鼠背部皮肤,在处理后2.5、5、7、9、14、28d时取材,HE染色及免疫组化染... 目的研究Wntlob诱导再生毛囊的表达特性及诱导作用机制。方法HEK-293细胞内扩增并用氯化铯梯度离心纯化Wntlob过表达腺病毒及对照腺病毒,皮内注射至C57BL/6J小鼠背部皮肤,在处理后2.5、5、7、9、14、28d时取材,HE染色及免疫组化染色观察毛囊结构特征、信号通路表达特征及增殖特性。结果HE染色发现,AdWntlob处理组从第5天开始出现新生毛囊结构,正常生长,第28天左右进入退化期。免疫组化染色发现,AdWntlob处理组从处理后5d开始新生毛囊具有AE15表达,随着毛囊生长而增加,至处理后28d开始减少。在AdWntlob处理后5d,观察到13连环素的核表达,Lef1特异性表达于毛芽和毛母质部位,且全为核表达。在AdWntlob处理后28d,Lef1表达减弱。AdWntlob处理后2.5d即可见Ki67表达于表皮和毛囊外根鞘。处理后2、5、7、9、14d均在隆突区见到Ki67的表达;从处理后7d开始,Ki67表达于毛母质细胞。结论Wnt10b诱导的再生毛囊具有正常的毛囊结构,Wnt10b激活了经典Wnt信号通路,其作用的靶细胞是毛囊干细胞及其子代细胞。 展开更多
关键词 毛囊 再生 干细胞 WNT信号通路 KI-67抗原 Β连环素
下调gankyrin通过调节β-catenin/cyclin D1信号通路抑制胃癌细胞增殖 预览 被引量:2
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作者 潘杰 汪伟民 +3 位作者 蔡炜龙 许洪宝 韩春蕃 钱福初 《胃肠病学》 2016年第5期282-286,共5页
背景:Gankyrin是一个含锚蛋白重复序列的原癌蛋白,其高表达参与了多种恶性肿瘤的发生、发展进程。目的:探讨下调gankyrin表达对胃癌细胞增殖能力的影响及其可能机制。方法:以携带gankyrin siRNA的慢病毒载体转染人胃癌细胞株MKN28,分别... 背景:Gankyrin是一个含锚蛋白重复序列的原癌蛋白,其高表达参与了多种恶性肿瘤的发生、发展进程。目的:探讨下调gankyrin表达对胃癌细胞增殖能力的影响及其可能机制。方法:以携带gankyrin siRNA的慢病毒载体转染人胃癌细胞株MKN28,分别采用MTT实验、流式细胞术和蛋白质印迹法检测下调gankyrin表达对MKN28细胞增殖、细胞周期分布及其β-catenin/cyclin D1信号通路的影响。结果:慢病毒载体的转染效率在90%以上,转染gankyrin siRNA后,MKN28细胞gankyrin蛋白表达显著受抑(P<0.01)。与未转染慢病毒和转染对照病毒的细胞相比,转染gankyrin siRNA的MKN28细胞体外生长于第3天起显著受抑,细胞周期G1期细胞比率增高,S期细胞比率降低,细胞中的β-catenin和cyclin D1表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:下调胃癌细胞中的gankyrin表达可通过抑制β-catenin/cyclin D1信号通路引起细胞周期G1期阻滞和细胞增殖抑制,gankyrin有望成为胃癌靶向治疗的新靶点。 展开更多
关键词 Gankyrin 胃肿瘤 RNA干扰 细胞增殖 细胞周期 Β连环素 细胞周期蛋白D1
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骨髓间充质干细胞移植联合氯化锂治疗兔股骨头缺血坏死疗效 预览 被引量:1
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作者 李巍 户小伟 +1 位作者 冼呈 劳山 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第6期868-875,共8页
背景:氯化锂促进骨髓间充质干细胞增殖并促进股骨头缺血坏死区成骨能力的研究日益受到关注。目的:比较移植骨髓间充质干细胞联合氯化锂修复股骨头坏死外的优势。方法:1取出生1周的新西兰白兔第2代的骨髓间充质干细胞,以加入含0,5,10,... 背景:氯化锂促进骨髓间充质干细胞增殖并促进股骨头缺血坏死区成骨能力的研究日益受到关注。目的:比较移植骨髓间充质干细胞联合氯化锂修复股骨头坏死外的优势。方法:1取出生1周的新西兰白兔第2代的骨髓间充质干细胞,以加入含0,5,10,20,40 mmol/L氯化锂培养。2选取48只健成年新西兰大白兔,用液氮冷冻方法制成右侧股骨头坏死模型,随机分为4组,单纯造模组:不植入任何材料;氯化锂组:造模3 d后每日应用氯化锂;骨髓间充质干细胞移植组:造模后用明胶海绵植入股骨头内,制成骨髓间充质干细胞悬液注入股骨头内;骨髓间充质干细胞移植+氯化锂组:在骨髓间充质干细胞移植组的基础上每日应用氯化锂;氯化锂的用法为每天45.2 mg/kg腹腔注射,术后3 d开始,连续应用4周。结果与结论:1以10 mmol/L的浓度对进兔骨髓间充质干细胞的增殖起最大作用,超过10 mmol/L的氯化锂促进作用开始下降。2股骨头坏死模型兔经干细胞联合氯化锂治疗后,形态有所恢复,骨密度增加,骨小梁增粗,股骨头中β-连环蛋白表达水平增加,且效果优于单纯干细胞或氯化锂治疗。3说明骨髓间充质干细胞移植联合氯化锂可以促进股骨头坏死区骨小梁的增生骨量增加骨密度增高,促进股骨头坏死的修复。 展开更多
关键词 干细胞 移植 氯化锂 骨髓间充质干细胞 Β-连环蛋白 股骨头坏死 WNT信号通路 骨小梁
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柚皮苷激活Wnt/β-catenin信号通路预防废用性骨质疏松 被引量:1
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作者 吕建伟 马信龙 +9 位作者 孙晓雷 马剑雄 邢国胜 王颖 孙磊 王建宝 李风波 李艳军 赵志虎 卢斌 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期503-512,共10页
目的探究柚皮苷对大鼠废用性骨质疏松的预防作用及其机制。方法采用后肢悬吊法制备废用性骨质疏松模型,分为单纯造模组和低、中、高剂量柚皮苷预防组(30mg·kg^-1·d^-1,100mg·kg^-1·d^-1和300mg·kg^-1·... 目的探究柚皮苷对大鼠废用性骨质疏松的预防作用及其机制。方法采用后肢悬吊法制备废用性骨质疏松模型,分为单纯造模组和低、中、高剂量柚皮苷预防组(30mg·kg^-1·d^-1,100mg·kg^-1·d^-1和300mg·kg^-1·d^-1);另取等量大鼠作为正常对照组。造模4周后处死各组大鼠取材,双能X线吸收法检测股骨远端骨密度(bonemineral density,BMD),Micro-CT分析股骨远端骨小梁微结构,骨生物力学性能测试检测股骨力学性能变化,ELISA法检测血清骨代谢指标,qRT—PCR检测胫骨骨膜素(Postn)、骨硬化蛋白(Sost)和β-catenin的mRNA水平,Western—blot检测胫骨骨膜素、骨硬化蛋白和细胞核β-catenin蛋白含量,并对股骨行骨膜素和骨硬化蛋白免疫组织化学染色。结果造模4周后,单纯造模组比正常对照组股骨远端BMD和股骨力学性能明显下降,股骨远端骨小梁微结构破坏明显,血清Ⅰ型前胶原氨基端肽(amino-terminal propeptide of type-1 procollagen,P1NP)明显下降,Ⅰ型胶原交联氨基末端肽cross—linked C—terminal telopeptides of callagen type-1,CTX-1)明显上升,qRT-PCR和Western-blot结果显示胫骨骨膜素表达水平下调,骨硬化蛋白表达上调,细胞核B—catenin含量减少,免疫组织化学染色结果显示股骨远端骨外膜成骨细胞分泌的骨膜素减少,而股骨干骨细胞骨硬化蛋白阳性程度上升。中、高剂量柚皮苷明显减弱悬吊导致的股骨远端BMD和股骨力学性能下降,以及骨小梁微结构破坏,上调血清P1NP水平,下调CTX-1含量,并明显增加骨组织中骨膜素和细胞核β-catenin的表达量,减少骨硬化蛋白的表达水平。结论柚皮苷能预防废用性骨质疏松发生,其机制可能是通过上调骨膜素,进而抑制骨硬化蛋白表达,最终激活Wnt/β-catenin信号通路所介导。 展开更多
关键词 骨质疏松 骨碎补 Β连环素 WNT信号通路
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