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Hyperbaric oxygen improves functional recovery of rats after spinal cord injury via activating stromal cell-derived factor-1/CXC chemokine receptor 4 axis and promoting brain-derived neurothrophic factor expression
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作者 Xiang-Long Meng Yong Hai +6 位作者 Xi-Nuo Zhang Yun-Sheng Wang Xue-Hua Liu Lin-Lin Ma Rong Yue Gang Xu Zhuo Li 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期699-706,共8页
Background: Spinal cord injury (SCI) is a worldwide medical concern. This study aimed to elucidate the mechanism underlying protective effect of hyperbaric oxygen (HBO) against SCI-induced neurologic defects in rats v... Background: Spinal cord injury (SCI) is a worldwide medical concern. This study aimed to elucidate the mechanism underlying protective effect of hyperbaric oxygen (HBO) against SCI-induced neurologic defects in rats via exploring the stromal cell-derived factor-1 (SDF-1)/CXC chemokine receptor 4 (CXCR4) axis and expression of brain-derived neurotrophic factor (BDNF). Methods: An acute SCI rat model was established in Sprague-Dawley rats using the Allen method. Sixty rats were divided into four groups (w = 15 in each group): sham-operated, SCI, SCI treated with HBO (SCI + HBO), and SCI treated with both HBO and AMD3100 (an antagonist of CXCR4;SCI + HBO + AMD) groups. The rats were treated with HBO twice a day for 3 days and thereafter once a day after the surgery for up to 28 days. Following the surgery, neurologic assessments were performed with the Basso-Bettie-Bresnahan (BBB) scoring system on postoperative day (POD) 7, 14, 21, and 28. Spinal cord tissues were harvested to assess the expression of SDF-1, CXCR4, and BDNF at mRNA and protein levels, using quantitative real-time polymerase chain reaction, Western blot analysis, and histopathologic analysis. Results: HBO treatment recovered SCI-induced descent of BBB scores on POD 14,(1.25±0.75 vs. 1.03 ±0.66, P< 0.05), 21 (5.27± 0.89 vs. 2.56± 1.24, P< 0.05), and 28 (11.35±0.56 vs. 4.23± 1.20, P<0.05) compared with the SCI group. Significant differences were found in the mRNA levels of SDF-1 (mRNA: day 21, SCI + HBO vs. SCI + HBO + AMD, 2.89± 1.60 vs. 1.56±0.98, P<0.05), CXCR4 (mRNA: day 7, SCI + HBO vs. SCI, 2.99± 1.60 vs. 1.31 ±0.98, P<0.05;day 14, SCI + HBO vs. SCI + HBO + AMD, 4.18± 1.60 vs. 0.80±0.34, P<0.05;day 21, SCI + HBO vs. SCI, 2.10±1.01 vs.1.15±0.03, P<0.05), and BDNF (mRNA: day 7, SCI + HBO vs. SCI, 3.04±0.41 vs. 2.75±0.31, P<0.05;day 14, SCI + HBO vs. SCI, 3.88± 1.59 vs. 1.11 ±0.40, P<0.05), indicating the involvement of SDF-1/CXCR4 axis in the protective effect of HBO. Conclusions: HBO might promote the recovery of neurologic func 展开更多
关键词 BRAIN-DERIVED NEUROTROPHIC factor CXC CHEMOKINE receptor 4 HYPERBARIC oxygen NEUROTROPHIC STROMAL cell-derived factor-1 Spinal cord injury
Stromal cell-derived factor-1α promotes recruitment and differentiation of nucleus pulposus-derived stem cells
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作者 Jin-Wei Ying Tian-Yong Wen +2 位作者 Shi-Shen Pei Ling-Hao Su Di-Ke Ruan 《世界干细胞杂志:英文版(电子版)》 2019年第3期196-211,共16页
BACKGROUND Intervertebral disc (IVD) degeneration is a condition characterized by a reduction in the water and extracellular matrix content of the nucleus pulposus (NP) and is considered as one of the dominating contr... BACKGROUND Intervertebral disc (IVD) degeneration is a condition characterized by a reduction in the water and extracellular matrix content of the nucleus pulposus (NP) and is considered as one of the dominating contributing factors to low back pain. Recent evidence suggests that stromal cell-derived factor 1α(SDF-1α) and its receptor CX- C chemokine receptor type 4 (CXCR4) direct the migration of stem cells associated with injury repair in different musculoskeletal tissues. AIM To investigate the effects of SDF-1α on recruitment and chondrogenic differentiation of nucleus pulposus-derived stem cells (NPSCs). METHODS We performed real-time RT-PCR and enzyme-linked immunosorbent assay to examine the expression of SDF-1α in nucleus pulposus cells after treatment with pro-inflammatory cytokines in vitro. An animal model of IVD degeneration was established using annular fibrosus puncture in rat coccygeal discs. Tissue samples were collected from normal control and degeneration groups. Differences in the expression of SDF-1α between the normal and degenerative IVDs were analyzed by immunohistochemistry. The migration capacity of NPSCs induced by SDF-1α was evaluated using wound healing and transwell migration assays. To determine the effect of SDF-1α on chondrogenic differentiation of NPSCs, we conducted cell micromass culture and examined the expression levels of Sox-9, aggrecan, and collagen II. Moreover, the roles of SDF-1/CXCR4 axis in the migration and chondrogenesis differentiation of NPSCs were analyzed by immunofluorescence, immunoblotting, and real-time RT-PCR.RESULTS SDF-1α was significantly upregulated in the native IVD cells cultured in vitro with pro-inflammatory cytokines, such as interleukin-1β and tumor necrosis factor-α, mimicking the degenerative settings. Immunohistochemical staining showed that the level of SDF-1α was also significantly higher in the degenerative group than in the normal group. SDF-1α enhanced the migration capacity of NPSCs in a dose-dependent manner. In addition, SDF- 展开更多
关键词 STROMAL cell-derived factor CXC CHEMOKINE receptor 4 Nucleus pulposusderived stem cells INTERVERTEBRAL disc degeneration Endogenous regeneration
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CXC受体4阳性表达骨髓间充质干细胞的分选及其骨向分化的能力 预览
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作者 麦宇芸 叶舒 +2 位作者 胡晓莉 权晶晶 张晓磊 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2018年第5期285-293,共9页
目的研究磁珠分选法分选表面CXC受体4(CXCR4)阳性表达的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的分选效率,以及分选后BMSC的增殖、迁移和成骨能力是否受到影响。方法全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSC,通过生长曲线、成骨成脂诱导分化和流式检测BMSC... 目的研究磁珠分选法分选表面CXC受体4(CXCR4)阳性表达的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的分选效率,以及分选后BMSC的增殖、迁移和成骨能力是否受到影响。方法全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSC,通过生长曲线、成骨成脂诱导分化和流式检测BMSC表面标记蛋白表达,鉴定大鼠BMSC。流式检测细胞表面CXCR4的阳性率,通过生长曲线及克隆形成实验检测细胞的增殖活性及克隆形成能力,Transwell体外趋化实验检测细胞迁移能力,通过检测成骨诱导早期细胞ALP活性和成骨相关基因的表达,分析细胞成骨能力,数据采用单因素方差分析处理。结果通过全骨髓贴壁法获得具有自我更新和多向分化能力的大鼠BMSC。磁珠分选阳性细胞表面CXCR4表达[(55.13±0.67)%]较未分选组[(6.49±0.59)%]显著增加(LSD-t=63.66,P<0.001)。分选阳性细胞的克隆形成能力[(16.22±1.68)%]以及培养后期细胞增殖活性(A450(5 d)=1.40±0.04;A450(7 d)=1.60±0.01)较未分选细胞[CFU=(17.00±1.76)%;A450(5 d)=1.49±0.07;A450(7 d)=1.60±0.12]均无明显变化;而培养早期(第1、3天)分选阳性细胞的增殖活性[A450(1 d)=0.50±0.01;A450(3 d)=0.81±0.05]较未分选细胞[A450(1 d)=0.57±0.01;A450(3 d)=0.96±0.06]稍低[LSD-t1 d=5.208,P1 d=0.002;LSD-t3 d=3.563,P3 d=0.012]。分选阳性细胞的基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)定向迁移能力(71.33±5.69)较未分选细胞(23.33±1.53)显著增强(LSD-t=17.211,P<0.001)。在成骨诱导早期,分选阳性细胞的Runx2 mRNA(0.93±0.12)较未分选组(0.51±0.14)表达上调(LSD-t=4.703,P=0.003),而ALP活性及ALP mRNA、OCN mRNA的表达均无明显变化(P>0.05)。结论磁珠分选法可有效分选CXCR4+BMSC,显著提高BMSC向SDF-1α的迁移效率,对细胞的增殖活性影响不大。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓 磁珠分选 基质细胞衍生因子1 CXC受体4 细胞迁移分析
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CXCR4抑制剂AMD3465调节肺癌细胞株增殖、侵袭的实验研究 预览
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作者 梁涛 王彬 +2 位作者 汪涛 柳曦 李捷 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2017年第4期398-401,共4页
目的 探讨CXCR4抑制剂AMD3465对肺癌细胞株增殖、侵袭的影响。方法 培养肺癌细胞株A549并分为AMD3465组、对照组;分别用含有三种不同剂量(50、100、200 mg/L)AMD3465的DMEM处理以及用不含药物的DMEM处理。处理后12、24、48 h,检测细... 目的 探讨CXCR4抑制剂AMD3465对肺癌细胞株增殖、侵袭的影响。方法 培养肺癌细胞株A549并分为AMD3465组、对照组;分别用含有三种不同剂量(50、100、200 mg/L)AMD3465的DMEM处理以及用不含药物的DMEM处理。处理后12、24、48 h,检测细胞的增殖活力和侵袭数目;处理后48 h,检测细胞中增殖及侵袭基因的mRNA表达量。结果 处理后12、24、48 h,三种不同剂量(50、100、200 mg/L)AMD3465组细胞的OD值均显著低于对照组、侵袭数目均显著少于对照组,AMD3456剂量较低时OD值、侵袭数目与对照组差距均大于AMD3456剂量较高时(P〈0.05);处理后48 h,50 mg/L AMD3465组、100 mg/L AMD3465组、200 mg/L AMD3465组细胞中Cyclin D1、PCNA、Ki-67、Cat B、MMP2、MMP9、MMP13的mRNA表达量均显著低于对照组;AMD3456剂量较低时细胞中Cyclin D1、PCNA、Ki-67、Cat B、MMP2、MMP9、MMP13的mRNA表达量与对照组差距均大于AMD3456剂量较高时(P〈0.05)。结论 CXCR4抑制剂AMD3465能够有效抑制肺癌细胞株的增殖、侵袭。 展开更多
关键词 支气管肺癌 CXC受体4 增殖 侵袭
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CXCR4转染的骨髓间充质干细胞靶向治疗急性肝衰竭 被引量:1
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作者 马虎成 施晓雷 +2 位作者 任昊桢 袁献温 丁义涛 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第16期2229-2236,共8页
目的:提高骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植治疗急性肝衰竭时在肝脏的定植率及疗效.方法:采用慢病毒转染使MSC过表达CXCR4基因,RT-PCR和细胞流式检测CXCR4表达.ELISA实验检测肝衰竭裸鼠肝脏MSC向基质衍生因子-1α(... 目的:提高骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植治疗急性肝衰竭时在肝脏的定植率及疗效.方法:采用慢病毒转染使MSC过表达CXCR4基因,RT-PCR和细胞流式检测CXCR4表达.ELISA实验检测肝衰竭裸鼠肝脏MSC向基质衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)水平.迁移实验检测转染的SDF-1α趋化能力.20%(V/V)四氯化碳(CCl4)橄榄油溶液8μL/g腹腔注射诱导裸鼠急性肝衰竭模型,24 h后尾静脉注射CXCR4转染的间充质干细胞(CXCR4-MSC)和未转染的间充质干细胞(Null-MSC).于注射后各时间点活体示踪MSC分布情况、裸鼠肝功能、生存率、组织病理学改变和肝细胞增殖情况.结果:CXCR4-MSC高表达CXCR4基因和CXCR4蛋白,肝衰竭裸鼠肝脏SDF-1α水平升高,与正常裸鼠相比有统计学差异.体外迁移实验证实CXCR4-MSC比Null-MSC具有向SDF-1α更好的迁移能力.体内活体成像显示移植后5 d CXCR4-MSC主要定植在肝脏,而Null-MSC在肝脏和脾脏都有定植.高定植率使得转染组裸鼠比未转染组裸鼠肝细胞受损更轻且具有更长的生存期,同时转染组裸鼠肝细胞增殖明显多于未转染组,两者有统计学差异.我们的实验证实转染CXCR4基因的骨髓间充质干细胞能够更好地促进肝再生.结论:基因修饰使骨髓间充质干细胞过表达CXCR4基因能够促进干细胞在肝脏的定植,改善肝功能,提高肝细胞的再生和裸鼠的生存率,为干细胞移植治疗肝功能衰竭提供了更广阔的应用途径. 展开更多
关键词 急性肝衰竭 细胞移植 间充质干细胞 趋化因子受体4 基因修饰
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蛋白酶激活受体1活化对小鼠内皮祖细胞增殖和迁移的影响
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作者 代静澜 古平 +1 位作者 潘波 牟海刚 《中国药房》 CAS CSCD 2013年第37期3465-3467,共3页
目的:研究蛋白酶激活受体1(PAR-1)活化对小鼠内皮祖细胞(EPCs)增殖和迁移的影响,及CXC型趋化因子受体4(CXCR4)的作用。方法:取对数生长期的小鼠EPCs,加入PAR-1激活剂SFLLRN(50μmol/L)进行活化,再加入CXCR4拮抗药AMD3100使后... 目的:研究蛋白酶激活受体1(PAR-1)活化对小鼠内皮祖细胞(EPCs)增殖和迁移的影响,及CXC型趋化因子受体4(CXCR4)的作用。方法:取对数生长期的小鼠EPCs,加入PAR-1激活剂SFLLRN(50μmol/L)进行活化,再加入CXCR4拮抗药AMD3100使后者终浓度分别为0、50、100、200 nmol/L(即b、c、d、e组);另设不活化、不加AMD3100的为空白对照(即a组)进行比较。采用荧光定量实时聚合酶链式反应法检测各组细胞中CXCR4 mRNA表达水平,Transwell小室共培养分析EPCs的迁移能力,MTT法检测各组细胞作用24、48、72、96 h后的EPCs增殖情况。结果:与a组比较,b组EPCs中CXCR4 mRNA表达水平和细胞迁移能力均明显增加(P〈0.05),细胞增殖能力增强;与b组比较,d、e组EPCs中CXCR4 mRNA表达水平明显降低(P〈0.05),c、d、e组EPCs细胞迁移能力均明显减弱(P〈0.05),增殖能力明显减慢,且呈剂量依赖性。结论:PAR-1活化能促进小鼠EPCs的增殖和迁移,其作用可能与CXCR4表达的上调有关。 展开更多
关键词 蛋白酶激活受体1 CXC型趋化因子受体4 小鼠 内皮祖细胞 增殖 迁移
PAR-1激活对小鼠内皮祖细胞CXCR4mRNA表达及细胞增殖与迁移的影响 预览
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作者 代静澜 潘波 +2 位作者 古平 牟海刚 白家驷 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第33期4056-4058,4061共4页
目的:研究蛋白酶激活受体-1(PAR-1)活化后对小鼠内皮祖细胞(EPCs) CXC型趋化因子受体4(CXCR4) mRNA表达及细胞增殖、迁移的影响。方法分离鉴定小鼠 EPCs ,分别以不同浓度 PAR-1激活剂SFLLRN加入培养的EPCs中,以PAR-1小干扰RNA... 目的:研究蛋白酶激活受体-1(PAR-1)活化后对小鼠内皮祖细胞(EPCs) CXC型趋化因子受体4(CXCR4) mRNA表达及细胞增殖、迁移的影响。方法分离鉴定小鼠 EPCs ,分别以不同浓度 PAR-1激活剂SFLLRN加入培养的EPCs中,以PAR-1小干扰RNA(siRNA)转染EPCs ,并设立空白对照组。采用荧光定量实时聚合酶链反应(RT-PCR)分析各组细胞PAR-1、CXCR4 mRNA表达;MTT法检测各组EPCs增殖情况;Transwell小室共培养分析各组EPCs的迁移能力。结果 SFLLRN激活组EPCs增殖率、迁移率及PAR-1、CXCR4 mRNA表达均较空白对照组、PAR-1特异siRNA转染组增高,差异有统计学意义( P<0.05)。CXCR4 mRNA与PAR-1 mRNA表达呈明显正相关(r=0.991)。结论 PAR-1可能通过促使CXCR4的表达增加,从而促进EPCs的增殖和迁移。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 蛋白酶激活受体-1 CXC型趋化因子受体4 细胞增殖 迁移
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Effect of CO2 pneumoperitoneum on the expression of the chemokine receptors CXCR4 and CCR7 in colorectal carcinoma cells in vitro 被引量:1
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作者 YANG Chun-kang LI Guo-dong +1 位作者 Y1NG Min-gang XU Ke 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2013年第24期4747-4751,共5页
关键词 趋化因子受体 CXCR4 CO2气 体外表达 癌细胞 MRNA表达水平 逆转录聚合酶链反应 免疫细胞化学
CXC类趋化因子受体4在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义 预览 被引量:4
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作者 程伟 童昕 +3 位作者 马建民 温波 王芳芳 李岭 《国际口腔医学杂志》 CAS 2010年第5期 502-503,共2页
目的探讨CXC类趋化因子受体(CXCR)4在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测OSCC组织中CXCR4的表达。结果 OSCC组织中CXCR4的阳性表达率明显高于正常对照组。CXCR4的表达与... 目的探讨CXC类趋化因子受体(CXCR)4在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测OSCC组织中CXCR4的表达。结果 OSCC组织中CXCR4的阳性表达率明显高于正常对照组。CXCR4的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期和淋巴结转移密切相关,而与性别、年龄和肿瘤大小无关。结论 CXCR4的表达可能在OSCC的发生、发展中起着一定的作用。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 基质细胞衍生因子-1 CXC类趋化因子受体4
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SDF—1α/CXCR4对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜修复的影响 预览
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作者 蔡文玮 方宁远 《老年医学与保健》 CAS 2009年第1期 10-15,共6页
目的观察基质细胞衍生因子1α(stromal derived factor-1,SDF-1α)与其受体CXCR4(CXC chemokiner receptor4)间的相互作用对血管损伤后内膜修复的影响。方法雄性SD大鼠分成对照组(C组,12只)、损伤组(S组)和AMD3100(octahydro... 目的观察基质细胞衍生因子1α(stromal derived factor-1,SDF-1α)与其受体CXCR4(CXC chemokiner receptor4)间的相互作用对血管损伤后内膜修复的影响。方法雄性SD大鼠分成对照组(C组,12只)、损伤组(S组)和AMD3100(octahydrochloride hydrate)干预组(A组,AMD3100200ng/kg,腹腔注射),S组和A组大鼠均进行左侧颈总动脉球囊损伤术。S组和A组又分成术后即刻(So/Ao组,各12只)、术后1dS1d/A1d组,各12只)、术后4d(S4d/A4d组,各12只)、术后7d(S7d/A7d组,各12只)和术后1月(S1m/A1m组,各12只),S组和A组大鼠均进行左侧颈总动脉球囊损伤术。所有大鼠均采血,应用流式细胞仪检测外周血CD34^+CXCR4^+细胞,应用ELISA法检测血浆SDF—1α水平,同时取左侧颈总动脉进行SDF-1α和CXCR4的mRNA和蛋白表达的检测,并应用免疫组化法检测损伤后血管内膜中CXCR4的表达。结果(1)在S组和A组中均发现损伤后外周血循环中CD34^+CXCR4^+细胞显著增加(P〈0.01),以手术后即刻上升最明显,随后逐渐下降,在术后第7天恢复到基础水平,A0和A1d组的细胞数量多于So和S1d组。(2)ELISA法结果显示:S组和A组大鼠在颈总动脉球囊损伤术后,血浆内SDF—1α水平急剧上升,在术后1d达峰值(P〈0.01),随后迅速下降,至术后7d已回复至术前水平(P〉0.05)。(3)在S组和A组中均可见到SDF—1α和CXCR4mRNA的表达,其中SDF-1α在损伤后即刻就有表达,在术后第7天表达减弱,CXCR4mRNA则在术后第4天开始出现,在术后1m时仍有表达,但是S组中CXCR4mRNA的表达强于A组;C组中无SDF—1α和CXCR4mRNA的表达。(4)在S组和A组中均可见到CXCR4蛋白的表达(67kD),但是S组的蛋白表达是A组的1.05~1.36倍,C组中未见CXCR4蛋白的表达。(5)应用CXCR4抗体与新生内膜中的CXCR4受体结合,发现S组中颈总动脉损伤� 展开更多
关键词 基质细胞 趋化凶子 CXC 受体 CXCR4 颈动脉损伤 血管内膜
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甲状腺肿瘤CD44v6与CXCR4的表达及其意义 预览 被引量:5
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作者 陈文有 张春辉 +2 位作者 倪启超 何志贤 周锋 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期 659-661,F0002,共4页
目的探讨甲状腺肿瘤中CD44v6、趋化因子受体4(CXCR4)的表达及意义。方法免疫组化检测200例甲状腺癌(淋巴结转移阳性100例)以及20例甲状腺腺瘤中CD44v6和CXCR4的表达。结果甲状腺癌组CD44v6及CXCR4的阳性表达率分别为72%和69%,显... 目的探讨甲状腺肿瘤中CD44v6、趋化因子受体4(CXCR4)的表达及意义。方法免疫组化检测200例甲状腺癌(淋巴结转移阳性100例)以及20例甲状腺腺瘤中CD44v6和CXCR4的表达。结果甲状腺癌组CD44v6及CXCR4的阳性表达率分别为72%和69%,显著高于甲状腺良性腺瘤组的20%和15%;淋巴结转移组CD44v6和CXCR4表达的阳性表达率分别为88%和91%,显著高于无转移组的56%和47%;不同病理类型、临床分期和生存期甲状腺癌中CD44v6和CXCR4的阳性表达率显著不同。结论CD44v6及CXCR4在甲状腺良恶性肿瘤的鉴别诊断,甲状腺癌淋巴结转移与否的判断和预后估计等方面有重要意义。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 CD44V6 趋化因子受体4
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人前列腺特异性抗原启动子调控的CXCR4-siRNA逆转录病毒载体的构建及其对前列腺癌细胞的生物学效应 预览 被引量:3
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作者 杜岳峰 邢毅飞 +3 位作者 曾甫清 陆鹏 刘先艮 肖亚军 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期 489-494,共6页
目的构建人前列腺特异性抗原(hPSA)启动子调控的趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,并探讨其对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞CXCR4基因表达的靶向抑制作用。方法PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(siRNA),转入带有增强型... 目的构建人前列腺特异性抗原(hPSA)启动子调控的趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,并探讨其对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞CXCR4基因表达的靶向抑制作用。方法PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(siRNA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子u6的pGensil-1质粒,以hPSA启动子代替U6启动子,再将重组基因片段导入到逆转录病毒真核表达载体pLXSN中,进行限制性酶切鉴定。转染PA317包装细胞,收获病毒上清,分别转染前列腺癌细胞PC-3m、LNCaP和人乳腺癌细胞MCF7。采用RT-PCR、Westernblot检测CXCR4基因表达。Transwell小室侵袭实验检测前列腺癌细胞体外侵袭能力的变化。结果通过限制性酶切鉴定该重组质粒,成功构建了CXCR4的RNA干扰质粒pLXSN/EGFP—hPSA-siCXCR4。与空载体组比较,CXCR4-siRNA对LNCaP细胞CXCR4mRNA和蛋白表达抑制显著,48h抑制率分别为(81.53±10.22)%和(90.52±9.31)%;对PC-3m、MCF-7细胞CXCR4mRNA和蛋白表达无抑制作用。Transwell侵袭实验结果显示,LNCaP细胞干扰组微膜下孔细胞数为(139.9±14.2)个,空载体组为(348.4±36.4)个,两组差异有统计学意义(P〈0.05);PC-3m、MCF-7细胞干扰组微膜下孔细胞数与空载体组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论该逆转录病毒系统中,hPSA启动子调控的下游RNA干扰序列特异性地抑制激素依赖前列腺肿瘤细胞的CXCR4基因表达,具有明显的靶向性。hPSA启动子调控的靶向CXCR4基因的RNA干扰技术在激素依赖性前列腺癌的基因治疗中具有一定价值。 展开更多
关键词 RNA干扰 趋化因子受体4 人前列腺特异性抗原 前列腺肿瘤 肿瘤转移
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The inhibitory effects of siRNA expression vector on CXCR4 expression in prostate carcinoma cell lines 被引量:1
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作者 Yuefeng Du Yifei Xing Fuqing Zeng Peng Lu Xianyin Liu 《南京医科大学学报:英文版》 2006年第2期 104-108,共5页
客观:调查 RNAi 的禁止的效果(RNA 干扰, RNAi ) 在前列腺癌房间的 CXCR4 表示上的表示向量排队。方法:为 CXCR4 基因的 Smallinterference RNA (siRNA ) 表示向量被构造,进前列腺癌房间的 transfected 排队(PC-3m 和 LNCaP ) 与 li... 客观:调查 RNAi 的禁止的效果(RNA 干扰, RNAi ) 在前列腺癌房间的 CXCR4 表示上的表示向量排队。方法:为 CXCR4 基因的 Smallinterference RNA (siRNA ) 表示向量被构造,进前列腺癌房间的 transfected 排队(PC-3m 和 LNCaP ) 与 lipo 一些。CXCR4 的表示被 RT-PCR 和西方的污点检测。结果:在 PC-3m 和 LNCaPcells 的 CXCR4 mRNA 和蛋白质的表示被 RNAi 表示向量减少。在 thePC-3m 房间的 CXCR4 mRNA 表示的禁止的率是 87.81% ± 10.20% ,在第 24 小时的 56.10%± 9 .32% 和第 48 小时,比较 with56.93%± 8 .78% , 49.24% ± 11.23% 在 LNCaP 房间。CXCR4protein 的表示的禁止的率是 64.71%± 6 .68% , 58.66%± 1 1.56% 分别地。结论:CXCR4 基因的表示能被 RNAi 表示向量有效地禁止。 展开更多
关键词 RNA 干扰(RNAi ) CXC 受体 4 表示向量 RT-PCR 西方的污点
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趋化因子SDF-1及受体CXCR4研究进展 预览 被引量:6
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作者 储子彦 陈晓萍 方晶晶 《生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期 11-13,共3页
趋化因子(chemokine)是一类一级结构相似,以对白细胞等多种细胞具有趋化定向运动作用为特征的小分子蛋白。功能研究表明,趋化因子在胚胎发育、血管生成、炎症、肿瘤、史滋病等机体多种生理和病理过程中发挥重要作用,部分趋化因子... 趋化因子(chemokine)是一类一级结构相似,以对白细胞等多种细胞具有趋化定向运动作用为特征的小分子蛋白。功能研究表明,趋化因子在胚胎发育、血管生成、炎症、肿瘤、史滋病等机体多种生理和病理过程中发挥重要作用,部分趋化因子的衍生物或抑制物具有潜在的临床应用前景。不久的将来,趋化因子及其受体可能成为疾病治疗的分子靶点。 展开更多
关键词 趋化因子 SDF-1 CXCR4
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逆转录病毒介导CXCR4-siRNA对前列腺癌细胞体外侵袭能力的影响 预览 被引量:1
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作者 杜岳峰 邢毅飞 +2 位作者 曾甫清 陆鹏 刘先艮 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期 426-432,共7页
目的设计构建趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,探讨干扰CXCR4表达对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。方法用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6... 目的设计构建趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,探讨干扰CXCR4表达对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。方法用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的Pgensil-1质粒中,再将重组基因片段导入到逆转录病毒真核表达载体PLX-SN中,行限制性酶切及测序鉴定。重组逆转录病毒载体转染包装细胞PA317,获取病毒上清转染前列腺癌细胞,RT-PCR检测CXCR4 mRNA表达。Transwell小室侵袭实验检测前列腺癌细胞体外侵袭能力的变化。结果通过酶切及测序鉴定,成功构建了PLXSN/EGFP-U6-siCXCR4。干扰质粒抑制CXCR 4mRNA的表达,与空载体组比较,PC-3m、LNCaP siRNA对CXCR4 mRNA的抑制率分别为(84.26±10.20)%和(88.17±11.23)%。Transwell侵袭实验结果显示,干扰组微膜下孔细胞数PC-3m、LNCaP分别为(14.7±3.1)和(18.9±4.2)个,空载体组分别为(46.9±5.3)和(66.7±6.0)个,两者差异显著(P〈0.05)。结论PLXSN/EGFP-U6-siCXCR4可以有效地抑制前列腺癌细胞CXCR4 mRNA的表达,干扰CXCR4可以显著抑制前列腺癌细胞体外侵袭转移能力。 展开更多
关键词 RNA干扰 逆转录病毒 趋化因子受体4 前列腺癌
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补肾活血汤对骨髓间充质干细胞迁移及趋化因子受体4,趋化因子13表达的影响
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作者 钱伟宏 沈玮 +4 位作者 鲍青青 姚志宏 罗毅文 陆吴超 万小敏 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2019年第3期6-10,14共6页
目的:探讨补肾活血汤及其拆方对骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移及趋化因子(CXCL)13及趋化因子受体(CXCR)4表达的影响。方法:以大鼠BMSCs为研究对象,制备含药血清,采用全骨髓贴壁法培养BMSCs。通过Transwell实验观察补肾活血汤(全方组)及... 目的:探讨补肾活血汤及其拆方对骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移及趋化因子(CXCL)13及趋化因子受体(CXCR)4表达的影响。方法:以大鼠BMSCs为研究对象,制备含药血清,采用全骨髓贴壁法培养BMSCs。通过Transwell实验观察补肾活血汤(全方组)及其拆方(补肾组、活血组)含药血清干预BMSCs体外迁移的能力,采用PCR法检测CXCL13及CXCR4RNA表达水平,采用WesternBlot法检测CXCR4蛋白表达水平。结果:通过培养获得高纯度的BMSCs.Transwell实验显示:全方含药血清干预的大鼠BMSCs,其迁移能力显著增强,与其它4组对比差异均有统计学意义(P<0.05)。PCR结果显示:补肾活血汤全方含药血清能显著上调大鼠BMSCs的CXCL13及CXCR4RNA表达水平,与其它4组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果显示:补肾活血汤全方含药血清能显著上调大鼠BMSCs的CXCR4蛋白表达水平,与其它4组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:全方组含药血清促BMSCs体外迁移的影响较显著,结合其影响CXCL13和CXCR4的表达水平,较其单纯的活血或补肾组效果更显著,其促进BMSCs体外迁移机制可能与同时上调CXCL13及CXCR4表达,从而激活CXCL13/CXCR5信号轴及SDF-1/CXCR4信号轴有关。合理配伍促进了补肾活血汤促BMSCs体外迁移的能力。 展开更多
关键词 补肾活血汤 细胞迁移 骨髓间充质干细胞 趋化因子13 趋化因子受体4
复方苦参注射液影响HL-60细胞迁移的机制研究 预览
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作者 盛贤福 王珺 +2 位作者 庄海峰 张宇 陈均法 《浙江中西医结合杂志》 2019年第1期6-9,共4页
目的探讨复方苦参注射液(CKI)影响HL-60细胞迁移的机制。方法选取HL-60细胞株作为研究对象,根据不同加药方案分为粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组(40ng/mL)、CKI组(0.5ng/mL)、G-CSF和CKI联合加药组和空白对照组,共培养48h后采用蛋白质印迹... 目的探讨复方苦参注射液(CKI)影响HL-60细胞迁移的机制。方法选取HL-60细胞株作为研究对象,根据不同加药方案分为粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组(40ng/mL)、CKI组(0.5ng/mL)、G-CSF和CKI联合加药组和空白对照组,共培养48h后采用蛋白质印迹法(WB)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测微小RNA-146a(miR-146a)、趋化因子CXC受体4(CXCR4)等信使RNA(mRNA)、CXCR4蛋白表达变化情况;同时采用Transwell小室检测CKI、G-CSF作用前后细胞迁移率变化情况。结果(1)与空白对照组相比,基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)能促进HL-60细胞的迁移[(2.01±0.13)比(1.05±0.10),P<0.05],而CKI组、G-CSF组、CKI联合G-CSF组均能阻断HL-60细胞向SDF-1α迁移[(1.50±0.04)、(1.68±0.08)、(1.27±0.02)比(2.01±0.13),P<0.05]。(2)与空白对照组相比,CKI、G-CSF处理HL60细胞后,CXCR4的mRNA、蛋白表达均受抑[(0.75±0.10)、(0.47±0.09)比(1.00±0.08),P<0.05];与CKI组、G-CSF组相比,CIK联合G-CSF组CXCR4的mRNA蛋白表达受抑更明显[(0.24±0.04)比(0.47±0.09)、(0.75±0.10),P<0.05]。(3)与空白对照组比较,G-CSF、CKI处理HL-60细胞后,miR-146a表达显著上调[(5.59±0.46)、(3.53±0.39)比(1.03±0.11),P<0.01];而联合加药组上调更明显[(6.76±0.54)比(5.59±0.46)、(3.53±0.39),P<0.05]。结论CKI能协同G-CSF上调miR-146a表达,通过降低HL-60细胞表面的CXCR4表达而阻断CXCR4/SDF-1α信号轴,最终导致HL-60细胞体外迁移能力明显下降。 展开更多
关键词 复方苦参注射液 粒细胞集落刺激因子 微小RNA-146a 趋化因子CXC受体4 细胞迁移
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CXCL12-CXCR4/CXCR7信号轴与PE发病关系的研究 预览
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作者 王亭婷 钱天烨 +1 位作者 郑皓文 孔祥 《医学综述》 2018年第17期3502-3506,共5页
目的通过检测子痫前期(PE)患者胎盘组织及血清中CXC趋化因子配体12(CXCL12)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)以及CXCR7的表达水平,分析CXCR4、CXCR7、CXCL12表达与PE发病的关系。方法选取2016年9月至2017年9月扬州大学临床医学院妇产科... 目的通过检测子痫前期(PE)患者胎盘组织及血清中CXC趋化因子配体12(CXCL12)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)以及CXCR7的表达水平,分析CXCR4、CXCR7、CXCL12表达与PE发病的关系。方法选取2016年9月至2017年9月扬州大学临床医学院妇产科住院分娩的产妇60例为研究对象,其中正常妊娠妇女(正常对照组)、轻度PE组及重度PE组各20例,通过免疫组织化学法和酶联免疫吸附法检测三组胎盘组织和血清中CXCL12、CXCR4以及CXCR7的表达。结果三组血清CXCL12、CXCR4、CXCR7表达比较差异有统计学意义(P〈0.05),与正常对照组相比,重度PE组CXCL12、CXCR4及CXCR7表达显著降低(P〈0.05);与轻度PE组相比,重度PE组CXCL12、CXCR4及CXCR7表达显著降低(P〈0.05)。三组胎盘组织中CXCL12、CXCR4及CXCR7表达差异有统计学意义(P〈0.05),与正常对照组相比,重度PE组胎盘组织中CXCL12、CXCR4、CXCR7的表达显著降低(均P〈0.05),与轻度PE组相比,重度PE组胎盘组织中CXCL12、CXCR4、CXCR7的表达显著降低(均P〈0.05)。结论 PE患者胎盘中CXCL12/CXCR4/CXCR7表达呈下降趋势,血清中CXCL12/CXCR4/CXCR7的表达呈下降趋势,可能与PE的发病有关。 展开更多
关键词 子痫前期 CXC趋化因子配体12 CXC趋化因子受体4 CXC趋化因子受体7
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CXC趋化因子配体12-CXC趋化因子受体4信号轴与卵巢癌相关性的研究进展 预览
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作者 陈丹丹 罗宁 程忠平 《医学综述》 2018年第18期3580-3585,共6页
慢性炎性微环境是肿瘤的特征之一,而肿瘤微环境在肿瘤病理机制中发挥关键作用。在转化医学及精准医学的背景下,肿瘤微环境的内涵不断丰富,外延不断拓展,其与肿瘤细胞增殖增生、侵袭转移、上皮-间充质转化(EMT)、肿瘤干细胞、肿瘤转移... 慢性炎性微环境是肿瘤的特征之一,而肿瘤微环境在肿瘤病理机制中发挥关键作用。在转化医学及精准医学的背景下,肿瘤微环境的内涵不断丰富,外延不断拓展,其与肿瘤细胞增殖增生、侵袭转移、上皮-间充质转化(EMT)、肿瘤干细胞、肿瘤转移窗前期等的相关性研究备受关注,且针对肿瘤微环境关键环节的靶向治疗策略也应运而生。其中,CXC趋化因子配体12(CXCL12)-CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号轴是肿瘤间质细胞与肿瘤细胞联系的重要桥梁;其参与肿瘤细胞增殖增生、侵袭转移、血管生成及EMT等过程。目前,CXCL12-CXCR4信号轴的表达调控机制及其在肿瘤病理机制中的作用尚未完全明确。未来,从分子水平认识CXCL12-CXCR4信号轴将为其在卵巢癌中的靶向治疗开辟新领域。 展开更多
关键词 卵巢癌 肿瘤微环境 CXC趋化因子配体12-CXC趋化因子受体4信号轴
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间充质干细胞修复大鼠缺血再灌注肾损伤中SDF-1/CXCR4轴的调控机制研究
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作者 司晓芸 徐申 +1 位作者 毕晓红 吴小燕 《华南国防医学杂志》 CAS 2018年第7期435-439,445共6页
目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植修复大鼠肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)过程中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对基质细胞衍生因子1(st... 目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植修复大鼠肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)过程中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对基质细胞衍生因子1(stromal cells derived factor-1,SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)轴的调控作用。方法建立大鼠缺血再灌注肾损伤模型,动物分为5组:对照组、IRI组、BMSCs组、TGF-β1中和抗体组、CXCR4中和抗体组(n均为8)。HE染色观察肾组织形态学改变;Western blot法检测肾组织TGF-β1、SDF-1α和CXCR4蛋白水平;免疫荧光组织化学法检测肾组织CXCR4蛋白表达。结果 IRI大鼠肾皮质肾小管结构破坏、消失、炎性细胞浸润,BMSCs移植能够改善损伤的肾小管,但修复作用可被TGF-β1抗体和CXCR4抗体所抑制。与对照组比较,IRI组、BMSCs组、TGF-β1中和抗体组与CXCR4中和抗体组肾组织TGF-β1蛋白表达明显上调,分别进行组间比较差异具有统计学意义(t分别为-15.508,-18.487,5.749,19.976,P〈0.01);与BMSCs组比较,TGF-β1中和抗体组肾组织中TGF-β1蛋白表达水平明显降低,组间比较差异有统计学意义(t=16.380,P〈0.01),但CXCR4中和抗体组、IRI组TGF-β1蛋白表达水平变化不大,组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。与对照组比较,IRI组、BMSCs组、TGF-β1中和抗体组及CXCR4中和抗体组SDF-1α蛋白表达水平均明显升高,分别进行组间比较差异具有统计学意义(t分别为-15.073,-15.749,-18.934,-19.077,P〈0.01),但升高表达的4组间比较差异无统计学意义(F=2.83,P〉0.05)。与对照组比较,IRI组、BMSCs组、TGF-β1中和抗体组、CXCR4中和抗体组CXCR4蛋白表达水平明显上调,分别进行组间比较差异具有统计学意义(t分别为-11.205,-20.960,11.925,-9.212,P〈0.01);与BMSCs组比较,IRI组、TGF-β1中和抗体组及CXCR4中和抗体组肾组织CXCR4蛋白表达水平均明� 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 缺血再灌注 转化生长因子β1 基质细胞衍生因子1 CXC趋化因子受体4
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