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分子生物学技术在医学中的应用及潜在风险
1
作者 裴银辉 李琳 《医学争鸣》 2018年第6期9-11,共3页
近年来,分子生物学技术逐渐应用于医学研究、疾病诊断及治疗,但与之相关的问题也越来越多地显现出来。由于目前人类认知水平的局限,尚不能对分子生物学技术尤其是基因调控及改造技术的应用给人类带来的严重后果做出准确的评估。本文对... 近年来,分子生物学技术逐渐应用于医学研究、疾病诊断及治疗,但与之相关的问题也越来越多地显现出来。由于目前人类认知水平的局限,尚不能对分子生物学技术尤其是基因调控及改造技术的应用给人类带来的严重后果做出准确的评估。本文对分子生物学技术在医学中的应用及潜在风险进行分析,认为应该对分子生物学技术进行有限制、有程度的研究及开发。 展开更多
关键词 分子生物学技术 基因诊断 DNA重组
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GST-SRY融合蛋白原核表达和纯化 预览 被引量:2
2
作者 张小玉 段君君 +3 位作者 王江 贾霄 汪小波 何颖红 《昆明医科大学学报》 CAS 2018年第4期1-4,共4页
目的构建GST-SRY融合蛋白原核表达载体,在E.coli中诱导其表达,并进行纯化.方法 PCR扩增SRY基因,将SRY基因插入原核表达载体p GEX-6P-1,经酶切和测序验证后,p GEX-6p-1-SRY转化到原核表达菌株E.coli Rosetta DE3,IPTG诱导表达GST-SRY融... 目的构建GST-SRY融合蛋白原核表达载体,在E.coli中诱导其表达,并进行纯化.方法 PCR扩增SRY基因,将SRY基因插入原核表达载体p GEX-6P-1,经酶切和测序验证后,p GEX-6p-1-SRY转化到原核表达菌株E.coli Rosetta DE3,IPTG诱导表达GST-SRY融合蛋白,用GST标签纯化树脂对其进行纯化.结果经双酶切和测序证实p GEX-6P-1-SRY构建正确.重组质粒转化到Rosetta DE3经IPTG诱导后表达了分子质量单位约为49 KD的重组蛋白.结论 p GEX-6P-1-SRY原核表达载体构建成功,SRY蛋白成功诱导表达并纯化,为今后深入研究SRY蛋白的功能奠定了实验基础. 展开更多
关键词 SRY 基因重组 基因表达 蛋白纯化
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携pEGFP-C1的目的基因真核表达载体的构建方法研究
3
作者 海玲 富红丹 赵静 《疾病监测与控制杂志》 2015年第5期301-302,共2页
目的提高构建携pEGFP-C1的目的基因真核表达载体的成功率。方法通过理论研究结合实验操作经验。结果利用该方法可以高效率的成功构建真核表达载体。结论文章提出的方法简便、通用、高效,可以解决重组DNA载体构建技术中的一系列关键问题... 目的提高构建携pEGFP-C1的目的基因真核表达载体的成功率。方法通过理论研究结合实验操作经验。结果利用该方法可以高效率的成功构建真核表达载体。结论文章提出的方法简便、通用、高效,可以解决重组DNA载体构建技术中的一系列关键问题,为相关研究提供了必要的理论和技术支持。 展开更多
关键词 PEGFP-C1 真核表达载体 重组DNA
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P450酶系中高效电子传递链的构建及应用 被引量:1
4
作者 柯霞 孙骏 郑裕国 《生命的化学》 CAS CSCD 2015年第6期733-740,共8页
细胞色素P450作为单加氧酶的主要成员,能够在多种化合物中引入氧分子,催化包括羟化在内的多种反应。在级联的氧化还原反应中,需特定的电子传递链将氧原子中的电子传递至P450单加氧酶的亚铁红素结构中,并最终催化底物氧化,而电子传递体... 细胞色素P450作为单加氧酶的主要成员,能够在多种化合物中引入氧分子,催化包括羟化在内的多种反应。在级联的氧化还原反应中,需特定的电子传递链将氧原子中的电子传递至P450单加氧酶的亚铁红素结构中,并最终催化底物氧化,而电子传递体系的低效性往往成为整个反应的限速步骤。本文在介绍P450单加氧酶电子传递链基本结构的基础上,着重阐述对于细胞色素P450酶系中电子传递链未知或者内源性电子传递效率较低的情况下,利用DNA重组技术构建高效的电子传递链从而提高P450单加氧酶的催化效率相关研究进展,主要从细菌及真核细胞线粒体电子传递链(ClassⅠ)及真核生物细胞色素C还原酶CPR(ClassⅡ),天然融合电子传递链及人工融合蛋白电子传递链的构建及其应用展开。 展开更多
关键词 P450单加氧酶 电子传递链 DNA重组 融合蛋白
“Golden Gate”克隆法构建靶向载体 被引量:2
5
作者 梁龙 杨华 +2 位作者 杨永林 刘守仁 皮文辉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期111-116,共6页
在同一反应体系内,利用IIS型限制性核酸内切酶和DNA连接酶进行"Golden Gate"克隆方法,将多 个目的基因片段按照设定的顺序连接,实现多基因片段一步"无缝"连接。为编辑小鼠&beta;酪蛋白基因位点,利用"Golden Gate"克隆法,构建了... 在同一反应体系内,利用IIS型限制性核酸内切酶和DNA连接酶进行"Golden Gate"克隆方法,将多 个目的基因片段按照设定的顺序连接,实现多基因片段一步"无缝"连接。为编辑小鼠&beta;酪蛋白基因位点,利用"Golden Gate"克隆法,构建了小鼠&beta;酪蛋白基因位点同源重组靶向载体。 展开更多
关键词 DNA重组 &ldquo GOLDEN Gate&rdquo 克隆法 小鼠&beta 酪蛋白基因
DNA重组技术的研究综述 预览 被引量:6
6
作者 张亚旭 《生物技术进展》 2012年第1期 57-63,共7页
DNA重组技术,即DNA克隆技术的研究和运用是现代生物学发展的一个重要分支,是分子生物学发展的突出领域。本文介绍了DNA重组的类型及相关的生物学概念;综述了目前已报道的传统的酶切-连接经典克隆方法、位点特异性重组克隆方法、以及同... DNA重组技术,即DNA克隆技术的研究和运用是现代生物学发展的一个重要分支,是分子生物学发展的突出领域。本文介绍了DNA重组的类型及相关的生物学概念;综述了目前已报道的传统的酶切-连接经典克隆方法、位点特异性重组克隆方法、以及同源重组克隆方法,重点阐述了各自的原理、步骤、特点及实际应用等方面;最后归纳总结了各种方法的优缺点和应用范围,并对该技术的科研成果进行了回顾和对未来的研究进行了展望。 展开更多
关键词 DNA重组 基因克隆 经典克隆 位点特异性重组克隆 同源重组克隆
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一种快速高效构建植物表达载体的方法 被引量:10
7
作者 韩凯 翁建峰 +7 位作者 郝转芳 李新海 李明顺 张德贵 白丽 张世煌 薛吉全 谢传晓 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 61-66,共6页
植物表达载体是将目的基因转化宿主细胞的媒介,载体构建是通过遗传转化方法开展基因功能鉴定与应用等研究的重要环节。以构建玉米谷氨酰胺合成酶基因(GS1)表达载体pCUbi1390-Ubi-GS1-35S-EPSPS为例,研究简单、通用、高效的构建载体的... 植物表达载体是将目的基因转化宿主细胞的媒介,载体构建是通过遗传转化方法开展基因功能鉴定与应用等研究的重要环节。以构建玉米谷氨酰胺合成酶基因(GS1)表达载体pCUbi1390-Ubi-GS1-35S-EPSPS为例,研究简单、通用、高效的构建载体的方法。该方法目的片段和载体不需要酶切产生互补的黏性末端,只需通过在目的基因PCR上下游引物的5’端设计与线性载体两端有15个碱基的同源序列,根据序列的同源性,将目的基因插入载体中,通过PCR程序实现DNA重组。结果表明,正确构建了设计的转化载体,该方法大大简化了载体构建的过程,也适用于任何一个基于单酶切位点把外源DNA重组插入目标序列。 展开更多
关键词 表达载体 同源序列 DNA重组
基因工程制药应用及研究进展 预览 被引量:3
8
作者 黄榕珍 《海峡药学》 2010年第12期 5-8,共4页
基因工程制药通过DNA重组技术,进行无性繁殖和基因表达来获得所需核酸或蛋白质,产品主要有细胞因子、蛋白质激素、抗血栓药等,广泛应用于癌症、免疫性疾病、抗病毒、心血管疾病等。本文就基因工程蛋白质药物为主的基因工程制药的概况进... 基因工程制药通过DNA重组技术,进行无性繁殖和基因表达来获得所需核酸或蛋白质,产品主要有细胞因子、蛋白质激素、抗血栓药等,广泛应用于癌症、免疫性疾病、抗病毒、心血管疾病等。本文就基因工程蛋白质药物为主的基因工程制药的概况进行综述。 展开更多
关键词 基因工程 DNA重组 细胞因子 蛋白质
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不依赖基因序列和连接反应克隆(SLIC)方法的改进 被引量:5
9
作者 王广珺 何川 张义正 《四川大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期 893-898,共6页
SLIC(Sequence and Ligation Independent Cloning)是一种不依赖于基因序列和连接反应的高效基因克隆新方法.为了进一步提高该方法的重组效率,将T4连接酶缓冲液改换成退火缓冲液,并使用相应的退火程序,可使重组效率提高至少10倍... SLIC(Sequence and Ligation Independent Cloning)是一种不依赖于基因序列和连接反应的高效基因克隆新方法.为了进一步提高该方法的重组效率,将T4连接酶缓冲液改换成退火缓冲液,并使用相应的退火程序,可使重组效率提高至少10倍.此外,参加重组的若干DNA片段在同一反应体系中用T4DNA聚合酶处理,再使用相同的方法退火,其重组效率仍然可以提高至少10倍.因此,利用本研究所建立的SLIC改进方法,不仅可以提高重组效率,而且还可以用于多DNA片段的高效重组,减少研究者的时间和节约实验成本. 展开更多
关键词 SLIC 退火缓冲液 退火程序 DNA重组
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Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶重组腺病毒载体的构建、鉴定及初步应用 预览
10
作者 屈睿 刘加宝 +3 位作者 桑建荣 任峰 赵爽 陈永昌 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2010年第1期 36-39,51,共5页
目的:构建携带Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶(PKGII)基因的重组腺病毒载体,并以此初步研究PKGⅡ对增殖相关的MAPK信号转导的影响。方法:将PKGⅡcDNA片段自载体pRC/CMV-GKⅡ(wt)中切出,克隆至穿梭质粒pENTR1A,用ClonaseⅡ将pENTR—PK... 目的:构建携带Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶(PKGII)基因的重组腺病毒载体,并以此初步研究PKGⅡ对增殖相关的MAPK信号转导的影响。方法:将PKGⅡcDNA片段自载体pRC/CMV-GKⅡ(wt)中切出,克隆至穿梭质粒pENTR1A,用ClonaseⅡ将pENTR—PKG11中的PKGⅡcDNA片段定向克隆到pAd/CMV/V5.DEST中构建pAd/CMV/V5-DEST—PKGⅡ(Ad—PKGⅡ)。重组质粒Ad—PKGⅡ用PacⅠ酶酶切,使其线性化,再用脂质体转染法转染HEK293A细胞进行包装和扩增,微量全细胞病变法检测病毒滴度,蛋白质印迹法检测重组腺病毒Ad—PKGⅡ感染细胞后PKGⅡ的表达以及MAPK通路关键成分胞外信号调节激酶(ERK)活性的变化。结果:重组腺病毒滴度达5×10^9 pfu/ml,蛋白质印迹法检测显示重组腺病毒感染CS54细胞后使其PKGⅡ表达明显增高;在BGC-823胃癌细胞株,PKGⅡ对EGF导致的ERK的激活有明显抑制作用。结论:成功构建了携带PKGⅡ基因的重组腺病毒,初步证明PKGⅡ对细胞增殖相关信号转导有抑制作用,为进一步研究PKGⅡ与肿瘤细胞发生发展的关系提供了基础。 展开更多
关键词 Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶 腺病毒载体 DNA重组 胞外信号调节激酶
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携带人野生型PKGⅠα基因的重组腺病毒载体的构建及鉴定 被引量:4
11
作者 易斌 陆俊羽 +2 位作者 白莉 王关嵩 钱桂生 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期69-72,共4页
目的:克隆人PKGⅠa基因,构建其重组腺病毒载体。方法:用RT-PCR方法从人肺动脉平滑肌组织中扩增PKGⅠa基因全长,经T/A克隆后,亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上,构建穿梭质粒pAdTrack-PKGⅠα。PmeⅠ酶切pAdTrack-PKGⅠα,然后分... 目的:克隆人PKGⅠa基因,构建其重组腺病毒载体。方法:用RT-PCR方法从人肺动脉平滑肌组织中扩增PKGⅠa基因全长,经T/A克隆后,亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上,构建穿梭质粒pAdTrack-PKGⅠα。PmeⅠ酶切pAdTrack-PKGⅠα,然后分别将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1和穿梭质粒pAdTrack-PKGⅠα转化至BJ5183感受态细菌中进行同源重组,PacⅠ酶切线性化重组质粒AdCMV-PKGⅠα后转染Ad293细胞进行病毒包装和扩增。检测PKGⅠα基因的表达,并用绿色荧光蛋白(GFP)法测定其滴度。结果:用RT-PCR方法,从人肺动脉中层扩增出PKGⅠα,测序证实为人PKGⅠα基因。构建了PKGⅠα基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒保存液。结论:成功地克隆了人PKGⅠα基因,并构建其重组腺病毒载体,为进一步研究PKGⅠα基因在低氧肺血管重建中的作用提供了有效的基因转移载体。 展开更多
关键词 PKGⅠα基因 腺病毒载体 基因克隆 DNA重组
降钙素基因相关肽真核表达载体pcDNA3.1/CGRP的构建 预览
12
作者 周卸来 《杭州师范学院学报:医学版》 2008年第5期305-309,共5页
目的构建带有大鼠降钙素基因相关肽基因(rCGRP)的重组真核表达载体pcDNA3.1(+)/rCGRP。方法应用Trizol试剂从SD大鼠脑组织提取总RNA,RT—PCR扩增rCGRPeDNA(PCR引物上加上双酶切位点),产物通过Hindm和BamHI酶切、纯化、连接... 目的构建带有大鼠降钙素基因相关肽基因(rCGRP)的重组真核表达载体pcDNA3.1(+)/rCGRP。方法应用Trizol试剂从SD大鼠脑组织提取总RNA,RT—PCR扩增rCGRPeDNA(PCR引物上加上双酶切位点),产物通过Hindm和BamHI酶切、纯化、连接,将目的基因插入真核表达质粒载体peDNA3.1(+),再将重组质粒转化感受态细菌,通过氨苄青霉素抗性筛选阳性克隆,再经PCR、酶切和测序鉴定所得克隆。结果(1)RT-PCR产物电泳分析扩增产物行1%琼脂糖凝胶电泳后可见一条特异的片段,和rCGRPcDNA大小相吻合;(2)重组克隆鉴定①PCR鉴定。PCR产物行1%琼脂糖凝胶电泳后可见一条特异的片段,和rCGRPeDNA大小相吻合;②酶切鉴定,抽提质粒经双酶切,酶切产物行1%琼脂糖凝胶电泳后在凝胶成像仪下可见两特异性条带,分别和pcDNA3.1(+)和rCGRPcD-NA大小相吻合;③DNA测序,测序结果经BLAST分析,与rCGRP基因编码区全长序列完全一致。结论(1)大鼠脑组织中有rCGRP的表达;(2)通过RT—PCR及基因重组技术成功构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)/rCGRP。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 PCDNA3.1 DNA重组
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低碳经济是氨基酸工业发展的战略重点 预览
13
作者 于信令 于军 《当代化工》 CAS 2008年第5期 544-546,共3页
在全球气候变暖的背景下,以低能耗、低污染为基础的“低碳经济”成为当今世界潮流。低碳经济对氨基酸工业节约资源和能源具有双重意义。研发创新是其根本出路。最近美国关于细菌进行DNA重组,利用农业废料生物发酵产生优质石油的信息... 在全球气候变暖的背景下,以低能耗、低污染为基础的“低碳经济”成为当今世界潮流。低碳经济对氨基酸工业节约资源和能源具有双重意义。研发创新是其根本出路。最近美国关于细菌进行DNA重组,利用农业废料生物发酵产生优质石油的信息,对氨基酸工业今后发展予以重大启示。 展开更多
关键词 低碳节能减排 研发创新 DNA重组 细菌发酵石油
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Cre/lox P系统介导的基因重组及其在酵母中的应用 被引量:2
14
作者 和东芹 肖冬光 吕烨 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S1期46-49,共4页
Cre/loxP系统是源于P1噬菌体的一个DNA重组体系,具有位点特异、时期特异、组织特异和高效重组的特点,它为转基因生物工程研究提供有力工具。概述了Cre/loxP系统的组成、结构、作用方式、机制、特点及其在酵母中的应用。
关键词 CRE/LOXP系统 CRE重组酶 酵母基因敲除 基因重组
解螺旋酶RecQ家族的研究进展 预览 被引量:2
15
作者 章诺贝 张吉翔 《生命科学》 CSCD 2007年第2期 203-207,共5页
DNA解螺旋酶RecQ家族在抑制人类肿瘤发生及早衰方面发挥着重要作用。本文介绍了RecQ家族成员的结构与生物学特性,并在此基础上对其在DNA复制、重组、修复以及在维持端粒稳定方面的作用机制作一综述。
关键词 RecQ解螺旋酶 DNA复制 DNA重组 DNA修复 端粒
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多基因双T—DNA植物表达载体的构建及拟南芥转化 预览 被引量:6
16
作者 李煦 王荣春 +1 位作者 何影 杨爱芳 《山东大学学报:理学版》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期 1-6,29,共7页
多基因植物表达载体用于植物遗传转化是培育具有多种优良品质作物的有效策略.双T-DNA系统是实现筛选完成后选择标记基因删除的一种简便可行的方式.为培育高度抗逆或去除标记基因的农作物,构建了多基因双T-DNA植物表达载体2T-bbgdD,... 多基因植物表达载体用于植物遗传转化是培育具有多种优良品质作物的有效策略.双T-DNA系统是实现筛选完成后选择标记基因删除的一种简便可行的方式.为培育高度抗逆或去除标记基因的农作物,构建了多基因双T-DNA植物表达载体2T-bbgdD,其中含有一个抗除草剂基因bar,3个抗逆相关基因(DREB1A,Na^+依赖性Pi转运体基因(d5),bet A)和一个报告基因gfp.利用农杆菌介导法将该载体转入拟南芥,获得了多基因共转化及去除标记基因的转基因拟南芥.可将此植物表达载体进一步用于作物的遗传转化. 展开更多
关键词 植物表达载体 DNA重组 多基因 双T-DNA 拟南芥 遗传转化
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大鼠GAD65重组腺病毒载体的构建和鉴定大鼠GAD65重组腺病毒载体的构建和鉴定 预览 被引量:1
17
作者 陈盛强 刘启才 +3 位作者 陈德忠 林勇平 孙卫文 廖卫平 《解剖学研究》 CAS 2007年第3期 163-167,共5页
目的 构建大鼠GAD65重组腺病毒载体.方法 将目的基因大鼠GAD65 cDNA亚克隆到穿梭质粒pShutile启动子CMV的下游,再通过I-Ceu Ⅰ和PI-Sce Ⅰ两个稀有酶切位点,将目的基因GAD65与腺病毒质粒DNA(pAdeno-X)进行体外连接,获得含目的基因GAD6... 目的 构建大鼠GAD65重组腺病毒载体.方法 将目的基因大鼠GAD65 cDNA亚克隆到穿梭质粒pShutile启动子CMV的下游,再通过I-Ceu Ⅰ和PI-Sce Ⅰ两个稀有酶切位点,将目的基因GAD65与腺病毒质粒DNA(pAdeno-X)进行体外连接,获得含目的基因GAD65重组腺病毒质粒DNA,后者经限制性内切酶Pae Ⅰ切割后,两端露出反向末端重复序列(rTR),利用脂质体转染293细胞,获得含目的基因重组腺病毒上清.PCR双引物检测含有目的基因GAD65的片段.结果 在挑选的5个空斑中,有4个含GAD65 cDNA阳性重组腺病毒.GAD65重组腺病毒可感染293细胞并在293细胞内进行有效的复制.PCR双引物检测证明含有目的基因GAD65片段,表明利用体外连接法成功构建了含目的基因GAD65重组腺病毒转移载体.结论 成功构建了GAD65重组腺病毒,为进一步研究GAD65重组腺病毒的功能提供了条件. 展开更多
关键词 腺病毒 DNA重组 谷氨酸脱羧酶65 载体
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基于分子重组技术的DNA计算 预览
18
作者 李燕 《潍坊学院学报》 2006年第6期 5-7,4,共4页
DNA计算是计算科学和分子生物学相结合的新领域。目前关于DNA计算的研究主要是抽象的计算模型和简单的原理性试验。DNA剪接计算模型是以生物DNA分子重组技术为基础的文法系统。本文主要介绍DNA剪接计算模型的文法结构及计算方法,证明了... DNA计算是计算科学和分子生物学相结合的新领域。目前关于DNA计算的研究主要是抽象的计算模型和简单的原理性试验。DNA剪接计算模型是以生物DNA分子重组技术为基础的文法系统。本文主要介绍DNA剪接计算模型的文法结构及计算方法,证明了DNA剪接模型可以计算所有图灵机可计算函数。 展开更多
关键词 DNA计算 DNA分子重组 DNA剪接模型
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计算科学的新领域:DNA计算(Ⅲ)
19
作者 李燕 《计算机科学》 CSCD 北大核心 2006年第3期 179-180,184,共3页
DNA计算是应用分子生物技术进行计算的新方法.从理论上研究DNA计算方法,有利于推动理论计算科学的发展.本系列文章应用形式语言及自动机理论技术,系统地探讨了DNA分子的可计算性及其计算能力.本文主要介绍DNA剪接计算模型的文法结构... DNA计算是应用分子生物技术进行计算的新方法.从理论上研究DNA计算方法,有利于推动理论计算科学的发展.本系列文章应用形式语言及自动机理论技术,系统地探讨了DNA分子的可计算性及其计算能力.本文主要介绍DNA剪接计算模型的文法结构和剪接计算方法,探讨了不同DNA剪接计算模型的计算能力,证明了所有图灵机可计算的函数理论上都可以通过DNA剪接计算模型来计算. 展开更多
关键词 DNA分子重组 DNA剪接操作 DNA剪接计算模型
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肠出血性大肠埃希菌O157:H7 espA基因的克隆与表达 预览 被引量:7
20
作者 王庆旭 毛旭虎 +5 位作者 邹全明 曾韦锟 罗萍 程建平 易勇 马颖 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期 535-538,共4页
目的 通过DNA重组技术表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的EspA蛋白,并分析其免疫学性质。方法 采用PCR技术从EHEC O157:H7基因组中扩增espA基因,T/A法克隆,连接至pET-28a(+)载体上,转化宿主细胞E.coli BL21(DE3),IPT... 目的 通过DNA重组技术表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的EspA蛋白,并分析其免疫学性质。方法 采用PCR技术从EHEC O157:H7基因组中扩增espA基因,T/A法克隆,连接至pET-28a(+)载体上,转化宿主细胞E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,亲和层析法纯化目的蛋白,SDS-PAGE测定其相对分子质量,同时分析其N端氨基酸序列,免疫家兔鉴定其抗原性。结果 重组espA基因片段的测序结果与GenBank上基因序列只有1个碱基不同,一致性为99.83%,所编码的氨基酸序列没有改变。重组EspA蛋白在工程菌中以包涵体的形式表达,表达量约30%。免疫家兔所得抗体滴度为1:32。结论构建高效表达EspA蛋白的重组载体pET-28a(+)-espA,表达的蛋白具有良好的免疫原性,为进一步制备亚单位疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 EHEC O157:H7 espA基因表达 DNA重组
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