期刊文献+
共找到534篇文章
< 1 2 27 >
每页显示 20 50 100
STAT1信号通路在全反式维甲酸诱导人白血病细胞向粒细胞分化过程中的作用与机制 预览 被引量:1
1
作者 孙琳琳 郭强 +8 位作者 朱肖肖 张振 赵霖 魏然 施引 尹训强 张云虹 姜国胜 李霞 《山东医药》 2018年第6期24-27,共4页
目的探讨信号转导与转录激活因子1(STAT1)信号通路在全反式维甲酸(ATRA)诱导人白血病细胞向粒细胞分化过程中的作用与机制,为白血病的临床治疗提供新的靶点与途径。方法将人急性髓系白血病细胞HL-60随机分为两组,观察组以ATRA(2μm... 目的探讨信号转导与转录激活因子1(STAT1)信号通路在全反式维甲酸(ATRA)诱导人白血病细胞向粒细胞分化过程中的作用与机制,为白血病的临床治疗提供新的靶点与途径。方法将人急性髓系白血病细胞HL-60随机分为两组,观察组以ATRA(2μmol/L)诱导HL-60细胞向粒细胞分化,对照组加入相同浓度DMSO;瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞表面CD11b表达,q-PCR法检测细胞STAT1、亮氨酸结构拉链转录因子ε(C/EBPε)mRNA,Western blotting法检测细胞STAT1蛋白及磷酸化(p-STAT1)水平,q-PCR法检测细胞miR-155-5p,Pearson相关性分析STAT1与miR-155-5p、C/EBPε表达的关系。结果与对照组比较,观察组诱导96 h后细胞体积变小,形状不规则,胞质增多,核浓缩,核仁变小或消失,分叶核显著增多。观察组ATRA诱导96 h时细胞表面CD11b阳性表达率为62.97%±1.90%,高于对照组的1.87%±0.08%(P〈0.05)。与对照组比较,观察组ATRA诱导后48、72、96 h细胞中STAT1 mRNA、C/EBPεmRNA、STAT1蛋白、p-STAT1蛋白表达增加(P均〈0.05),而miR-155-5p表达降低(P均〈0.05)。Pearson相关性分析显示,细胞STAT1 mRNA与miR-155-5p相对表达量呈负相关(r=-0.90,P〈0.05),与C/EBPεmRNA相对表达量呈正相关(r=0.96,P〈0.05)。结论miR-155-5p反向调控STAT1信号通路,进而活化粒细胞分化转录因子C/EBPε,诱导HL-60细胞向粒细胞分化;STAT1活化可能是ATRA诱导HL-60细胞向粒细胞分化的关键机制之一,靶向调控STAT1信号通路可能成为诱导HL-60细胞向粒系分化的有效靶点。 展开更多
关键词 人急性髓系白血病细胞 HL-60细胞 粒细胞 全反式维甲酸 信号转导与转录激活因子1 微小RNA-155-5p 亮氨酸结构拉链转录因子ε
在线阅读 下载PDF
Rabdosin B对急性早幼粒白血病细胞HL-60分化的诱导作用
2
作者 魏婧昕 丁兰 +2 位作者 刘扬 李佩蔚 刘国安 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第11期2591-2600,共10页
目的研究螺环内酯型对映-贝壳杉烷型二萜rabdosin B(RB)诱导HL-60向成熟粒细胞分化的特征及机制。方法采用台盼蓝染色、吉姆萨染色、硝基四氮唑蓝(NBT)还原力测定及流式细胞术检测RB对HL-60细胞增殖、细胞周期、NBT还原力、细胞吞... 目的研究螺环内酯型对映-贝壳杉烷型二萜rabdosin B(RB)诱导HL-60向成熟粒细胞分化的特征及机制。方法采用台盼蓝染色、吉姆萨染色、硝基四氮唑蓝(NBT)还原力测定及流式细胞术检测RB对HL-60细胞增殖、细胞周期、NBT还原力、细胞吞噬及细胞表面抗原CD11b表达的影响。结果 RB在1.0、3.0、5.0μmol/L下抑制HL-60细胞增殖,引起HL-60细胞G0/G1期阻滞,增加HL-60细胞肾形核和分叶核细胞比率,并伴随细胞NBT还原力和吞噬能力显著增强以及CD11b阳性细胞率明显上升。进一步检测显示,活性氧(ROS)清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,300μmol/L)及NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(APO,100μmol/L)和二联苯碘锚(DPI,0.1μmol/L)不仅可显著抑制RB诱导的细胞内ROS升高,并且可显著抑制RB诱导的HL-60细胞分化的各项特征指标的改变。结论 RB可通过上调HL-60细胞NADPH氧化酶活性,升高胞内ROS浓度,诱导HL-60细胞向成熟粒细胞分化。 展开更多
关键词 对映-贝壳杉烷型二萜 rabdosin B HL-60细胞 细胞分化 NADPH氧化酶
siRNA靶向抑制4-1BBL基因表达在HL-60细胞对淋巴细胞增殖和凋亡的影响 预览
3
作者 王慧 吴俊英 《蚌埠医学院学报》 CAS 2018年第9期1121-1124,共4页
目的:观察4-1BB配体(4-1BBL)-siRNA对HL-60细胞细胞因子分泌的影响;对比观察4-1BBL基因被干扰前后,HL-60细胞培养上清液对淋巴细胞增殖、凋亡诱导作用的影响;探讨肿瘤细胞的免疫逃逸机制。方法: 采用化学合成法人工合成靶向人4-1... 目的:观察4-1BB配体(4-1BBL)-siRNA对HL-60细胞细胞因子分泌的影响;对比观察4-1BBL基因被干扰前后,HL-60细胞培养上清液对淋巴细胞增殖、凋亡诱导作用的影响;探讨肿瘤细胞的免疫逃逸机制。方法: 采用化学合成法人工合成靶向人4-1BBL基因的siRNA,脂质体转染法转染HL-60细胞;半定量RT-PCR和流式细胞术检测干扰前后HL-60细胞4-1BBL-mRNA和表面蛋白的表达水平;ELISA法检测4-1BBL干扰前后HL-60细胞培养上清液转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)分泌水平。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,收集4-1BBL干扰后的HL-60细胞培养上清液与体外分离的人淋巴细胞共培养,MTT法检测机体淋巴细胞增殖水平;流式细胞术检测淋巴细胞凋亡比率的变化。结果: 靶向4-1BBL-siRNA转染HL-60后,4-1BBL-mRNA和蛋白的表达水平明显降低( P 〈0.01); ELISA结果显示,4-1BBL基因被干扰后,HL-60细胞培养上清液中TGF-β和VEGF分泌水平明显降低( P 〈0.01和 P 〈0.05)。与干扰前比较,干扰后的HL-60细胞培养上清液对机体淋巴细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用均下降( P 〈0.05)。结论: HL-60细胞高表达的4-1BBL信号具有反向调节作用,通过促进其分泌TGF-β、VEGF,使肿瘤细胞培养上清液对淋巴细胞活性的抑制作用增强并促进淋巴细胞凋亡,可能是肿瘤细胞逃避宿主免疫监视的机制之一。 展开更多
关键词 肿瘤免疫 4-1BB配体 SIRNA HL-60细胞 增殖 凋亡 免疫逃逸
在线阅读 下载PDF
茅莓总皂苷诱导HL-60白血病细胞凋亡机制研究 预览
4
作者 许晓峰 杨威 张学进 《中国中医药科技》 CAS 2018年第4期491-494,497共5页
目的:明确茅莓总皂苷(TSRP)在体外对HL-60细胞抑制增殖和诱导凋亡作用。方法:MTT法检测不同浓度TSRP对HL-60细胞的增殖抑制;使用DAPI和Annexin V-FITC/PI法观察TSRP诱导凋亡作用;RT-PCR法检测TSRP对HL-60细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3... 目的:明确茅莓总皂苷(TSRP)在体外对HL-60细胞抑制增殖和诱导凋亡作用。方法:MTT法检测不同浓度TSRP对HL-60细胞的增殖抑制;使用DAPI和Annexin V-FITC/PI法观察TSRP诱导凋亡作用;RT-PCR法检测TSRP对HL-60细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9和Fas mRNA表达的影响。结果:MTT显示TSRP在浓度200、400、800 mg/L对HL-60细胞生长抑制呈剂量依赖性,浓度800mg/L时吸光度为(0.232±0.030),与空白对照组比较差异显著(P〈0.01)。DAPI显示TSRP在一定浓度内干预HL-60细胞后出现明显凋亡现象;Annexin V-FITC/PI凋亡检测显示经不同浓度TSRP处理后,HL-60细胞的早期凋亡率明显增加;RT-PCR检测到在一定浓度范围内,TSRP显著抑制细胞Bcl-2和Fas mRNA表达,同时Bax、Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达明显增加,以上均呈剂量依赖性。结论:在体外TSRP是通过Bcl-2和Fas途径诱导HL-60细胞凋亡,具有较好的临床应用前景。 展开更多
关键词 茅莓总皂苷 HL-60细胞 凋亡 Bcl-2 Bax Fas Caspase-3 CASPASE-9 体外实验
在线阅读 下载PDF
别欧前胡内酯对HL-60细胞凋亡的影响 被引量:1
5
作者 白英英 董昌虎 +5 位作者 晁旭 周智辉 翟冬芝 郭雨晨 崔胜楠 李宏 《中华实用诊断与治疗杂志》 2018年第1期31-34,共4页
目的探讨别欧前胡内酯对人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞凋亡的影响及可能的机制。方法对数生长期人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞随机分为对照组和4、16、32、64、128mg/L别欧前胡内酯组。别欧前胡内酯作用24h,应用透射电子显微镜... 目的探讨别欧前胡内酯对人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞凋亡的影响及可能的机制。方法对数生长期人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞随机分为对照组和4、16、32、64、128mg/L别欧前胡内酯组。别欧前胡内酯作用24h,应用透射电子显微镜观察HL-60细胞形态学改变,MTT法检测别欧前胡内酯对HL-60细胞增殖的影响,根据细胞生长抑制率计算别欧前胡内酯对HL-60细胞的半数抑制浓度(halfinhibitory concentration,IC50),流式细胞仪检测HL-60细胞凋亡率及线粒体膜电位改变。结果别欧前胡内酯作用24h,对照组HL-60细胞表面光滑,形态正常,大小均匀;64、128mg/L别欧前胡内酯组HL-60细胞数目明显减少,且体积变小,呈凋亡形态改变;MTT检测结果显示,别欧前胡内酯对HL-60细胞增殖具有明显的抑制作用,IC50值为(75±13)mg/L;流式细胞仪检测结果显示,对照组HL-60细胞凋亡率为(11.6±5.2)%,4、16、32、64、128mg/L别欧前胡内酯组HL-60细胞凋亡率分别为(17.2±6.1)%、(24.2±8.6)%、(36.1±4.5)%、(46.0±7.3)%和(69.9±10.2)%,随别欧前胡内酯浓度增加,HL-60细胞凋亡率逐渐增高,线粒体膜电位逐渐降低(P%O.05)。结论别欧前胡内酯可明显促进人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞凋亡,其机制可能与改变HL-60细胞线粒体膜电位有关。 展开更多
关键词 人急性早幼粒细胞白血病 HL-60细胞 别欧前胡内酯 细胞凋亡
大蒜素诱导人白血病HL-60细胞程序性坏死及分子机制的研究
6
作者 熊春雷 姚青林 +2 位作者 冯品 王晓光 张静宜 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第35期6833-6838,共6页
目的:研究大蒜素对人白血病HL-60细胞的抗肿瘤作用,检测程序性坏死明确大蒜素处理后HL-60细胞的死亡方式,并以JNK、RIP1和RJP3为靶点探讨可能的分子机制。方法:不同浓度大蒜素处理HL-60细胞后,在不同时间点采用MTT法检测细胞活力... 目的:研究大蒜素对人白血病HL-60细胞的抗肿瘤作用,检测程序性坏死明确大蒜素处理后HL-60细胞的死亡方式,并以JNK、RIP1和RJP3为靶点探讨可能的分子机制。方法:不同浓度大蒜素处理HL-60细胞后,在不同时间点采用MTT法检测细胞活力,使用非选择性caspase抑制剂z-vad-fmk研究细胞凋亡在其中的作用;50μM大蒜素处理HL-60细胞后,检测LDH释放量和PI染色阳性细胞比例反映细胞程序性坏死程度,采用免疫印迹法检测各时间点RIP1、R1P3表达和JNK磷酸化程度;使用JNK特异性抑制剂SP600125处理HL-60细胞,采用免疫共沉淀法检测RIP1与RIP3相互作用,并通过检测细胞活力、LDH释放量和PI染色阳性细胞比例研究JNK在大蒜素抗白血病活性中的作用。结果:大蒜素可显著抑制人白血病HL-60细胞增殖,这种作用并不完全依赖于诱导细胞凋亡;50μM大蒜素可诱导HL-60细胞发生程序性坏死,这种作用可被程序性坏死的特异性抑制剂necrostatin-1逆转;50μM大蒜素可显著增加HL-60细胞RIP1的表达和JNK的磷酸化水平,而对RJP3的表达无明显影响;50μM大蒜素可显著增加RIP1与RIP3的相互作用,使用JNK特异性抑制剂SP600125可逆转大蒜素的抗白血病作用。结论:一定剂量的大蒜素可通过激活JNK增加RIP1与RIP3的相互作用,诱导人白血病HL-60细胞发生程序性坏死,进而发挥抗白血病作用。 展开更多
关键词 大蒜素 白血病 程序性坏死 R1P1 JNK HL-60细胞
HL-60细胞中ICAT基因沉默对Wnt信号通路及NSC67657诱导细胞分化的影响
7
作者 王伟佳 陈康 +2 位作者 王娟 黄云秀 张德才 《中华血液学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期972-976,共5页
目的探讨β-catenin相关蛋白1(ICAT)沉默对Wnt信号通路及甾醇类新药NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化的影响。方法NSC67657诱导HL-60细胞分化,流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD14的表达,检测细胞分化程度;构建慢病毒LV-ICAT-RNAi... 目的探讨β-catenin相关蛋白1(ICAT)沉默对Wnt信号通路及甾醇类新药NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化的影响。方法NSC67657诱导HL-60细胞分化,流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD14的表达,检测细胞分化程度;构建慢病毒LV-ICAT-RNAi载体,感染HL-60细胞,采用荧)匕实时定量PCR和Westernblot技术检测感染前后ICAT基因和蛋白表达情况,判断干扰效果;采用免疫共沉淀技术检测β-catenin与ICAT蛋白在细胞内的相互作用;采用Westernblot技术分析NSC67657诱导非感染HL-60细胞(HL-60v组)和LV-ICAT-RNAi载体感染HL-60细胞(HL-60i组)前后Wnt/β-catenin通路下游靶点CyclinDl、TCF-1和c-Jun的表达情况;NSC67657分别作用HL-60v组和HL-60i组细胞24h,采用瑞氏染色、透射电子显微镜、流式细胞术观察细胞分化情况。结果10μmol/LNSC67657可以诱导HL-60细胞向单核系分化,连续诱导5d后,CD14+细胞比例为(92.30±5.14)%;HL-60i细胞ICATmRNA表达(0.07±0.01)明显低于HL-60v组(1.00±0.08)(P=0.002)(平均敲减效率为93.2%),Westernblot结果与PCR结果-致(P=0.001);免疫共沉淀结果显示,ICAT与3-catenin蛋白在细胞分化前后都存在相互作用,药物诱导细胞分化后两者相互作用条带吸光度明显增加。药物作用HL-60i细胞Wnt信号通路下游靶蛋白CyclinD1、TCF-1和c-Jun表达明显高于HL-60v组,但低于非药物处理组。NSC67657作用HL-60i细胞CD14+细胞比例为(8.33±3.14)%,明显低于HL-60v组的(19.08±4.73)%,但仍高于非药物处理非感染HL-60细胞组(0.60±0.03)%(F=119.24,P=0.010),细胞彤态和超微结果符合细胞表面分化抗原检测结论。结论ICAT蛋白参与了NSC67657诱导HL.60细胞的单核系分化,Wnt/β-catenin信号通路可能起到桥梁作用。 展开更多
关键词 HL-60细胞 β-catenin}H关蛋白1 分化 WNT信号通路
法舒地尔对HL-60细胞增殖、凋亡、分化及侵袭作用的影响 预览
8
作者 贾少勋 茹杏丽 王一 《陕西医学杂志》 CAS 2017年第10期1329-1331,共3页
目的:探讨ROCK酶抑制剂法舒地尔对HL-60细胞增殖、凋亡、分化以及侵袭作用的影响。方法:用台盼蓝拒染实验绘制法舒地尔作用下,HL-60细胞的生长曲线;MTT法检测法舒地尔对HL-60细胞增殖抑制。应用流式细胞术CD11b抗原表达,硝基四唑氮蓝... 目的:探讨ROCK酶抑制剂法舒地尔对HL-60细胞增殖、凋亡、分化以及侵袭作用的影响。方法:用台盼蓝拒染实验绘制法舒地尔作用下,HL-60细胞的生长曲线;MTT法检测法舒地尔对HL-60细胞增殖抑制。应用流式细胞术CD11b抗原表达,硝基四唑氮蓝(NBT)还原实验分析法舒地尔对HL-60细胞分化影响。采用AnnexinV/PI双染试剂盒上流式细胞仪测定细胞凋亡。利用Transwell穿孔板法观察法舒地尔对HL-60细胞侵袭力的影响。结果:法舒地尔抑制HL-60细胞呈浓度和时间依赖性、法舒地尔作用于HL-60细胞12、24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为(89.65±12.45)μmol/L、(69.21±15.48)μmol/L、(65.29±20.31)μmol/L以及(58.54±10.02)μmol/L。法舒地尔诱导HL-60细胞凋亡呈时间和剂量依赖性。法舒地尔可增加HL-60细胞后硝基四唑氮蓝阳性率,上调CD11b单核分化抗原的表达。法舒地尔明显抑制HL-60细胞穿透Transwell小室,侵袭到穿孔膜外。结论:法舒地尔有抑制HL-60细胞增殖、诱导凋亡、促进分化及抑制侵袭等多种抗白血病作用。 展开更多
关键词 HL-60细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞分化 @法舒地尔
在线阅读 免费下载
焦炉逸散物致HL-60细胞急性损伤及机制研究
9
作者 沈美丽 解秋艳 +5 位作者 李红丽 王艳华 纪乾鹏 王庆荣 戴宇飞 段化伟 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2017年第1期14-19,共6页
目的建立焦炉逸散物(COE)对离体培养的人白血病细胞株HL-60细胞的染毒模型,探讨COE对血液细胞的急性毒性作用及机制。方法取对数生长期HL-60细胞,分别以终浓度为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/L的COE染毒并培养24 h后,以CCK-8法检测细胞存... 目的建立焦炉逸散物(COE)对离体培养的人白血病细胞株HL-60细胞的染毒模型,探讨COE对血液细胞的急性毒性作用及机制。方法取对数生长期HL-60细胞,分别以终浓度为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/L的COE染毒并培养24 h后,以CCK-8法检测细胞存活率,以乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒性,以2',7'-二氯荧光素二乙酸酯荧光探针法和硝基蓝四氮唑染料法检测细胞活性氧(ROS)水平,以蛋白免疫印迹法检测核转录因子κB(NF-κB)信号通路蛋白表达情况。结果随着COE染毒剂量的增加,HL-60细胞毒性上升(P〈0.01),细胞存活率下降(P〈0.01),细胞内ROS水平下降(P〈0.01),细胞外ROS水平上升(P〈0.01),均呈剂量-效应关系。4个剂量组HL-60细胞p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白相对表达水平均高于对照组(P〈0.05),但均无剂量-效应关系。结论 COE可导致HL-60细胞急性损伤,呈剂量-效应关系;其作用机制可能与COE诱导HL-60细胞发生ROS释放与清除失衡,进而导致NF-κB信号通路活化有关。HL-60细胞可作为COE对血液细胞毒性分析的常用细胞模型。 展开更多
关键词 焦炉逸散物 HL-60细胞 活性氧 核转录因子ΚB
三氧化二砷通过激活Drp-1增加人白血病HL-60细胞的放疗敏感性
10
作者 张静宜 范丹 +2 位作者 肖方 李媛春 熊春雷 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第17期3206-3210,共5页
目的:研究三氧化二砷(Arsenictrioxide,ATO)对人白血病HL-60细胞放疗敏感性的影响,并以动力相关蛋白-1(dynamin—relatedprotein 1,Drp-1)为靶点探讨其可能的机制。方法:μg/mL浓度的ATO处理HL-60细胞后使用20Gy强度进行放疗... 目的:研究三氧化二砷(Arsenictrioxide,ATO)对人白血病HL-60细胞放疗敏感性的影响,并以动力相关蛋白-1(dynamin—relatedprotein 1,Drp-1)为靶点探讨其可能的机制。方法:μg/mL浓度的ATO处理HL-60细胞后使用20Gy强度进行放疗,采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,通过线粒体钙离子缓冲能力检测线粒体钙离子代谢障碍,采用免疫印迹法检测Drp-1蛋白表达,并通过Drp—1阻滞剂mdivi-1预处理的方法检测Drp-1在实验中的作用。结果:1μg/mL浓度的ATO对HL-60细胞活力无影响,但可显著增加20Gy放疗所致的细胞活力下降、细胞凋亡和线粒体钙离子代谢障碍;1μg/mL浓度的ATO可显著增加Drp-1蛋白表达,使用mdivi-1预处理可部分逆转ATO的放疗增敏作用。结论:一定剂量的ATO可增加人白血病HL-60细胞的放疗敏感性,而这一作用可能是通过激活Drp-1蛋白表达而实现。 展开更多
关键词 三氧化二砷 Drp-1 凋亡 线粒体 HL-60细胞
三氧化二砷通过线粒体途径诱导人白血病HL-60细胞凋亡 被引量:1
11
作者 冯品 姚青林 +2 位作者 王晓光 胡晓辉 熊春雷 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第24期4621-4625,共5页
目的:研究三氧化二砷(Arsenic trioxide,ATO)对人白血病HL-60细胞凋亡的影响,并以线粒体通路为靶点探讨其可能的机制.方法:采用1μg/mL、5 μg/mL及10 μg/mLATO处理HL-60细胞24小时后,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,通过细胞内MD... 目的:研究三氧化二砷(Arsenic trioxide,ATO)对人白血病HL-60细胞凋亡的影响,并以线粒体通路为靶点探讨其可能的机制.方法:采用1μg/mL、5 μg/mL及10 μg/mLATO处理HL-60细胞24小时后,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,通过细胞内MDA与GSH含量检测反映氧化应激水平,采用免疫印迹法检测凋亡相关分子表达,并通过免疫荧光染色检测细胞线粒体膜电位(mitogchondrial membrane potential,MMP)水平.结果:5μg/mL及10 μg/mL ATO可显著诱导人白血病HL-60细胞凋亡,并显著增加其氧化应激水平,增加促凋亡分子Bax和Caspase-3的表达,而抑制抗凋亡分子Bcl-2的表达,降低HL-60细胞线粒体膜电位的水平.结论:一定剂量的ATO可诱导人白血病HL-60细胞凋亡,而这一作用可能是通过诱导线粒体相关性凋亡信号通路激活实现. 展开更多
关键词 三氧化二砷 氧化应激 凋亡 线粒体 HL-60细胞
干扰HMGA2基因表达抑制HL60细胞的增殖及浸润 预览
12
作者 刘文丹 周坚 +1 位作者 杜伟峰 何伟 《临床与病理杂志》 2017年第9期1786-1790,共5页
目的:探索干扰高迁移率族蛋白A2(high mobility group protein A2,HMGA2)基因的表达对HL-60白血病细胞体外增殖、浸润的影响。方法:实验分为3组,实验组为稳定转染慢病毒干扰HMGA2基因表达载体的HL-60细胞;阴性对照组为稳定转染慢病... 目的:探索干扰高迁移率族蛋白A2(high mobility group protein A2,HMGA2)基因的表达对HL-60白血病细胞体外增殖、浸润的影响。方法:实验分为3组,实验组为稳定转染慢病毒干扰HMGA2基因表达载体的HL-60细胞;阴性对照组为稳定转染慢病毒空载体HL-60细胞;空白对照组为未转染的HL60细胞。3组分别接种BALB/c裸鼠建立种植瘤模型,检测接种后各个时间点裸鼠外周血和骨髓中白血病细胞的比例(肿瘤负荷)、生活质量,计算接种40 d后各组小鼠的肝脾指数。结果:RTPCR及Western印迹证明干扰RNA慢病毒表达载体可明显降低HL-60细胞靶基因的表达。接种后骨髓涂片结果显示裸鼠白血病模型成功建立。接种后21,28,40 d,实验组HL-60细胞在小鼠外周血和骨髓中的比例均明显低于阴性对照组及空白对照组,差异有统计学意义(P〈0.05),其白血病细胞比例随接种时间延长而增加的速度亦明显变缓;且实验组小鼠萎糜少动、腹部膨隆、皮下结节等并发症出现时间明显较空白对照组及阴性对照组延迟;接种40 d后实验组小鼠肝脾指数分别为66.76±5.56和20.57±0.75,均明显低于其余两组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:干扰HMGA2基因表达,可明显抑制HL60白血病细胞在小鼠体内增殖、浸润。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白A2 RNA干扰 HL-60细胞
在线阅读 下载PDF
白血病细胞株分泌的基质金属蛋白酶在中枢神经系统白血病发病机制中的作用 被引量:2
13
作者 冯洒然 陈子兴 +3 位作者 岑建农 沈宏杰 王元元 姚利 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1070-1076,共7页
目的 观察白血病细胞分泌的基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9对脑微血管内皮细胞(BMVEC)紧密连接蛋白ZO-1、claudin-5、occludin表达及对血脑屏障(BBB)通透性的影响,探讨MMP-2和MMP-9在中枢神经系统白血病(CNSL)发病机制中的作用.... 目的 观察白血病细胞分泌的基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9对脑微血管内皮细胞(BMVEC)紧密连接蛋白ZO-1、claudin-5、occludin表达及对血脑屏障(BBB)通透性的影响,探讨MMP-2和MMP-9在中枢神经系统白血病(CNSL)发病机制中的作用.方法 ①实时定量PCR检测SHI-1、HL-60、U937细胞MMP-2、MMP-9基因的转录水平;明胶酶谱法检测细胞培养上清中MMP-2和MMP-9蛋白表达;体外穿膜实验观察各白血病细胞株的侵袭能力.②将原代人BMVEC接种于铺有Matrigel胶和纤维黏连蛋白包被的Transwell小室系统中,建立体外BBB模型.将蛋白酶抑制剂GM6001处理或未处理的SHI-1、HL-60、U937细胞或MMP-2/MMP-9基因沉默的SHI-1细胞接种于BBB模型的Transwell小室上层与BMVEC共培养,倒置相差显微镜观察BMVEC的形态变化,激光共聚焦显微镜观察紧密连接蛋白ZO-1、claudin-5和occludin的表达,计算白血病细胞的穿膜率.结果 ①SHI-1细胞表达较高转录水平的MMP-2和MMP-9及酶活性,且侵袭能力强于HL-60、U937细胞(P<0.01).②与HL-60、SHI-1和U937细胞共培养后,融合致密的BMVEC之间出现间隙、细胞呈单个生长,紧密连接蛋白ZO-1、claudin-5和occludin的表达明显下调,各白血病细胞均不同程度地穿过体外BBB进入Transwell小室下层.其中SHI-1细胞对BMVEC的形态改变及3种紧密连接蛋白的下调最为明显,穿膜率最高.GM6001明显抑制白血病细胞分泌MMP-2和MMP-9,使BMVEC的形态有所恢复,同时上调ZO-1、claudin-5和occludin的表达,降低了BBB的通透性.③用siRNA分别沉默MMP-2和MMP-9基因后,SHI-1细胞分泌MMP-2和MMP-9被抑制,SHI-1细胞穿膜率较沉默前分别下降43.64%和57.30%(P<0.01),ZO-1、claudin-5和occludin表达上调.结论 白血病细胞株分泌的MMP-2和MMP-9能通过降解BMVEC紧密连接蛋白ZO-1、claudin-5和occludin而破坏BBB. 展开更多
关键词 HL-60细胞 U937细胞 SHI-1细胞 血脑屏障 基质金属蛋白酶类
盐酸普鲁卡因对人白血病HL-60细胞ID4基因甲基化状态的影响 预览
14
作者 林文远 朱春江 +3 位作者 刘冯 陈蓓莉 农庆伟 吴贤义 《华夏医学》 CAS 2016年第5期12-16,共5页
目的:探讨盐酸普鲁卡因对体外培养的人白血病HL-60细胞ID4基因甲基化状态的影响。方法:体外培养HL-60细胞,使用不同浓度(2 mmol/L、4 mmol/L、6 mmol/L)的普鲁卡因处理细胞,分别采用MS-HRM、RT-PCR法检测HL-60细胞ID4基因启动子区... 目的:探讨盐酸普鲁卡因对体外培养的人白血病HL-60细胞ID4基因甲基化状态的影响。方法:体外培养HL-60细胞,使用不同浓度(2 mmol/L、4 mmol/L、6 mmol/L)的普鲁卡因处理细胞,分别采用MS-HRM、RT-PCR法检测HL-60细胞ID4基因启动子区域的甲基化状态和ID4m RNA的表达。结果:HL-60细胞ID4基因在普鲁卡因作用下呈现明显的去甲基化状态,ID4m RNA表达明显增加,且以上改变均随药物浓度的增加而增强(P〈0.05)。结论:盐酸普鲁卡因对HL-60细胞的ID4基因启动子区域有去甲基化作用,上调细胞ID4 m RNA的表达。 展开更多
关键词 盐酸普鲁卡因 ID4基因 甲基化 HL-60细胞
在线阅读 下载PDF
氢醌染毒HL-60细胞DNA损伤模型构建及其与DNA-PKCS表达之间的关系
15
作者 孔萌萌 孙江华 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2016年第9期878-881,共4页
目的探讨DNA-PKCS在氢醌致人急性粒细胞白血病HL-60细胞DNA双链断裂损伤修复中作用。方法采用不同剂量氢醌在不同时间范围内诱导HL-60细胞,应用荧光显微镜检测HQ处理各个阶段γ-H2AX焦点的形成。利用Real Time-PCR、免疫荧光染色等分... 目的探讨DNA-PKCS在氢醌致人急性粒细胞白血病HL-60细胞DNA双链断裂损伤修复中作用。方法采用不同剂量氢醌在不同时间范围内诱导HL-60细胞,应用荧光显微镜检测HQ处理各个阶段γ-H2AX焦点的形成。利用Real Time-PCR、免疫荧光染色等分子生物学技术,研究DNA-PKCS基因在转录和翻译水平的表达。结果染毒后18h组和24h组,50um和100um HQ组γ-H2AX焦点的数目随氢醌浓度的递增而明显增加,但两者相比无明显差异。染毒后18h组和24h组,HL-60细胞内DNA-PKCS转录表达水平与蛋白表达水平诱导氢醌浓度之间存在明显的时间剂量依赖关系。结论50um和100um的氢醌18h和24h处理可以诱导HL-60细胞内明显的DNA双链断裂损伤,且损伤程度与DNA-PKCS表达水平直接相关。 展开更多
关键词 HQ HL-60细胞 DNA损伤模型 DNA—PKCS
白杨素诱导白血病细胞HL-60凋亡及其机制 预览 被引量:3
16
作者 张嵘 王洪涛 +3 位作者 苗苗 李佳 杨莹 刘卓刚 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第10期1522-1524,共3页
目的:检测白杨素诱导白血病细胞HL-60凋亡及其机制。方法:分别利用MTT实验和AnnexinV-FITC/PI双染实验检测细胞增殖和凋亡。Westernblot技术检测相关通路蛋白变化。结果:白杨素可以明显诱导白血病细胞HL-60凋亡。白杨素处理后细胞的p... 目的:检测白杨素诱导白血病细胞HL-60凋亡及其机制。方法:分别利用MTT实验和AnnexinV-FITC/PI双染实验检测细胞增殖和凋亡。Westernblot技术检测相关通路蛋白变化。结果:白杨素可以明显诱导白血病细胞HL-60凋亡。白杨素处理后细胞的p-AKT蛋白水平明显下降。结论:白杨素能够通过AKT通路诱导HL-60细胞凋亡。 展开更多
关键词 HL-60细胞 白杨素 增殖 凋亡 AKT
在线阅读 下载PDF
甾醇类药NSC67657诱导急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞单核系分化中Wnt信号通路相关蛋白的表达 被引量:3
17
作者 王晋蜀 王伟佳 +1 位作者 王婷 张彦 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期246-251,共6页
目的:探讨甾醇类药NSC67657诱导急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞单核系分化时β连环蛋白(β-catenin)和T细胞因子4( TCF-4)抑制蛋白( ICAT)和Wnt信号通路相关mRNA和蛋白的表达。方法10μmol/L NSC67657药物处理HL-60细胞5 d后,... 目的:探讨甾醇类药NSC67657诱导急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞单核系分化时β连环蛋白(β-catenin)和T细胞因子4( TCF-4)抑制蛋白( ICAT)和Wnt信号通路相关mRNA和蛋白的表达。方法10μmol/L NSC67657药物处理HL-60细胞5 d后,采用瑞氏染色、非特异酯酶染色分析细胞的分化方向,采用流式细胞术分析细胞的分化程度和细胞周期的分布情况,采用逆转录聚合酶链反应和Western blot检测 Wnt 信号通路相关因子 ICAT、β-catenin、TCF-4、Wnt 信号通路下游靶点c-myc、细胞周期蛋白D1( cyclin D1)、TCF-1 mRNA和蛋白在细胞分化前后的表达情况。结果 NSC67657可诱导HL-60细胞向单核系分化。10μmol/L NSC67657作用5 d后,处理组CD14+细胞数为(94.37±2.84)%,高于未处理组[(1.31±0.09)%],差异有统计学意义(P<0.01)。处理组G1/G0期细胞所占比例为(76.46±2.83)%,高于未处理组[(59.40±5.42)%],差异有统计学意义(P<0.05);处理组S期细胞所占比例为(18.76±0.98)%,低于未处理组[(34.38±2.61)%],差异有统计学意义(P<0.05)。药物作用后HL-60细胞中ICAT mRNA和蛋白的表达水平上调(均P<0.01),β-catenin mRNA和蛋白的表达水平下调(均P<0.01),细胞核中β-catenin蛋白的表达水平下调( P<0.01)。处理组和未处理组HL-60细胞中TCF-4 mRNA、总蛋白和细胞核蛋白的表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。药物诱导HL-60细胞分化后,Wnt信号通路下游靶基因c-myc、cyclin D1、TCF-1 mRNA和蛋白的表达水平均下调(均P<0.05)。结论 NSC67657可诱导HL-60细胞向单核系分化,导致Wnt信号通路关键调节因子β-catenin及下游靶点的表达下调,Wnt信号通路可能直接或间接地参与了HL-60细胞的单核系分化进程。 展开更多
关键词 白血病 早幼粒细胞 急性 WNT蛋白质类 HL-60细胞 细胞分化 NSC67657 β连环蛋白和T细胞因子4抑制蛋白
中性粒细胞碱性磷酸酶对中性粒细胞功能影响的体外研究 被引量:2
18
作者 李海宁 李伟 +2 位作者 杨晋 张春艳 吴惠毅 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期405-411,共7页
目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophils alkaline phosphatase,NAP)对中性粒细胞迁移、活性氧(ROS)生成以及凋亡的影响。方法通过慢病毒感染人早幼粒细胞白血病细胞株HL-60获得NAP高表达细胞株,采用RT-PCR和Westernblot技术... 目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophils alkaline phosphatase,NAP)对中性粒细胞迁移、活性氧(ROS)生成以及凋亡的影响。方法通过慢病毒感染人早幼粒细胞白血病细胞株HL-60获得NAP高表达细胞株,采用RT-PCR和Westernblot技术分别检测感染后细胞NAP的基因转录及蛋白表达水平。HL-60细胞经1.5%DMSO体外诱导分化为类中性粒细胞后进行相关实验:分别利用Transwell迁移实验和流式细胞术检测高表达NAP中性粒细胞的迁移及ROS生成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Westernblot法检测高表达NAP中性粒细胞中凋亡相关蛋白Bax、caspase-3和caspase-9的表达情况。结果经慢病毒感染的HL-60细胞通过嘌呤霉素筛选后80%以上细胞可见绿色荧光,且NAP在基因及蛋白水平表达均明显升高。HL.60细胞经1.5%DMSO体外诱导分化5d后,细胞体积变小、表面出现许多突起,核质比例降低,核仁消失,核染色质由密集趋向疏松,细胞核扭曲折叠呈杆状或分叶,CD11b+细胞百分比明显升高。Transwell迁移实验结果显示,高表达NAP的中性粒细胞迁移细胞数多于阴性对照组[(15.30±3.65)×10^3对(8.00±0.78)×10^3,P〈0.001]。流式细胞术检测结果表明,高表达NAP的中性粒细胞胞内ROS的平均荧光强度高于阴性对照组(355.70±20.10对103.22±4.71,P〈0.001);与阴性对照组比较,高表达NAP中性粒细胞胞凋亡率及凋亡相关蛋白Bax、active-caspase.3以及active.caspase-9的表达水平明显上调。结论NAP具有促进类中性粒细胞迁移及ROS生成、加速细胞凋亡的生物学作用。 展开更多
关键词 HL-60细胞 碱性磷酸酶 细胞迁移分析 活性氧 细胞凋亡
达努塞替对HL-60细胞抗肿瘤作用机制的研究 预览 被引量:1
19
作者 何思佳 舒莉萍 +1 位作者 任涛 何志旭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期990-997,共8页
目的:探讨丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂达努塞替对人急性髓细胞白血病(AML)细胞株HL-60的细胞周期阻滞、自噬和凋亡的影响。方法:用MTT法检测达努塞替对HL-60细胞的生长抑制作用;用流式细胞术检测相同时间不同浓度药物组与同一浓度不同... 目的:探讨丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂达努塞替对人急性髓细胞白血病(AML)细胞株HL-60的细胞周期阻滞、自噬和凋亡的影响。方法:用MTT法检测达努塞替对HL-60细胞的生长抑制作用;用流式细胞术检测相同时间不同浓度药物组与同一浓度不同时间组的细胞周期、细胞凋亡及细胞自噬;用Western blot方法检测细胞周期相关蛋白CDK1/CDC2、CDK2、cyclin B1、P21Waf1/Cip1、P27Kip1和P53,凋亡相关蛋白Bcl-x L、Bcl-2、Bax、PUMA、cleaved caspase-3及cleaved caspase-9以及自噬相关蛋白p-PI3K、PTEN、p-Akt、p-m TOR、Beclin 1、LC3-I和LC3-II的水平。用共聚焦显微镜检测同时间不同浓度药物组细胞的自噬情况。结果:达努塞替能明显抑制HL-60细胞的活力,诱导细胞周期G2/M期阻滞,可以通过线粒体caspase-3途径诱导细胞凋亡,同时可以通过抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路诱导细胞自噬。结论:达努塞替可通过抑制作为染色体伴侣蛋白且在有丝分裂中调控染色质复制与分离的极光激酶A/B有效抑制HL-60细胞生长,引起细胞周期阻滞、凋亡和自噬发生,可能是AML临床治疗具有前景的抗肿瘤靶点。 展开更多
关键词 PI3K/Akt/mTOR信号通路 细胞周期 细胞凋亡 自噬 HL-60细胞
在线阅读 免费下载
漆姑草醇提物对人白血病细胞株HL-60细胞凋亡相关蛋白表达的影响
20
作者 梁冰 周磊 +1 位作者 李淑芳 沈祥春 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期2380-2382,共3页
目的:研究漆姑草醇提物(HSJ)对人白血病细胞株HL-60细胞凋亡相关蛋白表达的影响,探讨其诱导凋亡的分子机制。方法:采用不同浓度的HSJ作用HL-60细胞后,Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡形态变化;Western blot法检测Caspase-3、Ca... 目的:研究漆姑草醇提物(HSJ)对人白血病细胞株HL-60细胞凋亡相关蛋白表达的影响,探讨其诱导凋亡的分子机制。方法:采用不同浓度的HSJ作用HL-60细胞后,Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡形态变化;Western blot法检测Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:HSJ作用后HL-60细胞出现浓染致密的颗粒状荧光及明显的核形态变化;与阴性对照组相比,凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达水平增高,Bcl-2/Bax蛋白的比值降低,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:HSJ能诱导HL-60细胞凋亡,其作用可能与降低Bcl-2/Bax蛋白的比值,增加Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 漆姑草 HL-60细胞 细胞凋亡 CASPASE家族 BCL-2家族
上一页 1 2 27 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈