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脾氨肽口服冻干粉中活性多肽的分离及鉴定
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作者 黄静芳 郑秋凌 +1 位作者 李起竖 李博 《中南药学》 CAS 2019年第5期681-686,共6页
目的分离及鉴定脾氨肽口服冻干粉中的活性多肽。方法通过Sephacryl S-200HR凝胶色谱柱对脾氨肽口服冻干粉进行分离,采用ESI/MS(正离子模式)对收集的组分进行相对分子量测定,结合nano-LC-MS/MS对脾氨肽中间体酶解产物进行鉴定,最后利用H... 目的分离及鉴定脾氨肽口服冻干粉中的活性多肽。方法通过Sephacryl S-200HR凝胶色谱柱对脾氨肽口服冻干粉进行分离,采用ESI/MS(正离子模式)对收集的组分进行相对分子量测定,结合nano-LC-MS/MS对脾氨肽中间体酶解产物进行鉴定,最后利用HPLC法和酶联免疫法对脾氨肽口服冻干粉中多肽进行定性定量研究。结果脾氨肽中多肽的相对分子量为1000~10 000,其中大多数多肽的相对分子量在2000~5000。在这些多肽中有一条相对分子量为4962.6312的多肽,其氨基酸序列与数据库搜索到的胸腺素β4的序列匹配度为75%。HPLC法和酶联免疫法的定性定量研究结果也证明了胸腺素β4的存在。结论脾氨肽口服冻干粉中存在胸腺素β4。 展开更多
关键词 脾氨肽口服冻干粉 多肽 胸腺素Β4 LC-MS LC-MS/MS
基于气质和液质联用技术的烟草鲜烟叶代谢组学分析流程 预览
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作者 郑庆霞 刘萍萍 +9 位作者 陈霞 王冰 翟妞 陈千思 金立锋 路鑫 徐国云 张慧 许国旺 周会娜 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期59-71,共13页
为进一步推广普及烟草代谢组学研究技术,规范烟草代谢组学数据的采集流程,提高烟草代谢组学数据的可比性和可用性,建立了适用于新鲜烟叶代谢组学研究的样品采集和质谱检测方法。将采集后的鲜烟叶迅速用锡箔纸包裹并在液氮中冷冻;将充分... 为进一步推广普及烟草代谢组学研究技术,规范烟草代谢组学数据的采集流程,提高烟草代谢组学数据的可比性和可用性,建立了适用于新鲜烟叶代谢组学研究的样品采集和质谱检测方法。将采集后的鲜烟叶迅速用锡箔纸包裹并在液氮中冷冻;将充分冷冻的烟叶样品在干冰包埋下转移至实验室,真空冷冻干燥;将干燥后的烟叶样品打碎成粉末,提取代谢物;采用9种主要基于GC-MS和LC-MS技术的检测方法收集代谢组数据,分别是6种靶向检测(植物色素、游离氨基酸、有机酸、生物碱及多酚和萜类化合物)和3种非靶向检测(脂类、基于GC-MS的全成分分析和基于LC-MS全成分分析)方法。采用所建方法对不同产区、不同品种及不同生长发育时期的第十叶位鲜烟叶进行分析。结果表明:①共定性定量500余种代谢物,涉及烟草主要初生、次生代谢物,其中绝对定量101种;②主成分分析表明不同生长发育期鲜烟叶的代谢组差异较大,如大多数胺类(包括游离氨基酸)代谢物随生长发育期变化其质量分数逐渐降低;同一期鲜烟叶代谢组的生态差异大于品种差异。该方法具有稳定性和可重复性高、数据量大且可靠、覆盖代谢物多等特点,可用于烟草代谢组学研究。 展开更多
关键词 烟草 鲜烟叶 代谢组学 GC-MS LC-MS
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青藤仔乙醇提取物的成分分析 预览
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作者 吕金燕 刘本涛 +5 位作者 袁彩英 陈睿 李本杰 韦建华 霍丽妮 陈湘联 《广州化工》 CAS 2019年第9期146-149,202共5页
通过95%乙醇回流提取得到青藤仔提取物,采用热裂解气相色谱-质谱(PY-GC/MS)、液相色谱-质谱(LC-MS)以及气相色谱-质谱(GC-MS)技术分析提取物的化学成分及相对含量。经过分析,从青藤仔乙醇提取物中共解析出28个化合物,包括1,4,5,6-四羟基... 通过95%乙醇回流提取得到青藤仔提取物,采用热裂解气相色谱-质谱(PY-GC/MS)、液相色谱-质谱(LC-MS)以及气相色谱-质谱(GC-MS)技术分析提取物的化学成分及相对含量。经过分析,从青藤仔乙醇提取物中共解析出28个化合物,包括1,4,5,6-四羟基-3-甲氧基己烷-2-酮、羊毛甾醇、2,4,6-三叔丁基苯酚、盐酸青藤碱等,其中萜类、黄酮类和生物碱类含量较高,为主要的活性成分。为青藤仔化学成分的深入研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 青藤仔 成分分析 PY-GC/MS LC-MS
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基于UHPLC-MS/MS苦参实定性定量及其入血成分分析
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作者 宿美凤 雒晓梅 +5 位作者 王小明 常晓燕 王卫华 孙虹 李壮壮 石钺 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2041-2048,共8页
目的基于UPLC-Q-Exactive轨道阱高分辨质谱技术分析鉴定苦参实及其入血成分,采用UHPLC-MS/MS同时定量分析苦参实中6种生物碱。方法采用Waters HSS T3色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm);流动相为0.1%甲酸乙腈(10mmol/L醋酸铵)溶液(A)和0.1... 目的基于UPLC-Q-Exactive轨道阱高分辨质谱技术分析鉴定苦参实及其入血成分,采用UHPLC-MS/MS同时定量分析苦参实中6种生物碱。方法采用Waters HSS T3色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm);流动相为0.1%甲酸乙腈(10mmol/L醋酸铵)溶液(A)和0.1%甲酸水(10mmol/L醋酸铵)溶液(B),梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源(ESI);正离子模式下采集数据进行定性定量分析。结果苦参实样品中共鉴定34个色谱峰,大多数为生物碱类化学成分,有26个,血浆样品中共鉴定了18个生物碱以原型入血的色谱峰。苦参实中6种生物碱的总质量分数高达18.5%,其中氧化苦参碱含量最高。结论苦参实含有大量的生物碱类物质,苦参实的急性毒性可能是由于生物碱成分直接入血,本研究为苦参实的开发利用提供参考。 展开更多
关键词 苦参实 液质联用 氧化苦参碱 入血成分 UHPLC-MS/MS N-甲基金雀花碱 苦参碱 槐果碱 槐定碱 氧化槐果碱
基于尿液代谢组学的土三七诱导大鼠肝损伤的机制研究 被引量:1
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作者 詹美榕 苟小军 +4 位作者 陈龙 王雨 王夏雷 李云鹤 贾益群 《上海中医药大学学报》 CAS 2019年第1期60-65,共6页
目的:采用代谢组学技术检测土三七干预后大鼠尿液中内源性代谢物的变化,分析土三七诱导大鼠肝脏损伤的可能机制。方法:12只SD大鼠,随机分为对照组和土三七组,每组6只。土三七组大鼠灌胃给予7.5 g·kg^-1·d^-1土三七水煎液,对... 目的:采用代谢组学技术检测土三七干预后大鼠尿液中内源性代谢物的变化,分析土三七诱导大鼠肝脏损伤的可能机制。方法:12只SD大鼠,随机分为对照组和土三七组,每组6只。土三七组大鼠灌胃给予7.5 g·kg^-1·d^-1土三七水煎液,对照组大鼠灌胃给予等体积纯净水,连续给药14 d。末次给药后,代谢笼收集大鼠尿液,并分离大鼠血清和肝脏组织。生化分析仪检测血清ALT、AST、TBIL和TG水平;HE染色后光镜下观察肝组织病理形态学变化。液质联用(LC-MS)技术检测尿液样本,主成分分析评价组间代谢谱差异,筛选并鉴定差异性代谢物,分析代谢通路。结果:与对照组比较,土三七组大鼠血清ALT、AST和TBIL水平显著增高(P<0.05,P<0.01);HE染色结果显示,土三七组大鼠肝组织结构破坏,细胞排列紊乱,有炎性细胞浸润。代谢组学分析显示,组间代谢谱差异明显,尿液样本中共鉴定出马尿酸、苯丙氨酸、N-甲基烟酰胺、氧化三甲胺等40个差异代谢物,涉及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,苯丙氨酸代谢,烟酸和烟酰胺代谢,Vit B2代谢等主要代谢通路。结论:土三七诱导大鼠肝脏损伤,其机制可能与苯丙氨酸生物合成和代谢、烟酸和烟酰胺代谢、Vit B2代谢等有关。 展开更多
关键词 土三七 肝损伤 代谢组学 尿液 LC-MS 大鼠
基于LC- MS的四氯化碳致大鼠急性肝损伤的脂质组学研究
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作者 陈龙 王夏雷 +3 位作者 詹美榕 李云鹤 李修龙 贾益群 《上海中医药大学学报》 CAS 2019年第4期61-67,共7页
目的:基于液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术从脂质组学的角度探讨四氯化碳(CCl4)致大鼠急性肝损伤的作用机制。方法:取Wistar大鼠12只,随机分为正常组和模型组,每组6只。模型组大鼠单次腹腔注射50%CCl4诱导急性肝损伤,给药剂量为1 ml/kg;... 目的:基于液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术从脂质组学的角度探讨四氯化碳(CCl4)致大鼠急性肝损伤的作用机制。方法:取Wistar大鼠12只,随机分为正常组和模型组,每组6只。模型组大鼠单次腹腔注射50%CCl4诱导急性肝损伤,给药剂量为1 ml/kg;正常组大鼠腹腔注射等体积橄榄油。给药24 h后,采集血清样本,分离肝大叶。生化分析仪检测血清ALT、AST、TG、HDL和LDL水平;HE染色后光镜下观察肝组织病理形态学变化;LC-MS检测血清样本,采用多元统计分析(主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析)比较两组间脂质代谢谱差异,并筛选差异性脂质代谢物。结果:与正常组比较,模型组大鼠ALT和AST水平显著升高(P<0.01),TG含量明显降低(P<0.05)。HE染色可见模型组大鼠的肝细胞肿大、坏死,伴有明显的炎症浸润。脂质组学分析显示,两组间脂质代谢谱差异明显,共找出80个差异性脂类成分;进一步经S-plot图比对,筛选出34个差异最为显著的脂质代谢物,其中15个属于磷脂酰胆碱类,6个属于三酰甘油类,4个属于磷脂酰乙醇胺类,2个属于溶血磷脂酰胆碱类,2个属于鞘氨醇类,5个属于血小板激活因子。结论:脂质组学研究揭示CCl4诱导急性肝损伤的机制与磷脂及三酰甘油代谢紊乱相关。 展开更多
关键词 脂质组学 四氯化碳 肝损伤 LC-MS 大鼠
南方根结线虫侵染烟草抗感品种前后的代谢组学分析 预览
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作者 田培 李晓辉 +3 位作者 贺文俊 段杜薇 徐世晓 杨铁钊 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期81-92,共12页
为明确南方根结线虫侵染烟草抗感品种前后代谢途径的差异,选取烟草抗病品种G28与感病品种长脖黄壮苗为试验材料,设置4个处理:1)G28接种J2s悬浮液(G_RKN);2)长脖黄接种J2s悬浮液(C_RKN);3)G28接种清水(G_CK);4)长脖黄接种清水(C_CK)。每... 为明确南方根结线虫侵染烟草抗感品种前后代谢途径的差异,选取烟草抗病品种G28与感病品种长脖黄壮苗为试验材料,设置4个处理:1)G28接种J2s悬浮液(G_RKN);2)长脖黄接种J2s悬浮液(C_RKN);3)G28接种清水(G_CK);4)长脖黄接种清水(C_CK)。每个处理3次重复。采用LC/MS技术分析接种前后代谢通路的变化。结果表明,南方根结线虫侵染的抗、感病品种G28与长脖黄在抗病相关的代谢通路都有明显变化,鉴定出的差异代谢物包括了生物碱、脂肪酸、类黄酮、萜类和聚酮等物质。其中抗病品种被显著激活的代谢通路有10条,而感病品种只有5条。所以抗、感品种被南方根结线虫侵染后防御能力不同。 展开更多
关键词 南方根结线虫 烟草 代谢组学 LC/MS 代谢通路
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LC-MS导向分离山壳骨中主成分及其生物活性研究 预览
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作者 吴浩祥 袁捷 +1 位作者 肖文静 陈锦兰 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期208-212,共5页
为了解山壳骨(Pseuderanthemum latifolium)的化学成分和生物活性,运用LC-MS联用技术分离得到羽扇豆醇(1)和豆甾醇(2)。体外活性评价结果表明,化合物1和2均具有中等的抗MRSA活性,但不具有神经保护作用。这是首次对山壳骨进行化学成分和... 为了解山壳骨(Pseuderanthemum latifolium)的化学成分和生物活性,运用LC-MS联用技术分离得到羽扇豆醇(1)和豆甾醇(2)。体外活性评价结果表明,化合物1和2均具有中等的抗MRSA活性,但不具有神经保护作用。这是首次对山壳骨进行化学成分和生物活性研究,为综合开发与利用山壳骨提供科学依据。 展开更多
关键词 山壳骨 LC-MS 羽扇豆醇 豆甾醇
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NADPH氧化酶相关基因对盾壳霉代谢的影响 预览
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作者 孙池 蒋静 +2 位作者 胡先文 付艳苹 姜道宏 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期79-84,共6页
基于液质联用(LC-MS)的代谢组学分析手段,通过突变株Qnox1-6与野生株zs-1的代谢比较,研究NADPH氧化酶相关基因对盾壳霉代谢的影响。筛选得到14个重要的代谢差异物质,主要是羧酸类和苷类物质。特别是7个仅在突变株中出现的物质为:苯二酚... 基于液质联用(LC-MS)的代谢组学分析手段,通过突变株Qnox1-6与野生株zs-1的代谢比较,研究NADPH氧化酶相关基因对盾壳霉代谢的影响。筛选得到14个重要的代谢差异物质,主要是羧酸类和苷类物质。特别是7个仅在突变株中出现的物质为:苯二酚、松柏苷、甾体皂苷类物质、3个羧酸类物质及其他物质,这些代谢物与盾壳霉寄生核盘菌紧密相关。 展开更多
关键词 盾壳霉 NOX 突变株 寄生能力 LC-MS 差异代谢物 代谢组学
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不同种质萝卜肉质根硫苷组分及含量分析 预览
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作者 公茂勇 王燕 +5 位作者 徐良 王娟娟 谢洋 范莲雪 陈微 柳李旺 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期413-420,共8页
[目的]本文旨在检测萝卜肉质根中硫苷组分与含量,分析硫苷总量与单个硫苷组分含量的相关性,为萝卜种质品质性状评价与优良新品种培育提供理论基础。[方法]通过液质联用(LC-MS)技术和高效液相色谱法(HPLC)对44份萝卜种质肉质根中硫苷组... [目的]本文旨在检测萝卜肉质根中硫苷组分与含量,分析硫苷总量与单个硫苷组分含量的相关性,为萝卜种质品质性状评价与优良新品种培育提供理论基础。[方法]通过液质联用(LC-MS)技术和高效液相色谱法(HPLC)对44份萝卜种质肉质根中硫苷组分与含量进行检测,并通过主成分分析研究了总硫苷与单个硫苷含量之间的相关性。[结果]在萝卜肉质根中共检测到12种硫苷,包括8种脂肪族硫苷和4种吲哚族硫苷,其中4-甲硫基-3-丁烯基硫苷(GRH)作为重要的硫苷组分在所有材料中含量最高。44个萝卜种质干样总硫苷平均含量10.73μmol·g^-1,变化区间1.61~23.23μmol·g^-1;硫苷含量占干质量的平均比例为0.4%,变化区间为0.14%~0.97%。筛选到4份4-甲基亚磺酰丁基硫苷(RAA)含量较高的种质,4份GRH含量较低的种质。分析单一硫苷相关系数矩阵显示,总硫苷含量与4-甲基亚磺酰基-3-丁烯基硫苷(GRE)、4-戊烯基硫苷(GBN)、4-甲硫基丁基硫苷(GER)的含量呈极显著正相关,且同族硫苷间相关性较强。[结论]萝卜不同种质肉质根中硫苷组分与含量存在较大差异,其中GRH是影响脂肪族硫苷及总硫苷含量差异的关键硫苷,筛选到的高含量RAA与低含量GRH种质可为萝卜品质性状遗传改良提供重要材料。 展开更多
关键词 萝卜 肉质根 硫苷 组分含量 LC-MS
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不同干燥条件对女贞子有效成分影响的初步研究
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作者 冯素香 李柯 +4 位作者 冯志毅 高宁宁 孙莹娜 张浩杰 李冰 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期492-496,510共6页
目的采用液质联用(liquid chromatograph mass spectrometer,LC-MS)方法,分析测定不同干燥条件下女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷4个成分的含量,为其干燥条件和质量控制提供理论依据。方法采用Hypersll GOLD C18(100 mm... 目的采用液质联用(liquid chromatograph mass spectrometer,LC-MS)方法,分析测定不同干燥条件下女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷4个成分的含量,为其干燥条件和质量控制提供理论依据。方法采用Hypersll GOLD C18(100 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,以甲醇(A)-体积分数0.1%的甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min-1,柱温为25℃。结果红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷分别在质量浓度0.38~192.08、0.01~6.95、1.14~574.42、3.59~1 798.25 mg·L-1内呈现良好的线性关系(r≥0.999 4),平均加样回收率(n=6)分别为100.4%、99.91%、99.87%和100.7%,RSD分别为0.5%、1.1%、2.2%和1.0%。不同的干燥方法和不同的干燥温度对女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷4个成分具有一定的影响,不同干燥条件下女贞子中成分含量变化较为明显。结论建立女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷、橄榄苦苷成分的含量测定方法,该方法可以为女贞子干燥条件和质量评价提供理论依据。 展开更多
关键词 女贞子 LC-MS 干燥条件 含量测定 红景天苷 木犀草苷 特女贞苷 橄榄苦苷
疏血通注射液中抗血小板聚集寡糖类组分的分离和验证 预览
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作者 衣春 张勇纯 +1 位作者 周剑波 陈艳明 《临床医药文献电子杂志》 2019年第4期5-7,共3页
对于所获得的寡糖类成分经PMP衍生化法测定活性寡糖组分中的单糖组成,确认所述的寡糖类组分中单糖单元为葡萄糖、半乳糖、甘露糖,其中主要为葡萄糖。经LC-MS分析,确认所述的寡糖组分主要是由大约2~10个左右单糖单元聚合而成,其分子量范... 对于所获得的寡糖类成分经PMP衍生化法测定活性寡糖组分中的单糖组成,确认所述的寡糖类组分中单糖单元为葡萄糖、半乳糖、甘露糖,其中主要为葡萄糖。经LC-MS分析,确认所述的寡糖组分主要是由大约2~10个左右单糖单元聚合而成,其分子量范围为200Da~3000 Da,其中主要集中在200Da~2000Da。通过血小板聚集试验,确认所述的寡糖组分抗血小板聚集活性主要是对体外ADP诱导和胶原诱导的血小板聚集有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 疏血通 寡糖 PMP衍生化 LC-MS
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地榆鞣质对环磷酰胺致小鼠白细胞减少作用的代谢组学研究 预览
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作者 赵兰兰 宋婷婷 +1 位作者 莫利云 熊永爱 《遵义医科大学学报》 2019年第5期495-502,共8页
目的采用代谢组学研究地榆鞣质升高骨髓抑制小鼠白细胞的作用机制。方法SPF级KM小鼠随机分为正常组、模型组、地榆鞣质组,每组10只。腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg诱导小鼠建立骨髓抑制模型,地榆鞣质组按10 mg/kg剂量灌胃给予地榆鞣质水溶... 目的采用代谢组学研究地榆鞣质升高骨髓抑制小鼠白细胞的作用机制。方法SPF级KM小鼠随机分为正常组、模型组、地榆鞣质组,每组10只。腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg诱导小鼠建立骨髓抑制模型,地榆鞣质组按10 mg/kg剂量灌胃给予地榆鞣质水溶液,连续5 d。检测各实验组小鼠外周血液中白细胞数量,并采用LC-MS分析各试验组小鼠血清代谢谱的变化。结果与模型组比较,地榆鞣质组小鼠白细胞数量显著增加(P<0.05);经血清代谢轮廓分析,与模型组比较,地榆鞣质组小鼠血清中阿糖胞苷、D-葡糖糖-6磷酸、α-酮异戊酸、十二烷二酸等潜在代谢标志物显著回调,其涉及磷酸戊糖途径、淀粉和蔗糖代谢、异亮氨酸和缬氨酸亮氨酸代谢、半乳糖代谢、糖酵解和糖异生、氨基酸和核苷酸代谢6条代谢路径。结论地榆鞣质升高骨髓抑制小鼠白细胞可能与调控磷酸戊糖途径,氨基酸和核苷酸代谢的途径等有关。 展开更多
关键词 地榆鞣质 骨髓抑制 代谢组学 LC-MS
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组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(Hint1)在胚胎植入中的作用
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作者 王倩 刘太行 +4 位作者 陈雪梅 张爽 张雪 叶亮 丁裕斌 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期982-991,共10页
目的:检测组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(histidine triad nucleotide binding protein 1,Hint1)基因在小鼠早期妊娠过程中子宫内膜中的表达规律;探究Hint1基因在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化过程的作用。方法:应用免疫组化、原位杂交、West... 目的:检测组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(histidine triad nucleotide binding protein 1,Hint1)基因在小鼠早期妊娠过程中子宫内膜中的表达规律;探究Hint1基因在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化过程的作用。方法:应用免疫组化、原位杂交、Western blot和RT-qPCR检测Hint1在早期妊娠、假孕和人工诱导蜕膜化模型小鼠子宫中的表达;siRNA敲低原代分离的小鼠子宫内膜基质细胞Hint1的表达。LC-MS分析Hint1对基质细胞蜕膜化过程中脂质组学的影响。结果:在妊娠的第1至第8天Hint1表达逐渐升高,且在胚胎植入部位的表达明显高于非植入点;体内人工诱导蜕膜化小鼠子宫内膜Hint1的表达明显高于未发生蜕膜化的对照子宫;利用siRNA干扰小鼠子宫内膜基质细胞中Hint1的表达可显著影响其蜕膜化过程及脂质代谢。结论:Hint1在基质细胞蜕膜化过程中表达升高,并可能与蜕膜化过程中基质细胞的脂质代谢相关。 展开更多
关键词 蜕膜化 Hint1 脂质代谢 LC-MS
LC-MS法对抗PD-1信迪利单抗药物分子铰链区序列改构稳定性的研究
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作者 于传飞 曹兴军 +3 位作者 王文波 倪海晴 GUO Amy Y 王兰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期122-129,共8页
抗体药物目前已成为治疗自身免疫性疾病及肿瘤等多种疾病的重要创新药物。以IgG4为框架开发的抗体药物面临的挑战之一是野生型IgG4的铰链区不稳定,容易发生铰链区Fab臂交换现象。将IgG4分子的铰链区序列-CPSC-(野生型IgG4)改构成-CPPC-... 抗体药物目前已成为治疗自身免疫性疾病及肿瘤等多种疾病的重要创新药物。以IgG4为框架开发的抗体药物面临的挑战之一是野生型IgG4的铰链区不稳定,容易发生铰链区Fab臂交换现象。将IgG4分子的铰链区序列-CPSC-(野生型IgG4)改构成-CPPC-(改构型IgG4)是降低铰链区交换和提高IgG4类分子稳定性的有效手段。信迪利单抗(sintilimab)是用于肿瘤免疫治疗的全人源抗PD-1抗体,采用IgG4分子框架并对其铰链区序列进行了改构(S228P)。利用LC-MS检测方法从体外(PBS和人血清)到动物体内(SCID小鼠)对改构后的铰链区稳定性进行了评估。结果表明, LC-MS作为一种简便快速的方法可以有效地检测体外和体内IgG4分子的Fab臂交换反应,经IgG4分子改构后的信迪利单抗结构稳定,避免了Fab臂的交换现象。 展开更多
关键词 IgG4 Fab臂交换 LCMS PD-1 信迪利单抗
虾青素对高脂高胆固醇饲喂小鼠胆汁成分的调节作用 预览
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作者 刘杨 阮梦成 +2 位作者 赵秀举 王华林 刘志国 《武汉轻工大学学报》 2019年第2期21-24,30共5页
研究虾青素对高脂高胆固醇饲喂小鼠胆汁成分的调节作用。采用高脂高胆固醇饲喂小鼠模型,设置高脂高胆固醇饲喂组、高脂高胆固醇添加虾青素组,12周后测定小鼠血浆总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),HE染色观察肝组织形态学变化,LC-MS测定胆... 研究虾青素对高脂高胆固醇饲喂小鼠胆汁成分的调节作用。采用高脂高胆固醇饲喂小鼠模型,设置高脂高胆固醇饲喂组、高脂高胆固醇添加虾青素组,12周后测定小鼠血浆总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),HE染色观察肝组织形态学变化,LC-MS测定胆汁组成。结果显示:高脂高胆固醇饮食增补虾青素能够降低小鼠脂肪指数、血浆TG和TC;此外,高脂高胆固醇饮食小鼠在添加虾青素后胆汁部分成分有明显变化,其中高脂所致的组氨醇、组氨酸等成分有所改善。结论:添加虾青素能够对高脂高胆固醇饮食小鼠胆汁成分起到明显调节作用。 展开更多
关键词 高脂饮食 虾青素 胆汁代谢 LC-MS
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Detection of Oxidized Ferrocenes by LC-MS with Electrospray Ionization Using Picric Acid as the Counter Ion 预览
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作者 Yutaka Okada Masako Tsuchida 《分析质谱与色谱期刊(英文)》 2019年第1期1-8,共8页
Ferrocene is an organometallic compound that readily undergoes oxidation in atmosphere under acidic conditions. However, because of its diamagnetic nature, ferrocene does not lend itself to structural analysis by nucl... Ferrocene is an organometallic compound that readily undergoes oxidation in atmosphere under acidic conditions. However, because of its diamagnetic nature, ferrocene does not lend itself to structural analysis by nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. In this work, the oxidation of ferrocene and several of its derivatives were analyzed by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS). An electrospray ionization (ESI) source was used, with picrate serving as the counter ion. This method is particularly effective for studying oxidation of ferrocenes because their reactivity toward oxygen under ambient conditions is low. 展开更多
关键词 ESI LC-MS FERROCENE Oxidation PICRATE
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桂枝附子含药血清对类风湿关节炎模型的影响 预览
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作者 简旖沫 汤小虎 赖张凤 《云南中医中药杂志》 2019年第4期69-73,共5页
目的通过液质联用(LC-MS)技术分析桂枝附子温通经脉配伍灌胃后胶原关节炎(CIA)大鼠的血清移行成分,考察桂枝附子含药血清对类风湿关节炎模型的影响。方法选取雄性Wistar大鼠25只随机取6只分为正常组、桂枝附子组,每组3只,其余大鼠采用... 目的通过液质联用(LC-MS)技术分析桂枝附子温通经脉配伍灌胃后胶原关节炎(CIA)大鼠的血清移行成分,考察桂枝附子含药血清对类风湿关节炎模型的影响。方法选取雄性Wistar大鼠25只随机取6只分为正常组、桂枝附子组,每组3只,其余大鼠采用Ⅱ型胶原造模。将造模成功的6只CIA大鼠随机平均分为模型组、造模桂枝附子组,每组3只。予20倍给药剂量的桂枝附子配伍灌胃给药,正常组和模型组大鼠予生理盐水灌胃,60min后经肝门静脉取血,采用甲醇沉淀法处理血清,予LC-MS技术对其进行分析。通过将含药血清与相同条件下测定的模型组血清、正常组血清、供试品以及对照品图谱比较,分析大鼠给药后血清中的移行成分。结果桂枝附子组含药血清中产生了10个移行成分,均为代谢产物;造模桂枝附子组含药血清产生了25个移行成分,其中8个为原形成分,17个为代谢产物。结论造模后大鼠的含药血清中移行成分明显增加,成分浓度也较高。由此可见,CIA大鼠病理模型选择性的吸收了桂枝附子含药学清中的成分,从基础层面探讨中医“有是病用是药”理论。 展开更多
关键词 CIA病理模型 类风湿关节炎 桂枝附子 含药血清 LC-MS
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基于LC-MS的代谢组学技术分析孜亚比提片的降糖作用机制
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作者 张彩娟 晋小雁 +5 位作者 邱敏懿 张驰 罗凌龙 王敏 赵保胜 王学勇 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期141-147,共7页
目的:观察孜亚比提片对2型糖尿病大鼠的降糖效果,并基于代谢组学技术分析其降糖作用机制。方法:根据临床调研结果对不同组分来源的孜亚比提片进行筛选,筛选出最佳组方配比;并以2型糖尿病大鼠为实验对象进行药效学实验研究,正常组和模型... 目的:观察孜亚比提片对2型糖尿病大鼠的降糖效果,并基于代谢组学技术分析其降糖作用机制。方法:根据临床调研结果对不同组分来源的孜亚比提片进行筛选,筛选出最佳组方配比;并以2型糖尿病大鼠为实验对象进行药效学实验研究,正常组和模型组分别给予相同剂量的生理盐水、孜亚比提片组给予300 mg·kg-1孜亚比提片、二甲双胍组给予300 mg·kg-1盐酸二甲双胍片,每组8只,记录给药后实验组的空腹血糖值及体质量变化并进行数据分析;同时利用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱联用(UHPLC-LTQ Orbitrap MS)技术对大鼠血清进行代谢组学分析,采用主成分分析(PCA),偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对不同组别大鼠血清代谢物进行分析,鉴定出潜在生物标记物,并分析维吾尔族药孜亚比提片的降糖作用机制。结果:与正常组比较,模型组大鼠的空腹血糖值升高(P <0. 01);与模型组比较,孜亚比提片组大鼠状态整体较好,毛色光滑,其空腹血糖值也有所下降(P <0. 05),表明孜亚比提片对2型糖尿病大鼠有一定的降糖作用;根据LC-MS代谢组学数据结果最终得到8个生物标记物。与模型组相比孜亚比提片组中L-valine,propionylcarnitine含量均降低(P <0. 05),sphingosine-1-phosphate,LPC(16∶1/0∶0),LPC(18∶0/0∶0),LPC(18∶2/0∶0),LPC(20∶1/0∶0),PC(19∶0/0∶0)的含量均升高(P <0. 05)。结论:孜亚比提片能够降低2型糖尿病大鼠血糖值,并能改善2型糖尿病大鼠的一般生理特征,其作用机制可能与改善氨基酸代谢,脂质代谢有关。 展开更多
关键词 孜亚比提片 2型糖尿病(T2DM) 糖尿病 液相色谱-质谱(LC-MS)
基于多次重复液相质谱生物实验数据校准方法研究
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作者 崔健 马媛媛 +2 位作者 张法伟 马鑫 郭兆龙 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1229-1235,共7页
在蛋白质组学中,进行液相质谱(LC-MS)实验谱数据处理,发现并分析生物标志物的复杂肽或蛋白质样本的差异是重点,而校准相同样本的多次重复实验中肽链产生的洗脱时间峰信号(LC峰)是进行量化、分析差异的关键。目前多个重复实验数据的校准... 在蛋白质组学中,进行液相质谱(LC-MS)实验谱数据处理,发现并分析生物标志物的复杂肽或蛋白质样本的差异是重点,而校准相同样本的多次重复实验中肽链产生的洗脱时间峰信号(LC峰)是进行量化、分析差异的关键。目前多个重复实验数据的校准通常是在重复的实验数据集中根据液相二级质谱(LC-MS/MS)实验标识LC峰的时间特征,然后使用翘曲函数对时间特征进行对齐。由于多重数据的洗脱时间误差产生是随机的,统一使用翘曲函数校准会产生较大误差。为了解决这个问题,本研究重点研究了多个重复实验数据中LC峰的时间校准算法。我们选取了两个重复实验数据,采用机器学习的思路,通过选用两个数据的LC-MS/MS中重复检测到的肽链数据作为可信数据,部分选为训练序列,部分作为测试序列,建立统计数学模型,提出了一种新的校准算法,并采用测试序列对该统计模型进行准确率测试,表明算法的准确性达到95%以上;然后,将该模型应用在两个实验数据的所有LC-MS/MS肽链检测值上,提高检测值在多个数据中的覆盖率,表明覆盖率可以到达85%以上。 展开更多
关键词 蛋白质组学 液相质谱(LC-MS) 时间特征 校准 统计学习模型
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