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研究两种干细胞体外矿化过程中LIM矿化蛋白1的表达 预览
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作者 费腾 孙艳艳 +4 位作者 周妍 袁梦桐 刘明月 史欣 胡伟平 《口腔医学》 CAS 2017年第1期19-23,共5页
目的 LIM矿化蛋白1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)是一种胞内非分泌型蛋白,广泛存在于各种组织中,它不仅影响骨基质的矿化而且还是成骨细胞分化和骨形成过程中重要的调节因子。本实验通过检测LMP-1在牙髓干细胞和骨髓间充质干... 目的 LIM矿化蛋白1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)是一种胞内非分泌型蛋白,广泛存在于各种组织中,它不仅影响骨基质的矿化而且还是成骨细胞分化和骨形成过程中重要的调节因子。本实验通过检测LMP-1在牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞体外矿化过程中的表达情况,来研究胞内信号转导分子LIM矿化蛋白1对牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞体外矿化的作用,为LMP-1作为成骨调节因子,影响骨基质矿化方面的研究提供参考。方法 酶消化法体外培养牙髓干细胞,用挑克隆细胞团的方法对牙髓干细胞进行纯化传代培养。密度梯度离心法体外培养骨髓间充质干细胞。两种细胞分别设置实验组和对照组。实验组培养液中加入矿化诱导液,对照组不加矿化诱导液。分别于培养3、5、7、14天检测碱性磷酸酶的活性。培养21天茜素红染色检测矿化结节形成。培养期间,采用荧光定量PCR方法检测LIM矿化蛋白1、骨形态发生蛋白BMP-2、牙本质涎磷蛋白DSPP和Ⅰ型胶原蛋白COL-1、核心结合因子RUNX-2等成骨标志基因的表达,用SPSS 17.0对结果进行统计学分析。结果 培养3、5、7、14天碱性磷酸酶的活性逐渐提高,且实验组碱性磷酸酶的活性显著高于对照组。培养21天实验组可见矿化结节形成。荧光定量PCR检测到实验组及对照组各个基因均表达,且实验组表达显著高于对照组。结论发现LIM矿化蛋白1与牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞体外矿化过程相关,推测LIM矿化蛋白1可能作为检测牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞矿化的一个指标。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 骨髓间充质干细胞 LIM矿化蛋白1 骨形态发生蛋-2
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Expression, purification and mass spectrometric analysis of LIM mineralization protein-1 in human lung epithelial cells
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作者 Sreedhara Sangadala Louisa Titus Scott D. Boden 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第11期909-918,共10页
秘鲁利玛机场之代号矿化作用 protein-1 (LMP-1 ) 是被克隆并且出现在 vitro 并且在 vivo 导致骨头形成的新奇 osteoin-ductive 蛋白质。在 LMP-1 的糖类结构的可能的存在的察觉和评估是为 recombinantly 表示的蛋白质的治疗学的使用的... 秘鲁利玛机场之代号矿化作用 protein-1 (LMP-1 ) 是被克隆并且出现在 vitro 并且在 vivo 导致骨头形成的新奇 osteoin-ductive 蛋白质。在 LMP-1 的糖类结构的可能的存在的察觉和评估是为 recombinantly 表示的蛋白质的治疗学的使用的重要规章的考虑。LMP-1 的顺序包含一个高度保存的 N 终端 PDZ 领域和三个 C 终端秘鲁利玛机场之代号领域。LMP-1 的顺序分析预言二个潜在的 N-glycosylation 地点和几个 O-glycosylation 地点。这里,我们报导克隆并且在在人的肺癌(A549 ) 的 LMP-1 的表示上房间。尽管我们的组已经报导了 LMP-1 cDNA 的顺序,我们拿了这个工作澄清是否过去表示蛋白质在 vivo 经历任何 glycosylation。表示全身的 recombinant 蛋白质被净化并且使遭到了到化学分析并且内部定序。在 LMP-1 蛋白质的化学作文分析的任何 hexosamines (N 乙酰 glucosamine 或 N 乙酰 galactosamine ) 的缺席表明有很少或在肺癌房间(A549 ) 的 LMP-1 多肽的没有 translational 以后 glycosylation。我们在净化的 LMP-1,和产生的肽上执行了在里面胶化胰岛素消化文摘被分析进一步的使用为肽质量的帮助矩阵的激光解吸附作用和电离团 spectrometry 手指打印,它与相应 LMP-1 肽生产了几准确匹配。由高效液体层析和定序的 N 终端跟随的需要的肽的纯化的分离为几净化的肽导致了许多准确 LMP-1 火柴,因此作为 LMP-1 建立净化的蛋白质的身份。 展开更多
关键词 矿物蛋白质 光谱测定 A549细胞 基因表达 纯化
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