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芪贞汤对脂多糖诱导人结肠癌细胞上皮间充质转化的影响 预览
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作者 刘雷蕾 马淑然 +2 位作者 王方园 许峰巍 孟静岩 《环球中医药》 CAS 2019年第2期161-166,共6页
目的研究芪贞汤对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导结肠癌细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的机制,为其发挥抗癌作用提供实验依据。方法将人结肠癌LoVo细胞分为4组,空白组不予干预,模型组、实验组和对照... 目的研究芪贞汤对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导结肠癌细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的机制,为其发挥抗癌作用提供实验依据。方法将人结肠癌LoVo细胞分为4组,空白组不予干预,模型组、实验组和对照组分别予1μg/mL LPS、1μg/mL LPS+800μg/mL芪贞汤、1μg/mL LPS+100μg/mL 5-氟尿嘧啶(5-Fu)干预48小时。采用MTT实验计算芪贞汤诱导肿瘤细胞凋亡50%的浓度,即IC50(half maximal inhibitory concentration);划痕实验观察细胞迁移能力;免疫荧光法检测NF-κB p65核转位情况;Western blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)蛋白的表达。结果芪贞汤在48小时诱导肿瘤细胞凋亡的IC50值为980.855μg/mL。空白组、模型组、实验组和对照组划痕缩小面积分别为(46.38±5.15)(80.81±3.18)(17.78±9.87)和(16.95±3.45);与模型组相比,各组划痕缩小面积皆有极显著统计差异(P<0.01)。空白组NF-κB p65多于细胞浆中表达;模型组可以明显看到NF-κB p65入核,核转位明显;对照组NF-κB p65在包浆和细胞核中都有表达;实验组NF-κB p65在细胞核中表达相对较少,核转移情况下降。相对于空白组,实验组E-cadherin表达量(1.266±0.065)和对照组E-cadherin表达量(0.979±0.183)比模型组(0.420±0.071)显著升高,有极显著统计学差异(P<0.01);实验组N-cadherin表达量(0.518±0.115)和对照组N-cadherin表达量(1.275±0.567)比模型组(2.287±0.257)显著降低,有极显著统计学差异(P<0.01)。结论芪贞汤可通过抑制NF-κB p65活化而抑制结肠癌细胞EMT的发生,从而达到控制肿瘤细胞迁移的效果。 展开更多
关键词 结直肠癌 LOVO细胞 芪贞汤 上皮间充质转化 NF-ΚB P65
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MiRNA-424对人结肠癌细胞系Lovo细胞增殖及Rspo3基因表达的影响 被引量:1
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作者 林琳 周刘祥 王晓春 《中国肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期223-228,共6页
[目的]探讨miR-424对人结肠癌Lovo细胞增殖及Rspo3基因表达的影响。[方法]运用实时荧光定量PCR检测Lovo细胞和正常结肠上皮组织NCM460细胞中miR-424与Rspo3 mRNA的表达水平。miR-424抑制剂(inhibitor)转染Lovo细胞后,观察细胞增殖能力... [目的]探讨miR-424对人结肠癌Lovo细胞增殖及Rspo3基因表达的影响。[方法]运用实时荧光定量PCR检测Lovo细胞和正常结肠上皮组织NCM460细胞中miR-424与Rspo3 mRNA的表达水平。miR-424抑制剂(inhibitor)转染Lovo细胞后,观察细胞增殖能力,及miR-424、Rspo3 mRNA、miR-15/16/103表达水平,Western blot检测Rspo3蛋白表达水平。通过在线软件预测靶向Rspo3基因的miRNA,并用双荧光素酶报告基因实验验证。[结果]Mi R-424与Rspo3 mRNA在结肠癌Lovo细胞中过表达(P〈0.05)。miR-424 inhibitor组Lovo细胞增殖受到明显抑制(P〈0.05),且Rspo3基因表达量显著下降(P〈0.05),miR-15/16/103均上调,其中miR-103上调最显著(P〈0.05)。双荧光素酶报告基因实验验证miR-103可靶向调控Rspo3基因的表达。[结论]miR-424抑制剂可阻滞Lovo细胞增殖且通过反馈性上调miR-103靶向抑制Rspo3基因的表达。 展开更多
关键词 miR-424 结肠癌 LOVO细胞 增殖 Rspo3基因
冬凌草甲素通过下调NF-κB/COX-2表达抑制结肠癌LoVo细胞增殖 预览 被引量:2
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作者 刘娜 李文强 高成伟 《山西医科大学学报》 CAS 2017年第3期251-255,共5页
目的观察天然植物冬凌草提取物冬凌草甲素对结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的作用,并分析其可能的作用机制。方法体外培养LoVo细胞,用不同浓度冬凌草甲素(0-240μmol/L)分别处理24,48,72h,MTT法检测细胞活力的改变。冬凌草甲素(终浓度为0,... 目的观察天然植物冬凌草提取物冬凌草甲素对结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的作用,并分析其可能的作用机制。方法体外培养LoVo细胞,用不同浓度冬凌草甲素(0-240μmol/L)分别处理24,48,72h,MTT法检测细胞活力的改变。冬凌草甲素(终浓度为0,30,60,120μmol/L)分别处理LoVo细胞48h,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,ELISA法检测细胞上清液中PGE2的含量;Westernblot检测细胞蛋白环氧合酶-2(COX-2)、p-NF-κB(p65)、Bcl-2及Bax的表达的改变。结果冬凌草甲素(15-240μmol/L)能显著抑制LoVo细胞活力(P〈0.05),呈剂量、时间依赖性。冬凌草甲素(终浓度为0,30,60,120μmol/L)处理LoVo细胞48h后,细胞凋亡率分别为8.83%,15.5%,22.64%和25.86%;冬凌草甲素处理LoVo细胞48h后,细胞Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P〈0.05),同时p-NF-κB(p65)、COX-2蛋白的表达及PGE2合成降低(P〈0.05)。结论冬凌草甲素可通过抑制p-NF-κB、COX-2表达及PGE2合成,继而上调促凋亡蛋白Bax表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,抑制LoVo细胞增殖并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 LOVO细胞 细胞凋亡 环氧合酶-2 前列腺素E2
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人参皂苷Rg3对LoVo细胞迁移和侵袭影响 预览
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作者 李荣江 高峰 +3 位作者 林木平 邱振雄 张晶锐 曾宪成 《广东药科大学学报》 CAS 2017年第4期509-512,535共5页
目的 探讨人参皂苷Rg3对人结肠癌LoVo细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度Rg3对LoVo细胞增殖的影响,并确定用于研究抑制LoVo细胞迁移和转移功能作用的Rg3浓度和作用时间.设置空白对照组及Rg3实... 目的 探讨人参皂苷Rg3对人结肠癌LoVo细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度Rg3对LoVo细胞增殖的影响,并确定用于研究抑制LoVo细胞迁移和转移功能作用的Rg3浓度和作用时间.设置空白对照组及Rg3实验组(5、10、20、30、40、50μmol/L),通过划痕试验,对LoVo细胞划痕加药处理24 h后,观察不同浓度Rg3对细胞迁移的影响.采用Transwell法观察不同浓度Rg3对细胞侵袭的影响.采用Western blot检测不同浓度Rg3对CD44、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)、E-cadherin和β-catenin表达水平的影响.结果 MTT结果显示:0~30μmol/L Rg3处理LoVo细胞24 h对其生长无明显影响.随Rg3作用时间的延长和浓度的增加,Rg3对LoVo细胞抑制作用逐步增强.划痕试验和Transwell试验表明:Rg3浓度增加,对LoVo细胞迁移及侵袭能力抑制作用增强,浓度达15μmol/L以上时,Rg3对实验组有显著抑制作用.Western blot检测表明Rg3浓度的升高,伴随CD44、MMP2蛋白表达水平下降,TIMP2表达上升,但E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平无明显改变.结论 人参皂苷Rg3对人结肠癌LoVo细胞迁移和转移能力有抑制作用,其抑制作用具有时间和浓度依赖性. 展开更多
关键词 人参皂苷RG3 LOVO细胞 CD44 MMP2 TIMP2
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丹皮酚通过下调COX-2表达及PGE2合成降低大肠癌细胞侵袭能力 预览 被引量:6
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作者 李明 谭诗云 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2017年第2期124-127,共4页
目的观察丹皮酚对结肠癌LoVo细胞侵袭能力的影响,并探讨其是否通过下调环氧合酶-2(COX-2)表达及PGE_2合成发挥抗肿瘤作用。方法分别用0、30、60、120 mg/L的丹皮酚体外处理LoVo细24 h,Transwell小室法检测细胞侵袭能力;ELISA法检测细... 目的观察丹皮酚对结肠癌LoVo细胞侵袭能力的影响,并探讨其是否通过下调环氧合酶-2(COX-2)表达及PGE_2合成发挥抗肿瘤作用。方法分别用0、30、60、120 mg/L的丹皮酚体外处理LoVo细24 h,Transwell小室法检测细胞侵袭能力;ELISA法检测细胞上清液中PGE2的含量;Western blotting检测COX-2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、NF-κB/p65、IKKα和IκBα的表达。结果丹皮酚处理后,LoVo细胞侵袭能力降低,MMP-9表达下调;COX-2的表达及PGE2合成降低,NF-κB/p65表达下调。结论丹皮酚可能通过抑制NF-κB、COX-2表达、PGE2合成,下调MMP-9表达,降低LoVo细胞侵袭能力。 展开更多
关键词 丹皮酚 结肠癌 LOVO细胞 侵袭 环氧合酶-2 前列腺素E2
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Transcription factor EB is involved in autophagymediated chemoresistance to doxorubicin in human cancer cells
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作者 Li-mei FANG Bin LI +4 位作者 Jun-jie GUAN Hai-dong XU Gen-hai SHEN Quan-gen GAO Zheng-hong QIN 《中国药理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第9期1305-1316,共12页
抄写因素 EB (TFEB ) 是活动和 lysosomal 生物的续生说,而是它在幸存和化疗抵抗不是的调停 autophagy 的房间的角色完全理解的 autophagy 的一个主人管理者。在这研究,我们探索了 TFEB 是否在 vitro 在人的癌症 LoVo 和 HeLa 房间在... 抄写因素 EB (TFEB ) 是活动和 lysosomal 生物的续生说,而是它在幸存和化疗抵抗不是的调停 autophagy 的房间的角色完全理解的 autophagy 的一个主人管理者。在这研究,我们探索了 TFEB 是否在 vitro 在人的癌症 LoVo 和 HeLa 房间在调停 autophagy 的化疗抵抗起了一个重要作用。有 doxorubicin (0.5 mol/L ) 的人的结肠癌 LoVo 房间的治疗导致了 autophagy 激活和 TFEB 的原子 translocation,它源于 mTOR 小径的 inactivation。在 LoVo 和 HeLa 房间, TFEB 的 overexpression 提高了导致 doxorubicin 的 autophagy 激活并且显著地减少了导致 doxorubicin 的房间死亡,而有小介入 RNA 的 TFEB 击倒堵住的导致 doxorubicin 的 autophagy 并且显著地提高了 doxorubicin 的 cytotoxicity。在 LoVo 房间,由 3-methyladenine (3 麻省) 的 autophagy 抑制或 autophagy 相关的基因 Atg5 击倒响应 doxorubicin 的增加的房间死亡,和废除 TFEB 导致 overexpression 的化疗抵抗,建议 autophagy 的抑制使癌症房间更敏感到 doxorubicin。结果证明调停 TFEB 的 autophagy 激活减少到 doxorubicin 的癌症房间的敏感。 展开更多
关键词 肿瘤细胞 阿霉素 转录因子 耐药 HeLa细胞 小干扰RNA 细胞死亡 生物合成
靶向c-myc基因的siRNA基因干扰对大肠癌Lovo细胞增殖与凋亡的影响 预览 被引量:3
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作者 刘集鸿 蒋楠楠 +1 位作者 张丽科 邓宁 《分子诊断与治疗杂志》 2016年第2期109-113,118共6页
目的阐述靶向c-myc基因的si RNA基因转染干扰对大肠癌Lovo细胞增殖与凋亡的影响作用。方法将靶向c-myc基因的si RNA片段转染入大肠癌Lovo细胞,特异沉默c-myc基因,通过实时荧光定量PCR法检测c-myc m RNA表达水平,原位末端标记法(termina... 目的阐述靶向c-myc基因的si RNA基因转染干扰对大肠癌Lovo细胞增殖与凋亡的影响作用。方法将靶向c-myc基因的si RNA片段转染入大肠癌Lovo细胞,特异沉默c-myc基因,通过实时荧光定量PCR法检测c-myc m RNA表达水平,原位末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase d UTP nick end labeling,TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡情况及噻唑蓝法[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]检测细胞的增殖能力。结果经过转染的Lovo细胞组与未转染的对照组c-myc m RNA表达量比率为0.22∶1,c-myc m RNA表达量比例有统计学差异(P〈0.05)。经过转染的Lovo细胞与未转染的对照组的凋亡指数分别为32.4%与65.4%,具有显著性统计学差异(P〈0.01)。MTT检测经过转染的Lovo细胞与未转染的对照组的细胞增值率,分别为79.28%与38.32%,具有极其显著性统计学差异(P〈0.001)。结论将靶向c-myc基因的si RNA片段转染入大肠癌Lovo细胞,特异沉默c-myc基因,从而证实c-myc抑制大肠癌细胞增殖,诱导细胞凋亡的作用,从而为大肠癌的基因治疗寻求更多的治疗靶点。 展开更多
关键词 Survivin HTERT C-MYC 大肠癌 LOVO细胞 转染 凋亡
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白藜芦醇抑制人结肠癌细胞增殖的作用与促进骨形态蛋白9及其受体表达的关系研究 预览 被引量:2
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作者 曾于桦 邵英 +6 位作者 李洋 陈前昭 任文艳 周林云 周益 刘荣兴 何百成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1705-1711,共7页
目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人结肠癌LoVo细胞增殖的抑制作用与骨形态蛋白9(bone morphorgenetic protein 9,BMP9)之间的可能关系。方法采用结晶紫染色与流式细胞术检测Res对LoVo细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测Res对L... 目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人结肠癌LoVo细胞增殖的抑制作用与骨形态蛋白9(bone morphorgenetic protein 9,BMP9)之间的可能关系。方法采用结晶紫染色与流式细胞术检测Res对LoVo细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测Res对LoVo细胞凋亡的诱导作用。利用RTPCR和Western blot检测Res在LoVo细胞中对BMP9表达的影响,以及对BMP9的受体ALK2和ALK3表达的影响。采用ALK2和ALK3的抑制剂,通过结晶紫染色分析BMP9介导Res抑制LoVo细胞增殖的可能机制。结果与对照组相比,Res明显呈浓度依赖性抑制LoVo细胞增殖,并诱导LoVo细胞发生S期阻滞;Res呈浓度依赖性增加LoVo细胞凋亡比例;Res促进BMP9的mRNA表达并明显增加其蛋白水平;外源性过表达BMP9能增强Res对LoVo细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用;Res能诱导BMP9的受体ALK2和ALK3的mRNA表达,抑制ALK2和ALK3能明显促进LoVo细胞增殖,并减弱Res对LoVo细胞增殖的抑制作用。结论Res对LoVo细胞的增殖具有明显抑制作用,这种作用可能与Res促进BMP9及其受体表达有关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 骨形态蛋白9 结肠癌 LOVO细胞 增殖抑制
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人参皂苷Rh2对LoVo细胞迁移和转移能力的影响及机制研究 被引量:1
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作者 张晓圆 李荣江 +5 位作者 孙继贤 孙砚辉 张苗苗 伍志学 张韧 邝枣园 《广州中医药大学学报》 CAS 2016年第4期545-551,共7页
【目的】探讨人参皂苷Rh2对人结肠癌Lo Vo细胞迁移和转移能力的影响。【方法】通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度Rh2对Lo Vo细胞增殖的影响,并确定用于研究抑制Lo Vo细胞迁移和转移功能作用的Rh2浓度和作用时间。设置空白对... 【目的】探讨人参皂苷Rh2对人结肠癌Lo Vo细胞迁移和转移能力的影响。【方法】通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度Rh2对Lo Vo细胞增殖的影响,并确定用于研究抑制Lo Vo细胞迁移和转移功能作用的Rh2浓度和作用时间。设置空白对照组及Rh2实验组(5、10、20、40、60μmol/L),通过划痕试验,对Lo Vo细胞划痕加药处理24 h后,观察不同浓度Rh2对细胞迁移的影响。采用Transwell法观察不同浓度Rh2对细胞转移的影响。采用Western blot检测不同浓度Rh2对CD44、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)、E-Cadherin和β-catenin表达水平的影响。【结果】MTT结果显示:0~40μmol/L Rh2处理Lo Vo细胞24 h对其生长无明显影响。随Rh2作用时间的延长和浓度的增加,Rh2对Lo Vo细胞抑制作用逐步增强。划痕试验和Transwell结果表明:随着Rh2浓度增加,其对Lo Vo细胞迁移和转移能力的抑制作用增强,20μmol/L以上浓度的Rh2处理Lo Vo细胞24 h与空白对照组比较具显著抑制作用。Western blot结果表明:随着Rh2浓度的升高,CD44、MMP2蛋白表达水平下降,TIMP2、E-Cadherin和β-catenin蛋白表达水平上升。【结论】人参皂苷Rh2对人结肠癌Lo Vo细胞迁移和转移能力有抑制作用,其抑制作用具有时间和浓度依赖性。 展开更多
关键词 人参皂苷RH2 LOVO细胞 细胞迁移 细胞转移 蛋白表达 细胞培养
川芎素对结直肠癌Lovo细胞生长的体内外抑制作用及机制 预览 被引量:4
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作者 金剑 赵庆 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第34期8-10,共3页
目的观察川芎素在体内外对人结直肠癌Lovo细胞生长的抑制作用,并探讨其机制。方法将Lovo细胞分为两组,观察组分别与终浓度为0.125、0.25、0.5、1.0 mg/m L川芎素共培养,对照组不加川芎素。MTT法测定细胞吸光度值,计算细胞活力指数;流式... 目的观察川芎素在体内外对人结直肠癌Lovo细胞生长的抑制作用,并探讨其机制。方法将Lovo细胞分为两组,观察组分别与终浓度为0.125、0.25、0.5、1.0 mg/m L川芎素共培养,对照组不加川芎素。MTT法测定细胞吸光度值,计算细胞活力指数;流式细胞术检测细胞周期和凋亡细胞,计算细胞凋亡率;将14只皮下接种Lovo细胞的裸鼠随机分两组各7只,观察组静脉注射0.5 mg/m L的川芎素50μL,对照组静脉注射等量生理盐水,隔日给药7次,测量给药前后肿瘤体积。采用Western blot法检测Lovo细胞及裸鼠肿瘤组织中的Bcl-2及proCaspase3。结果观察组分别与终浓度0.125、0.25、0.5、1.0 mg/m L川芎素共培养24 h后,其细胞活力指数分别为81.23±6.58、75.69±6.34、62.18±3.29、58.39±2.69,G1期细胞比例减少、S期细胞比例增加(P均〈0.05),细胞凋亡率增加(P〈0.05);与对照组比较,观察组各时点荷瘤裸鼠肿瘤体积均减小(P均〈0.05);观察组Lovo细胞及裸鼠肿瘤组织中的Bcl-2及pro-Caspase3相对表达量较对照组均降低(P均〈0.05)。结论川芎素可抑制Bcl-2的表达、激活Caspase-3进而促进凋亡,最终抑制Lovo细胞的体内外生长。 展开更多
关键词 结直肠癌 川芎素 LOVO细胞 细胞凋亡 B淋巴细胞瘤-2基因 半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶
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白藜芦醇抑制人结肠癌细胞增殖与P38MAPK的关系研究 预览 被引量:5
11
作者 陈前昭 曾于桦 +6 位作者 邵英 李洋 任文艳 周林云 周益 刘荣兴 何百成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1110-1114,共5页
目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)抑制人结肠癌细胞生长的作用与p38MAPK的可能关系.方法利用结晶紫染色、Westernblot和流式细胞术检测Res对LoVo细胞增殖的抑制作用;Westernblot分析Res对LoVo细胞凋亡的促进作用,以及Res对p38MAPK... 目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)抑制人结肠癌细胞生长的作用与p38MAPK的可能关系.方法利用结晶紫染色、Westernblot和流式细胞术检测Res对LoVo细胞增殖的抑制作用;Westernblot分析Res对LoVo细胞凋亡的促进作用,以及Res对p38MAPK磷酸化的影响;利用p38MAPK抑制剂,通过结晶紫染色和Wetreblot实验,分析Res抑制结肠癌LoVo细胞增殖的作用与p38MAPK之间的关系.结果与对照组相比,Res在20μmol·L^-11时就能明显抑制LoVo细胞增殖(P〈0.05),并促使细胞周期阻滞在S期,上调PCNA蛋白水平;Res能呈浓度依赖性增加Bad的蛋白水平,而抑制Bcl-2蛋白表达;Res对p38MAPK总蛋白水平无明显影响,但可明显增加p38MAPK的磷酸化水平;抑制p38MAPK明显促进LoVo细胞增殖,并能减弱Res对LoVo细胞增殖的抑制作用、对Bad表达促进作用和对Bcl-2表达的抑制作用.结论Res对LoVo细胞的增殖具有抑制作用并促进凋亡,其机制可能与Res促进p38MAPK的磷酸化有关. 展开更多
关键词 白藜芦醇 结肠癌 LOVO细胞 增殖抑制 凋亡 p38MPAK
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聚乙二醇修饰的5-氟尿嘧啶磁性白蛋白微球联合恒定外磁场对体外人结肠癌细胞生长的抑制作用 预览
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作者 刘建刚 《中华诊断学电子杂志》 2016年第4期231-235,共5页
目的 探讨聚乙二醇修饰的磁性5-氟尿嘧啶白蛋白微球(PEG-5-FU-MAMS)联合恒定外磁场体外对人结肠癌(LoVo)细胞生长的抑制作用及其机制。方法 采用乳化-加热固化法制备PEG-5-FU-MAMS,并检测其表征,将体外培养的LoVo细胞分为4组:A组为... 目的 探讨聚乙二醇修饰的磁性5-氟尿嘧啶白蛋白微球(PEG-5-FU-MAMS)联合恒定外磁场体外对人结肠癌(LoVo)细胞生长的抑制作用及其机制。方法 采用乳化-加热固化法制备PEG-5-FU-MAMS,并检测其表征,将体外培养的LoVo细胞分为4组:A组为PEG-5-FU-MAMS联合磁场组;B组为PEG-5-FU-MAMS组;C组为游离5-氟尿嘧啶(5-FU)组;D组为单纯磁场组。参照5-FU血浆峰水平10.0 mg/L,每组设含5-FU水平为1.0,2.0,5.0,10.0,20.0,50.0,100.0 mg/L 7种不同的药物和微球备用。每种条件重复3孔,采用噻唑蓝(MTT)比色分析法测定各组肿瘤细胞生长抑制率(IR),观察PEG-5-FU-MAMS联合恒定磁场组对体外LoVo细胞生长的抑制作用。结果 微球平均粒径为(1.32±0.50)μm,呈球形,表面光滑,载药量为(5.31±0.13)%,具有良好的磁响应性和缓释性。LoVo细胞培养24 h后,显微镜下各组肿瘤细胞完全贴壁,生长良好,折光性好。单纯磁场组体外对LoVo细胞生长无明显影响。经过不同的处理后,含5-FU浓度为20.0,50.0,100.0 mg/L时,B组和C组IR〉50%,药物敏感,两组在相应药物浓度下IR相似,差异无统计学意义(q=2.02,2.11,2.74;P〉0.05)。在含5-FU浓度为10.0 mg/L时,A组IR为59.8%,IR〉50%,药物敏感,且随着药物浓度的增高,IR逐步升高,与B、C组比较,差异有统计学意义(F=62.09,66.74,56.62,66.13;P〈0.05)。结论PEG-5-FU-MAMS具有良好的外形、粒径、载药量、磁响应性和药物缓释作用;PEG-5-FU-MAMS联合恒定外磁场能显著增强对LoVo细胞生长的抑制效应。 展开更多
关键词 氟尿嘧啶 白蛋白类 微球体 人结肠癌LoVo细胞
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美洛昔康对人结肠癌细胞增殖、迁移和PTEN基因表达的影响 预览 被引量:4
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作者 周密 邱峰 +2 位作者 张渊 王家玉 秧茂盛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1704-1709,共6页
目的研究美洛昔康(meloxicam,Mel)对人结直肠癌LoVo细胞增殖和迁移能力的抑制作用及其对抑癌基因PTEN表达水平的影响.方法以人结肠癌细胞株LoVo为试验对象,通过集落形成试验分析Mel对LoVo细胞增殖的影响,Westernblot检测Mel对PCNA蛋白... 目的研究美洛昔康(meloxicam,Mel)对人结直肠癌LoVo细胞增殖和迁移能力的抑制作用及其对抑癌基因PTEN表达水平的影响.方法以人结肠癌细胞株LoVo为试验对象,通过集落形成试验分析Mel对LoVo细胞增殖的影响,Westernblot检测Mel对PCNA蛋白和PTEN蛋白表达水平的影响;细胞迁移试验分析Mel对LoVo细胞活性的影响;RT-PCR检测Mel对LoVo细胞中PTENmRNA表达水平的影响;使用重组腺病毒作为干预手段,Annexin-V试验验证Mel是否通过PTEN发挥抑癌作用.结果与对照组相比,Mel能明显抑制LoVo细胞的集落形成能力,能抑制LoVo细胞的细胞核增殖抗原PCNA的蛋白表达水平,80μmol·L-1Mel干预48h,可将LoVo细胞中PCNA的蛋白表达水平抑制到61.57% ±2.81%(T=7.086,P=0.019);Mel能上调LoVo细胞内抑癌基因PTEN的mRNA表达水平,80μmol·L^-1Mel干预48h后PTEN的mRNA 表达水平上调至160.43% ±4.71%(T=24.244,P=0.002);Mel能上调LoVo细胞内PTEN的蛋白表达水平,80μmol·L^-1Mel干预48h后PTEN的蛋白表达水平上调至152.63% ±3.33%(T=27.359,P=0.001);Annexin-V试验结果说明Mel的对LoVo细胞的抑制作用可能与上调PTEN基因表达有关.结论Mel能抑制LoVo细胞的增殖和迁移,其机制可能与上调PTEN的表达水平有关. 展开更多
关键词 Mel 人结肠癌细胞 PTEN 增殖 迁移 重组腺病毒 LOVO细胞
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灵芪胶囊对直结肠癌lovo细胞凋亡相关基因表达的影响
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作者 王国胜 李环 《中医学报》 CAS 2015年第10期1397-1399,共3页
目的:观察灵芪胶囊对直结肠癌lovo细胞凋亡相关Caspase3基因表达的影响。方法:灵芪胶囊含药血清根据浓度不同分为灵芪胶囊高剂量组、灵芪胶囊中剂量组、灵芪胶囊低剂量组、阳性对照组及空白对照组,将对数生长期的lovo细胞培养至细胞... 目的:观察灵芪胶囊对直结肠癌lovo细胞凋亡相关Caspase3基因表达的影响。方法:灵芪胶囊含药血清根据浓度不同分为灵芪胶囊高剂量组、灵芪胶囊中剂量组、灵芪胶囊低剂量组、阳性对照组及空白对照组,将对数生长期的lovo细胞培养至细胞贴壁后,分别放入相应的含药血清,48 h后收集细胞,应用蛋白质印迹法检测各组Caspase3的含量。结果:空白对照组Caspase3蛋白表达量较高,阳性对照组和灵芪胶囊高剂量组Caspase3蛋白表达量小于空白对照组,其结果具有明显统计学差异(P〈0.01)。灵芪胶囊中剂量组、灵芪胶囊低剂量组Caspase3表达量与空白对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:体外条件下,灵芪胶囊对lovo细胞具有一定的抑制作用,能够使细胞凋亡发生。灵芪胶囊导致细胞发生凋亡的作用机制可能与抑制Caspase3基因的表达情况有关。 展开更多
关键词 灵芪胶囊 直肠癌 结肠癌 LOVO细胞 细胞凋亡 Caspase3基因
RNA干扰沉默高迁移率族蛋白B1的表达对结直肠癌LoVo细胞增殖和侵袭的抑制作用 被引量:4
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作者 李增军 王海鹏 +3 位作者 宋宝 孙燕来 徐忠法 韩建军 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期664-670,共7页
目的探讨小分子RNA(siRNA)干扰高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因的表达对结直肠癌细胞株kv0增殖和侵袭的抑制作用。方法采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默HMGB1的表达,以逆转录聚合酶链反应和Western blot法检测干扰后LoVo细胞中HMGB1 m... 目的探讨小分子RNA(siRNA)干扰高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因的表达对结直肠癌细胞株kv0增殖和侵袭的抑制作用。方法采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默HMGB1的表达,以逆转录聚合酶链反应和Western blot法检测干扰后LoVo细胞中HMGB1 mRNA和蛋白的表达情况。采用四甲基偶氮唑蓝(MTr)法、流式细胞术、Transwell小室实验、细胞划痕实验及裸鼠成瘤实验,分析HMGB1基因沉默对LoVo细胞生长、增殖、侵袭及转移的影响。结果慢病毒介导siRNA可成功转染结直肠癌细胞株LoVo。HMGB1-siRNA转染组LoVo细胞中HMGB1 mRNA和蛋白的相对表达水平分别为0.24±0.04和0.21±0.03,阴性对照组分别为0.82±0.13和1.15±0.18,空白对照组分别为0.93±0.15和1.21±0.20;HMGB1-siRNA转染组HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平均明显低于阴性对照组和空白对照组(P〈0.05)。MTT法检测结果显示,HMGB1-siRNA转染组LoVo细胞的生长速度较阴性对照组和空白对照组降低(P〈0.05)。流式细胞术检测结果显示,HMGBI—siRNA转染组LoVo细胞的增殖指数为38.27±1.32,明显低于阴性对照组(54.66±1.74)和空白对照组(57.43±1.29,P〈0.05)。Transwell小室实验显示,HMGB1-siRNA转染组穿膜细胞数为(14.0±3.5)个/高倍视野,明显低于阴性对照组[(51.0±6.7)个/高倍视野]和空白对照组[(68.0±5.3)个/高倍视野,P〈0.05]。细胞划痕实验显示,划痕后培养48h时,HMGB1-siRNA转染组LoVo细胞的迁移距离为(83.61±23.21)μm,明显低于阴性对照组[(202.86±46.46)μm]和空白对照组[(214.58±57.38)μm,P〈0.05]。裸鼠成瘤实验显示,21d后,肿瘤最终体积为(521±34)mm^3,明显小于阴性对照组[(763±46)mm^3]和空白对照组[(802±51)mm^3,P〈0.05]。结论慢病毒介导的RNA干扰技术可有效抑制结直肠癌LoVo细胞中HMGB 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 高迁移率族蛋白B1 LOVO细胞 RNA干扰 肿瘤侵袭 肿瘤 转移 裸鼠
姜黄素与5-FU联用对人结肠癌LoVo细胞生长抑制与凋亡诱导作用研究 被引量:1
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作者 魏雯 贺彬 +1 位作者 刘骥 赵刚 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1885-1889,共5页
目的体外观察5-氟尿嘧啶(5-FU)与姜黄素联用对人结肠癌LoVo细胞的生长抑制和凋亡诱导的作用。方法采用MTT方法、流式细胞检测技术和荧光染料AO/EB双染法观察不同浓度姜黄素和5-氟尿嘧啶单独或联合应用对Lovo细胞生长和凋亡的影响。结... 目的体外观察5-氟尿嘧啶(5-FU)与姜黄素联用对人结肠癌LoVo细胞的生长抑制和凋亡诱导的作用。方法采用MTT方法、流式细胞检测技术和荧光染料AO/EB双染法观察不同浓度姜黄素和5-氟尿嘧啶单独或联合应用对Lovo细胞生长和凋亡的影响。结果 MTT法检测结果显示,各药物组LoVo细胞的生长均受到了显著抑制,各剂量5-FU以及分别联合姜黄素对LoVo细胞的抑制率呈剂量-时间依赖关系;FCM检测结果表明,姜黄素联合低剂量5-FU组的早期、晚期凋亡率显著高于中剂量和高剂量5-FU单用组,姜黄素联合中剂量5-FU组的细胞凋亡率最高;荧光显微镜观察发现各实验组细胞同对照组相比呈现典型凋亡形态,且联合用药组细胞凋亡率最高。结论姜黄素与低剂量5-FU联用对体外培养的结肠癌LoVo细胞的的生长抑制和促凋亡作用能够达到高剂量5-FU单用的效果。 展开更多
关键词 姜黄素 5-FU LOVO细胞 生长抑制 细胞凋亡
Faecalibacterium prausnitzii基因组DNA上调外周血单个核细胞Th1型免疫应答增强对人结肠癌LoVo细胞的杀伤活性 预览
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作者 张涛 张敏 +3 位作者 汤爱荣 曹萍 谢丽娟 于成功 《胃肠病学》 2015年第8期457-461,共5页
背景:Faecalibacterium prausnitzii(Fp)是一种具有抗炎和免疫调节作用的肠道共生菌,研究发现结直肠癌患者肠道内Fp数量明显减少,可能与肿瘤发生有关。目的:探讨Fp及其基因组DNA(fDNA)干预对外周血单个核细胞(PBMCs)对人结肠癌L... 背景:Faecalibacterium prausnitzii(Fp)是一种具有抗炎和免疫调节作用的肠道共生菌,研究发现结直肠癌患者肠道内Fp数量明显减少,可能与肿瘤发生有关。目的:探讨Fp及其基因组DNA(fDNA)干预对外周血单个核细胞(PBMCs)对人结肠癌LoVo细胞杀伤活性的影响及其免疫学机制。方法:将Fp、fDNA或酶解fDNA(d-fDNA)与分离自健康成人的PBMCs体外共培养,MTT实验检测PBMCs对LoVo细胞的杀伤活性,ELISA法检测PBMCs培养上清液中的Th1、Th2型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)含量,real-time PCR检测PBMCs Th1、Th2特异性转录因子T-bet、GATA3表达。结果:与未予干预的PBMCs相比,fDNA干预能显著增强PBMCs对LoVo细胞的杀伤活性(P〈0.05),同时促进PBMCs的IFN-γ分泌和T-bet mRNA表达(P〈0.05),抑制IL-4分泌和GATA3mRNA表达(P〈0.05)。Fp和d-fDNA均未显示出上述作用。结论:fDNA能增强PBMCs对人结肠癌细胞的杀伤活性,其机制可能与上调Th1型免疫应答有关。 展开更多
关键词 Faecalibacterium prausnitzii 干扰素Γ 白细胞介素4 Th1-Th2平衡 结肠肿瘤 LOVO细胞
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Osteopontin knockdown suppresses the growth and angiogenesis of colon cancer cells 预览 被引量:1
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作者 Xin-Lin Wu Kai-Jin Lin +8 位作者 Ai-Ping Bai Wan-Xiang Wang Xing-Kai Meng Xiu-Lan Su Ming-Xing Hou Pei-De Dong Jun-Jing Zhang Zhao-Yang Wang Lin Shi 《世界胃肠病学杂志:英文版(电子版)》 SCIE CAS 2014年第30期10440-10448,共9页
AIM:To investigate the effects of osteopontin(OPN)gene expression knockdown on colon cancer Lovo cells in vitro.METHODS:Four candidate small interfering RNA(siRNA)constructs targeting the OPN gene and a scrambled cont... AIM:To investigate the effects of osteopontin(OPN)gene expression knockdown on colon cancer Lovo cells in vitro.METHODS:Four candidate small interfering RNA(siRNA)constructs targeting the OPN gene and a scrambled control sequence(NC-siRNA)were synthesized and inserted into a pGPU6/GFP/Neo expression vector.After confirmation by restriction enzyme digestion and DNA sequencing,the recombinant plasmids were subsequently transfected into a human colon cancer cell line(Lovo)using a liposome transfection method.Stably transfected cells were maintained with G418 selection and referred to as Lovo-OPN-1,-2,-3,-4,and Lovo-NC cells.Knockdown efficiency of each of the four siRNA constructs was determined by realtime reverse transcription polymerase chain reaction assays and western blotting,and the construct with the most effective silencing was used for subsequent experiments.Cell proliferation,adhesion,and Matrigel invasion assays were performed to analyze the effects of OPN knockdown in stably transfected Lovo cells.The levels of four angiogenic factors,namely vascular endothelial growth factor(VEGF),matrix metalloproteinase(MMP)-2,MMP-9 and urokinase plasminogen activator were detected by enzyme-linked immunosorbent assays(ELISA).RESULTS:Recombinant vectors containing OPNspecific and scrambled siRNA sequences were successfully constructed and stably transfected into Lovo cells.Compared with the control Lovo and Lovo-NC cells,the levels of OPN mRNA and protein expression in LovoOPN-1,-2,-3,and-4 were significantly reduced(all P<0.05),with the most efficient reduction observed in Lovo-OPN-4 cells(P<0.05).Relative to untransfected Lovo cells,OPN mRNA expression levels in Lovo-NC and Lovo-OPN-4 cells were 1.008±0.067 and 0.160±0.023,respectively.The relative OPN protein expression levels in Lovo,Lovo-NC,and Lovo-OPN-4 cells were 3.024±0.211,2.974±0.630,and 0.121±0.008,respectively.Moreover,transfection with the scrambled sequence had no effect on the expression of OPN.After24,48,72,and 96 h of cultivation,absorption val 展开更多
关键词 COLON carcinoma LOVO cells OSTEOPONTIN Angiogenesi
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四种不同类型甲壳胺抑瘤作用的初步比较
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作者 赵丽艳 赵忠鹏 +2 位作者 马守栋 程艳芹 李明春 《热带医学杂志》 CAS 2014年第9期1138-1140,共3页
目的制备并表征纳米级甲壳胺,初步比较其与O-羧甲基甲壳胺、水溶性低分子量甲壳胺、非水溶性高分子量甲壳胺对人结肠癌LoVo细胞的抑瘤作用。方法采用改进的离子凝胶法制备纳米级甲壳胺,通过透射电子显微镜、马尔文激光纳米粒度测定仪对... 目的制备并表征纳米级甲壳胺,初步比较其与O-羧甲基甲壳胺、水溶性低分子量甲壳胺、非水溶性高分子量甲壳胺对人结肠癌LoVo细胞的抑瘤作用。方法采用改进的离子凝胶法制备纳米级甲壳胺,通过透射电子显微镜、马尔文激光纳米粒度测定仪对其形态、粒径、表面电位进行表征。采用MTT法初步比较上述四种类型甲壳胺对人结肠癌LoVo细胞的抑瘤活性。结果制备得到平均粒径160nm的纳米级甲壳胺,高、中浓度下均对LoVo细胞生长有一定的抑制作用,高浓度的抑制率达54.0%,其它三种类型甲壳胺抑制率分别是O-羧甲基甲壳胺4.5%、非水溶性甲壳胺35.8%和低分子量甲壳胺38.1%。结论对人结肠癌LoVo细胞,四种类型甲壳胺中纳米级甲壳胺的体外抑瘤作用最好,O-羧甲基甲壳胺几乎无抑瘤作用。 展开更多
关键词 纳米级甲壳胺 O-羧甲基甲壳胺 水溶性甲壳胺 非水溶性甲壳胺 LOVO细胞 抑瘤作用
藤黄酸对结肠癌LoVo细胞增殖和侵袭能力的影响 被引量:5
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作者 廖述文 杨平 +4 位作者 张通 陈熙文 王强 李旺林 曹杰 《国际中医中药杂志》 2014年第3期220-222,共3页
目的探讨不同浓度藤黄酸(gambogicacid,GA)对结肠癌LoVo细胞株增殖、侵袭能力及基质金属蛋白酶.2(MMP.2)蛋白表达的影响。方法CCK-8法检测藤黄酸对LoVo细胞增殖的影响;Transwell小室检验LoVo细胞体外侵袭能力的改变;WestemBlo... 目的探讨不同浓度藤黄酸(gambogicacid,GA)对结肠癌LoVo细胞株增殖、侵袭能力及基质金属蛋白酶.2(MMP.2)蛋白表达的影响。方法CCK-8法检测藤黄酸对LoVo细胞增殖的影响;Transwell小室检验LoVo细胞体外侵袭能力的改变;WestemBlot检测LoVo细胞中MMP.2蛋白的改变。结果CCK-8检测显示,GA剂量1、2、4、6、8mol/L作用于细胞24h、48h后,对结肠癌Lovo细胞增殖的抑制率分别为(0.16±0.11)%、(0.24±0.08)%、(0.58±0.01)%、(0.67±0.03)%、(0.79±0.01)%和(0.27±0.05)%、(0.69±0.09)%、(0.85±O.01)%、(0.87±0.01)%、(0.89±0.01)%,与对照组(0~tmo/L)比较差异具有统计学意义(P〈O.05)。Transwell侵袭实验显示,低剂量藤黄酸可抑制LoVo细胞侵袭,其中对照组(Ortrno/L)穿膜细胞数为(120.50±8.69)个,实验组的(1ixmol/L)穿膜细胞数为(69.83+--4.75)个,两组比较差异有条件下意义(P〈0.05)。WesternBlot结果显示,GA剂量1、2、4p,mol/L作用LoVo细胞后MMP.2蛋白表达水平分别下降48.67%、74.72%、82.70%,与对照组(0gmo/L)比较差异有统计学意义。结论藤黄酸可抑制LoVo细胞增殖及其侵袭能力,其作用机制可能与降低LoVo细胞中MMP.2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 藤黄酸 LOVO细胞 结肠癌 侵袭
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