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益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠肾组织Nestin的影响 预览
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作者 贾评评 宋丹 宋纯东 《中国中西医结合肾病杂志》 2019年第3期196-199,I0005共5页
目的:探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病(DKD)模型大鼠肾组织Nestin表达的影响。方法:将36只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、益气养阴活血方(中药)组各12只,模型组与中药组造模成功后,正常组和模型组灌服生理盐水,中药组给予益气养阴... 目的:探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病(DKD)模型大鼠肾组织Nestin表达的影响。方法:将36只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、益气养阴活血方(中药)组各12只,模型组与中药组造模成功后,正常组和模型组灌服生理盐水,中药组给予益气养阴活血方颗粒灌胃。6周后生化检测各组大鼠血清白蛋白(Alb)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量、空腹血糖(FBG)及血脂(TC、TG)等水平;测量大鼠体重、肾质量,计算肥大指数;过碘酸-雪夫氏(PAS)染色观察肾脏外观及病理;免疫组化法检测肾组织Nestin的表达水平。结果:益气养阴活血方可以改善大鼠基本状况及生化指标,减少蛋白尿、改善肾脏病理,肾质量及肥大指数降低,并且发现Nestin在肾组织的表达变化与上述生化及病理改善明显相关。结论:益气养阴活血方可能通过上调Nestin达到保护足细胞、降低蛋白尿及改善肾脏病理而延缓DKD进程。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 益气养阴活血方 足细胞 NESTIN 实验研究
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Nestin在乳腺癌中的表达及其与他莫昔芬治疗疗效和预后的关系
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作者 黎胤谋 李靖 彭世军 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2019年第4期205-210,共6页
目的探讨神经巢蛋白(Nestin)在乳腺癌中的表达及其与他莫昔芬治疗疗效和预后的关系。方法收集2009年3月至2013年3月湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院乳腺外科收治的82例乳腺癌根治术后使用他莫昔芬治疗的乳腺癌患者,选取冻存于液氮... 目的探讨神经巢蛋白(Nestin)在乳腺癌中的表达及其与他莫昔芬治疗疗效和预后的关系。方法收集2009年3月至2013年3月湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院乳腺外科收治的82例乳腺癌根治术后使用他莫昔芬治疗的乳腺癌患者,选取冻存于液氮中配对的癌组织和癌旁组织。荧光实时定量PCR(RT-PCR)和免疫组织化学检测乳腺癌组织中Nestin mRNA含量及Nestin表达情况,分析其与患者临床病理特征的关系。选取乳腺癌细胞株MCF-7,采用小干扰RNA(siRNA)沉默MCF-7细胞中的Nestin,观察其对他莫昔芬敏感性的影响。Western blotting检测Nestin与上皮-间质转化(EMT)的关系。结果RT-PCR结果提示乳腺癌组织中Nestin mRNA含量是癌旁组织的3.87倍(6.34±1.56∶1.64±0.52,t=26.140,P<0.001)。乳腺癌组织中Nestin阳性表达率为75.61%(62/82),显著高于癌旁组织的24.39%(20/82),差异有统计学意义(χ2=43.024,P<0.001)。Nestin的表达与乳腺癌患者淋巴管是否浸润(χ2=7.499,P=0.006)和淋巴结转移(χ2=6.770,P=0.034)有关,而与患者年龄(χ2=3.242,P=0.072)、肿瘤大小(χ2=2.358,P=0.308)、组织学分级(χ2=0.294,P=0.863)、导管浸润状态(χ2=0.180,P=0.671)及是否三阴性乳腺癌(χ2=0.142,P=0.706)无关。Cox比例风险模型分析结果提示,Nestin的表达(HR=1.982,P<0.001;HR=1.537,P<0.001)、淋巴管浸润(HR=2.502,P<0.001;HR=1.715,P<0.001)和淋巴结转移(HR=1.818,P<0.001;HR=1.446,P<0.001)是乳腺癌患者的无进展生存期和总生存期的独立预后风险因子。在乳腺癌细胞MCF-7中,Nestin敲除后MCF-7对他莫昔芬的IC50值从(48.05±2.22)μmol/L降到(35.59±2.92)μmol/L,差异有统计学意义(t=6.489,P=0.003)。Nestin沉默显著上调MCF-7细胞中的上皮钙黏着蛋白(7.21±1.15∶1.02±0.01,t=6.654,P=0.024),同时下调间质指标波形蛋白(0.17±0.08∶1.01±0.02,t=25.015,P<0.001)。结论Nestin在乳腺癌中过表达,与他莫昔芬疗效降低相关。Nestin可能是乳腺癌预后的一个新 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 他莫昔芬 巢蛋白 生物标记 肿瘤
胶质细胞源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化 预览
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作者 刘振东 王瑞 +1 位作者 杨建东 王静成 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4605-4609,共5页
背景:骨髓间充质干细胞作为中胚层来源的多能干细胞,除了能够分化为间充质系细胞如成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞外,还具有神经分化潜能,具有广阔的应用前景。目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元... 背景:骨髓间充质干细胞作为中胚层来源的多能干细胞,除了能够分化为间充质系细胞如成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞外,还具有神经分化潜能,具有广阔的应用前景。目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的可行性。方法:选用健康SD大鼠,采用全骨髓贴壁法体外培养、纯化骨髓间充质干细胞,经流式细胞仪进行细胞表型鉴定。取生长状态良好的第4代骨髓间充质干细胞进行实验分组:对照组不加任何诱导剂;实验组培养液内加入胶质细胞源性营养因子,调整质量浓度分别为20,50,100μg/L,倒置相差显微镜连续观察细胞生长情况及形态变化。诱导6,12,24,48,72h,采用免疫组化法检测巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶的表达。结果与结论:①原代提取获得的骨髓间充质干细胞形态均一性较好,流式细胞仪检测结果为CD44,CD90呈强阳性表达,CD34,CD45阳性表达率很低;②经胶质细胞源性营养因子诱导后,细胞胞体逐渐向胞核收缩,变形细胞逐渐增多,出现双极、多极和锥形等典型的神经元样细胞形态,细胞边缘出现突起,且与邻近细胞突起逐渐相互连接;③胶质细胞源性营养因子诱导6h后出现巢蛋白表达阳性,24h后达顶峰,50,100μg/L胶质细胞源性营养因子组巢蛋白表达显著高于20μg/L胶质细胞源性营养因子组。胶质细胞源性营养因子诱导12h后检测到神经元特异性烯醇化酶表达阳性,且表达强度随时间延长逐渐增加,48h后达顶峰,50,100μg/L胶质细胞源性营养因子组巢蛋白表达显著高于20μg/L胶质细胞源性营养因子组。对照组未见明显神经元样细胞的形态变化及特异性标志的阳性表达;④结果表明,大鼠骨髓间充质干细胞可通过全骨髓贴壁法在体外进行原代提取分离及传代培养,经胶质细胞源性营养因子诱导后具有向神经元样细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 胶质细胞源性神经营养因子 细胞分化 神经细胞 巢蛋白 神经元特异性烯醇化酶 国家自然科学基金
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Luteolin induces hippocampal neurogenesis in the Ts65Dn mouse model of Down syndrome 预览
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作者 Wen-Bo Zhou Zong-Ning Miao +4 位作者 Bin Zhang Wei Long Fang-Xiu Zheng Jing Kong Bin Yu 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第4期613-620,共8页
Studies have shown that the natural flavonoid luteolin has neurotrophic activity.In this study,we investigated the effect of luteolin in a mouse model of Down syndrome.Ts65Dn mice,which are frequently used as a model ... Studies have shown that the natural flavonoid luteolin has neurotrophic activity.In this study,we investigated the effect of luteolin in a mouse model of Down syndrome.Ts65Dn mice,which are frequently used as a model of Down syndrome,were intraperitoneally injected with 10 mg/kg luteolin for 4 consecutive weeks starting at 12 weeks of age.The Morris water maze test was used to evaluate learning and memory abilities,and the novel object recognition test was used to assess recognition memory.Immunohistochemistry was performed for the neural stem cell marker nestin,the astrocyte marker glial fibrillary acidic protein,the immature neuron marker DCX,the mature neuron marker NeuN,and the cell proliferation marker Ki67 in the hippocampal dentate gyrus.Nissl staining was used to observe changes in morphology and to quantify cells in the dentate gyrus.Western blot assay was used to analyze the protein levels of brain-derived neurotrophic factor(BDNF)and phospho-extracellular signal-regulated kinase 1/2(p-ERK1/2)in the hippocampus.Luteolin improved learning and memory abilities as well as novel object recognition ability,and enhanced the proliferation of neurons in the hippocampal dentate gyrus.Furthermore,luteolin increased expression of nestin and glial fibrillary acidic protein,increased the number of DCX+neurons in the granular layer and NeuN+neurons in the subgranular region of the dentate gyrus,and increased the protein levels of BDNF and p-ERK1/2 in the hippocampus.Our findings show that luteolin improves behavioral performance and promotes hippocampal neurogenesis in Ts65Dn mice.Moreover,these effects might be associated with the activation of the BDNF/ERK1/2 pathway. 展开更多
关键词 nerve REGENERATION LUTEOLIN HIPPOCAMPUS Ts65Dn mice NEUROGENESIS ERK BDNF NESTIN GFAP NEUN Down syndrome neural REGENERATION
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粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖和干性基因表达的影响及作用机制 预览
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作者 谢东可 何霞 廖凯男 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期729-733,共5页
背景:研究发现粉防己碱能通过下调β-catenin表达抑制神经胶质瘤干细胞特性,然而其对神经母细胞瘤干细胞的影响未见报道。目的:探讨粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖及干性标志物表达的影响,并探究其分子机制。方法:使用无血清悬浮法... 背景:研究发现粉防己碱能通过下调β-catenin表达抑制神经胶质瘤干细胞特性,然而其对神经母细胞瘤干细胞的影响未见报道。目的:探讨粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖及干性标志物表达的影响,并探究其分子机制。方法:使用无血清悬浮法从神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中获取肿瘤干细胞,给予粉防己碱干预,通过MTT法检测粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞的增殖抑制作用,细胞免疫荧光染色检测粉防己碱干预后Nestin蛋白水平变化,克隆球形成实验检测粉防己碱干预后肿瘤干细胞成球能力变化,qRT-PCR法检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、NestinmRNA表达,Westernblot检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白表达。结果与结论:与未干预组比较,粉防己碱干预后SK-N-SH干细胞增殖能力降低(P<0.05),CD133、Oct-4和NestinmRNA表达降低(P<0.05),Nestin蛋白荧光强度减弱,克隆球形成能力减弱(P<0.05),CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白减少(P<0.05)。结果表明,粉防己碱抑制神经母细胞瘤干细胞增殖并降低干性标志物表达,可能与其抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 肿瘤干细胞 粉防己碱 细胞增殖 CD133 OCT-4 NESTIN Wnt/β-catenin信号通路 苄异喹啉类 组织工程
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不同厚度神经球冰冻切片免疫荧光细胞化学染色结果的比较
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作者 马雪霞 汪兆艳 +2 位作者 王倩 杨印祥 栾佐 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期495-498,共4页
目的探索适合免疫荧光细胞化学染色的神经球最佳冰冻切片厚度。方法选取悬浮培养10~12 d的神经球,制作厚度分别为4、7、10μm的冰冻切片。采用免疫荧光细胞化学染色比较神经球神经上皮干细胞蛋白(nestin)的表达和定位。结果培养10~1... 目的探索适合免疫荧光细胞化学染色的神经球最佳冰冻切片厚度。方法选取悬浮培养10~12 d的神经球,制作厚度分别为4、7、10μm的冰冻切片。采用免疫荧光细胞化学染色比较神经球神经上皮干细胞蛋白(nestin)的表达和定位。结果培养10~12 d的神经球直径为200~250μm,状态良好,折光性强,呈圆球状,周边有毛刺。4μm的神经球冰冻切片制作较难,容易卷片,但细胞层次清楚,染色均匀,密疏适宜,可较清楚计数细胞。成像清楚。胞核清晰,可见较多nestin染色阳性的完整胞质包绕4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色阳性的胞核,能观察更多的细胞间细节。7μm切片较4μm切片制作容易,切片较平整,细胞层次不如4μm切片清楚,染色较均匀。所含细胞数较4μm多,可粗略计算细胞数。荧光拍照不能完全对焦,可见部分完整细胞形态。10μm的冰冻切片制作相对容易,切片平整,但细胞层次不清楚,堆叠严重,成像不清楚,难以看到完整细胞形态。结论 4μm厚度的神经球冰冻切片较适合进行免疫荧光细胞化学染色和分析。 展开更多
关键词 神经球 冰冻切片 厚度 悬浮培养 神经上皮干细胞蛋白(nestin)
胶质瘤干细胞标记物的研究进展
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作者 陈石蕊 杨柳 +3 位作者 倪晓琛 王钟 汤臻 李燕 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第15期2992-2996,共5页
胶质瘤作为一种恶性脑肿瘤,具有预后差、易复发、对放化疗有抵抗性等特点。为了提高对胶质瘤的分级及预后评价的准确性,获得有效的、有针对性的胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)标记物具有十分重要的意义。本文主要对CD133、SSEA-1... 胶质瘤作为一种恶性脑肿瘤,具有预后差、易复发、对放化疗有抵抗性等特点。为了提高对胶质瘤的分级及预后评价的准确性,获得有效的、有针对性的胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)标记物具有十分重要的意义。本文主要对CD133、SSEA-1、Nestin等干细胞标记物在胶质瘤临床诊治中的应用特征与相互联系进行了综述。CD133作为一种最早发现的胶质瘤干细胞标志物应用广泛,但其分布无特异性、表达不稳定限制了其预后评价的精确性,其有效性目前仍存在争议。SSEA-1(CD15)与Nestin等分子弥补了CD133的部分不足。这三种标记物的联合应用为胶质瘤的临床诊断和治疗提供了重要的参考依据。后续研究陆续发现的A2B5、BMI1、LGR5等标记物有助于进一步了解GSC的性质,提高胶质瘤的诊治水平和预后评价的准确度。 展开更多
关键词 胶质瘤干细胞(GSC) CD133 SSEA-1(CD15) NESTIN
Bmi-1在皮肤黑素瘤中的表达及其与Nestin的相关性分析
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作者 王攀 付桂莉 +2 位作者 郑源泉 卢静静 曾同祥 《中国皮肤性病学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期123-128,共6页
目的 探讨干细胞更新因子Bmi-1、干细胞表面标志物巢蛋白Nestin在皮肤黑素瘤中表达的临床与病理意义。方法 收集武汉市妇女儿童医疗保健中心、荆州市中心医院 2010-2015年40例经手术切除经组织病理加免疫组化诊断为黑素瘤的石蜡包埋切... 目的 探讨干细胞更新因子Bmi-1、干细胞表面标志物巢蛋白Nestin在皮肤黑素瘤中表达的临床与病理意义。方法 收集武汉市妇女儿童医疗保健中心、荆州市中心医院 2010-2015年40例经手术切除经组织病理加免疫组化诊断为黑素瘤的石蜡包埋切片为研究对象(实验组),选择40例组织病理诊断为良性色素痣标本作为阴性对照(对照组)。SP免疫组化法分别检测实验组与对照组Bmi-1、Nestin的表达与患者性别、年龄、发病部位、肿块大小、病理分级、临床分期等因素是否具有差异; 并对Bmi-1及Nestin行相关性统计分析。结果 黑素瘤组中Bmi-1、Nestin高表达,且Bmi-1、Nestin的高表达与肿瘤大小、病理分级、临床分期密切相关; Bmi-1与Nestin的表达呈正相关。结论 Bmi-1和Nestin在肿瘤的发生、发展中可能存在相关性,可能是一个新的皮肤黑素瘤辅助诊断组织学标记。 展开更多
关键词 皮肤黑素瘤 BMI-1 NESTIN
ZEB1及Nestin在高级别胶质瘤初治及配对复发标本中的表达及临床意义 预览
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作者 林才厚 陈建屏 +3 位作者 王春华 郑水顺 祁小龙 石松生 《福建医科大学学报》 2018年第6期359-363,共5页
目的研究ZEB1及Nestin在高级别胶质瘤初治标本及配对复发标本中的表达,并探讨其与无进展生存期(PFS)的关系。方法回顾性分析39例接受手术全切及规范化放化疗的高级别胶质瘤术后患者的临床资料,39例均为复发且再次手术病例。免疫组织化... 目的研究ZEB1及Nestin在高级别胶质瘤初治标本及配对复发标本中的表达,并探讨其与无进展生存期(PFS)的关系。方法回顾性分析39例接受手术全切及规范化放化疗的高级别胶质瘤术后患者的临床资料,39例均为复发且再次手术病例。免疫组织化学检测初治及复发标本中ZEB1及Nestin的表达水平,用平均光密度代表其表达水平,并通过Spearman法分析初治标本中两个标记物表达的相关性。根据平均光密度将39例患者分为高表达组和低表达组,并通过Kaplan-Meier单因素分析法及Cox比例风险模型多因素分析法,研究初治标本中ZEB1及Nestin表达与患者PFS的关系。结果ZEB1及Nestin在高级别胶质瘤复发标本表达的平均光密度明显高于初治标本[(0.703±0.176)vs(0.609±0.133),P<0.01;(0.375±0.096 6)vs(0.333±0.071 0),P=0.014],初治标本中ZEB1表达与Nestin表达呈正相关。单因素分析显示,年龄、卫星灶、坏死、ZEB1表达及Nestin表达与规范化治疗后高级别胶质瘤的PFS有相关性;多因素分析显示,ZEB1表达为影响高级别胶质瘤的独立因素(95%CI:3.016~19.194,P<0.001)。结论高级别胶质瘤细胞中ZEB1及Nestin的表达,复发者较初治者明显增高,这可能是复发者对治疗更加耐受且更具有侵袭性的重要原因之一。初治标本中,ZEB1可用于评估高级别胶质瘤规范化治疗后的PFS。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 ZEB1 NESTIN 免疫组织化学 无进展生存期
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视网膜神经节细胞无血清上清培养液诱导大鼠视网膜干细胞的分化 预览
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作者 戴敏 张青 +1 位作者 郑志坤 沈蔚 《眼科新进展》 北大核心 2018年第1期35-38,共4页
目的 探讨视网膜神经节细胞无血清上清培养液对视网膜干细胞分化的影响。方法 分离大鼠视网膜干细胞和视网膜神经节细胞;采用免疫荧光法鉴定体外培养的大鼠视网膜干细胞与视网膜神经节细胞,视网膜干细胞以Nestin抗体进行鉴定,视网膜... 目的 探讨视网膜神经节细胞无血清上清培养液对视网膜干细胞分化的影响。方法 分离大鼠视网膜干细胞和视网膜神经节细胞;采用免疫荧光法鉴定体外培养的大鼠视网膜干细胞与视网膜神经节细胞,视网膜干细胞以Nestin抗体进行鉴定,视网膜神经节细胞以Thy-1抗体进行鉴定;以视网膜神经节细胞无血清上清培养液培养视网膜干细胞,以不加入条件培养液培养的视网膜干细胞为对照组,收集分化细胞,采用qPCR法检测Nestin、Pax6、Thy-1及Brn-3的基因表达。结果 培养的视网膜干细胞Nestin抗体染色阳性,视网膜神经节细胞Thy-1抗体染色阳性。培养视网膜干细胞72 h后,与对照组相比,无血清上清培养液组细胞Nestin和PAX6基因相对表达量降低,差异均有统计学意义(均为P〈0.000 1);Thy-1和Brn-3基因相对表达量升高,差异均有统计学意义(均为P〈0.05)。结论 视网膜神经节细胞无血清上清培养液能够诱导视网膜干细胞分化为视网膜神经节样细胞。 展开更多
关键词 视网膜干细胞 视网膜神经节细胞 视网膜神经节细胞无血清上清培养液 NESTIN THY-1
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化瘀通络灸对血管性痴呆大鼠延迟回忆及海马神经新生的影响
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作者 樊吟秋 崔竟成 +1 位作者 杨骏 王频 《针刺研究》 CSCD 北大核心 2018年第3期133-139,共7页
目的:观察化瘀通络灸对血管性痴呆(VD)大鼠神经干细胞(NSCs)、内皮祖细胞(EPCs)移植后延迟回忆及海马巢蛋白(Nestin)、双皮质素(DCX)表达的影响,并探索其与脑内神经新生的关系。方法:Wistar大鼠采用Morris水迷宫筛选后随机... 目的:观察化瘀通络灸对血管性痴呆(VD)大鼠神经干细胞(NSCs)、内皮祖细胞(EPCs)移植后延迟回忆及海马巢蛋白(Nestin)、双皮质素(DCX)表达的影响,并探索其与脑内神经新生的关系。方法:Wistar大鼠采用Morris水迷宫筛选后随机分为假手术组、VD模型组、共植体艾灸组、共植体空白组。采用改良的缺血再灌注后结扎剪断法复制VD模型,NSCs、EPCs细胞培养后进行共植体构建,共植体艾灸组及共植体空白组大鼠于模型鉴定后3d进行共植体右侧侧脑室移植。共植体艾灸组于移植后3d进行化瘀通络灸治疗,取“百会”“大椎”“神庭”悬灸20min,每天1次,7次为1个疗程,共3个疗程,每疗程结束后休息1d。运用Morris水迷宫测试各组大鼠延迟回忆成绩,免疫荧光双标激光共聚焦检测大鼠右侧海马Nestin、DCX的表达。结果:Morris水迷宫结果显示,治疗前VD模型组、共植体空白组、共植体艾灸组逃避潜伏期均较假手术组延长,120s内穿越原平台次数减少(P〈0.008)。治疗后除VD模型组大鼠逃避潜伏期较治疗前无明显变化外(P〉0.05),假手术组、共植体艾灸组、共植体空白组大鼠逃避潜伏期均较治疗前缩短(P〈0.05);且共植体艾灸组大鼠120s内穿越原平台次数较治疗前增多(P〈0.05)。与假手术组相比,造模后大鼠逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少(P〈0.008);共植体艾灸组大鼠逃避潜伏期较VD模型组缩短,穿越原平台次数较VD模型组增多(P〈0.008);与共植体空白组相比,共植体艾灸组逃避潜伏期缩短(P〈0.008)。免疫荧光结果显示,共植体艾灸组治疗1、3个疗程后海马区Nestin的阳性表达多于共植体空白组(P〈0.05);Nestin、DCX分别在治疗1、2个疗程后表达最多(P〈0.05)。结论:化瘀通络灸可提高VD大鼠NSCs、EPCs移植后的延迟回忆,并通过上调海马区Nestin、DCX的表达,促进脑� 展开更多
关键词 艾灸 血管性痴呆 海马 延迟回忆 巢蛋白 双皮质素
Glycosylation of dentin matrix protein 1 is a novel key element for astrocyte maturation and BBB integrity
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作者 Bo Jing Chunxue Zhang +10 位作者 Xianjun Liu Liqiang Zhou Jiping Liu Yinan Yao Juehua Yu Yuteng Weng Min Pan Jie Liu Zuolin Wang Yao Sun Yi Eve Sun 《蛋白质与细胞:英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第3期298-309,共12页
血大脑障碍(BBB ) 是在 endothelial 房间和星形细胞之间形成的一条紧密的边界,它在循环把大脑与大多数病原体以及神经毒素分开并且保护。然而,详细说明了涉及 BBB 的形成的分子的播放器完全不被知道。牙质矩阵蛋白质 1 (DMP1 )-prote... 血大脑障碍(BBB ) 是在 endothelial 房间和星形细胞之间形成的一条紧密的边界,它在循环把大脑与大多数病原体以及神经毒素分开并且保护。然而,详细说明了涉及 BBB 的形成的分子的播放器完全不被知道。牙质矩阵蛋白质 1 (DMP1 )-proteoglycan (PG ) 被知道涉及骨头和牙质的矿化作用,也与未知功能包括大脑在软纸巾被表示。在现在的学习,我们报导 DMP1-PG 在大脑星形细胞被表示并且在 BBB 充实单位。DMP1 的唯一的 glycosylation 地点在在鼠标的蛋白质的 N 终端域是 serine89 (S89 ) 。有 DMP1 的变异的老鼠削尖把 S89 改变到 glycine (S89G ) 的变化,它蛋白质的完全根除的 glycosylation,表明的严重 BBB 混乱。DMP1 变异的鼠标的另一个品种,缺乏 DMP1 的 C 终端域,表明了正常 BBB 功能。S89G-DMP1 星形细胞的极性被破坏,房间房间粘附被松开。通过一组分析,我们发现 DMP1 glycosylation 极其在 vitro 并且在 vivo 为星形细胞成熟被要求。S89G-DMP1 变异的星形细胞没能表示 aquaporin 4 并且减少了 laminin 和 ZO1 表示,它导致了 BBB 的混乱。有趣地,在 nestin 倡导者驾驶的老鼠大脑的野类型的 DMP1-PG 的 overexpression 在野类型层次以外提高了 laminin 和 ZO1 表示并且能有效地抵抗的静脉内的导致甘露糖醇的 BBB 可逆的洞。一起拿,我们的学习不仅揭示了一个新奇元素,即, DMP1-PG,调整了 BBB 形成,而且把新功能分到 DMP1-PG。 展开更多
关键词 星形细胞 蛋白质 矩阵 成熟 元素 NESTIN 神经毒素 矿化作用
Increased Efficacy of Antivenom Combined with Hyperbaric Oxygen on Deinagkistrodon acutus Envenomation in Adult Rats
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作者 Mo Li Zhi-Hui Xie +1 位作者 An-Yong Yu Dong-Po He 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第3期323-329,共7页
关键词 高比重 SPRAGUE-DAWLEY 老鼠 功效 成年 LD50 蛇咬伤
氧糖剥夺-再灌注星型胶质细胞内皮素-1过表达对神经干/祖细胞增殖的影响 预览
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作者 程骁 杨家杰 钟金淑子 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期116-121,共6页
目的探讨氧糖剥夺-再灌注(OGD-R)星型胶质细胞内皮素(ET)-1过表达对神经干/祖细胞(NSPCs)增殖的影响。方法构建阴性对照星型胶质细胞(C6-Mock)和ET-1过表达的星形胶质细胞(C6-ET-1)OGD-R模型,并构建星型胶质细胞与NSPCs Trans... 目的探讨氧糖剥夺-再灌注(OGD-R)星型胶质细胞内皮素(ET)-1过表达对神经干/祖细胞(NSPCs)增殖的影响。方法构建阴性对照星型胶质细胞(C6-Mock)和ET-1过表达的星形胶质细胞(C6-ET-1)OGD-R模型,并构建星型胶质细胞与NSPCs Transwell共培养体系。对星型胶质细胞及原代NSPCs进行形态观察及鉴定;将细胞分为以下4组进行共培养:C6-Mock+NSPCs组,OGD-R+C6-Mock+NSPCs组,C6-ET-1+NSPCs组,OGD-R+C6-ET-1+NSPCs组,共培养0、24、48、72 h,分析各组NSPCs神经球直径。结果 C6-Mock及C6-ET-1均呈现Ⅰ型星型胶质细胞的纤维状形态,神经胶质酸性纤维蛋白(GFAP)表达于这两种细胞的胞质中。原代NSPCs的巢蛋白(nestin)染色阳性。共培养后的48 h及72 h,OGD-R+C6-Mock+NSPCs组神经球的直径明显大于C6-Mock+NSPCs组的直径,OGD-R+C6-ET-1+NSPCs组神经球的直径明显大于C6-ET-1+NSPCs组的直径,同时OGD-R+C6-ET-1+NSPCs组神经球的直径明显大于OGD-R+C6-Mock+NSPCs组的直径,差异均有统计学意义(均为P〈0.05)。结论 OGD-R星型胶质细胞促进NSPCs的增殖,且ET-1过表达进一步促进了NSPCs的增殖。 展开更多
关键词 星型胶质细胞 神经干/祖细胞(NSPCs) 内皮素(ET)-1 氧糖剥夺-再灌注(OGD-R) 巢蛋白 增殖 Transwell共培养 神经球直径
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脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖与Bcl-2的相关性研究 预览
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作者 董龙家 丁家秀 +2 位作者 史学形 谭伟 李青 《贵州医药》 CAS 2018年第3期259-262,共4页
目的 探讨脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖与抗凋亡因子Bcl-2基因表达的相关性。方法 成年健康Wistar大鼠30只,随机分为假手术组(sham组)和脊髓损伤组(SCI组),采用动脉瘤夹压迫法建立脊髓损伤模型,根据BBB评分标准评价运动功能结果... 目的 探讨脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖与抗凋亡因子Bcl-2基因表达的相关性。方法 成年健康Wistar大鼠30只,随机分为假手术组(sham组)和脊髓损伤组(SCI组),采用动脉瘤夹压迫法建立脊髓损伤模型,根据BBB评分标准评价运动功能结果。脊髓损伤组分别在术后1d、3d、7d、14d、21d不同时期,选取脊髓损伤组织切片并将其分组,分别行Nestin、Bcl-2免疫组化染色,统计分析脊髓损伤后不同时期损伤脊髓组织中Nestin及Bcl-2的表达情况,然后对Nestin及Bcl-2表达情况进行相关性分析。结果 30只实验Wistar大鼠均进入结果分析,sham组中有极少量Nestin的表达;SCI组在损伤后第1天见Nestin表达量较少,第3天时开始逐渐增加,第7天后能够见到Nestin表达量基本达到峰值,主要位于室管膜周围及灰质中,第14天时表达逐渐减少,第21天后Nestin阳性表达明显减少。SCI后各组均可见Bcl-2阳性表达的细胞,1d时表达就比较明显,脊髓灰、白质均有分布,3d时表达阳性细胞达到高峰,7d时阳性细胞开始减少,在损伤后14d、21d处于较低水平。统计学分析大鼠脊髓损伤后Nestin、Bcl-2阳性细胞表达数量,两者的表达具有正相关性。结论大鼠脊髓损伤后的一段时间内Bcl-2、内源性干细胞均有表达,并且Bcl-2的增殖可能促进内源性干细胞的反应性增殖。 展开更多
关键词 脊髓损伤 内源性神经干细胞 巢蛋白 细胞凋亡
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Nestin表达及高危型HPV感染与宫颈病变相关性的研究 预览
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作者 王小敏 王小燕 +2 位作者 朱春萍 冯春宇 余志英 《赣南医学院学报》 2018年第10期1002-1005,1029共5页
目的: 研究不同宫颈病变中巢蛋白(Nestin) 的表达与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染的关系及临床意义。 方法: 选取2015年5月-2017年12月宫颈病变患者300例,以病理诊断为金标准,分为慢性宫颈炎45例,CINⅠ74例,CINⅡ65例,CIN... 目的: 研究不同宫颈病变中巢蛋白(Nestin) 的表达与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染的关系及临床意义。 方法: 选取2015年5月-2017年12月宫颈病变患者300例,以病理诊断为金标准,分为慢性宫颈炎45例,CINⅠ74例,CINⅡ65例,CINⅢ68例,宫颈癌48例,采用PCR-反向点杂交法检测HPV基因型别, 同时对其中150例(20例慢性宫颈炎,25例CINⅠ, 27例CINⅡ,30例CINⅢ,宫颈癌48例)用免疫组化法检测Nestin蛋白表达情况,分析Nestin蛋白表达与HR-HPV之间的关系及其与宫颈病变的相关性。 结果: ①慢性宫颈炎组HR-HPV阳性率33.33%,明显低于CINⅠ71.62%、CINⅡ80.00%、CINⅢ92.65%、宫颈癌95.83%,差异有统计学意义( P <0.01)。HR-HPV阳性率随着慢性宫颈炎、CINⅠ-Ⅱ、CINⅢ宫颈癌的病理组织学诊断升级而升高,差异有统计学意义( P 〈0.05)。②Nestin蛋白阳性表达率在慢性宫颈炎、CINⅠ-Ⅲ及宫颈癌各组分别为25.00%、28.00%、51.85%、63.33%%及83.33%,呈逐渐升高趋势,差异有统计学意义( P <0.01)。③除慢性宫颈炎组外,CINⅠ-Ⅲ及宫颈癌各组Nestin表达与HR-HPV感染具有相关性( P 〈0.05)。 结论: 宫颈癌及癌前病变中Nestin表达及HR-HPV感染具有相关性,提示两者联合检测对评估宫颈病变预后及早期防治宫颈癌具有重要意义。 展开更多
关键词 巢蛋白 人乳头瘤病毒 宫颈炎 宫颈上皮内瘤变 宫颈癌
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促红细胞生成素在缺氧缺血性脑病大鼠模型中的神经保护作用 预览 被引量:3
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作者 段淼 曹云涛 王旭芹 《中国比较医学杂志》 北大核心 2018年第1期28-32,共5页
目的制作新生大鼠缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)模型,研究重组人促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的脑保护作用和新生大鼠HIE肠道菌群多样性的变化,为临床应用EPO治疗新生儿缺氧缺血性脑病提供实验依据... 目的制作新生大鼠缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)模型,研究重组人促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的脑保护作用和新生大鼠HIE肠道菌群多样性的变化,为临床应用EPO治疗新生儿缺氧缺血性脑病提供实验依据。方法选择7日龄SD大鼠制作HIE模型,随机分为HIE模型组、EPO实验组、对照组,免疫组织化学法观察巢蛋白(nestin)的表达变化,同时取各组大鼠粪便,用16s rRNA测序的方法观察肠道菌群的变化。结果各组大鼠同一时间点nestin的表达水平差异有显著性(P〈0.05),对照组最低,EPO实验组最高,HIE模型组其次。HIE模型组的香农-威纳指数(Shannon-Wiener index)较对照组呈降低趋势。结论外源性给予EPO可以促进HIE新生大鼠模型的神经细胞生长,具有一定的保护作用,同时大鼠的肠道菌群多样性有所改变。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑病 大鼠 促红细胞生成素 巢蛋白 肠道菌群
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神经干细胞提取与培养方法的比较研究 预览
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作者 吴增 李媛 +2 位作者 靳晓飞 周晓红 高维娟 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2018年第5期729-734,共6页
目的探讨神经干细胞(neural stem cells,NSCs)提取、培养的最佳方法,为NSCs的基础研究提供技术参考。方法对NSCs的不同提取、培养方法进行比较:提取胎鼠与乳鼠的大脑皮质、采用不同类型培养基、不同接种密度、不同培养方法、不同换液方... 目的探讨神经干细胞(neural stem cells,NSCs)提取、培养的最佳方法,为NSCs的基础研究提供技术参考。方法对NSCs的不同提取、培养方法进行比较:提取胎鼠与乳鼠的大脑皮质、采用不同类型培养基、不同接种密度、不同培养方法、不同换液方法、不同传代方法,观察NSCs的成球率和NSCs未分化状态的稳定性。用多功能微孔板读数仪检测NSCs活性。结果①胎龄14d胎鼠较新生24h内乳鼠的大脑皮质提取NSCs的比例高,杂细胞少,形成的神经球数量多。②采用无血清培养基,NSCs可以稳定在未分化状态;而采用含血清培养基,NSCs多数分化为神经元和胶质细胞。③以1.0×109·L-1密度接种的NSCs,培养形成的神经球数量多,且状态良好。④悬浮培养法较贴壁培养法,可以形成稳定的神经球,有利于保持NSCs处于未分化的状态。⑤半量换液法和只加液不弃液法培养形成的神经球的状态优于全量换液法。⑥原代和1代的神经球用机械吹打法传代后,NSCs的活细胞比例高,再次形成的神经球状态好,且较其他两种方法简便;2代及以后的神经球用Accutase酶传代后,NSCs的活细胞比例高,再次形成的神经球状态好。⑦14d胎鼠Accutase酶消化组的NSCs活性高于另外3组,差异均具有显著性(P<0.05)。结论提取胎龄14d胎鼠的大脑皮质,采用无血清培养基,以1.0×109·L-1的密度接种于25cm2培养瓶,采取悬浮培养法,每2~3d加液1~1.5mL,每6~7d传代1次,所得到的NSCs增殖分裂旺盛,成球率高,神经球状态良好,可以保持稳定的未分化状态。 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞提取 悬浮培养法:无血清培养基 细胞活性 巢蛋白
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巢蛋白在人胚胎肾中的表达与分布
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作者 董丽萍 伍赶球 《长沙医学院学报》 2018年第2期20-22,共3页
目的:通过研究不同时期人胚胎肾中巢蛋白的表达,探讨巢蛋白在肾发育过程中的作用。方法:取12例3~8个月人胚胎肾组织,常规石蜡切片,采用免疫组织化学法检测巢蛋白在胚胎肾中的表达及分布。结果:3~8个月人胚胎肾组织均有巢蛋白的表达。巢... 目的:通过研究不同时期人胚胎肾中巢蛋白的表达,探讨巢蛋白在肾发育过程中的作用。方法:取12例3~8个月人胚胎肾组织,常规石蜡切片,采用免疫组织化学法检测巢蛋白在胚胎肾中的表达及分布。结果:3~8个月人胚胎肾组织均有巢蛋白的表达。巢蛋白阳性细胞主要分布于肾小球、肾小囊壁层和肾间质内的微血管及毛细血管壁上,且其表达量随胎龄的增加而减少,而在近端小管、远端小管的上皮中未发现阳性细胞。结论:正常人胚肾中有巢蛋白的表达,随着胎龄的增加,巢蛋白表达量下降,提示巢蛋白可能参与胚胎肾的发育。 展开更多
关键词 胚胎 巢蛋白 免疫组织化学
甘草苷对小鼠胚胎脑神经干细胞增殖的影响 预览
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作者 李社芳 苗灵娟 +3 位作者 李宁 梁鹤 任德启 郭健 《中国组织工程研究》 北大核心 2017年第21期3332-3337,共6页
背景:甘草苷对神经细胞有保护和营养作用,但甘草苷对小鼠胚胎脑神经干细胞增殖的影响尚未见报道。目的:研究不同质量浓度甘草苷对小鼠胚胎脑神经干细胞增殖的影响。方法:从孕14 d昆明白小鼠胚胎脑组织中分离出神经干细胞并培养,采用... 背景:甘草苷对神经细胞有保护和营养作用,但甘草苷对小鼠胚胎脑神经干细胞增殖的影响尚未见报道。目的:研究不同质量浓度甘草苷对小鼠胚胎脑神经干细胞增殖的影响。方法:从孕14 d昆明白小鼠胚胎脑组织中分离出神经干细胞并培养,采用免疫细胞化学方法鉴定神经干细胞,利用qR T-PCR检测神经干细胞特异性基因表达,MTT法绘制神经干细胞生长曲线。取生长旺盛的神经干细胞,分别以0(对照),1,2,4,8 g/L的甘草苷干预,干预48 h后,MTT法检测细胞增殖。结果与结论:(1)培养第5天时,所有单个的神经干细胞全部聚集成球,随着时间的延长,细胞球体积越来越大,细胞球融合成更大的细胞团;(2)免疫细胞化学鉴定显示,100%的神经干细胞球呈巢蛋白阳性表达;(3)qR T-PCR检测显示,神经干细胞巢蛋白阳性表达较强,不表达神经元特异性烯醇化酶及胶质纤维酸性蛋白;(4)神经干细胞刚开始生长缓慢,处于生长缓慢期,第二三天起,细胞增殖迅速,进入指数生长期;第4天后,细胞增殖逐步减缓,细胞整体进入生长平台期;(5)2,4,8 g/L甘草苷组细胞增殖明显高于对照组(P〈0.05),并且随着甘草苷质量浓度的升高,神经干细胞增殖速度逐渐升高;(6)结果表明,2-8 g/L甘草苷能促进小鼠胚胎脑神经干细胞的增殖。 展开更多
关键词 神经干细胞 中草药 细胞增殖 组织工程 干细胞 胚胎干细胞 胚胎脑神经干细胞 神经系统 甘草苷 神经保护 NESTIN 增殖
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