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Homer蛋白在钙通道调控中作用研究进展
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作者 罗萍 景伟 +1 位作者 朱满 涂建成 《中华实用诊断与治疗杂志》 2016年第11期1044-1046,共3页
Homer蛋白是一种支架蛋白,包括Homerl、Homer2和Homer33种受体蛋白及其剪接体。Homer蛋白参与调节一系列Ca^2+调控蛋白,包括代谢性谷氨酸受体、三磷酸肌醇受体、瞬时受体电位通道、兰尼碱受体、基质相互作用分子1及Orial。Homer蛋白... Homer蛋白是一种支架蛋白,包括Homerl、Homer2和Homer33种受体蛋白及其剪接体。Homer蛋白参与调节一系列Ca^2+调控蛋白,包括代谢性谷氨酸受体、三磷酸肌醇受体、瞬时受体电位通道、兰尼碱受体、基质相互作用分子1及Orial。Homer蛋白调控细胞内多种钙通道的开关。Ca^2+作为细胞内主要信使,参与多种细胞和组织生理活动,包括细胞吞噬、凋亡及基因调节,而细胞内Ca^2+稳态的维持需多种钙通道参与,阐明Homer对细胞内钙通道调控的作用有一定意义。本文就Homer蛋白在钙通道调控中作用的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 Homer蛋白 CA^2+ 瞬时受体电位通道 代谢性谷氨酸受体 兰尼碱受体 Orai1 基质相互作用分子1
小鼠PICK1与Orai1蛋白质间的相互作用研究
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作者 蔡佩玲 程丽佳 王婷 《四川大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期689-696,共8页
从小鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增PICK1及Orai1的CDS序列,构建原核表达载体GST-PICK1及真核表达载体myc-Orai1,重组质粒经SalⅠ和NotⅠ双酶切鉴定后测序.正确的质粒myc-Orai1在HEK293细胞中表达收获过表达蛋白,GST-PICK1进行原核表... 从小鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增PICK1及Orai1的CDS序列,构建原核表达载体GST-PICK1及真核表达载体myc-Orai1,重组质粒经SalⅠ和NotⅠ双酶切鉴定后测序.正确的质粒myc-Orai1在HEK293细胞中表达收获过表达蛋白,GST-PICK1进行原核表达并获得融合蛋白.将纯化后的GST-PICK1蛋白条带切下,进行蛋白质液相质谱分析.后将myc-Orai1蛋白与GST-PICK1蛋白混合,进行GST-pulldown实验,western-blot检测到myc-Orai1的条带.结果表明PICK1与Orai1在体外有相互作用. 展开更多
关键词 PICK1 Orai1 GST-Pulldown 相互作用
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stim1和orai1蛋白在哮喘大鼠支气管平滑肌中的表达 预览
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作者 王丽 丁圣刚 +1 位作者 李忠强 王亚亭 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第4期430-433,共4页
目的研究基质交感分子1(stim1)和钙离子释放激活钙离子通道蛋白1(orai1)在哮喘气道平滑肌细胞中表达水平的变化。方法选取40只清洁级SD大鼠随机分为对照组和哮喘组,其中哮喘组用鸡卵清蛋白(OVA)激发制备大鼠哮喘模型(n=20),... 目的研究基质交感分子1(stim1)和钙离子释放激活钙离子通道蛋白1(orai1)在哮喘气道平滑肌细胞中表达水平的变化。方法选取40只清洁级SD大鼠随机分为对照组和哮喘组,其中哮喘组用鸡卵清蛋白(OVA)激发制备大鼠哮喘模型(n=20),对照组用生理盐水代替(n=20)。肺组织病理切片HE染色判断哮喘模型是否建立成功,分析支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数及分类计数,应用免疫组化技术及彩色病理图文分析系统测定stim1和orai1蛋白阳性细胞平均光密度值。结果肺组织病理切片HE染色镜下观察呈现大量炎细胞浸润,支气管黏膜肿胀,支气管腔内可见黏液栓等,证实哮喘模型建立成功。哮喘组中大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞计数明显高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.01)。哮喘组大鼠支气管平滑肌表达orai1蛋白阳性细胞平均光密度值明显高于对照组(P〈0.05)。哮喘组和对照组大鼠支气管平滑肌表达stim1蛋白阳性细胞的平均光密度值无明显差异(P〉0.05)。结论orai1蛋白在哮喘大鼠气道平滑肌细胞中表达变化较stim1蛋白明显,对支气管平滑肌调节作用可能更重要。 展开更多
关键词 基质交感分子1 orai1蛋白 哮喘 平滑肌细胞
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血管疾病治疗新靶标:STIM1和Orai1 被引量:3
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作者 赵慧 何芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期179-182,187共5页
钙离子(Ca^2+)是常见的第二信使,不同于其它第二信使,其主要位于细胞外或存储于内质网(endoplasmicreticulum,ER)等细胞器内。静息状态下细胞内游离Ca^2+浓度(intracellular Ca^2+ concentra.tion,[Ca^2+]i)约为细胞外的... 钙离子(Ca^2+)是常见的第二信使,不同于其它第二信使,其主要位于细胞外或存储于内质网(endoplasmicreticulum,ER)等细胞器内。静息状态下细胞内游离Ca^2+浓度(intracellular Ca^2+ concentra.tion,[Ca^2+]i)约为细胞外的1/20000,受体激活或生物信号刺激可通过改变[Ca^2+]i进一步发挥生物放大效应。[Ca^2+]; 展开更多
关键词 钙通道 基质相互作用分子1 Orai1 血管疾病 钙库操纵钙通道
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STIM1/Orai1可能是防治缺血性脑血管病的新靶点
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作者 朱余友 李淮玉 《国际脑血管病杂志》 北大核心 2012年第5期 368-371,共4页
近年来,通过RNA干扰技术在果蝇细胞中鉴定出钙离子释放激活钙通道(Ca^2+ release—activated calcium channel,CRAC)的2种重要组成蛋白,即位于内质网上的Ca^2+感受器问质相互作用分子1(stromal interaction molecule1,STIMl)... 近年来,通过RNA干扰技术在果蝇细胞中鉴定出钙离子释放激活钙通道(Ca^2+ release—activated calcium channel,CRAC)的2种重要组成蛋白,即位于内质网上的Ca^2+感受器问质相互作用分子1(stromal interaction molecule1,STIMl)和位于细胞膜上的CRAC通道蛋白0rail。研究表明,STIM1和Orai1对血管平滑肌细胞、血小板、血管内皮细胞等多种细胞均有调控作用,在血管平滑肌细胞表型转化、止血、血栓形成、新生血管发生等方面发挥着重要作用,显示两者可能与缺血性脑血管病密切相关。文章就STIM1和Orai1蛋白在缺血性脑血管病方面的研究进展进行了综述,以探讨STIM1和Orai1作为防治缺血性脑血管病的新靶点的可能性。 展开更多
关键词 STIM1蛋白 OR.AI1蛋白 脑缺血 血管平滑肌细胞 血栓形成 血管生成
钙释放激活钙通道研究进展 被引量:4
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作者 高尚邦 李臣鸿 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第2期350-354,共5页
库操纵的钙(Store Operated Calcium,SOC)进入参与许多重要Ca^2+信号生理过程,如细胞分化和凋亡。虽然SOC的许多生物物理特性被表述,但研究最清楚的是钙释放激活的钙(Ca^2+ release-activated Ca^2+,CRAC)通道。最近通过RNA... 库操纵的钙(Store Operated Calcium,SOC)进入参与许多重要Ca^2+信号生理过程,如细胞分化和凋亡。虽然SOC的许多生物物理特性被表述,但研究最清楚的是钙释放激活的钙(Ca^2+ release-activated Ca^2+,CRAC)通道。最近通过RNA干扰技术在果蝇和哺乳动物细胞上鉴定出CRAC通道的两个组成蛋白STIM1和Orail细胞静息时,STIM1均匀分布在内质网膜(ER)上。一当钙库耗竭,ER上STIM1会聚集迁移到细胞膜下。相比而言,Orail是一个形成CRAC通道孔的四次跨膜蛋白。有报道说STIM1作为ER上一个Ca^2+感受器向细胞膜传导钙库耗竭信号。虽然钙库耗竭激活CRAC通道的过程在最近的研究中被定量描述为四个步骤,但还有很多细节仍然不清楚。如STIM1是如何感受钙库耗竭而导致其发生聚集的不清楚,又如STIM1是如何定位到细胞膜下又如何传导信息的不清楚,STIM1和Orail直接到底是如何相互作用的等都有待进一步的研究。本文对CRAC通道的研究历史和最新进展进行了讨论。 展开更多
关键词 钙释放激活钙通道 STIMl Orail 库操纵钙通道
利用酵母双杂交研究与Ca^2+CRAC通道Orail相互作用蛋白 预览
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作者 夏孝强 李芳华 +2 位作者 季一飞 余守洋 田军龙 《华西医学》 CAS 2008年第3期 429-430,共2页
目的:利用酵母双杂交等技术研究与CRAC通道蛋白Orail发生相互作用的蛋白质,从而揭示CRAC通道分子作用机制。方法:以Orail-C端为诱饵蛋白筛选大鼠海马和皮质cDNA文库,寻找能与之相互作用的蛋白质,运用营养缺陷型培养,X-β-Gal蓝斑筛选... 目的:利用酵母双杂交等技术研究与CRAC通道蛋白Orail发生相互作用的蛋白质,从而揭示CRAC通道分子作用机制。方法:以Orail-C端为诱饵蛋白筛选大鼠海马和皮质cDNA文库,寻找能与之相互作用的蛋白质,运用营养缺陷型培养,X-β-Gal蓝斑筛选等实验去除假阳性克隆,并通过GST-Pulldown体外实验验证其相互作用。结果:以Orai1-C端为诱饵最终筛出了几个阳性克隆,经测序分析,发现了其中一个感兴趣的蛋白。结论:Orail可以和该蛋白发生相互作用,其相互作用可能与CRAC通道功能调节有关。 展开更多
关键词 CRAC通道 Orail 酵母双杂交 蛋白相互作用
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钙库调控的钙通道Orai1体外研究方法的建立
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作者 武福云 姚美连 +2 位作者 吴胜英 汪雄 李珊 《中国生物工程杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期41-47,共7页
目的:建立钙通道Orai1的体外研究方法。方法:利用脂质体重组技术,将体外纯化的Orai1蛋白重组到脂质体膜上,利用蔗糖密度梯度离心来检测其重组效率及Orai1蛋白在脂质体膜上的结构,并利用钙染料Fura-2检测脂质体内钙离子的释放。结果:... 目的:建立钙通道Orai1的体外研究方法。方法:利用脂质体重组技术,将体外纯化的Orai1蛋白重组到脂质体膜上,利用蔗糖密度梯度离心来检测其重组效率及Orai1蛋白在脂质体膜上的结构,并利用钙染料Fura-2检测脂质体内钙离子的释放。结果:成功制备了脂质体及体外纯化了GST-Orai1融合蛋白,蔗糖密度梯度离心结果证明GST-Orai1蛋白成功重组到脂质体上,以及Orai1蛋白以多聚体的形式定位在脂质体膜上。钙离子释放实验证明脂质体内钙离子包装完好,可用于后续Orai1钙通道的功能研究。结论:利用脂质体重组技术建立了一种新的Orai1的研究方法,能够更直接有效地研究其功能及其活化机制。 展开更多
关键词 钙通道 Orai1蛋白 体外研究
结肠腺癌中Orai1与STIM1的表达及临床意义 预览
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作者 李艳东 朱琳 +2 位作者 周永莉 周伊 郑建云 《临床与实验病理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1320-1323,共4页
目的 探讨Orai1和STIM1蛋白在结肠腺癌中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化法检测80例结肠腺癌及50例正常结肠黏膜中Orai1和STIM1蛋白的表达。分析两者表达与结肠腺癌临床病理特征及预后的关系。结果 结肠腺癌组织中Orai1和STIM1... 目的 探讨Orai1和STIM1蛋白在结肠腺癌中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化法检测80例结肠腺癌及50例正常结肠黏膜中Orai1和STIM1蛋白的表达。分析两者表达与结肠腺癌临床病理特征及预后的关系。结果 结肠腺癌组织中Orai1和STIM1表达水平均显著高于正常结肠黏膜(P均〈0.05);Orai1和STIM1表达与肿瘤TNM分期及淋巴结转移有关(P〈0.05),与患者性别、年龄、分化程度无关(P〉0.05)。结肠腺癌中Orai1与STIM1蛋白表达呈正相关(P=0.001,rs=0.349)。单因素生存分析显示,Orai1蛋白、STIM1蛋白、TNM分期及淋巴结转移与结肠腺癌患者预后相关(P〈0.05)。结论Orai1和STIM1可能具有协同作用,共同促进结肠癌的发展,有望成为结肠癌诊断、治疗以及判断预后的生物学指标。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 Orai1蛋白 STIM1蛋白 预后
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动脉平滑肌细胞的钙池操纵钙通道对细胞自噬的调节 预览
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作者 齐元麟 陈富华 +3 位作者 任正肖 王情 王丹 张明芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1416-1421,共6页
目的 探讨大鼠动脉平滑肌细胞A7R5上钙池操纵性钙通道(store-operated calcium channel,SOCC)对细胞自噬的影响。方法 在293T细胞中包装含有STIM1、Orai1基因的慢病毒,将获得的慢病毒LV-STIM1、LV-Orai1感染大鼠A7R5细胞,Western blo... 目的 探讨大鼠动脉平滑肌细胞A7R5上钙池操纵性钙通道(store-operated calcium channel,SOCC)对细胞自噬的影响。方法 在293T细胞中包装含有STIM1、Orai1基因的慢病毒,将获得的慢病毒LV-STIM1、LV-Orai1感染大鼠A7R5细胞,Western blot检测感染前后STIM1、Orai1蛋白表达及细胞自噬调节蛋白Beclin-1的表达。慢病毒感染A7R5后饥饿处理6h或雷帕霉素处理24h,Westernblot检测处理后各组自噬相关蛋白LC3的蛋白表达量。结果 重组载体pLV-STIM1、pLV-Orai1经双酶切鉴定正确。在293T成功包装慢病毒LV-STIM1、LV-Orai1。病毒感染A7R5后,与对照组相比,STIM1、Orai1蛋白表达量分别上调96%和163%,而自噬调节蛋白Beclin1下调64%。饥饿或雷帕霉素处理可明显增加细胞自噬水平,体现为自噬标志蛋白LC3-Ⅱ含量增加,而慢病毒感染STIM1、Orai1可明显抑制饥饿或雷帕霉素诱导的细胞自噬。结论 在大鼠动脉平滑肌A7R5细胞过表达钙池操纵钙通道分子STIM1和Orai1可使细胞自噬水平降低。这一分子机制可能与肺动脉高压发病相关。 展开更多
关键词 动脉平滑肌细胞 钙池操纵钙通道 细胞自噬 基质相互作用分子1 钙释放激活钙通道蛋白1 肺动脉高压
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