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环状RNA-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及其机制 预览
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作者 时浩清 訾晓渊 +2 位作者 张春雷 杨琦 孙颖浩 《山东医药》 CAS 2019年第35期1-5,共5页
目的观察环状RNA(circRNA)-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制。方法将PC-3细胞分为观察组和对照组,分别转染circRNA-1565 siRNA(si445)和阴性对照siRNA。两组转染24 h,分别检测其培养0~4 d细胞增殖、克隆形... 目的观察环状RNA(circRNA)-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制。方法将PC-3细胞分为观察组和对照组,分别转染circRNA-1565 siRNA(si445)和阴性对照siRNA。两组转染24 h,分别检测其培养0~4 d细胞增殖、克隆形成、凋亡、侵袭及迁移能力。免疫共沉淀实验筛选与circRNA-1565结合的miRNA分别为miR-21和miR-153,采用双荧光素酶报告基因实验观察circRNA-1565对miR-21和miR-153的调控作用。将PC-3细胞分为si445组、si445+miR-21 inhibitor组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组,分别转染si445、si445+miR-21 inhibitor、si445+miR-153 inhibitor及阴性对照siRNA,并检测细胞侵袭、迁移能力。采用Western blotting法检测si445组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、蜗牛家族转录抑制子1(SNAIL1)蛋白表达。结果观察组与对照组不同时间点细胞增殖OD值、克隆形成个数、细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P均>0.05),观察组进入下室的细胞个数、细胞移动距离均低于对照组(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因结果显示,circRNA-1565可以分别与miR-21及miR-153直接结合。与阴性对照组比较,其余三组进入下室的细胞个数、细胞移动距离均降低,且si445组、si445+miR-21 inhibitor组降低更明显(P均<0.05)。si445组、si445+miR-21 inhibitor组进入下室的细胞个数、细胞移动距离比较P均>0.05。si445组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞PI3K蛋白相对表达量依次升高(P均<0.05),三组细胞PTEN和SNAIL1蛋白相对表达量比较P均>0.05。结论circRNA-1565可促进前列腺癌PC-3细胞侵袭和迁移,其机制可能与竞争性结合miR-153并沉默其下游靶蛋白PI3K表达有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 PC-3细胞 环状RNA-1565 微小RNA-153 磷脂酰肌醇3-激酶
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羟喜树碱对前列腺癌PC-3细胞能量代谢的影响
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作者 赵行宇 侯建成 +3 位作者 侯以森 刘雅范 张晓雨 张巍 《上海中医药杂志》 2019年第4期81-84,共4页
目的研究羟喜树碱对人前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用及能量代谢和关键酶的影响。方法选取PC-3细胞,采用MTT法测定1.0、2.0及5.0μmol/L的羟喜树碱处理该细胞24h后细胞的增殖抑制能力。采用分光光度法测定葡萄糖摄取量及乳酸生成量及ATP... 目的研究羟喜树碱对人前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用及能量代谢和关键酶的影响。方法选取PC-3细胞,采用MTT法测定1.0、2.0及5.0μmol/L的羟喜树碱处理该细胞24h后细胞的增殖抑制能力。采用分光光度法测定葡萄糖摄取量及乳酸生成量及ATP生成相关能量代谢参数。采用Western blot法测定乳酸脱氢酶A(LDHA)和AMP活化蛋白激酶(AMPK)表达。结果1.0、2.0及5.0μmol/L的羟喜树碱可抑制PC-3细胞的增殖并呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01),IC50值为3.24μmol/L。与对照组相比,不同浓度的羟喜树碱可降低葡萄糖摄取,抑制乳酸生成及ATP生成,且均呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01);Western blot结果显示,不同浓度的羟喜树碱可使PC-3细胞中LDHA及AMPK表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论羟喜树碱通过可降低PC-3细胞中LDHA及AMPK表达,抑制肿瘤的有氧酵解并抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 羟喜树碱 PC-3细胞 乳酸脱氢酶A(LDHA) AMP活化蛋白激酶(AMPK)
喜树碱(CPT)诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡及其机制的研究
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作者 赵行宇 赵容 +3 位作者 田丰雨 侯建成 张万生 张巍 《毒理学杂志》 CSCD 2018年第4期264-267,共4页
目的测定不同浓度的喜树碱(CPT)对前列腺癌PC-3细胞的促凋亡作用,并进一步探讨其促凋亡机制。方法人前列腺癌PC-3细胞,加入不同浓度的CPT(10-100μmol/L),继续培养24 h。采用形态学观察及MTT方法检测细胞增殖,流式细胞仪测细胞早期... 目的测定不同浓度的喜树碱(CPT)对前列腺癌PC-3细胞的促凋亡作用,并进一步探讨其促凋亡机制。方法人前列腺癌PC-3细胞,加入不同浓度的CPT(10-100μmol/L),继续培养24 h。采用形态学观察及MTT方法检测细胞增殖,流式细胞仪测细胞早期凋亡率。Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3和PARP的表达。结果形态学观察及MTT试验显示,不同浓度的CPT可导致PC-3细胞形态改变,并对其生长有明显抑制作用,具有剂量依赖性,其IC50为23.25μmol/L;细胞凋亡检测表明不同浓度的CPT可使早期凋亡比率增加。Western blot结果显示,不同浓度CPT可使PC-3细胞Bcl-2蛋白表达降低,而Bax和Cleaved Caspase-3蛋白,89-k Da PRPP蛋白表达增加且呈剂量依赖性。结论 CPT可以诱导PC-3细胞凋亡,其作用机制可能为激活Caspase依赖途径,并活化其作用底物PARP来实现。 展开更多
关键词 CPT 细胞增殖 细胞凋亡 PC-3细胞
补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notchl/Jaggedl信号通路的影响
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作者 古炽明 陈艳芬 +5 位作者 陈志强 翁湘涛 温忠霖 王树声 汤桂兴 詹嫣然 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第17期162-166,共5页
目的:通过体外细胞实验研究补肾抑瘤汤对前列腺癌细胞增殖的干预作用及其机制。方法:首先按照血清药理学方法,给予SD大鼠连续灌胃用药7d,取血制备空白血清和补肾抑瘤汤含药血清;然后以人前列腺癌细胞PC-3为模型研究补肾抑瘤汤含药... 目的:通过体外细胞实验研究补肾抑瘤汤对前列腺癌细胞增殖的干预作用及其机制。方法:首先按照血清药理学方法,给予SD大鼠连续灌胃用药7d,取血制备空白血清和补肾抑瘤汤含药血清;然后以人前列腺癌细胞PC-3为模型研究补肾抑瘤汤含药血清对前列腺癌细胞增殖及Notchl/Jaggedl信号通路的影响,噻唑蓝(MTT)比色法检测补肾抑瘤汤含药血清(2.5%,5%,10%,15%)处理PC-3细胞后不同时间点(12,24,36h)的细胞增殖情况,分别应用逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Westernblot)分析补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notchl,JaggedlmRNA和蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,经补肾抑瘤汤含药血清处理12,24,36h后,PC-3细胞增殖受到了不同程度的抑制,其中以36h的抑制作用最为显著(P〈0.01);补肾抑瘤汤含药血清对Pc-3细胞Notchl,JaggedlmRNA和蛋白表达均有抑制作用,尤其是补肾抑瘤汤10%,15%含药血清组抑制效果明显(P〈0.05,P〈0.01)。结论:补肾抑瘤汤含药血清能明显抑制PC.3细胞增殖,作用可能与调控N0tchl/Jaggedl表达有一定相关性。 展开更多
关键词 补肾抑瘤汤 血清药理学 PC-3细胞 Notchl/Jagged1信号通路
沙棘黄酮制备及体外抑制人前列腺癌PC-3细胞作用研究 预览 被引量:2
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作者 赵波 向晓玲 +3 位作者 王微 李春松 吴晓琴 沈建福 《天然产物研究与开发》 CSCD 北大核心 2018年第1期27-32,160共7页
采用AB-8大孔树脂纯化沙棘黄酮初提物,用10%、30%、50%乙醇溶液梯度洗脱,以总黄酮含量和黄酮苷元含量为指标,筛选纯化样品;采用MTT法、实时无标记细胞分析技术检测沙棘黄酮样品体外对人前列腺癌PC-3细胞的增殖抑制作用,流式细胞技术检... 采用AB-8大孔树脂纯化沙棘黄酮初提物,用10%、30%、50%乙醇溶液梯度洗脱,以总黄酮含量和黄酮苷元含量为指标,筛选纯化样品;采用MTT法、实时无标记细胞分析技术检测沙棘黄酮样品体外对人前列腺癌PC-3细胞的增殖抑制作用,流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期情况,Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达情况。实验结果表明50%乙醇梯度洗脱样品(S50)中,总黄酮含量达到25.42%;水解后得到SH50样品,其槲皮素、异鼠李素含量分别达到5.03%、18.64%;25μg/mL的SH50样品对PC-3细胞即有增殖抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;同时25μg/mL的SH50样品作用48 h即可显著诱导细胞凋亡(P<0.01),并将细胞周期阻滞在G2/M期,此外,样品可提高Bax蛋白和降低Bcl-2蛋白的表达。说明沙棘黄酮SH50样品对体外人前列腺癌PC-3细胞具有抑制增殖并诱导细胞凋亡作用,其机制可能与阻滞细胞周期,调节Bax和Bcl-2蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 沙棘黄酮 人前列腺癌 PC-3细胞 抑制增殖
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补肾抑瘤汤对人前列腺癌PC-3细胞增殖与凋亡的影响 预览 被引量:1
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作者 古炽明 陈艳芬 +5 位作者 陈志强 詹嫣然 王树声 吕立国 汤桂兴 翁湘涛 《广东药科大学学报》 CAS 2018年第2期179-182,共4页
目的研究补肾抑瘤汤对前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法大鼠灌胃7 d后制备空白血清和补肾抑瘤汤含药血清,采用人前列腺癌PC-3细胞观察不同浓度的补肾抑瘤汤含药血清处理后的细胞增殖情况及细胞形态变化,采用流式细胞术检测不同浓度... 目的研究补肾抑瘤汤对前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法大鼠灌胃7 d后制备空白血清和补肾抑瘤汤含药血清,采用人前列腺癌PC-3细胞观察不同浓度的补肾抑瘤汤含药血清处理后的细胞增殖情况及细胞形态变化,采用流式细胞术检测不同浓度的补肾抑瘤汤含药血清对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果经各组含药血清处理36 h、48 h后,与空白血清组比较,PC-3细胞的增殖明显受到了抑制,细胞形态也发生了变化;补肾抑瘤汤含药血清处理PC-3细胞36 h后,G2/M期细胞比例明显增加,S期细胞比例降低,且36 h、48 h的细胞凋亡率明显高于空白血清组。结论补肾抑瘤汤含药血清在体外能明显抑制PC-3细胞的增殖,并诱导其细胞凋亡。 展开更多
关键词 补肾抑瘤汤 PC-3细胞 增殖 凋亡
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雷公藤内酯醇联合多西紫杉醇对PC-3/MDR细胞耐药的体外逆转作用 预览
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作者 杨瑜 陈明 +1 位作者 朱伟东 张光远 《中成药》 CSCD 北大核心 2018年第12期2629-2635,共7页
目的研究雷公藤内酯醇联合多西紫杉醇对人前列腺癌PC-3/多药耐药(MDR)细胞耐药的体外逆转作用。方法将对数生长期的PC-3、PC-3/MDR细胞随机分为阴性对照组、多西紫杉醇组、雷公藤内酯醇组、多西紫杉醇-雷公藤内酯醇组(1∶1、1∶2、1∶3)... 目的研究雷公藤内酯醇联合多西紫杉醇对人前列腺癌PC-3/多药耐药(MDR)细胞耐药的体外逆转作用。方法将对数生长期的PC-3、PC-3/MDR细胞随机分为阴性对照组、多西紫杉醇组、雷公藤内酯醇组、多西紫杉醇-雷公藤内酯醇组(1∶1、1∶2、1∶3),MTT法测定各组细胞生长抑制率,HPLC法检测各组细胞对多西紫杉醇的摄取,试剂盒法测定给药组细胞P-gp表达和P-gp ATP酶活性,RT-PCR法考察雷公藤内酯醇干预对PC-3/MDR细胞MDR1 mRNA表达影响。结果不同浓度雷公藤内酯醇联合多西紫杉醇与PC-3、PC-3/MDR细胞孵育后,IC50值均显著降低,其中3倍量前者对后者的耐药逆转指数为9. 75。联合用药组细胞所摄取的多西紫杉醇量显著高于多西紫杉醇组,并呈雷公藤内酯醇剂量依赖性。此外,高浓度雷公藤内酯醇对MDR1 mRNA表达有明显抑制作用。结论雷公藤内酯醇可通过抑制P-gp表达、激活P-gp ATP酶活性、抑制MDR1 mRNA表达等多重机制,促使多西紫杉醇在体外逆转前列腺肿瘤PC-3/MDR细胞耐药。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 多西紫杉醇 PC-3细胞 多药耐药(MDR)
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丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响
8
作者 夏黎 赵珍东 +2 位作者 邓晓迎 杨炳伟 庄义修 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期164-170,共7页
目的:探讨丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养PC-3细胞,给予不同浓度的YB16(0.125~16μmol·L^-1),以噻唑蓝(MTT)比色法检测YB16对PC-3的细胞毒性,倒置相差显微镜观察... 目的:探讨丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养PC-3细胞,给予不同浓度的YB16(0.125~16μmol·L^-1),以噻唑蓝(MTT)比色法检测YB16对PC-3的细胞毒性,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,吖啶橙(AO)染色、流式细胞术检测YB16对PC-3的凋亡影响,逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)检测YB16对PC-3细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-xl(Bcl-xl),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2,Bcl-xl,Bax,激活型Caspase-3(cleaved-Caspase-3)蛋白表达,并对结果进行分析。结果:YB16能显著抑制PC-3细胞的生长,具有剂量依赖性(P〈0.05);YB16能促进细胞的凋亡,相差显微镜,AO染色法观察可见细胞具凋亡特征性改变;YB16能下调Bcl-2,Bcl-xl,上调Bax,Caspase-3 mRNA和蛋白的表达(P〈0.05)。结论:YB16能抑制PC-3细胞增殖,促进PC-3发生凋亡,其机制可能与促进Caspase-3表达有关,具有良好的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 丫蕊花甾体皂苷YB16 前列腺癌 PC-3细胞 细胞凋亡 B淋巴细胞瘤-2 B细胞淋巴瘤-xl Bcl-2相关X蛋白 半胱氨酸蛋白酶-3
薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用 被引量:2
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作者 崔涛 高晶 +5 位作者 曾勇 李薇 伊秀林 司端运 刘昌孝 李大鹏 《中草药》 CSCD 北大核心 2017年第21期4460-4464,共5页
目的探讨薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法建立人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤模型,以2、6 m L/kg剂量的薏苡仁油连续ig给药26 d,绘制肿瘤生长曲线,实验结束后摘除肿瘤组织,称质量,计算抑瘤率,并采用紫外-可见分光光度法测... 目的探讨薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法建立人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤模型,以2、6 m L/kg剂量的薏苡仁油连续ig给药26 d,绘制肿瘤生长曲线,实验结束后摘除肿瘤组织,称质量,计算抑瘤率,并采用紫外-可见分光光度法测定肿瘤组织中脂肪酸合成酶(FAS)活性。体外培养人前列腺癌PC-3细胞,应用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR法测定各组FAS m RNA的相对表达量。结果薏苡仁油6 m L/kg组抑瘤率为43.9%,肿瘤组织中FAS活性与模型组比较下降44.7%(P〈0.05)。薏苡仁油20μL/m L水平上的FAS m RNA表达明显下降(P〈0.05)。结论薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的荷瘤裸鼠模型有明显的抑瘤作用,该作用可能与下调FAS m RNA的表达和降低FAS的活性有关。 展开更多
关键词 薏苡仁油 人前列腺癌 PC-3细胞 脂肪酸合成酶 RT-PCR
BAY 11-7082对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响 预览
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作者 喻雄杰 李艳丽 +3 位作者 雷金华 狄全书 李欣慧 曹风军 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第7期1023-1026,共4页
目的:探讨BAY 11-7082对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法:选择PC-3细胞分别加入不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L)的Bay 11-7082培养2h(实验1组与实验2组),同时选择空白对照组,检测三组细胞增殖、凋亡与细胞周期变化情况... 目的:探讨BAY 11-7082对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法:选择PC-3细胞分别加入不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L)的Bay 11-7082培养2h(实验1组与实验2组),同时选择空白对照组,检测三组细胞增殖、凋亡与细胞周期变化情况。结果:实验1组与实验2组的细胞存活率分别为(65.14±13.26)%和(55.81±14.55)%,明显低于空白对照组(85.45±12.33)%(P〈0.05)。空白对照组、实验1组与实验2组的细胞凋亡率分别为(0.56±0.11)%、(10.12±2.37)%和(17.23±2.46)%,对比差异都有统计学意义(P〈0.05)。实验组的G0/G1期细胞数目较对照组明显增加(P〈0.05),同时实验组的S、G2/M期细胞数目较对照组明显减少(P〈0.05),实验1组与实验2组之间对比差异也有统计学意义(P〈0.05)。结论:BAY 11-7082能明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞发生凋亡,其部分机制可能是通过调节细胞周期实现的。 展开更多
关键词 BAY 11-7082 前列腺癌 PC-3细胞 细胞周期 细胞凋亡
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石榴皮安石榴苷提取物对人前列腺癌PC-3细胞的增殖及凋亡的影响 预览
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作者 邱慧敏 马雪英 +1 位作者 孙玉红 马桂芝 《新疆医科大学学报》 CAS 2017年第4期486-490,共5页
目的探讨石榴皮安石榴苷提取物(PUN)对人前列腺癌PC-3细胞的增殖及细胞凋亡的影响。方法采用细胞形态学观察与四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定PUN、石榴皮多酚提取物(PPP)与氟他胺(FLU)对PC-3细胞增殖的影响。应用流式细胞仪检... 目的探讨石榴皮安石榴苷提取物(PUN)对人前列腺癌PC-3细胞的增殖及细胞凋亡的影响。方法采用细胞形态学观察与四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定PUN、石榴皮多酚提取物(PPP)与氟他胺(FLU)对PC-3细胞增殖的影响。应用流式细胞仪检测石榴皮中的PUN作用48h后诱导PC-3细胞的凋亡情况。结果PUN与PPP对人前列腺癌PC-3细胞增殖均有明显的抑制作用,且均呈剂量与时间依赖性;PUN对PC-3细胞的抑制作用优于PPP(P〈0.05),而与FLU的抑制作用比较差异无统计学意义(P〉0.05);PUN与PPP可明显诱导PC-3细胞凋亡,且均呈剂量依赖性,PUN与PPP在质量浓度为400、800μg/mL时,PUN组细胞的早期凋亡率要优于PPP组,差异有统计学意义(P〈0.05);PUN与FLU在质量浓度为200、800μg/mL时细胞的早期凋亡率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 PUN在体外可抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡。随着安石榴苷含量的提高,石榴皮多酚提取物对人前列腺癌PC-3细胞的体外抑制作用也会增强。 展开更多
关键词 安石榴苷 PC-3细胞 抑制作用 细胞凋亡
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雷公藤甲素自微乳对荷人前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用研究 被引量:2
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作者 吕华静 李幸苗 +1 位作者 顾露囡 蔡鑫君 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2017年第10期1385-1387,共3页
目的研究雷公藤甲素自微乳对荷人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤的抑制作用。方法构建荷人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤,分为模型组、雷公藤甲素组、雷公藤甲素自微乳组、空白辅料组,灌胃给药,每2天1次,连续18 d,每3天测定瘤体积;给药结束... 目的研究雷公藤甲素自微乳对荷人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤的抑制作用。方法构建荷人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤,分为模型组、雷公藤甲素组、雷公藤甲素自微乳组、空白辅料组,灌胃给药,每2天1次,连续18 d,每3天测定瘤体积;给药结束后处死裸鼠,比较各组裸鼠的体质量、肝脏与瘤块质量,计算抑瘤率,并对瘤块组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)进行免疫组化研究。结果与模型组相比,雷公藤甲素和雷公藤甲素自微乳均可抑制肿瘤体积的增长;与雷公藤甲素相比,雷公藤甲素自微乳可以提高抑瘤率,降低肿瘤组织中VEGF的表达水平,对肿瘤抑制作用更佳,且未发现明显的毒性反应;空白辅料组对肿瘤无抑制作用。结论自微乳给药系统可以提高雷公藤甲素的抗肿瘤作用,安全性良好。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 自微乳给药系统 PC-3细胞 抗肿瘤作用
巨噬细胞极化影响前列腺癌细胞的促血管形成能力 被引量:2
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作者 徐璐 胡银英 +5 位作者 余艳荣 袁铿 王一帆 刘燕玲 王志刚 闵卫平 《现代免疫学》 CSCD 北大核心 2017年第3期177-183,共7页
研究巨噬细胞极化对人前列腺癌PC-3细胞促血管形成的作用,并探讨其机制。本实验成功诱导正常男性外周血单核细胞为M0、M1、M2和TAM,发现它们在形态学上差异明显。ELISA检测各亚型巨噬细胞条件培养液(condition medium,CM)表明:TGF-β... 研究巨噬细胞极化对人前列腺癌PC-3细胞促血管形成的作用,并探讨其机制。本实验成功诱导正常男性外周血单核细胞为M0、M1、M2和TAM,发现它们在形态学上差异明显。ELISA检测各亚型巨噬细胞条件培养液(condition medium,CM)表明:TGF-β在TAM中显著高于其他亚型,IL-10高表达于M2及TAM,而IL-12在M1中高表达(P〈0.05)。RT-PCR结果表明:IL-6、IL-23与CXCL9在M1中表达显著增高(P〈0.05),以及miRNA let-7b、let-7c比TAM表达显著增高(P〈0.01)。体外血管形成实验结果显示M2、TAM能增强PC-3细胞的促血管形成(P〈0.01)。因此,TAM亚型巨噬细胞促进PC-3细胞的血管形成机制可能与miRNA let-7b、let-7c高表达以及上述细胞因子的差异性表达有关。 展开更多
关键词 巨噬细胞 PC-3细胞 血管生成 MIRNA
壁虎醇提物体外诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡及机制研究 被引量:5
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作者 宋佳玉 游颜杰 王建刚 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期137-141,共5页
目的:研究壁虎醇提物(GAE)体外诱导激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡作用及其可能机制,为激素非依赖性前列腺癌的治疗提供理论依据。方法:以前列腺癌PC-3细胞为研究对象,MTT法检测3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 g·L~(-1)GAE作用细胞2... 目的:研究壁虎醇提物(GAE)体外诱导激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡作用及其可能机制,为激素非依赖性前列腺癌的治疗提供理论依据。方法:以前列腺癌PC-3细胞为研究对象,MTT法检测3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 g·L~(-1)GAE作用细胞24,48,72 h后对激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用;3.5,4.0,5.0 g·L~(-1)的GAE作用48 h后,另设空白组,Hoeehst33342荧光染色法,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,SP免疫组化法检测细胞内半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)和Fas的表达情况并做统计学处理。结果:3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 g·L~(-1)GAE作用细胞24,48,72 h后能显著抑制PC-3细胞的生长且呈剂量和时间依赖性;与空白组比较,3.5,4.0,5.0 g·L~(-1)的GAE作用48 h后Hoeehst33342荧光染色发现部分PC-3细胞发生典型的凋亡形态学改变;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测显示3.5,4.0,5.0 g·L~(-1)的GAE作用48 h后,早期凋亡细胞分别占6.51%,12.48%和22.81%,且免疫组化显示细胞内蛋白Caspase-3和Fas的表达均上调且呈浓度依赖性(P〈0.05)。结论:GAE能够诱导激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡,其作用机制可能与死亡受体介导的信号通路有关。 展开更多
关键词 壁虎醇提物 PC-3细胞 凋亡 Fas 半胱氨酸蛋白酶
JAK2/STAT3信号转导通路在岩大戟内酯B诱导的前列腺癌细胞PC-3凋亡中的作用 预览 被引量:3
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作者 王贻兵 刘丹 王佳贺 《实用药物与临床》 CAS 2016年第9期1065-1068,共4页
目的 探讨岩大戟内酯B诱导的人前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡以及JAK2/STAT3信号转导通路在此过程中的作用。方法 不同浓度的岩大戟内酯B处理人前列腺癌细胞系PC-3细胞0、24、48、72 h后,采用台盼蓝染色法检测PC-3细胞存活率;采用Annexin ... 目的 探讨岩大戟内酯B诱导的人前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡以及JAK2/STAT3信号转导通路在此过程中的作用。方法 不同浓度的岩大戟内酯B处理人前列腺癌细胞系PC-3细胞0、24、48、72 h后,采用台盼蓝染色法检测PC-3细胞存活率;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测PC-3细胞凋亡率;Western blot分析检测岩大戟内酯B作用不同时间后JAK2/STAT3信号转导通路的表达;预先用不同浓度的JSI-124(选择性STAT3途径抑制剂)处理PC-3细胞60 min,观察岩大戟内酯B作用不同时间后PC-3细胞的凋亡情况。结果 岩大戟内酯B能够诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡,降低磷酸化-JAK2/STAT3的表达,JSI-124可以提高岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。结论 JAK2/STAT3信号转导通路参与了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡过程。JSI-124通过特异性地抑制STAT3活性提高了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。 展开更多
关键词 岩大戟内酯B 前列腺癌 PC-3细胞 细胞凋亡
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选择性磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91对人前列腺癌PC-3细胞和裸鼠移植瘤的影响
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作者 巩思嘉 林艳 +7 位作者 李晓曦 周素瑾 赵正刚 赖姨梅 师惠 丁宁 李芳红 赵子建 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第24期4601-4604,共4页
目的:研究选择性磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91对人前列腺癌PC-3细胞人前列腺癌PC-3细胞和裸鼠移植瘤的影响。方法:将不同浓度的ZL-n-91(10,50,100,200μM)分别处理体外培养的前列腺癌PC-3细胞24 h和48 h,用CCK-8法测定ZL-n-91对前列腺... 目的:研究选择性磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91对人前列腺癌PC-3细胞人前列腺癌PC-3细胞和裸鼠移植瘤的影响。方法:将不同浓度的ZL-n-91(10,50,100,200μM)分别处理体外培养的前列腺癌PC-3细胞24 h和48 h,用CCK-8法测定ZL-n-91对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响;将人前列腺癌PC-3细胞皮下种植裸鼠,待瘤体积达到100-200 mm3,口服ZL-n-91,定期测定动物体重、肿瘤体积、肿瘤重量、计算抑瘤率;采用免疫组织化学检测肿瘤组织Ki67的表达。结果:ZL-n-91能抑制PC-3细胞的增殖,药物浓度为100,200μM时,作用24 h后其抑制率分别达23.7%、58.1%,作用48 h后其抑制率分别达36.5%、70%。与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.001),并且其抑制增殖作用呈浓度和时间依赖性。荷瘤裸鼠经ZL-n-91治疗12天开始,给药组小鼠肿瘤体积明显小于对照组(P〈0.05),给药32天时,给药组肿瘤体积和重量约为对照组的1/2倍,其抑瘤率高达45.96%;免疫组化检测肿瘤组织中Ki67的表达,定量分析对照组和给药组阳性率分别为(40.7±0.18)%和(18.11±0.06)%,结果显示给药组小鼠肿瘤的增殖明显弱于对照组(P〈0.001)。结论:ZL-n-91对人前列腺癌PC-3细胞及移植瘤的生长有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 ZL-n-91 PC-3 移植瘤
人前列腺癌PC-3细胞中肿瘤干细胞的分离及鉴定
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作者 周耀军 许贤林 +5 位作者 徐仁芳 崔笠 夏炜 曹赟杰 范敏 何小舟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期2207-2210,共4页
目的 动态观察PC-3细胞克隆在形态上的差异,检测CD44在不同克隆中的表达,比较不同克隆细胞在裸鼠体内的成瘤能力,并鉴定含前列腺癌干细胞的克隆.方法 克隆形成实验观察PC-3细胞克隆的形态并分类,计算克隆形成率及每种克隆的比例,运用免... 目的 动态观察PC-3细胞克隆在形态上的差异,检测CD44在不同克隆中的表达,比较不同克隆细胞在裸鼠体内的成瘤能力,并鉴定含前列腺癌干细胞的克隆.方法 克隆形成实验观察PC-3细胞克隆的形态并分类,计算克隆形成率及每种克隆的比例,运用免疫荧光技术(IF)检测不同克隆CD44的表达.分离不同形态的克隆,检测其自我更新能力.将不同形态的克隆细胞分别接种于裸鼠皮下,观察各组成瘤能力.结果 PC-3细胞可形成3种克隆形态,即Holoclone、Meroclone及Paraclone.克隆形成率为(9.30±1.61)%(n=5),Holoclone、Meroclone和Paraclone 3种克隆的比例分别为10.0%、48.3%和41.7%.免疫荧光检测结果显示,CD44在Holoclone中的表达明显强于Meroclone及Paraclone.Holoclone具有自我更新能力,在裸鼠体内具有较强的成瘤能力.结论 PC-3细胞的克隆在形态和分化程度上存在差异,Holoclone富含前列腺癌干细胞. 展开更多
关键词 PC-3细胞 前列腺癌 肿瘤干细胞 克隆
生姜醇提取物抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖的体外研究 预览 被引量:1
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作者 蒋茂林 王毅 +5 位作者 曹正国 张朝胜 黎建欣 肖恒军 彭潋 蒋鸿涛 《肿瘤药学》 CAS 2015年第4期275-278,共4页
目的观察生姜醇提取物(extract of zingiber ethanol,EZE)对人前列腺癌PC-3细胞体外增殖的影响,并探讨其可能的调控机制。方法运用MTT法检测不同浓度EZE对PC-3细胞体外增殖的影响;Westernblot检测不同浓度EZE作用于PC-3细胞一定时间后... 目的观察生姜醇提取物(extract of zingiber ethanol,EZE)对人前列腺癌PC-3细胞体外增殖的影响,并探讨其可能的调控机制。方法运用MTT法检测不同浓度EZE对PC-3细胞体外增殖的影响;Westernblot检测不同浓度EZE作用于PC-3细胞一定时间后其P53、Bcl-2蛋白的表达情况。结果 MTT法结果提示,随着EZE浓度的增加与作用时间的延长,PC-3细胞DE增殖抑制率均增加,与对照组比较均有显著差异(P〈0.05);Western-blot结果显示EZE作用PC-3细胞后可上调P53、下调Bcl-2蛋白的表达,并呈一定的量效关系。结论 EZE能够抑制PC-3细胞体外增殖,其机制可能与其上调P53、下调Bcl-2蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 生姜醇提取物 前列腺癌 增殖 PC-3细胞
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度他雄胺和“扶正抑瘤”中药复方对人前列腺癌PC-3细胞转移抑制效应的对照研究 预览 被引量:3
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作者 周仕轶 王林 +1 位作者 邵继春 张蜀武 《成都中医药大学学报》 2015年第2期10-15,共6页
目的:通过失巢凋亡抑制,对照研究新型5α还原酶抑制剂—度他雄胺和由人参、姜黄、肿节风组成的"扶正抑瘤"中药复方调控人前列腺癌PC-3细胞转移的效应。方法:采用人前列腺癌PC-3细胞体外培养的方法;MTT法检测PC-3细胞对度他雄胺和中... 目的:通过失巢凋亡抑制,对照研究新型5α还原酶抑制剂—度他雄胺和由人参、姜黄、肿节风组成的"扶正抑瘤"中药复方调控人前列腺癌PC-3细胞转移的效应。方法:采用人前列腺癌PC-3细胞体外培养的方法;MTT法检测PC-3细胞对度他雄胺和中药复方含药血清的敏感度,并确定两者的浓度梯度;软琼脂集落形成实验法观察两者对PC-3细胞失巢条件下增殖的影响;以Poly-HEMA包被培养细胞悬浮生长和琼脂糖电泳实验观察两者对PC-3细胞失巢凋亡的诱导作用;并采用流式细胞仪PI单染和AV-PI双染定量检测各组细胞凋亡率。结果:MTT比色法确定度他雄胺的浓度梯度为15%(低剂量),30%(中剂量)和45%(高剂量),中药复方为30%(中剂量);软琼脂集落实验表明度他雄胺45%含药血清组和中药复方含药血清组对细胞集落形成数量具有抑制作用(P〈0.05),2组间比较无差异(P〉0.05);琼脂糖电泳显示度他雄胺45%含药血清组和中药复方含药血清组出现较明显凋亡DNA-Ladder条带;流式细胞检测PI单染显示,度他雄胺45%含药血清组和中药复方含药血清组可提高PC-3细胞失巢凋亡率(P〈0.01),AV-PI双染显示度他雄胺各浓度组和中药复方含药血清组仅具有提高细胞早期失巢凋亡率的趋势(P〉0.05)。结论:度他雄胺可抑制人前列腺癌PC-3细胞在失巢条件下增殖,并呈现一定的浓度依赖性,中药复方也可抑制人前列腺癌PC-3细胞在失巢条件下增殖,两者效应相当,两者均对PC-3细胞失巢凋亡具有相似诱导作用,但对细胞早期凋亡诱导作用均有限。 展开更多
关键词 度他雄胺 中药复方 前列腺癌 PC-3细胞 失巢凋亡
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依维莫司对前列腺癌PC-3细胞的抑制和凋亡的影响
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作者 黄小兵 朱绍兴 +2 位作者 曾邦伟 林小燕 陈强 《肿瘤学杂志》 CAS 2014年第7期560-563,共4页
[目的]探讨依维莫司对前列腺癌PC-3细胞凋亡及caspase-3表达的影响。[方法]体外培养前列腺癌细胞PC-3,使用不同浓度依维莫司(0mol/L、10-9mol/L和10-8mol/L)干预细胞,四氮唑蓝比色法(MTT)和原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测依维莫... [目的]探讨依维莫司对前列腺癌PC-3细胞凋亡及caspase-3表达的影响。[方法]体外培养前列腺癌细胞PC-3,使用不同浓度依维莫司(0mol/L、10-9mol/L和10-8mol/L)干预细胞,四氮唑蓝比色法(MTT)和原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测依维莫司对前列腺癌细胞PC-3生长抑制和诱导细胞凋亡的作用,流式细胞术检测其对caspase-3活化的情况。[结果]与对照组比较,依维莫司对前列腺癌PC-3细胞抑制和诱导凋亡作用明显(P〈0.05),明显增加caspase-3的表达(P〈0.05)。[结论]依维莫司抑制前列腺癌细胞PC-3增殖,可能通过诱导caspase-3表达活化增强,最终导致细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞凋亡 依维莫司 CASPASE-3 PC-3细胞 前列腺肿瘤
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