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SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞TLR4致炎信号通路的负调控作用
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作者 周秋格 刘畅 +2 位作者 赖金伦 郭爱珍 胡长敏 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期404-410,共7页
旨在探究SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)TLR4信号通路的负调控作用。构建SIGIRR—pEGFP真核表达载体,脂质体法转染HEK293T及BMECs,荧光显微镜观察及Westernblot验证融合蛋白SIGIRR—pEGFP的表达;LPS刺激转染后BMECs,检测TLR4及... 旨在探究SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)TLR4信号通路的负调控作用。构建SIGIRR—pEGFP真核表达载体,脂质体法转染HEK293T及BMECs,荧光显微镜观察及Westernblot验证融合蛋白SIGIRR—pEGFP的表达;LPS刺激转染后BMECs,检测TLR4及其信号通路分子IRAK1、IRAK4和TRAF6的变化,以及下游炎性因子IL-6、IL-8、IL-18和TNF-a的表达量。结果显示,成功构建SIGIRR-pEGFP真核表达载体,荧光检测重组质粒转染到HEK293T和BMECs中;Westernblot鉴定融合蛋白SIGIRR—pEGFP表达正确;重组质粒转染BMECs后,SIGIRR表达量较转染空载质粒组及空白未转染组显著升高(P〈0.01);炎性因子IL-6、IL-8、IL-10、TNFa、TLR4及下游信号分子IRAK1、IRAK4、TRAF6表达量显著降低(P〈0.01),转染空载质粒组与空白未转染组相比仅IRAKl表达量有差异(P〈0.05)。结果表明,本试验通过研究牛SIGIRR在BMECs中的作用,证实sIGIRR基因具有炎性负调控LPS-TLR4信号通路的作用,具有潜力成为临床治疗奶牛乳腺炎的新靶标。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺炎 乳腺上皮细胞 SIGIRR TLR4信号通路 负性调控
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