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新生儿脐静脉置管/经外周静脉穿刺中心静脉置管相关性心包积液/心脏填塞的临床分析
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作者 李媛 康华 +4 位作者 张姣 何平 李雪瑞 冯彪 周熙惠 《中华新生儿科杂志(中英文)》 CAS 2019年第6期408-412,共5页
目的探讨新生儿脐静脉置管/经外周静脉穿刺中心静脉置管(umbilical venous catheter/peripherally inserted central catheter,UVC/PICC)相关性心包积液/心脏填塞(pericardial effusion/cardiac tamponade,PCE/CT)的临床表现、影像学特... 目的探讨新生儿脐静脉置管/经外周静脉穿刺中心静脉置管(umbilical venous catheter/peripherally inserted central catheter,UVC/PICC)相关性心包积液/心脏填塞(pericardial effusion/cardiac tamponade,PCE/CT)的临床表现、影像学特点、治疗及预后.方法选取2017年1月至2018年12月陕西省5家医院新生儿重症监护病房收治的发生UVC/PICC相关性PCE/CT患儿临床资料,对其临床表现、影像学检查结果、治疗及预后情况进行回顾性分析.结果5家医院2年期间共留置UVC/PICC 693例,导管留置期间经超声心动图确诊发生PCE 7例(1.0%),其中有5例合并CT(0.7%).早产儿6例,足月儿1例;胎龄(32.6±3.8)周;出生体重1550(1200,3960)g.UVC/PICC置管时间为生后14 h(1~19h),发生PCE/CT症状时间为置管后69 h(13~104 h).主要表现为呼吸暂停/呼吸窘迫7例、发绀/氧饱和度下降至0.85以下7例、心动过速3例、心动过缓/心搏骤停5例.发生PCE/CT症状时6例有UVC/PICC尖端异位,其中4例胸部X线片显示UVC尖端位于T6~T7,1例尖端位于T12,1例超声心动图回报PICC在右心房;1例导管尖端位置正常,位于T8.5例拔除UVC/PICC行心包穿刺引流积液后治愈,1例拔除UVC未行心包穿刺治愈,1例行心包穿刺,外拔UVC至下腔静脉继续输液5h后死亡.结论尖端异位是导致UVC/PICC相关性PCE/CT的主要原因.UVC/PICC留置期间若出现突然的、无法解释的呼吸暂停/呼吸窘迫、发绀/血氧饱和度下降、心动过速/心动过缓/心搏骤停等临床表现,应立即行超声心动图检查,及时拔除导管、行心包穿刺引流可能挽救PCE/CT患儿生命. 展开更多
关键词 导管插入术 中心静脉 脐静脉 导管 留置 心包积液 心脏填塞
经皮脐静脉穿刺取材进行产前诊断的指征构成变化
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作者 张慧婧 王淑娴 +8 位作者 杨慧霞 孙瑜 孙笑 陈俊雅 张潇潇 付杰 于丽 潘虹 马京梅 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期838-843,共6页
目的评估现有产前筛查诊断体系中,经皮脐静脉穿刺(percutaneous umbilical cord blood sampling,PUBS)的应用指征变化趋势及安全性,探讨减少不必要PUBS的可能性。方法回顾性收集2015年1月至2017年12月在北京大学第一医院通过PUBS取材行... 目的评估现有产前筛查诊断体系中,经皮脐静脉穿刺(percutaneous umbilical cord blood sampling,PUBS)的应用指征变化趋势及安全性,探讨减少不必要PUBS的可能性。方法回顾性收集2015年1月至2017年12月在北京大学第一医院通过PUBS取材行产前诊断的病例。分析PUBS指征、取材孕周、后续检测项目(胎儿淋巴细胞染色体核型分析、分子遗传学检测、病原学检查)、检测结果以及妊娠结局。采用单因素方差分析、R×C列联表χ2检验、Fisher精确概率法、线性趋势χ2检验或独立样本Cruskal-Wallis秩和检验,对数据进行分析。结果(1)研究期间共412例单胎PUBS病例,穿刺孕周为孕20~38周,其中孕34周前取材379例(92.2%)。检测结果阳性共43例(10.4%)。1.5%(6/412)穿刺术后发生流产。2015与2016年各有1例出现体外细胞培养失败。(2)304例(73.8%)单一指征中,14例为早孕期已知指征[高龄(年龄>35岁)、曾生育染色体病患儿、夫妻一方为染色体异常携带者],2015和2017年单纯因高龄行PUBS的病例分别为4和1例,2016年无此指征病例。290例(70.4%)指征为中晚孕期所发现(筛查高风险、产前超声检查怀疑胎儿染色体异常及其他指征)。因双重指征行PUBS者(105例)所占比例呈现逐年增多趋势,但差异未见统计学意义。其中8例(7.6%)以高龄及筛查高风险作为指征,占总体的1.9%(8/412)。(3)中晚孕期超声提示异常作为指征者共363例(88.1%)。其中280例为单纯超声异常,比例为76.9%(280/363),呈现逐年下降趋势;其余83例合并高龄、不良孕产史及筛查高风险等其他指征(双重和三重指征分别为80和3例),所占比例为23.1%(83/363),显现逐年上升的趋势;但差异均未见有统计学意义。经分子诊断检出异常结果共18例,均见于超声异常指征。结论尽管PUBS并发症发生率较低,但存在风险,因单一指征进行PUBS的比例逐年下降。在产前筛查体系逐步健全及分子核型普遍� 展开更多
关键词 产前诊断 静脉切开术 血样采集 脐静脉
脐静脉导管留置术导管尖端位置的安全性探讨 被引量:2
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作者 林倩清 陈灵 +2 位作者 徐灿 何东梅 钟隽镌 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期51-54,共4页
目的分析新生儿脐静脉导管尖端高位与低位留置的安全性。方法本研究为回顾性研究。研究对象为广东省妇幼保健院2015年3月至2016年5月留置脐静脉导管的155例新生儿。根据导管尖端位置,将2组患儿分为高位(中心静脉位置)和低位(门静脉以下... 目的分析新生儿脐静脉导管尖端高位与低位留置的安全性。方法本研究为回顾性研究。研究对象为广东省妇幼保健院2015年3月至2016年5月留置脐静脉导管的155例新生儿。根据导管尖端位置,将2组患儿分为高位(中心静脉位置)和低位(门静脉以下)组。分析2组患儿的留置时间、肝功能、肝脏B超以及导管相关性血流感染等方面的情况。采用Mann-Whitney U检验、Wilcoxon符号秩和检验或χ^2检验对数据进行统计学分析。结果(1)共155例纳入本研究。155例新生儿胎龄25~41周;出生体重700~4 690 g;置管时日龄0.5~8.0 d,留置0~12 d。低位组因留置过浅导致液体外渗提前拔管7例。低位组留置时间短于高位组[M(P25~P75),6(4~7)d与7(5~7)d,Z=-2.580,P=0.010]。2组性别、胎龄、出生体重和置管时日龄差异均无统计学意义(P值均>0.05)。(2)2组患儿肝脏B超均未见异常,均未发生新生儿坏死性小肠结肠炎、血栓形成及栓塞、空气栓塞、肝脓肿等并发症。高位组肝功能异常比例为6.9%(6/87),与低位组的4.4%(3/68)相比,差异无统计学意义(χ^2=0.431,P=0.512)。(3)2组155例患儿均行血培养,其中116例(74.8%)行导管培养(高位组71例,低位组45例)。高位组导管相关性血流感染发生率为5.6%(4/71),感染发生率为7.4例/千导管日;低位组导管相关性血流感染发生率为6.7%(3/45),感染发生率为8.0例/千导管日。2组感染发生率差异无统计学意义(χ^2=0.052,P=0.820)。(4)导管培养阳性的7例中,检出3例溶血性葡萄球菌(低位组2例,高位组1例);高位组另检出1例酵母样真菌、1例屎肠球菌和1例金黄色葡萄球菌,低位组另检出1例白色念珠菌。结论高位脐静脉导管的留置时间长于低位,2组在并发症及感染率的安全性指标方面无明显差异。受条件所限,不同脐静脉导管尖端位置的安全性还需要进一步深入研究。 展开更多
关键词 脐静脉 导管 留置 时间 婴儿 新生
脐血管栓塞两例 被引量:1
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作者 李欢喜 张雪芹 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期775-777,共3页
脐带内有1条脐静脉,2条脐动脉,是母体与胎儿气体交换、营养物质供应和代谢产物排出的重要通道。脐血管周围有华通胶保护。当脐带血栓形成时,可导致胎儿缺氧,甚至危及胎儿生命。脐血管栓塞在产前较难发现,国内外鲜有报道。本文通过... 脐带内有1条脐静脉,2条脐动脉,是母体与胎儿气体交换、营养物质供应和代谢产物排出的重要通道。脐血管周围有华通胶保护。当脐带血栓形成时,可导致胎儿缺氧,甚至危及胎儿生命。脐血管栓塞在产前较难发现,国内外鲜有报道。本文通过对厦门市妇幼保健院的2例脐血管栓塞病例进行分析总结,旨在提高脐血管栓塞的产前检出率,避免胎儿不良结局发生。 展开更多
关键词 脐动脉 脐静脉 栓塞
锌离子对人脐静脉内皮细胞生物学功能的影响 被引量:2
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作者 包庞 刘焕云 +5 位作者 王玉清 谭亚军 李禄丰 徐春馨 黄岚 赵晓辉 《中华心血管病杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期390-395,共6页
目的 探讨锌离子对人脐静脉内皮细胞生物学功能的影响.方法 体外原代培养人脐静脉内皮细胞后,传代培养并将细胞分为8组:对照组(常规培养,n=3);20.μmol/L组(细胞培养液中加入氯化锌溶液20 μmol/L,n=3);40 μmol/L组(细胞培养液... 目的 探讨锌离子对人脐静脉内皮细胞生物学功能的影响.方法 体外原代培养人脐静脉内皮细胞后,传代培养并将细胞分为8组:对照组(常规培养,n=3);20.μmol/L组(细胞培养液中加入氯化锌溶液20 μmol/L,n=3);40 μmol/L组(细胞培养液中加入氯化锌溶液40μ mol/L,n=3);80 μmol/L组(细胞培养液中加入氯化锌溶液80 μmol/L,n=3);100 μmol/L组(细胞培养液中加入氯化锌溶液100 μmol/L,n=3);200 μmol/L组(细胞培养液中加入氯化锌溶液200μmol/L,n=3);300 μmol/L组(细胞培养液中加入氯化锌溶液300 μmol/L,n=3);500 μmol/L组(细胞培养液中加入氯化锌溶液500 μmol/L,n=3).采用实时无标记细胞分析仪检测内皮细胞增殖情况,采用CCK-8法检测内皮细胞活性,采用细胞划痕实验检测内皮细胞迁移能力,同时采用实时无标记细胞分析仪检测细胞黏附功能的变化.结果 (1)18 h后,20、40、80、100和200 μmol/L组的细胞增殖指数分别为4.5±0.6、3.7±0.4、3.6±0.3、2.5±0.4和2.5±0.4,与对照组的3.5±0.3比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);300和500μmol/L组的细胞增殖指数均为0.(2)96 h后,20、40、80、100、200、300和500 μmol/L组的细胞活性分别为1.21±0.05、1.10±0.03、0.99±0.05、0.62±0.02、0.45±0.04、O.11±0.01和0.12±0.06,与对照组的0.75±0.05比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).(3)12 h后,20、40、80和100 μmol/L组的细胞迁移距离分别为(0.56±0.11)、(0.96±0.07)、(0.49±0.02)和(0.29±0.01)mm,与对照组的(0.24±0.04) mm比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).(4)18 h后,20、40、80和100 μmol/L组的细胞黏附指数分别为0.40±0.05、0.31±0.01、0.38±0.05和0.40±0.03,与对照组的0.35±0.02比较,差异均无统计学意义(P均〉0.05).结论 低浓度锌离子(≤80 μμmol/L)对入脐静脉内皮细胞的增殖、活性和迁移功能有促进作用,对黏附功能无明� 展开更多
关键词 内皮细胞 脐静脉
骨髓间充质干细胞与血管内皮生长因子165基因转染人脐静脉内皮细胞共移植促进缺血皮瓣血管的生成 预览
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作者 先德彬 明华伟 +1 位作者 徐荣胜 夏德林 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第1期46-52,共7页
背景:如何促进大块组织工程骨早期血管化是目前研究的热点。通过细胞共培养以及添加生物活性因子来促进血管生成均是很好地促进早期血管化的方法。目的:探讨骨髓间充质干细胞与血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth facto... 背景:如何促进大块组织工程骨早期血管化是目前研究的热点。通过细胞共培养以及添加生物活性因子来促进血管生成均是很好地促进早期血管化的方法。目的:探讨骨髓间充质干细胞与血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor,VEGF165)基因转染的人脐静脉内皮细胞共移植在体内促进血管生成的能力,为构建血管化组织工程骨修复大段骨缺损提供理论依据和实验基础。方法:50只SD大鼠完全随机分入5组,每组10只,于SD大鼠背部中线上建立一个4 cm×1.5cm大小的缺血皮瓣模型,分别移植骨髓间充质干细胞与VEGF165基因转染的人脐静脉内皮细胞(A组)、单独转染VEGF165基因的人脐静脉内皮细胞(B组)、骨髓间充质干细胞与未转染VEGF165基因的人脐静脉内皮细胞(C组)、未转染VEGF165基因的人脐静脉内皮细胞(D组)、DMEM培养基(E组)。ELISA检测外周血VEGF水平,组织学观察其皮瓣存活状况及微血管密度。结果与结论:①术后A组皮瓣存活质量较其他4组高;②A组、B组术后第2,4,7,14天外周血中的VEGF持续高表达且逐渐升高,第7天时达到峰值,第14天时较术后第2天明显下降。不同时期A组外周血中VEGF水平明显高于其他4组,差异有显著性意义(P<0.05);③术后第11天,A组皮瓣存活率高于其他4组,差异有显著性意义(P<0.05);④术后第11天,A组微血管密度远远大于其他4组,差异有显著性意意义(P<0.05);⑤结果表明,骨髓间充质干细胞与VEGF165基因转染人脐静脉内皮细胞共移植可促进缺血皮瓣血管化,提高缺血皮瓣存活率。 展开更多
关键词 骨髓 间质干细胞 脐静脉 内皮细胞 血管内皮生长因子类 转染 组织工程
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胎儿腹内脐静脉异常的产前超声表现及预后分析 预览 被引量:2
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作者 丁媛 于冬梅 刘兰兰 《青岛大学医学院学报》 CAS 2017年第2期241-243,共3页
目的探讨胎儿腹内脐静脉异常的产前超声表现及预后。方法对我院2014年1—12月胎儿产前超声检查检出的69例胎儿腹内脐静脉异常的超声表现进行回顾性分析,并进行随访。结果本组69例胎儿腹内脐静脉异常中,58例为永久性右脐静脉,超声表现为... 目的探讨胎儿腹内脐静脉异常的产前超声表现及预后。方法对我院2014年1—12月胎儿产前超声检查检出的69例胎儿腹内脐静脉异常的超声表现进行回顾性分析,并进行随访。结果本组69例胎儿腹内脐静脉异常中,58例为永久性右脐静脉,超声表现为脐静脉进入肝脏后转向左侧,位于胆囊右侧;5例为脐静脉扩张,超声表现为胎儿腹内脐静脉增宽,其中弥漫性扩张1例,局限性瘤样扩张4例;5例为静脉导管缺如伴脐静脉异常连接,超声表现为脐静脉进入胎儿腹腔后直接回流到右心房或下腔静脉;1例为脐静脉肝静脉瘘,超声表现为静脉导管存在,脐静脉迂曲与肝静脉交通。无其他畸形的胎儿腹内脐静脉异常54例,3例失访,51例预后良好;合并较轻畸形3例,1例单脐动脉预后良好,2例室间隔缺损预后良好。合并严重畸形12例(其中1例18-三体,2例21-三体),主要为心脏、泌尿系统、神经系统或颜面部异常,均行引产。结论胎儿腹内脐静脉异常有特征性超声表现,不合并其他畸形者预后良好,合并严重畸形者妊娠结局不良。 展开更多
关键词 胎儿疾病 脐静脉 超声检查 产前
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高糖影响内皮细胞功能不良机制的初步探究 预览
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作者 刘旭 尹洪超 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2017年第10期1081-1084,共4页
目的 探讨高糖对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能不良的机制。方法 分离并培养HUVEC,取第3代细胞分为正常对照组、甘露醇对照组(33mmol/L)和高糖对照组(33mmol/L),处理36h后,用RT-PCR和Western blot测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白雷帕霉... 目的 探讨高糖对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能不良的机制。方法 分离并培养HUVEC,取第3代细胞分为正常对照组、甘露醇对照组(33mmol/L)和高糖对照组(33mmol/L),处理36h后,用RT-PCR和Western blot测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白雷帕霉素不敏感配体(RICTOR)表达情况。转染RICTOR过表达腺病毒为高糖腺病毒组,转染空白病毒AD-GFP作为高糖空病毒组,检测蛋白激酶B(Akt)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的磷酸化水平,用硝酸还原酶法测定NO释放量。结果高糖对照组RICTOR蛋白表达量较正常对照组显著降低(1.00±0.16 vs 2.69±0.07,P〈0.01)。与高糖空病毒组比较,高糖腺病毒组RICTOR表达增加(0.57±0.03 vs0.29±0.02,P〈0.01),磷酸化Akt-Ser473(0.95±0.05 vs 0.56±0.04,P〈0.01)及磷酸化eNOS-Ser1177增加(0.97±0.05 vs 0.55±0.07,P〈0.01),内皮细胞NO释放增多(0.85±0.06 vs 0.56±0.04,P〈0.05)。结论 纠正RICTOR表达能改善高糖诱发的血管内皮细胞功能不良。 展开更多
关键词 高血糖症 脐静脉 内皮细胞 蛋白激酶类 一氧化氮合酶
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脂多糖诱导对内皮细胞释放内皮细胞微粒的影响 预览 被引量:1
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作者 唐佳俊 徐继平 +1 位作者 郑捷新 张勤 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2017年第2期103-108,共6页
目的 探讨脂多糖刺激对内皮细胞释放内皮细胞微粒(EMP)的影响。方法 取人脐静脉内皮细胞培养,分为正常对照组(无脂多糖诱导)和不同浓度脂多糖(浓度分别为0.1、1.0、10.0、20.0μg/m L)组,脂多糖诱导24 h后收集细胞培养液并消化内皮细胞... 目的 探讨脂多糖刺激对内皮细胞释放内皮细胞微粒(EMP)的影响。方法 取人脐静脉内皮细胞培养,分为正常对照组(无脂多糖诱导)和不同浓度脂多糖(浓度分别为0.1、1.0、10.0、20.0μg/m L)组,脂多糖诱导24 h后收集细胞培养液并消化内皮细胞制成细胞悬液。离心法提取细胞培养液内的EMP,加入特异性荧光抗体(anti-CD31-CFS、anti-CD51-PE、anti-CD54-FITC、antiCD144-PE、anti-CD62E-APC)。采用流式细胞仪检测脂多糖诱导内皮细胞释放荧光标记EMP的变化以及内皮细胞的凋亡率。对数据行方差分析、t检验、Dunnett-t检验。结果 对照组和0.1、1.0、10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD31~+EMP数量水平分别为(1.23±0.43)×10~6、(1.92±0.64)×10~6、(2.55±0.78)×10~6、(3.96±0.78)×10~6、(6.96±1.80)×10~6,组间比较差异有统计学意义(F=5.83,P<0.05),CD31~+EMP占总体EMP的比值分别为(4.57±1.33)%、(5.92±1.24)%、(6.93±1.61)%、(7.44±1.09)%、(13.44±3.39)%,组间比较差异有统计学意义(F=3.43,P<0.05)。与对照组比较,10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD31~+EMP数量水平明显升高,差异均有统计学意义(t=-3.06、-3.61,P值均小于0.05);20.0μg/m L脂多糖组CD31~+EMP数量水平高于0.1、1.0μg/m L脂多糖组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。CD31~+EMP占总体EMP的比值20.0μg/m L脂多糖组高于对照组和0.1μg/m L脂多糖组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。对照组和0.1、1.0、10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD54+EMP数量水平分别为(4.70±1.01)×10~6、(9.20±3.34)×10~6、(8.83±1.70)×10~6、(17.18±3.78)×10~6、(17.73±4.98)×10~6,组间比较差异有统计学意义(F=3.35,P<0.05)。与对照组比较,10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD54+EMP数量水平明显升高,差异均有统计学意义(t=-3.19、-3.00,P值均小于0.05)。对照组和0.1、1.0、10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD144~+EMP数量水平分别为(3.93±1.22)×10~6、(6.80±1.36)×10~6、(8.03±2.53)×10~6、(17.22±4.52)×10~6、(11.05� 展开更多
关键词 脂多糖类 内皮细胞 脐静脉 微粒
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早产儿脐静脉导管相关性肝损伤的临床分析 被引量:12
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作者 茹喜芳 冯琪 +4 位作者 王颖 张欣 李星 桑田 蒙景雯 《中国新生儿科杂志》 CAS 2017年第1期11-15,共5页
目的探讨早产儿脐静脉导管(UVC)相关性肝损伤的临床表现、影像学特点、预后及可能危险因素。方法选择2012年12月至2015年11月我院新生儿重症监护病房(NICU)行UVC置管术早产儿并发肝损伤的临床资料。对其性别、胎龄、出生体重、UVC... 目的探讨早产儿脐静脉导管(UVC)相关性肝损伤的临床表现、影像学特点、预后及可能危险因素。方法选择2012年12月至2015年11月我院新生儿重症监护病房(NICU)行UVC置管术早产儿并发肝损伤的临床资料。对其性别、胎龄、出生体重、UVC留置时间、置管深度、管端位置、辅助检查结果、治疗、随访及预后进行分析。结果研究期间行UVC置管早产儿共322例,发生UVC相关性肝损伤10例(3.1%),9例为液体外渗肝实质,1例为肝血肿。10例患儿胎龄(28.5±1.7)周,出生体重(1184±207)g,X线检查UVC管端位于T9~T11,9例管端位置低于右侧膈肌水平。10例均经UVC输注肠外营养液。发生肝损伤的中位时间为生后6.0d。有临床表现6例,无临床表现4例。最常见的临床表现为腹胀(5例)、肠鸣音减弱(5例)和肝肿大(4例)。l例肝血肿患儿出现进行性血红蛋白下降(最低34g/L)及休克。肝损伤超声表现为不规则混杂回声区,边界清,内部为液性暗区或低回声区,周围为窄的高回声带。9例液体外渗肝实质的患儿拔除UVC后1周内临床症状好转,l例肝血肿患儿生后9d死亡。肝脏超声随诊8例于生后52d-3.5个月恢复正常,1例于生后9个月仍遗留钙化点。结论早产儿UVC置管后可能并发肝损伤,正确的管端位置有利于减少此类并发症。液体外渗肝实质患儿若早期识别、及时行超声检查并积极治疗,预后较好。 展开更多
关键词 导管插入术 中心静脉 导管 留置 脐静脉 肝损伤 超声检查
钙敏感受体介导的人脐静脉内皮细胞钙内流及一氧化氮生成过程中TRPCI与STIM1的相互作用
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作者 王腊梅 钟华 +3 位作者 唐娜 庞丽娟 张春军 何芳 《中华心血管病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期978-984,共7页
目的探讨经典瞬时受体电位通道1(TRPC1)与基质相互作用分子1(STIM1)在钙敏感受体(CaR)介导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)钙离子(Ca2+)内流和一氧化氮(NO)生成中的相互作用。 方法取华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产... 目的探讨经典瞬时受体电位通道1(TRPC1)与基质相互作用分子1(STIM1)在钙敏感受体(CaR)介导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)钙离子(Ca2+)内流和一氧化氮(NO)生成中的相互作用。 方法取华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科健康孕产妇剖宫产新生儿的新鲜脐带,原代培养HUVEC并传代。将所得HUVEC分别与CaR激动剂精胺[激活钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)]、ROC模拟剂12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA)+CaR负性变构调节剂Calhex231(阻断SOC阻、激活ROC)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro31-8220及经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967(激活SOC、阻断ROC)共孵育。采用免疫荧光技术检测HUVEC中TRPC1与STIM1的蛋白表达,免疫共沉淀法检测TRPC1与STIM1之间的相互作用。取2~3代HUVEC进行分组,将构建的TRPC1、STIM1干扰质粒(shTRPC1、shSTIM1)联合转染HUVEC即shTRPC1+shSTIM1组 (实验组)、vehicle-shTRPC1+vehicle-shSTIM1组 (空质粒组)和对照组,将3组细胞分别加入上述4种不同的药物进行干预。采用荧光探针Fura-2/AM检测HUVEC细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的变化,NO荧光探针DAF-FM负载方法同步检测HUVEC中NO生成的变化。 结果(1) HUVEC中TRPC1与STIM1的蛋白表达:激光共聚焦显微镜下观察,正常对照组HUVEC中TRPC1和STIM1蛋白的表达呈阳性,二者共定位于胞浆。Calhex231+TPA+精胺+Ca2+组、Ro31-8220+精胺+Ca2+组和Go6976+精胺+Ca2+组HUVEC中定位于胞浆中的TRPC1、STIM1均减少,二者结合也减少。(2) HUVEC中TRPC1与STIM1的相互作用:Calhex231+TPA+精胺+Ca2+组、Ro31-8220+精胺+Ca2+组和Go6976+精胺+Ca2+组STIM1/TRPC1和TRPC1/STIM1的相对比值的百分数分别为(25.98±2.17)%和(44.10±4.01)%、(20.85±1.01)%和(46.31±3.47)%、(23.88±2.05)%和(39.65±2.91)%� 展开更多
关键词 内皮细胞 脐静脉 细胞内钙离子感觉蛋白质类 受体 钙敏感 一氧化氮
血管内皮生长因子165转染脐静脉内皮细胞与骨髓间充质干细胞共培养在血管形成中的作用 预览
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作者 徐荣胜 何芸 +2 位作者 李彪 先德彬 夏德林 《中国组织工程研究》 北大核心 2017年第33期5268-5273,共6页
背景:组织工程骨早期血管化是目前亟待解决的难题,细胞共培养以及添加生物活性因子来促进血管生成均是很好地促进早期血管化的方法。目的:探讨人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)过表达血管内皮生长因子1... 背景:组织工程骨早期血管化是目前亟待解决的难题,细胞共培养以及添加生物活性因子来促进血管生成均是很好地促进早期血管化的方法。目的:探讨人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)过表达血管内皮生长因子165(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF165)后与小鼠骨髓间充质干细胞共培养在血管形成中的作用。方法:腺病毒介导VEGF165转染HUVECs,并分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,进行共培养。实验分组如下:①转染共培养组:AdVEGF165-HUVECs+骨髓间充质干细胞;②转染非共培养组:AdVEGF165-HUVECs;③空载体共培养组:AdGFP-HUVECs+骨髓间充质干细胞;④空载体组:AdGFP-HUVECs;⑤未转染共培养组:HUVECs+骨髓间充质干细胞;⑥空白对照组:HUVECs。采用CCK8法检测HUVECs的增殖能力,结晶紫染色检测HUVECs的迁移能力,Matrigel法检测HUVECs的血管形成能力。结果与结论:①与空白对照组相比,转染共培养组、转染非共培养组、空载体共培养组、未转染共培养组的细胞增殖能力均明显增加(P<0.05);②与空白对照组相比,转染共培养组人脐静脉内皮细胞数量最多(P<0.05);③与空白对照组相比,转染共培养组形成的小管数目更多形成时间更早,更稳定(P<0.05);④结果表明,VEGF165转染HUVECs和骨髓间充质干细胞共同作为种子细胞能更好地促进早期血管生成。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 脐静脉内皮细胞 血管内皮生长因子165 骨髓间充质干细胞 共培养 血管形成 国家自然科学基金
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脂氧素A4干预尿酸诱导人脐静脉内皮细胞发生氧化应激反应的机制研究
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作者 周游 周京国 +2 位作者 易婷婷 郭晓兰 蒋兴亮 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期252-257,I0001共7页
目的探讨脂氧素A4(LXA4)对尿酸诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)发生氧化应激反应的干预作用,并初步探讨其可能机制。方法以尿酸刺激HUVEC构建氧化应激模型,选择LXA4及二甲苯基碘(DPI)、鱼藤酮对模型进行干预。利用二氯二氢荧光素... 目的探讨脂氧素A4(LXA4)对尿酸诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)发生氧化应激反应的干预作用,并初步探讨其可能机制。方法以尿酸刺激HUVEC构建氧化应激模型,选择LXA4及二甲苯基碘(DPI)、鱼藤酮对模型进行干预。利用二氯二氢荧光素.乙酰乙酸酯(DCFH—DA)作为荧光探针,测定HUVEC活性氧化物(ROS)生成量;光泽精增强的化学发光法测定HUVEC内还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性;蛋白质印迹法测定HUVECs内NADPH氧化酶p47phox亚基在胞质、胞膜表达。所有结果均以对照组相对表达量描述,以重复测量方差分析和最小显著性差异检验(LSD)进行统计学分析。结果不同浓度和作用时间尿酸可以刺激HUVEC生成ROS(F=7.286,F=4.532,P均〈0.05),与空白对照组(100±11)比较,80mg/L(177±18)、120mg/L(226±29)、160mg/L(225±16)尿酸组ROS生成量显著升高(t=4.127,t=7.591,t=7.236,P均〈0.05),与基线(100±8)比较,3h(143±16)、6h(140±17)、12h(183±20)、24h(240±29)、48h(160±22)时间点ROS生成量显著升高(t=3.688,t=3.513,t=4.526,t=8.269,t=3.829,P均〈0.05);不同浓度、不同时间LXA4可以抑制ROS生成(F=4.008,F=4.497,P均〈0.05),与0nmol/L(202±20)比较,10nmol/L(162±16)、100nmol/L(132±15)LXA4可以明显抑制ROS生成(t=3.712,t=4.083,P均〈0.05),与0min(269±39)比较,LXA4预处理15min(160±16)、30rain(158±21)、1h(136±13)、2h(140±13)后ROS生成量显著下降(t=6.373,t=6.426,t=7.125,t=6.981,P均〈0.05);与尿酸组(252±31)比较,LXA4+尿酸组(145±29)、DPI+尿酸组(154±27)ROS生成量显著降低(t=6.356,t=5.853,P均〈0.05),而Rot+尿酸组(241±32)无明显改变(f=1.027,P〉0.05);在NADPH氧化酶活性比较� 展开更多
关键词 脂氧素类 尿酸 脐静脉 内皮细胞 氧化性应激 活性氧
NADPH对人脐静脉内皮细胞缺糖缺氧复灌损伤早期的保护作用 预览
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作者 宋琪 翁晓芬 +3 位作者 董婷 许莉敏 谢燕 秦正红 《天津医药》 CAS 2017年第9期907-911,共5页
目的 探讨还原型辅酶Ⅱ(NADPH)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺糖缺氧复灌(OGD/R)损伤早期的保护作用及其对occludin、基质金属蛋白酶(MMP)9蛋白表达的影响.方法 体外培养HUVECs系,建立稳定的HUVECs缺糖缺氧复灌损伤模型,实验分3... 目的 探讨还原型辅酶Ⅱ(NADPH)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺糖缺氧复灌(OGD/R)损伤早期的保护作用及其对occludin、基质金属蛋白酶(MMP)9蛋白表达的影响.方法 体外培养HUVECs系,建立稳定的HUVECs缺糖缺氧复灌损伤模型,实验分3组:正常对照组、缺糖缺氧复灌组、缺糖缺氧复灌+NADPH组.细胞增殖试剂盒(CCK-8法)检测HUVECs活力;细胞毒性试剂盒检测HUVECs内乳酸脱氢酶(LDH)释放;倒置显微镜观察HUVECs形态变化;比色法检测HUVECs裂解液中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量;Western Blot法检测各组occludin、MMP9蛋白的表达.结果 与缺糖缺氧复灌组比,NADPH处理可提高缺糖缺氧复灌损伤后HUVECs的存活率(P〈0.05),减少损伤后HUVECs中LDH释放(P〈0.05),促进HUVECs形态的恢复,减少MDA生成(P〈0.05),提高SOD活力(P〈0.05);缺糖缺氧复灌处理后,给予NADPH处理可抑制MMP9水平上调(P〈0.05),促进occludin水平恢复(P〈0.05).结论 NADPH对HUVECs具有保护作用,其保护作用与抑制氧化应激反应,调节MMP9、occludin蛋白的表达有关. 展开更多
关键词 内皮细胞 脐静脉 氧化性应激 基质金属蛋白酶9 缺糖缺氧复灌 matrix METALLOPROTEINASE 9
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β-雌二醇对人脐血管收缩的调节作用 被引量:1
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作者 何芸 杨玉贤 +3 位作者 竺迪 吴蕾 徐智策 高芹芹 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 2016年第11期855-860,共6页
目的 探讨β-雌二醇对人脐血管收缩功能的影响及其相关机制。方法 收集2013年12月至2015年6月在苏州大学附属第一医院出生的足月新生儿的脐带,排除多胎妊娠、妊娠合并症、剖宫产、低出生体重儿,共96例。将脐带标本分离出脐动、静脉,... 目的 探讨β-雌二醇对人脐血管收缩功能的影响及其相关机制。方法 收集2013年12月至2015年6月在苏州大学附属第一医院出生的足月新生儿的脐带,排除多胎妊娠、妊娠合并症、剖宫产、低出生体重儿,共96例。将脐带标本分离出脐动、静脉,剪成3~5 mm的血管环,分别置于37 ℃、含5 ml Krebs溶液的血管浴槽内,行血管功能试验。根据是否孵育β-雌二醇,作为β-雌二醇组及对照组。研究β-雌二醇对去氧肾上腺素诱导的人脐血管收缩的调节作用,并通过孵育一氧化氮合成酶阻断剂L-单甲基精氨酸(Nω-nitro-L-arginine,L-NMMA)、氟维司群(雌激素受体阻断剂)、吲哚美辛(前列腺素类合成阻断剂),以及去除血管内皮或加入累积浓度佛波醇酯(蛋白激酶C激动剂),分别从血管内皮功能及雌激素受体、蛋白激酶C及前列环素的影响等方面,探讨β-雌二醇对脐动、静脉的调节作用及其机制。对数据进行非线性回归并拟合曲线,采用两样本均数的双因素方差分析。结果(1)脐动、静脉对去氧肾上腺素均有剂量依赖性收缩反应,对照组最大收缩强度分别为氯化钾引起平均收缩强度的(59.17±5.98)%和(43.35±5.02)%,β-雌二醇组则分别为氯化钾的(5.87±1.32)%和(4.52±1.22)%。孵育β-雌二醇使人脐动、静脉对去氧肾上腺素收缩反应曲线右移。(2)在对照组和β-雌二醇组,孵育L-NMMA或者去除内皮,均可增大脐静脉和动脉由去氧肾上腺素所诱导的收缩反应,且这一幅度的差异有统计学意义,但在对照组和β-雌二醇组孵育L-NMMA或者去除内皮后,去氧肾上腺素诱导的收缩反应增加的幅度的差值无统计学差异。(3)不论是否孵育氟维司群,β-雌二醇组对脐静脉及脐动脉对去氧肾上腺素的收缩反应差异无统计学意义(P值均〉0.05),表明抑制并未明显减弱。(4)β-雌 展开更多
关键词 脐动脉 脐静脉 血管收缩 雌二醇
CD151促进Rac/cdc42信号通路激活并维持体外血管生成的稳定性 预览 被引量:1
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作者 刘涛 李鹏程 +2 位作者 刘照宇 刘正湘 左后娟 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第24期3313-3315,共3页
目的 探讨CD151及其QRD突变体对Rac/cdc42信号通路和体外血管生成的稳定性影响及机制。方法 脂质体介导质粒(pAAV-CD151、pAAV-CD151-QRD、pAAV-anti-CD151)转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),将HUVECs细胞分为对照组、CD151组、CD151-QR... 目的 探讨CD151及其QRD突变体对Rac/cdc42信号通路和体外血管生成的稳定性影响及机制。方法 脂质体介导质粒(pAAV-CD151、pAAV-CD151-QRD、pAAV-anti-CD151)转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),将HUVECs细胞分为对照组、CD151组、CD151-QRD组,anti-CD151 4组,分别取各个不同时间点评价Matrigel上的各组管腔血管形成能力及新生血管的稳定性。Western blot法检测各组CD151蛋白表达,以及Rac和cdc 42信号通路蛋白表达。结果 CD151组内皮细胞CD151表达(1.86±0.15)明显高于对照组(0.90±0.06),差异有统计学意义(P〈0.01);CD151-QRD组(1.75±0.16)与CD151组相比CD151蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05),但anti-CD151组蛋白表达(0.51±0.06)明显下降。在12hMatrigel上CD151及其他各组之间血管生成比较差异无统计学意义(P〉0.05)。36h时,各组血管生成有区别。72h,CD151组Matrigel上血管生成明显高于其他各组,其他各组生成的血管不能维持。CD151高表达促进cdc 42,Rac蛋白表达增加,CD151-QRD组、anti-CD151组蛋白表达则较CD151组下降。结论 CD151促进Rac和cdc 42信号通路激活,促进体外血管生成并可维持生成血管的稳定性。 展开更多
关键词 CD151 脐静脉 内皮细胞 血管生成 血管稳定性
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梅毒螺旋体膜蛋白Tpp47通过RhoA/ROCK信号通路调控血管内皮细胞通透性
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作者 张瑞丽 王千秋 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期21-25,共5页
目的 探讨梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47对血管内皮细胞通透性影响的调控机制。 方法 用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)构建细胞单层模型,重组蛋白Tpp47(rTpp47)直接与HUVEC单层模型混合培养,或RhoA/ROCK信号通路特异性抑制剂Y-27632预处... 目的 探讨梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47对血管内皮细胞通透性影响的调控机制。 方法 用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)构建细胞单层模型,重组蛋白Tpp47(rTpp47)直接与HUVEC单层模型混合培养,或RhoA/ROCK信号通路特异性抑制剂Y-27632预处理后再用rTpp47刺激HUVEC单层模型,以煮沸灭活的rTpp47处理HUVEC单层模型为阴性对照组,采用ELISA检测各组培养1、4 h时辣根过氧化物酶(HRP)流量,培养12 h用荧光染料罗丹明-鬼笔环肽染色细胞骨架系统,共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F肌动蛋白排列变化。用Western 印迹检测rTpp47与煮沸灭活的rTpp47分别处理HUVEC单层模型后细胞RhoA的表达水平。 结果 rTpp47刺激HUVEC单层模型1 h时HRP流量(0.81 ± 0.10)高于阴性对照组(0.39 ± 0.09),差异有统计学意义(P 〈 0.05),而此时Y-27632预处理组HRP流量(0.51 ± 0.10)与单用rTpp47刺激组及阴性对照组相比,差异无统计学意义(均P 〉 0.05)。培养4 h时,单用rTpp47刺激组HRP流量显著增加(2.31 ± 0.14),且高于Y-27632预处理组(1.21 ± 0.12)及阴性对照组(0.73 ± 0.12),差异有统计学意义(均P 〈 0.05),而Y-27632预处理组与阴性对照组之间差异无统计学意义。rTpp47刺激HUVEC后,与煮沸灭活的rTpp47作用HUVEC相比,细胞中RhoA表达增加。同时,rTpp47刺激细胞中骨架蛋白F肌动蛋白重排,在胞质中形成应力纤维,抑制剂Y-27632可部分抑制F肌动蛋白重排。 结论 梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47可通过RhoA/ROCK信号转导通路调控血管内皮细胞通透性。 展开更多
关键词 苍白密螺旋体 内皮 血管 通透性 脐静脉 肌动蛋白 Tpp47 RhoA/ROCK信号通路
肿瘤坏死因子-α预处理人脐带间充质干细胞的条件培养基对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡的影响 预览 被引量:1
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作者 聂顺义 周彪 +3 位作者 巴特 屠华雷 马双飞 李武 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2016年第6期共5页
目的:探讨100 ng/mL 肿瘤坏死因子-α( TNF-α)预处理人脐带间充质干细胞(hUCMSC)的条件培养基对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、凋亡的影响。方法本实验按随机数字表法将HUVEC 分为对照组、条件培养基组和预处理条件培养基组。... 目的:探讨100 ng/mL 肿瘤坏死因子-α( TNF-α)预处理人脐带间充质干细胞(hUCMSC)的条件培养基对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、凋亡的影响。方法本实验按随机数字表法将HUVEC 分为对照组、条件培养基组和预处理条件培养基组。首先使用含有100 ng/mL TNF-α的内皮细胞培养基刺激HUVEC 12 h后,对照组更换为原培养基,条件培养基组则更换为hUCMSC的条件培养基,以及预处理条件培养基组更换为TNF-α预处理hUCMSC的条件培养基。采用MTT法测定HUVEC 的增殖活性,流式细胞仪检测细胞的增殖周期,AO-EB染色和流式细胞仪定性、定量检测细胞的凋亡情况。数据比较采用重复测量方差分析。结果 MTT的检测结果提示,在培养24、48、72 h时,对照组细胞的吸光度值是0.51、0.43、0.32,而条件培养基组和预处理条件培养基组吸光度值是0.56、0.51、0.45和0.59、0.56、0.52。流式细胞仪检测细胞增殖周期( G2/M+S期)的结果示:在培养24、48和72 h 时,对照组细胞处于 G2/M +S 期的比例是(22.34±1.03)%、(10.66±1.07)%、(9.58±0.82)%,而条件培养基组和预处理条件培养基组处于G2/M+S期的比例则分别是(27.95±1.85)%、(18.59±1.48)%、(13.02±1.91)%和(31.17±1.29)%、(22.44±2.28)%、(16.28±1.11)%,3组比较差异有统计学意义(F=58.793,P<0.05)。此外,流式细胞仪定性检测结果表明:在培养24、48和72 h时,对照组细胞的凋亡率是(18.95±1.01)%、(16.66±1.51)%、(11.37±1.01)%,而条件培养基组和预处理条件培养基组细胞的凋亡率分别是(12.04±1.13)%、(10.88±1.39)%、(6.88±1.63)%和(8.16±1.44)%、(6.97±1.34)%、(2.97±1.44)%,3组比较差异有统计学意义( F=119.372,P� 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子Α 间质干细胞 脐静脉 内皮细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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微小RNA-145调控解整合素金属蛋白酶17对内皮细胞间质转化的影响 预览
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作者 李雪 王涛 李伟红 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2015年第10期1083-1086,共4页
目的探讨微小RNA-145(miR-145)对解整合素金属蛋白酶17(ADAMl7)的调控作用及其对人脐静脉内皮细胞(HuVEC)间质转化的影响。方法培养的HuVEC用转化生长因子p1(TGF—p1)诱导,免疫荧光化学检测钙粘蛋白和a平滑肌肌动蛋白(α-sMA... 目的探讨微小RNA-145(miR-145)对解整合素金属蛋白酶17(ADAMl7)的调控作用及其对人脐静脉内皮细胞(HuVEC)间质转化的影响。方法培养的HuVEC用转化生长因子p1(TGF—p1)诱导,免疫荧光化学检测钙粘蛋白和a平滑肌肌动蛋白(α-sMA)的表达。生物信息学方法预测miR-145和ADAMl7基因的靶向匹配关系,并应用双荧光素酶报告基因系统鉴定。将HUVEC分为contr01组、TGFB1组以及转染miR-145模拟物的mimics组,RT—PCR和Western blot检测miR-145、ADAM17及钙粘蛋白和a-SMA的表达。结果miR-145和ADAMl7基因匹配良好;mimics组荧光素酶表达水平明显低于control组[(50.96±6.02)%VS(100.00±0)%,P〈0.05];与TGF-β1组比较,mimics组ADAM17和a—SMA基N和蛋白表达下降,而钙粘蛋白基N和蛋白表达上调(P〈0.05)。结论miR-145负性调控ADAM17表达能够抑制间质转化过程。 展开更多
关键词 微RNAS 整合素类 基质金属蛋白酶17 脐静脉 内皮细胞 转化生长因子Β1
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元素硫腐蚀研究进展 预览 被引量:2
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作者 崔丽丽 余芳芳 左丽 《贵阳医学院学报》 CAS 2015年第1期20-23,共4页
简述了油气田元素硫沉积的危害及元素硫腐蚀评价方法,综述了元素硫腐蚀行为的研究进展和元素硫腐蚀机理。研究发现,元素硫的沉积将会对采、输管道造成严重腐蚀,尤其是点蚀;在现有的4种元素硫腐蚀评价方法中,硫涂敷法能较好模拟现场元素... 简述了油气田元素硫沉积的危害及元素硫腐蚀评价方法,综述了元素硫腐蚀行为的研究进展和元素硫腐蚀机理。研究发现,元素硫的沉积将会对采、输管道造成严重腐蚀,尤其是点蚀;在现有的4种元素硫腐蚀评价方法中,硫涂敷法能较好模拟现场元素硫的腐蚀状况,悬浮溶液中的腐蚀速率尽管最小,但点蚀严重;元素硫不仅促进了油套管钢的腐蚀,而且增大了镍基合金发生应力腐蚀开裂(SCC)的敏感性;元素硫因所接触的介质以及环境条件的不同导致反应后的溶液组分各异,腐蚀机理也不同。最后,对今后的研究工作进行了展望。 展开更多
关键词 元素硫 点蚀 SCC 腐蚀机理 歧化反应
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