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基于耐药特性联合单细胞培养识别肝癌干细胞克隆亚群 被引量:1
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作者 陈娟 区泳芳 +3 位作者 蔡捷 陶璐 陈相宜 邝晓聪 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期319-326,共8页
目的:基于癌干细胞的耐药特性联合单细胞培养方法识别肝癌干细胞所在的克隆亚群.方法:以BEL-7404细胞系为研究对象,裸鼠体内移植瘤形成实验,并予阿霉素(adriamycin,ADM)8 mg/kg干预,待肿瘤直径为1.5 cm时取移植瘤细胞做原代培养,并... 目的:基于癌干细胞的耐药特性联合单细胞培养方法识别肝癌干细胞所在的克隆亚群.方法:以BEL-7404细胞系为研究对象,裸鼠体内移植瘤形成实验,并予阿霉素(adriamycin,ADM)8 mg/kg干预,待肿瘤直径为1.5 cm时取移植瘤细胞做原代培养,并在裸鼠体内连续传代4代,并将第4代移植瘤细胞命名为"BEL-7404-ADM-P4",根据成瘤时间检测肝癌干细胞富集情况.联合单细胞培养,取BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4所形成的克隆根据克隆形态分为全克隆、部分克隆、旁克隆,检测BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆的癌干特性,即增殖能力、克隆形成率及悬浮球形成率;取其全克隆、部分克隆、旁克隆做hoechst33342染色,并在共聚焦显微镜下观察其染色情况;根据BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆的增殖能力、克隆形成率及悬浮球形成率以及hoechst33342染色情况识别癌干细胞所在的克隆亚群.结果:裸鼠体内低剂量阿霉素干预,在体内连续成瘤传代过程中,裸鼠皮下移植瘤成瘤率均为100%,且成瘤时间从第一代到第四代均有所缩短,以此达到了肝癌干细胞的初步富集;增殖能力:全克隆增殖速度最快,细胞量最大,部分克隆次之,旁克隆增殖速度最慢,并于第10天开始出现细胞皱缩死亡;克隆形成率:BEL-7404-ADM-P4-H高于BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4-M,差异有统计学意义(P〈0.05);悬浮球形成率:仅BEL-7404-H及BEL-7404-ADM-P4-H可形成悬浮球,其余细胞系不形成悬浮球,而BEL-7404-H及BEL-7404-ADM-P4-H悬浮球形成率比较,无统计学意义(P〉0.05);BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆hoechst33342染色情况:BEL-7404及BEL-7404-A D M-P4单克隆中全克隆都有极少数不染和低染的细胞存在,但部分克隆、旁克隆全染,且BEL-7404单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆hoechst33342荧光强度均强� 展开更多
关键词 阿霉素干预 肝癌干细胞 单细胞培养 全克隆 部分克隆 旁克隆
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冬凌草愈伤组织诱导及细胞培养的研究 预览 被引量:12
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作者 李景原 王太霞 +2 位作者 杨相甫 张晋豫 李贺敏 《中草药》 CAS 北大核心 2000年第12期 938-941,共4页
用组织培养、细胞悬浮培养和单细胞平板培养技术,诱导出冬凌草愈伤组织,并探讨了细胞悬浮培养时间、培养方法和接种密度对冬凌草单细胞平板培养植板率的影响。结果表明:从冬凌草叶和嫩茎诱导愈伤组织,以MS+2,4-D 1mg/L+NAA 0.5mg... 用组织培养、细胞悬浮培养和单细胞平板培养技术,诱导出冬凌草愈伤组织,并探讨了细胞悬浮培养时间、培养方法和接种密度对冬凌草单细胞平板培养植板率的影响。结果表明:从冬凌草叶和嫩茎诱导愈伤组织,以MS+2,4-D 1mg/L+NAA 0.5mg/L培养基较好,愈伤组织诱导率高达96.80%。用普通单细胞平板培养法培养冬凌草单细胞的植板率很低,而以悬浮培养15~18d的单细胞为材料,接种密度为5×10^3个/毫升时,进行条件培养和看护培养,植板率达21.63%。本研究结果可供利用细胞培养技术筛选冬凌草高产冬凌草素细胞株时参考。 展开更多
关键词 冬凌草 愈伤组织 细胞培养 中医药疗法 组织培养 细胞悬浮培养
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