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Beclin-1和bcl-2蛋白对前列腺癌的发生、进展的作用 被引量:1
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作者 刘涛 张璐 张凡 《现代医学》 2018年第2期157-161,共5页
目的:探讨前列腺癌组织beclin-1和bcl-2蛋白表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学染色检测75例前列腺癌患者(PC组)、40例前列腺高级别上皮内瘤变患者(HGPIN组)和40例前列腺增生患者(BPH组)组织beclin-1、bcl-2蛋白表达,比较be... 目的:探讨前列腺癌组织beclin-1和bcl-2蛋白表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学染色检测75例前列腺癌患者(PC组)、40例前列腺高级别上皮内瘤变患者(HGPIN组)和40例前列腺增生患者(BPH组)组织beclin-1、bcl-2蛋白表达,比较beclin-1、bcl-2与前列腺癌患者临床资料的关系。结果:PC组beclin-1蛋白阳性表达率为54.7%(41/75),HGPIN组为67.5%(27/40),BPH组为92.5%(37/40),PC组beclin-1蛋白阳性表达率明显低于HGPIN组和BPH组,差异具有统计学意义(P〈0.05),前列腺癌Gleason评分越高,beclin-1阳性率越低,bcl-2阳性率越高,差异具有统计学意义(P〈0.05);TNM分期越高,beclin-1阳性率越低,bcl-2阳性率越高,差异具有统计学意义(P〈0.05)。前列腺癌组织beclin-1表达与bcl-2呈显著负相关(r=-0.241,P〈0.05)。结论:前列腺癌中beclin-1基因缺失,bcl-2基因高表达,beclin-1/bcl-2共同参与了前列腺癌的发生和进展。 展开更多
关键词 前列腺癌 前列腺高级别上皮内瘤变 前列腺增生 自噬基因 凋亡基因
Interleukin-22 ameliorates acute severe pancreatitisassociated lung injury in mice
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作者 Ying-Ying Qiao Xiao-Qin Liu +2 位作者 Chang-Qin Xu Zheng Zhang Hong-Wei Xu 《世界胃肠病学杂志:英文版》 SCIE CAS 2016年第21期5023-5032,共10页
AIM: To investigate the potential protective effect of exogenous recombinant interleukin-22(r IL-22) on L-arginine-induced acute severe pancreatitis(SAP)-associated lung injury and the possible signaling pathway invol... AIM: To investigate the potential protective effect of exogenous recombinant interleukin-22(r IL-22) on L-arginine-induced acute severe pancreatitis(SAP)-associated lung injury and the possible signaling pathway involved.METHODS: Balb/c mice were injected intraperitoneally with L-arginine to induce SAP. Recombinant mouse IL-22 was then administered subcutaneously to mice. Serum amylase levels and myeloperoxidase(MPO) activity in the lung tissue were measured after the L-arginine administration. Histopathology of the pancreas and lung was evaluated by hematoxylin and eosin(HE) staining. Expression of B cell lymphoma/leukemia-2(Bcl-2), Bcl-x L and IL-22RA1 mRNAs in the lung tissue was detected by real-time PCR. Expression and phosphorylation of STAT3 were analyzed by Western blot. RESULTS: Serum amylase levels and MPO activity in the lung tissue in the SAP group were significantly higher than those in the normal control group(P < 0.05). In addition, the animals in the SAP group showed significant pancreatic and lung injuries. The expression of Bcl-2 and Bcl-x L mRNAs in the SAP group was decreased markedly, while the IL-22RA1 mRNA expression was increased significantly relative to the normal control group(P < 0.05). Pretreatment with PBS did not significantly affect the serum amylase levels, MPO activity or expression of Bcl-2, Bcl-x L or IL-22RA1 mRNA(P > 0.05). Moreover, no significant differences in the degrees of pancreatic and lung injuries were observed between the PBS and SAP groups. However, the serum amylase levels and lung tissue MPO activity in the r IL-22 group were significantly lower than those in the SAP group(P < 0.05), and the injuries in the pancreas and lung were also improved. Compared with the PBS group, r IL-22 stimulated the expression of Bcl-2, Bcl-x L and IL-22RA1 mRNAs in the lung(P < 0.05). In addition, the ratio of p-STAT3 to STAT3 protein in the r IL-22 group was significantly higher than that in the PBS group(P < 0.05).CONCLUSION: Exogenous recombinant IL-22 protects mice against L-arg 展开更多
关键词 INTERLEUKIN-22 Acute SEVERE PANCREATITIS Lung injury ANTI-APOPTOSIS gene Signal TRANSDUCER and activ
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人造抗瘤活性肽的构建及其抗瘤作用
3
作者 王艳艳 李志强 +2 位作者 刘彤 常凯 熊杰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3255-3259,共5页
通过构建融合RGD肽的NF-κB抑制肽,获取新型抗瘤融合肽,研究其抗肿瘤效果。构建人造抗瘤活性肽pEGFP-C1-ARP表达载体,转染COS7细胞,获取人造抗瘤活性肽,利用Western blotting法检测PC-3M细胞A20、Bcl2、CCND1;通过观察ARP对荷人... 通过构建融合RGD肽的NF-κB抑制肽,获取新型抗瘤融合肽,研究其抗肿瘤效果。构建人造抗瘤活性肽pEGFP-C1-ARP表达载体,转染COS7细胞,获取人造抗瘤活性肽,利用Western blotting法检测PC-3M细胞A20、Bcl2、CCND1;通过观察ARP对荷人前列腺癌PC-3M裸鼠肿瘤抑制实验,研究人造抗瘤活性肽的抗肿瘤效果。限制性内切酶酶切鉴定与DNA测序证实合成人造抗瘤活性肽真核载体寡核苷酸链插入正确。Western blotting检测结果表明转染后PC-3M细胞A20蛋白表达增加。并抑制凋亡抑制基因Bcl2的表达,动物实验证实人造抗瘤活性肽可显著抑制肿瘤生长。本研究成功构建人造抗瘤活性肽,其对肿瘤细胞具有明显的消除效应。 展开更多
关键词 人造抗瘤活性肽 核因子-ΚB 前列腺癌 凋亡抑制基因 裸鼠
A20突变体对前列腺癌细胞炎症反应因子及凋亡抑制基因表达的影响 被引量:1
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作者 王艳艳 但刚 +1 位作者 胡宗海 吴丽娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期50-54,共5页
目的通过构建A20突变体真核载体,获取A20突变体,研究其对前列腺癌细胞PC-3M细胞炎症反应因子及凋亡抑制基因表达的影响。方法构建A20突变体pEGFP-C1表达载体,提取质粒,限制性内切酶酶切鉴定并测序。质粒DNA转染COS7细胞,用LPS诱导PC-3M... 目的通过构建A20突变体真核载体,获取A20突变体,研究其对前列腺癌细胞PC-3M细胞炎症反应因子及凋亡抑制基因表达的影响。方法构建A20突变体pEGFP-C1表达载体,提取质粒,限制性内切酶酶切鉴定并测序。质粒DNA转染COS7细胞,用LPS诱导PC-3M细胞产生炎症反应,利用Western blot法检测PC-3M细胞A20,IκB-α、pERK1/ERK2、pJNK、Bcl-2;利用ELISA检测NF-κB、TNF-α、IL-6等的水平。结果限制性内切酶酶切鉴定与DNA测序证实合成A20突变体真核载体寡核苷酸链插入正确。Western blot检测结果表明转染后PC-3M细胞A20蛋白表达显著增。A20突变体抑制IκB-α的降解,ERK1/ERK2、JNK磷酸化及凋亡抑制基因Bcl-2的表达。ELISA法检测结果表明,A20突变体能显著抑制NF-κB、TNF-α、IL-6的表达(P〈0.05,P〈0.01)。结论成功构建人A20突变体真核表达载体,A20突变能抑制炎症反应因子及凋亡抑制基因。 展开更多
关键词 A20突变体 核因子ΚB 前列腺癌 炎症反应因子 凋亡抑制基因
牛蒡子苷元对小鼠红白血病FBL-3细胞凋亡的影响及相关机制 被引量:2
5
作者 钱茜 崔静 +2 位作者 吴余 付琳琳 王虹 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期1895-1897,共3页
目的探讨牛蒡子苷元对小鼠红白血病细胞株FBL-3细胞凋亡的影响及机制。方法以小鼠红白血病FBL-3细胞为研究对象,以不加药的FBL-3细胞为对照组,20mg/L牛蒡子苷元处理24h的FBL-3细胞为实验组。通过琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术观察牛蒡... 目的探讨牛蒡子苷元对小鼠红白血病细胞株FBL-3细胞凋亡的影响及机制。方法以小鼠红白血病FBL-3细胞为研究对象,以不加药的FBL-3细胞为对照组,20mg/L牛蒡子苷元处理24h的FBL-3细胞为实验组。通过琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术观察牛蒡子苷元对小鼠红白血病FBL一3细胞凋亡的影响,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测牛蒡子苷元处理前后FBL-3细胞凋亡相关基因表达的变化。结果电泳结果显示,与对照组相比,实验组可见明显的DNA“梯子”样断裂变化。流式细胞仪结果显示,与对照组相比,实验组细胞凋亡数量明显增加(t=60.681,P=0.000)。RT—PCR结果显示,与对照组相比,实验组细胞抗凋亡基因Bcl-2和lAP-J表达显著下调(t=14.732、29.702,P均=0.000),而Bcl—XL表达没有明显变化(t=0.209,P=0.844);促凋亡基因Box和Smac表达明显上调(t=6.721、8.499,P=0.003、0.001)。结论牛蒡子苷元可诱导FBL-3细胞凋亡,其机制可能与抗凋亡基因Bcl-2租IAP-J表达下调及促凋亡基因bax和Smac表达上调有关。 展开更多
关键词 牛蒡子苷元 白血病 凋亡 抗凋亡基因 促凋亡基因
虹鳟抗细胞凋亡因子(DAD1)基因全长cDNA克隆与进化分析 预览
6
作者 王家庆 李振刚 +3 位作者 马爽 李代宗 王虹玲 王亮 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期113-119,共7页
抗细胞凋亡因子1(Defenderagainstcelldeath1,DAD1)是内质网内膜上糖基转移酶复合体亚基之一。本文通过RT—PCR及RACE技术从虹鳟脑组织中克隆到DAD1基因cDNA全长序列(GenBank登录号:FJ849061)。该基因包括88bp5'-UTR、292bp 3'-... 抗细胞凋亡因子1(Defenderagainstcelldeath1,DAD1)是内质网内膜上糖基转移酶复合体亚基之一。本文通过RT—PCR及RACE技术从虹鳟脑组织中克隆到DAD1基因cDNA全长序列(GenBank登录号:FJ849061)。该基因包括88bp5'-UTR、292bp 3'-UTR以及342bp开放阅读框(ORF)。该基因编码113个氨基酸,存在三个明显跨膜区。无信号肽序列。通过蛋白序列比对显示虹鳟DAD1蛋白序列与大西洋鲑、白斑狗鱼、斑马鱼以及裸盖鱼同源性均在90%以上。系统发育分析显示DAD1蛋白主要聚成两个群:脊椎动物DAD1群与无脊椎动物DAD1群。虹鳟DAD1与大西洋鲑DAD1蛋白亲源关系最近。 展开更多
关键词 虹鳟 抗细胞凋亡因子 基因克隆 进化分析
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凋亡抑制基因Survivin在胰腺癌中的研究进展 预览 被引量:8
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作者 徐冬(综述) 许利剑(审校) 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第3期319-322,共4页
肿瘤的发生不仅与细胞的增殖和异常分化有关,也和细胞凋亡异常有关。Survivin是凋亡抑制蛋白家族(inhibi-tot of apoptosis protein, IAP)的重要成员,它抑制细胞凋亡并在细胞分化中起重要作用。它在分化正常的细胞或组织中较少表达... 肿瘤的发生不仅与细胞的增殖和异常分化有关,也和细胞凋亡异常有关。Survivin是凋亡抑制蛋白家族(inhibi-tot of apoptosis protein, IAP)的重要成员,它抑制细胞凋亡并在细胞分化中起重要作用。它在分化正常的细胞或组织中较少表达,但在肿瘤中大量表达;该基因可促使肿瘤组织生长,提高肿瘤组织的化疗耐药性并降低患者生存率,阻断其表达可以促进细胞凋亡并抑制肿瘤生长。因此,Survivin已作为肿瘤治疗的一种新靶点而被广泛研究。文中对Survivin在胰腺癌中的研究进展情况作一综述。 展开更多
关键词 SURVIVIN 胰腺癌 凋亡抑制基因
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黄芪甲甙在Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎中抗凋亡作用的机制 预览 被引量:13
8
作者 罗永姣 邓晖 +1 位作者 李双杰 杜九中 《南华大学学报:医学版》 2010年第3期 328-331,共4页
目的观察黄芪甲甙对Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的影响,探讨黄芪甲甙抗心肌细胞凋亡的可能机制。方法 Balb/C小鼠50只随机分5组(每组10只)。空白对照组:腹腔无菌注射不含病毒的Eagle’s培养基0.1 mL,在腹腔注射病毒培养... 目的观察黄芪甲甙对Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的影响,探讨黄芪甲甙抗心肌细胞凋亡的可能机制。方法 Balb/C小鼠50只随机分5组(每组10只)。空白对照组:腹腔无菌注射不含病毒的Eagle’s培养基0.1 mL,在腹腔注射病毒培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7天;病毒性心肌炎对照组:小鼠每只腹腔注射0.1 mL内含1×105TCID50CVB3的Eagle’s培养基,在腹腔注射含病毒的Eagle’s培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7天;黄芪甲甙低、中、高剂量干预组:在腹腔注射病毒30 min后,用黄芪甲甙[具体剂量分别为0.07、0.2、0.6 mg/(kg.d)]0.1 mL灌胃,共7天。采用缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌凋亡细胞,免疫组织化学检测Bcl-2、Bax蛋白的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bcl-2、Bax基因的表达,并利用图像分析系统测量平均光密度值进行半定量分析。结果与空白对照组比较,病毒性心肌炎对照组心肌细胞凋亡发生率增高;抑制凋亡因子Bcl-2基因及蛋白表达下降,而促进凋亡因子Bax基因及蛋白表达增强,Bcl-2/Bax mRNA比值降低。与病毒性心肌炎对照组比较,黄芪甲甙高剂量干预组能降低CVB3病毒性心肌炎心肌细胞的凋亡指数,Bcl-2基因及蛋白水平表达增强,Bax基因及蛋白水平表达下降。结论黄芪甲甙在Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎中抗凋亡作用机制可能是促进了抑制凋亡基因Bcl-2表达,抑制了促凋亡Bax基因表达。 展开更多
关键词 黄芪甲甙 抗凋亡 病毒性心肌炎 Bcl-2基因 BAX基因
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凋亡抑制蛋白XIAP、Survivin在子宫颈癌组织中的表达及意义
9
作者 张珍 周晖 +2 位作者 陆晓楣 卢淮武 林仲秋 《岭南急诊医学杂志》 2010年第2期102-104,共3页
目的:比较正常宫颈及宫颈癌组织中凋亡抑制基因XIAP、Survivin的表达,探讨其与宫颈癌发生、发展的关系。方法:应用RT-PCIR方法,在20例宫颈癌及癌旁组织中检测XIAP、Survivin的表达情况。结果:Survivin在宫颈癌旁组织中表达阳性率... 目的:比较正常宫颈及宫颈癌组织中凋亡抑制基因XIAP、Survivin的表达,探讨其与宫颈癌发生、发展的关系。方法:应用RT-PCIR方法,在20例宫颈癌及癌旁组织中检测XIAP、Survivin的表达情况。结果:Survivin在宫颈癌旁组织中表达阳性率为60%(12/20),在宫颈癌组织中Survivin阳性率为90%(18/20),SurvivinmRNA含量在两组中有显著差异(P〈0.05)。XIAP在宫颈癌组织和癌旁组织中表达相当,差异无统计学意义(P〉0.05)。宫颈癌SurvivinmRNA及XIAPmRNA表达与患者临床分期、淋巴结转移、组织分化程度均无显著关系。结论:Survivin可能通过抑制细胞凋亡对宫颈癌的发生、发展起重要作用。 展开更多
关键词 子宫颈癌 凋亡抑制蛋白 人乳头瘤病毒
坐骨神经缺损后神经组织再生早期信号调控研究 预览 被引量:1
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作者 王勇军 汤欣 +5 位作者 于彬 顾芸 李石营 姚登兵 丁斐 顾晓松 《交通医学》 2010年第6期 589-591,595,F0004,共5页
目的:采用基因芯片技术结合信号传递调控网络(Signal-Flow)分析技术,探讨坐骨神经缺损近端神经组织早期分子信号调控机理。方法:SD大鼠坐骨神经缺损0h、0.5h、1h、3h、6h和9h后,取0.5cm近端神经组织进行mRNA芯片检测,进行差异基因... 目的:采用基因芯片技术结合信号传递调控网络(Signal-Flow)分析技术,探讨坐骨神经缺损近端神经组织早期分子信号调控机理。方法:SD大鼠坐骨神经缺损0h、0.5h、1h、3h、6h和9h后,取0.5cm近端神经组织进行mRNA芯片检测,进行差异基因的筛选和信号传递调控网络分析,并采用qRT-PCR对相关基因行表达趋势验证。结果:共筛选差异显著性基因2850个,抗凋亡相关因子和紧密连接蛋白等构成信号传递调控网络的核心部分。Birc2、Birc3和Tnfrsf1a早期上调抑制凋亡相关基因,紧密连接蛋白cldn14促进与其家族成员的结合。结论:抗凋亡因子和紧密连接蛋白可能是坐骨神经缺损后神经组织再生的内在早期调控分子,推测与神经组织损伤后内在的再生能力调控机制相关。 展开更多
关键词 神经缺损 抗凋亡 紧密连接蛋白 信号传递调控网络 施万细胞 逆转录聚合酶链反应 坐骨神经 SD大鼠
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细胞凋亡相关分子与肿瘤基因治疗 被引量:3
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作者 冯真真 夏海滨 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期705-710,共6页
细胞凋亡的过程涉及一系列凋亡相关分子的调控。这些凋亡相关分子在机体中的异常调节将导致包括肿瘤和免疫性疾病在内的多种疾病的发生。针对凋亡相关分子的治疗策略在肿瘤治疗中具有重要意义。本文以细胞凋亡相关分子及其在肿瘤基因治... 细胞凋亡的过程涉及一系列凋亡相关分子的调控。这些凋亡相关分子在机体中的异常调节将导致包括肿瘤和免疫性疾病在内的多种疾病的发生。针对凋亡相关分子的治疗策略在肿瘤治疗中具有重要意义。本文以细胞凋亡相关分子及其在肿瘤基因治疗中的应用研究做一综述,为肿瘤治疗提供新的策略。 展开更多
关键词 细胞凋亡 促凋亡蛋白 抑凋亡蛋白 肿瘤 基因治疗
抗凋亡基因livin在急性非淋巴细胞白血病细胞中的表达及临床意义 预览 被引量:7
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作者 王娴静 孙慧 +1 位作者 王桂叶 范清堂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期 35-37,共3页
为了探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)原代细胞livin基因表达及临床意义,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测46例急性非淋巴细胞白血病患者livin基因mRNA表达水平,以10名健康人为正常对照,以HL-60细胞株为阳性对照。结果表明,livin... 为了探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)原代细胞livin基因表达及临床意义,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测46例急性非淋巴细胞白血病患者livin基因mRNA表达水平,以10名健康人为正常对照,以HL-60细胞株为阳性对照。结果表明,livin mRNA在初治ANLL患者中的表达较正常对照组明显升高(p〈0.05);治疗缓解后表达明显下降(p〈0.05);复发后其表达又升高。在初治ANLL患者中,livin mRNA表达阳性的患者完全缓解率(CR)低于表达阴性的患者(p〈0.05)。结论:livin基因过度表达和ANLL的发病呈正相关;livin基因高表达的患者完全缓解率低,预后不良;livin可作为急性非淋巴细胞白血病的发病、复发及预后判断的指标之一。 展开更多
关键词 抗凋亡基因 LIVIN基因 急性非淋巴细胞白血病
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维生素E琥珀酸酯对人胃癌细胞中核因子及抗凋亡基因的影响
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作者 苑林宏 张岭 +1 位作者 赵艳 吴坤 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期556-560,564共6页
目的本研究以人胃癌SGC-7901细胞为肿瘤模型,在体外探讨维生素E琥珀酸酯(VES)在抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡过程中对NF—xB组成性激活及抗凋亡基因在转录水平上的调控作用。方法采用MTT法和AnnexinV法分别检测不同浓度水平VES处... 目的本研究以人胃癌SGC-7901细胞为肿瘤模型,在体外探讨维生素E琥珀酸酯(VES)在抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡过程中对NF—xB组成性激活及抗凋亡基因在转录水平上的调控作用。方法采用MTT法和AnnexinV法分别检测不同浓度水平VES处理人胃癌SGC-7901细胞后细胞的生长和凋亡情况。采用细胞成分分离法获得细胞核总蛋白,然后以Western blot法测定VES处理后核因子蛋白p65在细胞核总蛋白中的含量。用RT—PCR方法检测VEs对SGC-7901细胞中抗凋亡基因c—IAP1、c—IAP-2、NAPI、survivin、XIAP的转录调节作用。结果12.5~50.0μmolVES作用24h后,SGC-7901细胞的生长被明显抑制。50μmolVES作用于细胞12h后可诱导细胞发生凋亡,且作用48h后其凋亡诱导作用更明显。Westernblot结果发现,VES处理SGC-7901细胞后使细胞核内NF—MBp65蛋白的含量下降,即抑制了NF—MBp65向细胞核内的迁移。RT—PCR结果提示,VES处理胃癌细胞后可以在基因水平上抑制抗凋亡基因NAIP和survivin转录,对其他IAPs家族成员-c-IAP1、c—IAP-2、XIAP的转录无下调作用。结论VES对SGC-7901细胞内NF—MB组成性激活的调控作用及对抗凋亡基因在转录水平上的抑制作用可能是其抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞发生凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 维生素E琥珀酸酯 人胃癌细胞:核因子-κBp65 抗凋亡基因
凋亡抑制因子Survivin在大肠杆菌TB1中的表达纯化及鉴定 预览 被引量:1
14
作者 刘晔 张青云 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期 200-204,共5页
本文旨在克隆凋亡抑制因子Survivin基因,并在大肠杆菌中进行可溶性表达与初步纯化.采用RT.PCR法,扩增人凋亡抑制因子survivincDNA,并克隆入原核表达载体pMAL.p2X中,转化TB1大肠杆菌感受态细胞.经0.3mmol/LIPTG诱导2h后,收集... 本文旨在克隆凋亡抑制因子Survivin基因,并在大肠杆菌中进行可溶性表达与初步纯化.采用RT.PCR法,扩增人凋亡抑制因子survivincDNA,并克隆入原核表达载体pMAL.p2X中,转化TB1大肠杆菌感受态细胞.经0.3mmol/LIPTG诱导2h后,收集菌体蛋白,进行SDS-PAGE、ELISA及Western印迹鉴定.实验获得凋亡抑制因子survivin编码区cDNA,以构建的原核表达载体pMAL-p2X-survivin转化菌株后,可表达凋亡抑制因子survivin和麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白,相对分子质量(Mr)为58000.并成功利用Factorxa将融合蛋白裂解开.ELISA和Westem印迹表明,融合蛋白能与抗凋亡抑制因子survivin单克隆抗体特异性结合.获得的凋亡抑制因子survivin全长cDNA可在大肠杆菌TB1中以MBP-survivin融合蛋白的形式表达,成功地将survivin目的蛋白和MBP蛋白分离,为深入研究survivin的结构和功能奠定了基础. 展开更多
关键词 凋亡抑制因子 SURVIVIN 麦芽糖结合蛋白 pMAL-p2X 可溶性表达 纯化
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凋亡抑制基因Survivin在宫颈癌中的表达及其临床意义的研究 预览 被引量:4
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作者 韩风贤 张师前 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2007年第35期 5034-5036,共3页
目的:观察正常宫颈及宫颈癌组织中凋亡抑制基因Survivin的表达,探讨Survivin与宫颈癌发生、发展的关系。方法:用免疫组织化学法(S-P法)检测49例宫颈癌组织和40例正常宫颈组织中Survivin的表达。结果:Survivin在正常宫颈组织中阳... 目的:观察正常宫颈及宫颈癌组织中凋亡抑制基因Survivin的表达,探讨Survivin与宫颈癌发生、发展的关系。方法:用免疫组织化学法(S-P法)检测49例宫颈癌组织和40例正常宫颈组织中Survivin的表达。结果:Survivin在正常宫颈组织中阳性表达率10%(4/40),宫颈癌组织中Survivin的阳性率为83.7%(41/49),其在宫颈癌组织中阳性表达主要位于细胞浆,两组相比较有显著差异(P〈0.05),Ia期、Ib期、Ⅱa期宫颈癌Survivin的强阳性结果分别为11.1%、50%、85.6%(P〈0.05)。Survivin在宫颈癌中的高表达与临床分期、组织分化程度、淋巴转移呈正相关,与年龄、病理类型无明显相关关系。结论:凋亡抑制基因Survivin蛋白在宫颈癌的发生、发展中起一定作用,可以作为宫颈癌诊断、评价疗效、判定预后的重要指标之一。 展开更多
关键词 宫颈癌 凋亡抑制基因 SURVIVIN 免疫组化技术
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云母单体颗粒对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜癌相关基因蛋白表达的影响 预览 被引量:11
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作者 朱方石 姒健敏 +2 位作者 王良静 王冬飞 陈萍 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 312-316,共5页
目的:研究云母单体颗粒剂对实验性萎缩性胃炎大鼠癌相关基因表达的调控作用。方法:运用云母高、中、低3种不同剂量的单体颗粒剂,对实验性萎缩性胃炎大鼠进行了分组干预治疗,采用免疫组织化学方法的EnVision系统二步法,观察模型大... 目的:研究云母单体颗粒剂对实验性萎缩性胃炎大鼠癌相关基因表达的调控作用。方法:运用云母高、中、低3种不同剂量的单体颗粒剂,对实验性萎缩性胃炎大鼠进行了分组干预治疗,采用免疫组织化学方法的EnVision系统二步法,观察模型大鼠胃黏膜突变型抑癌基因p53、癌基因p21、抑癌基因p16及细胞凋亡抑制基因bcl-2等基因蛋白表达变化情况。结果:云母3种不同剂量有降低p53,p21表达的倾向,对p16的缺失和bcl-2的高表达有明显调节作用,并能减轻胃黏膜炎症,促进腺体的再生。结论:云母对萎缩性胃炎的治疗和逆转作用可能与对癌相关基因蛋白表达的调控作用有关。 展开更多
关键词 云母 萎缩性胃炎 癌基因 抑癌基因 细胞凋亡抑制基因 基因蛋白 大鼠
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端粒酶基因和bcl-2在肺癌组织和细胞株中的相关性研究
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作者 陈蔚蔚 周宏远 +5 位作者 熊小熊 覃扬 孙芝玲 刘渊 周清华 孙泽芳 《四川大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2002年第S1期,共5页
目的 研究肺癌及相应的癌旁组织、肺癌细胞株中端粒酶基因和抗凋亡基因bcl 2的关系 ,以期阐明端粒酶基因在肺癌的发生、发展中的表达及抗凋亡基因对端粒酶的调控机理 .方法 采用TRAP ,RT PCR及LSAB的方法研究了 38例肺癌及相应的癌旁... 目的 研究肺癌及相应的癌旁组织、肺癌细胞株中端粒酶基因和抗凋亡基因bcl 2的关系 ,以期阐明端粒酶基因在肺癌的发生、发展中的表达及抗凋亡基因对端粒酶的调控机理 .方法 采用TRAP ,RT PCR及LSAB的方法研究了 38例肺癌及相应的癌旁组织、肺癌细胞株的端粒酶活性、hTR ,hTERT及bcl 2的表达 .结果  82 .3%的肺癌组织及 3种肺癌细胞株均表达端粒酶阳性 ,而癌旁组织及人胚肺成纤维细胞株全为端粒酶阴性 .38例癌组织中 ,34例表达hTR(89.4 %) ,其中 9例hTR在肿瘤组织的表达比其相应的正常组织高 ,其bcl 2表达也较高 .36例表达hTERT(94 .7%) .而在相应的癌旁组织中 ,34例表达hTR ,但只有 3例表达hTERT(7.8%) ,且表达hTERT的 3例患者其癌旁组织的hTERT表达比其相应肿瘤组织低 .hTERT阳性的癌旁组织其bcl 2表达也高于hTERT阴性的癌旁组织 .肺癌细胞株中均有hTR和hTERT的表达 ,而人胚肺成纤维细胞株只表达hTR .结论 肺癌组织中具有较高的端粒酶活性 ,说明端粒酶在肺癌的发生发展中起着重要的作用 .hTE... 展开更多
关键词 端粒酶基因 抗凋亡基因 肺癌
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皮肤鳞状细胞癌细胞中BAG-1表达变化对细胞增殖、凋亡的影响及机制 预览
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作者 张佳音 钟咪 +1 位作者 饶美荣 曾芬 《山东医药》 2018年第45期9-12,共4页
目的 观察Bcl-2结合抗凋亡基因1(BAG-1)在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞株A431中的表达水平,并探讨其对A431细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 分别采用qRT-PCR及Western blotting法检测CSCC细胞株A431和人正常永生化上皮细胞Hecate中... 目的 观察Bcl-2结合抗凋亡基因1(BAG-1)在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞株A431中的表达水平,并探讨其对A431细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 分别采用qRT-PCR及Western blotting法检测CSCC细胞株A431和人正常永生化上皮细胞Hecate中BAG-1 mRNA、蛋白表达。常规培养CSCC细胞株A431,感染BAG-1敲减病毒(抑制组,sh-BAG-1),并设立阴性对照(对照组),培养48 h后,分别采用qRT-PCR及Western blotting法检测BAG-1 mRNA及蛋白的表达,采用MTS法检测细胞增殖活力、平板克隆试验检测细胞克隆形成能力、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率、Western blotting法检测Mdm-2、p53及其下游基因Bcl-2和p21蛋白的表达水平。 结果 CSCC细胞系A431中BAG-1 mRNA相对表达量高于人正常永生化上皮细胞Hecate( P <0.05)。与对照组比较,抑制组BAG-1蛋白相对表达量下降,细胞增殖及克隆形成能力减弱,细胞阻滞在G 1期,细胞凋亡增多,Mdm-2蛋白表达减少,p53、p21和Bcl-2蛋白表达均增多( P 均<0.05)。结论 CSCC细胞中BAG-1高表达,其可能通过调控Mdm-2/p53信号通路增强CSCC细胞增殖、抑制其凋亡。 展开更多
关键词 皮肤鳞状细胞癌 Bcl-2结合抗凋亡基因1 Mdm-2/p53信号通路 细胞增殖 细胞凋亡
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胶质瘤组织中Bcl-2相关抗凋亡基因3表达及其对U87细胞增殖和侵袭能力的影响 预览 被引量:1
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作者 赵岗 杜伟 +2 位作者 魏新亭 王进忠 程振国 《新乡医学院学报》 CAS 2018年第10期843-848,共6页
目的探讨胶质瘤组织中Bcl-2相关抗凋亡基因3(BAG3)表达及其对U87细胞增殖和侵袭能力的影响。方法选取2011年4月至2017年4月于新乡市中心医院手术切除的胶质瘤组织及癌旁组织(距瘤旁边缘〉2 cm)标本各73例,采用免疫组织化学法检测胶... 目的探讨胶质瘤组织中Bcl-2相关抗凋亡基因3(BAG3)表达及其对U87细胞增殖和侵袭能力的影响。方法选取2011年4月至2017年4月于新乡市中心医院手术切除的胶质瘤组织及癌旁组织(距瘤旁边缘〉2 cm)标本各73例,采用免疫组织化学法检测胶质瘤组织和癌旁组织中BAG3蛋白表达;培养人胶质瘤U87细胞,待细胞融合度达70%以上时随机分为siRNA-BAG3组、siRNA-对照序列组和空白对照组,siRNA-BAG3组细胞转染BAG3干扰序列,siRNA-对照序列组细胞转染阴性对照序列,空白对照组细胞不作任何处理,转染后继续培养48 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测U87细胞中BAG3 mRNA表达,Western blot法检测U87细胞中BAG3蛋白表达,细胞计数试剂盒-8检测U87细胞增殖情况,克隆形成实验检测U87细胞克隆能力,流式细胞仪检测U87细胞凋亡情况,Transwell小室检测U87细胞侵袭能力。结果胶质瘤组织中BAG3蛋白高表达率为73.97%(54/73),低表达率为26.03%(19/73);癌旁组织中BAG3蛋白高表达率为36.99%(27/73),低表达率为63.01%(46/73);胶质瘤组织中BAG3蛋白高表达率显著高于癌旁组织(χ~2=20.215,P〈0.05)。胶质瘤组织中BAG3蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤直径及Karnofsky评分无关(P〉0.05),而与肿瘤分级有关(P〈0.05)。siRNA-BAG3组、siRNA-对照序列组和空白对照组U87细胞中BAG3 mRNA相对表达量分别为1.42±0.11、2.17±0.12和2.31±0.18;siRNA-BAG3组、siRNA-对照序列组和空白对照组U87细胞中BAG3蛋白相对表达量分别为0.20±0.12、0.84±0.13和0.92±0.12;siRNABAG3组U87细胞中BAG3 mRNA及蛋白相对表达量显著低于siRNA-对照序列组和空白对照组(P〈0.05);siRNA-对照序列组与空白对照组U87细胞中BAG3 mRNA及蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P〉0.05)。培养24、48、72、96 h时,siRNA-BAG3组U87细胞增殖能力显著低于siRNA-对照序列组和空白� 展开更多
关键词 胶质瘤 Bcl-2相关抗凋亡基因3 细胞增殖 细胞侵袭
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山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的表达与细胞凋亡的相关性 预览 被引量:2
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作者 关会敏 冉雪琴 +1 位作者 姬志林 王嘉福 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第4期 3-7,共5页
以贵州本地分离纯化的山羊痘病毒为试验材料,感染Vero细胞,通过台盼蓝、吖啶橙/溴乙锭荧光染色分析细胞的死亡及凋亡比例;经特异性PCR从山羊痘病毒基因组中分离出山羊痘病毒抗凋亡蛋白样基因,基因长531bp,含有完整的编码框,与绵羊痘病... 以贵州本地分离纯化的山羊痘病毒为试验材料,感染Vero细胞,通过台盼蓝、吖啶橙/溴乙锭荧光染色分析细胞的死亡及凋亡比例;经特异性PCR从山羊痘病毒基因组中分离出山羊痘病毒抗凋亡蛋白样基因,基因长531bp,含有完整的编码框,与绵羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的相似性为97%,因此确定为山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因。进一步研究山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因在Vero细胞中的表达,结果显示,病毒感染Vero细胞24h时没有检测到凋亡现象,山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的mRNA水平最高;感染48h时,Vero细胞的凋亡率上升到13%,山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的表达量随之下降。结果表明,山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的表达量与Vero细胞的凋亡呈负相关,有助于病毒在细胞内的生存和侵染等过程。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 抗凋亡蛋白基因 基因表达
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