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基于核酸适配体的肿瘤免疫治疗进展
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作者 吕海银 王腾飞 裴仁军 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期55-61,共7页
肿瘤免疫治疗是通过调节机体的免疫功能来控制和杀伤肿瘤的一种治疗手段。针对免疫检查点的治疗等一系列临床突破使得肿瘤的免疫治疗受到了广泛重视。目前,抗体治疗和过继性细胞治疗是肿瘤免疫治疗的主要方式,但是这些方法仍具有副作用... 肿瘤免疫治疗是通过调节机体的免疫功能来控制和杀伤肿瘤的一种治疗手段。针对免疫检查点的治疗等一系列临床突破使得肿瘤的免疫治疗受到了广泛重视。目前,抗体治疗和过继性细胞治疗是肿瘤免疫治疗的主要方式,但是这些方法仍具有副作用较强,实体瘤治疗难以实现,治疗费用高昂等缺点。因此改进和发展更加高效、安全、低成本的新技术仍十分必要。适配体是利用指数富集的配体系统进化技术筛选得到的单链寡核苷酸,有核酸“抗体”之称。适配体具有低免疫原性、组织穿透力强、易于化学合成与修饰等优势,且与其靶标的结合具有较好亲和力和特异性,可像抗体一样实现肿瘤的免疫治疗。对适配体在肿瘤免疫治疗相关技术中的新应用作一综述,主要包括基于免疫检查点的抗肿瘤作用、双特异性适配体的肿瘤免疫治疗、适配体靶向递送siRNA的肿瘤免疫治疗和适配体联合抗体的肿瘤免疫治疗等方面。 展开更多
关键词 适配体 肿瘤免疫治疗 双特异性适配体 免疫检查点
DNA纳米技术在凝血酶适配体分子设计中的应用进展
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作者 唐林林 黄承志 +1 位作者 左华 毛诚德 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1018-1026,共9页
DNA纳米技术是纳米生物技术的一个重要研究领域,近年来发展迅猛.通过合理的设计,利用DNA或其他核酸的分子性质构建出可操控的新型纳米尺度的结构或机器,在生物医学应用领域中有广泛应用.本文介绍了利用DNA纳米技术对凝血酶适配体结构合... DNA纳米技术是纳米生物技术的一个重要研究领域,近年来发展迅猛.通过合理的设计,利用DNA或其他核酸的分子性质构建出可操控的新型纳米尺度的结构或机器,在生物医学应用领域中有广泛应用.本文介绍了利用DNA纳米技术对凝血酶适配体结构合理设计的相关进展. 展开更多
关键词 DNA纳米技术 凝血酶 可逆调控 核酸适配体 二价适配体
四环素类抗生素酶联适体分析试剂盒的研制
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作者 赵秋伶 张振宇 +1 位作者 周广原 郑昊 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期107-111,共5页
研制了适用于检测动物源性食品中四环素类抗生素残留的竞争取代酶联适体分析试剂盒。以土霉素为靶标建立检测的标准曲线,结果表明:研制的试剂盒检测限为2.3μg/L,线性检测范围在5~100μg/L。将四环素、土霉素、金霉素和强力霉素添加到... 研制了适用于检测动物源性食品中四环素类抗生素残留的竞争取代酶联适体分析试剂盒。以土霉素为靶标建立检测的标准曲线,结果表明:研制的试剂盒检测限为2.3μg/L,线性检测范围在5~100μg/L。将四环素、土霉素、金霉素和强力霉素添加到猪肉、蜂蜜、牛奶样品中进行添加回收实验,并对试剂盒的精密度、特异性、稳定性和有效期进行测定。结果显示:四环素、土霉素、金霉素和强力霉素的添加回收率分别为77.6%~88.2%,82.9%~93.5%,78.3%~86.5%和86.4%~92.7%,供试样品检测结果的批内和批间变异系数均低于15%,符合兽药残留分析要求;该试剂盒对四环素类抗生素具有良好的特异性,能抵抗反复冻融60次以上,在4℃至少可保存6个月。 展开更多
关键词 四环素类抗生素 核酸适体 酶联适体分析 试剂盒
基于核酸适配体的PCR法检测溶藻弧菌及其灭活菌 预览
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作者 汤学敏 林文燕 +5 位作者 鄢庆枇 刘慧敏 彭英林 赵铨 林旭俊 郑江 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期391-396,共6页
溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)分布广,数量多,发病率高,是水产养殖中常见的条件致病菌,而对溶藻弧菌进行快速准确的识别鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体,因为具有较高的亲和特异性,在微生物的识别鉴定方面展现出了巨大的优... 溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)分布广,数量多,发病率高,是水产养殖中常见的条件致病菌,而对溶藻弧菌进行快速准确的识别鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体,因为具有较高的亲和特异性,在微生物的识别鉴定方面展现出了巨大的优势。本文利用核酸适配体和适配体筛选产物,通过结合、洗涤、加热分离、PCR扩增以及电泳检测等步骤,对溶藻弧菌进行了检测鉴定。结果表明,适配体和筛选产物都能对溶藻弧菌及其灭活菌进行较好的识别鉴定,适配体筛选产物对溶藻弧菌的检测下限为10~3cfu/mL,而对其灭活菌的检测下限为10~2cfu/mL,适配体对溶藻弧菌及其灭活菌的检测下限都可达到10 cfu/mL。该方法对溶藻弧菌有较好的亲和特异性,并能较好地区分溶藻弧菌与哈维氏弧菌等水产常见病原菌,在水产病害的检测中显示了较好的应用前景。 展开更多
关键词 核酸适配体 溶藻弧菌 PCR 灭活 检测
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CA125抗原核酸适体的筛选及鉴定 预览
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作者 黄百海 何雷 +2 位作者 李保林 修尘林 赵运旺 《分子影像学杂志》 2019年第1期52-56,共5页
目的建立一种基于核酸适体快速检测肿瘤血清标志物CA125抗原的方法。方法以CA125抗原为筛选靶标,CA199抗原为反筛选靶标,羧基化琼脂磁珠为筛选介质,利用指数级富集配体的系统进化技术筛选其高特异性核酸适体,利用生物信息学方法对核酸... 目的建立一种基于核酸适体快速检测肿瘤血清标志物CA125抗原的方法。方法以CA125抗原为筛选靶标,CA199抗原为反筛选靶标,羧基化琼脂磁珠为筛选介质,利用指数级富集配体的系统进化技术筛选其高特异性核酸适体,利用生物信息学方法对核酸适体进行序列分析和二级结构预测,荧光定量法分析核酸适体的亲和力,ELONA法测定核酸适体的特异性。结果经过6轮消减SELEX筛选,次级ssDNA文库的亲和力逐渐提高,特异性次级ssDNA文库逐轮富集,经二代测序,获得3条拷贝数>1000的核酸序列(Apt-1、Apt-2、Apt-3),可特异性识别CA125抗原,测定Kd值,分别为41.02±4.9、19.06±9.0、10.02±5.0 nmol/L,Apt-3亲和力最高。结论功能性核酸适体Apt-3能高特异性识别CA125抗原,为肿瘤血清标志物CA125检测提供了一种新的、快速、有效的工具和手段。 展开更多
关键词 CA125抗原 消减SELEX技术 核酸适体 高通量测序技术
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百草枯核酸适配体的筛选及其比色检测研究 预览
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作者 冉旭东 吴远根 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期567-575,共9页
核酸适配体具有类似蛋白抗体的性质,在靶标特异性识别与检测中引起越来越广泛的关注。小分子物质通常与环境污染和人类健康密切相关,然而小分子物质与核酸文库在性质上差异较小,在筛选过程中没有足够的活性位点,难以固定,因而其核酸适... 核酸适配体具有类似蛋白抗体的性质,在靶标特异性识别与检测中引起越来越广泛的关注。小分子物质通常与环境污染和人类健康密切相关,然而小分子物质与核酸文库在性质上差异较小,在筛选过程中没有足够的活性位点,难以固定,因而其核酸适配体筛选难度更大。本研究采用体外合成一条生物素修饰的碱基序列,通过氢键与随机文库3′-末端进行互补配对,将其固定在链霉亲和素修饰的纳米磁珠上。随后,加入不同浓度的百草枯靶分子孵育,洗脱得到百草枯特异性的亲和性ssDNA,对其进行非对称PCR扩增后,得到下一轮筛选所需的富集ssDNA库。经过9轮筛选后,将所得亲和性ssDNA进行克隆测序,最终得到15条百草枯的亲和ssDNA序列。对亲和性序列进行聚类分析和二级结构预测,再根据同源性等条件从中筛选出6条ssDNA序列进行亲和力测定。结果表明,PQ-15序列对百草枯的亲和力最高,解离常数(K_d)为(54±4) nmol/L。最后,利用PQ-15核酸适配体作为百草枯的识别分子,以阳离子化合物聚集的纳米金作为传感信号,建立了基于核酸适配体识别的百草枯农药比色检测方法,检出限为25.2 nmol/L,其它竞争性分子对百草枯检测无明显干扰,实际样品中百草枯的加标回收率为91.1%~99.6%。 展开更多
关键词 核酸适配体 百草枯 筛选 比色检测 纳米金
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131Ⅰ标记的肝癌核酸适配子在荷瘤裸鼠体内生物分布及显像 预览
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作者 杨敏 黄文山 +2 位作者 查悦明 张桂雄 许杰华 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2019年第3期260-264,共5页
目的探讨131Ⅰ标记肝癌核酸适配子JHIT2(131Ⅰ-JHIT2)作为肝癌靶向显像新型分子探针的可行性。方法采用Ⅰodogen 法制备131Ⅰ-JHIT2,纸层析法测标记率及放射化学纯度(放化纯度),检测其在不同溶液中不同时间的放化纯度。采用γ计数器分... 目的探讨131Ⅰ标记肝癌核酸适配子JHIT2(131Ⅰ-JHIT2)作为肝癌靶向显像新型分子探针的可行性。方法采用Ⅰodogen 法制备131Ⅰ-JHIT2,纸层析法测标记率及放射化学纯度(放化纯度),检测其在不同溶液中不同时间的放化纯度。采用γ计数器分别测定131I-JHIT2 与人肝癌细胞HepG2、正常肝细胞L02 结合后细胞的放射性计数。HepG2 荷瘤裸鼠尾静脉注射约0.74 MBq131Ⅰ-JHIT2 后不同时间处死,测定并计算各脏器每克组织放射性摄取值、肿瘤/肌肉(T/M)放射性比值。荷瘤裸鼠尾静脉注射约9.25 MBq 131Ⅰ-JHIT2 后单光子发射计算机断层成像术(SPECT)-CT 显像,观察并计算不同时间肿瘤/非肿瘤(T/NT)比值。两种细胞放射性计数比较采用t 检验。结果131Ⅰ-JHIT2 标记率为(67.8±0.5)%,纯化后放化纯度为(91.4±1.1)%。室温下131Ⅰ-JHIT2 在PBS、生理盐水24 h 的放化纯度均>80%。131Ⅰ-JHIT2 分别与两种细胞结合后,HepG2 细胞的放射性计数为(415±9)CPM,明显高于L02 细胞的(288±7)CPM(t=15.3,P<0.05)。尾静脉注射131Ⅰ-JHIT2 后,荷瘤鼠体内30 min、2 h 肿瘤部位每克组织放射性摄取值分别为(4.17±2.83)、(2.22±0.64)%ID/g,T/M 比值相应为2.01±1.15、2.07±0.82。SPECT-CT 显像示,荷瘤裸鼠注射131Ⅰ-JHIT2 后30 min,肿瘤部位可见放射性摄取,T/NT 比值为2.63;2 h 放射性减低,T/NT 比值为1.82。结论 131Ⅰ-JHIT2 探针在体外稳定性较好,对体外HepG2 细胞及HepG2 细胞荷瘤裸鼠模型具有一定靶向作用,为肝癌靶向核素诊疗奠定一定的基础。 展开更多
关键词 肝细胞 适配子 放射性核素显像
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靶向前列腺癌的纳米超声造影剂的研究 预览
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作者 顾芬芬 胡楚玲 +2 位作者 台宗光 高申 陈中建 《药学与临床研究》 2019年第1期1-4,共4页
目的:对前期研究的适体修饰的多壁碳纳米管(MWCNTs)纳米靶向造影剂作进一步的研究探讨。方法:对纳米超声造影剂采用激光共聚焦显微镜及流式细胞仪进行体外细胞摄取评价。采用裸鼠移植瘤模型对造影剂进行体内靶向性评价、体内显影效果与... 目的:对前期研究的适体修饰的多壁碳纳米管(MWCNTs)纳米靶向造影剂作进一步的研究探讨。方法:对纳米超声造影剂采用激光共聚焦显微镜及流式细胞仪进行体外细胞摄取评价。采用裸鼠移植瘤模型对造影剂进行体内靶向性评价、体内显影效果与代谢分布评价。结果:体外细胞学研究表明,该造影剂可被细胞摄取,且分布于细胞质中。体内靶向性评价结果表明,该造影剂具有肿瘤靶向性,且其在体内显影效果较好。结论:该新型造影剂能够靶向显影肿瘤部位,具有良好地临床应用的潜能。 展开更多
关键词 多壁碳纳米管 适体 纳米靶向造影剂 前列腺癌
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分子模拟指导核酸适配体文库设计
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作者 雷云霞 李招发 林俊生 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期251-258,共8页
核酸适配体是利用配体指数富集的系统进化技术(SELEX)从随机文库中筛选获得一段有功能的单链寡核苷酸。但因筛选过程中的文库选择、洗涤次数、分离效率、缓冲液离子含量和pH值等多种因素的影响,迄今所报道的亲和力与特异性都很高的核酸... 核酸适配体是利用配体指数富集的系统进化技术(SELEX)从随机文库中筛选获得一段有功能的单链寡核苷酸。但因筛选过程中的文库选择、洗涤次数、分离效率、缓冲液离子含量和pH值等多种因素的影响,迄今所报道的亲和力与特异性都很高的核酸适配体为数不多。初始文库是核酸适配体筛选的源头,作为SELEX技术的根本,其设计是否合理直接影响到筛选的成败和效率。分子模拟能以核酸适配体文库为主体,计算机为主要工具,发展多种结构模拟与分析工具,辅助核酸适配体文库的合理设计。本文综述了现阶段利用分子模拟进行核酸适配体初始文库设计的相关方法,希望能为从源头上提高核酸适配体筛选的成功率提供线索。 展开更多
关键词 核酸适配体 配体指数富集的系统进化技术(SELEX) 文库设计 分子模拟 分子对接
子体铅诱导T30695构象改变N-甲基卟啉二丙酸Ⅸ(NMM )荧光探针检测氡 预览
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作者 刘红文 刘士蒙 +3 位作者 李诗雅 杨桂英 刘然 吕昌银 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期643-648,共6页
氡衰变形成稳定的子体铅只需约3.82d,且衰变产生的210Pb非常稳定,其半衰期为21年。基于氡辐射衰变最终形成稳定的子体铅的特点,探讨了子体铅诱导富鸟嘌呤核苷酸序列形成G-四链体的特性,建立了一种基于子体铅诱导T30695构象改变的荧光传... 氡衰变形成稳定的子体铅只需约3.82d,且衰变产生的210Pb非常稳定,其半衰期为21年。基于氡辐射衰变最终形成稳定的子体铅的特点,探讨了子体铅诱导富鸟嘌呤核苷酸序列形成G-四链体的特性,建立了一种基于子体铅诱导T30695构象改变的荧光传感器。氡的子体铅诱导T30695形成的G-四链体结构能与N-甲基卟啉二丙酸Ⅸ(NMM)荧光染料结合发出较强荧光,在一定范围内,荧光强度与Pb2+的浓度和氡累积辐射剂量浓度成正相关。Pb2+离子浓度在5.13×10^-9~1.25×10^-7mol/L范围内与体系的ΔIF值呈现良好的线性关系,回归方程为ΔIF=77.30+5.05c,r=0.9950,对铅的检出限为1.54×10^-9mol/L,对氡的检出限为1.07×10^4Bq·h/m^3。 展开更多
关键词 子体铅 核酸适配体 G-四链体 构象转变 荧光传感
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寡核苷酸适配体的筛选及在农兽药残留检测中的应用 预览
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作者 邹雪梅 周佳伟 +1 位作者 宋尚红 陈冠华 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期488-499,共12页
适配体是一类从随机寡核苷酸文库中筛选出来的可对特定靶分子具有高亲和性和特异识别性的单链短脱氧核糖核酸或核糖核酸序列。自从指数富集配体系统进化(SELEX)的筛选方法问世以来,相继出现了各种基于SELEX的改进筛选方法,以及基于毛细... 适配体是一类从随机寡核苷酸文库中筛选出来的可对特定靶分子具有高亲和性和特异识别性的单链短脱氧核糖核酸或核糖核酸序列。自从指数富集配体系统进化(SELEX)的筛选方法问世以来,相继出现了各种基于SELEX的改进筛选方法,以及基于毛细管电泳分离手段的SELEX或非SELEX筛选方法。作为类似于抗体作用的分子识别元件,适配体在与食品和环境安全相关的农兽药残留检测领域中已得到一定的应用。在这些应用中,适配体通常与其它可以产生信号的材料如纳米金、量子点等构成复合探针,或与电化学电极等构成传感器。本文对适配体的筛选方法以及适配体在农兽药残留检测中的应用进行了概括和总结,以期为该研究提供有益的参考。 展开更多
关键词 适配体 筛选 农兽药残留 检测 评述
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光学适配体传感器在赭曲霉毒素A检测中的应用研究进展 预览
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作者 田风玉 周静 +1 位作者 何悦 焦必宁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期242-249,262共9页
赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)是一类主要由曲霉属和青霉属等真菌产生的次级代谢产物。毒理学研究表明,OTA具有强烈的肝毒性和肾毒性,并有致畸、致癌、致突变等危害。OTA作为一种天然污染物,对食品污染的范围较广,主要包括谷类、咖啡... 赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)是一类主要由曲霉属和青霉属等真菌产生的次级代谢产物。毒理学研究表明,OTA具有强烈的肝毒性和肾毒性,并有致畸、致癌、致突变等危害。OTA作为一种天然污染物,对食品污染的范围较广,主要包括谷类、咖啡、葡萄等及其相关产品,因此,开发高灵敏、高准确性的OTA检测技术对于预防控制其危害具有重要的意义。传统的OTA检测方法通常耗时费力且价格昂贵,限制了它们的应用范围。新兴的光学适配体传感器在检测OTA方面具有灵敏度高、选择性好和操作简单等优点,引起了人们的广泛关注。该文综述了近年来光学适配体传感器在OTA快速检测领域的应用及不同类型的OTA适体传感器的优缺点,并对该领域未来的发展方向进行了讨论和展望。 展开更多
关键词 适配体 光学传感器 赭曲霉毒素A
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miRNA-17核酸适配体阻断致癌性非编码RNA突变抑制神经胶质瘤细胞增殖 预览
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作者 林莉 王帮华 +2 位作者 张晓雯 胡美纯 张涛 《湖北科技学院学报:医学版》 2019年第2期102-104,共3页
目的探讨miRNA-17(miR-17)核酸适配体对神经胶质瘤的潜在治疗作用。方法设计合成miR-17核酸适配体(miR-17-apt)并转染12h后检测其对miR-17的阻断作用。采用神经胶质瘤细胞株U251、 SGH44、H4及BT-325作为体外模型,转染miR-17-apt 48h后... 目的探讨miRNA-17(miR-17)核酸适配体对神经胶质瘤的潜在治疗作用。方法设计合成miR-17核酸适配体(miR-17-apt)并转染12h后检测其对miR-17的阻断作用。采用神经胶质瘤细胞株U251、 SGH44、H4及BT-325作为体外模型,转染miR-17-apt 48h后用噻唑蓝实验检测细胞增殖。结果 400nmol/L的miR-17-apt可显著抑制miR-17基因的表达水平并具有广谱的抑制多种神经胶质瘤细胞增殖的作用。结论 miR-17-apt可被进一步开发为抗神经胶质瘤基因治疗的潜在载体。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 miRNA-17 核酸适配体 肿瘤基因治疗
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庆大霉素特异性单链DNA适配体的筛选、表征和应用
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作者 巫朦朦 韩旭艳 +3 位作者 蔡蓉凤 李茂林 田亚平 周楠迪 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第5期637-648,共12页
庆大霉素是一种常用的氨基糖苷类抗生素,对细菌尤其是革兰氏阴性菌有显著的抑菌作用,但其本身具有较强的毒副作用,而不规范的使用会对环境和人体健康产生危害.因此,建立一种高灵敏的快速检测庆大霉素的方法对于加强食品市场监管和环境... 庆大霉素是一种常用的氨基糖苷类抗生素,对细菌尤其是革兰氏阴性菌有显著的抑菌作用,但其本身具有较强的毒副作用,而不规范的使用会对环境和人体健康产生危害.因此,建立一种高灵敏的快速检测庆大霉素的方法对于加强食品市场监管和环境监控具有重要意义.本文利用基于Sepharose亲和层析的指数富集的配体系统进化技术,经过九轮筛选和克隆测序,从体外合成的全长为79个核苷酸的随机单链DNA文库中筛选得到34条与庆大霉素有亲和力的适配体序列.通过同源性分析将这些序列分为6个家族,利用Mfold软件分析这些序列的二级结构及其稳定性,从中选出结构稳定性最高的序列进行解离常数(K_d)测定,最后得到一条与庆大霉素具有极高亲和力的适配体Ap-26,其解离常数(K_d)为14.00±3.34 nmol/L.通过Autodock 4.0软件对Ap-26与庆大霉素进行分子对接模拟,结果表明Ap-26与庆大霉素主要的结合位点是17~20, 54~56位核苷酸.在此基础上,利用适配体Ap-26为识别元件构建了基于金纳米粒子(gold nanoparticles, AuNPs)比色检测庆大霉素的方法,验证了该适配体的应用潜力.当庆大霉素的浓度在50~700 nmol/L范围内时, AuNPs溶液在520 nm处的吸光值与庆大霉素的浓度存在良好的线性关系,检测限为11.50 nmol/L.将该方法应用于牛奶样品中庆大霉素的检测时发现牛奶基质成分对检测结果的影响很小,庆大霉素的回收率均超过90%.以上结果表明本文筛选得到的庆大霉素适配体能有效应用于庆大霉素检测方法的构建. 展开更多
关键词 庆大霉素 指数富集的配体系统进化技术 适配体 亲和层析 金纳米粒子
适配体传感器检测抗生素的研究进展 预览
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作者 彭艳 叶泰 +4 位作者 曹慧 袁敏 于劲松 黎燕 徐斐 《工业微生物》 CAS 2019年第1期55-60,共6页
抗生素作为一种微生物的次级代谢产物,具有杀死或抑制微生物生长的作用。抗生素的滥用导致了它在食物中的残留量逐年增加。因此,需要建立一种快速灵敏检测方法用于食品中抗生素残留量的检测。核酸适配体传感器因其高选择性、高特异性和... 抗生素作为一种微生物的次级代谢产物,具有杀死或抑制微生物生长的作用。抗生素的滥用导致了它在食物中的残留量逐年增加。因此,需要建立一种快速灵敏检测方法用于食品中抗生素残留量的检测。核酸适配体传感器因其高选择性、高特异性和高灵敏性等优点而备受关注。同时,借助纳米材料独特的光、电特性,能够进一步提高适配体传感器的性能。本文综述了目前用于抗生素检测的核酸适配体传感器如荧光适配体传感器、比色适配体传感器和电化学适配体传感器等的研究进展。此外,还对该研究领域面临的挑战和未来前景进行了展望。 展开更多
关键词 适配体 抗生素 纳米材料 生物传感器
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食源性致病细菌适配体生物传感器研究进展 预览
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作者 李雪彤 林英 +3 位作者 张园 李颖 吕淑霞 许文涛 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期125-138,共14页
食品安全是如今大众关注的焦点,而食源性致病细菌是导致食品安全问题事件频发的主要原因之一,因此需要开发一种快速灵敏便宜的检测方法,对食源性致病细菌进行监督检测。适配体是在体外基于SELEX技术,从单链寡核苷酸随机文库中筛选出的... 食品安全是如今大众关注的焦点,而食源性致病细菌是导致食品安全问题事件频发的主要原因之一,因此需要开发一种快速灵敏便宜的检测方法,对食源性致病细菌进行监督检测。适配体是在体外基于SELEX技术,从单链寡核苷酸随机文库中筛选出的对靶标具有高亲和性、特异性的寡核苷酸(DNA或RNA)片段。由于食源性致病细菌的表面结构物质复杂,基于SELEX技术的适配体筛选方式被不断改良。本文介绍了几种SELEX改良技术,同时对适配体结合力的十种表征方法进行了比较,并对几种常见食源性致病细菌重要的(DNA、RNA、劈裂)适配体进行总结。由于适配体具有众多优于抗体的特性,用于食源性致病细菌检测的适配体生物传感器得到快速发展,其中电化学传感器及光学传感器应用最为广泛。对食源性致病细菌的光学适配体传感器与电化学适配体传感器的最新研究进展进行重点综述,并提出了未来适配体传感器的发展趋势,旨在为微生物检测技术开拓新领域,指引新方向。 展开更多
关键词 食源性致病细菌 适配体 适配体传感器 SELEX
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Screening of aptamers and their potential application in targeted diagnosis and therapy of liver cancer 预览
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作者 Guo-Qing Zhang Li-Ping Zhong +1 位作者 Nuo Yang Yong-Xiang Zhao 《世界胃肠病学杂志:英文版》 SCIE CAS 2019年第26期3359-3369,共11页
Aptamers are a class of single oligonucleotide molecules(DNA or RNA)that are screened from random DNA or RNA oligonucleotide chain libraries by the systemic evolution of ligands by exponential enrichment technology.Th... Aptamers are a class of single oligonucleotide molecules(DNA or RNA)that are screened from random DNA or RNA oligonucleotide chain libraries by the systemic evolution of ligands by exponential enrichment technology.The selected aptamers are capable of specifically binding to different targeting molecules,which is achieved by the three-dimensional structure of aptamers.Aptamers are similar in function to monoclonal antibodies,and therefore,they are also referred to as"chemical antibodies".Due to their high affinity and specificity and low immunogenicity,aptamers are topics of intense interest in today's biological targeting research especially in tumor research.They not only have high potential for clinical advances in tumor targeting detection but also are highly promising as targeted tumor drug carriers for use in tumor therapy.Various experimental studies have shown that aptamer-based diagnostic and therapeutic methods for liver cancer have great potential for application.This paper summarizes the structure,characteristics,and screening methods of aptamers and reviews the recent research progress on nucleic acid aptamers in the targeted diagnosis and treatment of liver cancer. 展开更多
关键词 APTAMER SYSTEMIC evolution of LIGANDS by EXPONENTIAL ENRICHMENT Liver cancer Outlook
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Cell-imprinted polydimethylsiloxane for the selective cell adhesion
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作者 Lukuan Liu Kaiguang Yang +4 位作者 Zhongpeng Dai Zhen Liang Lihua Zhang Xiaojun Peng Yukui Zhang 《中国化学快报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期672-675,共4页
Cell adhesion is the basis for some cell isolation methods, and is influenced by both of the biochemical and topographic characteristics of the substrates. Herein, based on cell imprinting and click chemistry,we have ... Cell adhesion is the basis for some cell isolation methods, and is influenced by both of the biochemical and topographic characteristics of the substrates. Herein, based on cell imprinting and click chemistry,we have developed a cell-imprinted polydimethylsiloxane(PDMS) with aptamer functionalization(APTCIS). The atom force microscopic analysis results showed that the hierarchical structure matching well with the target cells is successfully introduced on the surface of the APT-CIS. By using the synergistic effects of hierarchical structure and aptamer affinity, the APT-CIS was successfully used for the selective cell adhesion, and 93.9%± 0.8% of the captured cells could then be released. Thus, the APT-CIS holds promise in selective cell isolation and sorting fields. 展开更多
关键词 CELL adhesion APTAMER CELL IMPRINTING Hierarchical structures CLICK chemistry
基于cell-SELEX技术筛选高转移胃癌细胞系HGC-27核酸适配体 预览
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作者 刘涛 王进军 +4 位作者 方晓娜 何磊 杨伟丽 罗昭锋 王亚雷 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第6期933-937,共5页
目的筛选针对高转移胃癌细胞(HGC-27)的核酸适配体。方法以HGC-27为靶细胞,以AGS为反筛细胞,利用Cell-SELEX技术逐轮次筛选,从文库中挑选能与HGC-27结合的核酸适配体LW-25。用流式细胞术检测核酸适配体测富集程度,核酸适配体与HGC-27的... 目的筛选针对高转移胃癌细胞(HGC-27)的核酸适配体。方法以HGC-27为靶细胞,以AGS为反筛细胞,利用Cell-SELEX技术逐轮次筛选,从文库中挑选能与HGC-27结合的核酸适配体LW-25。用流式细胞术检测核酸适配体测富集程度,核酸适配体与HGC-27的亲和力及特异性。结果流式细胞仪显示随着筛选轮数的增加,次级文库与靶细胞结合的荧光强度增强。从次级文库中成功挑选出一条能与HGC-27结合的核酸适配体LW-25。并且LW-25能特异性识别HGC-27。胰蛋白酶处理HGC-27后,LW-25与HGC-27的结合能力较处理前明显下降。结论核酸适配体LW-25能特异性识别HGC-27,是潜在具有诊断胃癌转移的分子探针。 展开更多
关键词 核酸适配体 胃癌 转移
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核酸适配体在环境雌激素检测领域的研究进展 预览
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作者 耿玉慧 沙隽伊 +4 位作者 王文静 贺祥珂 邴欣 余小影 贾敏 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第13期207-215,共9页
环境雌激素指具有雌激素效应,能够模拟天然雌激素,干扰内分泌功能的一类化合物。它可通过干扰或阻断雌激素受体与内源性雌激素的相互作用,影响天然激素的合成、分泌、运输、反应和代谢等,从而导致生殖、神经和免疫系统等的异常。因此急... 环境雌激素指具有雌激素效应,能够模拟天然雌激素,干扰内分泌功能的一类化合物。它可通过干扰或阻断雌激素受体与内源性雌激素的相互作用,影响天然激素的合成、分泌、运输、反应和代谢等,从而导致生殖、神经和免疫系统等的异常。因此急需建立环境雌激素的快速检测方法。核酸适配体是在体外筛选得到的一小段寡核苷酸,能够与靶标高亲和力、高特异性的结合,具有靶标范围广、灵敏度高、易于修饰等优点,被广泛应用于环境雌激素快速检测。该文主要综述环境雌激素的分类、筛选以及适配体技术在环境雌激素快速检测中的应用。 展开更多
关键词 环境雌激素 适配体 比色法 荧光 电化学
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