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Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响 预览
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作者 王超 刘玉 +3 位作者 安然 赵京山 孙佳欢 李爱英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期376-381,共6页
目的观察Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞周期的影响。方法组织贴块法培养大鼠VSMC细胞,采用TNF-α诱导其增殖,加入不同浓度的Roscovitine预处理15 h,将细胞分为:对照组、TNF-α组、Roscovitine 5、10、15... 目的观察Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞周期的影响。方法组织贴块法培养大鼠VSMC细胞,采用TNF-α诱导其增殖,加入不同浓度的Roscovitine预处理15 h,将细胞分为:对照组、TNF-α组、Roscovitine 5、10、15、30μmol·L-1组。MTT比色法检测细胞增殖活性;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA);流式细胞仪检测细胞周期;荧光定量RT-PCR及Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4、CDK5)、细胞周期抑制蛋白(p53、p21、p27)的表达。结果Roscovitine能抑制VSMC增殖;抑制细胞周期从G 0/G 1期向S期转化。与TNF-α组比较,Roscovitine 5、10、15、30μmol·L^-1组能降低细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E蛋白表达,降低细胞周期蛋白依赖激酶CDK4、CDK5蛋白表达,升高细胞周期抑制蛋白p53、p21、p27蛋白表达(P<0.05)。结论Roscovitine可抑制大鼠VSMC细胞周期进程及增殖活性。 展开更多
关键词 ROSCOVITINE 血管平滑肌细胞 增殖 细胞周期 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖性激酶 细胞周期抑制蛋白
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下调ANKRD22表达对人肺腺癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 预览
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作者 张烽 殷俊 +4 位作者 傅文凡 戴璐 潘雷 钟圣鹏 赵健 《山东医药》 CAS 2019年第5期1-4,共4页
目的通过RNA干扰技术下调人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株H1975中锚蛋白重复系列22(ANKRD22)表达,观察其对细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法体外培养H1975细胞,随机分为siRNA干扰组、阴性对照组、空白对照组,siRNA干扰组、阴性对... 目的通过RNA干扰技术下调人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株H1975中锚蛋白重复系列22(ANKRD22)表达,观察其对细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法体外培养H1975细胞,随机分为siRNA干扰组、阴性对照组、空白对照组,siRNA干扰组、阴性对照组分别转染ANKRD22-siRNA质粒和阴性对照质粒NC-siRNA,转染24h;空白对照组不予转染。采用实时荧光定量qRT-PCR法检测各组ANKRD22表达,采用MTT法检测细胞培养24、48、72、96、120h的细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果siRNA干扰组ANKRD22相对表达量低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),空白对照组与阴性对照组比较P >0.05。siRNA干扰组转染24h再培养24、48、72、96、120h细胞增殖能力均低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),空白对照组与阴性对照组比较P均 >0.05。siRNA干扰组G0/G1期细胞所占比例高于空白对照组与阴性对照组(P均<0.05),S期、G2/M期细胞所占比例低于空白对照组与阴性对照组(P均<0.05),空白对照组与阴性对照组比较P均 >0.05。siRNA干扰组细胞凋亡率高于空白对照组与阴性对照组(P均<0.05),空白对照组与阴性对照组比较P >0.05。结论通过RNA干扰下调NSCLC细胞株H1975中ANKRD22表达后,可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,延长细胞周期。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 锚蛋白重复系列22 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
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FK506结合蛋白52对人子宫内膜间质细胞增殖作用的影响
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作者 阎慧丽 魏慕筠 +1 位作者 颜磊 赵跃然 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2019年第2期80-87,共8页
目的 探讨FK506结合蛋白52(FKBP52)对人子宫内膜间质细胞(HESCs)增殖的影响,为薄型子宫内膜的治疗提供新的依据和靶点。方法 分离并培养原代HESCs,分别感染过表达FKBP52的慢病毒和转染靶向沉默FKBP52的小干扰RNA(siRNA),CCK8法检测细胞... 目的 探讨FK506结合蛋白52(FKBP52)对人子宫内膜间质细胞(HESCs)增殖的影响,为薄型子宫内膜的治疗提供新的依据和靶点。方法 分离并培养原代HESCs,分别感染过表达FKBP52的慢病毒和转染靶向沉默FKBP52的小干扰RNA(siRNA),CCK8法检测细胞增殖活性,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞分析法检测细胞周期的变化,Western blotting法检测FKBP52及细胞周期相关蛋白表达水平。结果 过表达FKBP52后,子宫内膜间质细胞的增殖活性增强(P <0. 05),细胞克隆形成能力提高(P <0. 01),细胞周期进程加快(P <0. 01),细胞周期素依赖激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期素依赖激酶2(CDK2)及细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)的蛋白表达水平均升高(P <0. 05);干扰FKBP52后,子宫内膜间质细胞的增殖能力减弱(P <0. 05),细胞克隆形成能力降低(P <0. 05),细胞周期进程受阻滞(P <0. 05),CDK4、Cyclin D1、CDK2、Cy-clin E1的表达均被抑制(P <0. 05)。结论 FKBP52可通过促进HESCs的细胞周期进程来促进HESCs的增殖,有可能作为薄型子宫内膜治疗的靶点。 展开更多
关键词 FK506结合蛋白52 细胞增殖 细胞周期 薄型子宫内膜 子宫内膜间质细胞
MicroRNA-140-5p通过蛋白激酶C亚型ε促进肾癌细胞增殖
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作者 刘伟红 余肖 +3 位作者 任雨 刘开泰 林晨 王萍 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期185-191,共7页
目的探讨microRNA-140-5p(miR-140-5p)在肾癌发生中的作用。方法 Real-time PCR方法检测肾癌细胞(Caki-1、ACHN、OS-RC-2和786-O)中miR-140-5p的表达。MTS,流式细胞术和Western blotting检测细胞增殖,细胞周期和相关蛋白的改变。结果降... 目的探讨microRNA-140-5p(miR-140-5p)在肾癌发生中的作用。方法 Real-time PCR方法检测肾癌细胞(Caki-1、ACHN、OS-RC-2和786-O)中miR-140-5p的表达。MTS,流式细胞术和Western blotting检测细胞增殖,细胞周期和相关蛋白的改变。结果降低Caki-1细胞中miR-140-5p的水平后,细胞增殖被抑制,G0/G1期细胞数量显着增加,cyclin D、cyclin E和CDK2、CDK4也随之减少;此外,增加786-O细胞中miR-140-5p的水平后,促进体外细胞增殖和体内肿瘤发生。基因芯片结果发现,蛋白激酶C亚型ε(PKCε)基因在改变Caki-1和786-O的细胞中显著性升高。si PKCε在降低肾癌细胞(RCC)中PKCε蛋白表达的同时,还能显著性反转抑制物/模拟物诱导的细胞增殖和细胞周期的改变。结论 miR-140-5p通过PKCε促进肾癌细胞增殖。 展开更多
关键词 MicroRNA-140-5p 肾癌细胞 细胞增殖 细胞周期 实时定量聚合酶链反应
白凤菜总黄酮对肝癌HepG2细胞生长、增殖和凋亡的影响
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作者 林燕燕 许新恒 +3 位作者 黄仲庆 林泽燕 罗秀针 石艳 《厦门大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期48-55,共8页
研究了白凤菜(Gynura formosana Kitam.)总黄酮(TFG)对肝癌HepG2细胞的生长、增殖和凋亡的影响.噻唑兰(MTT)实验结果表明TFG对HepG2细胞体外增殖的抑制作用有浓度和时间依赖效应:处理24h后130和260μg/mLTFG实验组的HepG2细胞凋亡率均... 研究了白凤菜(Gynura formosana Kitam.)总黄酮(TFG)对肝癌HepG2细胞的生长、增殖和凋亡的影响.噻唑兰(MTT)实验结果表明TFG对HepG2细胞体外增殖的抑制作用有浓度和时间依赖效应:处理24h后130和260μg/mLTFG实验组的HepG2细胞凋亡率均显著升高,分别达到(47.00±1.31)%和(76.39±1.39)%(p<0.05);24h的半抑制质量浓度(IC50)为190.80μg/mL.实验组HepG2细胞周期阻滞在S期,细胞迁移率随TFG质量浓度的升高而下降,细胞内活性氧(ROS)水平最终显著下降至对照组的6.9%(p<0.05),细胞中Bax表达量略微上调而Bcl-2表达量明显下调.综上,TFG抑制肝癌HepG2细胞增殖和诱导HepG2细胞凋亡的机制可能与下调细胞ROS水平、重构细胞内还原体系、上调促凋亡蛋白Bax以及下调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达相关. 展开更多
关键词 白凤菜 总黄酮 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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黄芩苷对人舌鳞癌细胞SCC15的抑制作用
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作者 钟文德 刘荣静 +1 位作者 管红兵 陈广盛 《口腔疾病防治》 2019年第4期226-230,共5页
目的探讨黄芩苷对人舌鳞癌细胞株SCC15细胞的抑制作用及可能机制,为舌鳞癌的防治提供新的思路及实验基础。方法单纯DMEM培养液培养的SCC15细胞为对照组,加入20 mg/mL黄芩苷溶液培养的SCC15细胞为黄芩苷组。2组细胞分别以划痕实验及Trans... 目的探讨黄芩苷对人舌鳞癌细胞株SCC15细胞的抑制作用及可能机制,为舌鳞癌的防治提供新的思路及实验基础。方法单纯DMEM培养液培养的SCC15细胞为对照组,加入20 mg/mL黄芩苷溶液培养的SCC15细胞为黄芩苷组。2组细胞分别以划痕实验及Transwell迁移实验检测细胞迁移能力的改变,流式细胞术检测细胞周期的改变,Western blotting检测细胞信号转导与转录激活子3(signal transduction and transcrip-tion activator 3,STAT3)磷酸化水平的差异。结果与对照组比较,划痕实验及Transwell迁移实验结果显示黄芩苷组细胞迁移能力降低(t=4.927,P=0.008);流式细胞术结果显示黄芩苷组G0/G1期增高(t=9.893,P=0.001),S期降低(t=8.528,P=0.001),G2/M期降低(t=3.550,P=0.024);Western blotting结果显示黄芩苷组SCC15细胞STAT3蛋白磷酸化水平下降(t=8.262,P=0.001)。结论黄芩苷对人舌鳞癌细胞SCC15具有抑制作用,其机制可能与降低STAT3通路磷酸化活性有关。 展开更多
关键词 黄芩苷 鳞状细胞 SCC15细胞 迁移 细胞周期 信号转导与转录激活子3
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miR-195靶向RAF1调控口腔鳞状细胞癌的生长、凋亡及迁移侵袭 预览
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作者 郭芳 黄硕 +2 位作者 刘宁 朱勇 刘昌奎 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第2期163-168,共6页
目的探讨miR-195与RAF1的靶向关系及二者对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞生长、凋亡及迁移侵袭的调控。方法构建miR-195过表达载体并合成si-RAF1,转染入SCC-4细胞,以荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-195及si-RAF1在SCC-4细胞中的转染效率。... 目的探讨miR-195与RAF1的靶向关系及二者对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞生长、凋亡及迁移侵袭的调控。方法构建miR-195过表达载体并合成si-RAF1,转染入SCC-4细胞,以荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-195及si-RAF1在SCC-4细胞中的转染效率。MTT法、克隆形成及细胞周期实验评价miR-195对SCC-4细胞生长的影响,流式细胞仪检测miR-195对SCC-4细胞凋亡的影响;并通过双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR及Western blot检测miR-195与RAF1的靶向关系。结果成功构建miR-195真核表达载体并合成si-RAF1,qRT-PCR显示miR-195真核表达载体及si-RAF1在SCC-4细胞中均具有较高的转染效率(P<0.01)。miR-195的过表达能够显著抑制SCC-4细胞的增殖活性及克隆形成,诱导细胞周期G1/S的阻滞,并促进细胞凋亡的发生;同时双荧光素酶报告基因分析表明,miR-195过表达能够显著抑制RAF1野生型报告载体荧光活性;Western blot和qRT-PCR进一步证实了miR-195能够抑制RAF1的mRNA和蛋白的表达。结论miR-195可能通过直接靶向RAF1来抑制OSCC细胞的生长及迁移侵袭,诱导细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 miR-195 RAF1 细胞增殖 凋亡 细胞周期
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脑胶质瘤干细胞的作用及其机制 预览
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作者 冀保卫 陈丽华 +1 位作者 陈治标 蔡强 《广西医学》 CAS 2019年第5期582-585,共4页
目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脑胶质瘤干细胞的作用及其机制。方法从脑胶质母细胞瘤组织中分离出脑胶质瘤干细胞,传代培养后分为实验组与对照组。实验组采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275进行干预,对照组给予等体积的磷酸缓冲盐溶... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脑胶质瘤干细胞的作用及其机制。方法从脑胶质母细胞瘤组织中分离出脑胶质瘤干细胞,传代培养后分为实验组与对照组。实验组采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275进行干预,对照组给予等体积的磷酸缓冲盐溶液干预。采用细胞计数法检测细胞增殖情况,单克隆法检测细胞单克隆形成率,流式细胞仪检测CD133+细胞含量和细胞周期,免疫印迹法检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1表达情况。结果经MS-275干预后,实验组胶质瘤干细胞增殖抑制率为(28.30±0.72)%,胶质瘤干细胞单克隆形成率、CD133+细胞含量、Cyclin D1表达水平及S期细胞比例均低于对照组,G0/G1期细胞比例高于对照组(均P<0.05)。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275能抑制脑胶质瘤干细胞增殖,促进其分化,其机制可能与MS-275降低脑胶质瘤干细胞Cyclin D1蛋白表达而导致细胞周期受阻滞有关。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 干细胞 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 细胞增殖 细胞分化 细胞周期
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蛇六谷提取物抑制K562细胞增殖并诱导分化的作用
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作者 李赛 潘磊 +3 位作者 高瑞兰 赵燕娜 余潇苓 尹利明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期592-596,共5页
目的:探讨蛇六谷提取物(TuAKe)抑制人慢性髓系白血病K562细胞增殖和诱导分化的作用机制。方法:不同浓度的TuAKe处理K562细胞,MTT比色法和半固体集落形成实验检测K562细胞的增殖能力;瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态;流式细胞术检测分化相... 目的:探讨蛇六谷提取物(TuAKe)抑制人慢性髓系白血病K562细胞增殖和诱导分化的作用机制。方法:不同浓度的TuAKe处理K562细胞,MTT比色法和半固体集落形成实验检测K562细胞的增殖能力;瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态;流式细胞术检测分化相关抗原CD11b、CD14和CD42b的阳性表达率;Western blot法检测细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白E1(cyclin E1)和红系分化核转录因子GATA-1的蛋白表达水平。结果:TuAKe能够抑制K562细胞增殖,改变细胞形态,抑制K562细胞进入S期,并阻滞在G2/M期,提高分化相关抗原CD11b、CD14和CD42b阳性表达率,上调GATA-1蛋白表达,同时下调CDK2和cyclin E1蛋白表达(P<0.05)。结论:TuAKe可能通过调控细胞周期抑制K562细胞增殖,同时诱导K562细胞多向分化。 展开更多
关键词 蛇六谷 白血病 细胞周期 细胞分化 细胞增殖
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白藜芦醇对高糖环境下人视网膜血管内皮细胞增殖的影响及分子机制
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作者 崔锡铭 王霜 +4 位作者 许顺江 张睿 谢冰 崔冬生 赵占胜 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2019年第3期19-24,共6页
目的观察白藜芦醇(Res)对高糖环境下人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)增殖和细胞周期的调控作用,并对其可能的分子机制进行初步探讨。方法细胞分组及处理如下:对照组(N组)加入5.5 mmol/L葡萄糖;高渗对照组(M组)加入5.5 mmol/L葡萄糖和19.5 ... 目的观察白藜芦醇(Res)对高糖环境下人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)增殖和细胞周期的调控作用,并对其可能的分子机制进行初步探讨。方法细胞分组及处理如下:对照组(N组)加入5.5 mmol/L葡萄糖;高渗对照组(M组)加入5.5 mmol/L葡萄糖和19.5 mmol/L甘露醇;高糖对照组(H组)加入25 mmol/L葡萄糖;实验组(R1~R4组)加入25 mmol/L葡萄糖+25、50、100、200μmol/L Res,分别进行培养。采用CCK-8法检测Res对HRCECs增殖的影响;流式细胞术检测Res对HRCECs细胞周期的影响;分别采用real-time PCR和Western blotting法检测PCNA、Cyclin A1、CDK2及P21CIP1的mRNA和蛋白水平。结果 CCK-8结果显示,Res可抑制高糖诱导的HRCECs增殖活性,并且呈浓度依赖性。流式细胞术分析结果显示,与H组相比,R2组和R3组处于S期的细胞数增加(P<0.01)。Real-time PCR和Western blotting分析结果显示,与N组相比,H组的Cyclin A1、CDK2和PCNA mRNA及蛋白的表达量增加,P21CIP1 mRNA及蛋白的表达量下降(P<0.01);与H组相比,R2组和R3组Cyclin A1、CDK2和PCNA的mRNA及蛋白表达量降低,而P21CIP1的mRNA及蛋白表达量增加(P<0.01)。结论 Res可通过下调Cyclin A1、CDK2和PCNA的mRNA、蛋白表达量及上调P21CIP1 mRNA、蛋白表达量抑制高糖诱导的HRCECs的增殖活性。 展开更多
关键词 白藜芦醇 人视网膜血管内皮细胞 周期相关蛋白 细胞周期
SIRT1基因对牛卵泡颗粒细胞增殖及细胞周期的影响 预览
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作者 陈洋 单雪松 +2 位作者 赵志辉 刘红羽 吕文发 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2019年第3期1-6,13共7页
【目的】探讨沉默信息调节因子1(Silent information regulator1,SIRT1)对牛卵泡颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。【方法】选取牛卵巢上直径2~6mm的卵泡,用注射器抽取卵泡中的颗粒细胞,进行体外培养。根据牛SIRT1基因的核苷酸序列,构建了... 【目的】探讨沉默信息调节因子1(Silent information regulator1,SIRT1)对牛卵泡颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。【方法】选取牛卵巢上直径2~6mm的卵泡,用注射器抽取卵泡中的颗粒细胞,进行体外培养。根据牛SIRT1基因的核苷酸序列,构建了4条干扰载体(shRNA-SIRT1-1597、shRNA-SIRT1-1471、shRNA-SIRT1-1186、shRNA-SIRT1-1306)及1条阴性对照载体(shRNA-NC),利用脂质体将质粒转入牛卵泡颗粒细胞,通过实时荧光定量PCR法筛选出干扰效果最佳的干扰载体用于后续试验。以转染shRNA-SIRT1-1471的颗粒细胞为干扰组,转染sh-RNA-NC的颗粒细胞为阴性对照组,不做处理的颗粒细胞为空白对照组,采用CCK-8法检测转染后24,36,48和60h各组颗粒细胞增殖情况,用流式细胞术检测转染后24,36和48h各组颗粒细胞的细胞周期变化情况。【结果】转染后48h shRNA-SIRT1-1471干扰的颗粒细胞SIRT1表达量显著低于其他处理组(P<0.05),故选用shRNA-SIRT1-1471作为最佳干扰载体。转染后24,36,48和60h,干扰组颗粒细胞增殖效果显著高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);转染后24~48h干扰组与空白对照组和阴性对照组相比G1期细胞比例显著降低,S期细胞比例显著升高,从而使更多细胞进入M期进行正常的有丝分裂,促进细胞增殖。【结论】SIRT1能抑制牛卵泡颗粒细胞的增殖,并阻滞细胞周期的进程。 展开更多
关键词 SIRT1基因 牛卵泡颗粒细胞 细胞增殖 细胞周期
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基于3D微流控芯片分析鸡血藤总鞣质对宫颈癌细胞HeLa的药理作用
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作者 王妮佳 王嘉仡 +3 位作者 孟宪生 包永睿 王帅 李天骄 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期103-108,共6页
目的:研究鸡血藤总鞣质的化学成分,并分析该有效部位对宫颈癌细胞HeLa的药效与作用机制,为鸡血藤抗宫颈癌提供实验依据。方法:运用UPLC-Q-TOF/MS对鸡血藤鞣质类化学成分进行定性分析。将不同质量浓度的鸡血藤总鞣质作用于宫颈癌细胞HeLa... 目的:研究鸡血藤总鞣质的化学成分,并分析该有效部位对宫颈癌细胞HeLa的药效与作用机制,为鸡血藤抗宫颈癌提供实验依据。方法:运用UPLC-Q-TOF/MS对鸡血藤鞣质类化学成分进行定性分析。将不同质量浓度的鸡血藤总鞣质作用于宫颈癌细胞HeLa,通过3维(3D)微流控芯片筛选合适的给药浓度及时间。运用流式细胞仪测定鸡血藤总鞣质对宫颈癌细胞HeLa周期与凋亡的影响,分别应用Flow Jo v10. 0. 7及ModFit LT 3. 2软件进行分析。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)测定经鸡血藤总鞣质作用后,宫颈癌细胞HeLa上清液中血管内皮生长因子-A(VEGF-A)与半胱天冬酶-3(Caspase-3)因子的含量变化。结果:鉴定并推断了鸡血藤总鞣质中15种成分。最终确定鸡血藤总鞣质低、中、高给药质量浓度分别为0. 5,1. 0,2. 0 g·L^-1,36 h为最佳给药时间。经鸡血藤总鞣质作用后宫颈癌细胞HeLa早凋与晚凋比例明显增加,宫颈癌细胞HeLa DNA合成前期(G0/G1期)明显增加,DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2/M期)减小。经鸡血藤总鞣质作用后,宫颈癌细胞HeLa上清液中VEGF-A因子显著降低,Caspase-3因子显著增加。结论:鸡血藤中含有丰富的鞣质类成分,此类成分对宫颈癌细胞HeLa有明显的抑制其增殖并促进其凋亡的作用,为该有效部位的后续研究与开发提供了实验依据。 展开更多
关键词 鸡血藤 总鞣质 3D微流控芯片 宫颈癌细胞HELA 细胞凋亡 细胞周期 酶联免疫吸附测定法
保妇康栓对宫颈癌细胞SiHa体外增殖和凋亡的影响 预览
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作者 李倩珺 胡艺琳 +3 位作者 梁琰 王婷 吴晓宾 晁艳 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第1期16-18,共3页
目的研究中药保妇康栓含药血清在细胞水平对宫颈癌SiHa细胞体外增殖及凋亡的影响,探讨保妇康栓抑制宫颈癌SiHa细胞生长可能的作用机制。方法中药保妇康栓含药血清培养液作用于SiHa细胞24、48、72h,并设立阴性及阳性(西药含药血清)对照组... 目的研究中药保妇康栓含药血清在细胞水平对宫颈癌SiHa细胞体外增殖及凋亡的影响,探讨保妇康栓抑制宫颈癌SiHa细胞生长可能的作用机制。方法中药保妇康栓含药血清培养液作用于SiHa细胞24、48、72h,并设立阴性及阳性(西药含药血清)对照组,采用CCK8及流式细胞分析技术进行细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡检测。结果保妇康栓对宫颈癌SiHa细胞增殖具有抑制作用,24h抑制作用最强。与阴性对照组比较,保妇康栓组SiHa细胞中G0/G1期细胞显著增多,S期细胞显著减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论保妇康栓的作用可能是通过阻断细胞从G0/G1期向S期分化,从而抑制宫颈癌SiHa细胞增殖并诱导凋亡来抑制肿瘤生长。 展开更多
关键词 莪术 冰片 宫颈肿瘤 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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丹酚酸B-TAT脂质体对HSF细胞增殖、侵袭和细胞周期的影响
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作者 时军 吴艳婷 +3 位作者 郭思旖 陈桂添 赖建辉 许小琪 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期357-363,共7页
制备载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),研究其对人皮肤成纤维细胞(HSF)生长增殖、迁移、侵袭和细胞周期的影响,初步评价其用于防治增生性瘢痕的效果。以体外培养的HSF细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐MTT法检测SAB-TAT-LI... 制备载丹酚酸B的穿膜肽TAT修饰脂质体(SAB-TAT-LIP),研究其对人皮肤成纤维细胞(HSF)生长增殖、迁移、侵袭和细胞周期的影响,初步评价其用于防治增生性瘢痕的效果。以体外培养的HSF细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐MTT法检测SAB-TAT-LIP对细胞生长增殖的抑制作用;采用Transwell小室法和划痕法检测SAB-TAT-LIP对细胞侵袭和迁移能力的影响;采用流式细胞术检测细胞周期变化。空白脂质体对HSF细胞基本无毒副作用,不同浓度的SAB-TAT-LIP干预HSF细胞不同时间后,均具有一定的增殖抑制作用,且呈现剂量和时间依赖性,同时细胞迁移和侵袭能力明显降低;SAB-TATLIP干预HSF细胞48 h后,可使细胞周期阻滞于G0/G1期,与空白对照组相比,P<0. 01。SAB-TAT-LIP对HSF细胞的增殖、侵袭和迁移有显著的抑制作用,对细胞周期G0/G1期有阻滞作用。 展开更多
关键词 丹酚酸B 穿膜肽TAT 脂质体 人皮肤成纤维细胞 增殖 迁移 细胞周期
SFPQ在肝细胞癌的表达及其对细胞增殖与细胞周期的影响
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作者 陈云茹 丹增措姆 +2 位作者 白文东 李青 涂康生 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期49-57,共9页
目的:探讨脯氨酸、谷氨酰胺剪接因子(SFPQ)在肝细胞癌(HCC)中的表达及作用。方法:采用实时定量PCR及Western blot检测HCC患者的癌组织和对应癌旁组织SFPQ mRNA及蛋白表达。采用TCGA和GEO数据库分析正常肝组织及HCC组织中SFPQ的表达丰度... 目的:探讨脯氨酸、谷氨酰胺剪接因子(SFPQ)在肝细胞癌(HCC)中的表达及作用。方法:采用实时定量PCR及Western blot检测HCC患者的癌组织和对应癌旁组织SFPQ mRNA及蛋白表达。采用TCGA和GEO数据库分析正常肝组织及HCC组织中SFPQ的表达丰度差异;采用TCGA数据库分析SFPQ表达与HCC患者临床分期、病理分级以及患者生存期的关系以及与增殖基因PCNA、Ki-67和周期蛋白CCNE1、CDK2的相关性。观察敲低HCC细胞株HepG2及Hep3B中SFPQ的表达后增殖能力与细胞周期的变化。结果:组织标本分析结果显示,SFPQ mRNA及蛋白表达水平在HCC组织中明显高于癌旁组织(均P<0.05)。数据库分析结果显示,HCC组织中SFPQ mRNA表达丰度明显高于正常肝组织,且患者临床分期及病理学分级越高,SFPQ mRNA水平越高,高表达SFPQ的患者的总生存率明显降低,SFPQ mRNA表达与PCNA、Ki-67、CCNE1、CDK2的表达均呈明显正相关(均P<0.05)。敲低SFPQ表达后,HepG2及Hep3B细胞的增殖能力明显减弱,并出现明显G1期阻滞(均P<0.05)。结论:SFPQ在HCC中表达升高,升高的SFPQ可通过调节HCC细胞周期,促进HCC细胞的增殖,加速肿瘤进展。 展开更多
关键词 肝细胞 PTB相关剪接因子 细胞增殖 细胞周期
蒎烷基噻唑腙类衍生物的合成及其抗肿瘤活性
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作者 匡红波 周慧 +3 位作者 卞天岑 谷文 朱永强 王石发 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期111-117,123共8页
以诺蒎酮为原料,经过加成、缩合、环化等反应,合成出蒎烷基噻唑腙衍生物4a~4n,采用FTIR、1HNMR、13CNMR和HRMS对化合物的结构进行了表征。考察了化合物4a~4n对人肝癌细胞(HepG2)、人多发性骨髓瘤细胞(RPMI-8226)、人肺癌细胞(A549)和乳... 以诺蒎酮为原料,经过加成、缩合、环化等反应,合成出蒎烷基噻唑腙衍生物4a~4n,采用FTIR、1HNMR、13CNMR和HRMS对化合物的结构进行了表征。考察了化合物4a~4n对人肝癌细胞(HepG2)、人多发性骨髓瘤细胞(RPMI-8226)、人肺癌细胞(A549)和乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的抗肿瘤活性。实验结果表明,化合物4a的抗肿瘤活性最强,其对Hep G2、8226、A549和231细胞的IC50分别低至5.8、8.8、7.1和10.6μmol/L;化合物4c的抗肿瘤活性也较强,其IC50分别为8.9、8.7、7.3和9.7μmol/L。细胞凋亡和周期实验数据显示,当化合物4a浓度从0增加到40μmol/L时,A549细胞的总凋亡率从6.55%增加到47.20%,G2/M期的细胞数量从13.50%上升至51.72%。以上结果表明,化合物4a能够诱导A549细胞凋亡,并将细胞有丝分裂周期阻滞在G2/M期。 展开更多
关键词 诺蒎酮 蒎烷基噻唑腙 抗肿瘤活性 细胞凋亡 细胞周期 医药与日化原料
Effect of Yanggan Jiedu Sanjie formula on human hepatocellular carcinoma Bel-7402 cells
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作者 Hu Bing Zhang Tong +5 位作者 An Hongmei Zheng Jialu Yan Xia Huang Xiaowei Tian Jianhui Li Miao 《中医杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期26-33,共8页
OBJECTIVE: To observe the effect of Yanggan Jiedu Sanjie(YGJDSJ) formula on human hepatocellular carcinoma Bel-7402 cells.METHODS: Bel-7402 cells were treated with YGJDSJ. Cell proliferation was detected by cell count... OBJECTIVE: To observe the effect of Yanggan Jiedu Sanjie(YGJDSJ) formula on human hepatocellular carcinoma Bel-7402 cells.METHODS: Bel-7402 cells were treated with YGJDSJ. Cell proliferation was detected by cell counting kit-8 assay. Cell apoptosis was identified by Hoechst 33258 staining and flow cytometric analysis. Cell cycle distribution was quantified by flow cytometric analysis. Caspase activities were measured by commercial kit. Cell senescence was detected by senescence-associated β-galactosidase(SA-β-gal)staining. Protein expression and phosphorylation were identified by Western blot. Protein expression was knocked-down by siRNA.RESULTS: YGJDSJ inhibited proliferation of Bel-7402 cells in a dose-and time-dependent manner.YGJDSJ induced apoptosis and activated caspase-3, 8, and 9 in Bel-7402 cells. YGJDSJ-induced apoptosis was completely abrogated by a pan caspase inhibitor, Z-VAD-FMK. YGJDSJ also induced cell senescence, up-regulated cyclin-dependent kinase inhibitor 1 a(CDKN1 a) and CDKN2 a expression and down-regulated retinoblastoma protein(RB) phosphorylation in Bel-7402 cells. Specific knockdown of CDKN1 a and CDKN2 a significantly reduced YGJDSJ-induce cell senescence in Bel-7402 cells.CONCLUSION: YGJDSJ inhibited cell proliferation,induced caspase-dependent apoptosis and CDKN1 a/CDKN2 a-RB signalling mediated cell senescence in Bel-7402 cells. Our findings suggest that YGJDSJ might be potential for hepatocellular carcinoma treatment. 展开更多
关键词 Carcinoma hepatocellular Chinese herbal FORMULA Apoptosis CELL SENESCENCE CELL cycle Cyclin-dependent KINASE INHIBITOR p21 Cyclindependent KINASE INHIBITOR p16 RETINOBLASTOMA protein
穿心莲内酯对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及其机制研究
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作者 刘红英 王协奇 +4 位作者 袁丽娜 刘影 彭燕 罗碧怡 何青莲 《广州中医药大学学报》 CAS 2019年第3期395-402,共8页
【目的】观察穿心莲内酯(Andro)对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及作用机制,探讨其体外抗肝癌作用。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Andro不同浓度(5、10、20、30、40、50μmol/L)及不同处理时间(24、48、72 h)对MHCC97H细胞增殖... 【目的】观察穿心莲内酯(Andro)对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及作用机制,探讨其体外抗肝癌作用。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Andro不同浓度(5、10、20、30、40、50μmol/L)及不同处理时间(24、48、72 h)对MHCC97H细胞增殖的影响;采用Annexin V—碘化丙啶(PI)双染法、Hoechst 33342染色法观察细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测凋亡相关蛋白如Bax、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、裂解型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、剪切型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PAPR),周期相关蛋白如周期素B1(cyclin B1)、周期素依赖性激酶1(CDK1)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白如m TOR、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)的表达。【结果】穿心莲内酯5、10、20、30、40、50μmol/L组24、48、72 h MHCC97H细胞增殖率下降,且随着Andro浓度、处理时间的增加而逐渐降低。Andro 25、50μmol/L组12、24、48 h MHCC97H细胞凋亡率均升高,呈浓度和时间依赖性。Andro 50μmol/L组48 h MHCC97H细胞发生G2/M期阻滞。与溶剂对照组比较,Andro 50μmol/L组中促凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP表达升高(P<0.05或P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01),周期蛋白cyclin B1和CDK1表达及mTOR信号通路蛋白mTOR、p70S6K的磷酸化水平均下降(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】Andro可能通过调控MHCC97H细胞凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP、Bcl-2及周期相关蛋白cyclin B1、CDK1的表达及抑制mTOR-p70S6K信号通路的激活,促进细胞凋亡及细胞周期阻滞,从而发挥体外抗肝癌作用。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 肝癌 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡 MTOR信号通路 MHCC97H细胞
Potassium bisperoxo(1,10-phenanthroline)oxovanadate suppresses proliferation of hippocampal neuronal cell lines by increasing DNA methyltransferases 预览
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作者 Xiao-Li Tian Shu-Yuan Jiang +7 位作者 Xiao-Lu Zhang Jie Yang Jun-He Cui Xiao-Lei Liu Ke-Rui Gong Shao-Chun Yan Chun-Yang Zhang Guo Shao 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期826-833,共8页
Bisperoxo(1,10-phenanthroline)oxovanadate(BpV)can reportedly block the cell cycle.The present study examined whether BpV alters gene expression by affecting DNA methyltransferases(DNMTs),which would impact the cell cy... Bisperoxo(1,10-phenanthroline)oxovanadate(BpV)can reportedly block the cell cycle.The present study examined whether BpV alters gene expression by affecting DNA methyltransferases(DNMTs),which would impact the cell cycle.Immortalized mouse hippocampal neuronal precursor cells(HT22)were treated with 0.3 or 3μM BpV.Proliferation,morphology,and viability of HT22 cells were detected with an IncuCyte real-time video imaging system or inverted microscope and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5(3-carboxymethonyphenol)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,respectively.mRNA and protein expression of DNMTs and p21 in HT22 cells was detected by real-time polymerase chain reaction and immunoblotting,respectively.In addition,DNMT activity was measured with an enzyme-linked immunosorbent assay.Effects of BpV on the cell cycle were analyzed using flow cytometry.Results demonstrated that treatment with 0.3μM BpV did not affect cell proliferation,morphology,or viability;however,treatment with 3μM BpV decreased cell viability,increased expression of both DNMT3B mRNA and protein,and inhibited the proliferation of HT22 cells;and 3μM BpV also blocked the cell cycle and increased expression of the regulatory factor p21 by increasing DNMT expression in mouse hippocampal neurons. 展开更多
关键词 nerve REGENERATION hippocampal neurons POTASSIUM bisperoxo(1 10-phenanthroline)oxovanadate DNA METHYLTRANSFERASE p21 HT22 CELL CELL cycle immunoblotting DNA methylation neural REGENERATION
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Gadd45蛋白家族在肿瘤发生发展中的作用 预览
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作者 曹宇 倪娟 +3 位作者 曹能 杨国防 薛京伦 汪旭 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第3期271-274,共4页
Gadd45蛋白是一种响应环境的应激蛋白,在DNA修复、细胞周期调控及衰老、基因毒性应激反应等多种细胞功能中起着重要的调节作用,该类蛋白包括α,β和γ三种亚型。大量研究结果显示,它们在肿瘤细胞中参与了多种信号通路的调控,与肿瘤的发... Gadd45蛋白是一种响应环境的应激蛋白,在DNA修复、细胞周期调控及衰老、基因毒性应激反应等多种细胞功能中起着重要的调节作用,该类蛋白包括α,β和γ三种亚型。大量研究结果显示,它们在肿瘤细胞中参与了多种信号通路的调控,与肿瘤的发生及发展关系密切,其表达改变与肿瘤预后息息相关。本文就近年来Gadd45蛋白家族与肿瘤发生发展的研究进展进行简要介绍与阐述。 展开更多
关键词 Gadd45蛋白 细胞周期 凋亡 自噬 侵袭转移 细胞耐药
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