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抗鸡传染性法氏囊病病毒抗体Fab的表达及其中和活性的测定 预览
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作者 张瑛杰 尹杰超 +5 位作者 李天鹤 周兵 徐鹏飞 荆燕 任桂萍 李德山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期866-870,共5页
为表达抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体Fab并检测其中和活性,本研究将抗IBDV抗体的轻链(L)和重链片段(Fd)基因分别克隆于pET-27b(+)载体中,并转化于大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。将L和Fd片段包涵体蛋白变性后等量... 为表达抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体Fab并检测其中和活性,本研究将抗IBDV抗体的轻链(L)和重链片段(Fd)基因分别克隆于pET-27b(+)载体中,并转化于大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。将L和Fd片段包涵体蛋白变性后等量混合于复性液中,制备Fab并对其进行活性鉴定。结果显示L和Fd蛋白相对分子质量大小分别为25ku和28ku。Westemblot和ELISA检测结果表明,获得的抗体Fab大小约为50ku,并且与VP2蛋白和不同病毒株均具有特异性结合能力。体外中和试验结果表明,获得的IBDV抗体Fab具有中和活性,可以有效阻断IBDV(B87株)对鸡胚成纤维细胞(DF1)的感染。本实验获得的IBDV抗体Fab有望成为治疗IBD的候选生物制剂,为研制治疗IBD抗体制剂奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 FAB抗体 共复性 中和活性 治疗性抗体
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