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麻黄肉种鸡蛋清中内源性禽白血病病毒的分离与遗传鉴定 预览 被引量:2
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作者 谭利强 冯敏 +3 位作者 郝建勇 秦建如 廖明 曹伟胜 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期3-5,8共4页
为了解麻黄肉种鸡蛋清中内源性禽白血病病毒(内源性ALV)的分布情况,从广东某麻黄肉种鸡场采集1 038份蛋清,经ALV p27抗原ELISA检测出30份阳性蛋清;将阳性蛋清同时接种DF1和CEF细胞,培养7d后,p27抗原ELI-SA检测到13份样品为DF1-CEF+;... 为了解麻黄肉种鸡蛋清中内源性禽白血病病毒(内源性ALV)的分布情况,从广东某麻黄肉种鸡场采集1 038份蛋清,经ALV p27抗原ELISA检测出30份阳性蛋清;将阳性蛋清同时接种DF1和CEF细胞,培养7d后,p27抗原ELI-SA检测到13份样品为DF1-CEF+;以这13份CEF+细胞培养物的基因组DNA为模板,经PCR扩增克隆测序最终得到了1株内源性ALV前病毒序列.将经ELISA、PCR和IFA等方法鉴定的该内源性ALV命名为HN1301株.基于遗传分析表明,HN1301株的前病毒基因序列与已知的E亚群毒株ev1、SD0501的相似性均为99.4%.表明该麻黄肉种鸡品系中存在有复制能力的内源性ALV,因而易干扰基于p27抗原的ELISA检测;本研究对于麻黄肉种鸡禽白血病的防控与净化有参考价值. 展开更多
关键词 麻黄肉种鸡 内源性禽白血病病毒 分离 遗传鉴定
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鸡致病性外源性禽白血病病毒特异性核酸探针交叉斑点杂交检测试剂盒的研制 预览 被引量:10
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作者 崔治中 赵鹏 +2 位作者 孙淑红 王鑫 李文平 《中国兽药杂志》 2011年第8期 5-11,共7页
用特定引物通过PCR合成了经地高辛标记的鸡致病性外源性及内源性禽白血病病毒特异性核酸探针,通过交叉斑点分子杂交,这些探针将可用于检测病料样品中致病性外源性禽白血病毒特异性核酸的存在。利用此试剂盒,对从病料组织样品中提取... 用特定引物通过PCR合成了经地高辛标记的鸡致病性外源性及内源性禽白血病病毒特异性核酸探针,通过交叉斑点分子杂交,这些探针将可用于检测病料样品中致病性外源性禽白血病毒特异性核酸的存在。利用此试剂盒,对从病料组织样品中提取的基因组DNA作交叉斑点分子杂交或对提取的DNA用相应引物扩增后的PCR产物作交叉斑点分子杂交,可在24~36h内完成检测并报告结果。 展开更多
关键词 鸡致病性外源禽白血病病毒 鸡内源性禽白血病病毒 特异性核酸探针 PCR 交叉斑点分子杂交 试剂盒
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J亚群禽白血病病毒套式PCR检测方法的建立 预览 被引量:2
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作者 陈国强 刁富花 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第12期60-63,共4页
本试验根据GenBank中登录的禽白血病病毒(ALV)基因组序列,设计合成了2对引物,外部引物的扩增片段大小为478 bp,内部引物的扩增片段大小为314 bp,建立了适合ALV快速检测的套式PCR方法(nested-PCR)。采用该方法对ALV毒株进行了检测,... 本试验根据GenBank中登录的禽白血病病毒(ALV)基因组序列,设计合成了2对引物,外部引物的扩增片段大小为478 bp,内部引物的扩增片段大小为314 bp,建立了适合ALV快速检测的套式PCR方法(nested-PCR)。采用该方法对ALV毒株进行了检测,试验结果表明,能扩增到314 bp的条带,禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、减蛋综合征病毒、禽网状内皮增生病病毒、禽呼肠孤病毒、马立克氏病病毒的扩增结果均为阴性。该方法第1次扩增的敏感性是100pg,第2次扩增的敏感性是1 fg,第2次比第1次扩增的敏感性高105倍。所建立的套式PCR方法具有敏感性高、重复性好、特异性强等优点,可用于禽白血病病毒(ALV)的临床诊断和分子流行病学调查等。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 逆转录套式PCR 检测
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AA肉种鸡内源性类ALV-J gp85基因及其抗原表位的分析
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作者 郭文龙 朱瑞良 +5 位作者 崔治中 闫振贵 马荣德 谭燕玲 朱明华 王新建 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期539-543,共5页
利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引物,从山东潍坊某肉种鸡场送检的7日龄肉种鸡基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因。利用ALV-J env基因特异性引物不能扩增出长度为2.2kb的目的片段,用ALV-J特异性单抗JE-9做间接免疫荧光检... 利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引物,从山东潍坊某肉种鸡场送检的7日龄肉种鸡基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因。利用ALV-J env基因特异性引物不能扩增出长度为2.2kb的目的片段,用ALV-J特异性单抗JE-9做间接免疫荧光检测,也呈现阴性反应。这种内源性类ALV-J gp85基因与已报道的禽内源性反录病毒EAV-HP序列的同源性为85.6%~93.8%,其中与ADOL 0系来航鸡EAV-HP的相似性最高(93.8%)。所得到的内源性类ALV-J gp85基因与外源性ALV-J毒株HPRS-103、SD07LK1、NX0101的同源性分别为93.8%、91.8%和91.7%。并且与外源性ALV-J gp85基因具有相似的Jameson-Worlf抗原表位优势。这种内源性类gp85基因很可能与肉雏鸡早期感染ALV-J后所呈现的免疫耐受现象有关。 展开更多
关键词 内源性反录病毒 内源性类ALV-J GP85基因 聚合酶链式反应
鸡内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的序列分析 预览 被引量:6
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作者 童淑梅 杨玉莹 +1 位作者 赵振华 秦爱建 《动物医学进展》 CSCD 2007年第1期 17-21,共5页
利用J亚群禽白血病病毒gp85基因两侧的序列为引物,从正常的SPF鸡胚、肉鸡胚、良凤花鸡胚和土鸡的基因组中扩增出完整的内源性类ALV-Jgp85基因序列。这4种不同品种来源的ALV-Jgp85基因与已报道的DF1细胞的内源性类ALV-Jgp85基因的同源... 利用J亚群禽白血病病毒gp85基因两侧的序列为引物,从正常的SPF鸡胚、肉鸡胚、良凤花鸡胚和土鸡的基因组中扩增出完整的内源性类ALV-Jgp85基因序列。这4种不同品种来源的ALV-Jgp85基因与已报道的DF1细胞的内源性类ALV-Jgp85基因的同源性依次为98.59/6、96.7%、98.6%、95.2%;与ALV-J原型株HPRS-103的同源性依次为97.3%、95.2%、97.6%、94.9%;与外源性IMC株的同源性依次为90.4%、88.5%、90.79,6、89.6%。这将为深入探讨内源性类gp85基因在感染ALV-J发病的过程中起何种作用奠定了基础。 展开更多
关键词 内源性类ALV-Jgp85基因 序列分析 基因的同源性
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鸡内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆及分析 预览 被引量:5
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作者 杨玉莹 秦爱建 +1 位作者 顾玉芳 赵振华 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期 54-59,共6页
为深入探讨J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)的亚群特性,利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引物,从正常SPF蛋鸡、商品肉鸡和DF1细胞基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因.肉鸡和DF1细胞内源性类ALV-J... 为深入探讨J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)的亚群特性,利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引物,从正常SPF蛋鸡、商品肉鸡和DF1细胞基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因.肉鸡和DF1细胞内源性类ALV-J gp85基因同源性达99.9%;SPF蛋鸡内源性类ALV-J gp85基因与肉鸡和DF1细胞的内源性类ALV-J gp85基因之间同源性达95.6%、95.3%.三种不同来源的内源性类ALV-J gp85基因DNA与IMC10200株ALV-J的gp85基因的同源性分别为91.8%、94.1%、94.0%;与ALV-J原型株HPRS-103gp85基因的同源性分别为95.6%、98.3%、99.9%.内源性类ALV-J gp85序列与外源性ALV-J gp85基因具有相似或一致的ORF和Jameson-Worlf抗原表位优势. 展开更多
关键词 内源性反录病毒 GP85基因 基因克隆 J亚群禽白血病病毒
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