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心房肌胞内钙浓度变化对心房颤动患者小电导钙激活钾通道电流的影响 预览 被引量:4
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作者 王华 李涛 +3 位作者 张丽 李妙龄 杨艳 曾晓荣 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2014年第4期296-300,305共6页
目的:SK通道存在于心肌细胞上,其中SK2亚型主要表达在心房。SK2通道对胞内游离钙离子高度敏感,可快速将钙离子浓度的变化转换成细胞膜电位变化。本实验应用穿孔膜片钳技术记录人心肌细胞SK2电流,观察心房肌细胞SK2电流在窦性患者和心... 目的:SK通道存在于心肌细胞上,其中SK2亚型主要表达在心房。SK2通道对胞内游离钙离子高度敏感,可快速将钙离子浓度的变化转换成细胞膜电位变化。本实验应用穿孔膜片钳技术记录人心肌细胞SK2电流,观察心房肌细胞SK2电流在窦性患者和心房颤动患者之间的差别,以及电极液中不同的钙浓度对两组细胞SK2电流的影响。方法:将接受体外循环手术的患者分为两组:心房颤动组和窦性心律组。以心房肌细胞为研究对象,用穿孔膜片钳技术记录人心肌细胞电流,观察窦性组与房颤组SK2通道电流的差异以及两组细胞SK2电流对电极液中钙敏感性的不同。结果:在全细胞穿孔膜片钳模式下,电极液中游离钙离子浓度为5×10-7mol/L时,记录到房颤组SK2通道电流明显大于窦性组,尤其是在超极化水平。膜电位在-130 mV时,窦性组与房颤组的SK2通道电流密度分别为(-2.92±0.35)pA/pF(n=6),(-6.83±0.19)pA/pF(n=3,P〈0.05)。在电极液游离钙离子浓度分别为0 mol/L、5×10-7mol/L、10-6mol/L,膜电位为-130 mV时,窦性组SK2通道电流密度分别为(-1.43±0.33)pA/pF(n=7),(-2.92±0.35)pA/pF(n=6),(-10.11±2.15)pA/pF(n=8,P〈0.05);房颤组SK2通道电流密度分别为(-2.17±0.40)pA/pF(n=4)(-6.83±0.19)pA/pF(n=3)(-14.47±2.89)pA/pF(n=4)(P〈0.05)。结论:人心房肌细胞SK2通道具有电压不敏感、内向整流、apamin敏感的特性。电极液中钙浓度相同的情况下,房颤组的SK2电流密度明显大于窦性组,SK2通道电流对钙离子的敏感性高于窦性组,提示SK2通道钙敏感性增加可能与心房颤动的发生发展密切相关。 展开更多
关键词 小电导钙激活钾通道 胞内钙 心房颤动 穿孔膜片钳技术 心房肌细胞
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18β-Glycyrrhetinic acid preferentially blocks late Na current generated by AKPQ Navl.5 channels
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作者 Yi-mei DU Cheng-kun XIA +3 位作者 Ning ZHAO Qian DONG Ming LEI Jia-hong XIA 《中国药理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2012年第6期 752-760,共9页
关键词 钠电流 甘草酸 浓度依赖性 后期 渠道 长QT综合征 爪蟾卵母细胞 甘草次酸
二性霉素B与β-escin混合穿孔电极液在人心房肌细胞SK2电流记录中的应用 预览 被引量:4
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作者 王华 李涛 +4 位作者 雷明 李妙龄 丁银元 杨艳 曾晓荣 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期 214-218,I0002,共6页
目的:为研究钙离子对人心房肌细胞小电导钙激活钾通道电流(ISK2)的调节作用,建立用二性霉素B(amphotericinB)与β-escin穿孔的膜片钳(PPR)技术。方法:体外循环术中取得右心耳,应用急性酶分离获得单个人体心房肌细胞,用二性霉... 目的:为研究钙离子对人心房肌细胞小电导钙激活钾通道电流(ISK2)的调节作用,建立用二性霉素B(amphotericinB)与β-escin穿孔的膜片钳(PPR)技术。方法:体外循环术中取得右心耳,应用急性酶分离获得单个人体心房肌细胞,用二性霉素B和/或β-escin作为穿孔电极液,进行穿孔膜片钳实验,在此模式下测试钙离子对人心房肌细胞SK2电流的调控作用,并用胞内钙测试系统验证穿孔前后胞内钙变化。结果:混合使用穿孔电极液6.88μg/mlβ-escin和150μg/ml二性霉素B与单独用150μg/ml二性霉素B或6.88μg/ml β-escin相比,前一种方法细胞容易封接,能形成稳定的穿孔膜片钳记录模式,可观察到SK2电流有激活,且胞内钙测试系统检测时可观察到穿孔后电极液至细胞内的游离钙离子浓度的增加,F340/380增强。结论:适当浓度的二性霉素B与β-escin混合使用进行穿孔膜片钳实验是一种稳定的全细胞膜片的记录技术,可以用于胞内游离钙离子对SK2电流调控的研究。 展开更多
关键词 β-escin 二性霉素B 人心房肌细胞 小电导钙激活钾电流 穿孔膜片钳技术
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抗人Kv1.5胞外环肽段E215抗体的制备与鉴定
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作者 戴芝银 刘坤 +8 位作者 曾秋棠 刘金平 祝聪聪 杨晓芳 廖玉华 王敏 陈志坚 黄丹 刘鸿涛 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期389-392,共4页
目的:为研究新的人Kv1.5(hKv1.5)通道/超快激活延迟整流钾通道(Ikur)阻滞剂,通过免疫法制备抗hKv1.5胞外环肽段E215的特异性抗体,并进行鉴定。方法:雄性新西兰大白兔,随机分为免疫组和假性免疫组。从hKv1.5胞外环中筛选出一段短肽... 目的:为研究新的人Kv1.5(hKv1.5)通道/超快激活延迟整流钾通道(Ikur)阻滞剂,通过免疫法制备抗hKv1.5胞外环肽段E215的特异性抗体,并进行鉴定。方法:雄性新西兰大白兔,随机分为免疫组和假性免疫组。从hKv1.5胞外环中筛选出一段短肽E215作为抗原肽免疫动物。免疫组予抗原免疫,2周1次,假性免疫组予0.9%氯化钠溶液免疫,方法同前。实验63 d处死,留取血清,亲合层析法提取、纯化抗肽段E215抗体。酶联免疫吸附法(ELISA)动态地观察抗体在体内的产生及效价,免疫荧光组织化学及免疫印迹(Western-blot)观察制备的抗体与人心房肌细胞膜及hKv1.5/Ikur通道蛋白的结合。结果:ELISA结果表明,免疫组于实验第28、42、56、63 d血清抗体滴度分别达到1∶6 400、1∶6 400、1∶6 400、1∶12 800;免疫荧光组织化学显示,制备的抗体能结合于人心房肌细胞的细胞膜;Western-blot结果表明,此抗体能特异性结合人心房肌细胞膜上分子量为75000的蛋白(hKv1.5/Ikur通道蛋白)。而假性免疫组未发现相同抗体产生。结论:所制备胞外环肽段E215的抗体能与人心房肌细胞膜上hKv1.5/Ikur通道特异性结合,为下一步实验提供了新的药理学干预手段。 展开更多
关键词 抗体 人心房肌细胞 KV1.5 胞外环
氯胺酮对人心房肌细胞瞬时外向钾电流的影响 被引量:1
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作者 邝素娟 邓春玉 +5 位作者 李晓红 刘晓颖 林秋雄 单志新 杨敏 余细勇 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期849-852,共4页
本研究应用全细胞膜片钳技术观察氯胺酮对人心房肌细胞瞬时外向钾电流(transient outward potassium current,Ito)的影响,以了解其作用的部分机制。标本取自心脏瓣膜置换病人的右心耳,采用急性酶解法消化分离人心房肌细胞,室温下以全... 本研究应用全细胞膜片钳技术观察氯胺酮对人心房肌细胞瞬时外向钾电流(transient outward potassium current,Ito)的影响,以了解其作用的部分机制。标本取自心脏瓣膜置换病人的右心耳,采用急性酶解法消化分离人心房肌细胞,室温下以全细胞膜片钳技术记录Ito,分别观察30、100、300和1000μmol·L-1的氯胺酮对Ito的作用。实验过程由pCLAMP9.0软件程序发放刺激和采集信号并存储于计算机中。结果表明,氯胺酮对Ito电流-电压曲线呈浓度依赖性抑制作用,在+50mV时,30、100、300和1000μmol·L-1的氯胺酮分别阻断Ito峰电流(13.62±0.04)%、(38.92±0.05)%、(72.24±0.10)%和(83.84±0.05)%,其半数有效浓度(IC50)为121μmol·L-1。但是100μmol·L-1氯胺酮对Ito的激活和失活曲线以及复活曲线均无明显影响。由此得知,氯胺酮呈浓度依赖性抑制人心房肌细胞瞬时外向钾电流。 展开更多
关键词 氯胺酮 膜片钳技术 人心房肌细胞 瞬时外向钾电流
慢性房颤患者心房肌细胞钠通道的变化 预览 被引量:2
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作者 陈丽 李忠稳 +3 位作者 杨艳 刘智飞 李其勇 曾晓荣 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第10期 1048-1051,共4页
目的研究慢性房颤病人心房肌细胞钠通道电流特征及其基因表达。方法膜片钳全细胞技术记录风湿性心脏病慢性房颤者和窦性心律者心房肌细胞钠通道电流;半定量反转录聚合酶链式反应测量心房肌细胞钠通道α亚单位基因(SCN5A)mRNA的表达... 目的研究慢性房颤病人心房肌细胞钠通道电流特征及其基因表达。方法膜片钳全细胞技术记录风湿性心脏病慢性房颤者和窦性心律者心房肌细胞钠通道电流;半定量反转录聚合酶链式反应测量心房肌细胞钠通道α亚单位基因(SCN5A)mRNA的表达。结果(1)与窦性心律相比,慢性房颤病人钠通道电流密度和恢复动力学无改变,钠通道电压依赖性失活曲线向更正的方向偏移;(2)慢性房颤病人基因表达无改变。结论慢性房颤病人心房传导速度的减慢不是由于钠通道电流的减小所致。 展开更多
关键词 慢性房颤 钠通道 人体心房肌 膜片钳 SCN5A
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氢化可的松琥珀酸钠对人和豚鼠心肌细胞钠电流的影响 预览 被引量:1
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作者 胡壮丽 刘慧 +3 位作者 胡燕 张德勇 孙宗全 金满文 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期 250-253,共4页
目的研究氢化可的松琥珀酸钠对人心房肌细胞和豚鼠心室肌细胞钠电流的影响.方法应用酶解法分离单个心肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录氢化可的松琥珀酸钠对钠电流的作用.结果氢化可的松琥珀酸钠(1,3,10 μmol·L-1)浓度依赖性地抑... 目的研究氢化可的松琥珀酸钠对人心房肌细胞和豚鼠心室肌细胞钠电流的影响.方法应用酶解法分离单个心肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录氢化可的松琥珀酸钠对钠电流的作用.结果氢化可的松琥珀酸钠(1,3,10 μmol·L-1)浓度依赖性地抑制人心房肌细胞和豚鼠心室肌细胞钠电流,IC50分别为6.97和8.74 μmol·L-1.氢化可的松琥珀酸钠不改变INa的最大激活电压.氢化可的松琥珀酸钠对钠电流的抑制作用起效快,见于用药后1~3 min.结论氢化可的松琥珀酸钠浓度依赖性地抑制钠电流,此作用出现快,提示可能与非基因组效应有关. 展开更多
关键词 氢化可的松琥珀酸钠 豚鼠 心肌细胞 钠电流 影响因素
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