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小叶莲中graphislactone A的分离制备及其抗肿瘤作用机制研究 被引量:1
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作者 高美玲 孙彦君 +7 位作者 冯卫生 付露 关延彬 张艳丽 弓建红 陈辉 李晓坤 王彦志 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第1期167-172,共6页
目的确定小叶莲中graphislactone A的制备分离方法;探讨graphislactone A诱导人乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡的作用机制。方法小叶莲药材采用醋酸乙酯超声提取,提取物经过硅胶柱色谱法富集目标成分,再用重结晶法纯化。采用MTT法检测... 目的确定小叶莲中graphislactone A的制备分离方法;探讨graphislactone A诱导人乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡的作用机制。方法小叶莲药材采用醋酸乙酯超声提取,提取物经过硅胶柱色谱法富集目标成分,再用重结晶法纯化。采用MTT法检测graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR的细胞毒活性。采用流式细胞术、RT-PCR技术和Western blotting法分别检测graphislactone A对乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡、凋亡相关基因及P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达的影响。结果建立了小叶莲中graphislactone A的制备分离方法。Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有细胞毒活性,IC50值分别为2.38、9.35μmol/L,且能够上调乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中p53、bax、caspase-3基因的表达,下调bcl-2基因和P-gp的蛋白表达。结论 Graphislactone A为首次从高等植物中发现的酚类化合物,该制备分离方法效率高、样品回收率高,得到的目标成分纯度高。与阳性药依托泊苷相比,Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有较强的细胞毒活性,且能够诱导其凋亡,其机制可能与p53的表达水平上调、激活caspase-3通路、调节bax和bcl-2的相对比例,下调P-gp的蛋白表达有关。 展开更多
关键词 小叶莲 graphislactone A 分离制备 细胞毒活性 多药耐药 乳腺癌 细胞凋亡
阿卡波糖中杂质的分离富集方法研究 预览 被引量:3
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作者 梁现蕊 张会晨 +2 位作者 何小嫒 吴晖 苏为科 《浙江工业大学学报》 北大核心 2017年第3期289-293,共5页
采用不同的酸、碱条件对阿卡波糖进行降解反应,可得到其杂质A和D,不同酸碱浓度、温度和降解时间等条件对两种杂质的生成量有较大的影响.结果显示在30℃和0.5moL/L的NaOH溶液中降解3h杂质A组分产量较高;在25℃和12moL/L的HCl溶液... 采用不同的酸、碱条件对阿卡波糖进行降解反应,可得到其杂质A和D,不同酸碱浓度、温度和降解时间等条件对两种杂质的生成量有较大的影响.结果显示在30℃和0.5moL/L的NaOH溶液中降解3h杂质A组分产量较高;在25℃和12moL/L的HCl溶液中降解1h杂质D组分产量较高.降解实验得到的粗品杂质A和D经制备液相色谱进一步分离富集,分别得到高纯度的两种杂质,并采用高分辨质谱对其进行了结构确认.实验对于提高阿卡波糖产品质量标准具有重要意义. 展开更多
关键词 阿卡波糖 杂质A 杂质D 分离富集
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菖蒲芋螺不同大小基因组DNA片段的分离制备 预览
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作者 丁青 刘月鹏 +3 位作者 朱晓鹏 吴科榜 罗素兰 长孙东亭 《热带生物学报》 2017年第3期267-276,共10页
使用常规酚/氯仿抽提法(CTAB法)、离心柱法和磁珠吸附法,分别从菖蒲芋螺毒腺、肌肉及肝胰脏中提取基因组DNA,利用普通琼脂糖凝胶电泳与脉冲场电泳(PFGE)对基因组DNA片段进行分离,并检测提取DNA的大小和分布范围,同时,对脉冲场电泳... 使用常规酚/氯仿抽提法(CTAB法)、离心柱法和磁珠吸附法,分别从菖蒲芋螺毒腺、肌肉及肝胰脏中提取基因组DNA,利用普通琼脂糖凝胶电泳与脉冲场电泳(PFGE)对基因组DNA片段进行分离,并检测提取DNA的大小和分布范围,同时,对脉冲场电泳条件进行了优化。结果表明,3种方法均可提取基因组DNA,其中CTAB法和离心柱法提取的毒腺DNA纯度高,产率大,可用于后续实验,而磁珠法产率适中且纯度不高,但离心柱法的DNA片段较小,大多在9 kb以下,而CTAB法提取的DNA片段较大,获得的20 kb以上的大片段量较多,更适合于大片段基因组文库的构建。3种芋螺组织中,肝胰脏产率最高但片段弥散有降解,毒腺DNA片段较大且集中,产率也较高,而肌肉的DNA片段产率最低且片段较小。因此,用CTAB法提取菖蒲芋螺毒腺的DNA更适合构建大片段基因组DNA文库。筛选高质量的菖蒲芋螺的DNA,利用优化的脉冲场电泳条件进行分离回收,获得了不同大小片段的DNA,为后续菖蒲芋螺不同载体系统的基因组文库构建奠定了基础。 展开更多
关键词 菖蒲芋螺 基因组DNA提取方法 基因组DNA片段 分离制备 脉冲场电泳
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茶叶中EGCG3"Me和EGCG4"Me的分离制备与鉴定 预览 被引量:3
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作者 李银花 张盛 +1 位作者 黄建安 刘仲华 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期313-318,共6页
采用柱色谱和高效制备液相色谱法从茶叶中分离制备2种甲基化EGCG(EGCG 3"Me和EGCG 4"Me)。用含水的乙酸乙酯提取茶叶,粗提液浓缩后经HP-20柱色谱分离,再经制备液相色谱分离,以水和乙腈为流动相进行梯度洗脱得到2种甲基化EGCG。经紫... 采用柱色谱和高效制备液相色谱法从茶叶中分离制备2种甲基化EGCG(EGCG 3"Me和EGCG 4"Me)。用含水的乙酸乙酯提取茶叶,粗提液浓缩后经HP-20柱色谱分离,再经制备液相色谱分离,以水和乙腈为流动相进行梯度洗脱得到2种甲基化EGCG。经紫外光谱、核磁共振及质谱分析,进一步确定2种甲基化EGCG分别为EGCG3"Me和EGCG4"Me。所制备的2种甲基化EGCG的纯度在98%以上。 展开更多
关键词 分离制备 茶叶 液相色谱分离 EGCG 鉴定 液相色谱法 甲基化 高效制备
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粘细菌BD105产生的抑瘤活性物质的分离制备 预览 被引量:2
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作者 张林松 张利平 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第11期 5531-5532,5543,共3页
从河北省微生物多样性研究与重点实验室保存的具有抑瘤活性的粘细菌BD105菌株中分离纯化了抑制人宫颈癌细胞的活性物质。应用分析型高效液相色谱对BD105菌株的发酵产物甲醇粗提液进行梯度洗脱,确定混合发酵产物的最适分离条件,再运用制... 从河北省微生物多样性研究与重点实验室保存的具有抑瘤活性的粘细菌BD105菌株中分离纯化了抑制人宫颈癌细胞的活性物质。应用分析型高效液相色谱对BD105菌株的发酵产物甲醇粗提液进行梯度洗脱,确定混合发酵产物的最适分离条件,再运用制备型高效液相色谱对不同组分进行分离,大量发酵后制备得到组分I(浅黄色粉末状化合物)。应用MTT法对得到的活性组分进行体外抗癌细胞活性检测,发现组分I对人宫颈癌细胞最高抑制活性达91.785%,体内动物实验也显示出高效低毒的生物活性。 展开更多
关键词 粘细菌 分离制备 抗癌活性
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高速逆流色谱-高效液相色谱法制备甘薯茎叶中化合物 预览 被引量:1
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作者 陆英 廖红梅 +2 位作者 谭君 吴朝比 刘仲华 《湖南农业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期 581-584,共4页
以徐薯18型甘薯茎叶为原料,建立了高速逆流色谱法制备分离甘薯茎叶中化合物的方法.以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(0.5%乙酸)(体积比0.5:5:1:5)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2mL/min,转速900r/min,进行2次分离,并结合1... 以徐薯18型甘薯茎叶为原料,建立了高速逆流色谱法制备分离甘薯茎叶中化合物的方法.以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(0.5%乙酸)(体积比0.5:5:1:5)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2mL/min,转速900r/min,进行2次分离,并结合1次制备高效液相,共分离得到7个高纯度化合物.结合化学显色反应、紫外扫描、高效液相色谱等,初步鉴定4个为黄酮类化合物,其中1个为芦丁,1个为槲皮苷. 展开更多
关键词 甘薯茎叶 高速逆流色谱 高效液相色谱 制备
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从大豆胚芽中分离纯化大豆皂苷的研究 预览 被引量:5
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作者 师文添 于学雷 +1 位作者 袁建 赵大云 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期25-29,共5页
以大豆胚芽为原料,通过溶剂萃取,大孔吸附树脂与阳离子交换树脂除杂处理,凝胶渗透色谱初步纯化,然后利用高效液相色谱纯化制备了5个大豆皂苷单体,液相色谱-质谱联用鉴定结果为两个A组大豆皂苷Aa、Ab,三个B组大豆皂苷Ba、Bb和Be。通过蒸... 以大豆胚芽为原料,通过溶剂萃取,大孔吸附树脂与阳离子交换树脂除杂处理,凝胶渗透色谱初步纯化,然后利用高效液相色谱纯化制备了5个大豆皂苷单体,液相色谱-质谱联用鉴定结果为两个A组大豆皂苷Aa、Ab,三个B组大豆皂苷Ba、Bb和Be。通过蒸发光散射与紫外检测并用,高效液相色谱分析其纯度皆达到95%以上,可作为标准品用于大豆皂苷含量的分析检测。 展开更多
关键词 大豆 大豆皂苷 分离制备
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高效半制备液相色谱法从橘皮中分离制备黄酮类化合物 预览 被引量:5
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作者 刘均玉 许晨 +1 位作者 许建中 陈清松 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2009年第2期,共4页
采用高效半制备液相色谱法从橘皮中分离制备黄酮类化合物。橘皮提取液经过过滤、浓缩、D101大孔树脂吸附、甲醇洗脱后,在室温、283nm波长、1.0mL的进样量和以流速为15mL/min的MeOH:H2O(0.5%HAc)=19:31做洗脱液条件下,用YEG-C18色谱柱分... 采用高效半制备液相色谱法从橘皮中分离制备黄酮类化合物。橘皮提取液经过过滤、浓缩、D101大孔树脂吸附、甲醇洗脱后,在室温、283nm波长、1.0mL的进样量和以流速为15mL/min的MeOH:H2O(0.5%HAc)=19:31做洗脱液条件下,用YEG-C18色谱柱分离得到8种化合物。通过紫外分光光度法、标准品液相色谱对照法、质谱特征离子峰法初步确定其中5种化合物为新橙皮苷、橙皮苷、柚皮苷、异柚皮苷、新圣草苷,其它3种物质有待进一步鉴定。橙皮苷、柚皮苷、异柚皮苷、新橙皮苷的色谱分析纯度达到或超过99.0%。 展开更多
关键词 HPLC 分离制备 黄酮类化合物 橘皮 紫外分光光度法 质谱
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牧草膳食纤维及其发展趋势 预览 被引量:2
9
作者 姜义宝 《草业科学》 CAS CSCD 2008年第6期 62-66,共5页
膳食纤维对人体健康具有重要的生理功能和医疗作用,引起世界各国营养学家的极大关注,随着人们对牧草应用研究的不断深入,牧草已成为提取膳食纤维的重要原料。综述了牧草膳食纤维研究概况,包括牧草膳食纤维的优点、生理功能、分离制... 膳食纤维对人体健康具有重要的生理功能和医疗作用,引起世界各国营养学家的极大关注,随着人们对牧草应用研究的不断深入,牧草已成为提取膳食纤维的重要原料。综述了牧草膳食纤维研究概况,包括牧草膳食纤维的优点、生理功能、分离制备和改性方法等,并对今后牧草膳食纤维发展提出一些看法和展望。牧草膳食纤维的开发不但可以提高牧草的综合利用率,增加经济效益,为牧草的加工开辟了新途径。加大牧草等新膳食纤维资源的研究工作,对于改善人口的膳食结构,促进经济发展,都具有重要的现实意义。 展开更多
关键词 膳食纤维 生理功能 分离制备
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辣根过氧化物酶的分离制备和纯化 预览 被引量:5
10
作者 范军 李纯 +2 位作者 稽跃琴 程备久 蒋立科 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 1998年第3期 313-316,共4页
从辣根块茎分离和纯化了辣根过氧化物酶(HRP),纯化程度包括匀浆、加热、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和CM-23阴离子交换层析。纯化的HRP的K4值为2.5×10^5,RZ值值3.00,酶的比活406U/mg蛋白... 从辣根块茎分离和纯化了辣根过氧化物酶(HRP),纯化程度包括匀浆、加热、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和CM-23阴离子交换层析。纯化的HRP的K4值为2.5×10^5,RZ值值3.00,酶的比活406U/mg蛋白。它的SDS-PAGE显示一条带,酶亚基分子量为40KD,等电聚焦电泳呈现三条带,酶不舔生染色呈现多条带,表明有同工酶存在。对酶的分离纯化作了一些改进,如加氨水保持PH值,加入5mmol/ 展开更多
关键词 辣根过氧化物酶 分离 制备 纯化
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