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Microtubule-bundling protein Spef1 enables mammalian ciliary central apparatus formation
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作者 Jianqun Zheng Hao Liu +7 位作者 Lei Zhu Yawen Chen Huijie Zhao Wei Zhang Fan Li Lele Xie Xiumin Yan Xueliang Zhu 《分子细胞生物学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期67-77,共11页
Cilia are cellular protrusions containing nine microtubule(MT)doublets and function to propel cell movement or extracellular liquid flow through beating or sense environmental stimuli through signal transductions.Cili... Cilia are cellular protrusions containing nine microtubule(MT)doublets and function to propel cell movement or extracellular liquid flow through beating or sense environmental stimuli through signal transductions.Cilia require the central pair(CP)apparatus,consisting of two CP MTs covered with projections of CP proteins,for planar strokes.How the CP MTs of such‘9+2’cilia are constructed,however,remains unknown.Here we identify Spef1,an evolutionarily conserved microtubule-bundling protein,as a core CP MT regulator in mammalian cilia.Spef1 was selectively expressed in mammalian cells with 9+2 cilia and specifically localized along the CP.Its depletion in multiciliated mouse ependymal cells by RNAi completely abolished the CP MTs and markedly attenuated ciliary localizations of CP proteins such as Hydin and Spag6,resulting in rotational beat of the ependymal cilia.Spef1,which binds to MTs through its N-terminal calponin.homologous domain,formed homodimers through its C-terminal coiled coil region to bundle and stabilize MTs.Disruption of either the MT-binding or the dimerization activity abolished the ability of exogenous Spef1 to restore the structure and functions of the CP apparatus.We propose that Spefl bundles and stabilizes central MTs to enable the assembly and functions of the CP apparatus. 展开更多
关键词 central pair apparatus CILIUM MICROTUBULE MOUSE ependymal CELL MOUSE TRACHEAL epithelial CELL Spef1
Orai1蛋白体外干预对小鼠nuocyte细胞功能的影响
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作者 蔺林 陈峥 +2 位作者 戴飞 魏瑾瑾 汤欣玥 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2019年第1期41-46,共6页
目的探讨nuocyte细胞是否表达Orai1蛋白及该蛋白的功能。方法用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)建立小鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型,计数AR小鼠的打喷嚏、挠鼻次数,分离、提纯并体外培养AR小鼠鼻相关淋巴组织(nasal-associated lymp... 目的探讨nuocyte细胞是否表达Orai1蛋白及该蛋白的功能。方法用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)建立小鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型,计数AR小鼠的打喷嚏、挠鼻次数,分离、提纯并体外培养AR小鼠鼻相关淋巴组织(nasal-associated lymphoid tissue,NALT)中的nuocyte细胞,用激光扫描共聚焦显微镜定性检测该细胞Orai1蛋白的表达,以ELISA法和实时荧光定量RT-PCR法分别定量检测该细胞Orai1蛋白及其mRNA的表达量,将小鼠重组(recombinant,rm)白介素(interleukin,IL)-33加入nuocyte细胞培养基,检测其中IL-5和IL-13蛋白及其mRNA的浓度,然后再将Orai1蛋白抗体加入nuocyte细胞培养基,再次检测其中IL-5和IL-13蛋白及其mRNA的含量。结果小鼠AR模型打喷嚏和挠鼻次数较正常小鼠显著增多,OVA诱导NALT来源的小鼠nuocyte细胞被鉴定为CD3CD4CD8CD19CD11bCD11cFcεR1(lineage)-ICOS+,该细胞表面表达Orai1蛋白,其蛋白和mRNA含量均较正常小鼠显著升高,rmIL-33加入nuocyte细胞培养基后,IL-5和IL-13蛋白及其mRNA的浓度均明显增多,而加入Orai1蛋白抗体后,其浓度出现下降。结论 nuocyte细胞表达Orai1蛋白,该蛋白的干预抑制nuocyte细胞的正常功能。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 Orai1蛋白 nuocyte细胞 小鼠 鼻相关淋巴组织 白介素
小鼠转录因子STAT1真核表达质粒的构建及生物学功能分析 预览
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作者 韩凯凯 赵冬敏 +6 位作者 毕可然 章丽娇 刘青涛 刘宇卓 黄欣梅 杨婧 李银 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期136-141,共6页
本研究以小鼠组织的总RNA为模板,通过RT-PCR扩增得到小鼠信号转导子和转录激活子1(STAT1)基因完整开放阅读框的碱基序列,然后将其克隆到真核表达载体pDsRed-N1中,构建pDsRed-N1-STAT1重组质粒。测序成功的真核质粒转染至BHK-21细胞,通... 本研究以小鼠组织的总RNA为模板,通过RT-PCR扩增得到小鼠信号转导子和转录激活子1(STAT1)基因完整开放阅读框的碱基序列,然后将其克隆到真核表达载体pDsRed-N1中,构建pDsRed-N1-STAT1重组质粒。测序成功的真核质粒转染至BHK-21细胞,通过α干扰素(IFN-α)分子刺激,检测细胞中STAT1分子的活化状态与定位,最终通过坦布苏病毒刺激,荧光显微镜检测STAT1分子的细胞内定位。结果表明,小鼠的STAT1基因开放阅读框为2250bp,编码749个氨基酸。同源性比对结果表明,小鼠STAT1与人、大鼠、猪、马等哺乳动物STAT1氨基酸序列的一致性分别为92%、97%、91%、91%。转染结果表明,构建的pDsRed-N1-STAT1真核表达质粒在BHK-21细胞中成功表达,无IFN-α刺激时,红色荧光只在BHK-21细胞的细胞质中出现,而加入IFN-α后,红色荧光则大多分布于细胞核内。用坦布苏病毒感染细胞后,红色荧光多分布于细胞质中。说明,构建的真核质粒pDsRed-N1-STAT1在哺乳动物细胞中能够正确表达融合蛋白质Red-STAT1,而且在IFN-α刺激下,Red-STAT1可由细胞质向细胞核转运,同时发现,坦布苏病毒感染能够有效抑制STAT1分子的核转运。 展开更多
关键词 小鼠 信号转导子和转录激活子1 Α干扰素
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H1N1猪流感病毒介导小鼠 mmu-miR-206-3p下调及其对FN1表达过程的影响
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作者 谢博 黄良宗 +2 位作者 李丽 顾万军 邝伟键 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期84-87,180共5页
为了分析H1N1猪流感病毒(SIV)介导小鼠mmu-miRNA-206-3p(mmu-miR-206-3p)下调及其对纤连蛋白1(FN1)表达过程的影响,试验选用10只6周龄雌性SPF级Balb/c小鼠建立感染H1N1 SIV小鼠模型,并将小鼠分为对照组和攻毒组,对照组用无病毒的尿囊液... 为了分析H1N1猪流感病毒(SIV)介导小鼠mmu-miRNA-206-3p(mmu-miR-206-3p)下调及其对纤连蛋白1(FN1)表达过程的影响,试验选用10只6周龄雌性SPF级Balb/c小鼠建立感染H1N1 SIV小鼠模型,并将小鼠分为对照组和攻毒组,对照组用无病毒的尿囊液滴鼻,攻毒组用病毒尿囊液滴鼻,观察并记录小鼠的表现,利用RT-qPCR、Western-blot方法检测mmu-miR-206-3p、FN1和纤连蛋白1基因(Fn1)的变化。结果表明:感染H1N1 SIV 48 h后,对照组小鼠无异常表现,攻毒组小鼠精神萎靡,扎堆,食欲减退,被毛逆立。与对照组相比,12 h后攻毒组mmu-miR-206-3p相对表达量下降, FN1相对表达量升高,Fn1相对表达量变化不显著。说明H1N1 SIV可抑制mmu-miR-206-3p表达,减少mmu-miR-206-3p对Fn1翻译的抑制,进而导致FN1的相对表达量升高。 展开更多
关键词 H1N1猪流感病毒 纤连蛋白1 纤连蛋白1基因 小鼠 microRNA mmu-miRNA-206-3P 肺脏纤维化
不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用 预览
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作者 王翠芳 王特日格乐 +4 位作者 丹妮 杜红喜 张秀媛 萨茹丽 敖长金 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期342-350,共9页
本试验旨在研究通过超声波法提取的35%和75%乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用。采用细胞计数试剂盒检测不同添加浓度(25、50、100、200、400μg/mL)的35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞活性的... 本试验旨在研究通过超声波法提取的35%和75%乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用。采用细胞计数试剂盒检测不同添加浓度(25、50、100、200、400μg/mL)的35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响;设空白对照组、LPS应激模型组、不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮组(分别加入25、50、100μg/mL 35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮溶液),采用Griess、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附测定法检测不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子及炎性因子的影响。结果表明:与空白对照组相比,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮在25~100μg/mL添加浓度内可极显著提高小鼠腹腔巨噬细胞活性(P<0.01)。与LPS应激模型组相比,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮均可极显著极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮含量及诱导型一氧化氮合酶mRNA相对表达量(P<0.01),并均呈剂量依赖效应,且75%乙醇洗脱沙葱黄酮作用效果优于35%乙醇洗脱沙葱黄酮;35%乙醇洗脱沙葱黄酮可极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量(P<0.01),极显著降低TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量(P<0.01);75%乙醇洗脱沙葱黄酮可显著或极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α含量(P<0.05或P<0.01),极显著降低TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量(P<0.01)。由此可见,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮可通过提高小鼠腹腔巨噬细胞活性、调控细胞因子及炎性因子的分泌而发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 沙葱 黄酮 脂多糖 小鼠 腹腔巨噬细胞 炎症
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cxcr2 基因修饰小鼠骨髓间充质干细胞的构建与鉴定 预览
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作者 张莉 刘永飞 +3 位作者 叶传涛 边培育 雷迎峰 侯立朝 《微生物学免疫学进展》 2019年第1期19-25,共7页
目的构建小鼠CXC型趋化因子受体2(CXCR2)基因cxcr2过表达的骨髓间充质干细胞(Bonemarrowmesenchymalstemcell,BMSC)并进行鉴定。方法全骨髓贴壁法分离培养小鼠BMSC,采用流式细胞术检测干细胞抗原1(stemcellantigen-1,SCA-1)、CD44、CD43... 目的构建小鼠CXC型趋化因子受体2(CXCR2)基因cxcr2过表达的骨髓间充质干细胞(Bonemarrowmesenchymalstemcell,BMSC)并进行鉴定。方法全骨髓贴壁法分离培养小鼠BMSC,采用流式细胞术检测干细胞抗原1(stemcellantigen-1,SCA-1)、CD44、CD43、CD45、IA/IE表达率,并诱导成骨分化。以含有小鼠cxcr2的质粒为模版进行PCR扩增,将获得的cxcr2克隆到慢病毒载体,命名为pLenti-cxcr2-GZ;将其与慢病毒包装质粒共转染HEK-293T细胞,收获慢病毒后,通过离心法感染BMSC,经过1μg/mLzeocin压力选择建立了稳定表达CXCR2的小鼠BMSC(CXCR2-BMSC)。采用流式细胞术和RT-PCR分别检测其CXCR2蛋白和mRNA表达水平,Transwell趋化实验检测其迁移能力。结果90%以上的第3代BMSC表达CD44、SCA-1,几乎不表达IA/IE、CD34、CD45,且成功诱导成骨分化。菌液PCR、质粒双酶切后,琼脂糖凝胶电泳鉴定结果得到特异、大小正确的条带及测序鉴定正确,表明成功构建了pLenti-cxcr2-GZ表达质粒。流式细胞术和RT-PCR结果显示,CXCR2-BMSC的CXCR2蛋白和mRNA表达水平均明显高于对照组BMSC,差异有统计学意义(P<0.001)。Transwell结果显示,CXCR2-BMSC迁移能力高于对照组BMSC,差异有统计学意义(P<0.01)。结论利用慢病毒系统成功构建了稳定表达CXCR2的BMSC,cxcr2基因修饰BMSC后可明显增加BMSC的迁移能力。 展开更多
关键词 CXC型趋化因子受体2 小鼠 骨髓间充质干细胞 细胞迁移
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姜黄素对5/6肾结扎诱导的慢性肾病小鼠模型肾纤维化的保护作用 预览
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作者 严颖 谭睿陟 +5 位作者 赵长英 李健春 钟霞 王露 林晓 王丽 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期52-58,共7页
目的研究姜黄素对慢性肾病(CKD)肾纤维化的保护作用,并探讨可能作用机制。方法30只C57BL/6J小鼠随机分成假手术对照组(NC)、5/6肾结扎模型组(LIG)和姜黄素治疗组(LIG+CUR),每组10只,按照改良的5/6肾结扎方法制作CKD动物模型,姜黄素组小... 目的研究姜黄素对慢性肾病(CKD)肾纤维化的保护作用,并探讨可能作用机制。方法30只C57BL/6J小鼠随机分成假手术对照组(NC)、5/6肾结扎模型组(LIG)和姜黄素治疗组(LIG+CUR),每组10只,按照改良的5/6肾结扎方法制作CKD动物模型,姜黄素组小鼠给予含姜黄素饲料(每日100mg/kg),其余组给予正常饲料,三月后牺牲小鼠,检测纤维化指标α-SMA及参与慢性肾病纤维化的Hippo通路转录激活子Yap。结果肾功能检测结果显示,与假手术组相比,结扎组中的尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)显著增高,给予姜黄素可以有效保护肾功能受损;H&E、Masson和免疫组化结果均显示,结扎组小鼠的肾出现明显肾小管病变和一定程度的纤维化改变,给予姜黄素后纤维化程度显著减轻(P<0.05);而Yap蛋白在造模后mRNA和蛋白水平均出现升高,姜黄素处理后则显著下降(P<0.05)。结论姜黄素可有效改善5/6肾结扎诱导的慢性肾病病症和减轻纤维化病变,机制研究结果初步提示可能与降低Hippo信号通路中的Yap表达有关。 展开更多
关键词 慢性肾病 5/6肾结扎 姜黄素 Yap
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西酞普兰对小鼠角膜上皮细胞和泪膜功能的影响 预览
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作者 闵幼兰 刘佳祥 +8 位作者 贺赢 马明洋 徐晓玮 姜楠 刘康成 袁晴 朱佩文 叶蕾 邵毅 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第1期1-6,共6页
目的研究西酞普兰对小鼠泪膜功能和角膜上皮细胞的影响。方法选取36只BABL/c雄性小鼠随机分为A、B、C3组,A组:空白对照组(不进行任何处理);B组:生理盐水组,以10mg/kg腹腔注射生理盐水;C组:西酞普兰组,以10mg/kg腹腔注射西酞普兰。分别... 目的研究西酞普兰对小鼠泪膜功能和角膜上皮细胞的影响。方法选取36只BABL/c雄性小鼠随机分为A、B、C3组,A组:空白对照组(不进行任何处理);B组:生理盐水组,以10mg/kg腹腔注射生理盐水;C组:西酞普兰组,以10mg/kg腹腔注射西酞普兰。分别在实验第1、4和7天时行泪液分泌试验(SIT)、泪膜破裂时间(BUT)检测,同时于实验第7天进行角膜荧光素染色(FL),取眼球做扫描电镜及HE染色观察角膜上皮损伤情况。结果①3组不同时间点的SIT、BUT、FL有差异(F=9.749、10.427和6.752,P=0.008、0.019和0.032);②3组的SIT、BUT、FL有差异(F=11.234、14.842和5.337,P=0.002、0.012和0.029);③3组的SIT、BUT、FL变化趋势有差异(F=16.438、11.753和16.431,P=0.000、0.001和0.002)。干预后第7天,3组上皮空泡细胞数比较,差异有统计学意义(F=7.749,P=0.013)。3组微绒毛数量比较差异无统计学意义(F=0.917,P=0.092)。结论西酞普兰会损伤小鼠泪膜功能的稳定性,但对角膜上皮细胞无影响。 展开更多
关键词 干眼病 泪膜/眼 西酞普兰 小鼠 上皮 角膜
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肌动蛋白细胞骨架在小鼠第二生心区祖细胞部署发育中的作用 预览
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作者 刘钟颖 黄霞 +2 位作者 李紫怡 杨子豪 袁白银 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期125-136,共12页
脊椎动物心管起源于早期胚胎的生心中胚层细胞,随后从邻近的咽中胚层和内脏中胚层中逐渐添加第二生心区(second heart field,SHF)祖细胞而延长。SHF细胞向心管贡献受损,使心管不能最大限度地延长,导致一系列的心脏发育缺陷,包括最常见... 脊椎动物心管起源于早期胚胎的生心中胚层细胞,随后从邻近的咽中胚层和内脏中胚层中逐渐添加第二生心区(second heart field,SHF)祖细胞而延长。SHF细胞向心管贡献受损,使心管不能最大限度地延长,导致一系列的心脏发育缺陷,包括最常见的右心室发育不良与流出道分隔旋转异常等先天性出生缺陷。SHF祖细胞构成非经典顶端-基底极性上皮,并具有顶部单纤毛、动态肌动蛋白(actin)富集基底端的丝状伪足等特点。本文总结了actin细胞骨架在小鼠SHF祖细胞部署发育过程中的研究进展,揭示actin细胞骨架在SHF祖细胞发育特别是SHF细胞向流出道部署过程中的重要性,以期为阐明和理解SHF祖细胞迁移、部署的细胞生物学特性提供一定的理论参考。 展开更多
关键词 肌动蛋白 第二生心区 细胞部署 小鼠
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不同严重程度变应性鼻炎小鼠模型的制备 预览
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作者 熊亚军 金日群 彭韶平 《赣南医学院学报》 2019年第2期121-123,143共4页
目的:建立不同严重程度的变应性鼻炎小鼠模型。方法:用含有氢氧化铝佐剂的卵清蛋白腹腔注射致敏BALB/c小鼠,然后于激发阶段分别予以卵清蛋白连续鼻部激发7天,14天和21天建立模型。通过行为学、鼻粘膜组织形态学和血清sIgE含量三个方面... 目的:建立不同严重程度的变应性鼻炎小鼠模型。方法:用含有氢氧化铝佐剂的卵清蛋白腹腔注射致敏BALB/c小鼠,然后于激发阶段分别予以卵清蛋白连续鼻部激发7天,14天和21天建立模型。通过行为学、鼻粘膜组织形态学和血清sIgE含量三个方面来评价模型的建立情况。结果:鼻部激发时间不同的三组模型小鼠与对照组比较,行为学评分、血清sIgE的含量均升高(P<0.05)。三组模型小鼠间比较,随着激发时间的延长,行为学评分、血清sIgE的含量增加(P<0.05)。结论:通过延长鼻部激发时间,可以建立不同严重程度的变应性鼻炎小鼠模型。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 动物模型 小鼠 卵清蛋白
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对氧磷酶3基因过表达对急性中毒小鼠肝损伤的保护作用及机制
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作者 伍洋 刘英 +1 位作者 刘济滔 尹德锋 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期179-184,共6页
目的探讨对氧磷酶3(PON3)对急性中毒肝损伤的保护作用及作用机制。方法将40只Balb/c小鼠随机分为4组,正常对照(NC)组、敌敌畏(DDVT)对照组、绿色荧光蛋白慢病毒(Lv-GFP)组和重组PON3慢病毒(Lv-PON3)组,每组10只。LV-GFP组和Lv-PON3组小... 目的探讨对氧磷酶3(PON3)对急性中毒肝损伤的保护作用及作用机制。方法将40只Balb/c小鼠随机分为4组,正常对照(NC)组、敌敌畏(DDVT)对照组、绿色荧光蛋白慢病毒(Lv-GFP)组和重组PON3慢病毒(Lv-PON3)组,每组10只。LV-GFP组和Lv-PON3组小鼠经尾静脉分别注射2×107TU的Lv-GFP、Lv-PON3慢病毒,3 d后腹腔注射敌敌畏(DDVT)溶液9 mg/kg,DDVT组只需腹腔注射同等剂量DDVT,NC组注射同等剂量生理盐水。各组于DDVT染毒后12 h麻醉处死10只小鼠取肝组织,ELISA法检测各组血清乙酰胆碱酯酶(ACh E)、肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)和肝组织氧化应激指标丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH),HE染色法观察肝组织形态学改变,Real-time PCR检测肝组织Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、血红蛋白加氧酶(HO-1)和转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2) mRNA的表达。结果与NC组比较,DDVT组和Lv-GFP组肝组织MDA、ALT、AST水平,HO-1和Nrf2 mRNA表达量明显升高,ACh E、CAT、SOD、GSH水平和Keap1 mRNA表达量均明显降低(P <0. 05)。与DDVT组比较,Lv-PON3组肝组织MDA、ALT、AST水平,Keap1 mRNA表达量降低,ACh E、CAT、SOD和GSH水平均明显著升高,HO-1和Nrf2 mRNA表达量显著上升(P<0. 05)。正常对照组肝细胞结构清晰,未出现肝细胞坏死和脂肪病变的情况,DDVT组和Lv-GFP组出现肝细胞坏死和脂肪变性等病理改变,Lv-PON3组肝脏病变组织肝细胞坏死和脂肪变性细胞数有一定的减少。结论PON3可通过Keap1-Nrf2/HO-1途径缓解氧化应激反应,改善肝功能,对敌敌畏急性中毒小鼠肝损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 对氧磷酶3 急性中毒 肝损伤 氧化应激 转染 实时定量聚合酶链反应 小鼠
氟西汀通过上调海马内溴结构域蛋白4的表达改善慢性束缚应激所致小鼠的抑郁样行为
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作者 王贞 黄怡佳 +7 位作者 乃爱桃 牛磊 罗诗诗 万炜 刘政海 陈熙 徐杨 曹文宇 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期18-23,共6页
目的探讨氟西汀(FLX)对慢性束缚应激(CRS)所致小鼠抑郁样行为及海马内溴结构域蛋白4(BRD4)表达的影响。方法 24只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水对照(NS)组、抑郁模型(CRS)组、氟西汀干预(CRS+FLX)组。慢性束缚应激3周建立小鼠抑郁模型,... 目的探讨氟西汀(FLX)对慢性束缚应激(CRS)所致小鼠抑郁样行为及海马内溴结构域蛋白4(BRD4)表达的影响。方法 24只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水对照(NS)组、抑郁模型(CRS)组、氟西汀干预(CRS+FLX)组。慢性束缚应激3周建立小鼠抑郁模型,应激的第8天至第21天CRS+FLX组于应激前30 min腹腔注射氟西汀(10 mg/kg),NS组及CRS组注射等体积生理盐水。采用糖水偏好实验、喷糖实验、强迫游泳实验、新旧事物识别实验和旷场实验检测各组小鼠行为变化;采用Western blotting及Real-time PCR法检测小鼠海马BRD4蛋白和mRNA的表达情况。结果与NS组相比,CRS组小鼠表现出明显的抑郁样行为,包括糖水偏好百分比显著降低(P<0.01),喷糖实验舔糖时间缩短(P<0.05),强迫游泳不动时间增加(P<0.01),新事物辨别指数降低(P<0.0001),抗抑郁药FLX干预可逆转CRS所诱导的上述抑郁样行为表现(P<0.05);与NS组相比,CRS组小鼠海马BRD4蛋白及mRNA的表达明显下调(1.0000±0.04577比0.08337±0.01658;1.0000±0.04379比0.6672±0.03193,P<0.05),而FLX可上调抑郁小鼠海马BRD4蛋白及mRNA的表达(0.08337±0.01658比0.4983±0.08574;0.6672±0.03193比0.8572±0.03181,P<0.05)。结论氟西汀可能通过上调海马BRD4的表达改善小鼠抑郁样行为。 展开更多
关键词 氟西汀 慢性束缚应激 抑郁症 溴结构域蛋白4 海马 实时定量聚合酶链反应 小鼠
骆越壮酒对正常小鼠免疫功能的影响 预览
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作者 李耀燕 张曼 +4 位作者 闫国跃 白燕远 杜俊芳 谢阳姣 李彤 《中国中医药科技》 CAS 2019年第2期185-188,共4页
目的:观察骆越壮酒对正常小鼠免疫功能的影响。方法:小鼠灌胃不同剂量的骆越壮酒28 d后,采用绵羊红细胞(SRBC)诱导小鼠迟发型超敏反应(足跖增厚法)以及ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)检测细胞免疫功能;采用抗体生成细胞(PFC)和... 目的:观察骆越壮酒对正常小鼠免疫功能的影响。方法:小鼠灌胃不同剂量的骆越壮酒28 d后,采用绵羊红细胞(SRBC)诱导小鼠迟发型超敏反应(足跖增厚法)以及ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)检测细胞免疫功能;采用抗体生成细胞(PFC)和血清溶血素测定方法测定体液免疫情况;以小鼠碳廓清实验和腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测定单核巨噬细胞免疫功能。结果:骆越壮酒可显著促进小鼠的迟发型超敏反应和脾淋巴细胞的增值能力(P<0.01);显著提高SRBC免疫后的正常小鼠抗体生成细胞(PFC)数量和血清溶血素含量(P<0.01);显著提高小鼠碳廓清吞噬指数和腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数(P<0.01)。结论:骆越壮酒对正常小鼠特异性和非特异性免疫机能均有显著的调节作用。 展开更多
关键词 骆越壮酒 免疫功能 迟发型超敏反应 淋巴细胞增殖 抗体生成细胞 血溶血素 碳廓清实验 吞噬率和吞噬指数 小鼠
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丹参抑制NLRP3炎症小体减轻胆汁淤积性肝损伤
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作者 彭渊 马园园 +2 位作者 黄恺 陶艳艳 刘成海 《上海中医药大学学报》 CAS 2019年第1期66-70,共5页
目的:探讨丹参抑制肝脏核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化、减轻胆汁淤积性肝损伤的作用机制。方法:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组及丹参低、高剂量组,每组10只。模型组和丹参组小鼠采用0.1%DDC饲料... 目的:探讨丹参抑制肝脏核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化、减轻胆汁淤积性肝损伤的作用机制。方法:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组及丹参低、高剂量组,每组10只。模型组和丹参组小鼠采用0.1%DDC饲料连续喂养3周的方法诱导胆汁淤积性肝损伤,同时正常组小鼠给予不含DDC饲料喂养。造模1周后,丹参低、高剂量组小鼠每日分别灌胃给予1.5 g/kg和3.0 g/kg丹参浸膏粉溶液,正常组与模型组灌胃给予等体积双蒸水,连续14 d。造模3周末收集各组小鼠血清和肝组织。试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平,计算肝脏指数;HE染色观察肝组织病理学及炎症分级的变化;ELISA检测肝组织白介素-1β(IL-1β)含量;免疫组化观察肝脏NLRP3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清ALT、AST、TBIL水平和肝脏指数明显升高(P<0.01),HE染色结果显示,肝内汇管区和胆管周围出现大量炎症细胞浸润,肝组织促炎因子IL-1β含量和NLRP3阳性表达显著上调(P<0.01)。丹参干预2周后可降低模型小鼠血清ALT、AST、TBIL水平和肝脏指数(P<0.05,P<0.01),明显减轻肝组织病变,改善炎症细胞浸润,降低肝组织IL-1β含量,并减少NLRP3阳性表达(P<0.01)。与丹参低剂量组比较,丹参高剂量组改善肝功能及肝组织病变、抑制IL-1β表达及NLRP3炎症小体活化的作用效果更为明显(P<0.05)。结论:丹参可有效减轻DDC诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤,其机制与抑制NLRP3炎症小体活化有关。 展开更多
关键词 丹参 胆汁淤积性肝损伤 DDC NLRP3 小鼠
建立小鼠腹部心脏移植模型联合尾静脉注射的实践体会(附视频) 预览
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作者 鲍志野 朱嘉亿 +6 位作者 蹇骞 潘崎 刘博千 张景旭 赵柯艺 易才彧 刘浩 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期171-174,181共5页
目的总结建立稳定的小鼠腹部心脏移植模型联合尾静脉注射的实践体会。方法实验练习包括50对供、受体为昆明小鼠的同系移植,40对供、受体为C57BL/6J小鼠的同系移植;正式实验包括10对供、受体为C57BL/6J小鼠的同系移植,30对以Balb/c小鼠... 目的总结建立稳定的小鼠腹部心脏移植模型联合尾静脉注射的实践体会。方法实验练习包括50对供、受体为昆明小鼠的同系移植,40对供、受体为C57BL/6J小鼠的同系移植;正式实验包括10对供、受体为C57BL/6J小鼠的同系移植,30对以Balb/c小鼠为供体、C57BL/6J小鼠为受体的同种异系移植。记录手术过程中每个步骤的时间(包括供体心脏摘取和修整时间、受体血管吻合等)。术后每日观察移植心脏搏动持续时间及受体存活时间,同时记录移植小鼠的尾静脉注射所需时间。同系移植术后30 d、同种异系移植术后7 d行移植心脏病理学检查(各5只)。结果正式实验心脏移植成功率为90%。供体心脏摘取和修整时间为(13.9±0.6)min,受体冷缺血时间为(14.2±1.2)min,血管吻合时间为(34.2±3.1)min,总手术时间为(86.6±5.4)min,术后同系移植小鼠移植心脏存活时间达到100 d以上,术后30 d病理学检查显示仅有少量炎症细胞浸润。同种异系移植小鼠因发生排斥反应,存活时间为(7.2±0.5)d。术后7 d病理学检查示心肌大量炎症细胞浸润,呈急性细胞性排斥反应表现。尾静脉注射超过200次后,成功率达90%。结论本研究成功建立了稳定的小鼠腹部心脏移植模型。同时进行尾静脉注射可有效地利用预实验的小鼠。 展开更多
关键词 腹部心脏移植 心脏移植 尾静脉注射 小鼠 移植免疫 器官移植 排斥反应 炎症细胞
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单纯疱疹病毒Ⅰ型基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒减毒活疫苗Oka株感染小鼠的生物学特性比较
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作者 柳蕾 徐兴丽 +4 位作者 冯敏 何玉凤 王丽春 张莹 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期249-254,共6页
目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫... 目的比较单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)基因突变株M3株与水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)减毒活疫苗Oka株感染BALB/c小鼠的生物学特性。方法用不同剂量(103、104、105 PFU/只)的HSV-ⅠM3株及疫苗剂量的VZV Oka株以不同方式(腹腔、肌肉、鼻腔、足垫)感染小鼠后,对小鼠的急性临床反应、体重变化、病毒增殖、组织病理损伤及病毒重激活等生物学特性进行比较。结果 HSV-ⅠM3及VZV Oka组小鼠均未见弓背、倒毛、单侧眼失明等急性临床症状,体重均呈逐渐上升趋势;器官组织中病毒拷贝数均处于较低水平,且两组差异无统计学意义(P> 0. 05);小鼠脑组织出现轻微局部炎症细胞浸润、出血、胶质小结或无异常,两组差异较小,脊髓组织均未出现明显异常;神经组织与Vero细胞共培养,均未观察到细胞病变(CPE)。结论 HSV-ⅠM3株与VZV Oka株感染小鼠后的生物学特征无明显差异。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅰ型 突变株 水痘带状疱疹病毒 减毒活疫苗 小鼠 生物学特性
改良法分离肝纤维化不同阶段小鼠肝星状细胞
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作者 胡翘廷 蒋煜川 +6 位作者 涂梦仙 袁辉 郑丹丹 陈鹏 何璐 曲辰 洪健 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期255-257,共3页
目的 探索一种应用于肝纤维化不同阶段小鼠的肝星状细胞(HSCs)分离方法。方法 联合肝脏原位灌注胶原酶、离体消化、细胞梯度密度离心等方法,分离获取小鼠原代HSCs;采用形态学观察及细胞自发荧光检测,进行细胞纯度鉴定;利用锥虫蓝染色进... 目的 探索一种应用于肝纤维化不同阶段小鼠的肝星状细胞(HSCs)分离方法。方法 联合肝脏原位灌注胶原酶、离体消化、细胞梯度密度离心等方法,分离获取小鼠原代HSCs;采用形态学观察及细胞自发荧光检测,进行细胞纯度鉴定;利用锥虫蓝染色进行细胞活力评估;应用免疫荧光染色,对HSCs活化状态进行检测。结果 通过本方法,从正常小鼠可获得1.14× 106个HSCs,纯度达95.7%,活力为92.8%;从肝纤维化不同阶段小鼠可获得1.85×106个HSCs,纯度达90.6%,活力为97.3%;分离所得的HSCs均可于体外继续培养及活化。结论 基于梯度密度离心的改良法简便高效,适用于肝纤维化不同阶段小鼠肝星状细胞的分离与培养。 展开更多
关键词 小鼠 肝星状细胞 原位灌注 梯度密度离心 原代培养
慢性粒细胞白血病小鼠动物模型建立的研究进展
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作者 武小亮 卢林纲 +2 位作者 王靖 任广旭 韩娟 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第1期197-200,共4页
慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)恶性克隆性增殖引起的一种血液系统疾病。动物模型是研究CML发病机制及药物靶向治疗的重要载体和工具。研究表明,CML小鼠模型可以通过逆转... 慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)恶性克隆性增殖引起的一种血液系统疾病。动物模型是研究CML发病机制及药物靶向治疗的重要载体和工具。研究表明,CML小鼠模型可以通过逆转录病毒介导、转基因和白血病细胞移植的方法建立。三种方法建立的CML小鼠模型均可用于CML发病机制及药物疗效评估研究。实验动物模型进一步通过血常规、血涂片和骨髓涂片、免疫学、分子生物学及病理学等检测手段,判断模型是否建立成功。本文就近年来CML小鼠模型的建立、鉴定及研究应用进展进行综述。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 CML 小鼠 模型建立 BCR-ABL
Choroid plexus tumor necrosis factor receptor 1:a new neuroinflammatory piece of the complex Alzheimer’s disease puzzle 预览
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作者 Sophie Steeland Roosmarijn E.Vandenbroucke 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第7期1144-1147,共4页
Due to the aging of the population and despite the enormous scientific effort,Alzheimer’s disease remains one of the biggest medical and pharmaceutical challenges in current medicine.Novel insights highlight the impo... Due to the aging of the population and despite the enormous scientific effort,Alzheimer’s disease remains one of the biggest medical and pharmaceutical challenges in current medicine.Novel insights highlight the importance of neuroinflammation as an undeniable player in the onset and progression of Alzheimer’s disease.Tumor necrosis factor is a master inflammatory cytokine that signals via tumor necrosis factor receptor 1 and tumor necrosis factor receptor 2,but that also regulates several brain functions in health and disease.However,clinical trials investigating drugs that interfere with the tumor necrosis factor pathway in Alzheimer’s disease led to inconclusive results,partially because not only the pro-inflammatory tumor necrosis factor/tumor necrosis factor receptor 1,but also the beneficial tumor necrosis factor/tumor necrosis factor receptor 2 signaling was antagonized in these trials.We recently found that tumor necrosis factor is the main upregulated cytokine in the choroid plexus of Alzheimer’s disease patients,signaling via tumor necrosis factor receptor 1.In agreement with this,choroidal tumor necrosis factor/tumor necrosis factor receptor 1 signaling was also upregulated in different Alzheimer’s disease mouse models.Interestingly,both genetic and nanobody-based pharmacological blockage of tumor necrosis factor receptor 1 signaling was accompanied by favorable effects on Alzheimer’s disease-associated inflammation,choroidal morphology and cognitive functioning.Here,we briefly summarize the detrimental effects that can be mediated by tumor necrosis factor/tumor necrosis factor receptor 1 signaling in(early)Alzheimer’s disease,and the consequences this might have on the disease progression.As the main hypothesis in Alzheimer’s disease clinical trials is still based on the amyloid beta-cascade,the importance of Alzheimer’s disease-associated neuroinflammation urge the development of novel therapeutic strategies that might be effective in the early stages of Alzheimer’s disease and pr 展开更多
关键词 tumor necrosis factor NEUROINFLAMMATION blood-cerebrospinal fluid barrier PRECLINICAL research drug development NEURODEGENERATION cognitive decline mouse models TNFR
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ZP2蛋白在小鼠卵巢颗粒细胞中的表达
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作者 谢妍 迟恒 +1 位作者 乜春城 曹佐武 《暨南大学学报:自然科学与医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期150-156,共7页
目的:在蛋白质水平确定小鼠卵巢的颗粒细胞内是否表达透明带蛋白.方法:制作小鼠卵巢组织的冰冻切片,免疫荧光实验用抗ZP2抗体检测小鼠卵巢颗粒细胞中是否存在ZP2蛋白,荧光显微镜下对卵巢切片的荧光信号拍照,通过灰度分析评估小鼠卵巢的... 目的:在蛋白质水平确定小鼠卵巢的颗粒细胞内是否表达透明带蛋白.方法:制作小鼠卵巢组织的冰冻切片,免疫荧光实验用抗ZP2抗体检测小鼠卵巢颗粒细胞中是否存在ZP2蛋白,荧光显微镜下对卵巢切片的荧光信号拍照,通过灰度分析评估小鼠卵巢的颗粒细胞中的荧光信号,检测小鼠卵巢颗粒细胞内的ZP2蛋白.结果:实验组卵巢切片颗粒细胞区抗透明带ZP2抗体标记的荧光信号灰度值(1. 88±0. 57)明显比对照组(1. 20±0. 11)强.结论:小鼠卵巢颗粒细胞也表达透明带ZP2蛋白. 展开更多
关键词 透明带 颗粒细胞 免疫荧光试验 小鼠
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