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西兰花种子中黑芥子酶酶解性质及其应用研究 预览
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作者 侯海亮 邓莉 +1 位作者 杨黾 刘娜 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期98-102,共5页
为探究黑芥子酶在食品方面的应用价值,以10种西兰花种子作为实验材料,采用液相色谱测定异硫氰酸烯丙酯的含量,计算在不同pH值、不同温度条件下的黑芥子酶的酶解活性。发现不同种子黑芥子酶的最适条件不同,其温度范围为50~65℃,pH值的范... 为探究黑芥子酶在食品方面的应用价值,以10种西兰花种子作为实验材料,采用液相色谱测定异硫氰酸烯丙酯的含量,计算在不同pH值、不同温度条件下的黑芥子酶的酶解活性。发现不同种子黑芥子酶的最适条件不同,其温度范围为50~65℃,pH值的范围为5~8。以酶活性最高的种子作为酶源,10种蔬菜作为底物,采用固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术相结合的方法,并结合感官评价,评测西兰花种子中黑芥子酶对各种蔬菜香气恢复的程度。结果表明,西兰花种子能够很大程度地恢复十字花科蔬菜香气,并且有恢复部分其他科蔬菜香气的作用。 展开更多
关键词 西兰花种子 十字花科 异硫氰酸烯丙酯 黑芥子酶 香气
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异硫氰酸烯丙酯酶解转化工艺的优化
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作者 丁瑞霞 靳方舟 +2 位作者 丁轲 韩涛 陈湘宁 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第21期7336-7342,共7页
目的 优化酶解黑芥子苷转化成异硫氰酸烯丙酯(allyl isothiocyanate,AITC)的水解条件.方法 在已知AITC的测定条件下,以AITC转化率为考察指标,对温度、pH、Zn2+离子添加量、乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)添加量... 目的 优化酶解黑芥子苷转化成异硫氰酸烯丙酯(allyl isothiocyanate,AITC)的水解条件.方法 在已知AITC的测定条件下,以AITC转化率为考察指标,对温度、pH、Zn2+离子添加量、乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)添加量及酶来源进行单因素试验以及设计五因素四水平的正交试验,确定最优转化工艺条件.结果 黑芥子苷对AITC最优转化条件为:黑芥子酶来源为樱桃萝卜种子、pH为7.00、Zn2+的添加量为1.00 mmol/L、转化温度为40℃、螯合EDTA添加量为0.30 mmol/L.最优转化条件下AITC的转化率为70.32%.结论 本研究的实验设计简单且能真实的提高AITC的转化率,对酶解法制备AITC提供数据依靠. 展开更多
关键词 黑芥子酶 酶解转化 烯丙基异硫氰酸酯 正交试验
芥菜加工过程冲味形成机制及其芥子苷酶特性研究
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作者 高倩妮 杜传来 +2 位作者 邹小欠 杨婷婷 魏敏 《食品科技》 北大核心 2018年第10期90-97,共8页
为了解根用芥菜腌制过程主要风味物质尤其是冲味形成机制及其变化,为企业大规模生产腌制冲菜提供理论支持。通过对根用芥菜腌制过程中前体物质硫代葡萄糖苷含量、内源芥子苷酶特性在腌制过程中变化研究,GC-MS分离鉴定芥菜腌制加工过程... 为了解根用芥菜腌制过程主要风味物质尤其是冲味形成机制及其变化,为企业大规模生产腌制冲菜提供理论支持。通过对根用芥菜腌制过程中前体物质硫代葡萄糖苷含量、内源芥子苷酶特性在腌制过程中变化研究,GC-MS分离鉴定芥菜腌制加工过程主要风味物质、采用半内标定量法测定冲味物质异硫氰酸烯丙酯含量变化,来分析芥菜在腌制过程中主要风味物质尤其是冲味的形成及其变化。其结果表明:硫代葡萄糖苷在内源水解酶芥子苷酶作用下水解产生的异硫氰酸烯丙酯是芥菜首要辛辣味的来源;加工过程中内源水解酶活性不断下降,其最适温度为50℃,最适pH为6左右,0.5%的食盐就会抑制酶活,一定浓度的Vc会激活内源酶活性,Vc最适浓度为10mg/mL,酶活力到达34.12U;脱水、食醋的添加二次腌制对芥菜独特冲味有明显的影响。 展开更多
关键词 根用芥菜 异硫氰酸烯丙酯(AITC) GC-MS 硫代葡萄糖苷 芥子苷酶
黑芥子酶固定化在制备莱菔素中的应用 被引量:1
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作者 程立 李思彤 袁其朋 《中国科学:化学》 CSCD 北大核心 2018年第6期676-682,共7页
硫代葡萄糖苷-黑芥子酶体系是一种广泛存在于十字花科植物中的抗虫体系.在植物细胞被破碎之后,硫代葡萄糖苷会与内源的黑芥子酶相接触,并被其降解成为可以抗虫的异硫氰酸酯类化合物.异硫氰酸酯类化合物在近年来还被发现具有很好的抗癌活... 硫代葡萄糖苷-黑芥子酶体系是一种广泛存在于十字花科植物中的抗虫体系.在植物细胞被破碎之后,硫代葡萄糖苷会与内源的黑芥子酶相接触,并被其降解成为可以抗虫的异硫氰酸酯类化合物.异硫氰酸酯类化合物在近年来还被发现具有很好的抗癌活性,其中抗癌活性最高的化合物之一就是从中药莱菔子中提取的莱菔素.但是,使用内源性的黑芥子酶酶解硫代葡萄糖苷时,原料中的杂酶会导致大部分底物转化为副产物腈类,不仅导致产量大幅度降低,而且为后续的纯化带来困难.本文开发出了使用纯化并固定化后的黑芥子酶生产莱菔素的工艺,使得底物转化率从10%-30%稳定提高到80%以上,不仅提高了产量,而且降低了对提取原料的要求. 展开更多
关键词 硫代葡萄糖苷 黑芥子酶 异硫氰酸酯 莱菔素
芥子油苷-黑芥子酶防御系统的最新研究进展
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作者 张凯鑫 赵海燕 李晶 《植物生理学报》 CSCD 北大核心 2017年第12期2069-2077,共9页
芥子油苷是一类含氮、硫的植物次生代谢物质,它与其水解酶黑芥子酶共同组成了十字花目植物特有的防御系统。黑芥子酶和芥子油苷分别储藏在植物的不同细胞或同一细胞的不同区域。当植物受到机械损伤或病虫侵袭时,底物和酶接触,芥子油苷... 芥子油苷是一类含氮、硫的植物次生代谢物质,它与其水解酶黑芥子酶共同组成了十字花目植物特有的防御系统。黑芥子酶和芥子油苷分别储藏在植物的不同细胞或同一细胞的不同区域。当植物受到机械损伤或病虫侵袭时,底物和酶接触,芥子油苷被降解成多种具有生物活性的物质。这些降解产物可对昆虫及病原菌表现出较强的毒害作用,也有可能作为信号分子启动植物其它防御机制,如气孔的关闭、细胞程序性死亡及细胞壁胼胝质累积等。本文对近年来黑芥子酶防御系统的最新研究成果进行了综述,介绍了芥子油苷和黑芥子酶的合成及分布、芥子油苷降解产物的多样性、芥子油苷-黑芥子酶系统对昆虫和病原菌的防御作用和防御机制及芥子油苷的代谢与初生代谢的关系,并对目前该领域研究中存在的问题和研究趋势进行了讨论。 展开更多
关键词 芥子油苷 黑芥子酶 降解产物 细胞程序性死亡 气孔关闭 胼胝质累积
十字花科植物中黑芥子酶的研究进展 预览 被引量:1
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作者 孙艳伟 张泽生 +2 位作者 王田心 李雨蒙 秦程广 《食品研究与开发》 北大核心 2017年第11期216-220,共5页
黑芥子酶是一种存在于十字花科植物中用以水解硫代葡萄糖苷的酶,且水解产物因具有抗癌作用而受到广泛关注。对黑芥子酶的分布、结构及活性等方面进行了概述,着重介绍了十字花科植物中黑芥子酶的提取及活性测定方法,并简述了黑芥子酶... 黑芥子酶是一种存在于十字花科植物中用以水解硫代葡萄糖苷的酶,且水解产物因具有抗癌作用而受到广泛关注。对黑芥子酶的分布、结构及活性等方面进行了概述,着重介绍了十字花科植物中黑芥子酶的提取及活性测定方法,并简述了黑芥子酶的应用。 展开更多
关键词 十字花科植物 黑芥子酶 硫代葡萄糖苷 研究进展
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茎瘤芥(榨菜叶)中硫苷酶基因的酶活性研究 预览 被引量:2
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作者 张燕 李瑶 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期744-749,共6页
【目的】异硫代氰酸盐(Isothiocyanates,ITCs)具有抗癌和植物杀虫剂的作用,为解决天然硫苷酶提取复杂、费用昂贵等问题,【方法】本研究采用RT-PCR法扩增硫苷酶的关键基因MYR1,通过构建硫苷酶表达载体,并在毕赤酵母中进行体外诱导表达... 【目的】异硫代氰酸盐(Isothiocyanates,ITCs)具有抗癌和植物杀虫剂的作用,为解决天然硫苷酶提取复杂、费用昂贵等问题,【方法】本研究采用RT-PCR法扩增硫苷酶的关键基因MYR1,通过构建硫苷酶表达载体,并在毕赤酵母中进行体外诱导表达,以获得外源硫苷酶。将从榨菜叶中提取的总RNA,通过Sal I酶切,插入p PIC9K-S表达载体构建重组子。在YPD培养基中菌体悬浮培养至OD600为1左右,更换BMMY培养基进行诱导表达72 h。【结果】提取菌液进行SDS-PAGE电泳检测分析,发现表达蛋白的分子量为90 KDa左右,经诱导表达,Ni柱纯化后,得到纯度为85%的硫苷酶融合蛋白,产率约850 U/L。硫苷酶融合蛋白以sinigrin为底物,运用HPLC测得蛋白的比活力约等于0.003 U/μl。【结论】采用在毕赤酵母中进行体外诱导表达,以获得外源硫苷酶,对硫苷酶活性最佳条件进行筛选和确认,为扩增和签定硫苷酶活性等技术提供重要参考。 展开更多
关键词 MYR1 硫苷酶 质粒构建 表达
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切分、汽蒸及脱水对甘蓝叶片中硫苷-黑芥子酶系统的影响 预览 被引量:1
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作者 方孟玮 杨润强 +3 位作者 郭丽萍 王建善 王一淳 顾振新 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期41-45,共5页
以结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata L.)为材料,研究切分、汽蒸及脱水对甘蓝叶片中硫苷(glucosinolates,GLs)和异硫氰酸盐(isothiocyanate,ITCs)含量、黑芥子酶(myrosinase,MYR)活性的影响。结果表明:切分度为1.00 cm2... 以结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata L.)为材料,研究切分、汽蒸及脱水对甘蓝叶片中硫苷(glucosinolates,GLs)和异硫氰酸盐(isothiocyanate,ITCs)含量、黑芥子酶(myrosinase,MYR)活性的影响。结果表明:切分度为1.00 cm2时,总GLs、脂肪族GLs含量最低,ITCs含量最高,比新鲜原料提高38.91%;随汽蒸时间的延长,MYR活性降低,汽蒸时间为60 s时,ITCs含量最高,比新鲜原料提高53.70%,此时总GLs、脂肪族GLs含量最低;添加葡萄糖质量分数为5%时,ITCs含量最高,比新鲜甘蓝提高76.26%;热风干燥温度为50℃时,ITCs含量比新鲜原料高89.88%,总GLs、脂肪族GLs含量最低。获得合适的条件为:切分大小1.00 cm^2,汽蒸60 s,添加质量分数5%的葡萄糖,50℃热风干燥。 展开更多
关键词 甘蓝 硫代葡萄糖苷 异硫氰酸盐 黑芥子酶 脱水
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十字花科蔬菜功能成分多样性研究进展 预览 被引量:2
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作者 许婷 吴秋云 +1 位作者 毛舒香 黄科 《湖南农业科学》 2016年第6期119-122,共4页
十字花科蔬菜种类繁多,营养价值高,富含多种功能成分,对抗氧化、抑制癌细胞生长等具有十分重要的作用。综述了十字花科蔬菜中萝卜硫素、类胡萝卜素等功能成分的生理功能、合成代谢途径和多样性,为进一步了解十字花科蔬菜中主要功能成分... 十字花科蔬菜种类繁多,营养价值高,富含多种功能成分,对抗氧化、抑制癌细胞生长等具有十分重要的作用。综述了十字花科蔬菜中萝卜硫素、类胡萝卜素等功能成分的生理功能、合成代谢途径和多样性,为进一步了解十字花科蔬菜中主要功能成分的特性提供了重要参考,并对其功能的研究提出了展望。 展开更多
关键词 十字花科 萝卜硫素 黑芥子酶 类胡萝卜素
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拟南芥黑芥子酶TGG1对抗旱性的作用 预览
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作者 毛明宇 张文宇 +2 位作者 夏洪宇 王洋 李晶 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期218-224,共7页
为阐明拟南芥中黑芥子酶TGG1对抗旱性的影响,构建了35S启动子驱动的TGG1过表达载体,并将其转入拟南芥获得了转基因植株。以野生型和过量表达TGG1的转基因植株为材料,进行干旱胁迫实验,结果显示,在甘露醇模拟的干旱胁迫下35S∶TGG1种子... 为阐明拟南芥中黑芥子酶TGG1对抗旱性的影响,构建了35S启动子驱动的TGG1过表达载体,并将其转入拟南芥获得了转基因植株。以野生型和过量表达TGG1的转基因植株为材料,进行干旱胁迫实验,结果显示,在甘露醇模拟的干旱胁迫下35S∶TGG1种子平均发芽率显著高于野生型,平均相对电导率则显著低于野生型;自然干旱胁迫下,35S∶TGG1的相对失水速率显著慢于野生型,而干旱复水后的平均存活率则显著高于野生型。对气孔的观察结果表明,过表达TGG1的转基因植株气孔对ABA处理具有更高的敏感性,气孔关闭程度显著高于野生型植株。以上研究结果表明,过量表达TGG1基因可显著提高拟南芥的抗旱能力,而且其抗性机制很可能与气孔在逆境下的关闭程度有关。 展开更多
关键词 芥子油苷水解酶 TGG1 拟南芥 干旱胁迫 气孔
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结球甘蓝不同品种及部位中主要生物活性物质含量比较 预览 被引量:3
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作者 方孟玮 杨润强 +2 位作者 郭丽萍 王志英 顾振新 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期187-191,共5页
对春大将、帕特、汉城和春优4种结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata L.)以及帕特甘蓝的不同部位中硫代葡萄糖苷、异硫氰酸盐(isothiocyanate,ITCs)、总酚和抗坏血酸等主要生物活性物质含量进行比较。结果表明:各品种中脂肪族硫苷... 对春大将、帕特、汉城和春优4种结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata L.)以及帕特甘蓝的不同部位中硫代葡萄糖苷、异硫氰酸盐(isothiocyanate,ITCs)、总酚和抗坏血酸等主要生物活性物质含量进行比较。结果表明:各品种中脂肪族硫苷含量均最高。其中帕特甘蓝中总硫苷、脂肪族硫苷均高于其他3个品种,且其不同部位中总硫苷含量以外部叶为最高,而中部叶中含量最低。帕特甘蓝中ITCs和总酚含量最高,汉城甘蓝中抗坏血酸含量高于其他3个品种;春大将甘蓝中黑芥子酶(myrosinase,MYR)活性最高,帕特和春优甘蓝中其活性差异不显著,汉城甘蓝中最低。帕特甘蓝中ITCs和抗坏血酸含量以外部叶为最高,总酚含量则在内部叶中最高,MYR活性在中部叶和内部叶中显著高于外部叶。可见,帕特甘蓝可作为功能性食品的原料加以开发利用。 展开更多
关键词 甘蓝 硫代葡萄糖苷 异硫氰酸盐 总酚 抗坏血酸 黒芥子酶
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甘蓝苗生长过程中主要生理生化变化 预览 被引量:10
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作者 王志英 郭丽萍 +3 位作者 李倩倩 杨润强 郭强晖 顾振新 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期6-11,共6页
以'新夏50和'紫红钻'两种甘蓝种子为试材,研究了芽苗生长过程中芽长、呼吸速率、含水量、硫苷含量、异硫氰酸盐含量、多酚含量、抗坏血酸含量等主要的生理生化变化。结果表明:两种甘蓝在发芽过程中芽长、呼吸速率和含水量... 以'新夏50和'紫红钻'两种甘蓝种子为试材,研究了芽苗生长过程中芽长、呼吸速率、含水量、硫苷含量、异硫氰酸盐含量、多酚含量、抗坏血酸含量等主要的生理生化变化。结果表明:两种甘蓝在发芽过程中芽长、呼吸速率和含水量逐渐升高,'新夏50的生长速率较'紫红钻'快;硫苷和总酚含量在种子中含量最高,随发芽时间延长均逐渐下降。'新夏50和'紫红钻'芽苗中的异硫氰酸盐含量均在发芽1 d后达到最高水平,之后异硫氰酸盐含量缓慢下降至较低水平;而黑芥子酶活性则分别在第3天和第1天达到最高。两种甘蓝种子中未检测到抗坏血酸,随着种子发芽其含量先上升后下降。 展开更多
关键词 甘蓝种子 发芽 硫苷 总酚 异硫氰酸盐 黑芥子酶 抗坏血酸
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黄芥子外敷时芥子酶活性及芥子碱硫氰酸盐含量的变化 预览 被引量:1
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作者 刘青凤 徐德宏 +1 位作者 崔培梧 谭朝阳 《世界最新医学信息文摘(电子版)》 2015年第26期20-,22共2页
目的不同调敷方式对芥子外用时芥子酶的活性和芥子碱硫氰酸盐含量的影响。方法用50%乙醇、醋或温水处理黄芥子,然后采用高效液相色谱法测定芥子碱硫氰酸盐含量和酶促反应后底物黑芥子硫苷酸钾的剩余量,计算芥子酶的活性。结果经50%乙醇... 目的不同调敷方式对芥子外用时芥子酶的活性和芥子碱硫氰酸盐含量的影响。方法用50%乙醇、醋或温水处理黄芥子,然后采用高效液相色谱法测定芥子碱硫氰酸盐含量和酶促反应后底物黑芥子硫苷酸钾的剩余量,计算芥子酶的活性。结果经50%乙醇、醋或温水处理后,芥子酶的活性均有增加,而芥子碱硫氰酸盐含量均降低,其中醋处理下降最多。结论芥子外敷应用时用醋调敷为佳。 展开更多
关键词 芥子酶 黄芥子 酶活性 芥子碱硫氰酸盐
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金属离子及保护剂对深绿木霉T_(155)产芥子酶的活性影响及芥子酶的分离纯化
14
作者 孙迪 马艳 +3 位作者 安霞 顾志光 王光飞 王秋君 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1807-1815,共9页
【目的】探求金属离子及保护剂对深绿木霉T155产生的粗芥子酶液活性的影响以及芥子酶的分离纯化方法。【方法】通过添加不同浓度的金属离子及保护剂研究对芥子酶活性的影响并通过细胞破壁、硫酸铵沉淀、透析、Sephadex G-100柱层析、DEA... 【目的】探求金属离子及保护剂对深绿木霉T155产生的粗芥子酶液活性的影响以及芥子酶的分离纯化方法。【方法】通过添加不同浓度的金属离子及保护剂研究对芥子酶活性的影响并通过细胞破壁、硫酸铵沉淀、透析、Sephadex G-100柱层析、DEAE-52离子交换层析、Sephadex G-200柱层析等方法提取到纯的芥子酶,最后通过电泳检测芥子酶的纯度和分子量。【结果】研究发现Ag+、Zn2+、Pb2+、Mg2+、Hg2+、Fe3+等金属离子在低浓度时对芥子酶均表现为一定的促进作用,但达到一定浓度后则起抑制作用,Ca2+浓度在0.069–17.000 g/L范围内均对酶活性起到促进作用,且促进效果基本与Ca2+浓度成正比;添加1 mmol/L EDTA和3 mmol/L DTT对芥子酶的保护作用最好,4°C保存26 d后芥子酶能够保持85%活性;电泳分析该芥子酶的分子量大约在150 kD左右,并且是一个二聚体。【结论】Ca2+在实验浓度内主要是提高芥子酶活性,而其他金属离子对芥子酶活性主要起抑制作用;EDTA或者EDTA与DTT协同能够较好保持芥子酶活性的稳定性;通过一系列分离纯化步骤得到了纯的二聚体芥子酶,研究结果为挖掘产芥子酶的微生物资源提供了新的途径和思路。 展开更多
关键词 深绿木霉T155 芥子酶 保护剂 电泳 分子量
7种十字花科种子中黑芥子酶降解油菜籽饼粕中硫苷的产物比较分析 预览 被引量:6
15
作者 丁艳 李丽倩 +1 位作者 顾振新 韩永斌 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期1-7,共7页
比较7种十字花科植物种子中的黑芥子酶的活性,利用气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分别测定这7种黑芥子酶降解油菜籽饼粕中硫代葡萄糖苷(简称硫苷)的产物组分和相对含量。结果表明:7种来源的黑芥子酶比活... 比较7种十字花科植物种子中的黑芥子酶的活性,利用气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分别测定这7种黑芥子酶降解油菜籽饼粕中硫代葡萄糖苷(简称硫苷)的产物组分和相对含量。结果表明:7种来源的黑芥子酶比活力存在差异(P<0.05),比活力由高到低依次为西兰花籽黑芥子酶(broccoli seeds myrosinase,BSm)、油菜籽黑芥子酶(rape seeds myrosinase,RPSm)、白菜籽黑芥子酶(white cabbage seeds myrosinase,WCSm)、萝卜籽黑芥子酶(radish seeds myrosinase,RDSm)、芥蓝籽黑芥子酶(kale seeds myrosinase,KSm)、甘蓝籽黑芥子酶(cabbage seeds myrosinase,CSm)和芥菜籽黑芥子酶(mustard seeds myrosinase,MSm)。GC-MS比较分析7种黑芥子酶降解油菜籽饼粕中硫苷的产物发现,RPSm降解产物有6种,即1-丁烯基-4-异硫氰酸酯、烯丙基异硫氰酸酯、2-苯乙基异硫氰酸酯、苯丙腈、致甲状腺肿素和2,1-苯并异恶唑。CSm降解产物中1-丁烯基-4-异硫氰酸酯含量最高(33.22%),RPSm次之,含量为32.20%,而MSm降解产物中未检测到。WCSm、KSm、MSm和CSm降解产物中检测到新组分丁基异硫氰酸酯。与RPSm降解产物相比,其他6种黑芥子酶降解产物中恶唑类及腈类物质种类增多,有4种恶唑类和3种腈类,但降解产物中未检测到2,1-苯并恶唑。不同来源的黑芥子酶在相同环境下降解油菜籽饼粕中的硫苷的产物种类和相对含量存在明显差异,虽RPSm活性低于BSm,但其降解产物中恶唑类及腈类种类最少,含量最低,是较好的降解油菜籽饼粕中硫苷的酶源。 展开更多
关键词 黑芥子酶 油菜籽饼粕 气相色谱-质谱法 硫代葡萄糖苷
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油菜籽饼粕中硫苷的酶解条件优化及降解产物分析 预览 被引量:8
16
作者 丁艳 李丽倩 +3 位作者 曹蓉 唐根胜 顾振新 韩永斌 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期383-393,共11页
【目的】研究影响油菜籽饼粕中硫代葡萄糖苷在黑芥子酶作用卞定向转化为异硫氰酸酯的因素,确定最佳酶解条件,探索外加黑芥子酶对硫代葡萄糖苷降解产物组分和含量的影响,为油菜籽饼粕的综合利用提供基础。【方法】测定4种反应体系中... 【目的】研究影响油菜籽饼粕中硫代葡萄糖苷在黑芥子酶作用卞定向转化为异硫氰酸酯的因素,确定最佳酶解条件,探索外加黑芥子酶对硫代葡萄糖苷降解产物组分和含量的影响,为油菜籽饼粕的综合利用提供基础。【方法】测定4种反应体系中黑芥子酶活性,确定酶解反应缓冲体系。以油菜籽饼粕中异硫氰酸酯总量为指标,单因素结合正交设计研究不同料液比、时间、温度、pH、抗坏血酸添加量对外加黑芥子酶降解油菜籽饼粕中硫代葡萄糖苷转化为异硫氰酸酯的影响,优化工艺参数,获得最佳酶解条件。采用二氯甲烷为提取剂,真空浓缩得到油状降解产物,利用气相色谱一质谱(GC-MS)联用鉴定外加黑芬子酶和内源黑芥子酶酶解产物成分,分析产物相对含量。【结果】4种缓冲体系中,在柠檬酸一磷酸盐缓冲液中测得黑芥子酶活性最高,在相同条件下,外加黑芥子酶的活性显著高于内源黑芥子酶活性;外源黑芥子酶添加量大于油菜籽饼粕量的20%,异硫氰酸酯生成量无显著增加,选择外源黑芥子酶添加量为油菜籽饼粕量的20%;正交优化得到最佳酶解条件为:料液比1:15,pH为6.0,反应温度为50℃,抗坏血酸添加量为0.005mg·g-1,反应时间为1h,异硫氰酸酯含量达到1.799mg·g-1,是油菜籽饼粕内源黑芥子酶降解硫代葡萄糖苷生成异硫氰酸酯产物总量的7.6倍。外加黑芥子酶生成异硫氰酸酯含量显著高于内源黑芥子酶降解硫苷生成异硫氰酸酯含量,但两者异硫氰酸酯含量随反应条件变化趋势一致。GC-MS鉴定外加黑芥子酶有7种酶解产物,相对含量在产物的67%以上,含有1种腈类,2种噫唑烷酮和4种异硫氰酸酯。产物中异硫氰酸酯为烯丙基异硫氰酸酯、丁烯基异硫氰酸酯、环戊基异硫氰酸酯和苯乙基异硫氰酸酯;其中丁烯基异硫氰酸酯的 展开更多
关键词 油菜籽饼粕 硫苷 黑芥子酶 异硫氰酸酯 GC-MS
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菜蚜体内产芥子酶微生物的分离 预览
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作者 龚洪兵 刘建利 +1 位作者 陈琛 胡静 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2013年第14期101-105,共5页
芥子酶能分解底物硫代葡萄糖苷产生萝卜硫素等抗癌物质。本研究拟从十字花科植物寄生菜蚜体内分离产芥子酶微生物。通过RSM培养基富集培养,氯化钯-硫苷降解率法初筛,葡萄糖产量法复筛。分离获得9株产芥子酶菌株,其中DS12菌株的酶活最高,... 芥子酶能分解底物硫代葡萄糖苷产生萝卜硫素等抗癌物质。本研究拟从十字花科植物寄生菜蚜体内分离产芥子酶微生物。通过RSM培养基富集培养,氯化钯-硫苷降解率法初筛,葡萄糖产量法复筛。分离获得9株产芥子酶菌株,其中DS12菌株的酶活最高,为1.486 IU;并且在VC浓度为0.28μg/uL时,酶活最大;在发酵42 h,生长量最大。DS12可作为生产芥子酶的潜力菌株。 展开更多
关键词 菜蚜 芥子酶 微生物
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Effect of NaCl treatments on glucosinolate metabolism in broccoli sprouts 被引量:1
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作者 Rong-fang GUO Gao-feng YUAN Qiao-mei WANG 《浙江大学学报:B卷英文版》 SCIE CAS CSCD 2013年第2期124-131,共8页
To understand the regulation mechanism of NaCl on glucosinolate metabolism in broccoli sprouts,the germination rate,fresh weight,contents of glucosinolates and sulforaphane,as well as myrosinase activity of broccoli s... To understand the regulation mechanism of NaCl on glucosinolate metabolism in broccoli sprouts,the germination rate,fresh weight,contents of glucosinolates and sulforaphane,as well as myrosinase activity of broccoli sprouts germinated under 0,20,40,60,80,and 100 mmol/L of NaCl were investigated in our experiment.The results showed that glucoerucin,glucobrassicin,and 4-hydroxy glucobrassicin in 7-d-old broccoli sprouts were significantly enhanced and the activity of myrosinase was inhibited by 100 mmol/L of NaCl.However,the total glucosinolate content in 7-d-old broccoli sprouts was markedly decreased although the fresh weight was significantly increased after treatment with NaCl at relatively low concentrations(20,40,and 60 mmol/L).NaCl treatment at the concentration of 60 mmol/L for 5 d maintained higher biomass and comparatively higher content of glucosinolates in sprouts of broccoli with decreased myrosinase activity.A relatively high level of NaCl treatment(100 mmol/L) significantly increased the content of sulforaphane in 7-d-old broccoli sprouts compared with the control.These results indicate that broccoli sprouts grown under a suitable concentration of NaCl could be desirable for human nutrition. 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 蛋白质组分 细胞增殖 姜黄素
响应面法优化微波钝化玛咖黑芥子酶活 预览 被引量:2
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作者 涂行浩 张弘 +3 位作者 郑华 甘瑾 徐珑峰 李坤 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期 122-127,共6页
探讨微波处理在钝化玛咖黑芥子酶相对酶活研究中的应用。通过单因素试验考察微波强度、处理时间以及料液比3个主要因素对玛咖黑芥子酶相对酶活和芥子油苷的影响。以黑芥子酶相对酶活为响应值,进行响应面分析和优化,建立微波钝化玛咖... 探讨微波处理在钝化玛咖黑芥子酶相对酶活研究中的应用。通过单因素试验考察微波强度、处理时间以及料液比3个主要因素对玛咖黑芥子酶相对酶活和芥子油苷的影响。以黑芥子酶相对酶活为响应值,进行响应面分析和优化,建立微波钝化玛咖黑芥子酶相对酶活的回归模型。结果显示:在微波强度14w儋、料液比2:1(g/mL)条件下对冰鲜玛咖处理60s,玛咖黑芥子酶相对酶活几乎完全丧失。与传统热水烫漂相比,在有效钝化黑芥子酶相对酶活的前提下,玛咖芥子油苷损失率下降28%,VC损失率下降21%,蛋白质含量无显著变化。 展开更多
关键词 玛咖 微波钝化 黑芥子酶 烫漂 芥子油苷 响应面分析
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Characterization of a myrosinase cDNA from Brassica parachinensis and its defense role against Plutella xylostella after suppression
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作者 Guang Yang Ding-Feng wang +3 位作者 Zhi-Quan Dong Qian-Liang Wang Gefu Wang-Pruski Min-Sheng You 《中国昆虫科学:英文版》 CAS CSCD 2012年第4期461-471,共11页
在 Brassicaceae 的摘要, myrosinase 催化 glucosinolate 的水解作用并且在反草食动物防卫起一个重要作用。我们从从另外的 Brassica 种类与 myrosinase 基因展出高顺序身份的 Brassica parachinensis 克隆并且描绘 myrosinase 基因... 在 Brassicaceae 的摘要, myrosinase 催化 glucosinolate 的水解作用并且在反草食动物防卫起一个重要作用。我们从从另外的 Brassica 种类与 myrosinase 基因展出高顺序身份的 Brassica parachinensis 克隆并且描绘 myrosinase 基因的全身的互补 DNA。对有菱形斑纹的蛾(Plutella xylostella ) 在防卫调查这 myrosinase 的角色,我们构造了 RNA 干扰(RNAi ) 表示指向了 myrosinase 和 transfected 的双 stranded RNA 的盒子它进 B。parachinensis。Myrosinase 在结果被压制转基因的工厂。在转基因的工厂上喂的有菱形斑纹的蛾幼虫比在非转基因的工厂上喂的那些有更低的幼虫、蛹的重量,更长蛹的持续时间,和更低的肥沃,建议有菱形斑纹的蛾使防御系统适应了 glucosinolate-myrosinase。因此, myrosinase 的抑制是为控制有菱形斑纹的蛾的一条潜在的途径。 展开更多
关键词 小菜蛾幼虫 防御作用 酶基因 黑芥 菜心 转基因植物 表征 芥子酶
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