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不同血细胞分离机采集外周血单个核细胞的质量评估
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作者 于晓燕 曼斌 +4 位作者 白洁 刘丽娟 张燕燕 周倩 贾延军 《中国输血杂志》 2018年第9期1025-1028,共4页
目的通过比较3种型号的血细胞分离机所采集到的单采白细胞样品,及经处理后得到的外周血单个核细胞(PBMC)的质量,为选择最佳血细胞分离机机型和采集参数提供实验依据。方法分别使用,3种不同品牌的血细胞分离机Fenwal Amicus、Spectra o... 目的通过比较3种型号的血细胞分离机所采集到的单采白细胞样品,及经处理后得到的外周血单个核细胞(PBMC)的质量,为选择最佳血细胞分离机机型和采集参数提供实验依据。方法分别使用,3种不同品牌的血细胞分离机Fenwal Amicus、Spectra optia、MCS~+9000采集了20人次的外周血白细胞细胞。单采结束后对样品进行血细胞计数检测,并分离其中的外周血单个核细胞(PBMC),染色后通过流式细胞仪进行细胞分类检测。结果 3种机型所采集到的单采白细胞样品中所含的WBC总数无统计学差异,但是Fenwal Amicus所采集的产品中混入的血小板却明显少于其他2种机型,而MCS~+9000在采集白细胞时会混入更多的红细胞,MCS~+9000所采集到的单采产品含有更多的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞,而Fenwal Amicus所得到的嗜碱性粒细胞明显高于MCS~+9000。流式细胞术分析发现,单采产品中分离出的PBMC和单核细胞绝大多数都是活细胞,主要由单核细胞和淋巴细胞组成,而粒细胞的含量很少。Baxter Amicus组最终得到的PBMC总数和T淋巴细胞总数最高,而单核细胞细胞总数则三者差异不大。结论 3种机型的血细胞分离机采集过程都比较顺利,所得到的单采白细胞样品和分离得到的PBMC质量差异不大,符合预期目的,都可用于健康志愿者的白细胞单采。 展开更多
关键词 单个核细胞 血细胞分离机 血细胞计数
宫腔灌注自体外周血单个核细胞治疗对反复种植失败患者妊娠结局的影响及相关机制 被引量:5
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作者 刘洋虹 张婧 +1 位作者 刘恋 施晓波 《中华生殖与避孕杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期539-544,共6页
目的探讨宫腔灌注自体外周血单个核细胞(PBMCs)治疗对反复种植失败(RIF)患者妊娠结局的影响及相关机制。方法36名RIF患者于冻融胚胎移植(FET)前24h行自体PBMCs宫腔灌注,随访妊娠结局:酶联免疫吸附试验(ELISA)检测宫腔灌注前... 目的探讨宫腔灌注自体外周血单个核细胞(PBMCs)治疗对反复种植失败(RIF)患者妊娠结局的影响及相关机制。方法36名RIF患者于冻融胚胎移植(FET)前24h行自体PBMCs宫腔灌注,随访妊娠结局:酶联免疫吸附试验(ELISA)检测宫腔灌注前、后外周血及宫颈分泌物中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-a(TNV-a)水平。结果RIF患者经宫腔灌注自体PBMCs治疗后得到了较高的临床妊娠率(47.22%);富颈分泌物中IL-6、IL-6/TNF-a均显著升高(p〈0.05),TNF-a水平无统计学差异(P〉O.05),外周血中IL-6、TNF-a水平均无统计学差异(P〉0.05)。结论宫腔灌注自体PBMCs治疗能提高RIF患者宫腔局部IL-6水平及IL-6/TNF-a比值.有效改善RIF患者临床妊娠率。 展开更多
关键词 反复种植失败(RIF) 外周血单个核细胞(PBMCs) 宫腔灌注 白细胞介素-6(IL-6) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)
口腔扁平苔藓患者外周血单个核细胞和血浆中miR-132的异常表达及其临床意义 预览
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作者 陈雪芬 孙晓峰 《实用口腔医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期812-815,共4页
目的: 探讨miR-132在口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血单个核细胞(PBMCs)和血浆中的表达及其临床意义。方法: 纳入40 例OLP患者(24 例非糜烂型,16 例糜烂型), 40 名健康对照者;采用实时荧光定量PCR的方法检测2 组PBMCs和血浆中mi... 目的: 探讨miR-132在口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血单个核细胞(PBMCs)和血浆中的表达及其临床意义。方法: 纳入40 例OLP患者(24 例非糜烂型,16 例糜烂型), 40 名健康对照者;采用实时荧光定量PCR的方法检测2 组PBMCs和血浆中miR-132的表达。结果: OLP患者PBMCs和血浆中miR-132的相对表达量均显著高于健康对照组(P〈0.01),糜烂型OLP患者PBMC和血浆中miR-132的表达水平均明显高于非糜烂型和健康对照组(P〈0.01),而非糜烂型OLP患者PBMCs和血浆中miR-132的表达水平与健康对照组相比,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论: miR-132高表达可能与OLP的异常免疫反应有关,并且miR-132可以作为评估OLP病情严重程度的辅助指标。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓(OLP) miR-132 外周血单个核细胞 微小 RNA
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2型糖尿病性视网膜病变PBMCs中miR-126表达的研究 被引量:2
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作者 高祎 刘玉震 +2 位作者 王丽君 房炳华 雷宁玉 《中国实用眼科杂志》 2016年第4期322-325,共4页
目的探讨糖尿病性视网膜病变(DR)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-126的水平变化及其临床意义。方法临床病例对照研究。对2014年12月到2015年3月在滨州医学院附属医院内分泌科及眼科住院的76例患者分为无糖尿病性视网膜病变组(ND... 目的探讨糖尿病性视网膜病变(DR)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-126的水平变化及其临床意义。方法临床病例对照研究。对2014年12月到2015年3月在滨州医学院附属医院内分泌科及眼科住院的76例患者分为无糖尿病性视网膜病变组(NDR组)30例,非增殖期糖尿病性视网膜病变组(NPDR组)25例,增殖期糖尿病性视网膜病变组(PDR组)21例,及正常对照组(CON组)30名。收集患者的-般检查结果,用逆转录PCR(RT—PCR)检测PBMCs中miR-126的水平,及酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆中VEGF的水平。结果高密度脂蛋白(HDL)在PDR组明显高于NDR组和NPDR组,差异有统计学意义(P〈0.05)。PDR组的白细胞(WBC)数明显比其余三组高,差异有统计学意义(P〈0.05)。miR-126在NPDR组、PDR组明显低于CON组和NDR组,差异有统计学意义(P〈0.05)。与CON组相比,血浆中的VEGF在NDR组、NPDR组和PDR组中明显上调,差异有统计学意义(P〈0.05)。PBMCs中miR-126水平与FPG、VEGF差异有统计学意义(P〈0.05),(r=-0.67,P〈0.05,f=-0.74,P〈O.05)。结论PBMCs中miR-126参与到DR的发生及发展的过程,其水平变化与病程有关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 糖尿病性视网膜病变 PBMCS MIR-126
肺炎支原体肺炎患儿外周血CXCL8及其mRNA表达 预览 被引量:7
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作者 卜小芳 王健 +3 位作者 倪宁 田恒忠 祁庆松 孔占一 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1195-1199,共5页
目的:探讨支原体肺炎患儿外周血CXCL8及其mRNA表达的临床意义。方法:收集2013年10月~2015年3月淮南市妇幼保健院收治的支原体肺炎患儿48例,其中重症12例,轻症36例,以ELISA法检测患儿血清CXCL8含量,PCR法检测患儿外周血单个核细胞内CX... 目的:探讨支原体肺炎患儿外周血CXCL8及其mRNA表达的临床意义。方法:收集2013年10月~2015年3月淮南市妇幼保健院收治的支原体肺炎患儿48例,其中重症12例,轻症36例,以ELISA法检测患儿血清CXCL8含量,PCR法检测患儿外周血单个核细胞内CXCL8 mRNA水平。以GAPDH为参照,以lgc DNA/lg GAPDH比值代表其最终mRNA水平。结果:支原体肺炎患儿外周血血清CXCL8含量及外周血单个核细胞内CXCL8 mRNA水平分别为(298.917±51.860)pg/ml、(1.848±0.525)lgc DNA/lg GAPDH,与正常对照相比差异均有显著统计学意义(P〈0.05)。进一步观察发现,重症患儿外周血CXCL8及其mRNA进一步升高,与轻症组相比,血清CXCL8含量差异无显著统计学意义统计学意义(P〉0.05),而CXCL8mRNA水平差异有显著统计学意义(P〈0.05)。急性期以红霉素静脉注射7~10 d,使患儿病情得以明显控制,咳嗽症状减轻,肺部炎症逐渐改善,病情得到有效控制,再以阿奇霉素序贯治疗2~3周,患儿病情逐步由急性期转为恢复期,此时患儿外周血CXCL8及其mRNA水平明显降低,与急性期相比,差异有显著统计学意义(P〈0.05)。结论:支原体肺炎患儿外周血CXCL8及其mRNA表达水平增高,并与病情的严重程度相关。CXCL8参与支原体肺炎的发病过程,并对病情的轻重程度和转归有一定的提示作用。阿奇霉素可通过抑制肺炎支原体增殖途径降低患儿血清中CXCL8含量、下调CXCL8 mRNA的表达,逐渐抑制由肺炎支原体介导的免疫损伤。 展开更多
关键词 肺炎支原体 支原体肺炎 外周血单个核细胞 CXCL8 mRNA
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卡介苗诱导人外周血单个核细胞Th1活化
6
作者 周宏 李欣 +2 位作者 刘斌 王祥谷 张东 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第12期1274-1276,共3页
目的探讨卡介苗(BCG)对人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)Th1活化的调节作用。方法经密度梯度离心法制备PBMCs悬液,用BCG进行体外刺激。WST1法测定BCG对PBMCs增殖能力的影响;ELISA法检测BCG对PBMCs分... 目的探讨卡介苗(BCG)对人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)Th1活化的调节作用。方法经密度梯度离心法制备PBMCs悬液,用BCG进行体外刺激。WST1法测定BCG对PBMCs增殖能力的影响;ELISA法检测BCG对PBMCs分泌干扰素γ(interferonγ,IFNγ)及IL-4水平的影响;流式细胞术检测BCG对PBMCs Th1活化的影响。结果经BCG体外刺激后,PBMCs的增殖能力、IFNγ的分泌水平及CD4+IFNγ+细胞比例均显著增加(P〈0.05),IL-4的分泌水平显著下降(P〈0.05)。结论 BCG可显著诱导PBMCs发生Th1活化,为深入研究BCG的抗肿瘤作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 卡介苗 外周血单个核细胞 Th1活化
外周血单个核细胞介导的HBV宫内垂直传播 预览 被引量:2
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作者 周娜 王健 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期946-949,共4页
目的:探讨HBV感染外周血单个核细胞在介导乙肝病毒母婴传播中的作用。方法:以Ficoll-Hypaque常规分离、纯化孕妇外周血单个核细胞( PBMCs )和新生儿脐血单个核细胞( CBMCs ), PCR法检测孕妇外周血和新生儿脐血HBV-DNA。结果:HB... 目的:探讨HBV感染外周血单个核细胞在介导乙肝病毒母婴传播中的作用。方法:以Ficoll-Hypaque常规分离、纯化孕妇外周血单个核细胞( PBMCs )和新生儿脐血单个核细胞( CBMCs ), PCR法检测孕妇外周血和新生儿脐血HBV-DNA。结果:HBeAg(+)孕妇血清和PBMCs内HBV-DNA检出率分别为100.00%(25/25)和72.00%(18/25),其新生儿脐血血清和CBMCs内HBV-DNA检出率分别为60.00%(15/25)和44.00%(11/25),与 HBeAg (-)组相比差异有显著性( P<0.05)。 PBMCs内HBV高复制组其新生儿脐血及CBMCs 内HBV-DNA阳检率均较高,与其他组相比,差异有显著性( P<0.05)。结论:HBV不仅可通过血清介导HBV宫内垂直传播,还可侵染外周血单个核细胞,并通过外周血单个核细胞→脐血单个核细胞途径介导HBV宫内垂直传播。 展开更多
关键词 外周血单个核细胞 脐血单个核细胞 HBV 宫内感染 垂直传播
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胃癌细胞FoxP3的表达及其与外周血单个核细胞(PBMCs)的相互作用 预览
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作者 马桂芬 缪青 +1 位作者 刘以梅 陈世耀 《复旦学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期180-186,共7页
目的检测叉头样蛋白3(forkhead box protein 3,FoxP3)在胃癌细胞中的表达分布,并探讨其在外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)和胃癌细胞共培养过程中的作用。方法应用免疫荧光技术检测FoxP3蛋白的表达定位... 目的检测叉头样蛋白3(forkhead box protein 3,FoxP3)在胃癌细胞中的表达分布,并探讨其在外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)和胃癌细胞共培养过程中的作用。方法应用免疫荧光技术检测FoxP3蛋白的表达定位;建立胃癌细胞和PBMCs的体外共培养体系,然后用CCK-8法检测共培养后胃癌细胞的生长抑制情况;通过Real-time PCR技术检测共培养后胃癌细胞和PBMCs中FoxP3mRNA表达情况;并采用流式细胞技术和Western blot技术检测共培养后两种细胞中FoxP3蛋白表达情况。结果 FoxP3表达于胃癌细胞的胞质和胞核。胃癌细胞与PBMCs共培养时能明显抑制胃癌细胞的增殖。直接和间接共培养后MKN28胃癌细胞的FoxP3蛋白的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)均增加(P=0.031;P=0.015);与单培养相比,来源于胃癌患者和健康对照组的淋巴细胞与胃癌细胞共培养后其FoxP3 MFI均明显增加(P=0.016;P=0.034),且IL-2能促进间接培养条件下PBMCs的FoxP3表达(P=0.024),而对直接共培养影响不大。共培养后胃癌细胞的FoxP3mRNA和蛋白表达均增加,直接共培养较间接共培养增加更明显(P=0.035)。结论胃癌细胞与PBMCs的相互作用主要依赖细胞间的直接接触方式,FoxP3的表达变化在这一过程中发挥了重要作用,这可能跟肿瘤免疫逃逸有关。 展开更多
关键词 叉头样蛋白3(FoxP3) 胃癌 外周血单个核细胞(PBMCs) 共培养
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外周血单个核的细胞中糖皮质激素受体亚型与突发性聋预后的相关性 预览 被引量:2
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作者 戴艳红 陆玲 +3 位作者 吴骎 袁文杰 张秀玲 佘万东 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期32-36,共5页
目的探讨外周血单个核的细胞(peripheral blood mononuelear cells,PBMCs)中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)亚型与突发性聋(sudden sensorineural hearing loss,SSNHL)预后的相关性以及糖皮质激素(glucocorticoi... 目的探讨外周血单个核的细胞(peripheral blood mononuelear cells,PBMCs)中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)亚型与突发性聋(sudden sensorineural hearing loss,SSNHL)预后的相关性以及糖皮质激素(glucocorticoid,GC)治疗对GR亚型表达的影响。方法选择27例应用GC治疗的SSNHL患者,根据听力预后分为有效组(PTA改善≥15dB)15例和无效组(PTA改善〈15dB)12例,6例听力正常的鼻中隔偏曲志愿者为对照组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,QRT—PCR)检测各组对象外周血单个核细胞中的GRdtuRNA、GRBmRNA和SRp30cmRNA的表达水平,并随访3个月以上。分析GRamRNA、GR13mRNA、SRp30cmRNA表达量和GRdmRNA/GR13mRNA比值在有效组、无效组和对照组间的差异以及SSNHI。患者GC治疗前后的差异。结果27例SSNHL患者中采用鼓室灌注GC治疗20例,静脉滴注GC治疗7例,治疗后有效15例,无效12例。有效组、无效组和对照组间PBMCs中GRamRNA、GRβmRNA、SRp30cmRNA表达量和GRamRNA/GRβmRNA比值比较差异无统计学意义。鼓室灌注GC治疗前后均留取血标本15例,其中有效8例,无效7例,有效组GC灌注后PBMCs中GRamRNA和GR8mRNA表达量均较灌注前下降(Z GRa=2.380,PGRa=0.017;ZGRβ=2.521,PCRβ=0.012),而无效组GC灌注前后两者的表达差异无统计学意义(P〉0.05)。结论本组SSNHL患者治疗前PBMCs中GRumRNA、GROmRNA、SRp30cmRNA表达量和GRamRNA/GRβmRNA比值均与SSNHL的听力预后无相关性,尚不能用来预测SSNHL患者对GC的敏感性和听力预后;但鼓室灌注GC治疗后GRamRNA和GRβmRNA表达量下调可能提示有较好的听力预后。 展开更多
关键词 糖皮质激素 敏感性 糖皮质激素受体亚型 突发性聋 外周血单个核细胞
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云芝糖肽对乳腺癌患者外周血单个核细胞Toll样受体4的作用 被引量:2
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作者 王静 余爽 +2 位作者 陈楚 董冰 鲍依稀 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第6期844-847,共4页
目的探讨云芝糖肽(polysaccharopeptide,PSP)对乳腺癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell,PBMC)Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)的作用。方法体外分离乳腺癌患者或健康人PBMC,并将其分别分为PSP组(... 目的探讨云芝糖肽(polysaccharopeptide,PSP)对乳腺癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell,PBMC)Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)的作用。方法体外分离乳腺癌患者或健康人PBMC,并将其分别分为PSP组(分别加入终浓度为25μg/ml的PSP和终浓度为100μg/ml的PHA)和对照组(只加入终浓度为100μg/ml的PHA),采用TLR4单克隆抗体对各组细胞进行免疫荧光染色。将乳腺癌患者PBMC分为空白对照组、TLR4抗体组、PSP组和PSP+TLR4抗体组,采用Q-PCR检测各组PBMC IL-12、IL-6和TNF-α的表达水平。结果健康志愿者对照组PBMC荧光强度较强,而健康志愿者PSP组PBMC荧光强度较弱;乳腺癌患者PSP组与乳腺癌患者对照组相比,细胞荧光强度更弱。与空白对照组比较,TLR4抗体组PBMC IL-12和组TNF-α的表达水平均显著降低(P〈0.05),PSP组PBMC IL-12、IL-6和TNF-α的表达水平均显著上调(P〈0.05或〈0.01);与PSP和TLR4抗体组比较,PSP+TLR4抗体组PBMC IL-12、IL-6和TNF-α的表达水平均显著上调(P〈0.05或〈0.01)。结论 TLR4可能是PSP的作用受体之一。 展开更多
关键词 云芝糖肽 乳腺癌 外周血单个核细胞 TOLL样受体4 免疫调节
慢性肝囊型包虫病患者外周血单核细胞的表型及其功能状态研究 被引量:1
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作者 单骄宇 李海涛 +4 位作者 吐尔洪江·吐逊 张雪 李亮 林仁勇 温浩 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第12期 898-902,共5页
目的探讨慢性肝囊型包虫持续感染患者外周血单核细胞的亚群组成及其功能状态。方法囊型包虫病患者(CE组)和健康者(NC组)各15例,采集外周血单核细胞(PBMC)后分成两部分,一部分应用流式细胞术分析其表面CD14、CD16的阳性表达率;另... 目的探讨慢性肝囊型包虫持续感染患者外周血单核细胞的亚群组成及其功能状态。方法囊型包虫病患者(CE组)和健康者(NC组)各15例,采集外周血单核细胞(PBMC)后分成两部分,一部分应用流式细胞术分析其表面CD14、CD16的阳性表达率;另一部分分为未干预组和重组抗原B(rAgB)干预组,干预后ELISA法检测上清中IFN-γ、IL-12p70、IL-10、IL-4的浓度。结果 PBMC占外周血白细胞的比例在CE组、NC组分别为(13.42±3.90)%和(6.23±1.39)%,差异有统计学意义(t=6.17,P〈0.05);CD14阳性表达率分别为(19.90±6.96)%和(45.61±14.25)%,差异有统计学意义(t=6.28,P〈0.05);CD16阳性表达率分别为(22.75±8.99)%和(22.83±6.77)%,差异无统计学意义(t=0.03,P〉0.05)。除NC组rAgB干预后的IL-4与未干预对照相比差异无统计学意义外,来源于NC组、CE组rAgB干预后的4种细胞因子浓度与未干预对照相比差异均有统计学意义(P均〈0.05)。CE组与NC组相比,rAgB干预下的IFN-γ、IL-12p70及IL-10的浓度差异均有统计学意义(t值分别为2.580,2.745,2.213,P值均〈0.05),IL-4浓度差异无统计学意义(t=0.722,P〉0.05)。结论慢性CE患者PBMC的CD14低表达致使单核细胞未能达到成熟状态,影响其分化能力,同时联合细粒棘球绦虫主要抗原成分的作用使机体倾向于Th2型反应,是囊型包虫病慢性感染引起机体免疫低下的重要因素。 展开更多
关键词 囊型包虫病 外周血单核细胞(PBMCs) 细胞表型 免疫低下
非重症及重症脓毒症患者外周血单核细胞炎性因子分泌及Toll样受体4表达的研究 被引量:1
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作者 滕国杰 聂秀红 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期247-250,共4页
目的 观察革兰阴性菌感染的非重症及重症脓毒症患者内毒素(LPS)刺激后外周血单核细胞炎性因子分泌及TLR4的表达.方法 以我院ICU革兰阴性菌感染所致脓毒症52例患者为研究对象,28例非重症脓毒症患者,24例重症脓毒症患者,选取30例健康对... 目的 观察革兰阴性菌感染的非重症及重症脓毒症患者内毒素(LPS)刺激后外周血单核细胞炎性因子分泌及TLR4的表达.方法 以我院ICU革兰阴性菌感染所致脓毒症52例患者为研究对象,28例非重症脓毒症患者,24例重症脓毒症患者,选取30例健康对照者.所有人均晨起空腹采血,分离外周血单核细胞,将细胞加入1 μg/mL细菌LPS培养24 h后流式细胞仪检测单核细胞表面TLR4的表达,同时应用放射免疫法测定外周血单核细胞培养液中TNF-α、IL-10的浓度.结果 ①重症脓毒症患者单核细胞培养上清液中TNF-α的浓度低于非重症脓毒症患者及健康对照组(P〈0.05),但IL-10浓度高于其他两组(P〈0.05),IL-10/TNF-α比值明显高于非重症脓毒症患者及健康对照组(P〈0.01).②三组患者外周血单核细胞LPS刺激后,细胞表面TLR4表达差异无统计学意义(P〉0.05).结论 重症脓毒症患者外周血单核细胞体外给予LPS刺激后,促炎因子表达较非重症脓毒症组下降,且伴有抗炎因子表达的上调,IL-10/TNF-α比值明显升高,显示重症脓毒症患者存在更加严重的免疫抑制现象,但这种现象不能单纯用细胞膜表面TLR4的表达解释,其可能存在更复杂的机制. 展开更多
关键词 脓毒症 外周血单核细胞 肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 白细胞介素-10(IL-10) Toll样受体4(TLR4)
新生儿缺氧缺血性脑病患儿外周单个核细胞CD25 mRNA表达 预览 被引量:2
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作者 孙琳 陆勤 王健 《中国卫生检验杂志》 2008年第1期 104-106,共3页
目的:探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD25 mRNA表达。方法:以管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为参照,应用Real-time PCR法检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、7天外周血CD25 mRNA水... 目的:探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD25 mRNA表达。方法:以管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为参照,应用Real-time PCR法检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、7天外周血CD25 mRNA水平,以lg cDNA/lg GAPDH比值代表其最终mRNA水平。结果:HIE患儿生后第1天静息期和诱导期CD25 mRNA水平分别为0.72±0.19和1.12±0.23,与正常对照组相比,差异有显著性(P〈0.05);随着通气、换气等综合性治疗时间的延长,患儿缺氧缺血症状逐步改善,生后第7天静息期和诱导期CD25 mRNA水平分别为1.02±0.22和2.02±0.32,与正常对照组相比,差异无显著性(P〉0.05)。其中HIE(重度)患儿静息期和诱导期CD25 mR-NA水平均较低,与正常对照组相比,差异有显著性(P〈0.05)。结论:HIE患儿存在一定程度的细胞免疫功能紊乱,主要表现为外周血CD25 mRNA水平降低,并与HIE严重程度有关。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑病(HIE) 新生儿 生物素-链霉亲和素(BSA) CD25 mRNA 外周血单个核细胞(PBMC)
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Preliminary Study on a Potential Panel for Quality Assurance of ELISPOT 预览
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作者 Chun-tao ZHANG Yu WU +7 位作者 Chen-yan ZHAO Kun-xue HONG Chun-yu LIU Ying WANG Ping ZHONG Jian-hui NIE Xue-lin WU You-chun WANG 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2008年第5期 330-338,共9页
ELISPOT 试金逐渐地被使用在 HIV-1 或癌症疫苗的临床的试用估计细胞的有免疫力的回答。迄今为止,然而,从临床的试用的数据一致地不证明有免疫力的回答与临床的端点被相关。这越过实验室对试金标准化和确认的缺乏部分地到期,因此,... ELISPOT 试金逐渐地被使用在 HIV-1 或癌症疫苗的临床的试用估计细胞的有免疫力的回答。迄今为止,然而,从临床的试用的数据一致地不证明有免疫力的回答与临床的端点被相关。这越过实验室对试金标准化和确认的缺乏部分地到期,因此,一块质量控制面板被要求在不同实验室之中建立才能和相似性。在这学习外设血,从健康个人的单音的原子房间(PBMC ) 在液体氮被屏蔽并且结冰。PBMC 的恢复和干扰素(IFN ) 的频率在 CEF 肽水池刺激以后的 -&#947;-secreting 房间在七个不同实验室在各种各样的间隔以后被检测。恢复和生存能力没在不同间隔以后显著地不同。尽管在融化的 PBMC 之中的 IFN (干扰素)-&#947;-secreting 房间的频率(外部血单音的原子房间) 在不同间隔在 CEF 肽水池刺激以后波动,他们显著地没在新鲜 PBMC 之中与那些相比被减少。然而, IFN-&#947;-secreting 房间的生存能力,恢复和频率在七个实验室之中显著地不同。我们的结果显示 cryopreserved PBMC 能为 ELISPOT 被用作一块质量控制面板。然而,为 ELISPOT 的过程需要在不同实验室之中被标准化。 展开更多
关键词 斑点法 细胞 免疫系统 测试方法
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溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞IL-13 mRNA表达的研究 被引量:1
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作者 周宇 叶文桃 +1 位作者 王皓 麦海妍 《中国医师杂志》 CAS 2005年第5期 634-636,共3页
目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者外周血单个核细胞( PBMCs)白介13(IL-13) mRNA表达与血清C反应蛋白(C-RP)的关系.方法对21例溃疡性结肠炎(UC)活动期患者、10例缓解期患者及20例健康人,采用RT-PCR 法和图像分析半定量法检测PBMCs 中IL-13mR... 目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者外周血单个核细胞( PBMCs)白介13(IL-13) mRNA表达与血清C反应蛋白(C-RP)的关系.方法对21例溃疡性结肠炎(UC)活动期患者、10例缓解期患者及20例健康人,采用RT-PCR 法和图像分析半定量法检测PBMCs 中IL-13mRNA 的表达水平及血清C反应蛋白(CRP)浓度.结果活动期UC患者IL-13mRNA 的表达水平(6.45±1.23)明显低于缓解期UC患者(14.72±2.12)和健康人(15.17±2.38)(t=2.13,2.24,P<0.05) ,而缓解期UC患者与健康人比较无明显降低(t=1.63,P>0.05).活动期UC患者IL-13mRNA 的表达水平(6.45±1.23)与血清C-RP 浓度(8.36±3.16mg/L)呈负相关(r=-0.589,P<0.05).结论活动期UC患者PBMCs中IL-13mRNA 表达水平显著降低,炎症活动程度与IL-13基因转录降低有关. 展开更多
关键词 外周血单个核细胞 溃疡性结肠炎 表达的研究 患者 IL-13mRNA C反应蛋白(CRP) mRNA表达 血清C反应蛋白 RT-PCR法 血清C-RP PBMCS 活动期 健康人 缓解期 半定量法 图像分析 基因转录 UC 水平 负相关 浓度
PCR技术在猴免疫缺陷病毒(SIV)感染模型中的应用 预览
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作者 丛喆 涂新明 +5 位作者 蒋虹 魏强 佟巍 孙敏 于浩 秦川 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第S1期共2页
目的(1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA,比较其与传统血浆病毒分离方法的敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中的前病毒DNA.(3)检验DNA-PCR和RNA-PCR方法在猴SAIDS模型应用中的实用性和可... 目的(1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA,比较其与传统血浆病毒分离方法的敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中的前病毒DNA.(3)检验DNA-PCR和RNA-PCR方法在猴SAIDS模型应用中的实用性和可操作性.方法用SIVmac251静脉感染恒河猴,定期采血,从血浆中提取病毒RNA,以RNA为模板通过RT-PCR法扩增,凝胶电泳定性;从感染猴PBMC中提取带有整合的SIV前病毒DNA的细胞基因组DNA,巢式PCR扩增,凝胶电泳定性.结果DNA-PCR和RNA-PCR经两轮扩增后均得到一长度为477bp的特异条带,测序鉴定确为目的片段.9只实验猴感染SIV后7 d,RNA-PCR结果为7/9阳性,DNA-PCR结果为100%阳性,而血浆病毒分离只有5/9阳性;此后一直到感染后的42d,RNA-PCR和DNA-PCR的结果一直为100%阳性,而血浆病毒分离阳性率在感染后35 d下降到4/9,到42 d时下降为零.结论PCR方法比病毒分离方法的敏感性高.尤其是DNA-PCR,既可检测具有活跃病毒复制的受感染细胞,又可检测那些携带病毒处于转录休眠期的细胞,所以在感染的早期和中后期--血浆病毒水平较低的情况下或病毒处于潜伏感染的阶段,它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之一有其必要性和重要性.这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感. 展开更多
关键词 猴免疫缺陷病毒(SIV) RT-PCR 巢式PCR 外周血淋巴细胞(PBMCs) 病毒分离
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多脏器功能障碍综合征患者外周血单个核细胞凋亡的意义研究 预览 被引量:3
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作者 梁艳冰 陈娟 +4 位作者 唐皓 马中富 叶海宁 熊艳 詹红 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期 625-627,共3页
目的观察多脏器功能障碍综合征(MODS)患者外周血单个核细胞(PBMCs)的细胞凋亡.方法采用流式细胞仪法、电子显微镜、荧光显微镜测定25例MODS患者PBMCs的细胞凋亡,并与18例健康志愿者比较.结果电镜、吖啶橙-溴化乙锭染色荧光显微镜均观察... 目的观察多脏器功能障碍综合征(MODS)患者外周血单个核细胞(PBMCs)的细胞凋亡.方法采用流式细胞仪法、电子显微镜、荧光显微镜测定25例MODS患者PBMCs的细胞凋亡,并与18例健康志愿者比较.结果电镜、吖啶橙-溴化乙锭染色荧光显微镜均观察到MODS患者PBMCs出现细胞凋亡的典型形态学改变;MODS组和健康对照组的PBMCs凋亡率分别为(25.4±9.21)%、(15.9±6.75)%(P<0.01),凋亡细胞数分别为1.040±0.096、0.235±0.028个/HPF(P<0.05).结论 MODS患者PBMCs细胞凋亡异常增高. 展开更多
关键词 多脏器功能障碍综合征 外周血单个核细胞 细胞凋亡
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PCR技术在猴免疫缺陷病毒(SIV)感染模型中的应用 预览 被引量:15
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作者 丛喆 涂新明 +5 位作者 蒋虹 魏强 佟巍 孙敏 于浩 秦川 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第2期 84-87,共4页
目的 (1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA,比较其与传统血浆病毒分离方法的敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中的前病毒DNA。(3)检验DNA.PCR和RNA-PCR方法在猴SAIDS模型应用中的实用... 目的 (1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA,比较其与传统血浆病毒分离方法的敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中的前病毒DNA。(3)检验DNA.PCR和RNA-PCR方法在猴SAIDS模型应用中的实用性和可操作性。方法 用SIVmac251静脉感染恒河猴,定期采血,从血浆中提取病毒RNA,以RNA为模板通过RT-PCR法扩增,凝胶电泳定性;从感染猴PBMC中提取带有整合的SIC前病毒DNA的细胞基因组DNA,巢式PCR扩增,凝胶电泳定性。结果 DNA-PCR和RNA-PCR经两轮扩增后均得到一长度为477bp的特异条带,测序鉴定确为目的片段。9只实验猴感染SIV后7d,RNA-PCR结果为7/9阳性,DNA-PCR结果为100%阳性,而血浆病毒分离只有5/9阳性;此后一直到感染后的42d,RNA-PCR和DNA-PCR的结果一直为100%阳性,而血浆病毒分离阳性率在感染后35d下降到4/9,到42d时下降为零。结论 PCR方法比病毒分离方法的敏感性高。尤其是DNA-PCR,既可检测具有活跃病毒复制的受感染细胞,又可检测那些携带病毒处于转录休眠期的细胞,所以在感染的早期和中后期——血浆病毒水平较低的情况下或病毒处于潜伏感染的阶段。它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之一有其必要性和重要性。这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感。 展开更多
关键词 猴免疫缺陷病毒 PCR技术 RT-PCR方法 外周血淋巴细胞 RT-PCR法 病毒DNA 基因组DNA 分离方法 凝胶电泳 病毒分离 PCR扩增 RNA SIV 定性测定 可操作性 模型应用 PBMC 感染细胞 病毒复制 潜伏感染 检测方法 敏感性 血浆 实用性
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拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者血清及PBMC内HBV DNA的动态变化 预览 被引量:3
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作者 柯昌征 陈悦 +5 位作者 龚作炯 王明春 李东 朱琳 刘莉 周作华 《中西医结合肝病杂志》 2004年第4期 197-199,共3页
目的:研究拉米夫定对慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者血清及PBMC内HBVDNA的抑制作用.方法:应用荧光定量PCR方法动态观察72例拉米夫定治疗组和对照组患者血清及PBMC内HBV DNA的含量变化.结果:治疗组血清HBV DNA在治疗6周时(2~8周)21例转阴,PBM... 目的:研究拉米夫定对慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者血清及PBMC内HBVDNA的抑制作用.方法:应用荧光定量PCR方法动态观察72例拉米夫定治疗组和对照组患者血清及PBMC内HBV DNA的含量变化.结果:治疗组血清HBV DNA在治疗6周时(2~8周)21例转阴,PBMC中HBV DNA在治疗16周(8~24周)时17例转阴.结论:拉米夫定对慢乙肝患者血清HBV DNA有较强的抑制作用,起效快,同时,随着治疗时间的延长,对PBMC内HBV DNA也有一定的抑制作用,但滞后于血清中HBV DNA的转阴. 展开更多
关键词 拉米夫定 治疗 慢性乙型肝炎 血清 PBMC HBVDNA 动态变化
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乙肝患者外周血单个核细胞中乙肝病毒复制中间体RNA与乙肝病毒DNA相关性的研究 预览 被引量:1
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作者 张凯宇 蔡艳俊 +2 位作者 王峰 许昶 吕美德 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2001年第3期 149-151,共3页
采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测乙肝患者外周血单个核细胞(PBMCs)乙肝病毒复制中间体RNA(HBV RNA),60例乙肝患者5例PBMCs中HBV RNA阳性,26例PBMCs中HBV DNA阳性,27例血清HBVDNA阳性;PBMCs HBVDNA阳性患者中有4例PBMCs HBVRNA阳... 采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测乙肝患者外周血单个核细胞(PBMCs)乙肝病毒复制中间体RNA(HBV RNA),60例乙肝患者5例PBMCs中HBV RNA阳性,26例PBMCs中HBV DNA阳性,27例血清HBVDNA阳性;PBMCs HBVDNA阳性患者中有4例PBMCs HBVRNA阳性,血清HBV DNA阳性患者中有3例PBMCs HBVRNA阳性;17例血清HBeAg阳性患者中有4例PBMCs HBV RNA阳性.血清HBeAg、HBV DNA及PBMCs中HBV DNA阴性患者,其PBMCsHBV RNA仍可能阳性,其PBMCs可成为乙肝患者肝病复发和传播的来源. 展开更多
关键词 外周血单个核细胞 乙肝病毒 乙肝病毒复制中间体RNA 多聚酶链反应 HBV RT-PCR技术 PBMCS HBV-RNA
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