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The Role of Prostaglandin E2 on Osteoblast Proliferation Induced by Hydroxyapatite 认领
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作者 Erwan Sugiatno Endang Herminajeng Wihaskoro Sosroseno 《生物科学与医学(英文)》 2020年第1期42-55,共14页
Objective: Prostaglandin E2 (PGE2) plays a crucial role in regulating bone cell differentiation and proliferation. The aim of the present study was to determine whether PGE2 may regulate osteoblast proliferation induc... Objective: Prostaglandin E2 (PGE2) plays a crucial role in regulating bone cell differentiation and proliferation. The aim of the present study was to determine whether PGE2 may regulate osteoblast proliferation induced by hydroxyapatite. Materials and Methods: Osteoblasts (HOS cell line) pre-treated with cyclooxygenase (COX) inhibitors (indomethacin, aspirin and nimesulide) were then cultured. The cells were also pre-treated with or without nimesulide and then cultured with PGE2. The cell cultures were also treated with SQ22536 (adenylyl cyclase inhibitor) and added with Db-cAMP (cAMP analog), and/or PGE2. KT5720 [protein kinase A (PKA) inhibitor.], Db-cAMP and/or forskolin (adenylyl cyclase activator)-treated cultures were used to assess the role of PKA. The role of EP2 and/or EP4 was determined by using EP2 antagonist (PF-04418948) and EP4 antagonist (L-161,982) with PGE2. All cells were cultured with or without hydroxyapatite. The levels of PGE2 and cAMP were detected from the culture supernantants and the cell proliferation was assessed colorimetrically. Results: Nimesulide and indomethacin but not aspirin suppressed partially the cell proliferation but fully PGE2 production. PGE2 abrogated nimesulide-mediated suppression of cell proliferation. The cell proliferation was enhanced by low but suppressed by high concentration of PGE2. Moreover, the SQ22536-mediated suppression of cell proliferation was abolished by Db-cAMP but not PGE2. Conversely, PGE2, Db-cAMP or forskolin failed to eliminate KT5720-mediated suppression of cell proliferation. The effect of PGE2 on cell proliferation and cAMP levels was mediated predominantly via EP2 and to a lesser extent, EP4. The results of the controls for all experiments were significantly lower than hydroxyapatite-stimulated cell cultures. Conclusion: These results suggest thatPGE2, acting via a COX-2-, cAMP-PKA- and both EP2 and EP4-dependent pathway may partially regulate hydroxyapatite-induced human osteoblasts in an autocrine fashion. 展开更多
关键词 HYDROXYAPATITE OSTEOBLAST PGE2 PROLIFERATION
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Evaluation of the Anti-Proliferative Effects of a Green Tea and <i>Capsicum</i>Powder Extract in Cancer Cell Lines 认领
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作者 Eleana Hatzidaki Maria Papadimitriou Ioannis Papasotiriou 《癌症治疗(英文)》 2020年第2期44-54,共11页
In recent years the use of natural supplements in order to prevent, treat or delay recurrence of cancer or reduce chemotherapy toxicity has attracted much?attention. One such supplement is Capsol-T which consists of d... In recent years the use of natural supplements in order to prevent, treat or delay recurrence of cancer or reduce chemotherapy toxicity has attracted much?attention. One such supplement is Capsol-T which consists of de-caffeinated green tea and chili pepper extracts. The aim of the study was the evaluation of Capsol-T effect on the proliferation of various cancer cell lines representing different cancer types. Cell lines that were used in the study were: DU145, LNCap,?MCF7, HCT116 and MOR. The effect of various concentrations and incubation times of Capsol-T on cell viability was determined using the MTT method. The results do not show a common anti-proliferative pattern in all cancer cells.?In some cell lines and certain concentrations cell growth was significantly decreased at 24 hr which became more evident at 48?hr. The role of Capsicum?powder in cancer is unclear since both cancer cell proliferation and growth arrest have been demonstrated. Green tea on the other hand was found to decrease certain drugs’ bioavailability. Our results suggest that an anti-proliferative?effect in certain types of cancer should not be generalized to other types as well.?Different concentrations also affect the net result often having opposite effects. Overall, caution should be taken when using natural supplements for their anti-cancer effects. 展开更多
关键词 Proliferation Cancer Green TEA CAPSICUM POWDER
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大葱油对人结肠癌SW480细胞增殖及转移能力的影响 认领
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作者 赵璐 冯金歌 +2 位作者 付佳 汪亚伦 邹鹏 《沈阳医学院学报》 2020年第3期210-215,共6页
目的:探讨大葱油对人结肠癌SW480细胞增殖和转移能力的影响。方法:采用MTT法、流式细胞仪检测不同浓度大葱油对SW480细胞生长能力及细胞周期的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测... 目的:探讨大葱油对人结肠癌SW480细胞增殖和转移能力的影响。方法:采用MTT法、流式细胞仪检测不同浓度大葱油对SW480细胞生长能力及细胞周期的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测大葱油对细胞周期、凋亡和迁移侵袭相关基因和蛋白表达的影响。结果:大葱油能显著抑制SW480细胞生长,且呈剂量依赖性(P<0.01),100μg/ml大葱油作用SW480细胞24 h细胞抑制率显著高于人正常结肠CCD-18Co细胞(P<0.01);不同浓度的大葱油作用SW480细胞24 h,流式细胞仪检测结果显示细胞周期发生改变,细胞周期停滞于G2/M期,其G2/M期细胞比率分别从10.43%增至15.69%(50μg/ml)和24.07%(100μg/ml)且诱导细胞发生凋亡。25、50和100μg/ml大葱油作用SW480细胞24 h后,实时荧光定量PCR和Western blot检测与细胞周期、凋亡、迁移侵袭相关蛋白Cyclin D1、CDK4、CDK6、Bcl-2、MMP2、MMP9、LIMK1p-Thr508和Cofilinp-Ser3基因和蛋白表达量呈下降趋势,Caspase-9、Caspase-3和Bax基因和蛋白表达量呈上升趋势(P<0.05)。结论:大葱油具有抑制人结肠癌SW480细胞生长及转移能力,诱导G2/M期阻滞,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 大葱油 SW480 增殖 转移
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miR⁃182⁃5p调节细胞自噬促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭 认领
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作者 相绿竹 王晔 +3 位作者 陈文 赵琦 彭瑞 牟晓峰 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第5期596-600,638,共6页
目的探讨miR⁃182⁃5p调节细胞自噬对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时定量聚合酶链式反应检测胃癌与癌旁组织、正常胃上皮细胞GES⁃1与胃癌细胞株BGC⁃823中miR⁃182⁃5p的表达。细胞荧光和免疫印迹实验检测细胞自噬。细胞计数试剂... 目的探讨miR⁃182⁃5p调节细胞自噬对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时定量聚合酶链式反应检测胃癌与癌旁组织、正常胃上皮细胞GES⁃1与胃癌细胞株BGC⁃823中miR⁃182⁃5p的表达。细胞荧光和免疫印迹实验检测细胞自噬。细胞计数试剂盒8(CCK⁃8)实验、划痕实验和侵袭实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭。结果与癌旁组织和GES⁃1相比,胃癌组织和BGC⁃823细胞株中miR⁃182⁃5p的表达显著增加(P<0.05);相比于对照组,特殊化学修饰的微小RNA激动剂组自噬水平增强,微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表达增加、脂质体1(SQSTM1或P62)表达减少,特殊化学修饰的微小RNA拮抗剂组结果相反(P<0.05);过量表达miR⁃182⁃5p后,细胞增殖、迁移和侵袭能力增强,抑制miR⁃182⁃5p表达后,细胞增殖、迁移和侵袭能力减弱(P<0.05)。结论miR⁃182⁃5p可能是通过增强自噬作用促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,miR⁃182⁃5p可作为胃癌的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 miR⁃182⁃5p 胃癌 自噬 增殖 迁移 侵袭
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RanBP9激活线粒体途径诱导骨肉瘤细胞凋亡 认领
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作者 郭栎枫 吕杨帆 +2 位作者 曹亚 郭乔楠 尹良军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1174-1181,共8页
目的探讨过表达RanBP9对骨肉瘤细胞凋亡的作用及其机制。方法采用Real-time PCR、Western blot检测成骨细胞及不同骨肉瘤细胞株(SaOS2、MG63、U2OS和HOS)中RanBP9的mRNA和蛋白表达水平。使用慢病毒建立稳定过表达RanBP9的SaOS2骨肉瘤细... 目的探讨过表达RanBP9对骨肉瘤细胞凋亡的作用及其机制。方法采用Real-time PCR、Western blot检测成骨细胞及不同骨肉瘤细胞株(SaOS2、MG63、U2OS和HOS)中RanBP9的mRNA和蛋白表达水平。使用慢病毒建立稳定过表达RanBP9的SaOS2骨肉瘤细胞模型,并利用流式细胞仪及TUNEL染色法检测过表达RanBP9组及对照组骨肉瘤细胞凋亡率,使用线粒体膜电位检测过表达RanBP9组及对照组细胞凋亡过程中发生的线粒体膜电位变化。结果RanBP9在成骨细胞和骨肉瘤细胞株中均呈阳性表达,在成骨细胞中的表达显著高于骨肉瘤细胞(P<0.05),并且在恶性程度较低的骨肉瘤细胞株MG63和HOS中的表达要高于恶性程度较高的细胞株SaOS2和U2OS(P<0.05)。过表达RanBP9降低骨肉瘤细胞的增殖能力,促进凋亡率上升(P<0.05)。过表达RanBP9明显增加Caspase-3和Cytc的表达水平,并同时上调Bax/Bcl-2的比率(P<0.05);过表达RanBP9破坏线粒体膜电位,诱导内源性线粒体凋亡信号转导途径。结论RanBP9通过上调内源性线粒体通路发挥诱导骨肉瘤细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 骨肉瘤 RanBP9 凋亡 增殖
KLF7对骨髓间充质干细胞增殖和施万样细胞分化的影响 认领
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作者 孙广大 李文媛 +1 位作者 马多 王莹 《中国实用神经疾病杂志》 2020年第14期1197-1202,共6页
目的探讨转录因子KLF7对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和施万样细胞分化的作用。方法 BMSCs培养与鉴定,应用腺病毒AAV-KLF7和AAV-NC转染BMSCs。将BMSCs分为AAV-KLF7组、AAV-NC组和正常组。应用Western blots和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检... 目的探讨转录因子KLF7对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和施万样细胞分化的作用。方法 BMSCs培养与鉴定,应用腺病毒AAV-KLF7和AAV-NC转染BMSCs。将BMSCs分为AAV-KLF7组、AAV-NC组和正常组。应用Western blots和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测KLF7及其靶基因神经生长因子(NGF)表达水平,EdU免疫荧光染色及MTT法检测各组细胞增殖情况,应用施万细胞分化培养液和免疫荧光染色检测各组细胞诱导分化为类施万样细胞情况。结果与正常组和AAV-NC组比较,AAV-KLF7组KLF7蛋白和mRNA表达水平显著升高,NGF mRNA表达亦显著升高(P<0.05);AAV-KLF7组EdU阳性细胞比率显著增多,增殖活性显著增加(P<0.05);诱导10 d后AAV-KLF7组S100阳性细胞比率显著增多(P<0.05)。结论 KLF7显著促进BMSCs增殖和施万样细胞分化。 展开更多
关键词 KLF7 骨髓间充质干细胞 增殖 细胞分化 神经生长因子
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MicroRNA-7对HCCC9810细胞增殖、迁移和侵袭的研究 认领
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作者 张家宁 孙大鹏 +1 位作者 李雯 周伟平 《腹部外科》 2020年第2期159-162,F0004共5页
目的探讨MicroRNA-7(miR-7)对于肝内胆管癌细胞HCCC9810增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法利用实时定量PCR对于肝内胆管癌病人的癌组织和癌旁组织,以及正常肝内胆管上皮细胞和肝内胆管癌细胞HCCC9810中miR-7表达水平的验证;培养人肝内... 目的探讨MicroRNA-7(miR-7)对于肝内胆管癌细胞HCCC9810增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法利用实时定量PCR对于肝内胆管癌病人的癌组织和癌旁组织,以及正常肝内胆管上皮细胞和肝内胆管癌细胞HCCC9810中miR-7表达水平的验证;培养人肝内胆管癌细胞HCCC9810,将其分为研究组(miR-7 mimics)和阴性对照组(miR-7 NC),分别进行miR-模拟物以及miR-阴性序列的转染,效率验证后,通过CCK-8实验,EDU实验,克隆形成实验,以及划痕和Transwell实验分别验证两组细胞的增殖、迁移和侵袭的能力。结果肝内胆管癌病人中癌组织miR-7的表达水平低于癌旁组织,肿瘤细胞HCCC9810 miR-7表达水平低于正常胆管上皮细胞;细胞转染效率验证显示,miR-7 mimics组HCCC9810细胞中miR-7的相对表达水平远高于miR-7 NC组,差异具有统计学意义(P<0.05);与miR-7NC相比,miR-7 mimics组细胞的增殖、迁移以及侵袭能力被明显抑制,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-7在肝内胆管癌中表达水平下调,而且过表达miR-7能够抑制肿瘤细胞的增殖、迁移以及侵袭过程。 展开更多
关键词 肝内胆管癌 MicroRNA-7 增殖 迁移 侵袭
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Survivin对分流型肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖作用及机制研究 认领
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作者 黄静林 劳金泉 庞玉生 《广西医科大学学报》 CAS 2020年第5期837-842,共6页
目的:通过RNA干扰抑制分流型肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中survivin的表达,探索survivin基因对PASMCs增殖作用的影响及其机制。方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、假手术组和分流组,正常组大鼠不做处理,假手术组大鼠开腹后... 目的:通过RNA干扰抑制分流型肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中survivin的表达,探索survivin基因对PASMCs增殖作用的影响及其机制。方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、假手术组和分流组,正常组大鼠不做处理,假手术组大鼠开腹后予夹闭腹主动脉10 min,分流组用腹主动脉-下腔静脉分流术建立肺动脉高压大鼠模型。术后饲养11周后,通过测定大鼠右心室压力、右心室肥厚指数及肺小动脉苏木精-伊红(HE)染色评估模型建立情况。提取各组大鼠肺动脉进行PASMCs原代培养,并通过siRNA干扰技术将分流组大鼠PASMCs在细胞层面上分为分流组、分流+空载病毒组和分流+慢病毒干扰组。用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blot分别检测survivin mRNA及蛋白在5组细胞中的表达;CCK-8法检测5组细胞的增殖水平。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中caspase-9、caspase-3浓度。结果:分流组大鼠的右心室压力、右心室肥厚指数均较正常组和假手术组明显增高(P<0.05),分流组大鼠肺动脉较正常组和假手术组明显增厚。正常组和假手术组的PASMCs均未见survivin mRNA及蛋白表达,分流组为阳性表达。分流+慢病毒干扰组survivin mRNA及蛋白表达水平较分流组、分流+空载病毒组明显下降(P<0.05),分流组、分流+空载病毒组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CCK-8法分析,分流组PAMSCs在接种48 h及之后较正常组和假手术组吸光度值明显增加(P<0.05),正常组和假手术组在各个时间节点比较,差异无统计学意义(P>0.05),分流+慢病毒干扰组PASMCs在接种48 h及之后吸光度值较分流组、分流+空载病毒组明显下降(P<0.05),分流组和分流+空载病毒组在各个时间节点比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA法显示分流+慢病毒干扰组caspase-9、caspase-3浓度较分流组、分流+空载病毒中显著增高(P<0.05),分流组与分流+空载病毒组� 展开更多
关键词 肺动脉高压 SURVIVIN RNA干扰 增殖 大鼠
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蝴蝶兰‘大辣椒’组培快繁技术体系的优化 认领
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作者 高壮壮 娄倩 刘雅莉 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期95-100,211,共7页
探索优化蝴蝶兰组培快繁技术体系,以蝴蝶兰‘大辣椒’半木质化花梗为试验材料,研究消毒剂、基础培养基、植物生长调节剂配比及浓度对蝴蝶兰不定芽诱导、增殖和生根过程的影响。结果表明:1)先用2%H2O2溶液处理15 min,再用10%NaClO溶液处... 探索优化蝴蝶兰组培快繁技术体系,以蝴蝶兰‘大辣椒’半木质化花梗为试验材料,研究消毒剂、基础培养基、植物生长调节剂配比及浓度对蝴蝶兰不定芽诱导、增殖和生根过程的影响。结果表明:1)先用2%H2O2溶液处理15 min,再用10%NaClO溶液处理10 min,消毒效果良好,花梗污染率低,为26.6%;2)不定芽诱导最适培养基为花宝1号+花宝2号+6-BA 3 mg/L+NAA 0.05 mg/L,出芽率为78.9%;3)不定芽增殖最适培养基为花宝1号+6-BA 5 mg/L+NAA 0.05 mg/L,增殖系数为3.60;4)幼苗生根最适培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L,生根率为73.7%。本研究旨在优化‘大辣椒’品种的组培快繁技术体系,为进一步建立蝴蝶兰再生体系和工厂化生产提供技术支持。 展开更多
关键词 蝴蝶兰 不定芽 增殖 生根 快速繁殖
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微小RNAs在涡虫再生中的研究进展 认领
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作者 张芬熙 董自梅 +1 位作者 陈广文 刘德增 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期631-636,共6页
涡虫由于其体内存在丰富的成体干细胞——新母细胞(neoblasts)而具有极强的再生能力。目前,涡虫已成为再生生物学研究的重要模式动物,neoblasts也成为生物医学领域的重要工具细胞。但关于调控涡虫再生和neoblasts增殖的基因网络仍不十... 涡虫由于其体内存在丰富的成体干细胞——新母细胞(neoblasts)而具有极强的再生能力。目前,涡虫已成为再生生物学研究的重要模式动物,neoblasts也成为生物医学领域的重要工具细胞。但关于调控涡虫再生和neoblasts增殖的基因网络仍不十分清楚。微小RNAs(miRNAs)是广泛存在于真核生物中的一类内源性、小片段、非编码RNA,可通过特异性识别并结合目的RNA,负调控功能基因的表达。近期的研究提示,miRNAs可能参与涡虫再生的调控。我们就miRNAs调控涡虫再生及neoblasts,增殖和分化特性的新近研究成果及进展进行综述。 展开更多
关键词 微小RNA 涡虫 新母细胞 增殖 再生
MiR-25-3p靶向NOTCH1对食管鳞癌细胞ECA109侵袭、迁移、增殖的影响 认领
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作者 薛亚军 杜雅彦 +2 位作者 周奕君 董星星 魏育涛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第1期75-80,共6页
目的探讨miR-25-3p靶向NOTCH1基因对食管鳞癌细胞侵袭、迁移和增殖的影响,阐明miR-25-3p和NOTCH1基因在食管鳞癌中的作用机制。方法将ECA109细胞以1×10~6/ml均匀接种于培养皿,每组设3个复孔,实验分为两组。第1组:miR-25-3p上调组(... 目的探讨miR-25-3p靶向NOTCH1基因对食管鳞癌细胞侵袭、迁移和增殖的影响,阐明miR-25-3p和NOTCH1基因在食管鳞癌中的作用机制。方法将ECA109细胞以1×10~6/ml均匀接种于培养皿,每组设3个复孔,实验分为两组。第1组:miR-25-3p上调组(转染miR-25-3p模拟物)、miR-25-3p下调组(转染miR-25-3p抑制剂)和NC组;第2组:NOTCH1上调组(转染NOTCH1模拟物)、NOTCH1下调组(转染NOTCH1抑制剂)和NC组。实时荧光定量PCR法分别检测各组miR-25-3p、NOTCH1表达水平,Transwell小室检测转染miR-25-3p、NOTCH1后ESCC细胞侵袭能力,CCK-8检测细胞增殖能力,生物信息学分析和荧光素酶活性测定以确定NOTCH1是否为miR-25-3p的靶基因。结果①NOTCH1是miR-25-3p的靶基因;②细胞实验结果显示,与NC组相比,miR-25-3p上调组促进ECA109细胞的侵袭(P<0.05),CCK-8增殖试验显示在ECA109细胞中miR-25-3p上调组促进细胞增殖(P<0.05);③下调NOTCH1促进细胞生长(P<0.05),下调NOTCH1可增强ECA109细胞的侵袭能力(P<0.005),上调NOTCH1可抑制ECA109细胞的侵袭能力(P<0.005)。结论 miR-25-3p通过靶向调节NOTCH1促进人ESCC细胞的侵袭、迁移和增殖,miR-25-3p有望成为ESCC治疗的新靶点。 展开更多
关键词 miR-25-3p ESCC NOTCH1 侵袭 增殖 生物信息学分析
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肾癌血清microRNA-29a表达量与肿瘤恶性增殖及侵袭的相关性分析 认领
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作者 王旭 刘勇 吴冶 《临床和实验医学杂志》 2020年第5期490-493,共4页
目的研究肾癌血清microRNA-29a(miR-29a)表达量与肿瘤恶性增殖、侵袭的相关性。方法回顾性选择2015年6月至2019年2月期间在盘锦辽油宝石花医院接受手术切除的肾癌患者并收集肾癌组织、癌旁组织及手术前的血清标本,取体检的健康者并收集... 目的研究肾癌血清microRNA-29a(miR-29a)表达量与肿瘤恶性增殖、侵袭的相关性。方法回顾性选择2015年6月至2019年2月期间在盘锦辽油宝石花医院接受手术切除的肾癌患者并收集肾癌组织、癌旁组织及手术前的血清标本,取体检的健康者并收集血清标本。检测血清中miR-29a的表达水平及肾癌组织、癌旁组织中miR-29a、增殖基因及侵袭基因[第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、转化生长因子-β(TGF-β)、β-连环蛋白(β-catenin)、N-钙黏蛋白(Ncadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)]的表达水平,分析血清及肾癌组织中miR-29a的相关性。结果肾癌组织中miR-29a的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),肾癌患癌症血清中miR-29a的表达水平明显高于健康体检者(P<0.05),且肾癌患者血清中miR-29a的表达与肾癌组织中miR-29a的表达呈正相关(r=0.451,P<0.05);肾癌组织中PTEN、E-cadherin的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05),PI3K、AKT、Cyclin D、TGF-β、β-catenin、Ncadherin 1的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05);且血清miR-29a高表达患者肾癌组织中PTEN、E-cadherin的表达水平明显低于血清miR-29a低表达患者(P<0.05),PI3K、AKT、Cyclin D1、TGF-β、β-catenin、N-cadherin的表达水平明显高于血清miR-29a低表达患者(P<0.05)。结论miR-29a高表达对肾癌组织中增殖和侵袭基因的表达具有靶向调节作用,血清miR-29a表达的检测能够对肾癌的增殖、侵袭进行评估。 展开更多
关键词 肾癌 microRNA-29a 靶基因 增殖 侵袭
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脂联素受体激动剂(AdipoRon)对鸡成骨细胞增殖和凋亡的影响 认领
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作者 江莎 吴晓玲 +2 位作者 程婷婷 张嘉容 魏学良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期355-360,368共7页
脂联素受体激动剂(AdipoRon)是人工合成的与脂联素(ADPN)有相似作用的口服活性小分子,研究显示ADPN可调节成骨细胞生长和分化,但AdipoRon是否具有类似的功能目前鲜见报道。本试验主要研究AdipoRon对鸡成骨细胞的影响。从14日龄鸡胚额骨... 脂联素受体激动剂(AdipoRon)是人工合成的与脂联素(ADPN)有相似作用的口服活性小分子,研究显示ADPN可调节成骨细胞生长和分化,但AdipoRon是否具有类似的功能目前鲜见报道。本试验主要研究AdipoRon对鸡成骨细胞的影响。从14日龄鸡胚额骨中分离获得成骨细胞,细胞培养第4日,分别添加100,200 mg/L AdipoRon处理成骨细胞,处理72 h后,MTT法检测细胞增殖活性,并进行碱性磷酸酶(ALP)染色。Real-time PCR检测脂联素受体1(AdipoR1)、脂联素受体2(AdipoR2)、成骨细胞成熟标志基因骨钙素(osteocalcin,OC)、Ⅰ型胶原α2链(alpa2 of type I collegen,COL1A2)、细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2及Bax的基因表达量,计算Bcl-2与Bax基因表达量的比值。结果显示,100,200 mg/L AdipoRon处理后的成骨细胞正常形态消失,细胞数量减少,体积变小,细胞核明显固缩,细胞存活率极显著降低(P<0.01)。AdipoRon可增加成骨细胞中AdipoR1、AdipoR2、OC、Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达量(P<0.05),并呈剂量依赖性,但对COL1A2和Bcl-2/Bax的表达无显著性影响。结果表明,100,200 mg/L AdipoRon均可促进鸡成骨细胞AdipoR1/2的表达,且能抑制成骨细胞的增殖,促进成骨细胞的成熟及凋亡。 展开更多
关键词 脂联素 脂联素受体激动剂 鸡成骨细胞 增殖 凋亡
miR-625通过负向调控Resistin的表达抑制非小细胞肺癌细胞的恶性生物学行为及其机制 认领
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作者 张建庆 章恒 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期477-486,共10页
目的:探究miR-625和Resistin对NSCLC细胞增殖、侵袭、迁移及裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的机制。方法:qPCR实验检测80例NSCLC及癌旁组织(标本收集自2018年3月至2019年10月于新疆维吾尔自治区人民医院手术治疗的NSCLC患者)和4种细胞系... 目的:探究miR-625和Resistin对NSCLC细胞增殖、侵袭、迁移及裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的机制。方法:qPCR实验检测80例NSCLC及癌旁组织(标本收集自2018年3月至2019年10月于新疆维吾尔自治区人民医院手术治疗的NSCLC患者)和4种细胞系中miR-625与Resistin的表达,生物信息学预测两者的靶向关系并用双荧光素酶基因报告实验进行验证;通过脂质体转染技术在NSCLC细胞中过表达或抑制miR-625及Resistin表达,实验分为miR-625 mimic组、miR-625 inhibitor组、si-Resisitin组、miR-625 inhibitor+si-Resisitin组和NC组,利用CCK-8、Transwell及划痕实验检测miR-625与Resistin对NSCLC细胞增殖、侵袭及迁移的影响,Western blotting实验检测两者对NSCLC细胞中EMT相关的PI3K/AKT/Snail通路蛋白表达的影响,裸鼠成瘤实验观察两者对A549细胞移植瘤生长的影响。结果:miR-625在NSCLC组织和4种细胞系中呈低表达、Resistin呈高表达(均P<0.01),两者表达水平呈负相关(r=-0.7183,P<0.01),且Resistin的表达与NSCLC分化程度、临床分期及淋巴结转移相关。Resistin是miR-625的靶基因。在NSCLC细胞系A549和H226的增殖、侵袭、迁移能力及裸鼠移植瘤的生长方面,与Blank组和NC组相比,miR-625 mimic组与si-Resistin组能力均显著降低(均P<0.05),miR-625 inhibitor组显著提高(均P<0.05);miR-625 inhibitor+si-Resistin组显著低于miR-625 inhibitor组(均P<0.05);NC组与miR-625 inhibitor+si-Resistin组之间无显著差异(均P>0.05);p-AKT、p-PI3K、Snail、Twist1、Vimentin等蛋白表达变化也有相同的趋势(均P<0.05),E-cadherin蛋白表达则发生相反的改变(P<0.05)。结论:miR-625在NSCLC组织和细胞中均呈低表达,其能负向调控Resistin表达从而抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移及裸鼠移植瘤生长,其机制可能与PI3K/AKT/Snail信号通路有关。 展开更多
关键词 miR-625 RESISTIN 非小细胞肺癌 A549细胞 H226细胞 增殖 侵袭 迁移 PI3K/AKT/Snail
miR-31通过PAX9抑制骨肉瘤细胞增殖和促进其凋亡 认领
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作者 朝乐孟 刘剑峰 《海南医学院学报》 CAS 2020年第13期985-991,共7页
目的:探讨MicroRNA-31(miR-31)在骨肉瘤中的作用及其在骨肉瘤增殖、凋亡中的分子机制。方法:应用实时定量PCR(qRT-PCR)检测人骨肉瘤组织中miR-31的表达。采用Pearson's chisquared检测miR-31与临床病理特征的关系。CCK-8、流式ANNEX... 目的:探讨MicroRNA-31(miR-31)在骨肉瘤中的作用及其在骨肉瘤增殖、凋亡中的分子机制。方法:应用实时定量PCR(qRT-PCR)检测人骨肉瘤组织中miR-31的表达。采用Pearson's chisquared检测miR-31与临床病理特征的关系。CCK-8、流式ANNEXIN-FITC/PI双染法实验检测骨肉瘤细胞的增殖和凋亡。结果:qRT-PCR结果显示,与配对癌旁骨组织相比,miR-31在骨肉瘤组织中表达较低。miR-31在恶性程度高、总体生存率低的骨肉瘤组织中的表达水平更低。CCK-8和流式Annexin-FITC/PI双染法实验检测显示miR-31抑制骨肉瘤细胞增殖并促进骨肉瘤细胞凋亡。根据荧光素酶的检测,miR-31直接作用于PAX9基因,而PAX9基因促进骨肉瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡。结论:miR-31通过靶向PAX9抑制骨肉瘤细胞增殖和促进骨肉瘤细胞凋亡,miR-31和PAX9可作为骨肉瘤治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 骨肉瘤 增殖 凋亡 miR-31 PAX9
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高三尖杉酯碱对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响及机制研究 认领
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作者 唐加峰 张滔 +4 位作者 黄世莹 杜玉梅 李静 冉建华 陈地龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1100-1105,共6页
目的探究高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)对人黑色素瘤A375增殖的影响及可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测HHT对A375细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色法观察染色质凝集情况;细胞克隆形成实验检测HHT对A375细胞克隆形成能力的影... 目的探究高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)对人黑色素瘤A375增殖的影响及可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测HHT对A375细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色法观察染色质凝集情况;细胞克隆形成实验检测HHT对A375细胞克隆形成能力的影响;流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测HHT对A375细胞凋亡和周期影响;Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase 3、Cleaved-PARP、CyclinB1和CDK1蛋白的表达情况。结果CCK-8结果显示,随着药物的剂量(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8μmol·L^-1)和作用时间(24、48、72 h)增加,HHT对A375细胞的抑制作用逐渐增强;Hoechst 33258染色和FCM结果显示,HHT可使A375细胞染色质呈凋亡形态改变,促进细胞凋亡,将A375的细胞周期阻滞于G2/M期;克隆形成实验显示,HTT可以抑制A375细胞的克隆形成能力;Western blot结果表明HHT可下调CyclinB1、CDK1和Bcl-2蛋白水平,上调Bax,Cleaved-caspase 3和Cleaved-PARP蛋白表达水平。结论HHT使A375细胞阻滞于G2/M期,抑制A375细胞增殖;HHT可激活线粒体凋亡信号通路,诱导黑色素瘤A375细胞凋亡。 展开更多
关键词 黑色素瘤 HHT 增殖 细胞凋亡 细胞周期 A375
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脂联素受体激动剂AdipoRon通过AMPK/自噬途径抗骨髓瘤细胞增殖 认领
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作者 王树娟 王冲 +2 位作者 王伟琼 郝倩倩 刘延方 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期171-176,共6页
目的:探讨脂联素受体激动剂AdipoRon对骨髓瘤细胞系的增殖抑制作用及其可能的机制。方法:将不同浓度AdipoRon作用于骨髓瘤细胞系Sp2/0-Ag14和MPC-11,采用CCK-8法检测细胞增殖,Western blot检测信号通路蛋白表达水平,采用RT-PCR方法检测... 目的:探讨脂联素受体激动剂AdipoRon对骨髓瘤细胞系的增殖抑制作用及其可能的机制。方法:将不同浓度AdipoRon作用于骨髓瘤细胞系Sp2/0-Ag14和MPC-11,采用CCK-8法检测细胞增殖,Western blot检测信号通路蛋白表达水平,采用RT-PCR方法检测脂联素受体AdipoR1和AdipoR2在23例正常对照和21例多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞中的表达情况。结果:AdipoRon能显著抑制小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0-Ag14和MPC-11的增殖,且呈浓度依赖性和时间依赖性(r=-0.951/-0.950,r=-0.993/-0.969);AdipoRon可诱导凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleaved PARP的表达水平升高;AdipoRon可上调MPC-11的p-AMPK及其下游的p-ACC磷酸化水平,且可上调LC3-II/LC3-I的水平,下调p62的蛋白水平。脂联素受体AdipoR1在MM细胞中的表达水平显著高于正常对照,而AdipoR2在MM细胞中的表达水平显著低于正常对照。结论:脂联素受体在MM患者和正常人之间存在差异性表达。脂联素受体激动剂AdipoRon能够抑制骨髓瘤细胞增殖及诱导细胞凋亡,AMPK/自噬途径可能是其作用机制之一。 展开更多
关键词 脂联素受体激动剂 多发性骨髓瘤 增殖 AMPK 自噬
微小RNA-182靶向调控特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白2基因对结肠癌细胞增殖和迁移的影响 认领
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作者 徐纪中 王贵宪 +2 位作者 袁维堂 周全博 胡晟云 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期63-66,共4页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-182通过靶向特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白2(SATB2)基因对结直肠癌细胞增殖迁移的作用,探讨其对SATB2/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nox4)通路的调节机制。方法对数期生长人结肠癌细胞(HT-29)细胞,采... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-182通过靶向特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白2(SATB2)基因对结直肠癌细胞增殖迁移的作用,探讨其对SATB2/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nox4)通路的调节机制。方法对数期生长人结肠癌细胞(HT-29)细胞,采用脂质体转染法将si-miR-182、Control-si转至HT-29细胞,分别设为Si-miR-182组、N-miR-182组,另取不做任何处理细胞为对照组。测定3组细胞中miR-182基因表达、增殖和迁移、SATB2、nox4、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA和蛋白表达。重复计量资料比较采用重复测量方差分析,两两样本比较采用LSD-t检验。结果Si-miR-182组miR-182基因相对表达量(0.35±0.05)低于对照组(1.24±0.26)和N-miR-182组(1.20±0.25),差异均有统计学意义(t=7.517、7.455,P<0.05);Si-miR-182组培养24、48、72 h MTT试验吸光度(A)值均低于对照组和N-miR-182组,差异均有统计学意义(24 h:t=2.667、2.664;48 h:t=4.559、4.524;72 h:t=7.257、6.981;P<0.05);与培养24 h比较,3组培养48、72 h MTT试验A值均升高(48 h:t=5.507、5.092、3.741;72 h:t=11.330、10.637、9.229;P<0.05),且72 h MTT试验A值高于48 h,差异均有统计学意义(t=7.411、6.941、5.214,P<0.05)。Si-miR-182组细胞迁移率[(53.90±3.19)%]低于对照组[(81.66±5.92)%]和N-miR-182组[(80.35±5.40)%],差异均有统计学意义(t=9.231、9.430,P<0.05);Si-miR-182组细胞SATB2、E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和N-miR-182组(SATB2:t=10.930、11.158;E-cadherin:t=9.288、9.369;P<0.05),nox4、Vimentin mRNA和蛋白相对表达量低于对照组和N-miR-182组,差异均有统计学意义(nox4:t=8.955、7.590;Vimentin:t=6.543、6.644;P<0.05)。结论沉默miR-182基因可显著抑制结直肠癌细胞增殖及迁移能力,可能通过激活SATB2、E-cadherin的表达、抑制nox4、Vimentin的表达、参与SATB2/nox4通路共同调控。 展开更多
关键词 微小RNA-182 特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白2 结直肠癌 增殖 迁移
白藜芦醇对大鼠骨髓内皮祖细胞增殖活性的影响 认领
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作者 余惠珍 陈成 +1 位作者 陈俊明 朱鹏立 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期43-49,共7页
目的采用密度梯度离心分离培养大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs),观察白藜芦醇对EPCs增殖活性的影响。方法首先采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓单个核细胞,去除非贴壁细胞,培养14 d后获得EPCs。随后免疫荧光法测定细胞表面血小板-内皮细胞粘附... 目的采用密度梯度离心分离培养大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs),观察白藜芦醇对EPCs增殖活性的影响。方法首先采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓单个核细胞,去除非贴壁细胞,培养14 d后获得EPCs。随后免疫荧光法测定细胞表面血小板-内皮细胞粘附因子(CD31)、血管性血友病因子(vWF)、血管内皮生长因子受体(FLK-1)、白细胞共同抗原(CD45),行Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-AC-LDL)和异硫氰酸荧光素荆豆凝集素-1(FITC-UEA-1)双摄取实验,以及基质胶(Matrigel)管状形成实验,鉴定EPCs。运用CCK8法检测细胞增殖活性,采用不同浓度(5、10、25、50、100μmol/L)白藜芦醇干预EPCs 48 h,以及白藜芦醇在不同时间(24~72 h)干预EPCs,分别检测细胞增殖活性。结果大鼠骨髓单个核细胞分离后,经诱导培养14 d后,呈现"鹅卵石样""铺路石状"外观。超过90%细胞表面表达CD31、vWF、FLK-1,能摄取DiI-AC-LDL和结合FITC-UEA-1,可在Matrigel胶中形成管状结构,经上述方法证实,本实验所分离培养的细胞为大鼠EPCs。与对照组比较,干预48 h,白藜芦醇呈浓度依赖性(5~50μmol/L)增强EPCs增殖活性(P均<0.01)。50μmol/L白藜芦醇干预EPCs 24 h~72 h后,EPCs的增殖活性呈现时间依赖性增强。结论采用密度梯度离心法分离培养及免疫荧光法鉴定细胞,证实为大鼠骨髓内皮祖细胞;进一步证实白藜芦醇可增强内皮祖细胞的增殖活性,为后续研究白藜芦醇的心血管保护机制奠定实验基础。 展开更多
关键词 白藜芦醇 内皮祖细胞 增殖 骨髓 大鼠
基因沉默ILK对胰腺癌细胞Panc-1细胞增殖、凋亡与侵袭的影响 认领
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作者 朱相宇 徐正馨 +1 位作者 苏春晓 白静慧 《解剖科学进展》 2020年第3期321-324,共4页
目的探讨基因沉默整合素连接激酶(ILK)对胰腺癌细胞(Panc-1)细胞增殖、凋亡与侵袭的影响。方法培养胰腺癌Panc-1细胞,构建ILK-specific shRNA慢病毒载体后对Panc-1细胞进行转染,qPCR与Western Blot方法验证干扰基因片段的有效性,MTT实... 目的探讨基因沉默整合素连接激酶(ILK)对胰腺癌细胞(Panc-1)细胞增殖、凋亡与侵袭的影响。方法培养胰腺癌Panc-1细胞,构建ILK-specific shRNA慢病毒载体后对Panc-1细胞进行转染,qPCR与Western Blot方法验证干扰基因片段的有效性,MTT实验检测转染后胰腺癌细胞增殖能力的变化,流式细胞仪检测转染后胰腺癌细胞周期的变化,Transwell实验检测转染后胰腺癌细胞侵袭能力的改变。结果成功构建siRNA-ILK慢病毒载体,转染组细胞的ILK mRNA及蛋白表达明显低于空病毒组及阴性对照组。基因沉默ILK的胰腺癌Panc-1细胞增殖能力显著降低,停滞在G0/G1的细胞数显著增多,G2/M期细胞数明显减少,侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论基因沉默ILK能抑制胰腺癌细胞Panc-增殖与侵袭能力,并促进凋亡。 展开更多
关键词 整合素连接激酶 PANC-1细胞 增殖 凋亡 侵袭
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