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microRNA研究进展 预览 被引量:23
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作者 华友佳 肖华胜 《生命科学》 CSCD 2005年第3期 278-281,共4页
小分子RNA家族中的一员--microRNA,是一段非常短的非编码RNA序列,对多种生物学过程起调控作用.本文试从microRNA的结构特点、合成及作用机制和功能等方面对microRNA的研究进展作一个简单回顾.
关键词 microRNA(miRNA) DROSHA DICER sirna
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瞬时表达靶向TMV外壳蛋白基因的siRNA能干扰病毒侵染 预览 被引量:20
2
作者 赵明敏 安德荣 +2 位作者 黄广华 何祖华 陈江野 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 35-40,共6页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是与内源性mRNA编码区某段序列同源的双链RNA导入细胞后,该mRNA发生特异性降解,从而导致该基因表达沉默的现象。小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)作为RNAi途径的重要中介,已被广泛应用... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是与内源性mRNA编码区某段序列同源的双链RNA导入细胞后,该mRNA发生特异性降解,从而导致该基因表达沉默的现象。小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)作为RNAi途径的重要中介,已被广泛应用于动、植物抗病毒治疗研究。本文以烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)外壳蛋白基因为靶位,设计合成表达小干扰RNA的寡核苷酸,亚克隆到植物双元表达载体pBI121中,直接转化根癌农杆菌。通过根癌农杆菌介导的瞬时表达法,研究了同源于TMV外壳蛋白的siRNA对TMV侵染的干扰作用。结果表明,瞬时表达的siRNA能够特异性干扰TMV侵染。含有重组表达载体pBI121/siRNA的根癌农杆菌渗入普通烟植株,在TMV接种后14d其上部叶片没有表现典型的花叶症状。对这些叶片进行Northern杂交试验也没有检测到TMV病毒的RNA积累或仅有很少量的积累。在枯斑寄主心叶烟上,siRNA的瞬时表达可使TMV侵染后的枯斑数明显减少,甚至不产生枯斑。此外,同源于TMV外壳蛋白的siRNA瞬时表达对非同源的黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)没有抑制作用,表明siRNA的干扰作用具有高度的同源依赖性。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 烟草花叶病毒 外壳蛋白 sirna 干扰
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高效siRNA设计的研究进展 预览 被引量:19
3
作者 许德晖 黄辰 +1 位作者 刘利英 宋土生 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期 1457-1461,共5页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是生物界普遍存在的一种抵御外来基因和病毒感染的保守进化机制,其本质是siRNA与靶向mRNA特异结合、并由RISC介导其降解,从而阻止mRNA的翻译,导致基因沉默。因此,RNAi可以作为基因功能研究、基因... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是生物界普遍存在的一种抵御外来基因和病毒感染的保守进化机制,其本质是siRNA与靶向mRNA特异结合、并由RISC介导其降解,从而阻止mRNA的翻译,导致基因沉默。因此,RNAi可以作为基因功能研究、基因治疗等的新工具。但是,随机设计的siRNA之间沉默效应差别很大。如何针对靶基因设计特异、高效的siRNA就成了一个关键的问题。文章对siRNA设计原则的研究进展进行了总结论述。 展开更多
关键词 RNAI sirna 序列设计
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RNA干涉及其应用前景 预览 被引量:18
4
作者 张利生 陈大元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期 341-344,共4页
RNA干涉是指由特定双链RNA(dsRNA)引起的转录后基因沉默现象.研究表明,Dicer断裂dsRNA产生的小干涉RNA可以抑制哺乳动物体细胞和胚胎中的基因的表达.RdRP在扩增RNAi中起着关键性的作用,RdRP活性复制较长的触发性dsRNA或以一种非引物的... RNA干涉是指由特定双链RNA(dsRNA)引起的转录后基因沉默现象.研究表明,Dicer断裂dsRNA产生的小干涉RNA可以抑制哺乳动物体细胞和胚胎中的基因的表达.RdRP在扩增RNAi中起着关键性的作用,RdRP活性复制较长的触发性dsRNA或以一种非引物的方式复制短的siRNA,即以siRNA为引物的RdRP反应使靶mRNA转变为dsRNA,同时复制触发性dsRNA.所有的产物又可作为Dicer的底物,起始RdRP级联反应.本文综述了RNAi可能的作用机制,并对RNAi在分析功能基因组、药物治疗等方面的应用前景进行了展望. 展开更多
关键词 RNA干涉 双链RNA DSRNA 转录 基因沉默 DICER酶 RdRP活性 功能基因组 作用机制 RNAi
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RNA干扰(RNAi)技术及其在功能基因组学研究中的应用 预览 被引量:13
5
作者 朱睿 张开立 邹向阳 《大连医科大学学报》 CAS 2003年第2期 105-107,共3页
近年来的研究表明,一些小的双链PNA可以高校、特异的阻断体内基因致使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference ,RNAi).
关键词 RNAI技术 功能基因组学 小分子 sirna 基因缺失 反义寡核苷酸 RNA干扰
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RNA干扰技术的研究进展 预览 被引量:20
6
作者 秦玉新 蒙凌华 丁健 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期 421-424,共4页
RNA干扰是一项新的分子生物学技术,是外源和内源性双链RNA在生物体内诱导同源靶基因的mRNA特异性降解,从而导致转录后基因沉默的现象。尽管RNA干扰发现的时间较短,但由于其具有操作简单、成本低、特异性高和高效性等特点,因而发展... RNA干扰是一项新的分子生物学技术,是外源和内源性双链RNA在生物体内诱导同源靶基因的mRNA特异性降解,从而导致转录后基因沉默的现象。尽管RNA干扰发现的时间较短,但由于其具有操作简单、成本低、特异性高和高效性等特点,因而发展迅速,目前对于它的机制已有初步的了解,同时RNA干扰在功能基因组学以及疾病的基因干预治疗方面也有一定的进展。该文就RNA干扰技术的历史、作用机制、生物学意义及应用作简要概述。 展开更多
关键词 RNAI sirna miRNA RISC DICER 基因沉默
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RNAi及其在植物遗传改良中的应用 预览 被引量:16
7
作者 朱龙付 张献龙 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期 472-477,共6页
RNAi(RNA interfering)是由与靶基因同源的双链RNA引发的、在动植物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默.这种现象在动物、植物和真菌中广泛存在并被证实,因此可能是生物的发育调控及抗外源或内源侵染的一种普遍的生理机制.对RNAi的... RNAi(RNA interfering)是由与靶基因同源的双链RNA引发的、在动植物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默.这种现象在动物、植物和真菌中广泛存在并被证实,因此可能是生物的发育调控及抗外源或内源侵染的一种普遍的生理机制.对RNAi的研究是目前生物学领域研究的热点之一,近几年来该技术已经在功能基因组学、遗传学和医学等诸学科得到大量应用.本文将就RNAi的机制研究及其在植物遗传改良中的应用进行综述. 展开更多
关键词 RNAI 植物 遗传改良 基因沉默 RNA干涉
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特异性小干扰性RNA降低骨桥蛋白基因表达对肝癌细胞侵袭性的影响 预览 被引量:11
8
作者 朱晓群 叶青海 +2 位作者 雷科峰 陈洁 钦伦秀 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期 404-407,共4页
目的 应用RNA干扰技术降低细胞内骨桥蛋白的表达水平,研究骨桥蛋白对人肝癌细胞侵袭性的影响。方法 体外化学合成骨桥蛋白序列特异性双链RNA,转染高转移肝癌细胞株HCC-LM3,用实时定量PCR和Western blot检测骨桥蛋白的表达。通过生长... 目的 应用RNA干扰技术降低细胞内骨桥蛋白的表达水平,研究骨桥蛋白对人肝癌细胞侵袭性的影响。方法 体外化学合成骨桥蛋白序列特异性双链RNA,转染高转移肝癌细胞株HCC-LM3,用实时定量PCR和Western blot检测骨桥蛋白的表达。通过生长曲线、克隆形成和Matrigel侵袭实验,观察肝癌细胞恶性生物学行为的改变。结果 骨桥蛋白特异性小干扰性RNA(siRNA)转染组的HCC-LM3细胞,骨桥蛋白mRNA水平下降79%,蛋白水平下降81%。体外实验表明,与空白对照组及非特异性siRNA转染组相比,骨桥蛋白特异性siRNA转染组HCC-LM3细胞克隆形成数目下降,穿过人工基底膜的细胞数减少(P〈0.05)。结论 降低骨桥蛋白的表达可显著抑制肝癌细胞的侵袭转移能力。 展开更多
关键词 骨桥蛋白 sirna 肝细胞癌 基因表达 侵袭
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c-myc靶向小干扰RNA诱导乳腺癌细胞凋亡的作用 预览 被引量:19
9
作者 翟荣林 王国斌 夏泽峰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期 698-700,共3页
目的构建小干扰RNA(siRNA)表达载体,体外观察其诱导乳腺癌细胞凋亡效应.方法基因克隆技术构建人c-myc癌基因特异性siRNA表达载体,体外转染MCF-7,48 h后检测c-myc癌基因表达状况并观察MCF-7凋亡诱导效应.结果 (1)成功构建siRNA表体载体:p... 目的构建小干扰RNA(siRNA)表达载体,体外观察其诱导乳腺癌细胞凋亡效应.方法基因克隆技术构建人c-myc癌基因特异性siRNA表达载体,体外转染MCF-7,48 h后检测c-myc癌基因表达状况并观察MCF-7凋亡诱导效应.结果 (1)成功构建siRNA表体载体:pEGFP-C1/U6-1、pEGFP-C1/U6-2和pEGFP-C1/U6-3;(2)siRNA表达载体转染MCF-7 48 h后,pEGFP-C1/U6-2组显著抑制胞内c-myc表达(80%);(3)转染24 h和48 h后,pEGFP-C1/U6-2组凋亡率分别为11.01%和21.30%,明显高于对照组(P<0.01).结论构建的c-myc靶向siRNA表达载体能显著下调c-myc在MCF-7中的过表达,诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡. 展开更多
关键词 C-MYC 靶向诱导 小干扰RNA 乳腺癌 细胞凋亡 表达载体
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MicroRNA及其在人和动物上的研究进展 预览 被引量:16
10
作者 盛熙晖 杜立新 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期 651-658,共8页
MicroRNA是一种长约22nt的非编码RNA,通过与靶基因的3′UTR区结合来调控靶基因的表达。目前已证实miRNA在生物体生长、发育和疾病发生等过程中发挥着重要的作用。文章介绍了miRNA的特征、作用机制,综述了关于miRNA的功能、miRNA基因的... MicroRNA是一种长约22nt的非编码RNA,通过与靶基因的3′UTR区结合来调控靶基因的表达。目前已证实miRNA在生物体生长、发育和疾病发生等过程中发挥着重要的作用。文章介绍了miRNA的特征、作用机制,综述了关于miRNA的功能、miRNA基因的鉴定与靶基因预测的最新研究进展。 展开更多
关键词 MICRORNA sirna 基因鉴定 发育 疾病
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2002年世界十大科学成就之首——siRNA和RNAi 预览 被引量:10
11
作者 杨吉成 《苏州大学学报:医学版》 CAS 2003年第3期 253-256,共4页
RNA和蛋白质在生物体中共同负责基因的表达和基因表达的调控.在生命活动中具有重要的作用.
关键词 小分子干扰RNA RNA干扰 RNA 蛋白质 基因表达 sirna RNAI 科学成就 2002年
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miRNA(microRNA)家族的研究进展 预览 被引量:15
12
作者 叶茂 陈跃磊 明镇寰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期 370-374,共5页
近年来,科学家在许多真核生物中发现了一类能时序调控发育进程,长度约为21个核苷酸的小分子RNA,并称其为miRNA(microRNA).最近研究表明,它与早先在RNAi(RNA interference)中发现的siRNA(small interfering RNA)具有很大的相关性,并在不... 近年来,科学家在许多真核生物中发现了一类能时序调控发育进程,长度约为21个核苷酸的小分子RNA,并称其为miRNA(microRNA).最近研究表明,它与早先在RNAi(RNA interference)中发现的siRNA(small interfering RNA)具有很大的相关性,并在不同水平上参与了生物体内的遗传调控和基因重组等重要过程.miRNA基因调控的特殊方式,高度的保守性,可能的加工机制以及它的发现所引发的讨论已引起人们的普遍关注. 展开更多
关键词 MIRNA MICRORNA 时序调控 发育 基因调控
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鸡传染性支气管炎病毒的RNA干扰 预览 被引量:15
13
作者 刘惠莉 陆承平 朱伟云 《中国病毒学》 CSCD 2005年第3期 272-276,共5页
为探讨短的双链RNA(siRNA)对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)增殖的干扰作用,利用软件设计siRNA 1280个,75%位于Pol基因内.通过同源比较和保守性分析,筛选到针对Pol、M、N基因的12个siRNA(每个基因3~4个)作为后选目的片段,分别在Vero细胞、... 为探讨短的双链RNA(siRNA)对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)增殖的干扰作用,利用软件设计siRNA 1280个,75%位于Pol基因内.通过同源比较和保守性分析,筛选到针对Pol、M、N基因的12个siRNA(每个基因3~4个)作为后选目的片段,分别在Vero细胞、9日龄SPF鸡胚上进行基因干扰试验.结果,来自Pol、N靶序列的2个siRNA在Vero细胞上及鸡胚上均对IBV增殖产生明显的干扰作用,并与siRNA剂量有一定相关性,依赖于与mRNA互补的负链siRNA存在.本研究首次证实IBV增殖过程中存在siRNA干扰现象,为利用RNA干扰(RNAi)技术控制IBV提供了新手段. 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 sirna RNAI VERO细胞 SPF鸡胚
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RNA干扰 预览 被引量:11
14
作者 陈颖 朱明华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第3期 39-47,共9页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种古老的生物抗病毒机制,能介导序列特异性的mRNA降解,是基因功能研究和蛋白组学的有效工具,在药物靶基因的筛选、抗病毒、肿瘤基因治疗等领域有很好的发展前景.
关键词 RNA干扰 RNAI 基因沉默 DSRNA sirna
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NS特异性siRNA真核表达载体的构建 预览 被引量:15
15
作者 蔡子微 刘思金 +2 位作者 胡国法 魏影允 劳为德 《牡丹江医学院学报》 2003年第3期 1-4,共4页
目的:构建nucleostemin(核干细胞因子,NS)特异性siRNA真核表达载体.方法:以小鼠组织基因组DNA为模板,PCR方法克隆小鼠编码U6 snRNA基因的启动子,将NS-siRNA表达序列、PolⅢ识别的终止信号与U6启动子连接起来,并将其插入pcDNA4/C载体中.... 目的:构建nucleostemin(核干细胞因子,NS)特异性siRNA真核表达载体.方法:以小鼠组织基因组DNA为模板,PCR方法克隆小鼠编码U6 snRNA基因的启动子,将NS-siRNA表达序列、PolⅢ识别的终止信号与U6启动子连接起来,并将其插入pcDNA4/C载体中.结果:(1)从小鼠基因组DNA中克隆到编码U6 snRNA基因的启动子,(2)构建了含有U6启动子、NS-siRNA表达序列和PolⅢ识别终止信号的NS-siRNA表达的片段,(3)将NS-siRNA表达片段插入了pcDNA4/C真核表达载体.结论:构建了针对NS 特异性的siRNA真核表达载体pcDNA4/C-NS-Silencer. 展开更多
关键词 核干细胞因子 NS sirna 特异性真核表达载体 小鼠 U6启动子 基因 克隆
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RNAi技术及其在植物中的应用研究进展 被引量:10
16
作者 李兰岚 饶力群 +2 位作者 范适 易诚 彭国平 《湖南环境生物职业技术学院学报》 CAS 2005年第4期 313-318,共6页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链(double-stranded RNA,dsRNA)所引起的序列特异性基因沉默,是真核生物中一种非常保守的机制.RNA干扰依赖于小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)与靶mRNA之间的严格碱基配对,具有高度特异性... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链(double-stranded RNA,dsRNA)所引起的序列特异性基因沉默,是真核生物中一种非常保守的机制.RNA干扰依赖于小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)与靶mRNA之间的严格碱基配对,具有高度特异性.本文就RNAi的发现、作用机制研究、特点、以及在植物功能基因分析、抗病毒与品种改良等方面的应用进行了综述,并对存在的问题和应用前景作了分析和预测. 展开更多
关键词 RNA干扰 DSRNA sirna 植物 应用
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RNAi及其在肿瘤研究中的应用 预览 被引量:10
17
作者 石智 符立梧 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第6期 492-499,共8页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在生物体细胞内,外源性或内源性的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)引起与其同源mRNA特异性的降解,因而抑制其相应的基因表达过程.由于它能够高度特异性、高效性地抑制基因的表达,因此在研究基因... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在生物体细胞内,外源性或内源性的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)引起与其同源mRNA特异性的降解,因而抑制其相应的基因表达过程.由于它能够高度特异性、高效性地抑制基因的表达,因此在研究基因功能及表达调控、信号传导通路、药物靶点的鉴定和基因药物开发等方面具有良好的应用前景.主要介绍RNAi可能的分子机制、分子生物学特性、产生方法及其在肿瘤研究中的应用. 展开更多
关键词 RNAI sirna 基因抑制 肿瘤
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siRNA与miRNA在生物体基因调控中沉默机制的比较 被引量:19
18
作者 张超 庞全海 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期 393-398,共6页
siRNA和miRNA的沉默机制是生物基因调控的重要手段之一.小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是RNA干扰的引发物,激发与之互补的目标mRNA沉默.非编码RNA中的微小RNA(microRNA,miRNA),能够识别特定的目标mRNA,通过与mRNAs的3'非... siRNA和miRNA的沉默机制是生物基因调控的重要手段之一.小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是RNA干扰的引发物,激发与之互补的目标mRNA沉默.非编码RNA中的微小RNA(microRNA,miRNA),能够识别特定的目标mRNA,通过与mRNAs的3'非翻译区结合,影响该目标蛋白的翻译水平.siRNA和miRNA的基因调控机制对生物学研究及疾病的病因和治疗等有直接影响.本文主要对siRNAs和miRNAs的生物起源及沉默机制进行比较性论述:提出Dicers酶蛋白、Ago蛋白以及20 nt~25 nt的双链RNAs的3类大分子是RNA沉默的特征结构,并进行了说明性论述;总结性叙述了siRNA和miRNA的2类小分子经典沉默机制,并提出其异同点.最后,本文根据近期研究进展,对siRNA和miRNA的生物起源及沉默机制提出了新的疑问. 展开更多
关键词 小干扰RNA 微小RNA 基因沉默 RNA干扰 基因调控
RNA干涉(RNAi)技术应用于哺乳动物细胞的研究策略 预览 被引量:8
19
作者 张定校 樊斌 +1 位作者 刘榜 李奎 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期 839-844,共6页
RNAi作为新近发展起来的基因功能分析技术,近年来在哺乳动物细胞中的研究已取得了长足进展,且有着广泛的应用前景.对RNAi作用机制及RNAi实验操作技术的探讨是目前研究的热点.研究表明,哺乳动物细胞中的RNAi作用模式与植物有所不同.文章... RNAi作为新近发展起来的基因功能分析技术,近年来在哺乳动物细胞中的研究已取得了长足进展,且有着广泛的应用前景.对RNAi作用机制及RNAi实验操作技术的探讨是目前研究的热点.研究表明,哺乳动物细胞中的RNAi作用模式与植物有所不同.文章对RNAi作用机制、哺乳动物细胞RNAi实验的一般策略(包括靶siRNA序列选择、siRNA获取方法、siRNA转染、RNAi效果检测等)以及最新研究进展进行简述,以供类似工作的参考. 展开更多
关键词 RNA干扰 sirna 基因功能分析 哺乳动物细胞
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转录后水平的基因沉默—RNA干涉 预览 被引量:6
20
作者 郭晓红 周忠孝 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2003年第1期 24-29,共6页
RNA干涉(RNA interference,RNAi)是1998年首次在秀丽线虫中发现并证明属于转录后水平的基因沉默(PTGS)机制.它利用双链RNA(dsRNA)特异性地降解相应序列的mRNA成为siRNA,从而特异性地阻断相应基因的表达,广泛存在于从真菌到植物、从无脊... RNA干涉(RNA interference,RNAi)是1998年首次在秀丽线虫中发现并证明属于转录后水平的基因沉默(PTGS)机制.它利用双链RNA(dsRNA)特异性地降解相应序列的mRNA成为siRNA,从而特异性地阻断相应基因的表达,广泛存在于从真菌到植物、从无脊椎动物到哺乳动物的各种生物中.本文介绍了基因沉默的机理、RNA干涉的分子机制及技术应用等方面的进展,RNA干涉在后基因组时代的基因功能研究和药物开发中将具有广阔的发展前景. 展开更多
关键词 PTGS RNA干涉 DSRNA 短干涉RNA sirna
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